用于治療丙型肝炎病毒感染的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物的制作方法

專利名稱：用于治療丙型肝炎病毒感染的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種用于治療丙型肝炎病毒感染的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽 汁酸的藥物組合物。
背景技術：
根據在2004年取得的統計，估計大約有3%的世界人口感染有丙型肝炎病毒。具 體地說，在2006年，7個國家(美國、日本、法國、德國、意大利、西班牙和英國)丙型肝炎病 毒感染的流行程度為1. 4%，這是可獲得的準確統計，相當于7億人口當中有超過1000萬 人。引起此疾病的丙型肝炎病毒是屬于黃病毒科中的肝炎病毒屬的包膜單鏈RNA病毒，并 主要通過體液(例如血液)感染到人。感染此病毒的15-45%的患者在經歷急性肝炎后恢復，但剩余的55-85%的患者 發展為慢性肝炎，其中的大約5-20%在20-25年后發展為肝硬化。每年在慢性感染的患者 中有1-5%發展為肝癌。用于治療丙型肝炎病毒感染的現有方法通常包括單獨服用干擾素的方法和聯合 抗病毒藥物服用干擾素的方法。干擾素是最初在人體內產生的細胞因子，并具有抗病毒作 用、抗增殖作用和免疫調節作用。在干擾素中，干擾素-a主要用于治療丙型肝炎和乙型 肝炎，并作為干擾素-a產品，使用每日一次的制劑和每周一次的制劑(Roche Pegasys, Schering Peg-Intron, Intron A 等)。干擾素治療可以是能夠完全清除病毒的根本治療，但是，當單獨使用干擾素時，雖 然根據臨床組而不同，但是治療率平均不超過30%。不過，通過所有臨床實驗已證明，當干 擾素和抗病毒藥物聯合使用時，治療率比干擾素單一治療的治療率高。抗病毒藥物(小分子藥物)的典型之一是三氮唑核苷。三氮唑核苷顯示出抑制丙 型肝炎病毒的增殖和刺激T細胞的效果，以提高先天免疫力。但是，它無法清除肝炎病毒， 且當停止服用藥物時，血液ALT(丙氨酸轉氨酶)水平再次升高。由于即使在根據臨床治療 標準已經完成藥物服用之后，某些肝炎病毒仍存在于體內，所以肝炎病毒感染的復發風險 仍然存在。因此，三氮唑核苷是必須長期服用的一種藥物，但由于長期服用而顯示出非常嚴 重的副作用。這種藥物大量散布在血球中，進而產生導致貧血的非常嚴重的副作用。另外，干擾素和三氮唑核苷的聯合治療的治療率仍大約為55%。丙型肝炎患者的 數量眾多，如果他們不治療的話，丙型肝炎發展為肝硬化和肝癌。由于這些原因，必須開發 顯著提高聯合治療的治療率的藥物，此外，新開發的藥物是能夠長期服用的安全藥物。廣泛用作高脂血癥治療劑的氟伐他汀(fluvastatin)是一種HMG_CoA還原酶抑 制劑，并具有[R，S-(E)]_(士)-7-[3-(4_氟苯基)-1-(1_甲基乙基)-lH-吲哚-2-基]-3， 5- 二羥基-6-庚酸的化學名稱，并且主要使用其鈉鹽。HMG-CoA還原酶抑制劑通過HMG-CoA 還原酶抑制脂肪酸轉變為甲羥戊酸，從而防止膽固醇的合成。因此，氟伐他汀降低血膽固醇水平，從而治療高膽固醇血癥。因此，氟伐他汀用于防止并治療由動脈的反常血流引起的心 血管疾病。目前眾所周知的是，氟伐他汀在用于治療高脂血癥的藥物中是最常用的。HMG-CoA還原酶抑制劑抑制膽固醇合成的初始階段，以減少最終產物膽固醇和由 此衍生的物質的生成。此外，在中間階段，它們抑制了磷酸香葉酯(geranyl phosphate) 的合成，磷酸香葉酯是一種使丙型肝炎病毒增殖的物質。因此，HMG-CoA還原酶抑制劑能 夠抑制丙型肝炎病毒的增殖。這樣，廣泛地使用HMG-CoA還原酶抑制劑-氟伐他汀、洛 伐他汀(lovastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、利伐他汀 (livastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)，瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和它們的鹽，在它 們當中，氟伐他汀顯示出最強的功效(參見Different anti-HCV profiles of statins andtheir potential for combination therapy with interferon. Ikeda M, Abe K, YamadaM, Dansako H, Naka K, Kato N. , Hepatology. 2006Jul ；44(1) : 117-25)。氟伐他汀的功效優于作為先前的肝炎抗病毒藥物的三氮唑核苷的功效。另外，氟 伐他汀沒有嚴重的副作用，因而能夠長期使用。日本研究小組已經通過在2007年5月于美 國華盛頓哥倫比亞特區舉辦的消化疾病周(DDW)報道了這些事實(..，DDW:Could Statins Be a New Option for Hepatitis CPatients，DDW，2007，May)。然而，服用氟伐他汀的大約1. 的肝炎患者顯示，轉氨酶水平與氟伐他汀劑量成 比例地不斷增加，并且轉氨酶水平升高到正常值上限的至少3倍。至少90%的這種患者在 服用氟伐他汀之后在12周內顯示出血液轉氨酶水平增加。這是因為膽汁酸在肝臟中的合 成由于病毒而減少，因而使脂渣結合并將脂質排至纖細的膽管的代謝過程在長時間段內受 損。當損害未快速恢復時，肝炎的恢復被推遲。膽汁酸已被用于治療肝功能異常、慢性肝炎、肝硬化，膽汁分泌缺陷等。這些膽汁 酸的已知示例包括熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、脫氧膽酸、膽酸等。日本衛生和福利部最近批 準了應用熊去氧膽酸對抗病毒性肝炎的事實支持了膽汁酸可用于治療病毒性肝炎。熊去氧膽酸是一種主要在熊膽汁中發現的膽汁酸，并且還在人膽汁中發現了約 5%的量。關于長期被認為是對抗肝臟疾病的最佳藥物的熊膽汁的醫學效果，瑞典研究小組 在20世紀30年代在世界上第一次通過分子結構方法證實熊膽汁的主要藥學成分是熊去氧 膽酸。在1961年，日本科學家首次人工合成熊去氧膽酸，熊膽汁的醫學效果已經通過人工 合成物質開始展現出來。在1989年，對抗原發性膽汁性肝硬化的熊去氧膽酸的正式申請在 法國、德國和英國被批準。在1990年，熊去氧膽酸的應用被US FDA批準。在2007年，日本 衛生和福利部批準三菱制藥公司應用熊去氧膽酸來對抗病毒性肝炎。在韓國，應用熊去氧 膽酸對抗膽石癥、慢性肝炎和膽汁分泌缺陷等目前正在申請批準。在文獻中已經報道，熊去氧膽酸具有各種作用，例如，防止乙型肝炎、丙型肝炎、 肝硬化和肝癌惡化，抑制高脂血癥，并在器官移植中抑制免疫力。熊去氧膽酸降低慢性肝 炎患者的諸如ALT、AST和GGT的生化參數(參見C. Sama等，Clin. Drug. Invest 13(4)， 192-198 (1997))，并且熊去氧膽酸防止急性乙型肝炎病毒感染變為慢性(參見J. Galsky 等，J. CLIN. Gastroenterol. 28 (3). 249-253 (1999))。另外，熊去氧膽酸是在改善由肝臟移 植之后復發的慢性丙型肝炎病毒感染引起的慢性非活動性肝炎方面有效的治療劑(參見 Y. Kita等，Transpl. pro. 28，1701-1703 (1996))，當熊去氧膽酸聯合干擾素服用給慢性丙型 肝炎患者時，熊去氧膽酸抑制停止干擾素治療而引起的GPT水平升高，從而延長了干擾素的作用(參見 M. Angelico 等，Amer. J. Gastroenterol. 90，263-269 (1995))。另外，熊去氧 膽酸是一種在干擾素治療后能夠顯著降低肝酶水平的有用的治療劑，從而降低肝炎復發率 (參見 C. Clerici 等，Minerva Med. 88，219-225 (1997))。在韓國提交了與使用熊去氧膽酸作為用于治療丙型肝炎的制劑有關的專利申 請，第PCT/JP94/001178號國際申請公開了將熊去氧膽酸作為用于抑制丙型肝炎病毒增 殖的制劑。然而，在許多研究中已經報道，熊去氧膽酸不直接抑制丙型肝炎病毒(參見 Ursodeoxycholic acid’ mechanisms of action andclinical use in hepatobiliary disorders'. Lazaridis KN,Gores GJ,Lindor KD. JHepatol. ,July 2001,35(1) :134_46)。在以前的專利中，第2005/0187204號美國專利公布公開了 HMG-CoA還原酶抑制劑 和膽汁酸的聯合使用。然而，在所述美國專利公布中公開的發明僅針對由高脂血癥引起的 疾病的治療，而沒有涉及到作為本發明主題的丙型肝炎病毒感染的治療。

發明內容
技術問題本發明的目的在于提供一種用于治療病毒性肝炎的復方制劑，其包含HMG-CoA還 原酶抑制劑，所述HMG-CoA還原酶抑制劑作為與現有的丙型肝炎治療劑聯合服用的制劑， 從而協助丙型肝炎治療劑或丙型肝炎治療效果。本發明人已經開發出一種功能性復方制劑，該功能性復方制劑包含HMG-CoA還原 酶抑制劑和膽汁酸的組合，因此具有對抗丙型肝炎的提高的抗病毒活性，并能夠長期服用， 而沒有諸如由現有的三氮唑核苷引起的貧血之類的副作用，由此完成本發明。技術方案本發明提供一種包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的用于治療丙型肝炎病毒 感染的穩定制劑及其制備方法。更具體地說，本發明提供一種包含作為HMG-CoA還原酶抑 制劑的氟伐他汀和作為膽汁酸的熊去氧膽酸的用于治療丙型肝炎病毒感染的制劑及其制 備方法。具體地說，本發明的一方面涉及(1)用于治療丙型肝炎病毒感染的藥物組合物，其包含作為活性成分的HMG-CoA 還原酶抑制劑和膽汁酸；(2)上面(1)的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑包括從由氟伐他汀、 洛伐他汀、阿托伐他汀、辛伐他汀、利伐他汀、匹伐他汀、瑞舒伐他汀和它們的鹽組成的組中 選擇的一種或多種；(3)上面(2)的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑為氟伐他汀或其鹽。(4)上面(3)的藥物組合物，其中，氟伐他汀的鹽為鈉鹽；(5)上面(1)的藥物組合物，其中，所述膽汁酸包括從由熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、 脫氧膽酸、膽酸和它們的鹽組成的組中選擇的一種或多種；(6)上面(5)的藥物組合物，其中，所述膽汁酸為熊去氧膽酸或其鹽；(7)上面(1)的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑的量為 0. 05mg-200mg的范圍，所述膽汁酸的量為10mg-l，500mg的范圍；
(8)上面(7)的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑的量為 0. lmg-100mg的范圍，膽汁酸的量為25mg-l，OOOmg的范圍；(9)上面(1)的藥物組合物，所述藥物組合物還包括干擾素；(10)上面(9)的藥物組合物，其中，干擾素的量為1000單位-1，000, 000, 000單位 的范圍；(11)上面(10)的藥物組合物，其中，所述干擾素的量為10，000單位-100，000, 000
單位的范圍；(12)上面(1)的藥物組合物，所述藥物組合物采用兩相骨架、多層片或壓制包衣 片的形式；(13)上面(1)的藥物組合物，所述藥物組合物采用包括由延遲釋放顆粒和立即釋 放顆粒組成的兩相顆粒的膠囊的形式；(14)上面(1)的藥物組合物，所述藥物組合物采用多層片的形式；(15)用于治療丙型肝炎病毒感染的復方制劑，其包括作為活性成分的HMG-CoA還 原酶抑制劑和膽汁酸；(16) 一種用于防止或治療丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括服用包含作為 活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物；(17)上面(16)的方法，其中，所述藥物組合物還包括干擾素；(18) 一種用于防止或治療丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括與干擾素一起 服用包含作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物；(19)包含作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物用于防 止或治療丙型肝炎病毒感染的用途；(20)上面(19)的用途，其中，所述藥物組合物還包括作為活性成分的干擾素。有益效果本發明的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物可以代替已經在現 有技術中與干擾素聯合使用的三氮唑核苷。另外，本發明的藥物組合物可以在已經在現有 技術中用于治療丙型肝炎病毒感染的干擾素和三氮唑核苷的聯合治療中作為附加成分。本發明的藥物組合物不具有由三氮唑核苷引起的與貧血有關的副作用，因此可以 長期服用。另外，本發明的藥物組合物可以改善具有包括丙型肝炎病毒感染在內的慢性肝 病的患者的狀況。


圖1示出在試驗示例1中使用的96孔板的構造。圖2是示出在試驗示例1中評估的干擾素a _2b、氟伐他汀、干擾素+氟伐他汀和 干擾素+氟伐他汀+熊去氧膽酸對抗丙型肝炎病毒的抑制作用的圖。
具體實施例方式本發明涉及包含作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物 及其制備方法，所述HMG-CoA還原酶抑制劑具有丙型肝炎抑制作用，所述膽汁酸具有針對 丙型肝炎抑制作用的顯著協同作用以及肝功能改善作用。更具體地說，本發明涉及包含作為HMG-CoA還原酶抑制劑的氟伐他汀和作為膽汁酸的熊去氧膽酸的組合的藥物組合物及 其制備方法，所述熊去氧膽酸具有針對丙型肝炎抑制作用的顯著協同作用以及肝功能改善 作用。根據本發明的氟伐他汀和熊去氧膽酸的復方制劑顯示出對抗丙型肝炎病毒的抑 制作用，因此可以代替三氮唑核苷，所述三氮唑核苷已經作為用于口服的丙型肝炎治療劑， 并具有諸如貧血之類的副作用。另外，本發明的復方制劑可以作為對于以前的干擾素和三 氮唑核苷的聯合治療沒有顯著的作用的患者的新型治療劑。在下面的試驗示例1中，評估 氟伐他汀、熊去氧膽酸和干擾素對抗丙型肝炎病毒的抑制作用。在試驗示例1中可以看出，本發明的藥物組合物具有對抗丙型肝炎病毒的抑制作 用。另外看到，當本發明的藥物組合物的藥物組合服用時，與它們單獨服用時相比，具有高 協同作用。為了以更容易的方式將本發明的組合物應用于丙型肝炎患者，可以使用包含氟伐 他汀和熊去氧膽酸的復方制劑，并且為了更有效地應用，可以使用包含干擾素、氟伐他汀和 熊去氧膽酸的復方制劑。另外，可以開發出包含干擾素和氟伐他汀或者包含干擾素和熊去 氧膽酸的復方制劑，并將其用于治療丙型肝炎病毒感染。在氟伐他汀的情況下，氟伐他汀通過膽道排出，并可能在肝內經歷顯著的首過代 謝。為此，會發生氟伐他汀在肝功能降低的丙型肝炎患者內的累積。因此，為了以更安全的 方式將氟伐他汀服用給患者，需要控制氟伐他汀在體內的釋放速率。當氟伐他汀的釋放速 率受到控制時，經歷首過代謝的氟伐他汀的每小時的量會減小，進而導致藥物的總體可用 性或峰值血濃度降低，但是，因為能夠降低對患者的肝代謝的負荷，所以能夠以更安全的方 式服用氟伐他汀。另外，體內的氟伐他汀的峰值血濃度隨著其劑量的增加以幾何級數升高， 由于此原因，即使為了有效治療丙型肝炎而增加了氟伐他汀的劑量，具有氟伐他汀的控制 釋放的制劑仍舊更加安全。同時，熊去氧膽酸通過被動擴散在體內被吸收，但其吸收率低，約50%的被吸收的 藥物以膽汁的形式排出。但是，未被吸收的藥物通過腸肝循環經歷結合、解離和再吸收過 程，在肝病患者的情況下，其通過膽汁排出的量減少，因而，與發生正常的肝代謝的情形相 比，其傳輸到全身的量增加。因此，在熊去氧膽酸的情況下，就藥學功效而言，有利的是，在 服用之后使藥物在體內迅速釋放，以經歷連續的腸肝循環，而不是另外地控制含有藥物的 制劑內的藥物的釋放。因此，本發明的新的組合物包含延遲釋放部分，所述延遲釋放部分包含HMG-CoA 還原酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的傳統的賦形劑；立即釋放部分，所 述立即釋放部分包含膽汁酸和藥學上可接受的傳統的賦形劑，其中，這兩部分在物理上是 彼此分離的或分開的，使得這兩種藥物可以具有不同的釋放速率。具有這樣的物理部分的 本發明的組合物可以以各種劑型來制備。例如，本發明的組合物可以以包括以下形式的各 種劑型來制備，即，在單個片內具有兩種分開的顆粒相的兩相骨架片、多層片、壓制包衣片 和填裝有由延遲釋放顆粒和立即釋放顆粒組成的兩相顆粒的膠囊劑型，本發明的范圍不限 于此。根據本發明，兩相骨架片的特征在于其包括以下成分a)包含顆粒或細粒的延遲釋放層，通過使HMG-CoA還原酶抑制劑和從由腸溶聚合物、水不溶性聚合物、疏水化合物和親水聚合物組成的組中選擇的釋放控制物質與藥學上 可接受的傳統賦形劑一起經過混合、粒化或包覆工藝來獲得；b)立即釋放層，通過使膽汁酸和藥學上可接受的賦形劑經過用于生產口服固體制 劑的傳統工藝例如混合、捏合、干燥和粒化來獲得。上述制劑是兩相的控制釋放的制劑，其中，在a)中示出的延遲釋放層被在b)中示 出的立即釋放層包圍。HMG-CoA還原酶抑制劑可以以藥學上可接受的形式使用。優選地，可以使用氟伐他 汀和氟伐他汀的鈉鹽。然而，本發明的范圍不限于氟伐他汀。膽汁酸可以以藥學上可接受的形式使用。更優選地，可以使用熊去氧膽酸。然而， 本發明的范圍不限于熊去氧膽酸。在制備制劑的延遲釋放層或立即釋放層的過程中，可以加入干擾素，并可以用干 擾素代替氟伐他汀或熊去氧膽酸。干擾素可以以藥學上可接受的形式使用。優選地，可以 使用干擾素a-2b。每片中HMG-CoA還原酶抑制劑的量為0. 05mg至200mg的范圍，每片中膽汁酸的量 為10mg至1，500mg的范圍。優選地，每片中HMG-CoA還原酶抑制劑的量為0. lmg-100mg的 范圍，每片中膽汁酸的量為25mg至l，000mg的范圍。就功效而言，每片中干擾素的量為1000 單位至1，000, 000, 000單位的范圍，優選地為10，000單位至100，000, 000單位的范圍。作為腸溶聚合物，可以使用從由聚醋酸乙烯酞酸酯、甲基丙烯酸共聚物、羥丙基甲 基纖維素鄰苯二甲酸酯、紫膠、鄰苯二甲酸醋酸纖維素和鄰苯二甲酸丙酸纖維素組成的組 中選擇的一種或多種。優選地，使用羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯。水不溶性聚合物可以從由藥學上可接受的聚醋酸乙烯酯、聚甲基丙烯酸酯共聚物 (例如聚(丙烯酸乙酯，甲基丙烯酸甲酯)共聚物和聚(丙烯酸乙酯，甲基丙烯酸甲酯，甲基 丙烯酸三甲基氨基乙酯)共聚物)、乙基纖維素、醋酸纖維素等組成的組中選擇。疏水化合物可以從由以下物質組成的組中選擇脂肪酸或脂肪酸酯，包括硬脂酸 棕櫚酸甘油酯、甘油硬脂酸酯、山崳酸甘油酯、鯨蠟醇十六酸酯、甘油單油酸酯、硬脂酸等； 脂肪酸醇，包括十八醇十六醇混合物、十六醇、十八烷醇等；蠟，包括巴西棕櫚蠟、蜂蠟、微 晶蠟等；無機材料，包括滑石、沉淀碳酸鈣、磷酸氫鈣、氧化鋅、氧化鈦、高嶺土、膨潤土、蒙脫 石、硅酸鎂鋁(veegum)等。親水聚合物可以從由以下物質組成的組中選擇糖類，包括糊精、聚糊精、葡聚糖、 果膠和果膠衍生物、藻酸鹽、聚半乳糖醛酸、木聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、阿拉伯半乳聚糖、 淀粉、羥丙基淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉等；纖維素衍生物，包括羥丙基纖維素、羥甲基纖維 素、羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、醋酸羥丙甲纖維素琥珀 酸酯、羥乙基甲基纖維素等；樹膠，包括瓜耳豆膠、刺槐豆膠、黃芪膠、角叉膠、阿拉伯樹膠 (gum acacia)、涂膠(gum arabic)、結冷膠、黃原膠等；蛋白質，包括明膠、酪蛋白、玉米蛋白 等；聚乙烯基衍生物，包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇縮乙醛二乙氨基乙酸酯等； 聚甲基丙烯酸酯共聚物，包括聚(甲基丙烯酸丁酯，甲基丙烯酸(2-二甲氨基乙)酯，甲基 丙烯酸甲酯)共聚物、聚(甲基丙烯酸，甲基丙烯酸甲酯)共聚物、聚(甲基丙烯酸，丙烯酸 乙酯)共聚物等；聚乙烯衍生物，包括聚乙二醇、聚氧化乙烯等；羧基乙烯基聚合物，例如卡 波姆(carbomer)。
在下文中，將詳細描述用于制備本發明的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的 藥物的方法的每個步驟。步驟1是獲得包含顆粒或細粒的延遲釋放組合物的步驟，所述延遲釋放組合物通 過使作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽以及從由腸溶聚合物、 水不溶性聚合物、疏水化合物、親水聚合物等組成的組中選擇的釋放控制物質與藥學上可 接受的傳統賦形劑一起經過混合、捏合、干燥、粒化或包覆工藝來獲得。步驟2是獲得包含顆粒或細粒的立即釋放組合物的步驟，所述立即釋放組合物通 過使作為活性成分的膽汁酸與藥學上可接受的賦形劑一起經過用于生產口服固體制劑的 傳統工藝例如混合、捏合、干燥和粒化來獲得。如果膽汁酸混合物的流動性良好，使得可以 將其直接壓制成片，則所述組合物可以通過混合工藝獲得，如果流動性差，則所述組合物可 以通過壓制、粒化和篩分以細粒的形式獲得。步驟3是通過將在步驟1和步驟2的每個步驟中獲得的顆粒或細粒與藥學上可接 受的賦形劑進行后期混合并將混合物壓制成片或將混合物填裝在口服膠囊中來獲得口服 制劑的步驟。根據上述方法，形成了具有HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的控制釋放的兩相骨 架片。然而，可以根據本發明提供的控制釋放制劑不限于作為單個片存在的兩相骨架片，在 該單個片中，HMG-CoA還原酶抑制劑的延遲釋放層位于膽汁酸的立即釋放層中。基于其中的每一層顯示出立即釋放和延遲釋放的口服片可以通過以下步驟獲得 將在步驟1和步驟2中獲得的細粒與藥用賦形劑混合；使用多層壓片機將混合物壓制成雙 層或三層片，所述雙層或三層片的層彼此平行。另外，具有作為外層的立即釋放層和作為核心層的延遲釋放層的口服片可以通過 以下步驟獲得將在步驟1中獲得的細粒與藥用賦形劑混合；將該混合物壓制成核心片；將 在步驟2中獲得的細粒與藥用賦形劑混合；然后將該混合物壓制在核心片上，以形成外層。此外，口服膠囊制劑可以通過以下步驟獲得如果需要，將在步驟1和步驟2中獲 得的細粒與藥用賦形劑混合；將細粒填裝在膠囊中。除了上述活性成分和釋放控制劑之外，可以在片層中使用藥學上可接受的稀釋 物，例如淀粉、微晶纖維素、乳糖、葡萄糖、甘露醇、藻酸鹽、堿土金屬鹽、聚乙二醇、磷酸氫鈣 等，只要它們不減弱本發明的效果即可。作為粘合劑，可以在本發明的組合物中使用淀粉、 微晶纖維素、高可分散硅石、甘露醇、乳糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、天然 樹膠、合成樹膠、共聚維酮(Copovidone)、明膠等。作為崩解劑，可以在本發明的組合物中 使用淀粉或改性淀粉(例如，羥基乙酸淀粉鈉、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、預膠凝淀粉)、粘土 (例如，膨潤土、蒙脫石、硅酸鎂鋁等)、纖維素(例如，微晶纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖 維素等)、藻酸類物質(alginic)(例如，藻酸鈉、藻酸等)、交聯纖維素(例如，交聯羧甲基 纖維素鈉等)、交聯聚合物(例如，聚乙烯聚吡咯烷酮等)、泡騰添加劑(例如，碳酸氫鈉、檸 檬酸等)。作為滑潤劑，可以在本發明的組合物中使用滑石、堿土金屬硬脂酸鹽、十二烷基硫 酸鹽、氫化植物油、苯甲酸鈉、硬脂富馬酸鈉、單硬脂酸甘油酯、聚乙二醇400等。另外，可以 在本發明中使用在著色劑、香料等中選擇的藥學上可接受的添加劑。作為這樣的添加劑，在本發明的示例中使用微晶纖維素、羥基乙酸淀粉鈉、十二烷 基硫酸鈉、硬脂酸鎂等，但本發明的范圍不限于使用這些添加劑，本領域技術人員可以選擇包含適當量的這些添加劑。另外，如果需要，可以在片的外表面上形成包覆層。本發明的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的組合物還可以以未包覆的片的 形式使用。然而，當在含活性成分的片層的表面上形成包覆層時，具有能夠進一步確保活性 成分的穩定性的優點。本領域技術人員可以從能夠使用上述活性成分在片層的表面上形成包覆層的方 法中適當地選擇用于形成包覆層的方法。優選地，可以使用扇式包覆方法(fan coating method)。 包覆層可以由成膜劑、成膜助劑或它們的混合物制成。具體地說，包覆層的成膜劑 可以是從纖維素衍生物、糖類衍生物、聚乙烯基衍生物、蠟、脂肪、明膠等中選擇的一種或者 兩種或更多種的混合物，成膜助劑可以是從由聚乙二醇、乙基纖維素、甘油酯、氧化鈦和對 苯二甲酸二乙酯組成的組中選擇的一種或者兩種或更多種的混合物。當將本發明的組合物制成包衣片時，基于片的總重量，優選地包含0.5_15襯％的 量的包覆層。示例在下文中，將參照示例詳細地描述本發明，但本發明的范圍不限于這些示例。示例1 包含氟伐他汀和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備1)氟伐他汀的緩釋顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，氟伐他汀鈉鹽、微晶纖維素和聚烯吡酮 (Povidone)通過20號篩進行篩分，然后在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器 中的主要成分的混合物與純水捏制3分鐘，然后在90°C下在流化床干燥器中進行干燥，直 到其L0D達到少于2%為止。然后，使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混合物進行篩 分。將通過35號篩而篩分的羥丙基纖維素加入到混合物中并與混合物混合。最后，將通過 35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。2)熊去氧膽酸顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，將羥丙基纖維素溶于純水中，以制備粘 合劑溶液。同時，通過20號篩將熊去氧膽酸、微晶纖維素和玉米淀粉進行篩分，然后將它們 在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分的混合物與粘合劑溶液捏制 3分鐘，然后使用配置有20號篩的振蕩器進行篩分。在90°C下將篩分后的混合物在流化床 干燥器中進行干燥，直到其L0D達到不多于2%為止。使用配置有20號篩的振蕩器將干燥 后的混合物進行篩分。十二烷基硫酸鈉和羥基乙酸淀粉鈉通過35號篩進行篩分，然后與混 合物進行混合。最后，將通過35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物并與混合物混合。3)壓片和包覆使用多層壓片機(MRC-37T,Sejong Pharmatech Co.，Ltd. , Korea)實施壓片。將 包含熊去氧膽酸的組合物置于第一粉末加料器中，并將包含氟伐他汀的緩釋層組合物置于 第二粉末加料器中。在可以使層間的結合最小化的條件下，將組合物壓制成片。使用薄膜 包衣裝置(Hi-coater，SFC-30N, Se jongPharmatech Co.，Ltd.)在片上形成包覆層，由此制 備多層緩釋片。示例2 包含氟伐他汀和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備
1)氟伐他汀的緩釋顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，氟伐他汀鈉鹽、微晶纖維素、聚烯吡酮和 羥丙基甲基纖維素通過20號篩進行篩分，并在雙錐混合器中彼此混合60分鐘。混合物通 過輥壓制在15-20MPa的壓力下進行壓制。然后，使用配置有14號篩的振蕩器來篩分混合 物。最后，將通過35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。2)熊去氧膽酸顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，將羥丙基纖維素溶于純水中，以制備粘 合劑溶液。同時，將熊去氧膽酸、微晶纖維素和玉米淀粉通過20號篩進行篩分，然后在高速 混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分的混合物與粘合劑溶液捏制3分鐘， 然后使用配置有20號篩的振蕩器進行篩分。在90°C下將篩分后的混合物在流化床干燥器 中進行干燥，直到其LOD達到不多于2%為止。使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混 合物進行篩分。十二烷基硫酸鈉和羥基乙酸淀粉鈉通過35號篩進行篩分，然后與混合物混 合。最后，將通過35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。3)壓片和包覆使用多層壓片機(MRC-37T,Sejong Pharmatech Co.，Ltd.，Korea)實施壓片。將 包含熊去氧膽酸的組合物置于第一粉末加料器中，并將包含氟伐他汀的緩釋層組合物置于 第二粉末加料器中。在可以使層間的結合最小化的條件下，將組合物壓制成片。使用薄膜 包衣裝置(Hi-coater) (SFC-30N, SejongPharmatech Co.，Ltd.)在片上形成包覆層，由此制 備多層緩釋片。示例3 包含氟伐他汀和熊去氧膽酸的膠囊形式的藥物組合物的制備1)氟伐他汀的緩釋顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，氟伐他汀鈉鹽、微晶纖維素、聚烯吡酮、 聚氧化乙烯和黃原膠通過20號篩進行篩分，然后在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速 混合器中的主要成分的混合物與純水捏制3分鐘，然后在90°C下在流化床干燥器中進行干 燥，直到其LOD少于2%為止。然后，使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混合物進行篩 分。2)熊去氧膽酸顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，將羥丙基纖維素溶于純水中，以制備粘 合劑溶液。同時，熊去氧膽酸、微晶纖維素、玉米淀粉、十二烷基硫酸鈉和羥基乙酸淀粉鈉通 過20號篩進行篩分，然后在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分的 混合物與粘合劑溶液捏制3分鐘，然后使用配置有20號篩的振蕩器進行篩分。在90°C下將 篩分后的混合物在流化床干燥器中進行干燥，直到其LOD達到不多于2%為止。使用配置有 20號篩的振蕩器將干燥后的混合物進行篩分。3)后期混合和填裝在膠囊中將顆粒組合物在雙錐混合器中彼此混合。根據在下面的表1中示出的成分和含 量，將通過35號篩而篩分的輕質無水硅酸加入到混合物中并與混合物混合。然后，將通過 35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。將得到的混合物置于粉末加料 器中，并使用膠囊填裝機填裝在0號膠囊中。示例4 包含氟伐他汀和熊去氧膽酸的兩相骨架制劑的制備
1)氟伐他汀的緩釋顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，氟伐他汀鈉鹽、微晶纖維素、聚烯吡酮和 乙基纖維素通過20號篩進行篩分，然后在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中 的主要成分的混合物與純水捏制3分鐘，然后在90°C下在流化床干燥器中進行干燥，直到 其LOD達到少于2%為止。然后，使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混合物進行篩分。2)熊去氧膽酸顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，將羥丙基纖維素溶于純水中，以制備粘 合劑溶液。同時，熊去氧膽酸、微晶纖維素和玉米淀粉通過20號篩進行篩分，然后在高速混 合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分的混合物與粘合劑溶液捏制3分鐘， 然后使用配置有20號篩的振蕩器進行篩分。在90°C下將篩分后的混合物在流化床干燥器 中進行干燥，直到其LOD達到不多于2%為止。使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混 合物進行篩分。十二烷基硫酸鈉和羥基乙酸淀粉鈉通過35號篩進行篩分，然后與混合物混
I=I O3)壓片和包覆將顆粒組合物在雙錐混合器中彼此混合。根據在下面的表1中示出的成分和含 量，輕質無水硅酸通過35號篩進行篩分，然后與混合物混合。然后，硬脂酸鎂通過35號篩 進行篩分，并與混合物混合。使用旋轉式壓片機(MRC-33，Sejong Pharmatech Co.，Ltd.) 將混合物壓制成片，使用薄膜包衣裝置(Hi-coater) (SFC-30N，Sejong Pharmatech Co., Ltd.)在片上形成包覆層，由此制備緩釋骨架片。示例5 包含氟伐他汀和熊去氧膽酸的壓制包衣片形式的藥物組合物的制備1)氟伐他汀的緩釋核心片的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，氟伐他汀鈉鹽、微晶纖維素和聚烯吡酮 通過20號篩進行篩分，然后在高速混合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分 的混合物與純水捏制3分鐘，然后在90°C下在流化床干燥器中進行干燥，直到其LOD達到少 于2%為止。然后，使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混合物進行篩分。然后，將通過 35號篩而篩分的羥丙基甲基纖維素加入到混合物中并與混合物混合。然后，將通過35號 篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。然后，使用旋轉式壓片機(MRC-33， Sejong Pharmatech Co.，Ltd.)將混合物壓制成核心片。2)熊去氧膽酸顆粒的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，將羥丙基纖維素溶于純水中，以制備粘 合劑溶液。同時，熊去氧膽酸、微晶纖維素和玉米淀粉通過20號篩進行篩分，然后在高速混 合器中彼此混合3分鐘。將高速混合器中的主要成分的混合物與粘合劑溶液捏制3分鐘， 然后使用配置有20號篩的振蕩器進行篩分。在90°C下將篩分后的混合物在流化床干燥器 中進行干燥，直到其LOD不多于2%為止。使用配置有20號篩的振蕩器將干燥后的混合物 進行篩分。十二烷基硫酸鈉和羥基乙酸淀粉鈉通過35號篩進行篩分，然后與混合物混合。 然后，將通過35號篩而篩分的硬脂酸鎂加入到混合物中并與混合物混合。3)壓片和包覆使用壓制包衣片生產機(RUD-1 =Kilian)將組合物壓縮成片，所述片的內核心為 氟伐他汀的緩釋片，外層為包含熊去氧膽酸的組合物。使用薄膜包衣裝置(Hi-coater)
12(SFC-30N, Sejong Pharmatech Co. ,Ltd.)在片上形成包覆層，由此制備壓制包衣片形式的 緩釋片。示例6 包含氟伐他汀和鵝去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用鵝去氧膽酸代替熊去氧膽酸之 外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例7 包含氟伐他汀和脫氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用脫氧膽酸代替熊去氧膽酸之 外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例8 阿托伐他汀和熊去氧膽酸形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用阿托伐他汀鈣鹽代替氟伐他汀 鈉鹽之外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例9 包含洛伐他汀(lovastatin)和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的 制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用洛伐他汀代替氟伐他汀鈉鹽之 外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例10 包含匹伐他汀和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用匹伐他汀鈣鹽代替氟伐他汀鈉 鹽之外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例11 包含瑞舒伐他汀和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用瑞舒伐他汀鈣鹽代替氟伐他汀 鈉鹽之外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。示例12 包含辛伐他汀和熊去氧膽酸的多層片形式的藥物組合物的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，除了使用辛伐他汀代替氟伐他汀鈉鹽之 外，以示例1相同的方式制備藥物組合物。對比例1 氟伐他汀片的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，以與用于制備氟伐他汀的緩釋顆粒的示 例1的方法相同的方式來制備氟伐他汀顆粒。然后，使用旋轉式壓片機(MRC-33，Sejong Pharmatech Co.，Ltd.)將顆粒壓制成片，使用薄膜包衣裝置(Hi-coater) (SFC-30N，Se jong Pharmatech Co.，Ltd.)在片上形成包覆層，由此制備緩釋骨架片。對比例2 熊去氧膽酸片的制備根據在下面的表1中示出的成分和含量，以與用于制備熊去氧膽酸顆粒的示例 1的方法相同的方式來制備熊去氧膽酸顆粒。然后，使用旋轉式壓片機(MRC-33，Sejong Pharmatech Co.，Ltd.)將顆粒壓制成片，使用薄膜包衣裝置(Hi-coater) (SFC-30N, Sejong Pharmatech Co.，Ltd.)在片上形成包覆層，由此制備緩釋骨架片。表 1
根據示例3，可以制備代替熊去氧膽酸而包含干擾素的膠囊。可選地，可以使用干 擾素作為附加的組分來制備包含熊去氧膽酸的顆粒。試驗示例1 藥物之間的對EMCV的抑制作用的比較1)試驗溶液的制備 將干擾素α _2b、氟伐他汀、熊去氧膽酸、干擾素+氟伐他汀和干擾素+氟伐他汀+ 熊去氧膽酸分別稀釋成在下面的表2中示出的最終濃度。表2 2)細胞分散A)將50 μ L的各個試驗溶液加入到96孔板的各個孔，并將50 μ L的實驗介質加入 到用于空白組、正常組和載體組的每個孔。然后，將96孔板在CO2培養箱中培育30分鐘。B)以4Χ IO5個細胞/mL的濃度將倍增時間為22小時的A549細胞懸浮在實驗介 質中，最終體積為20mL。C)將50 μ L的細胞懸液加入到“Α”板的每個孔(除了空白孔外)，并將50 μ L的 實驗介質加入到每個空白孔。然后，將板在CO2培養箱中培育24小時。3)病毒感染 Α)將EMC病毒原種稀釋成5 X IO3個細胞/mL的濃度(重構)。B)將50 μ L的稀釋液加入到除了空白組和正常組外的所有試驗組的每個孔，并將 50 μ L的實驗介質加入到空白孔和正常孔的每個。然后，將板在CO2培養箱中培育24小時。4) MTT 化驗Α)將15 μ L的MTT標記試劑加入到板的每個孔。B)將板在CO2培養箱中培育4小時。C)將150 μ L的增溶溶液加入到板的每個孔。D)將板在用于病毒的CO2培養箱中在37°C下培育過夜(12_18小時)。E)測量紫色的甲朥(formazan)的生成，并使用酶標儀在550nm和600nm之間的 波長下測量吸收率。在表3中示出在試驗示例1中測量的對丙型肝炎病毒的抑制作用。表3
在表3中可看出，即使在試驗示例1中使用的每個試驗溶液的濃度是在現有技術 中使用的溶液的濃度的1/101/100，仍可以在所有試驗組中觀測到抗病毒作用。可以看出， 用干擾素α -2b和氟伐他汀中的每種處理過的試驗組顯示出的丙型肝炎病毒抑制作用是 僅用干擾素處理過的試驗組的丙型肝炎病毒抑制作用的大約1. 4倍高。僅用熊去氧膽酸處 理的試驗組顯示出對丙型肝炎病毒沒有直接抑制作用，與在2000年以后主要報道的情況 相同，但氟伐他汀和熊去氧膽酸與干擾素一起復合使用顯示出的丙型肝炎抑制作用是僅用 干擾素處理的試驗組的丙型肝炎抑制作用的大約1. 7倍，與使用氟伐他汀結合干擾素處理 的試驗組相比，這種復合使用顯示出意料不到的附加抑制作用。另外，當結合使用熊去氧膽 酸時，在細胞毒性測試試驗中顯示出低毒性。以上結果揭示了本發明的包含氟伐他汀和熊 去氧膽酸的組合物能夠成為對抗丙型肝炎病毒感染的優異治療劑。
權利要求
一種用于治療丙型肝炎病毒感染的藥物組合物，其中，所述藥物組合物包含作為活性成分的HMG CoA還原酶抑制劑和膽汁酸。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑包括從由氟伐 他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、辛伐他汀、利伐他汀、匹伐他汀、瑞舒伐他汀和它們的鹽組成 的組中選擇的一種或多種。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑為氟伐他汀或 其鹽。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其中，氟伐他汀的鹽為鈉鹽。
5.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述膽汁酸包括從由熊去氧膽酸、鵝去氧 膽酸、脫氧膽酸、膽酸和它們的鹽組成的組中選擇的一種或多種。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其中，所述膽汁酸為熊去氧膽酸或其鹽。
7.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑的量的范圍為 0. 05mg至200mg，所述膽汁酸的量的范圍為IOmg至1，500mg。
8.根據權利要求7所述的藥物組合物，其中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑的量的范圍為 0. Img至lOOmg，所述膽汁酸的量的范圍為25mg至1，OOOmgo
9.根據權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物還包括干擾素。
10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其中，所述干擾素的量的范圍為1000單位至 1，000，000, 000 單位。
11.根據權利要求10所述的藥物組合物，其中，所述干擾素的劑量的范圍為10，000單 位至100，000，000單位。
12.根據權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物采用兩相骨架片、多層片或壓 制包衣片的形式。
13.根據權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物采用膠囊的形式，所述膠囊包 括由延遲釋放顆粒和立即釋放顆粒組成的兩相顆粒。
14.根據權利要求12所述的藥物組合物，所述藥物組合物采用多層片的形式。
15.—種用于治療丙型肝炎病毒感染的復方制劑，其中，所述復方制劑包含作為活性成 分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸。
16.一種用于防止或治療丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括服用包含作為活 性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物。
17.根據權利要求16所述的方法，其中，所述藥物組合物還包含干擾素。
18.一種用于防止或治療丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括與干擾素一起服 用包含作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物。
19.包含作為活性成分的HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物用于防止或治 療丙型肝炎病毒感染的用途。
20.根據權利要求19所述的用途，其中，所述藥物組合物還包含作為活性成分的干擾器ο
全文摘要
這里公開了一種用于治療丙型肝炎病毒感染的包含HMG-CoA還原酶抑制劑和膽汁酸的藥物組合物。更具體地說，公開了一種用于治療丙型肝炎病毒感染的包含氟伐他汀或其藥學上可接受的鹽以及熊去氧膽酸的藥物組合物及其制備方法。
文檔編號A61K31/57GK101932322SQ200880111175
公開日2010年12月29日 申請日期2008年10月10日 優先權日2007年10月10日
發明者具滋星, 曺榮觀, 李俊榮, 田圣樹, 金圣旭 申請人:韓諾生物制約株式會社