一種硫酸阿米卡星注射液的新用途的制作方法

專利名稱：一種硫酸阿米卡星注射液的新用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，特別是涉及一種硫酸阿米卡星注射液 用于防治雞的大腸桿菌和沙門氏菌病的新用途。
背景技術：
硫酸阿米卡星注射液的主要成份為硫酸阿米卡星。其化學名稱為0-3-氨基-3-脫氧
-a-D-葡吡喃糖基-(1—6)-0-[6-氨基-6-脫氧-a-D-葡吡喃糖基-(l一4)]-N-(4-氨基-2-羥基-l-氧 丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽。藥品類別氨基糖甙類。
適應癥硫酸阿米卡星注射液適用于銅綠假單胞菌及部分其他假單胞菌、大腸埃希菌、
變形桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬、不動桿菌屬等敏感革蘭陰性桿菌與葡萄 球菌屬(甲氧西林敏感株)所致嚴重感染，如菌血癥或敗血癥、細菌性心內膜炎、下呼吸道 感染、骨關節感染、膽道感染、腹腔感染、復雜性尿路感染、皮膚軟組織感染等。由于本 品對多數氨基糖苷類鈍化酶穩定，故尤其適用于治療革蘭陰性桿菌對卡那霉素、慶大霉素 或妥布霉素耐藥菌株所致的嚴重感染。
性狀硫酸阿米卡星注射液為無色或微黃色的澄明液體。
藥理毒理硫酸阿米卡星是一種氨基糖苷類抗生素。對多數腸桿菌科細菌，如大腸埃 希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、變形桿菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、沙雷 菌屬等均具良好作用，對銅綠假單胞菌及部分其他假單胞菌、不動桿菌屬、產堿桿菌屬等 亦有良好作用；對腦膜炎球菌、淋球菌、流感桿菌、耶爾森菌屬、胎兒彎曲菌、結核桿菌
及某些分枝桿菌屬亦具較好抗菌作用，其抗菌活性較慶大霉素略低。其最突出的優點是對 許多腸道革蘭陰性桿菌所產生的氨基糖苷類鈍化酶穩定，不會為此類酶鈍化而失去抗菌活
性。在目前所分離到的12種鈍化酶中，硫酸阿米卡星僅可為AAC(6')所鈍化，此外AAD(4') 和APH(3') — III偶可導致細菌對本品中度耐藥。臨床分離的腸桿菌科細菌中對慶大霉素、 妥布霉素和奈替米星等氨基糖苷類耐藥者約60 70%對硫酸阿米卡星仍敏感。近年來革蘭 陰性桿菌中對阿米卡星耐藥菌株亦有增多。革蘭陽性球菌中本品除對葡萄球菌屬中甲氧西 林敏感株有良好抗菌作用外，肺炎鏈球菌、各組鏈球菌及腸球菌屬對之大多耐藥。硫酸阿 米卡星對厭氧菌無效。硫酸阿米卡星作用機制為作用于細菌核糖體的30S亞單位，抑制細 菌合成蛋白質。阿米卡星與半合成青霉素類或頭孢菌素類合用常可獲協同抗菌作用。
3藥代動力學硫酸阿米卡星口服很少吸收。肌內注射后迅速被吸收。主要分布于細胞 外液，部分藥物可分布到各種組織，并可在腎臟皮質細胞和內耳液中積蓄；但在心臟心耳 組織、心包液、肌肉、脂肪和間質液內的濃度很低。支氣管分泌物、膽汁及房水中濃度低。 蛋白結合率低。在體內不代謝。成人血消除半衰期(tl/2 )為2 2.5小時。可透過胎盤進入 胎兒組織。腦脊液中濃度低。主要經腎小球濾過排出，給藥后24小時內排出90%以上。 血液透析與腹膜透析可自血中清除相當量的藥物。
用法用量1.成人，肌內注射或靜脈滴注。單純性尿路感染對常用抗菌藥耐藥者每 12小時0.2g;用于其他全身感染每12小時7.5mg/kg，或每24小時15mg/kg。成人一日不 超過1.5g，療程不超過10天。2.小兒，肌內注射或靜脈滴注。首劑按體重10mg/kg，繼 以每12小時7.5mg/kg，或每24小時15mg/kg。 3.腎功能減退患者肌酐清除率>50 90ml/min者每12小時給予正常劑量(7.5mg/kg)的60 90% ;肌酐清除率10 50ml/min者 每24 48小時用7.5mg/kg的20 30% 。肌酐清除率可直接測定或從血肌酐值按下式計算 成年男性肌酐清除率K140-年齡)x標準體重(kg)/72x患者血肌酐濃度(mg/dl)或(140-年齡)x 標準體重(kg)/50x患者血肌酐濃度(mg/dl);成年女性肌酐清除率K140-年齡)x標準體重 (kg)x0.85/72x患者血肌酐濃度(mg/dl)或(140-年齡)x標準體重(kg)x0.85/50x患者血肌酐濃度 (mg/dl)。
不良反應1.患者可發生聽力減退、耳鳴或耳部飽滿感；少數患者亦可發生眩暈、 步履不穩等癥狀。聽力減退一般于停藥后癥狀不再加重，但個別在停藥后可能繼續發展至 耳聾。2.本品有一定腎毒性，患者可出現血尿，排尿次數減少或尿量減少、血尿素氮、 血肌酐值增高等。大多系可逆性，停藥后即見減輕，但亦有個別報道出現腎功能衰竭。3.軟 弱無力、嗜睡、呼吸困難等神經肌肉阻滯作用少見。4.其他不良反應有頭痛、麻木、針 刺感染、震顫、抽搐、關節痛、藥物熱、嗜酸粒細胞增多、肝功能異常、視力模糊等。
禁忌癥對阿米卡星或其他氨基糖苷類過敏的患者禁用。
注意事項1.交叉過敏，對一種氨基糖苷類過敏的患者可能對其他氨基糖苷也過敏。 2.在用藥過程中應注意進行下列檢查(l)尿常規和腎功能測定，以防止出現嚴重腎毒性 反應。(2)聽力檢査或聽電圖檢查，尤其注意高頻聽力損害，這對老年患者尤為重要。3.療 程中有條件時應監測血藥濃度，尤其新生兒、老年和腎功能減退患者。每12小時給藥
7.5mg/kg者血約峰濃度應保持在15 30 g/ml，谷濃度5 10g/ml; —日1次給藥15mg/kg 者血藥峰濃度應維持在56 64g/ml，谷濃度應為〈lg/ml。 4.下列情況應慎用硫酸阿米卡 星(l)失水，可使血藥濃度增高，易產生毒性反應。(2)第8對腦神經損害，因本品可導致前庭神經和聽神經損害。(3)重癥肌無力或帕金森病，因本病可引起神經肌肉阻滯作用，導 致骨骼肌軟弱。(4)腎功能損害者，因本品具有腎毒性。5.對診斷的干擾本品可使丙氨酸 氨基轉移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、血清膽紅素濃度及乳酸脫氫酶濃度的測定
值增高；血轉、鎂、鉀、鈉濃度的測定值可能降低。6.氨基糖苷類與p內酰胺類(頭孢菌
素類與青霉素類)混合時可導致相互失活。本品與上述抗生素聯合應用時必須分瓶滴注。
阿米卡星亦不宜與其他藥物同瓶滴注。7.應給予患者足夠的水份，以減少腎小管損害。8.配 制靜脈用藥時，每500mg加入氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液或其他滅菌稀釋液100 200ml。成人應在30 60分鐘內緩慢滴注，嬰兒患者稀釋的液量相應減少。
孕婦及哺乳期婦女用藥硫酸阿米卡星屬孕婦用藥的D類，即對人類有一定危害，但 用藥后可能利大于弊。本品可穿過胎盤到達胎兒組織，可能引起胎兒聽力損害。妊娠婦女 使用本品前必須充分權衡利弊。哺乳期婦女用藥時宜暫停哺乳。
兒童用藥氨基糖苷類在兒科中應慎用，尤其早產兒及新生兒的腎臟組織尚未發育完 全，使本類藥物的半衰期延長，藥物易在體內蓄積產生毒性反應。
老年患者用藥老年患者的腎功能有一定程度的生理性減退，即使腎功能的測定值在
正常范圍內，仍應采用較小治療量。老年患者應用本品后較易產生各種毒性反應，應盡可 能在療程中監測血藥濃度。
藥物相互作用1.硫酸阿米卡星與其他氨基糖苷類合用或先后連續局部或全身應用， 可增加耳毒性、腎毒性及神經肌肉阻滯作用。2.硫酸阿米卡星與神經肌肉阻斷藥合用可 加重神經肌肉阻滯作用，導致肌肉軟弱、呼吸抑制等癥狀。本品與巻曲霉素、順鉑、依他 尼酸、呋塞米或萬古霉素(或去甲萬古霉素)等合用，或先后連續局部或全身應用，可能增
加耳毒性與腎毒性。3.硫酸阿米卡星與頭孢噻吩或頭孢唑林局部或全身合用可能增加腎 毒性。本品不宜與兩性霉素B、頭孢噻吩、磺胺嘧啶和四環素等注射劑配伍，不在同一瓶 中滴注。4.硫酸阿米卡星與多粘菌素類注射劑合用或先后連續局部或全身應用，可增加 腎毒性和神經肌肉阻滯作用。5.其他腎毒性藥物及耳毒性藥物均不宜與硫酸阿米卡星合 用或先后應用，以免加重腎毒性或耳毒性。
藥物過量由于缺少特異性拮抗劑，本品過量或引起毒性反應時，主要用對癥療法和 支持療法，同時補充大量水分。血液透析或腹膜透析有助于從血中清除阿米卡星。貯藏 密閉，在涼暗處保存。

發明內容
5本發明的目的是提供一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，特別是提供一種硫酸阿米卡 星注射液用于防治雞的大腸桿菌和沙門氏菌病的新用途，硫酸阿米卡星注射液屬復方廣譜 抗生素類藥物，對多種革蘭氏陰性桿菌，如大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、變形桿菌等 有中度抑制作用，A群鏈球菌、肺炎球菌、表皮葡萄球菌和某些支原體(如雞毒支原體、 火雞支原體、滑液支原體、豬鼻支原體、豬滑膜支原體等)常敏感。草綠色鏈球菌和金黃 色葡萄球菌多不敏感。林可霉素主要抗革蘭氏陽性菌，對支原體的作用與紅霉素相似而比 其他大環內酯類稍弱。對葡萄球菌、溶血性鏈球菌和肺炎球菌作用較強，但不及青霉素類 和頭孢菌素類，對厭氧菌如破傷風梭菌、產氣莢膜芽孢桿菌有抑制作用；對豬痢疾密螺旋 體和弓形體也有一定作用。對需氧革蘭氏陰性菌耐藥。二者合用，具有協同作用，同時也 顯著增加對支原體的抗菌活性。
本發明的一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，通過硫酸阿米卡星注射液對人工誘發雞 大腸桿菌和沙門氏菌的療效試驗，以人工誘發雞大腸桿菌和雛雞沙門氏菌病為病理模型， 進行了硫酸阿米卡星注射液肌內注射的藥效學觀察，為在臨床上有效安全使用提供了科學 依據，揭示了硫酸阿米卡星可有效防治雞大腸桿菌和沙門氏菌病。
本發明的結果顯示硫酸阿米卡星注射液對雞源大腸桿菌和沙門氏菌，均產生明顯的 抑菌作用，雞源大腸桿菌和沙門氏菌對硫酸阿米卡星注射液均高敏；硫酸阿米卡星注射液 能有效地控制雞大腸桿菌感染，減輕臨床癥狀，減少發病和死亡率，同時能遏制存活雞的 體重下降；硫酸阿米卡星注射液對雞大腸桿菌和沙門氏菌具有抑殺作用，臨床上能有效地 防治大腸桿菌和沙門氏菌的感染，降低發病率和病雞的死亡率。
具體實施例方式
下面結合具體實施方式
，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術 人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限 定的范圍。
本發明的一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，是一種硫酸阿米卡星注射液用于防治雞 的大腸桿菌和沙門氏菌病的新用途，硫酸阿米卡星屬于氨基糖苷類藥物，具有抗菌譜廣、 抗菌效果強等特點，可有效防治雞大腸桿菌和沙門氏菌病。下列試驗通過人工誘發雞大腸 桿菌和雛雞沙門氏菌病為病理模型，進行了硫酸阿米卡星注射液肌內注射的藥效學觀察， 為在臨床上有效安全使用提供了科學依據。
61材料與方法 11試驗材料
1. 1. 1試驗藥物硫酸阿米卡星注射液(3%)，批號20080901，山西恒豐強動物藥業有
限公司生產。
1. 1. 2試驗動物湟中縣多巴種豬種雞場1日齡的健康海蘭雛雞480羽(無大腸桿菌病和沙
門氏菌病母源抗體)。
1 1. 3菌種中國獸藥監察所培植的雞源大腸桿菌O， (E， ColiCh)和雞源沙門氏菌C79—1， C79— l陽性血清由青海省牧科院制作。 12試驗方法
1. 2. 1試驗動物的選擇試驗動物選用體重相近、體質健壯、精神狀況良好、健康無病 的1日齡海蘭雛雞480羽作為試驗動物。
1. 2. 2試驗動物分組與攻毒接種量將選擇好的480羽1日齡海蘭雛雞，按隨機分組設計， 分為兩個試驗。第一個試驗雞大腸桿菌攻毒治療試驗。將240羽試驗雞隨機分為2個大組， 其中第一大組(4個小組)用0.05 ml(2.4億個活菌)雞大腸桿菌02攻毒后進行治療試驗；第二大 組(4個小組)用0.1 ml(2.5億個活菌)雞大腸桿菌02攻毒后進行治療試驗。第二個試驗雞沙 門氏菌C79—l攻毒治療試驗。將240羽試驗雞隨機分為2個大組，其中第1個大組(4個小組) 用0.05ml(2. 4億個活菌)沙門氏菌C79—1攻毒后進行治療試驗；第二大組(4個小組)用
0. 1ml(2.5億個活菌)沙門氏菌C79—l攻毒后進行治療試驗。
1. 2. 3體外抑菌試驗通過測量抑菌圈的大小初步了解試驗菌株對受試藥的敏感性(含藥 量30嗎/點)。
1. 2. 4治療用藥量及用藥方法把細菌攻毒各大組平均分成4個小組，每小組30羽雞， 其中3個組為不同劑量水平治療組(分別為4mg/kgw、 5mg/kgw和7mg/kgw). l個組不治療， 作為對照組。各治療組在攻毒后5 7h，即感染后初顯臨床癥狀時，立即分別給予藥物飲 水，2次/d，連用5d。
1. 2. 5療效判定標準用藥后病雞腹瀉癥狀減輕，眼結膜潮紅消失。采取雞心血在試驗 室進行細菌培養、顯微鏡檢查，大腸桿菌呈陰性，判定為有效或治愈，反之判定為無效。 1. 2. 6試驗時間試驗時間為15d，其中預試期5d，正式試驗10d。 1. 3觀察記錄等項目.
1. 3. 1接種后仔細觀察和記錄各組雞的發病情況、臨床變化及死亡情況。 1. 3. 2對死亡雞及時進行剖檢，記錄病理變化，連續觀察10d。1. 3. 3對死亡雞進行剖檢，取心血、肝進行細菌分離培養，并作血清學鑒定或用陽性血 清與培養菌進行玻片凝集反應，確定雞死亡是否由接種感染菌所致。
1. 3. 4各組雞在感染前和試驗結束時分別稱重l次，觀察 增重效果。
2結果與分析
2. 1體外抑茵試驗結果
硫酸阿米卡星注射液對雞源大腸桿菌02和沙門氏菌C79—1株，均產生明顯的抑菌作用，其 抑菌圈的直徑分別為23mm和29 mm，根據細菌對藥物敏感度的判定標準(硫酸阿米卡星的 抑菌直徑》17為高敏)，結果表明雞源大腸桿菌02，和沙門氏菌C79—1對硫酸阿米卡星注 射液均高敏。
2. 2對雞大腸桿菌株02，感染的治療試驗人工病模試驗各治療組和細菌感染組雛雞在 攻毒后5 7h，部分雛雞出現不同程度的大腸桿菌臨床癥狀，主要表現為精神不振、輕度 腹瀉、眼結膜潮紅、食欲減退，嚴重者食欲廢絕等。三個用藥組治療后的第2d臨床病癥明 顯減輕，到5d臨床病癥基本消失，但仍有個別病重的雞，也有死亡。而對照組從攻毒開始 至第8d，臨床癥狀非常嚴重并陸續死亡，到第9d存活雞臨床病癥基本消失。各組治療效 果見表l。
表l治療期間各試驗組的死亡、相對增重率(單位頭、％ 、 kg)
組別動物數量死亡數死亡率始重末重總增重
0.05M14mg/kgw3026.61.572.801.23
攻毒組5mg/kgw30001.592.971.38
7mg/kgw30036.71.583.001.42
不治療對照組30111.571.760.19
0.1 Ml4mg/kgw3026.61.562.791.23
攻毒組5mg/kgw30001.582.961.38
7mg/kgw30001.572.991.42
不治療對照組3015501.561.750.19
從表l可以看出，治療組從治療開始到第10d，無論是0.05ml攻毒組，還是0.1ml攻毒 組，其4mg/kgw治療組的雞死亡率平均為6.6X ; 50mg/kgw和7mg/kg治療組的平均死 亡率為0，而對照組的死亡率平均為43. 3%。由此可見，雞的死亡率試驗組之間雖有差異，但差異不顯著(PX). 05)，而與對照組相比較，則差異極顯著(PO. Ol)。說明硫酸阿米卡 星注射液對雞大腸桿菌02株感染有良好的治療效果。
死亡雞剖檢變化及主要特征解剖病死雞可見氣管粘液增多，肝臟大多有散在的出 血點，較瘦的雞表現為纖維索性肝周炎、心包炎、腸黏膜肥厚，腸腔內有多量黃色泡沫， 腎臟稍腫。把死亡雞的心血和肝接種于鑒別培養基麥康凱瓊脂平板上進行常規培養，95% 的死亡雞分離出大腸桿菌，經實驗室血清學鑒定，全部是大腸桿菌02株，說明雛雞死亡的 原因是由該菌株引起的。
上述試驗結果表明，硫酸阿米卡星注射液能有效地控制雞大腸桿菌感染，減輕臨床癥 狀，減少發病和死亡率，同時能遏制存活雞的體重下降。在藥物的用量上，5mg/kgw和 7mg / kgw優于4mg / kgw硫酸阿米卡星注射液。
2. 3對雞沙門氏茵C79—1感染的治療效果人工病模試驗各治療組和細菌感染組雛雞在 接種了沙門氏菌C79—1后6 7 h，部分雞出現不同程度的發病癥狀，主要表現為精神不 振、閉目縮頸、畏寒、食欲減退或廢絕。治療的當天發病率已達50%左右，治療組經過 治療，到第5 d臨床病癥基本消失，期間個別組病重者死亡；而對照組從感染的第2d到 第4d臨床癥狀明顯，并發生大批死亡，從第5d死亡開始下降，至7 10d臨床病癥才基 本消失。各組的治療效果見表2。
表2治療期間各試驗組的死亡、相對增重率(單位頭、％ 、 kg)
組別動物數量死亡數死亡率始重末重總增重
0.05M14mg/kgw3013.31.592.901.31
攻毒組5mg/kgw30001.622.931.31
7mg/kgw30001.583.001.42
不治療對照組301653.31.622.220.6
O.畫4mg/kgw3013.31.582.911.33
攻毒組5mg/kgw30001.612.921.31
7mg/kgw30001.592.971.38
不治療對照組3021701.632.250.62
從表2中可以看出，治療組從治療開始到第10d，無論是O. 05ml攻毒組，還是O. lml 攻毒組，其4mg / kgw治療組的雞死亡率平均為3.3X; 5mg / kgw和7mg / kgw治療組的平 均死亡率均為O。試驗組之間雖有差異，但差異不顯著(PX). 05)，而與對照組的66. 7%的死亡率相比，則差異極顯著(PO. 01)。雞的增重結果也呈現上述規律，說明硫酸阿米卡 星注射液對雞沙門氏菌C79—1感染有良好的治療效果。
死亡雞剖檢變化及主要特征通過對病死雞的病理解剖，肉眼觀察可見嗉嚷空虛，肝 臟腫大，呈土黃色并有磚紅色條紋，脾臟腫大、充血。把死t雞的心血和肝接種于鑒別培
養基S. S瓊脂平板上進行常規培養，90%以上的死亡雞分離出沙門氏菌，經實驗室用抗血 清進行玻片凝集反應為陽性，說明雛雞死亡的原因是由沙門氏菌C79—l株引起的。上述試 驗結果表明，硫酸阿米卡星注射液能有效地控制雞沙門氏菌感染、減輕臨床癥狀、減少沙 門氏菌的感染率和死亡率，在治療期間一定程度上能遏制存活雞的體重下降。在藥物的用 量上，5mg / kgw和7mg / kgw無論在控制死亡和遏制體重下降方面都優于4mg / kgw硫酸 阿米卡星注射液。 3小結
3. 1硫酸阿米卡星注射液對雞大腸桿菌和沙門氏菌具有抑殺作用，臨床上能有效地防治 大腸桿菌和沙門氏菌的感染，降低發病率和病雞的死亡率。
3. 2本試驗采用4mg / kgw、 5mg/kgw和7mg/kgw，即低、中、高三個治療濃度，研究 了其藥效及臨床應用的治療劑量，根據感染后雛雞的發病率、死亡率、臨床病癥及相對增 重率進行評價，結果表明，三個臨床應用劑量都能有效地減少雞大腸桿菌病和沙門氏菌病 的發病率、死亡率，并能遏制體重的下降，但相比較之下，5mg/kgw和7mg/kgw的治療 效果更好。
10
權利要求
1.一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，是一種硫酸阿米卡星注射液用于防治雞的大腸桿菌和沙門氏菌病的新用途。
全文摘要
本發明涉及一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，特別是涉及一種硫酸阿米卡星注射液用于防治雞的大腸桿菌和沙門氏菌病的新用途。本發明的一種硫酸阿米卡星注射液的新用途，通過硫酸阿米卡星注射液對人工誘發雞大腸桿菌和沙門氏菌的療效試驗，以人工誘發雞大腸桿菌和雛雞沙門氏菌病為病理模型，進行了硫酸阿米卡星注射液肌內注射的藥效學觀察，為在臨床上有效安全使用提供了科學依據，揭示了硫酸阿米卡星可有效防治雞大腸桿菌和沙門氏菌病。
文檔編號A61K31/7028GK101584656SQ20091005436
公開日2009年11月25日 申請日期2009年7月3日 優先權日2009年7月3日
發明者洪 廖, 敏 李, 郭春艷, 高建輝, 譚 龍 申請人:上海恒豐強動物藥業有限公司