專利名稱：：一種穩定的前列地爾注射乳液及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種前列地爾注射乳液及其制備方法，屬藥物領域。
背景技術：
：前列地爾又名前列腺素E,(prostaglandinE,,PGE,)其化學名稱為11a,15(S)-雙羥基-9-酮-13-反前列烯酸，化學結構式如下前列地爾是一種內源性生理活性物質，具有多種生理、藥理作用。它可擴張血管，抑制血小板聚集、血栓素A2生成、動脈粥樣脂質斑塊形成及免疫復合物的作用，并能擴張外周和冠脈血管，減少胃液分泌，刺激小腸、子宮蠕動。臨床上可用于預防和治療各種心腦血管疾病、男性勃起功能障礙、嚴重外周血管疾病、成人呼吸窘迫綜合癥等，輔助治療肝炎、高血脂癥、糖尿病、腎功能不全、支氣管哮喘、胰腺炎等疾病。前列地爾在胃腸道易被分解代謝，不宜口服給藥，因此通常采用靜脈注射方式給藥。然而，前列地爾靜脈給藥后在體內的生物穩定性差，其主要代謝途徑是在15羥-前列腺素脫氫酶的作用下，首先形成15-酮-前列地爾，而后在一系列酶的作用下，再經一系列變化形成代謝終末產物。15羥-前列腺素脫氫酶廣泛存在于肺、肝、腎和脂肪等組織中。其中肺臟是其主要的代謝場所。藥物靜脈給藥經肺循環后，相當于給藥量60%90%的前列地爾被代謝而失去藥理活性。前列地爾傳統注射劑型為前列地爾環糊精包合物(PGErCD)，但該制劑經肺一次滅活效價70%95%，體內半衰期只有35min"1。為使血藥濃度維持在有效范圍內，須大劑量持續5小時以上的靜脈給藥，而由此產生的副作用如靜脈炎常使患者難以接受。為解決前列地爾傳統制劑靜脈給藥所致的不良反應問題，并減少其在肺部的代謝失活，一種前列地爾注射乳液(商品名為凱時)現已開發并應用于臨床，取得了良好的效果。該制劑具有如下優點(1)靶向性和高效性注射乳液易聚集于血管炎癥部位，可使C20H34O5354.5病變處的藥物濃度達到傳統制劑的1020倍，從而降低全身毒副作用；(2)減少藥物的代謝失活前列地爾注射乳液將藥物分子溶解、分散于乳劑的內油相與油水界面，可在一定程度上避免藥物分子與肺部酶的直接接觸，進而降低其在肺部的代謝失活。與前列地爾的傳統制劑相比，前列地爾注射乳液可以顯著減少給藥劑量，延長藥效作用時間，改善了病人用藥的順應性。前列地爾的化學結構中含有e-羥基酮，在酸、堿條件下易脫水生成前列腺素Ap并在堿性條件下繼續發生重排發應生成前列腺素B,而失去藥理活性。現有市售前列地爾注射乳液采用熱壓旋轉滅菌工藝(即117'C30分鐘，或12rC15分鐘)處理后藥物降解率超過30%，且現有市售前列地爾注射乳液須在05'C的環境下進行保存和運輸，有效期也僅有l年。綜上可見，進一步減少前列地爾在肺部的降解，提高其生物利用度；增強前列地爾的熱穩定性，延長前列地爾注射乳液的有效期，是一個重要的尚待解決的技術難題，同時也是前列地爾注射制劑的技術發展發向。中國專利(公開號:CN1562041A;公開號CN1903206A;公開號CN1195990A)公開了前列地爾脂微球(前列地爾注射乳液)的凍干制劑制造方法，上述三個公丌的方法中均使用了糖類等物質作為凍干保護劑。但我們經研究發現，由于前列地爾乳液屬于非均相體系，熱力學不穩定，不僅凍干保護劑難以保證在生產過程中不破乳，且經過凍干后易發生團聚或附聚。另一方面，該類凍干乳劑使用前須復溶，給臨床應用帶來不便，同時也增加了生產成本。中國專利(申請號200610034259.3)公開了一種前列地爾納米乳注射劑及其制備方法。該專利發明目的是為了解決前列地爾傳統制劑的肺部代謝失活問題，而不是為了提高現有市售前列地爾注射乳液的化學穩定性；從其
發明內容來看，不能得出其技術方案在減少前列地爾的肺部代謝失活及增強化學穩定性方面，顯著優于現有市售前列地爾注射乳液的結論。將前列地爾制備成注射乳液是上述四個公開專利(對比文件)的主要技術方案，它們都以磷脂作為主要乳化劑。
發明內容中雖提及泊洛沙姆188(F-68)可作為一種輔助乳化劑，但并沒有揭示如下令人意想不到的有益效果即提高泊洛沙姆188(F-68)在前列地爾注射乳液中的用量可以顯著增強前列地爾在注射乳液中的化學穩定性并減少其在肺部的代謝失活。本發明通過大量、反復的試驗研究發現提高前列地爾注射乳液中泊洛沙姆188(F-68)的用量并減少卵磷脂的用量，即以泊洛沙姆188(F-68)為主要4乳化劑，而以磷脂作為輔助乳化劑，可顯著增強前列地爾的化學穩定性并減少其在肺部的代謝失活。
發明內容本發明的目的是提供一種與現有市售前列地爾注射乳液相比，可以顯著增強其化學穩定性并可減少藥物在肺部的代謝失活的前列地爾注射乳液及其制備方法，它是以前列地爾為主要活性成分，加上藥學上常用的注射用油、乳化劑、滲透壓調節劑、穩定劑、注射用水，經乳化技術制備而得到。為得到比現有市售前列地爾注射乳液更加穩定的前列地爾注射乳液配方，我們對前列地爾注射乳液的處方和制備工藝進行了系統深入的研究。采用藥學中常用的單因素設計法，對前列地爾注射乳液所用乳化劑的種類進行了考察，如卵磷脂、泊洛沙姆188(F-68)等。以不同乳化劑制備的前列地爾注射乳液于在高溫(70°C、50°C、37°C)加速和低溫fc存條件(05°C)下的化學穩定性為考察指標，優選乳化劑。結果令人意外的發現泊洛沙姆188(F-68)與卵磷脂相比，可以顯著增強前列地爾在注射乳液中的化學穩定性。該研究結果提示在確保注射乳液物理穩定性合格的前提下，可通過提高泊洛沙姆188(F-68)在混合乳化劑中的用量比例，顯著改善現有市售前列地爾注射乳液化學穩定性差的問題。據此，我們對混合乳化劑中泊洛沙姆188(F-68)與卵磷脂的用量比例進行了考察，結果表明提高泊洛沙姆188(F-68)在混合乳化劑中的用量比例，確可顯著改善現有市售前列地爾注射乳液的化學穩定性(結果見表1-2)。在此基礎上，我們對前列地爾注射乳液進行了熱壓滅菌穩定性研究。于12rC滅菌12分鐘，以滅菌前后注射乳液的物理外觀、pH值及前列地爾含量為評價指標，結果如表3所示以泊洛沙姆188(F-68)為主要乳化劑制備的注射乳液，滅菌后pH值無明顯變化，且主藥前列地爾降解較少；而單獨以卵磷脂為乳化劑制備的注射乳液(市售制劑配方)，滅菌后pH值下降明顯，且主藥前列地爾的降解程度顯著大于按本發明技術方案制備的前列地爾注射乳液。肺臟是前列地爾的主要代謝器官，為驗證本發明制備的前列地爾注射乳液是否在提高藥物熱壓滅菌穩定性的同時也可減少藥物在肺部的代謝失活，進而顯著提高其生物學穩定性，發明人考察了前列地爾注射乳液在大鼠肺勻漿中的降解規律。將不同乳化劑制備的前列地爾注射乳液加入大鼠肺勻漿中于37'C水浴中孵育，測定不同時間主藥前列地爾的降解百分率。研究結果(見表4)表明本發明制備的前列地爾注射乳液與市售前列地爾注射乳液(凱時)相'比，可顯著減少前列地爾在肺勻槳中的降解，證實本發明提供的前列地爾注射乳液顯著優于現有市售制劑。基于上述研究結果，本發明的技術方案是提供一種以泊洛沙姆188(F-68)為主要乳化劑，卵磷脂為輔助乳化劑制備的前列地爾注射乳液。本發明提供的注射乳液是以前列地爾為活性成分加上藥學上常用的注射用甘油三酯類化合物、乳化劑、注射用甘油、注射用水制備而成，每1000mL乳液中含前列地爾5mg500mg、注射用油為50g100g、乳化劑為4g36g，'注射用甘油為20g25g，其余為注射用水；所述的乳化劑中含泊洛沙姆188(F-68)3g30g和卵磷脂1g6g，其中泊洛沙姆188(F-68)與卵磷脂的重量比(泊洛沙姆188/卵磷脂)在310的范圍內。所使用的卵磷脂選自大豆卵磷脂，蛋黃卵磷脂中的一種，優選為蛋黃卵磷脂。所使用的注射用油選自中鏈甘油三酯、大豆油、玉米油、蓖麻油、椰子油、紅花油、茶油中的一種，優選為大豆油。另一方面，本發明還提供了一種制備穩定的前列地爾注射乳液的方法，其具體方法如下a.稱取處方量的前列地爾、注射用油、乳化劑、注射用甘油、注射用水備用；b.將前列地爾溶于預熱的注射用油中形成油相；C.將乳化劑和甘油溶于預熱的適量注射用水中形成水相；d.在高速攪拌條件下滴加油相入水相，至油相均勻分散于水相中，得乳白色初乳；e.取上述初乳補加注射用水至全量，將乳液混勻后移入高壓均質機，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0左右，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。本發明技術方案制備的前列地爾注射乳液與現有的市售前列地爾注射乳液相比，顯著增強了藥物的化學穩定性，可延長該產品的貯存有效期；并且顯著減少藥物在肺部的代謝失活，有利于提高生物利用度，進而增強藥效。綜上所述，本發明提供了一種新的前列地爾注射乳液組方，具有鮮明的新穎性與創造性，在臨床使用上必將有良好的應用前景。參考文獻余翠琴.凱時的制劑特點[J].中國醫院藥學雜志.2002，22,(11):691-692.具體實施例方式下面的實施例用來進一歩說明本發明，但其不意味著對本發明的任何限制。實施例1將5mg前列地爾加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)15g，注射用卵磷脂3g及注射用甘油22g溶解于適量預熱至5(TC的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。實施例2將5mg前列地爾加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)30g，注射用卵磷脂6g及注射用甘油22g溶解于適量預熱至5(TC的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。實施例3將5mg前列地爾加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)30g，注射用卵磷脂3g及注射用甘油22g溶解于適量預熱至5CTC的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。實施例4將5mg前列地爾加入到預熱的大豆油50g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)3g，注射用卵磷脂lg及注射用甘油20g溶解于適量預熱至50'C的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。實施例5將200mg前列地爾加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)15g，注射用卵磷脂3g及注射用甘油25g溶解于適量預熱至50'C的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。實施例6將500mg前列地爾加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將泊洛沙姆188(F-68)15g，注射用卵磷脂5g及注射用甘油20g溶解于適量預熱至5(TC的注射用水混合均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。比較例1將5mg前列地爾和2.4g油酸加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將注射用卵磷脂18g和注射用甘油22g與適量預熱至5(TC的注射用水分散均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌10min(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。比較例2將200mg前列地爾和2.4g油酸加入到預熱的大豆油100g中，攪拌，至前列地爾溶解完全得油相。將注射用卵磷脂18g和注射用甘油22g與適量預熱至5(TC的注射用水分散均勻得水相。將油相緩慢加入水相中，于高速組織搗碎機攪拌lOmin(10000轉/分鐘)使油相均勻分散在水相中，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置于高壓均質機內，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。8試驗例l穩定性試驗(1):采用恒溫加速試驗法，分別在70。C、5(TC和37。C條件下，測定實施例l、2、3、和比較例l制備的各注射乳液在加速條件下的降解動力學常數(K/h—"。其結果如表l所示:前列地爾在注射乳液中的降解動力學符合一級動力學。表l不同處方前列地爾注射乳液在恒溫加速條件下的降解動力學常數(K/h—1)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表1可見，按本發明技術方案制備的前列地爾注射乳液，由于提高了泊洛沙姆188(F-68)在混合乳化劑中的用量比例，減少了卵磷脂的用量，在恒溫加速條件下的降解動力學常數顯著小于市售前列地爾注射乳液，顯著增強了前列地爾乳液的化學穩定性。試驗例2穩定性試驗(2):測定實施例l、2、3和比較例1制備的各注射乳液樣品在05'C條件下保存12個月后主藥前列地爾的降解百分率，結果如表2所示。表2不同處方前列地爾注射乳液在05'C貯存條件下的長期留樣穩定性<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表2可知，本發明制制備的前列地爾乳液較市售處方制備的前列地爾乳液可以顯著提高藥物的化學穩定性，從而延長前列地爾乳液的貯存有效期。試驗例3穩定性試驗(3):將實施例l、2、3和比較例l制備的各注射乳液樣品分別在12rC旋轉式熱壓滅菌12分鐘，考察其滅菌前后物理外觀，pH值及含量變化。結果見表3表3不同處方前列地爾注射乳液的滅菌穩定性考察指標實施例l實施例2實施例3比較例l物理外觀正常正常正常正常滅菌前pH4.004.004.004.00滅菌后pH3.984.044.003.15主藥降解率(%)6.235.155.0320.60由表3可見，本發明制備的前列地爾乳液較市售處方制備的前列地爾乳液可顯著的增強前列地爾乳液的滅菌穩定性。試驗例4生物學穩定性考察一大鼠肺勻漿孵育實驗-將實施例5和比較例2制備的各注射乳液樣品及前列地爾游離藥物，分別加入到大鼠肺勻漿(加適量生理鹽水稀釋)中于37士2"恒溫孵育，考察不同時間點前列地爾的不同樣品在肺勻漿中的降解程度，結果見表4。表4前列地爾的不同樣品在大鼠肺勻漿中孵育后的降解百分率(n=6)時間游離藥物+肺勻漿游離藥物+生理鹽水比較例2+肺勻漿實施例5+肺勻漿2h11.44±3.281.62±0.64〃6.16±1.74"1.55±0.30""4h19.26±4.345.36±0.80"13.18±2.38'4.73±0.66"**6h29.30±1.309.89±0.53"20.04±1.51"7.98±0.74"**8h34.97±1.5014.08±0.96"25.53±2.24"10.80±1.08""與游離藥物+肺勻漿組比較Ap〈0.05,"P<0.01;與比較例2+肺勻漿組比較，**P<0.01由表4可見，前列地爾游離藥物在肺勻漿和生理鹽水孵育條件下，不同時間點的降解百分率具有顯著性差異(p〈0.01)，說明大鼠肺勻漿中由于存在可使前列地爾代謝失活的酶確可加速前列地爾的降解，因此以生物學穩定性為指標，采用大鼠肺勻漿孵育的方法優選前列地爾注射乳液處方是行之有效的；將前列地爾制成注射乳液后(比較例2,實施例5)，其在肺勻漿中的代謝降解受到顯著抑制(p〈0.01);進一歩地，按本發明技術方案制備的前列地爾注射乳液(實施例5)較市售前列地爾注射乳液(比較例2)可顯著減少肺勻漿對前列地爾的滅活(p〈0.01)。該實驗結果表明本發明技術方案制備的前列地爾注射乳液與市售前列地爾注射乳液相比，顯著增強了前列地爾的生物學穩定性，有利于提高其生物利用度，進而增強前列地爾注射乳液的藥效。10權利要求1.一種前列地爾注射乳液，其特征在于它是以前列地爾為活性成分，加上藥學上可接受的輔料制備而成的乳狀液體制劑，每1000mL乳液中含前列地爾5mg～500mg、注射用油為50g～100g、乳化劑為4g～36g、注射用甘油為20g～25g，其余為注射用水。所述的乳化劑中含泊洛沙姆188(F-68)3g～30g和注射用卵磷脂1g～6g，其中泊洛沙姆188(F-68)與注射用卵磷脂的重量比(泊洛沙姆188/卵磷脂)在3～10的范圍內。2.根據權利要求1所述的乳液，其特征在于注射用油選自中鏈甘油三酯、大豆油、玉米油、蓖麻油、椰子油、紅花油、茶油中的一種，優選為大豆油；所使用的注射用卵磷脂選自大豆卵磷脂，蛋黃卵磷脂中的一種，優選為蛋黃卵磷脂。3.根據權利要求1所述的注射乳液的制備方法，包括如下步驟'a.稱取處方量的前列地爾、注射用油、乳化劑、注射用甘油、注射用水備用；b.將前列地爾溶于預熱的注射用油中形成油相；C.將乳化劑和甘油溶于預熱的適量注射用水中形成水相；d.在高速攪拌條件下滴加油相入水相，至油相均勻分散于水相中，得乳白色初乳；e.取上述初乳補加注射用水至全量，將乳液混勻后移入高壓均質機，于5000Psi15000Psi壓力下均質3次，續調節乳液pH至4.06.0，充氮灌裝，旋轉式熱壓滅菌，即得前列地爾注射乳液。全文摘要本發明公開了一種穩定的前列地爾注射乳液，它含有前列地爾為活性成分，加上藥學上可接受的注射用油、乳化劑、注射用甘油、注射用水經乳化技術制備而成。本發明制備的前列地爾注射乳液，與現有市售前列地爾注射乳液相比，可顯著增強前列地爾的熱穩定性，延長前列地爾注射乳液的有效期，同時可顯著減少前列地爾在肺部的降解，有利于提高其生物利用度，進而增強其藥效。文檔編號A61K9/107GK101474150SQ20091005818公開日2009年7月8日申請日期2009年1月19日優先權日2009年1月19日發明者婷儲,宇吳,慧李,毛聲俊,沈千萬,袁菊勇,輝金申請人:四川思達康藥業有限公司;毛聲俊