專(zhuān)利名稱(chēng)：：用于減少皮膚損傷的方法和組合物的制作方法用于減少皮膚損傷的方法和組合物對(duì)相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求2007年11月15日提交的美國(guó)申請(qǐng)流水號(hào)61/003，351的優(yōu)先權(quán)，通過(guò)提及而將其完整收入本文。
背景技術(shù)：
：Ras相關(guān)GTP酶的Rho家族成員(諸如RhoE)響應(yīng)胞外生長(zhǎng)因子而調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的組構(gòu)(organization)。發(fā)明概述本發(fā)明部分基于如下發(fā)現(xiàn)，即RhoE途徑對(duì)于皮膚的保養(yǎng)和/或外表是重要的。在一個(gè)實(shí)施方案中，發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，RhoE途徑在減少、治療、和/或防止皮膚損傷(例如紫外線B(UVB)誘導(dǎo)的皮膚損傷和皺紋)中是重要的。因此，發(fā)明人已經(jīng)將RhoE途徑鑒定為如下靶物，其用于通過(guò)例如防止和/或減少急性和/或慢性光損傷，例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷(例如防止和/或減少皺紋)來(lái)改善皮膚狀況和/或外表的篩選和治療方法。如此本發(fā)明的特征在于通過(guò)例如減少、治療、和/或防止UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷(例如皺紋)來(lái)改善皮膚的狀況和/或外表的篩選和治療方法，及相關(guān)組合物(例如化妝品組合物)。因而，一方面，本發(fā)明的特征在于一種篩選防止和/或減少UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷(例如皺紋)的藥劑的方法。該方法包括鑒定提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低Rho激酶I(ROCKI)活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑。方法還可以包括將RhoE途徑活性升高(例如RhoE活性升高、RhoE表達(dá)升高、ROCKI活性降低、或ROCKI表達(dá)降低)與所述藥劑防止和/或減少皺紋的能力聯(lián)系起來(lái)，例如將所鑒定的藥劑鑒定為皺紋保護(hù)和/或減少藥劑(例如提供印刷材料或計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)，例如信息、市場(chǎng)、或指導(dǎo)印刷材料或計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)，其涉及所鑒定的藥劑或其用途)。聯(lián)系意味著將提高RhoE途徑活性的測(cè)試藥劑鑒定為能夠防止、減少和/或治療皺紋的藥劑。聯(lián)系步驟可以包括例如產(chǎn)生或提供記錄，例如印刷物或計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)，諸如實(shí)驗(yàn)室記錄或數(shù)據(jù)集或電子郵件，將提高RhoE途徑活性的測(cè)試藥劑鑒定為能夠防止、減少和/或治療皺紋的藥劑。記錄可以包括其它信息，諸如具體的測(cè)試藥劑鑒定人、日期、方法的操作人員、或關(guān)于測(cè)試藥劑來(lái)源、結(jié)構(gòu)、純化方法、或生物學(xué)活性的信息?？梢允褂糜涗浕蛟从谠撚涗浀男畔?lái)例如將測(cè)試藥劑鑒定為供藥學(xué)或治療使用的化合物或候選藥劑(例如先導(dǎo)化合物)?？梢詫⑺b定的藥劑鑒定為用于治療和/或減少皺紋的藥劑或潛在藥劑。可以在例如皺紋治療(或治療，例如化妝品治療的開(kāi)發(fā))中使用通過(guò)此方法鑒定的藥劑(例如化合物)。在一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括評(píng)估(例如測(cè)量)所述藥劑對(duì)皮膚的影響，例如評(píng)估與皺紋相關(guān)的參數(shù)，例如皺紋的存在、程度、或類(lèi)型；并自篩選選擇藥劑，例如防止和/或減少對(duì)皮膚損傷(例如防止和/或減少皮膚中的皺紋)的藥劑。優(yōu)選地，評(píng)估所述藥劑對(duì)皮膚的影響包括對(duì)組織或受試者施用所述藥劑(例如表面地)，并比較與皺紋相關(guān)的參數(shù)(例如組織或受試者中的皺紋存在、程度、或類(lèi)型)，任選地，與參照數(shù)值(例如對(duì)照或基線數(shù)值，例如進(jìn)行過(guò)不同處理(例如沒(méi)有施用過(guò)藥劑或施用過(guò)安慰劑)的組織或受試者中的同一參數(shù)的數(shù)值)進(jìn)行比較。可以在沒(méi)有或存在皮膚損傷來(lái)源(例如誘導(dǎo)皺紋形成(例如UVB輻4射)的藥劑或處理)的情況中評(píng)估所述藥劑對(duì)皮膚的影響。在一些實(shí)施方案中，評(píng)估包括將評(píng)估數(shù)值(例如皺紋存在、程度、或類(lèi)型的數(shù)值)輸入數(shù)據(jù)庫(kù)或其它記錄。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)藥劑評(píng)估防止和/或減少UVB誘導(dǎo)的皺紋的能力。在另一個(gè)實(shí)施方案中，受試者是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，例如野生型或轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物，例如嚙齒類(lèi)，例如大鼠、小鼠或豚鼠(guineapig)。受試者也可以是人。在一個(gè)另外的實(shí)施方案中，評(píng)估步驟包括對(duì)受試者的皮膚施用所述藥劑(例如表面地)。在一個(gè)實(shí)施方案中，鑒定提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，鑒定步驟包括(a)提供包含外源核酸的細(xì)胞、組織或非人動(dòng)物，所述外源核酸包括與編碼報(bào)告多肽(例如基于光的，例如發(fā)光的(例如螢光素酶)、比色的、或熒光可檢測(cè)的(例如熒光報(bào)告多肽，例如GFP、EGFP,BFP、RFP)標(biāo)記物)的核苷酸序列可操作連接的RhoE途徑成分(例如RhoE或ROCKI)調(diào)節(jié)區(qū)(例如啟動(dòng)子或增強(qiáng)子)；(b)評(píng)估測(cè)試藥劑提高報(bào)告多肽在細(xì)胞、組織或非人動(dòng)物中的活性的能力；并(c)選擇調(diào)控報(bào)告多肽活性(例如相對(duì)于參照對(duì)照)的測(cè)試藥劑作為調(diào)控RhoE途徑成分的藥劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞或組織是皮膚細(xì)胞或組織，例如角質(zhì)形成細(xì)胞細(xì)胞或組織，例如皮膚外植體或人工皮膚組織。在另一個(gè)實(shí)施方案中，非人動(dòng)物是包含所述核酸的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，例如轉(zhuǎn)基因嚙齒類(lèi)，例如小鼠、大鼠、或豚鼠。在一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括兩個(gè)評(píng)估步驟，例如方法包括在第一系統(tǒng)(例如細(xì)胞或組織系統(tǒng))中評(píng)估測(cè)試藥劑的第一步，和在第二系統(tǒng)(例如第二細(xì)胞或組織系統(tǒng))或非人動(dòng)物中評(píng)估測(cè)試藥劑的第二步。在其它實(shí)施方案中，方法包括在同一類(lèi)型的系統(tǒng)中的兩個(gè)評(píng)估步驟，例如在相同或不同非人動(dòng)物中進(jìn)行第一次評(píng)估后在非人動(dòng)物中再評(píng)估所述藥劑。兩次評(píng)估可以間隔任何時(shí)間長(zhǎng)度，例如數(shù)天、數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年。在另一個(gè)實(shí)施方案中，評(píng)估藥劑對(duì)UVB誘導(dǎo)的皺紋的影響。例如，在UVB暴露之前、期間、和/或之后評(píng)估藥劑。調(diào)控RhoE途徑成分(例如RhoE)表達(dá)、活性、和/或水平的藥劑可以是粗制或半純化的提取物，例如有機(jī)體的，例如動(dòng)物或植物提取物，或者分離的化合物，例如小分子、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、或核酸。典型的藥劑是天然存在的物質(zhì)或提取物，例如植物或真菌提取物。例如，所述藥劑可以是下列任何一項(xiàng)(a)RhoE途徑的多肽成分，例如RhoE多肽或其功能片段或模擬物；(b)RhoE途徑成分的肽或蛋白質(zhì)激動(dòng)劑或拮抗劑，其提高RhoE途徑的活性；(c)如下的小分子或化學(xué)化合物(例如有機(jī)化合物，例如天然存在的或合成的有機(jī)化合物)，其提高RhoE途徑成分(例如RhoE)的表達(dá)，例如通過(guò)結(jié)合其基因的啟動(dòng)子區(qū)域來(lái)實(shí)現(xiàn)；(d)如下的小分子，其降低RhoE途徑成分(例如ROCKI)的表達(dá)，例如通過(guò)結(jié)合其基因的啟動(dòng)子區(qū)域來(lái)實(shí)現(xiàn)；(f)編碼RhoE途徑多肽或其功能片段、類(lèi)似物、活化等位基因、或活化劑的核苷酸序列；或(g)降低RhoE途徑多肽(例如ROCKI)表達(dá)的核苷酸序列(例如反義、siRNA、dsRNA、或發(fā)夾核酸)。核苷酸序列可以是基因組序列或cDNA序列。核苷酸序列(例如病毒載體(例如腺病毒載體、腺伴隨病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、或慢病毒載體)可以包括RhoE途徑成分編碼區(qū)域；啟動(dòng)子序列，例如來(lái)自RhoE途徑成分基因或來(lái)自另一種基因的啟動(dòng)子序列；增強(qiáng)子序列；非翻譯調(diào)節(jié)序列，例如5’非翻譯區(qū)(UTR)(例如來(lái)自RhoE基因或來(lái)自另一種基因的5，UTR),3'UTR，例如來(lái)自RhoE基因或來(lái)自另一種基因的3，UTR;多腺苷酸化位點(diǎn)；和/或絕緣子序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)提高RhoE途徑的內(nèi)源成分的表達(dá)水平(例如通過(guò)提高RhoE基因的轉(zhuǎn)錄或者提高RhoEmRNA穩(wěn)定性)來(lái)提高RhoE途徑成分(例如RhoE)的水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，如下提高RhoE基因的轉(zhuǎn)錄改變內(nèi)源因子RhoE基因的調(diào)節(jié)序列(例如在體細(xì)胞中)，例如通過(guò)添加正調(diào)節(jié)元件(諸如增強(qiáng)子或轉(zhuǎn)錄激活劑的DNA結(jié)合位點(diǎn))；刪除負(fù)調(diào)節(jié)元件(諸如轉(zhuǎn)錄阻遏物的DNA結(jié)合位點(diǎn))和/或替換內(nèi)源調(diào)節(jié)序列或其中的元件(用另一種基因的)，由此容許更有效地轉(zhuǎn)錄RhoE基因的編碼區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，藥劑在粗制或部分純化的植物提取物中。一種或多種藥劑可以組合用于本文中所描述的方法。一方面，本發(fā)明的特征在于減少、治療、和/或防止皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的方法，其通過(guò)以足以減少、治療、和/或防止皮膚損傷的量對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑調(diào)控RhoE途徑的成分，例如RhoE。在一些實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括鑒定需要減少、治療、和/或防止皮膚損傷的受試者。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。RhoE途徑的其它激動(dòng)劑也可以在所述方法中使用。又一方面，本發(fā)明的特征在于在受試者中減少皮膚損傷的一項(xiàng)或多項(xiàng)病癥(例如皺紋(例如皺紋的數(shù)目或形態(tài)學(xué))、發(fā)紅(redness)、炎癥、脫皮(desquamation)、和色素沉著之一項(xiàng)或多項(xiàng))的方法，其通過(guò)以足以減少皺紋(例如由暴露于UVB輻射引起的皺紋)的量對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑調(diào)控RhoE途徑的成分，例如RhoE。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。所述藥劑可以在組合物(例如化妝品組合物)中。組合物可以是無(wú)菌的和/或它可以進(jìn)一步包含化妝劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于在受試者中保護(hù)免于皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷)的方法，其通過(guò)以足以保護(hù)免于皮膚損傷的量對(duì)受試者提供包含提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑的組合物來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述組合物調(diào)控RhoE途徑的成分。在一些實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括向受試者提供關(guān)于使用組合物來(lái)保護(hù)免于皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的指令。在一些實(shí)施方案中，所述指令包括在日照之前、期間、和/或之后對(duì)皮膚應(yīng)用組合物的指導(dǎo)。組合物可以包含RhoE途徑激動(dòng)劑，例如選自表1中所呈現(xiàn)的那些藥劑的藥劑。組合物可以包含化妝劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于在受試者中維持皮膚穩(wěn)態(tài)的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此維持皮膚穩(wěn)態(tài)來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于在受試者中使表皮功能正常化的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用激活RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或6降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此使表皮功能正?；瘉?lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于在受試者中防止、減少、和/或治療皮膚老化的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療皮膚老化來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于改善受試者皮膚的屏障功能的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此改善皮膚的屏障功能來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于防止、減少、和/或治療干性皮膚的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療干性皮膚來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于防止、減少、和/或治療皺紋形成的方法，其通過(guò)對(duì)受試者施用提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療皺紋形成來(lái)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是表面施用的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者已經(jīng)或者將被暴露于UVB輻射(例如皮膚損傷量的UVB輻射)。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。術(shù)語(yǔ)“RhoE途徑”指介導(dǎo)RhoE對(duì)凋亡和分化的影響的生物學(xué)成分(參見(jiàn)圖9)。所述途徑包括例如RhoE和ROCKI。術(shù)語(yǔ)“RhoE途徑激動(dòng)劑”指提高RhoE途徑活性的藥劑，例如加強(qiáng)、誘導(dǎo)、或在其它方面增強(qiáng)RhoE多肽的一種或多種生物學(xué)活性(例如如本文中所描述的生物學(xué)活性)的藥劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，RhoE途徑激動(dòng)劑是編碼RhoE多肽或正向作用胞質(zhì)途徑成分的核酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，RhoE途徑激動(dòng)劑是抑制ROCKI表達(dá)的核酸(例如反義或RNAi核酸)。受試者可以是哺乳動(dòng)物，并且典型地是人(例如女性或男性，和成年或幼年人受試者)ο方法可以進(jìn)一步包括在例如施用之前、期間、或之后在受試者中評(píng)估皮膚損傷的一項(xiàng)或多項(xiàng)病癥。本文中描述了此類(lèi)病癥的例子。方法可以進(jìn)一步包括在受試者中評(píng)估RhoE相關(guān)參數(shù)，例如與RhoE多肽、RhoE受體、或RhoE途徑活性水平有關(guān)的參數(shù)。術(shù)語(yǔ)“參數(shù)”指信息，包括定性和定量描述符(values)，例如數(shù)值、水平、測(cè)量等。“RhoE相關(guān)參數(shù)”指描述RhoE途徑成分，例如所述成分(例如RhoE多肽或其它胞質(zhì)成分)的存在、缺失、水平、表達(dá)、穩(wěn)定性、亞細(xì)胞定位、或活性的參數(shù)。參數(shù)還可以描述編碼RhoE途徑成分的mRNA。7另一方面，本發(fā)明的特征在于包含提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑的組合物，例如化妝品組合物。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑調(diào)控RhoE途徑的成分，例如RhoE。化妝品組合物可以進(jìn)一步包含第二成分，例如化妝品成分(例如a芳香劑(fragrance)、保濕液(moisturizer)、或遮光劑)。在一些實(shí)施方案中，調(diào)控RhoE途徑成分的藥劑選自表1中所呈現(xiàn)的藥劑。這些組合物可以在用于治療和/或防止皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的方法中使用。另一方面，本發(fā)明的特征在于包含足以減少皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的量的提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑的組合物，例如供局部應(yīng)用的組合物。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑調(diào)控RhoE途徑的成分。所述藥劑可以選自例如表1中所呈現(xiàn)的藥劑。組合物可以進(jìn)一步包含化妝品成分，例如芳香劑或遮光劑。另一方面，本發(fā)明的特征在于有效量的提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑在制備用于防止、減少、和/或治療皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的藥物或化妝品中的用途或者有效量的提高RhoE途徑活性(例如提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá))的藥劑用于防止、減少、和/或治療皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的用途。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑調(diào)控RhoE途徑的成分。所述藥劑可以選自例如表1中所呈現(xiàn)的藥劑。所述藥物或化妝品可以進(jìn)一步包含化妝品成分，例如芳香劑或遮光劑。又一方面，本發(fā)明的特征在于用于在受試者中減少、治療、和/或防止皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷和/或皺紋)的試劑盒，其包括包含提高RhoE途徑活性、水平、或表達(dá)的藥劑(例如調(diào)控RhoE途徑成分的藥劑)的組合物，和關(guān)于使用所述組合物來(lái)防止皮膚損傷的指令。組合物可以進(jìn)一步包含化妝品成分，例如芳香劑或遮光劑。所述指令可以包括在日照之前、期間、或之后對(duì)皮膚應(yīng)用組合物的指導(dǎo)。除非另有定義，本文中所使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)與本發(fā)明所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
普通技術(shù)人員的通常理解具有相同的意義。雖然可以在本發(fā)明的實(shí)踐或測(cè)試中使用與本文中所描述的方法和材料類(lèi)似或等同的方法和材料，但是下文描述了合適的方法和材料。通過(guò)提及而完整收錄本文所提及的所有出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利、和其它參考文獻(xiàn)。在矛盾的情況中，以本說(shuō)明書(shū)(包括定義)為準(zhǔn)。另外，材料、方法、和實(shí)施例僅是例示性的，而并不意圖為限制性的。在附圖和下文描述中列出了本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案的詳情。從描述和權(quán)利要求書(shū)看，本發(fā)明的其它特征、目的、和優(yōu)點(diǎn)會(huì)是顯而易見(jiàn)的。通過(guò)提及而收錄本文所引用的所有參考文獻(xiàn)。附圖簡(jiǎn)述圖IA是一幅描繪了RhoE螢光素酶報(bào)告物的示意圖。圖IB是篩選RhoE表達(dá)誘導(dǎo)物的方法的流程圖。圖2是描繪了每種化合物的兩次獨(dú)立重復(fù)的Z值分布的圖像。圖3是描繪了用指定量的山奈素(kaempferol)進(jìn)行處理后的RhoE和p53表達(dá)的Western印跡。圖4是一幅柱狀圖，其描繪了UVB暴露后未處理的和山奈素處理的細(xì)胞的細(xì)胞死亡率。圖5是一組顯微照片，其描繪了UVB暴露并用0.5mM山奈素處理后的小鼠皮膚凋亡。以紅色標(biāo)示TUNEL染色，而以藍(lán)色標(biāo)示DAPI染色(針對(duì)細(xì)胞核)。圖6A-圖6C是UVB暴露并用0.5mM山奈素(6B)或DMSO對(duì)照(6A)處理后的小鼠皮膚中的DNA損傷的顯微照片。圖6C顯示了沒(méi)有UV暴露的對(duì)照。以綠色標(biāo)示TDM-2染色，而以藍(lán)色標(biāo)示DAPI染色。圖7A-圖7C是UVB暴露并用0.5mM山奈素(7B)或DMSO對(duì)照(7A)處理后的小鼠皮膚的顯微照片。圖7C顯示了沒(méi)有UV暴露的對(duì)照。以紅色標(biāo)示抗磷酸-H2AX染色，而以藍(lán)色標(biāo)示DAPI染色。圖8是一組顯微照片，其描繪了UVB暴露并用0.5mM山奈素處理后的小鼠表皮中的RhoE表達(dá)。以藍(lán)色標(biāo)示DAPI染色，而以紅色標(biāo)示RhoE染色。圖9是RhoE和ROCKI在角質(zhì)形成細(xì)胞的存活、凋亡、和分化中的作用的模型。圖IOA-圖IOB是Western印跡，其描繪了10A，與載體對(duì)照(pbabe)相比抑制RhoE表達(dá)(pbabe-shRhoE)后的NIC、內(nèi)披蛋白、RhoEjPβ-肌動(dòng)蛋白對(duì)照；或10Β，與對(duì)照(Ad-GFP)相比過(guò)表達(dá)RhoE(Ad-RhoE)后的NIC、內(nèi)披蛋白、RhoEjPβ-肌動(dòng)蛋白對(duì)照。圖1IA-IIB是描繪角蛋白1在野生型(IlA)和RhoE轉(zhuǎn)基因(IlB)小鼠表皮中的表達(dá)的顯微照片。以紅色標(biāo)示角蛋白1，而以藍(lán)色標(biāo)示DAPI。圖12和圖13是多組顯微照片，其描繪了UVB暴露后人皮膚中的RhoE表達(dá)。圖14是一幅柱狀圖，其描繪了暴露于指定水平的UVB后人角質(zhì)形成細(xì)胞中的相對(duì)RhoEmRNA水平，如通過(guò)定量PCR所測(cè)量的。發(fā)明詳述發(fā)明人已經(jīng)將RhoE途徑鑒定為供用于治療、防止、和/或減少皮膚損傷(例如UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷，例如皺紋)的篩選和治療方法以及組合物(例如化妝品組合物)用的靶物。本發(fā)明的特征在于具有作為活性成分的RhoE誘導(dǎo)物的組合物。皮膚損傷通常，受損傷皮膚的特征在于炎癥、表皮增生、皮膚彈性組織變性和基質(zhì)蛋白降解、和小靜脈周?chē)?perivenular)淋巴組織細(xì)胞性皮膚浸潤(rùn)的存在之一項(xiàng)或多項(xiàng)。本文所描述的結(jié)果揭示，RhoE保護(hù)免于皮膚損傷，例如由UVB輻射引起的皮膚損傷。組合物的有效量定義為對(duì)受試者施用后在受試者中防止或減少皮膚損傷的一種或多種病癥(例如炎癥、表皮增生、皮膚彈性組織變性和基質(zhì)蛋白降解、小靜脈周?chē)馨徒M織細(xì)胞性皮膚浸潤(rùn)、和皺紋(例如細(xì)皺紋)的形成)的組合物量。要對(duì)受試者施用的有效量通?；诙喾N因素，包括年齡、性別、表面積、重量、和皮膚狀況。體表面積可以從患者的高度和重量近似測(cè)定。參見(jiàn)例如ScientificTables,GeigyPharmaceuticals,Ardley,NewYork，1970，537。有效劑量會(huì)隨施用路徑、賦形劑使用、和與其它治療(諸如其它皺紋減少化合物的使用)共使用的可能性而變化，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)可的?？梢栽诖_定組合物的有效量的方法中使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。如本文中所使用的，“防止或治療皮膚損傷”指以減少、改善、減輕、改變、治療、改9善、或影響皮膚損傷外表的目的對(duì)具有皮膚損傷(例如皺紋)，或者具有朝向皮膚損傷素因，或者已經(jīng)被暴露于可能引起皮膚損傷的媒介(例如UV輻射，例如UVB輻射)的受試者應(yīng)用或施用治療劑?？梢杂墒茉囌咦约?，或者由另一人(例如健康護(hù)理提供者或化妝品提供者)對(duì)受試者施用治療劑。在本文所描述的方法的優(yōu)選的實(shí)施方案中，皮膚損傷在受試者中降低至少5%，通常為至少10%，例如至少20%，25%或更多。所述方法和組合物可以預(yù)防性使用或者可以使用它們來(lái)在受試者中減少、治療、和/或防止別的皮膚損傷，例如皺紋，或者減少皮膚損傷的外表。還可以使用組合物來(lái)制備用于防止、減少、和/或治療皮膚損傷(例如皺紋)的藥物或化妝品。MM皺紋一般是皮膚的自然老化過(guò)程和暴露于太陽(yáng)的紫外線的結(jié)果。皺紋是皮膚表面的構(gòu)造變化，在組織學(xué)水平?jīng)]有特定的結(jié)構(gòu)改變。一般而言，如Kligman等(1985)Br.J.Derm.113:37_42(通過(guò)提及而收入本文)中所描述的那樣對(duì)皺紋分類(lèi)。Kligman將皺紋分成三類(lèi)線性皺紋、雕刻皺紋(glyphicwrinkle)、和皺(crinkle)。線性皺紋是直的(一般在面部皮膚中找到)，并且由天然老化或暴露于紫外光引起。雕刻皺紋成形為明顯的三角形或矩形皺紋，在暴露于陽(yáng)光的臉、手、和頸上找到，并且通過(guò)暴露于紫外光或光老化(dermatoheliosis)加重。皺是松弛皮膚上細(xì)的、起皺的皺紋，在皮膚上的任何地方找到，但是通常在手背上和眼瞼周?chē)?。線性皺紋可以進(jìn)一步細(xì)分成(a)規(guī)則皺紋(regularwrinkles)和(b)細(xì)皺紋(finewrinkle)。規(guī)則皺紋是長(zhǎng)的、深的、清楚的，并且又稱(chēng)為魚(yú)尾紋(crow’sfeet)。細(xì)皺紋是細(xì)的且淺的。規(guī)則皺紋具有至少約155微米(0-32Hz)，通常約160至250微米的寬度。細(xì)皺紋具有小于約154微米，通常約40至154微米(32-126HZ)的長(zhǎng)度，如例如以經(jīng)由通過(guò)二維傅里葉變換(使用例如Shiseido皺紋分析器3DPro系統(tǒng)，基本上如記載于Takasu等(1996)J.Soc.Cosmet.Chem.Japan29394-405；及日本公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.07-113623，1995年5月2日公布的)將三維形狀數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成頻域數(shù)據(jù)獲得的功率譜計(jì)算的。篩選方法RhoE途徑(包括RhoE和ROCKI)記載于Ongusaha等(2006)Curr.Biol.162466-72和Boswell等(2007)J.Biol.Chem.282:4850_58，通過(guò)提及而將兩者收入本文。已經(jīng)從多個(gè)物種克隆出所述途徑的成分，并且它們的蛋白質(zhì)和基因序列對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是容易獲得的。RhoE序列可獲自例如人、黑猩猩、獼猴、小鼠、大鼠、牛、和馬。R0CK-1序列可獲自例如人、黑猩猩、獼猴、小鼠、大鼠、犬、家兔、牛、和馬。以SEQIDNO1提供了例示性人RhoE多肽。MDPNQNVKCKIVVVGDSQCGKTALLHVFAKDCFPENYVPTVFENYTASFEIDTQRIELSLWDTSGSPYYDNVRPLSYPDSDAVLICFDISRPETLDSVLKKWKGEIQEFCPNTKMLLVGCKSDLRTDVSTLVELSNHRQTPVSYDQGANMAKQIGAATYIECSALQSENSVRDIFHVATLACVNKTNKNVKRNKSQRATKRISHMPSRPELSAVATDLRKDKAKSCTVM(SEQIDNO1)以SEQIDNO2提供了例示性人R0CK1多肽。MSTCDSFETRFEKMDNLLRDPKSEVNSDCLLDGLDALVYDLDFPALRKNKNIDNFLSRYKDTINKIRDLRMKAEDYEVVKVIGRGAFGEVQLVRHKSTRKVYAMKLLSKFEMIKRSDSAFFWEERDIMAFANSPWVVQLFYAFQDDRYLYMVMEYMPG⑶LVNLMSNYDVPEKWARFYTAEWLALDAIHSMGFIHRDVKPD匪LLDKSGHLKLADFGTCMKMNKEGMVRCDTAVGTPDYISPEVLKSQG⑶GYYGRECDWWSVGVFLYEMLVGDTPFYADSLVGTYSKIMNHKNSLTFPDDNDISKEAKNLICAFLTDREVRLGRNGVEEIKRHLFFKNDQWAWETLRDTVAPVVPDLSSDIDTSNFDDLEEDKGEEETFPIPKAFVGNQLPFVGFTYYSNRRYLSSANPNDNRTSSNADKSLQESLQKTIYKLEEQLHNEMQLKDEMEQKCRTSNIKLDKIMKELDEEGNQRRNLESTVSQIEKEKMLLQHRINEYQRKAEQENEKRRNVENEVSTLKDQLEDLKKVSQNSQLANEKLSQLQKQLEEANDLLRTESDTAVRLRKSHTEMSKSISQLESLNRELQERNRILENSKSQTDKDYYQLQAILEAERRDRGHDSEMIGDLQARITSLQEEVKHLKHNLEKVEGERKEAQDMLNHSEKEKNNLEIDLNYKLKSLQQRLEQEVNEHKVTKARLTDKHQSIEEAKSMAMCEMEKKLKEEREAREKAENRVVQIEKQCSMLDVDLKQSQQKLEHLTGNKERMEDEVKNLTLQLEQESNKRLLLQNELKTQAFEADNLKGLEKQMKQEINTLLEAKRLLEFELAQLTKQYRGNEGQMRELQDQLEAEQYFSTLYKTQVKELKEEIEEKNRENLKKIQELQNEKETLATQLDLAETKAESEQLARGLLEEQYFELTQESKKAASRNRQEITDKDHTVSRLEEANSMLTKDIEILRRENEELTEKMKKAEEEYKLEKEEEISNLKAAFEKNINTERTLKTQAVNKLAEIMNRKDFKIDRKKANTQDLRKKEKENRKLQLELNQEREKFNQMVVKHQKELNDMQAQLVEECAHRNELQMQLASKESDIEQLRAKLLDLSDSTSVASFPSADETDGNLPESRIEGWLSVPNRGNIKRYGWKKQYVVVSSKKILFYNDEQDKEQSNPSMVLDIDKLFHVRPVTQ⑶VYRAETEEIPKIFQILYANEGECRKDVEMEPVQQAEKTNFQNHKGHEFIPTLYHFPANCDACAKPLWHVFKPPPALECRRCHVKCHRDHLDKKEDLICPCKVSYDVTSARDMLLLACSQDEQKKWVTHLVKKIPKNPPSGFVRASPRTLSTRSTANQSFRKVVKNTSGKTS(SEQIDNO2)這些或其它RhoE和R0CK-1序列的天然存在的和合成的變體可以在本文中所描述的方法中使用。存在多種用于評(píng)估藥劑是否改變特定mRNA或蛋白質(zhì)的表達(dá)、水平、或活性的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)例如報(bào)告物(例如螢光素酶、LacZ、或GFP)轉(zhuǎn)錄測(cè)定法來(lái)評(píng)估測(cè)試藥劑調(diào)控(例如提高或降低)(例如永久地或暫時(shí)地)自RhoE途徑啟動(dòng)子(例如RhoE啟動(dòng)子)表達(dá)的能力。例如，可以使細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(其基因組包含與RhoE途徑啟動(dòng)子可操作連接的報(bào)告基因)與測(cè)試藥劑接觸，并且測(cè)試藥劑提高或降低報(bào)告物活性的能力指明所述藥劑調(diào)控RhoE途徑活性的能力。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中評(píng)估測(cè)試藥劑調(diào)控RhoE表達(dá)、水平、或活性的能力?？梢詫?duì)細(xì)胞、細(xì)胞溶胞物、或受試者，通常為非人實(shí)驗(yàn)哺乳動(dòng)物，例如嚙齒類(lèi)(例如大鼠、小鼠、家兔)，或其外植體(例如皮膚)評(píng)估測(cè)試藥劑對(duì)RhoE表達(dá)、水平、或活性的影響。多種評(píng)估m(xù)RNA表達(dá)的方法是本領(lǐng)域中公知的，例如Northern分析、核糖核酸酶保護(hù)測(cè)定法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)或RNA原位雜交(參見(jiàn)例如Sambrook等MolecularCloning:ALaboratoryManual(第3版2001))。可以通過(guò)例如Western分析、免疫測(cè)定法、或原位雜交來(lái)監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)水平。小分子篩選的一般方法參見(jiàn)例如Schrieber(2003)Chem.&Eng.News81:51_61；及Flaumenhaft和Sim(2003)Chem.Biol.10:481_6。本文中所描述的核酸可以包含在載體內(nèi)，例如作為包含核酸且表達(dá)核酸的病毒。例示性病毒載體包括腺病毒(綜述于Altaras等，2005，Adv.Biochem.Eng.Biotechnol.，99193-260)、腺伴隨病毒(綜述于Park等，2008，F(xiàn)ront.Biosci.，13:2653_59；還可參見(jiàn)Williams,2007，Mol.Ther.，15:2053_54)、細(xì)小病毒、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒(綜述于Tai等，2008，F(xiàn)ront.Biosci.，133083-95)、和單純皰疹病毒。投遞核酸的方法綜述于Patil等，2005，AAPSJ.，7:E61_77，通過(guò)提及而將其完整收入本文。細(xì)要在本文中所描述的篩選方法中測(cè)試的藥劑包括有機(jī)物來(lái)源的粗制或純化的提11取物，例如動(dòng)物或植物提取物，以及部分或完全純化的或合成的藥劑，例如小分子、多肽、脂質(zhì)和/或核酸、和這些的文庫(kù)?？梢栽诒疚闹兴枋龅钠つw損傷相關(guān)方法和組合物中測(cè)試和/或使用鑒定為RhoE途徑活性激活劑的藥劑。本文中鑒定出數(shù)種激活RhoE途徑活性(例如誘導(dǎo)RhoE表達(dá))的藥劑，并將其呈現(xiàn)在表1中?？梢栽谥委熇缙つw損傷和皺紋中測(cè)試和/或使用這些和結(jié)構(gòu)或功能類(lèi)似的藥劑。MM可以經(jīng)由胃腸外路徑(包括表面地、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、鼻內(nèi)、和靜脈內(nèi))施用用于防止或減少皺紋或其它皮膚狀況，或用于治療本文中所描述的其它病癥的組合物。通常使用表面施用?？梢允褂媒M合物的重復(fù)施用，例如重復(fù)表面施用?？梢酝瑫r(shí)使用超過(guò)一種施用路徑，例如與口服聯(lián)合的表面施用。胃腸外劑量形式的例子包括活性劑在等張鹽水、5%葡萄糖、或其它公知的藥學(xué)可接受賦形劑中的水溶液。增溶劑諸如環(huán)糊精或其它增溶劑可以作為藥學(xué)賦形劑用于投遞皺紋減少組合物。還可以將本文中所描述的組合物配制成供利用常規(guī)方法的其它施用路徑用的劑量形式。可以將藥物組合物以例如供口服的劑量形式在膠囊、片劑(各包含定時(shí)釋放和持續(xù)釋放配制劑)、或凝膠密封中配制。膠囊可以包含任何標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)可接受材料諸如明膠或纖維素衍生物?？梢砸勒粘Ｒ?guī)方法通過(guò)壓縮藥劑和固體載體的混合物與潤(rùn)滑劑來(lái)配制片劑。固體載體的例子包括淀粉和糖膨潤(rùn)土。藥物組合物也可以以含有例如作為粘合劑的乳糖或甘露醇和常規(guī)的填充劑和壓片劑(tabletingagent)的硬殼片劑或膠囊形式施用。本文中所描述的化合物(例如皺紋減少化合物)的表面施用呈現(xiàn)上文所描述的許多不同路徑中優(yōu)選的施用路徑。對(duì)于局部應(yīng)用，組合物可以包含與皮膚相容的介質(zhì)。此類(lèi)表面藥物組合物可以以許多形式存在，例如以溶液、乳劑、軟膏劑、凝膠、洗劑、洗發(fā)劑、或改編用于向皮膚應(yīng)用的氣霧劑配制劑形式。通常，活性成分(例如表1中所呈現(xiàn)的，例如山奈素)在可用于防止或減少皺紋或治療本文中所描述的病癥的組合物中的重量百分比的范圍為與藥學(xué)可接受載體混合的0.01%至10%(例如0.02%、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1·0%、2·0%、5·0%、或10%)(基于組合物的總重量)或0.05μM至5mM(例如0.1至10μM、0.5至50μM、1至100μM、5至500μM、10μM至lmM、20μM至2mM、50μM至5mM、0.1至2mM、或0.2至ImM)?？梢栽诒疚闹兴枋龅陌櫦y減少組合物中采用極其多種載體材料，諸如酒精、蘆薈凝膠、尿囊素、甘油、維生素A和E油、礦物油、和聚乙二醇。其它添加劑(例如防腐劑、芳香劑、遮光劑、或其它化妝品成分)可以存在于組合物中?？梢詰?yīng)用表面組合物，并立即除去，或者可以將其應(yīng)用，并留在皮膚表面(例如臉)上，持續(xù)延長(zhǎng)的一段時(shí)間，例如過(guò)夜或貫穿整天。UVB輻射主要的UVB輻射來(lái)源是天然的陽(yáng)光。UVB光線的強(qiáng)度隨著白天時(shí)間、年時(shí)間、太陽(yáng)在天空的位置、海拔和距離赤道的距離而變化。雖然光線總是存在，甚至在冬季的月份期間，但是這些光線在夏季的正午幾小時(shí)期間是最強(qiáng)烈的。海拔距離和距離赤道的距離也是考慮的重要因素。海拔越高，UVB光線的強(qiáng)度越大。因此，登山運(yùn)動(dòng)員、滑雪者、和那些居住在高海拔的人有長(zhǎng)期UVB損傷的風(fēng)險(xiǎn)。還有，距離赤道越近，UV輻射越強(qiáng)烈，并且長(zhǎng)期UVB損傷的風(fēng)險(xiǎn)越高。雪地、水面、和沙灘反射陽(yáng)光，放大到達(dá)皮膚的UVB輻射量。甚至在云遮日時(shí)，UVB12水平仍可以高得足以在長(zhǎng)期暴露后引起皮膚損傷，例如皺紋。UV指數(shù)(由環(huán)境保護(hù)局(EnvironmentalProtectionAgency)開(kāi)發(fā))指明太陽(yáng)的UV射線在給定日子的強(qiáng)度。有四個(gè)種類(lèi)-適度(UV指數(shù)小于3)，高(UV指數(shù)3至6)，很高(UV指數(shù)是6至10)，和極端(UV指數(shù)大于10)。適度的UV指數(shù)意味著會(huì)花費(fèi)超過(guò)1小時(shí)來(lái)灼傷皮膚；極端水平意味著會(huì)花費(fèi)小于15分鐘。指數(shù)常常包括在天氣報(bào)告內(nèi)。臨床上，以MED測(cè)量UVB暴露。一個(gè)MED是在敏感皮膚中產(chǎn)生曬斑所需要的UVB量。因?yàn)閁VB暴露的效果是累積的，長(zhǎng)期或慢性UVB誘導(dǎo)的皺紋可以由于長(zhǎng)期暴露于低于在急性暴露后可引起紅斑或水腫或燒傷的水平(例如低于一個(gè)MED)的UVB水平而發(fā)生。例如，如果受試者慢性地暴露于陽(yáng)光，甚至如果受試者僅在具有低或適度UV指數(shù)的數(shù)天期間暴露于陽(yáng)光，那么受試者有長(zhǎng)期UVB誘導(dǎo)的皺紋的風(fēng)險(xiǎn)。皺紋的測(cè)量可以定性(例如通過(guò)目視檢查)或定量(例如通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助測(cè)量皺紋形態(tài)學(xué))評(píng)估化合物對(duì)皺紋形成或外表的影響。優(yōu)選地，定量分析皺紋形態(tài)學(xué)。用于測(cè)量皺紋的定量方法的例子包括但不限于采用激光束的光學(xué)切割技術(shù)，如由Hoshino(1992)Pixel45121(通過(guò)提及而將其收入本文)所提出的；或分析三維皮膚復(fù)制物的方法，例如Shiseido皺紋分析器3DPro系統(tǒng)(Takasu等(1996)J.Soc.Cosmet.Chem.Japan29394-405；日本公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.07-113623，1995年5月2日公布(對(duì)應(yīng)于美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)流水號(hào)08/364,346))ο可以使用SILFLO(FlexicoDevelopmentLtd.,PottersBar,UK)系統(tǒng)或類(lèi)似的系統(tǒng)來(lái)采集皮膚復(fù)制物。用例如Shiseido皺紋分析器3DPro或類(lèi)似的系統(tǒng)來(lái)分析皮膚復(fù)制物表面上的不規(guī)則性，即皺紋以從與皮膚對(duì)應(yīng)的二維平面上的各點(diǎn)的高度提供三維形狀數(shù)據(jù)。依照三維數(shù)據(jù)，計(jì)算每個(gè)皺紋的長(zhǎng)度、寬度、深度、面積、和體積。依照本文中所描述的規(guī)則皺紋和細(xì)皺紋的參數(shù)，如此可以對(duì)不同種類(lèi)的皺紋(包括規(guī)則皺紋和細(xì)皺紋亞類(lèi))個(gè)別識(shí)別和評(píng)分。試劑盒可以在試劑盒中提供提高RhoE途徑活性的藥劑，例如經(jīng)由本文中所描述的方法鑒定的藥劑，例如表1中所呈現(xiàn)的化合物。試劑盒可以包含(a)藥劑，例如包含藥劑的組合物，和(b)信息材料。信息材料可以是描述的、指導(dǎo)的、市場(chǎng)的、或其它材料，其涉及本文中所描述的方法和/或藥劑用于本文中所描述的方法的用途。例如，信息材料涉及皺紋或其防止或減少。在一個(gè)實(shí)施方案中，信息材料可以包含以適合于實(shí)施本文中所描述的方法的方式(例如以合適的劑量、劑量形式、或施用形式(例如本文中所描述的劑量、劑量形式、或施用形式))施用藥劑的指令。優(yōu)選的劑量、劑量形式、或施用形式是表面的，例如在皮膚上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，信息材料可以包括對(duì)合適的受試者(例如人，例如具有皺紋或有風(fēng)險(xiǎn)形成皺紋的人)施用藥劑的指令。例如，所述材料可以包括對(duì)臉、頸或手施用藥劑的指令。試劑盒的信息材料在其形式上不受限制。在許多情況中，信息材料(例如指令)以印刷物質(zhì)(例如印刷文本、繪圖、和/或照片，例如標(biāo)簽或印刷頁(yè))提供。然而，信息材料也可以以其它形式諸如盲文、計(jì)算機(jī)可讀材料、顯像記錄、或聲頻錄制提供。在另一個(gè)實(shí)施方案中，試劑盒的信息材料是聯(lián)系信息，例如實(shí)際地址、電子郵件地址、網(wǎng)址、或電話號(hào)碼，其中試劑盒的用戶可以獲得關(guān)于藥劑和/或其在本文中所描述的方法中的用途的實(shí)質(zhì)信息。當(dāng)然，信息材料也可以以任何形式組合提供。在所述藥劑外，試劑盒的組合物可以包含其它成分，諸如溶劑或緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑、芳香劑或其它化妝品成分，和/或用于治療本文所描述的狀況或病癥的第二藥劑，例如遮光劑。或者，其它成分可以包含在試劑盒中，但是在不同于所述藥劑的組合物或容器中。在此類(lèi)實(shí)施方案中，試劑盒可以包括關(guān)于混合所述藥劑與其它成分的指令，或關(guān)于與其它成分一起使用所述藥劑的指令。所述藥劑可以以任何形式(例如液體、干燥的或凍干的形式)提供。優(yōu)選的是，所述藥劑是基本上純的和/或無(wú)菌的。在以液體溶液提供所述藥劑時(shí)，液體溶液通常是水溶液，例如無(wú)菌水溶液。在以干燥形式提供所述藥劑時(shí)，一般通過(guò)添加合適的溶劑來(lái)重建。任選地，可以在試劑盒中提供溶劑(例如無(wú)菌水或緩沖液)。試劑盒可以包含用于含有所述藥劑的組合物的一個(gè)或多個(gè)容器。在一些實(shí)施方案中，試劑盒含有用于組合物和信息材料的分開(kāi)的容器、分隔物、或隔室。例如，組合物可以包含在瓶、小瓶、或注射器中，并且信息材料可以包含在塑料套管或袋中。在其它實(shí)施方案中，分開(kāi)的試劑盒元件包含在單一的、未分開(kāi)的容器內(nèi)。例如，組合物包含在瓶、小瓶、或注射器中，瓶、小瓶、或注射器已經(jīng)附著有標(biāo)簽形式的信息材料。在一些實(shí)施方案中，試劑盒包含多種(例如一包)單獨(dú)容器，各含有一個(gè)或多個(gè)單位劑量形式(例如本文中所描述的劑量形式)的藥劑。例如，試劑盒包括多個(gè)注射器、安瓿、箔袋(foilpacket)、或薄膜包裝(blisterpack)，各含有單一單位劑量的藥劑。試劑盒的容器可以是氣密的和/或防水的。任選地，試劑盒包括適合于施用組合物的裝置，例如注射器、吸入器、移液管、鑷子、量匙、滴管(例如眼滴管)、藥簽(例如棉花藥簽或木制藥簽)、或任何此類(lèi)投遞裝置。以下具體的實(shí)施例應(yīng)當(dāng)解釋為僅僅是例示性的，并且無(wú)論如何不以任何方式限制本公開(kāi)內(nèi)容的剩余部分。實(shí)施例實(shí)施例1:RhoE誘導(dǎo)性化合物的鑒定為了分離能在角質(zhì)形成細(xì)胞中激活RhoE途徑并保護(hù)免于UVB暴露的化合物，開(kāi)發(fā)有力且靈敏的化學(xué)遺傳學(xué)方法來(lái)鑒定誘導(dǎo)RhoE表達(dá)的小分子。圖IB中呈現(xiàn)了篩選方法的概述。簡(jiǎn)言之，創(chuàng)建如下報(bào)告構(gòu)建體，其包含與luc2螢光素酶報(bào)告基因可操作連接的RhoE啟動(dòng)子(圖1A)。生成表達(dá)報(bào)告構(gòu)建體的穩(wěn)定細(xì)胞系，并以每孔約10，000個(gè)細(xì)胞將細(xì)胞在384孔平板中分配。以每種化合物兩個(gè)重復(fù)將文庫(kù)測(cè)試化合物添加至分配細(xì)胞，并將細(xì)胞與化合物一起溫育24小時(shí)。使用讀板儀在24小時(shí)時(shí)測(cè)量發(fā)光。使用Spotfire來(lái)分析數(shù)據(jù)。表1中呈現(xiàn)了誘導(dǎo)RhoE表達(dá)的化合物，其中復(fù)合Z值(兩次重復(fù)的)大于2。表1.鑒定的RhoE表達(dá)誘導(dǎo)物復(fù)合Z值化合物6.2959山奈素(Kaempferol)5.8729序菜素(Apigenin)5.4731白楊素(Chrysin)5.41025，7，4，-三甲氧基黃I5.3515序菜素(Apigenin)145.1946銀膠菊內(nèi)酯(Parthenolide)5.1371銀膠菊內(nèi)酯4.8646大波其J菊苷(Cosmosiin)4.6992序菜素三乙酸酉旨(apigenintriacetate)4.6362甘草素二甲基醚(liquiritigenindimethylether)4.602芬苯達(dá)唑(Fenbendazole)4.5672香葉木素(Diosmetin)4.5119芬苯達(dá)唑；(芬苯達(dá)唑)4.5081萘丁美酮(Nabumetone)3.99583胃Ρ坐(Lansoprazole)3.977刺槐素二乙酸酉旨(acacetindiacetate)3.9036白楊素3.87013胃iiP坐(Lansoprazole)3.8551萘丁美酮3.8448花含毛連菜內(nèi)酯(Hieracin)3.83832-甲氧基咕噸酮(2-methoxyxanthone)3.80364，-甲氧基查耳酮(4'-methoxychalcone)3.79咕噸酮(Xanthone)3.722鹽酸非那口比旋(Phenazopyridinehydrochloride)3.6958甲苯達(dá)唑(甲苯達(dá)唑)3.6944甲苯達(dá)唑(Mebendazole)3.6564雞豆黃素二乙酸酉旨(biochaninadiacetate)3.651二苯酰甲烷(Dibenzoylmethane)3.604黃卡瓦古月椒素(flavokawain)b3.5924噻苯達(dá)唑(Tiabendazole)3.4862替洛隆(Tilorone)3.477SI^S-(chrysindimethylether)3.357瑞特寧(Rhetsinine)3.29775，7-二甲氧基異黃酮(dimethoxyisoflavone)3.2901(biochanina)3.2375刺槐素(Acacetin)3.2205舒洛芬甲基酉旨(suprofenmethylester)3.1488紅霉素硬脂酸脂(erythromycinstearate)3.1382二苯脲復(fù)合Z值化合物3.07217，4，-二甲氧基異黃酮(7，4'-dimethoxyisoflavone)3.0534阿苯達(dá)唑(Albendazole)3.02575，2，-二甲氧基黃酮(5，2'-dimethoxyflavone)2.,9591鹽酸非那口比口定(phenazopyridinehydrochloride)152.8734η-(9-芴甲氧羰基)-1-亮氨酸(n-(9-fluorenylmethoxycarbonyl)-1-leucine)2.8556才卜胃月安(Propachlor)2.84674，-羥基查耳酮(4'-hydroxychalcone)2.735苯并蒽酮(Benzanthrone)2.73268，2，_二甲氧基黃酮(8，2'-dimethoxyflavone)2.7194鳶尾苷(Iridin)2.6831花椒內(nèi)酯(Xanthyletin)2.6414芒柄花酚(Ononetin)2.6043尼泊金丁酯(Butylparaben)2.5938染料木素(Genistein)2.5656氯普芬(Chlorpropham)2.473土木香內(nèi)酯(Helenine)2.4662澤蘭素(Euparin)2.4579蘇木酮(sappanone)a7~甲基醚2.40623-甲基膽蒽(3-methylcholanthrene)2.3862黃檀醌(dalbergione)，4_甲氧基-4，-羥基-2.3814Derrustone2.3759節(jié)基胼鹽酸鹽(benzylhydrazinehydrochloride)2.3583鹽酸月井秦(hydralazinehydrochloride)2.3429馬烯雌酮(Equilin)2.324脫水二鹽酸喹吖因(Quinacrinedihydrochloridedehydrate)2.3231柚皮素(Naringenin)2.3104依布硒(Ebselen)2.3069四羥黃酮(Luteolin)2.2603維A酸(Tretinoin)2.2516Methiazole2.23Cuneatin甲基醚2.21582-羥基咕噸酮(2-hydroxyxanthone)2.2116高麗槐素(Maackiain)2.213，，4，-二甲氧基黃酮(3'，4'-dimethoxyflavone)i[合Z值化合物2.2003奧苯達(dá)唑(Oxibendazole)2-乙氧羰基-2-羥基-5，7-二甲氧基異黃烷酮2.164(2-ethoxycarbonyl-2-hydroxy-5,7-dimethoxyisoflavanone)2.1629莫諾苯宗(Monobenzone)2.1577鼠李素(Rhamnetin)在每種化合物的兩次重復(fù)之間相當(dāng)好地再現(xiàn)結(jié)果(圖2)。表2中呈現(xiàn)了具有最高復(fù)合Z值的六種化合物的其它數(shù)據(jù)。表2.對(duì)所鑒定的RhoE誘導(dǎo)物的分析復(fù)合Z信噪比再現(xiàn)性化合物6.29594.99770.9781山奈素5.87294.61910.9872芹菜素5.47314.24971白楊素5.41024.20710.99855,7,4'-三甲氧基黃酮5.35154.18060.9939芹菜素5.19464.05260.9952銀膠菊內(nèi)酯Western印跡分析顯示，山奈素能夠以P53不依賴性方式激活RhoE表達(dá)，表明此化合物作為皮膚保護(hù)劑可以是有用的(圖3)。t施例2:RhoEi秀導(dǎo)t牛化合物減Φ由UVB引fe的皮膚損傷為了測(cè)定RhoE誘導(dǎo)性化合物對(duì)UVB損傷介導(dǎo)的細(xì)胞死亡是否具有保護(hù)效果，將經(jīng)山奈素處理(1禾Π2.5μΜ)的HaCaT人角質(zhì)形成細(xì)胞暴露于UVB(30mJ/cm2)，并在24小時(shí)后檢查細(xì)胞死亡(圖4)。山奈素處理導(dǎo)致在HaCaT細(xì)胞中抑制UVB誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，提示山奈素介導(dǎo)的RhoE活化保護(hù)細(xì)胞免于UVB損傷。接著，調(diào)查山奈素對(duì)UVB損傷的小鼠皮膚是否具有任何保護(hù)效果和/或DNA修復(fù)潛力。修剪8周齡C57BL/6小鼠的背部絨毛，并通過(guò)應(yīng)用脫毛器來(lái)除去細(xì)絨毛，2天后進(jìn)行UVB暴露。以120mJ/cm2對(duì)受約束的(restricted)小鼠進(jìn)行UVB照射，并用50μ1DMSO中的0.5mM山奈素或DMSO對(duì)照處理。在UVB暴露后在多個(gè)時(shí)間時(shí)自實(shí)施安樂(lè)死的小鼠取出皮膚，立即在4%中性緩沖低聚甲醛中固定，包埋在OCT中，并以8μm厚度切片。通過(guò)末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的切口端標(biāo)記(TUNEL)測(cè)定法(RocheAppliedScience，德國(guó))依照制造商的指令在暴露于UVB后16小時(shí)收獲的皮膚切片中檢測(cè)凋亡細(xì)胞。與對(duì)照/DMSO處理的皮膚相比，山奈素處理抑制表皮中由UVB損傷誘導(dǎo)的凋亡(圖5)。此外，用抗CPD(環(huán)丁烷嘧啶二聚物)單克隆抗體，即克隆TDM-2(MBLInternational，ffoburn,MA)(使用AlexaFluor488(Invitrogen,Oregon,USA)來(lái)檢測(cè))檢測(cè)環(huán)丁烷嘧啶二聚物(CPD)(即源于UV損傷的一種主要類(lèi)型的DNA損傷)的染色顯示，山奈素處理抑制表皮中由UVB暴露產(chǎn)生的嘧啶二聚物形成(圖6A-6C)。還通過(guò)用抗磷酸-H2AX(Serl39)抗體(UpstateCellSignalingSolutions,NewYork)進(jìn)行的染色來(lái)測(cè)量活化形式的H2AX(Serl39)(已知其響應(yīng)UVB損傷而活化，并在DNA損傷位點(diǎn)處結(jié)合)的水平。響應(yīng)UVB損傷的活化形式的H2AX(Serl39)水平在山奈素暴露的皮膚中顯著降低(圖7A-7C)。此外，在經(jīng)山奈素處理的皮膚中的表皮上基底區(qū)域中RhoE表達(dá)也得到增強(qiáng)(圖8)。本實(shí)施例指明，RhoE活化能防止由UVB介導(dǎo)的DNA損傷，而且增強(qiáng)DNA修復(fù)以維持健康皮膚。實(shí)施例3=RhoE牽涉Notch誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞分化測(cè)定RhoE對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞分化的影響。在Ca2+誘導(dǎo)的分化期間，RhoE在角質(zhì)形成細(xì)胞中下調(diào)或上調(diào)，并且觀察到對(duì)分化標(biāo)志物胞質(zhì)活化形式的Notchl(NIC)和內(nèi)披蛋白的影響。通過(guò)表達(dá)shRNA構(gòu)建體(pbabe-shRhoE)來(lái)下調(diào)RhoE導(dǎo)致與pbabe對(duì)照載體相比NIC、內(nèi)披蛋白、和RhoE表達(dá)降低(圖10A)。相反地，與表達(dá)GFP的對(duì)照腺病毒(Ad-GFP)相比RhoE自腺病毒載體(Ad-RhoE)的過(guò)表達(dá)提高NIC、內(nèi)披蛋白、和RhoE表達(dá)(圖10B)。這些結(jié)果表明，RhoE表達(dá)在Ca2+-誘導(dǎo)的分化后在小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞中升高。接著，觀察到表達(dá)由角蛋白14啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的RhoE基因的轉(zhuǎn)基因小鼠的表皮的分化樣式。與Notchl的情況中看到的結(jié)果類(lèi)似，RhoE的過(guò)表達(dá)能夠顯著改變分化標(biāo)志物角蛋白I(Kl)的表達(dá)樣式。用Kl特異性抗體進(jìn)行的免疫熒光染色顯示此蛋白質(zhì)在表皮基底層和毛囊中的過(guò)表達(dá)，而野生型小鼠僅在上基底層中及其濾泡間表皮中之上保持Kl表達(dá)(圖11A-B)。這些發(fā)現(xiàn)指明，RhoE在調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細(xì)胞體內(nèi)分化中起關(guān)鍵作用，而且提示在角質(zhì)形成細(xì)胞分化中RhoE和Notch之間有交叉調(diào)節(jié)。本實(shí)施例提示，RhoE是Notchl的一種轉(zhuǎn)錄下游靶物，而且RhoE活化在Notch誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞分化中起作用。實(shí)施例4:UVB在人皮膚中在體內(nèi)誘導(dǎo)RhoE表汰UV照射后獲得健康男性志愿者的背部皮膚樣品，并通過(guò)福爾馬林或丙酮_苯甲酸甲酯-二甲苯(AMeX)固定來(lái)處理以檢測(cè)RhoE表達(dá)。在福爾馬林(圖12)或AMeX(圖13)固定的組織中，RhoE的表達(dá)在表皮的上基底層中增強(qiáng)，但是在基底層中略微降低。這提示，RhoE表達(dá)在人角質(zhì)形成細(xì)胞中由UVDNA損傷誘導(dǎo)。對(duì)于福爾馬林固定，使用FL-E燈(290_320nm)(Toshiba,日本)作為UV源以3個(gè)MED(最小紅斑劑量)(提前對(duì)每名志愿者測(cè)定MED)對(duì)5名年齡為30-49歲的健康男性志愿者的背部皮膚進(jìn)行UV照射。用10%福爾馬林固定活組織檢查的皮膚樣品，并包埋在石蠟中。通過(guò)于125°C高壓滅菌15分鐘用ImMEDTA和IOmMTris緩沖液，pH9實(shí)施抗原暴露。用去離子H2O將樣品清洗三次達(dá)2分鐘。清洗后，如下對(duì)樣品免疫染色，即在去離子H2O中的0.01%過(guò)氧化氫中溫育10分鐘以淬滅內(nèi)源過(guò)氧化物酶活性。用PBS將樣品清洗兩次達(dá)5分鐘，然后與PBS中10%正常封閉血清(VECTASTAIN通用EliteABC試劑盒)一起溫育30分鐘。將樣品與在具有10%正常封閉血清的PBS中以1200稀釋的一抗(抗RhoE/Rnd3，克隆4，Upstate)一起溫育。用PBS進(jìn)行三次5分鐘清洗后，將樣品與稀釋的生物素化二抗溶液(VECTASTAIN通用EliteABC試劑盒)一起溫育，用PBS再清洗三次達(dá)5分鐘，并與預(yù)混合的VECTASTAINEliteABC試劑一起溫育30分鐘。用PBS進(jìn)行三次最終的5分鐘清洗后，將細(xì)胞與過(guò)氧化物酶底物(Vector過(guò)氧化物酶底物試劑盒DABSK-4100)一起溫育，并用自來(lái)水漂洗。圖12中顯示了代表性樣品。對(duì)于AMeX固定，使用FL-E燈(290_320nm)(Toshiba,日本)作為UV源以2個(gè)MED(提前對(duì)每名志愿者測(cè)定MED)對(duì)4名年齡為30-49歲的健康男性志愿者的背部皮膚進(jìn)行UV照射。用冷丙酮固定活組織檢查的皮膚樣品，并包埋在石蠟中，其依照AMeX方法(Sato等(1986)Am.J.Pathol.125:431_435)來(lái)進(jìn)行。用二甲苯對(duì)3微米切片脫石蠟化，并將其再水合。用3%過(guò)氧化氫將樣品預(yù)處理15分鐘以封閉內(nèi)源過(guò)氧化物酶活性。用10%正常山羊血清(Histofine，Tokyo,日本)封閉非特異性結(jié)合。然后將樣品與在具有牛血清清蛋白的PBS中以1100稀釋的一抗(抗RhoE/Rnd3，克隆4，Upstate)—起溫育。用PBS18進(jìn)行三次5分鐘清洗后，將樣品與EnVison+系統(tǒng)標(biāo)記的聚合物-HRP抗小鼠(DAKO)抗體一起溫育，并用PBS再清洗三次。將樣品與液體DAB+底物-色原系統(tǒng)(DAKO)—起溫育，并用自來(lái)水漂洗。圖13中顯示了代表性樣品。t施徹丨5:UV在體夕卜i秀導(dǎo)RhoE在分化的角質(zhì)形成細(xì)胞沖的表汰培養(yǎng)正常的人角質(zhì)形成細(xì)胞，直至在角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(KGM)中達(dá)到匯合。通過(guò)添加1.5mMCa2+來(lái)誘導(dǎo)分化，并在第二天時(shí)，使用FL-E燈(290_320nm)(Toshiba,日本)作為UV源將細(xì)胞暴露于UVB。UV暴露后24小時(shí)，獲得細(xì)胞RNA，并使用LightCycler來(lái)實(shí)施定量RT-PCR以測(cè)定RhoE水平。UV照射進(jìn)一步促進(jìn)RhoE在分化人角質(zhì)形成細(xì)胞中的基因表達(dá)(圖14)。其它實(shí)施方案已經(jīng)描述了本發(fā)明的許多實(shí)施方案。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，可以在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下進(jìn)行各種修飾。因而，其它實(shí)施方案在所附權(quán)利要求書(shū)的范圍內(nèi)。19權(quán)利要求一種預(yù)防、降低、或治療受試者皮膚損傷的方法，包括對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療皮膚損傷。2.一種在受試者中維持皮膚穩(wěn)態(tài)的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此維持皮膚穩(wěn)態(tài)來(lái)進(jìn)行。3.一種在受試者中使表皮功能正常化的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此使表皮功能正?；瘉?lái)進(jìn)行。4.一種預(yù)防、降低、或治療受試者皮膚老化的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療皮膚老化來(lái)進(jìn)行。5.一種改善受試者皮膚的屏障功能的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此改善皮膚的屏障功能來(lái)進(jìn)行。6.一種預(yù)防、降低、或治療干性皮膚的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療干性皮膚來(lái)進(jìn)行。7.一種預(yù)防、降低、或治療皺紋形成的方法，其通過(guò)對(duì)所述受試者施用提高RhoE途徑活性的藥劑，由此預(yù)防、降低、或治療皺紋形成來(lái)進(jìn)行。8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥劑提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低Rho激酶I(ROCKI)活性，或降低ROCKI表達(dá)。9.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥劑是局部施用的。10.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的方法，其中所述受試者已經(jīng)或者會(huì)被暴露于UVB輻射。11.權(quán)利要求1、4、6、或7中任一項(xiàng)的方法，其中所述皮膚損傷、皮膚老化、干性皮膚、或皺紋形成是由UVB輻射引起的。12.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥劑選自表1。13.權(quán)利要求12的方法，其中所述藥劑是山奈素。14.權(quán)利要求13的方法，其中所述山奈素以50μΜ-5πιΜ的濃度存在。15.一種化妝品組合物，其包含提高RhoE途徑活性的藥劑。16.權(quán)利要求15的化妝品組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含化妝品成分。17.權(quán)利要求16的化妝品組合物，其中所述化妝品成分是芳香劑。18.權(quán)利要求16的化妝品組合物，其中所述化妝品成分是遮光劑。19.權(quán)利要求15的化妝品組合物，其中所述藥劑選自表1。20.權(quán)利要求19的方法，其中所述藥劑是山奈素。21.權(quán)利要求20的方法，其中所述山奈素以50μM和5mM之間的濃度存在于所述組合物中。22.權(quán)利要求15的化妝品組合物，其中所述組合物配制用于局部應(yīng)用。23.—種篩選用于治療皮膚損傷的藥劑的方法，該方法包括提供測(cè)試藥劑；確定所述測(cè)試藥劑是否提高RhoE途徑活性；和將所述測(cè)試藥劑提高RhoE途徑活性的能力與所述測(cè)試藥劑減少皮膚損傷的能力相聯(lián)系，由此篩選用于治療皮膚損傷的藥劑。24.權(quán)利要求23的方法，其進(jìn)一步包括評(píng)估所述藥劑對(duì)受試者中的皮膚損傷的影響。25.權(quán)利要求23的方法，其進(jìn)一步包括選擇提高RhoE途徑活性的測(cè)試藥劑。26.權(quán)利要求23的方法，其中所述確定步驟包括確定所述測(cè)試藥劑是否提高RhoE活性，誘導(dǎo)RhoE表達(dá)，降低ROCKI活性，或降低ROCKI表達(dá)。27.權(quán)利要求23的方法，其中所述測(cè)試藥劑選自下組動(dòng)物提取物、植物提取物、真菌提取物、小分子、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、和核酸。28.權(quán)利要求23的方法，其中所述確定步驟包括提供包含外源核酸的細(xì)胞、組織、或非人受試者，所述外源核酸包含與編碼報(bào)告多肽的核苷酸序列可操作連接的RhoE途徑組分的調(diào)節(jié)區(qū)；并評(píng)估所述測(cè)試藥劑在所述細(xì)胞、組織、或非人受試者中提高所述報(bào)告多肽活性的能力，其中如果相對(duì)于參照對(duì)照，所述測(cè)試藥劑提高所述報(bào)告多肽的活性，那么確定其為提高RhoE途徑活性。29.權(quán)利要求26的方法，其中所述確定步驟包括提供包含外源核酸的細(xì)胞、組織、或非人受試者，所述外源核酸包含與編碼報(bào)告多肽的核苷酸序列可操作連接的RhoE調(diào)節(jié)區(qū)；并評(píng)估所述測(cè)試藥劑在所述細(xì)胞、組織、或非人受試者中提高所述報(bào)告多肽活性的能力，其中如果相對(duì)于參照對(duì)照，所述測(cè)試藥劑提高所述報(bào)告多肽的活性，那么確定其為提高或誘導(dǎo)RhoE。30.權(quán)利要求24的方法，其中所述評(píng)估步驟包括向所述受試者的皮膚局部施用所述藥劑。31.權(quán)利要求24的方法，其中所述受試者是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。32.權(quán)利要求24的方法，其中所述受試者是人。33.權(quán)利要求24的方法，其中評(píng)估所述藥劑對(duì)UVB誘導(dǎo)的皺紋的影響。全文摘要RhoEGTP酶途徑已經(jīng)被鑒定為供用于防止和/或減少短期和長(zhǎng)期UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷(例如防止和/或減少UVB誘導(dǎo)的皺紋)的篩選和治療方法用的靶物。如此本發(fā)明的特征在于用于防止或減少UVB誘導(dǎo)的皮膚損傷的篩選和治療方法，及相關(guān)組合物，例如化妝品組合物。文檔編號(hào)A61K6/00GK101918037SQ200880124846公開(kāi)日2010年12月15日申請(qǐng)日期2008年11月17日優(yōu)先權(quán)日2007年11月15日發(fā)明者仲西城太郎,安娜·I·曼迪諾瓦,巖城春日,拉克施米·拉杰,勝田雄治,薩姆·W·李申請(qǐng)人:通用醫(yī)療公司;株式會(huì)社資生堂