用于治療癌癥的化合物和方法

專利名稱：用于治療癌癥的化合物和方法
用于治療癌癥的化合物和方法相關申請的交叉引用本申請要求2007年12月12日提交的美國臨時申請No. 61/007，371的優先權，該 文獻的說明書全文被并入本文。
背景技術：
S-二甲基胂基谷胱甘肽(SGLU-1)是目前被制備用于治療癌癥的有機砷化物。迄 今為止，用于合成SGLU-1的方法是兩步法，其中第一步涉及用次磷酸還原二甲胂酸。使人 遺憾地是，使用次磷酸產生作為副產物的膦氣體，大量的膦氣體可帶來危險。該合成法的 第二步要求使用吡啶作為堿，吡啶很難從最終產物中被完全地除去。另外，吡啶的高沸點 以及與藥物的親合力增加了干燥SGLU-1所需的時間。需要提供安全和有效率的用于合成 SGLU-1的大規模生產方法。另外，需要合成具有更高純度的SGLU-1的方法。發明概述本發明一方面涉及用于合成式(I)的化合物的方法， 其中X 是 S 或 Se，優選 S;W是0，S或(R)(R)，其中R在每種情況下獨立地是H或Ci_2烷基，優選0或(R) (R)；n是0或1，優選1;R1和R2獨立地是C^烷基，優選R1和R2獨立地選自甲基，乙基，丙基和異丙基；R3 是-H 或 CQ_6 烷基-C00R6 ；R3’是H，氨基，氰基，商素，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，羧基，烷基，烯 基或炔基，優選H;R4 是-0H，-H，-CH3，-0C (0) 芳烷基，-0C (0) 烷基，-0C (0)芳基或谷氨酰胺；R5是-0H，氰基，烷氧基，氨基，0-芳烷基，-0C (0) 芳烷基，-0C (0) 烷 基，-0C(0)芳基或甘氨酸取代基；和R6是H或烷基，優選H，包括使具有式(II)結構的化合物(R1) (R2)AsC1(II)與具有式(III)結構的化合物 在水性或醇性溶劑中在沒有吡啶的存在下反應，以提供式(I)的化合物。本發明的另一個方面涉及用于純化式(I)的化合物的方法，例如，在進行上述的 方法之后，包括(a)將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇性和/或極性非 質子溶劑，優選將二烷基酮諸如丙酮加入到反應混合物中，例如，在混合的同時加入；和(b)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，所述純化方法進一步包括(a)制備式(I)的化合物在水中的溶液；(b)過濾所述溶液；(c)減少水的量(例如，在減壓條件下和/或通過共沸蒸餾)；(d)加入降低所述化合物的溶解度的與水可混溶的極性非質子溶劑(例如，丙酮， 甲基異丙基酮，甲基乙基酮或四氫呋喃)，優選加入二烷基酮諸如丙酮，以形成漿料；和(e)過濾生成的漿料。本發明的一個方面是測定或監控SGLU-I的純度的方法。更特別地，這樣一種試 驗用于測定或監控由制備SGLU-I而產生的有機砷化物雜質的存在。所述方法可包括但不 限于質譜法，高壓液相色譜法(HPLC)和核磁共振(NMR)，以及這些技術的組合，諸如液相色 譜_質譜(LC-MS)。本發明的一個方面涉及用于測定或監控在SGLU-I的樣品中的式VIII化合物或其 鹽的存在和/或量的方法。 本發明的一個方面涉及制備SGLU-I的藥物制劑的方法，包括測定存在于SGLU-I 的樣品中的式VIII化合物或其鹽的量，并且如果式VIII化合物或其鹽的存在量小于約5%(w/w)，則加入藥學可接受的稀釋劑、載體或賦形劑。發明的詳細說明本發明一方面涉及合成式(I)的化合物的方法， 其中X 是 S 或 Se，優選 S;W是0，S或(R) (R)，其中R在每種情況下獨立地是H或烷基，優選0或(R) (R)；n是0或1，優選1;R1和R2獨立地是C^烷基，優選R1和R2獨立地選自甲基，乙基，丙基和異丙基；R3 是-H 或 C。_6 烷基-C00R6 ；R3’是H，氨基，氰基，鹵素，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，羧基，烷基，烯 基或炔基，優選H;R4 是-0H，-H，-CH3，_0C (0) 芳烷基，-0C (0) 烷基，-0C (0)芳基或谷氨酰胺；R5是-0H,氰基，C^烷氧基，氨基，0-芳烷基，-0C (0) C^芳烷基，-0C (0) C^烷 基，-0C(0)芳基或甘氨酸取代基；和R6是H或Ch。烷基，優選H，包括使具有式(II)結構的化合物(R1) (R2)AsC1(II)與具有式(III)結構的化合物在水性或醇性溶劑中并在沒有吡啶的存在下反應，以提供式(I)的化合物。在某些實施方案中，所述反應在非芳香胺堿的存在下進行。在某些這種實施方案 中，所述非芳香胺堿選自三乙胺和二異丙基乙胺，優選三乙胺。在某些實施方案中，式(II)化合物與非芳香胺堿的摩爾比為約0.5 1到約 1.5 1。在某些這種實施方案中，所述摩爾比為約0.7 1到約1.3 1，或約1 1到約 1. 1 1。在某些這種實施方案中，所述摩爾比為約1 1，或約1.1 1。在某些實施方案中，非芳香胺堿與式(III)化合物的摩爾比為約1 1到約2 1。
在某些這種實施方案中，所述摩爾比為約1.1 1到約1.5 1，或約1 1到約1.3 1。 在某些這種實施方案中，所述摩爾比為約1. 1 1,1.2 1，或約1.3 1。在某些優選的這種實施方案中，所述溶劑體系包含水和乙醇。在某些實施方案中 水與乙醇的比率(v/v)為約4 1到1 4，優選為約2 1到約1 2。在某些優選的這 種實施方案中，水與乙醇的比率(v/v)為約1 1。在某些實施方案中，進行這種方法從而使得式(I)化合物的收率為至少約50%、 約60%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%或者是定量的。在某些實施方案中，式(I)化合物通過HPLC測量的純度為至少約97%并且不含吡 啶。在某些優選實施方案中，所述化合物的純度為至少約99. 5%。在某些實施方案中，所述方法進一步包括(a)在混合的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇性 和/或極性非質子溶劑，優選將二烷基酮諸如丙酮加入到反應中；和(b)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，所述溶劑在約30分鐘、約60分鐘、約90分鐘或約120分鐘內， 優選在約60分鐘內被加入。在某些實施方案中，所述溶劑在反應的溫度被保持在約-10°C到約10°C，約_5°C 到約5°C或約0°C到約5°C的范圍內的同時被加入。在某些實施方案中，所述漿料被混合歷時約1到約24小時。在某些優選實施方案 中，所述漿料被混合歷時約2到約10小時，更優選約3到約5小時，諸如約4小時。在某些實施方案中，在沒有吡啶的存在下進行所述反應可減少干燥式(I)的化合 物所需的時間。在某些實施方案中，在混合的同時將溶劑加入到反應中以實現式(I)化合物的沉 淀。另外，溶劑例如丙酮的使用通過促進溶劑和液體雜質的除去可最終減少在減壓條件下 干燥式(I)化合物所需的時間。在某些實施方案中，式(I)的化合物可在約24到約48小時內干燥。在某些實施 方案中，式(I)的化合物可在減壓條件下干燥。本發明的另一個方面涉及用于純化式(I)的化合物的方法，例如，在上述的方法 之后，包括(a)在混合的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇 性和/或極性非質子溶劑，優選將二烷基酮諸如丙酮加入到所述化合物的水性或醇性溶液 中；和(b)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，所述溶劑在約30分鐘、約60分鐘、約90分鐘或約120分鐘內， 優選在約60分鐘內被加入。在某些實施方案中，所述溶劑在溶液的溫度被保持在約-10°C到約10°C，約_5°C 到約5°C或約0°C到約5°C的范圍內的同時被加入。在某些實施方案中，所述漿料被混合歷時約1到約24小時。在某些優選實施方案 中，所述漿料被混合歷時約2到約10小時，更優選約3到約5小時，諸如約4小時。本文使用的術語“混合”包括但不限于攪拌(使用磁力攪拌棒、機械攪拌器或任何其它適當的攪拌裝置)和振搖。在某些實施方案中，所述純化方法進一步包括(a)制備式(I)的化合物在水中的溶液；(b)過濾所述溶液；(c)減少水的量(例如，在減壓條件下和/或通過共沸蒸餾)；(d)加入降低所述化合物的溶解度的與水可混溶的極性非質子溶劑(例如，丙酮，甲基異丙基酮，甲基乙基酮或四氫呋喃)，優選加入二烷基酮諸如丙酮，以形成漿料；和(e)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，式(I)的化合物是如下所示的SGLU-I 本發明另一個方面涉及用于合成式(IV)的化合物的方法，
(IV)包括使具有式(V)結構的化合物(Me) 2AsC1(V)與具有式(VI)結構的化合物
(VI)在水性或醇性溶劑中并在沒有吡啶的存在下反應，提供式(IV)的化合物。在某些實施方案中，所述方法進一步包括(a)在混合的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇性 和/或極性非質子溶劑、優選將二烷基酮諸如丙酮加入到反應中；和(b)過濾生成的漿料。
在某些實施方案中，所述溶劑在約30分鐘、約60分鐘、約90分鐘或約120分鐘內， 優選在約60分鐘內被加入。在某些實施方案中，所述溶劑在反應的溫度被保持在約-10°C到約10°C，約_5°C 到約5°C或約0°C到約5°C的范圍內的同時被加入。在某些實施方案中，所述漿料被混合歷時約1到約24小時。在某些優選實施方案 中，所述漿料被混合歷時約2到約10小時，更優選約3到約5小時，諸如約4小時。本發明的另一個方面涉及用于純化式(IV)的化合物的方法，例如，在上述的方法 之后，包括(a)在混合的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇 性和/或極性非質子溶劑、優選將二烷基酮諸如丙酮加入到所述化合物的水性或醇性溶液 中；和(b)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，所述溶劑在約30分鐘、約60分鐘、約90分鐘或約120分鐘內， 優選在約60分鐘內被加入。在某些實施方案中，所述溶劑在溶液的溫度被保持在約-10°C到約10°C，約_5°C 到約5°C或約0°C到約5°C的范圍內的同時被加入。在某些實施方案中，所述漿料被混合歷時約1到約24小時。在某些優選實施方案 中，所述漿料被混合歷時約2到約10小時，更優選約3到約5小時，諸如約4小時。在某些實施方案中，所述純化方法進一步包括(a)制備式(IV)的化合物在水中的溶液；(b)過濾所述溶液；(c)減少水的量(例如，在減壓條件下和/或通過共沸蒸餾)；(d)加入降低所述化合物的溶解度的與水可混溶的極性非質子溶劑(例如，丙酮， 甲基異丙基酮，甲基乙基酮或四氫呋喃)，優選加入二烷基酮諸如丙酮，以形成漿料；和(e)過濾生成的漿料。本發明另一個方面涉及使式(I)的化合物或使式(IV)的化合物結晶的方法，包 括(a)將所述化合物溶解在水性或醇性溶劑中；(b)在混合的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇性 和/或極性非質子溶劑、優選將二烷基酮諸如丙酮加入到生成的溶液中；和(b)過濾生成的漿料。在某些實施方案中，所述溶劑在約30分鐘、約60分鐘、約90分鐘或約120分鐘內， 優選在約60分鐘內被加入。在某些實施方案中，所述溶劑在溶液的溫度被保持在約-10°C到約10°C，約_5°C 到約5°C或約0°C到約5°C的范圍內的同時被加入。在某些實施方案中，所述漿料被混合歷時約1到約24小時。在某些優選實施方案 中，所述漿料被混合歷時約2到約10小時，更優選約3到約5小時，諸如約4小時。在某些實施方案中，進行這種方法從而使得式(IV)化合物的收率為至少約50%、 約60%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%或者是定量的。
在某些實施方案中，式(IV)化合物通過HPLC測量的純度為至少約97%并且不含 吡啶。在某些優選實施方案中，所述化合物的純度為至少約99. 5%。本發明另一個方面涉及用于合成式(II)的化合物的方法，(R1) (R2)AsCl(II)其中R1和R2獨立地是C1,烷基，優選R1和R2獨立地選自甲基，乙基，丙基和異丙基；其中用氯化錫(II)還原具有結構(VII)的化合物(R1)(R2)As(O)OH(VII) ο在某些實施方案中，所述還原如實施例1所述進行，其中R1和R2都是甲基。之前，這一轉化可采用次磷酸在濃鹽酸中完成；然而，這導致有害物質膦氣體的釋 放。如本文所述用氯化錫(II)還原式(VII)的化合物避免了膦氣體的產生。本發明的一個方面涉及用于檢測例如已根據WO 2007/027344所述被制備的那些 式VIII的化合物或其鹽在SGLU-I批料中的存在的方法 該文獻的公開全文被并入本文。本文使用的術語“批料”意在包括SGLU-I制備過程的產物從而使得SGLU-I的產 量為至少1kg，優選至少10kg。一般地，批料是至少90%純的SGLU-I，在試驗之前，盡管如 果SGLU-I已與其它化合物諸如賦形劑、溶劑等混合的話，那么在樣品中一般至少90%的包 含砷的材料是SGLU-1。在某些實施方案中，這種SGLU-I批料實質上不含三谷胱甘肽砷，從 而使得在SGLU-I批料中存在小于約2%、小于約1%、小于約0. 5%或小于約0. 25%的三谷 胱甘肽。在某些實施方案中這種SGLU-I批料實質上不含生物學污染物，包括但不限于細胞 和蛋白質。在某些實施方案中，這種方法可包括使用HPLC進行檢測。在某些可供選擇的實施 方案中，所述方法可包括使用質譜法進行檢測。在某些可供選擇的實施方案中，所述方法可 包括通過NMR進行檢測。
在某些實施方案中，本發明涉及用于評價有機砷化物的樣品的純度的方法，其中 在所述樣品中至少90%的有機砷化物是式IV的化合物或其鹽，在某些這種實施方案中，檢測包括使用HPLC分析樣品。在某些可供選擇的實施方 案，檢測包括使用質譜法分析樣品。在某些可供選擇的實施方案，檢測包括使用NMR分析樣 在某些實施方案中，其中式VIII化合物的被檢測量大于約5% (通過HPLC測量的 總面積)、約4%、約3%、2%、或甚至大于約1%，該樣品可經過純化以除去一些或全部的式 VIII的化合物，然后任選重復試驗。這種純化可以是任何合適的方法(例如重結晶或HPLC 純化)。在其中純化不實用的情況下，諸如當樣品是包含式IV化合物的多組分藥物組合物 時，則因為不適合人用而可能丟棄樣品所取自的材料。在某些實施方案中，本發明涉及監控在SGLU-I批料中的式VIII化合物的存在的 方法，包括在數分鐘、數小時、數天、數周或數年的時段內定期檢測式VIII化合物的量。在 某些實施方案中，所述方法包括至少一天一次、一周一次、一月一次或至少一年一次檢測式 VIII化合物的量。在其中評價或監控方法包括對式II化合物進行HPLC檢測的某些實施方案中，所 述HPLC分析在約0到約20°C、優選約4到約10°C的溫度下進行。在某些這種實施方案中， 所述HPLC在約4到約6°C的溫度下進行。在其中評價或監控方法包括對式VIII化合物進行HPLC檢測的某些實施方案中，
所述洗脫可包括包含至少一種有機溶劑的單一的始終如一的溶液。這種溶液可任選進一步 包含水。在某些實施方案中，所述洗脫液可包含兩種或更多種溶液，所述溶液各自包含至 少一種有機溶劑。這種溶液可任選進一步包含水。在某些這種實施方案中，其中以變化的 比例使用兩種或更多種溶液以沿著梯度改變洗脫液，第一溶液可包含胺堿和有機酸。在某 些這種實施方案中，所述溶液可包含選自三乙胺和二異丙基乙胺、優選三乙胺的胺堿。在某 些這種實施方案中，所述溶液可包含有機酸諸如甲酸。在某些這種實施方案中，所述溶液可 包含三乙胺、甲酸和水。在其中第一溶液包含水、甲酸和三乙胺的某些實施方案中，所述溶液優選包含大 于約95%的水、大于約98%或大于約99%的水。在某些這種實施方案中，所述溶液包含 99. 85%的水、0. 的甲酸和0. 05%的三乙胺(v v v)。在其中存在兩種溶液的某些實施方案中，第二溶液可包含胺堿和有機酸。在某些 這種實施方案中，所述溶液可包含選自三乙胺和二異丙基乙胺、優選三乙胺的胺堿。在某些 這種實施方案中，所述溶液可包含有機酸諸如甲酸。在某些這種實施方案中，所述溶液可進 一步包含水溶性的有機溶劑。在某些這種實施方案中，所述水溶性的有機溶劑是乙腈。在 某些這種實施方案中，所述溶液包含大于約98%或大于約99%的乙腈。在某些這種實施方 案中，所述溶液包含99. 85%的乙腈、0. 的甲酸和0.05%的三乙胺(v v v)。本發明的一個方面涉及制備SGLU-1的藥物制劑的方法，包括測定式VIII化合物 的量，并且如果SGLU-1包含的式VIII化合物的量小于約5% (根據HPLC測量的總面積)， 則加入藥學可接受的稀釋劑、載體或賦形劑。在某些這種實施方案中，SGLU-1包含的式 VIII化合物的量小于約4%、約3%、2%、或小于約1%。在某些實施方案中，所述藥物制劑 實質上不含三谷胱甘肽砷，(arsenic triglutathione)從而使得在SGLU-1批料中存在小 于約2%、小于約1%、小于約0. 5%或甚至小于約0. 25%的三谷胱甘肽。在某些實施方案 中，所述藥物制劑實質上不含生物學污染物，包括但不限于細胞和蛋白質。在某些這種實施方案中，這種藥物制劑可用于制備口服劑型，包括但不限于膠囊， 片劑，丸劑，糖衣丸，粉劑，粒劑等。或者，這種藥物制劑可用于制備適于靜脈內給藥的溶液劑。 本發明的一個方面涉及用于檢測或監控在本文所述的藥物制劑、口服劑型或適于 靜脈內給藥的溶液劑中的式VIII化合物或其鹽的存在的方法。在其中所述方法是檢測方法的某些實施方案中，這種方法可包括使用HPLC進行 檢測。在某些可供選擇的實施方案中，所述方法可包括使用質譜法進行檢測。在某些可供 選擇的實施方案中，所述方法可包括通過NMR進行檢測。在某些實施方案中，其中所述方法是用于監控在藥物制劑、口服劑型或適于靜脈 內給藥的溶液劑中的式VIII化合物的存在的方法，所述方法包括在數分鐘、數小時、數天、 數周或數年的時段內定期檢測式VIII化合物的量。在某些實施方案中，所述方法包括至少 一天一次、一周一次、一月一次或甚至至少一年一次檢測式VIII化合物的量。本文使用的措辭“藥學可接受的”是指這樣的配體、材料、組合物和/或劑型，其處 于合理的醫學判斷的范圍內，適于接觸人類和動物的組織而無過度的毒性、刺激、變態反應 或其它問題或并發癥，并與合理的利益/風險比率相稱。
本文使用的措辭“藥學可接受的載體”是指藥學可接受的材料、組合物或介質，諸 如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或囊封材料。每種載體在與制劑的其它成分 相容并且對患者無害的意義上必須是“可接受的”。可充當藥學可接受的載體的材料的一 些實例包括(1)糖類，諸如乳糖，葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，諸如玉米淀粉，馬鈴薯淀粉，以 及被取代或未被取代的環糊精；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉，乙基纖 維素和醋酸纖維素；⑷粉狀黃耆膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；⑶賦形劑，諸如可可 脂和栓劑用蠟；(9)油類，諸如花生油，棉子油，紅花油，芝麻油，橄欖油，玉米油和大豆油； (10) 二醇類，諸如丙二醇；(11)多元醇，諸如甘油，山梨醇，甘露醇和聚乙二醇；(12)酯類， 諸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，諸如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)藻 酸；(16)無熱原的水；(17)等滲鹽水；(18)林格式溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩沖液；和 (21)在藥物制劑中所用的其它的無毒的相容物質。在某些實施方案中，本發明的藥物組合 物是非致熱的，即，當被給予至患者時不誘導顯著的升溫。在所述組合物中還可存在潤濕劑、乳化劑和潤滑劑，諸如十二烷基硫酸鈉和硬脂 酸鎂，以及著色劑、脫模劑、包衣劑、甜味劑、調味劑以及香料、防腐劑和抗氧化劑。藥學可接受的抗氧化劑的實例包括(1)水溶性的抗氧化劑，諸如抗壞血酸，鹽酸 半胱氨酸，硫酸氫鈉，焦亞硫酸鈉，亞硫酸鈉等；(2)油溶性的抗氧化劑，諸如棕櫚酸抗壞血 酸酯，丁羥茴醚(ΒΗΑ)，丁羥甲苯(BHT)，卵磷脂，掊酸丙酯，α-生育酚等；和(3)金屬螯合 劑，諸如檸檬酸，乙二胺四乙酸(EDTA)，山梨醇，酒石酸，磷酸等。適于口服給藥的制劑可為以下形式膠囊，扁囊劑，丸劑，片劑，菱形劑(采用加香 基質，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃耆膠)，粉劑，粒劑，或作為水性或非水性液體的溶液劑或 懸浮劑，或作為水包油型或油包水型的乳劑，或作為酏劑或糖漿劑，或作為錠劑(采用惰性 基質，諸如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或作為洗口劑等，各自含有預定量的抑制 劑作為活性成分。組合物還可作為大丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑被給予。在用于口服給藥的固體劑型(膠囊，片劑，丸劑，糖衣丸，粉劑，顆粒劑等)中，將活 性成分與一種或多種藥學可接受的載體諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣和/或任何以下物質混 合(1)填充劑或增量劑，諸如淀粉，環糊精，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和/或硅酸；(2)粘 合劑，諸如，例如，羧甲纖維素，藻酸鹽，明膠，聚乙烯基吡咯烷酮，蔗糖和/或阿拉伯膠；⑶ 濕潤劑，諸如甘油；(4)崩解劑，諸如瓊脂，碳酸鈣，馬鈴薯或木薯淀粉，藻酸，某些硅酸鹽和 碳酸鈉；(5)溶出阻滯劑，諸如石蠟；(6)吸收促進劑，諸如季銨化合物；(7)潤濕劑，諸如， 例如，乙酰基醇和單硬脂酸甘油酯；(8)吸附劑，諸如高嶺土和皂土；(9)潤滑劑，諸如滑石， 硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，十二烷基硫酸鈉及其混合物；和(10)著色劑。在膠囊、 片劑和丸劑的情況中，藥物組合物還可包含緩沖劑。相似類型的固體組合物還可用作使用 諸如乳糖或乳糖的賦形劑以及高分子量聚乙二醇等的軟和硬填充膠囊中的填充劑。片劑可通過壓制或模制，任選與一種或多種助劑一起被制備。壓制片劑可采用粘 合劑(例如，明膠或羥丙甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如淀粉羥基 乙酸鈉或交聯羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑來制備。模制片劑可通過在適當的機 器中模制用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀抑制劑的混合物來制備。片劑和其它固體劑型諸如糖衣丸、膠囊、丸劑和粒劑，可任選地具有刻痕或采用包 衣或外殼諸如腸溶包衣和藥物制劑領域公知的其它包衣來制備。它們還可使用例如改變比例的羥丙甲基纖維素從而提供所需的釋放曲線、聚合物基質、脂質體和/或微球體進行配 制，從而提供其中的活性成分的緩慢釋放或受控釋放。它們可通過例如過濾通過細菌保持 過濾器或通過引入無菌固體組合物形式的殺菌劑進行滅菌，可在即將使用前將該無菌固體 組合物溶解在無菌水或其它無菌的可注射介質中。這些組合物還可任選地包含遮光劑并且 可為這樣的組合物，即它們只釋放活性成分，或者在腸道的某一部分內優先釋放，任選地以 延遲方式釋放。可使用的包埋組合物的實例包括聚合物物質和蠟。如果適當的話，活性化 合物還可與一種或多種上述的賦形劑一起形成微囊封的形式。用于口服給藥的液體劑型包括藥學可接受的乳劑、微乳劑、懸浮劑、糖漿劑和酏 劑。除了活性成分之外，液體劑型可含有本領域常用的惰性稀釋劑，諸如，例如，水或其它溶 劑，增溶劑，和乳化劑諸如乙醇，異丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸芐酯，丙二醇， 1,3- 丁二醇，油類(特別是油、棉子油、花生油、玉米油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻 油)，甘油，四氫呋喃基甲醇，聚乙二醇，和山梨糖醇酐的脂肪酸酯，及其混合物。除了惰性稀釋劑之外，口服組合物還可包含助劑諸如潤濕劑，乳化劑和助懸劑，甜 味劑，調味劑，著色劑，芳香劑和防腐劑。除了活性抑制劑之外，懸浮劑可包含助懸劑，諸如，例如，乙氧基化異硬脂醇，聚氧 乙烯山梨醇和山梨糖醇酐酯，微晶纖維素，偏氫氧化鋁(aluminum metahydroxide)，皂土， 瓊脂，黃耆膠及其混合物。適于非腸胃給藥的本發明的藥物組合物包含與一種或多種藥學可接受的無菌的 水性或非水性溶液、分散液、懸浮液或乳液或在即將使用前被復溶在無菌的可注射溶液或 分散液中的無菌粉末組合的一種或多種抑制劑，其可包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、使制 劑與被給藥接受者的血液等滲的溶質或助懸劑或增稠劑。可用在本發明的藥物組合物中的適當的水性和非水性載體的實例包括水，乙醇， 多元醇(諸如甘油，丙二醇，聚乙二醇等)，及其適當的混合物，植物油諸如橄欖油，以及可 注射的有機酯諸如油酸乙酯。可以通過例如采用包衣材料諸如卵磷脂、在分散液的情況下 通過保持所需的粒子大小、以及通過采用表面活性劑來維持適當的流動性。這些組合物可包含助劑諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。可以通過引入各種 抗細菌劑和抗真菌劑例如對羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、苯酚、山梨酸等等來確保防止微生物 起作用。還希望在組合物中包含張力調節劑，諸如糖類，氯化鈉等。另外，可注射藥物形式 的延長的吸收可以通過引入延遲吸收的試劑諸如單硬脂酸鋁和明膠來實現。在一些情況中，為了延長藥物的效果，希望減慢藥物從皮下注射或肌肉內注射的 吸收。例如，非腸道給藥的藥物的延遲吸收通過將藥物溶解或懸浮在油性介質中來實現。可注射儲庫形式通過在可生物降解的聚合物諸如聚乙交酯-聚丙交酯中形成抑 制劑的微囊基質來形成。根據藥物與聚合物的比率以及所用的特定聚合物的性質，可以控 制藥物釋放速率。其它可生物降解的聚合物的實例包括聚原酸酯和聚酐。倉庫型可注射制 劑還可通過將藥物截留在與體組織相容的脂質體或微乳劑中來制備。本文使用的措辭“非腸道給藥”是指與腸道給藥和局部給藥方式不同的給藥方式， 通常通過注射給藥，并且包括但不限于，靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮 內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、被膜下、蛛網膜下、脊柱內和胸骨內注射，以及輸 注。
本發明的治療化合物對患者的給藥將根據化療給藥的總體規程進行，并考慮如果存在的毒性。預期治療周期可根據需要循環進行。還考慮了許多標準治療或輔助的癌癥治 療以及手術介入可與本文所述的砷化物試劑聯合使用。與所選擇的給藥途徑無關，可以適當的水合形式使用的抑制劑和/或本發明的藥 物組合物通過本領域技術人員已知的常規方法被配制成藥學可接受的劑型。在本發明藥物組合物中的活性成分的真實劑量水平可以改變，從而對于特定的患 者、組合物和給藥方式而言有效實現所需的治療響應并對患者無毒的量的活性物質。本文引用的全部的公開和專利各自以全文并入作為參考。本領域技術人員只需使用常規試驗可理解或能夠確定本文所述的本發明的具體 實施方案的許多等價物。這些等價物意在被權利要求書所涵蓋。
實施例提供以下實施例來闡述本發明的優選實施方案。本領域技術人員可理解的是，在 隨后實施例中所公開的技術代表了本發明人在實踐本發明中所充分起作用的技術，因此這 些實施例被認為構成了實踐本發明的優選方式。然而，本領域技術人員根據本文公開可理 解到，可在所公開的具體的實施方案中進行許多改變并且仍舊獲得相似或類似的結果，而 不脫離本發明的精神和范圍。實施例1二甲基氯胂(DMCA)的制備將裝備有機械攪拌器、氮氣入口、溫度計和冰浴的3頸圓底燒瓶(500mL)中加入 二甲胂酸(33g,0. 23mol)和濃硫酸(67mL)。在單獨的燒瓶中，制備了 SnCl2 · 2H20(54g, 0. 239mol)在濃鹽酸(IOmL)中的溶液。在氮氣下將SnCl2 ·2Η20溶液加入到二甲胂酸的HCl 溶液中并保持溫度為5°C到10°C。在加料完成后，除去冰浴并將反應混合物在周圍環境溫 度攪拌1小時。將反應混合物轉移到分液漏斗中并收集上層(有機層)。用二氯甲烷(DCM) 提取底層(2x25mL)。將合并的有機提取物用IN HCl (2xl0mL)和水(2x20mL)洗滌。將有機 提取物用MgSO4干燥并通過旋轉蒸發(浴溫80°C，在氮氣下，大氣壓力)除去DCM。將殘余 物在氮氣下進一步蒸餾。收集兩個級分的DMCA。第一級分含有一些DCM，第二級分具有合 適的質量(8.58，26%收率)。GC分析證實產品的識別性和純度。實施例2S-二甲基胂基谷胱甘肽(SGLU-I)的制備將谷胱甘肽(18g，59mm0l)在水/乙醇1 lv/v(180mL)的混合物中的懸浮液在 低于5°C下冷卻并在惰性氣氛中用三乙胺(10mL，74mmOl)進行一次性處理。將混合物冷卻 到0-5°C并在10分鐘內滴加DMCA(llg，78. 6mmol)，同時保持溫度低于5°C。將反應混合物 在0-5°C攪拌4小時，通過過濾分離生成的固體。將產物用乙醇(2x50mL)和丙酮(2x50mL) 洗滌并在室溫干燥過夜，得到1 Ig (46 % )的SGLU-I。HPLC純度是97. 6面積％ (3次注射的 平均數)，元素分析 C12H22AsN3O6S 的計算值=C, 35. 04 ；H, 5. 39 ；N, 10. 12，S，7. 8.實測值=C, 34. 92 ；H, 5. 31 ；N, 10. 27，S，7. 68。1H 和 13C-NMR 與結構一致。將濾液用丙酮(150mL)稀釋 并置于冰箱中歷時2天。分離出另外5. lg(21%)的SGLU-I作為第二批產物，HPLC純度是 97. 7面積％ (3次注射的平均數)。
實施例3S-二甲基胂基谷胱甘肽(SGLU-I)的制備在裝備有機械攪拌器、滴液漏斗和溫度計的3L三頸燒瓶中在惰性氣氛中制備了 谷胱甘肽(114. 5g，0. 37mol)在1 1 (ν/ν)的水/乙醇(1140mL)混合物中的懸浮液并冷 卻到5°C。將混合物用三乙胺(63. 6mL,0. 46mol)緩慢處理(在15分鐘內)，同時保持溫度 低于20°C。將混合物冷卻到4°C并攪拌15分鐘，然后通過過濾除去痕量的不溶性物質。將 濾液轉移到潔凈的裝備有機械攪拌器、滴液漏斗、氮氣入口和溫度計的3L三頸燒瓶中，并 慢慢加入DMCA (70g，0.49mol)(批號#543-07-01-44)并同時保持溫度在3_4°C。將反應混 合物在1_4°C攪拌4小時，在1小時內加入丙酮(1. 2L)。將混合物在2-3°C攪拌90分鐘并 通過過濾分離生成的固體。將產物用乙醇(2x250mL)和丙酮(2x250mL)洗滌，并將濕固體懸 浮在乙醇200 Proof (2000mL)中。通過過濾分離產物，用乙醇(2x250mL)和丙酮(2x250mL) 洗滌并在室溫真空干燥2天，得到115g(75% )的SGLU-I，HPLC純度> 99. 5% (在進行中 試驗)。實施例4SGLU-I 的純化在適當的反應器中加入SGLU-I (6. Okg)和水(72kg)。將漿料加熱到30_40°C直到 形成溶液為止，并將生成的溶液經由1.2微米的串聯過濾器泵出以除去溶液中存在的任何 顆粒物質。然后使用旋轉蒸發器將澄清的溶液進行減壓濃縮。使水浴保持在至多40°C的溫 度下。當除去水的總溶液體積的大約85%時，向濃縮物中加入乙醇(30L，200proof，USP)， 并繼續在40°C蒸餾以共沸除去剩余的水，直到開始形成漿料為止。然后在溶液形成時用丙 酮(24L)稀釋所述漿料。減壓除去溶劑直到形成漿料為止。將生成的漿料轉移到適當的反 應器中并用丙酮(6L)稀釋。將混合物冷卻到0-5°C并靜置1小時。然后過濾SGLU-I并用 丙酮(3L)洗滌并減壓干燥，得到SGLU-I (5. 1kg，85%收率)。實施例5
ZI0-101純度的HPLC測定
使用以下條件來測定SGLU-I的面積％，以測定樣品的純度
柱C8 或 C18
流動相A :pH 2-5 ；B 乙腈
注射體積1-10 μ 1
溫度0-25 °C
波長210-250nm
樣品制劑10-30mg
在某些實施方案中，可使用以下的條件
實施例6采用以下的HPLC條件從SGLU-1制備式VIII的化合物HPLC 條件 根據以下參數進行梯度洗脫 色譜分離表明式VIII的化合物以總峰面積的1. 5到2. 0%的量存在。進行了式VIII化合物的分離的峰的質譜分析以確認預期質量。式VIII的化合物 的合成已有文獻報導并且可利用的MS數據(JAAS 2004 ； 19 183 ； J. Biol. Chem. 275 (43) 33404)與本文所觀察到的數據是一致的。等價物本領域技術人員可理解或能夠確定只需使用常規試驗、本文所述的化合物的許多 等價物及其使用方法。這些等價物被認為處于本發明的范圍內并被權利要求書所涵蓋。本 領域技術人員還可理解的是，本文所述實施方案的全部組合都處于本發明的范圍內。
權利要求
用于合成式(I)的化合物的方法其中X是S或Se；W是O，S或(R)(R)，其中R在每種情況下獨立地是H或C1-2烷基；n是0或1；R1和R2獨立地是C1-20烷基；R3是-H或C0-6烷基-COOR6；R3’是H，氨基，氰基，鹵素，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，羧基，C1-10烷基，C1-10烯基或C1-10炔基；R4是-OH，-H，-CH3，-OC(O)C1-10芳烷基，-OC(O)C1-10烷基，-OC(O)芳基或谷氨酰胺；R5是-OH，氰基，C1-10烷氧基，氨基，O-芳烷基，-OC(O)C1-10芳烷基，-OC(O)C1-10烷基，-OC(O)芳基或甘氨酸取代基；和R6是H或C1-10烷基，包括使具有式(II)結構的化合物(R1)(R2)AsCl(II)與具有式(III)結構的化合物在水性或醇性溶劑中并在沒有吡啶的存在下反應，以提供式(I)的化合物。FPA00001140962100011.tif,FPA00001140962100012.tif
2.權利要求1的方法，其中式(III)的化合物具有以下結構
3.權利要求1或2的方法，其中所述反應在非芳香胺堿的存在下進行。
4.權利要求3的方法，其中非芳香胺堿是三乙胺。
5.權利要求1-4中任一項的方法，其中溶劑體系包含乙醇和水。
6.權利要求5的方法，其中水與乙醇的比率(v/v)為約2 1到約1 2。
7.權利要求6的方法，其中水與乙醇的比率(v/v)為約1 1。
8.用于純化式(I)的化合物的方法， X是S或Se ；W是0，S或(R) (R)，其中R在每種情況下獨立地是H或Ci_2烷基； n是 或1 ；R1和R2獨立地是C^烷基； R3 是-H 或 CQ_6 烷基-C00R6 ；R3’是H，氨基，氰基，鹵素，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，羧基，烷基，C^烯基 或炔基；R4是-0H，-H，-CH3，-0C (0)^芳烷基，-0C (0)^烷基，_0C(0)芳基或谷氨酰胺； R5是-0H，氰基，烷氧基，氨基，0-芳烷基，-0C (0) 芳烷基，-0C (0) 烷 基，-0C(0)芳基或甘氨酸取代基；和 R6是H或Ch。烷基， 包括(a)在攪拌的同時將與乙醇和水二者可混溶并降低式(I)化合物的溶解度的醇性或極 性非質子溶劑加入到所述化合物的水性或醇性溶液中；和(b)過濾生成的漿料。
9.權利要求8的方法，其中式(I)的化合物是 或其藥學可接受的鹽。
10.權利要求9的方法，其中醇性或非質子溶劑是丙酮。
11.權利要求8或9的方法，進一步包括(a)制備式(I)的化合物在水中的溶液；(b)過濾所述溶液；(c)減少水的量；(d)加入降低所述化合物的溶解度的與水可混溶的極性非質子溶劑以形成漿料；和(e)過濾生成的漿料。
12.用于合成具有式(II)結構的化合物的方法， (R1) (R2)AsC1(II)其中R1和R2獨立地是C1J烷基，優選獨立地選自甲基，乙基，丙基和異丙基； 包括用氯化錫(II)還原具有結構(VII)的化合物 (R1) (R2)As(O) OH (VII)0
13.權利要求12的方法，其中R1和R2獨立地選自甲基，乙基，丙基和異丙基。
14.權利要求13的方法，其中R1和R2都是甲基。
15.式(IV)的化合物 其中所述化合物通過HPLC測量的純度為至少97% ；和 所述化合物不含吡啶。
16.用于評價有機砷化物的樣品的純度的方法，其中在所述樣品中至少90%的有機砷 化物是式IV的化合物或其鹽， (IV)包括檢測在所述樣品中的式VIII化合物或其鹽的存在 (VIII)。
17.權利要求16的方法，其中檢測包括使用HPLC分析樣品。
18.權利要求16的方法，其中檢測包括使用質譜法分析樣品。
19.權利要求16的方法，其中檢測包括使用NMR分析樣品。
20.用于監控樣品中的式VIII的化合物或其鹽的存在的方法， 包括一周一次檢測權利要求1-4中任一項的樣品中的式VIII化合物或其鹽的量并歷 時一個月。
21.制備式IV化合物或其鹽的藥物制劑的方法， 包括測定在式IV的化合物的樣品中存在的式VIII化合物或其鹽的量 并且如果式VIII化合物的量相對于式IV化合物小于約5% (w/w)，則加入藥學可接受 的稀釋劑、載體或賦形劑。
22.權利要求21的方法，其中式VIII的化合物的存在量相對于式IV的化合物小于約`2 % 0
23.權利要求22的方法，其中式VIII的化合物的存在量相對于式IV的化合物小于約`1%。
24.根據權利要求21到23中任一項的方法制備的藥物制劑。
25.口服劑型，其中該口服劑型包含權利要求24的藥物組合物。
全文摘要
本發明提供了用于合成有機砷化物的方法。許多的這些化合物具有強力的體外抗多種人的實體和血液學由來的腫瘤細胞系以及抗白血病患者的惡性血細胞的細胞毒活性。
文檔編號A61K31/285GK101874034SQ200880117674
公開日2010年10月27日 申請日期2008年12月12日 優先權日2007年12月12日
發明者F·W·瓦利高拉, J·C·小阿梅迪奧 申請人:Zio醫藥腫瘤學公司