正義單鏈RNA包膜病毒的2-氨基-2,7-雙脫氧-α-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基抑制劑的制作方法

專利名稱：：正義單鏈RNA包膜病毒的2-氨基-2,7-雙脫氧-α-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基抑制劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及病毒感染的治療，具體指正義單鏈RNA包膜病毒感染。
背景技術：
：正義單鏈RNA包膜病毒，例如，黃病毒科的成員，人類和動物種群目前健康有關的問題。例如，丙型肝炎病毒(HCV)是慢性肝病的主要原因，導致肝硬化和肝癌(1)。這是世界范圍約1.7億個體的主要病原體感染(1，2)。另外一個正義單鏈RNA包膜病毒的例子是登革熱病毒。登革熱病毒(DV)感染包括一個由四個血清型DV(1-4型)之一感染引起的疾病的頻譜，發生在世界上許多熱帶和亞熱帶地區。登革熱的地理分布已傳播持續了30年，包括100多個國家(WH0(3))。基于感染DV的數字(約5000萬/年)以及每年成千上萬嚴重登革熱病例的事實(WHO,(3))，在2005年，美國疾病控制中心(CDC)認為登革熱是影響人類的最重要的蚊子傳播的病毒性疾病。DV的全球分布比得上瘧疾，估計有25.0億人在疫情傳播的高危地區居住。每年都有成千上萬登革出血熱(DHF)的病例報道，達到病例約5%的死亡率，其中大多數是兒童和年輕人。由于這些病毒造成的健康問題，有必要研究正義單鏈RNA包膜病毒，以便找到治療或抑制病毒感染的適當方法。用于研究這樣的病毒的一個模型系統是復制子。病毒復制子是RNA分子，或RNA區域，即來自單一復制源的復制。丙型肝炎病毒RNA復制子裝備有新霉素抗性基因，允許丙型肝炎病毒細胞內復制的抑制劑的篩選和鑒定。但是，由于復制子不進行完整的復制周期，藥物篩選程序和單靠這些化驗為基礎的行動研究機制可能無法識別靶向病毒復制周期早期(病毒粒附著，進入，脫殼)或晚期(病毒顆粒組裝，出口)階段的化合物。此外，可能負面影響新霉素抗性的藥物有可能也會抑制丙型肝炎病毒RNA復制子的病毒復制，而不會影響任何病毒機制，從而需要附加的篩選以過濾出假陽性。在這方面，氨基苷類，如新霉素類似物，利用該丙型肝炎病毒復制子篩選通常不會被認為是潛在抗病毒藥物。鑒于研究丙型肝炎病毒的問題，其他的病毒可能是更好的研究模型。其中一種丙型肝炎病毒的此類模型是牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。BVDV通常用作丙型肝炎病毒感染的替代模型。BVDV是一種正義單鏈RNA包膜病毒，屬于黃病毒科科(4)。BVDV是已知能導致感染的動物消化道嚴重病變隨后死亡(5，6)。可以從感染動物分離出兩種生物型細胞病變(cpBVDV)和非細胞病變(ncpBVDV)(7)。但是，只有cpBVDV誘導細胞病理學敏感細胞類型，如馬-達氏牛腎(細胞(MDBK)。因為各種原因BVDV是一種良好的HCV模型。牛病毒性腹瀉病毒具有類似丙型肝炎病毒的結構組織(8)。與HCV—樣，BVDV可利用低密度脂蛋白受體進入細胞，使用功能類似的內部核糖體進入位點(IRES)轉錄，利用具有同源NS3蛋白酶的NS4A輔助因子，具有類似NS3解旋酶/核苷三磷酸酶(NTPase)以及機械地類似NS5BRNA依賴的RNA聚合酶，并有顯然類似機制的病毒粒子成熟、組裝和出口(8)。由于大量與這些病毒相關的人類的問題，迫切需要預防和/或治療正義單鏈RNA包膜病毒感染的組合物和方法。
發明內容本發明的一個實施例是式11的化合物Kg￡3其中I^包括H、環烷基、碳水化合物、肽或核苷酸基團其中R2和R3各獨立地包括H、烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、卣代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、卣代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素其中R4、R5和R6各獨立地包括0R2、鹵素、S(0)nR8、CR9R1(IRU、CH20R、CN、C02R、C0NR12R13和NR12R13，其中R和R8-R13獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基、雜芳基烷基，并且n=0-2附帶條件是當R2和R3=H，且R4、R5和R6=OH時，&不包括H。優選的化合物包括那些化合物，其中&選自鏈霉胺或2-脫氧鏈霉胺組成的群組，R2和R3是H，以及R4、R5和R6是0H。本發明的另一個實施例是一種用于治療正義單鏈RNA包膜病毒感染的組合物，包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物。所述組合物降低病毒顆粒的傳染性。所述的組合物可用于治療選自以下組成的群組中的病毒丙肝病毒(HCV)、西尼羅病毒(WNV)、黃熱(YFV)、登革熱病毒(DV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、馬動脈炎病毒(EAV)和辛德畢斯病毒(SINV)，或所述的病毒的組合。所述組合物的所述氨基糖苷可以包括未修飾的2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分，或其類似物。優選的組合物包括遺傳霉素或作為氨基糖苷的其類似物。可以在所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分的氨基或羥基基團上利用修飾基團官能化。所述修飾基團選自以下組成的群組烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、7烷基、卣代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素。此外，所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖_吡喃庚糖基成分的羥基或氨基基團中的一個可以被利用選自以下群組的取代基取代鹵素、S(0)nR、NR"2、0R、酰氧基(0acy1)、CI^I^Rs、CH20R、CN、C02R、C0NR凡，其中R、&、R2、R3獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基和雜芳基烷基，并且n二0-2。具體地，6-0H可以被這樣取代。同樣，所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分的所述2-氨基基團可以被利用酰基基團進行官能化，所述酰基基團包括脂肪酸。所述2-氨基基團也可以被烷基化，例如被甲基化。本發明的所述的組合物可以進一步包括藥劑學上可接受的載體且該載體無結合至核糖體RNA的組分并抑制包膜病毒蛋白質的轉譯，和/或病毒顆粒的組裝或釋放。所述氨基糖苷成分存在的濃度以重量計從約0.001%到約40%，并可以進一步包括至少一種選自以下組成的群組的添加劑抗菌劑、穩定劑、抗真菌劑、止痛劑、抗氧化劑、緩沖劑、遮光劑、化妝用齊U、芳香齊U、潤滑齊U、油齊U、增濕齊IJ、醇、干燥齊IJ、防腐齊IJ、乳化齊IJ、增稠齊IJ、清潔齊IJ、增塑劑、滲透促進劑，或它們的混合物。所述的組合物還可以進一步包括至少一種選自以下組成的群組的附加抗病毒劑干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。本發明的另一實施例是一種用于治療多細胞生物體中正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法，包括給感染了正義單鏈RNA包膜病毒的所述的多細胞生物體施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。所述組合物的所述氨基糖苷降低病毒顆粒的傳染性。所述方法的所述組合物在包括至少一日的時間段內至少每日被施用一次。本發明的再一個實施例是一種用于治療多細胞生物體中正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法，包括首先診斷所述正義單鏈RNA包膜病毒在所述生物體內表現的臨床癥狀，隨后給所述生物體施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。臨床癥狀包括可檢測的體液中的病毒抗體存在、體液中的病毒滴度的診斷水平、疼痛、腫脹、發高燒、炎癥、發紅、麻剌感、癢、皮膚損傷、或它們的組合。所述組合物的施用可以是局部、口服、舌下、粘膜、經膜、皮下、靜脈、肌肉、含服、腸外、陰道、肛門、經皮、側腦室注射、經由離子電泳作用，或它們的組合。本發明的還以實施例是一種用于防止正義單鏈RNA包膜病毒感染傳播的方法，包括給感染了正義單鏈RNA包膜病毒的生物體以生理學上適當的方式施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。所述組合物的所述氨基糖苷降低病毒顆粒的傳染性。圖1表示在72小時感染后遺傳霉素對NADL介導的細胞毒性保護。(頂部畫面)遺傳霉素(geneticin)(31-250yg/ml)對MDBK細胞生活力沒有影響。(底部畫面)遺傳霉素(1.5-25i!g/ml)治療改善受感染細胞的生活力，相比未受治療的感染細胞。圖2表示遺傳霉素抑制感染了BVDV的NADL或NY-1株的MDBK細胞內的病毒載量。畫面A)遺傳霉素，6、12和25iig/ml，在24和48小時感染后對NADL的活性病毒滴度的影響。畫面B)遺傳霉素，6、12和25iig/ml，在24和48小時感染后對NY-l的活性病毒滴度的影響。圖3表示遺傳霉素介導的對NADL的細胞保護作用，相比卡那霉素和慶大霉素。畫面A)本研究使用的卡那霉素、慶大霉素和遺傳霉素結構圖。畫面B)只有遺傳霉素提供對MDBK細胞內BVDV的NADL株的細胞保護作用(所有治療每劑藥12yg/ml)。干擾素正控制在100IU使用。圖4表示遺傳霉素對病毒翻譯和NS3或RNA復制過程沒有影響。畫面A表示利用NS3的主要抗體(Mab20.10.6)的免疫印跡分析。畫面B表示在6和12yg/ml遺傳霉素存在下感染BVDV的NADL株的MDBK細胞的細胞內病毒RNA逆轉錄酶定量PCR分析。發明詳細描述遺傳霉素(G418，圖3A)是由革蘭氏陽性土壤細菌紅橙小單孢菌生產的氨基糖苷類抗生素。氨基糖苷類是修飾的糖類，氨基基團被糖類羥基基團中的一個取代。遺傳霉素已被主張用作人類抗寄生蟲劑(9)。此外，遺傳霉素(10)或相關的慶大霉素(11)的施用已經證明在治療遺傳性疾病患者中有幫助(12)。遺傳霉素是含新霉素的含2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖-吡喃庚糖基類似物，廣泛用于選擇轉染真核細胞(13，14)。遺傳霉素也可用于黃病毒科病毒的穩定病毒復制子的轉染；然而，沒有關于遺傳霉素對這些RNA病毒的效果的現有信息。本發明表明，遺傳霉素確實是抗病毒劑，由MDBK細胞對cpBVDV(NADL)的細胞病變效應和cpBVDV(NADL)和ncpBVDV(NY-l)生產的抑制證明，用約4微克/毫升EC5。。遺傳霉素抗病毒效果是濃度依賴性(圖1)。用于抗BVDV活性的EC5。濃度為4微克/毫升(表1)，并在12.5微克/毫升，它增加未感染控制細胞的水平的細胞活力。遺傳霉素的這種抗病毒和細胞保護活性可以與那些干擾素相比，其在100IU抑制BVDV導致的CPE，其是用于BVDV體系中干擾素的抗病毒活性的EC9。[20，21]。在如400微克/毫升以上的高劑量，遺傳霉素被證明具有細胞毒性，由在這些濃度細胞活性的下降曲線反映。本發明還表明，遺傳霉素阻礙與NADL介導的細胞病理學相關的單分子層破裂。遺傳霉素的這種抗病毒活性感染后72-120小時可以觀察出，表明病毒的傳播受到抑制。此外，病毒復制的特性，通過測量進入細胞細胞培養基的傳染性病毒，表明在感染后24和48小時，遺傳霉素(6-25微克/毫升)抑制BVDV的NADL和NY_1株二者的病毒產量10到100倍(圖2)。在感染的第一個48小時遺傳霉素明顯減少病毒產量至低于10%控制水平。雖然不想以任何具體的理論進行限制，根據在我們研究中使用的病毒滴度方法的事實，只有測量進入培養基中的活性傳染性顆粒的釋放，人們可以得出遺傳霉素抑制病毒釋放或降低病毒顆粒的傳染性。遺傳霉素在濃度為25微克/毫升對病毒蛋白NS3，BVDV轉譯的標記物沒有影響，在10的多重感染(MOI)感染后24小時(圖4)。24小時時間點被用來證明穩定的BVDV轉譯，因為高MOI(例如，MOI值為10)和稍后的時間點，病毒細胞病理學和細胞死亡發生，使分析不可靠的[14]。此外，遺傳霉素不阻止NS2-NS3蛋白的處理(圖4)，其通常被觀察為BVDV的非致細胞病變株，表明遺傳霉素介導的細胞保護作用不是由于對病毒蛋白處理的抑制。另外，120kDa條帶的NS2-NS3，通常在感染ncpBVDV過程中被觀察到，不能在遺傳霉素處理或感染NADL的未經處理細胞中找到。這些數據表明，遺傳霉素盡管蛋白質合成抑制劑(15，16)，但是不直接通過抑制轉譯或復制而抑制病毒產量。此外，由于病毒進入在轉譯之前，所以極不可能的是遺傳霉素在轉譯之前阻止病毒生理反應。此外，假定轉譯與RNA數量成比例，則遺傳霉素不可能阻止RNA轉錄。因此，遺傳霉素控制活性病毒的組裝或釋放，或者它降低病毒顆粒的傳染性。該結論也得到菌斑測定的支持，其中均勻6和12微克/毫升的遺傳霉素顯著減小菌斑大小，而不影響菌斑數量。氨基糖管類被認為通過干涉病毒進入以及抑制病毒RNA的轉譯來抑制病毒復制(17-19);但遺傳霉素對BVDV的抗病毒行為是唯一不同的，因為其機制似乎與隨后的病毒轉譯、處理和復制的時間有關。要確定是否遺傳霉素調控病毒RNA的復制，用RT-qPCR測定病毒RNA的細胞內累積。在用BVDV(M015)感染后24小時，并缺乏或存在不同濃度遺傳霉素情況下細胞內病毒RNA的數量無差異。此外，抗病毒濃度的遺傳霉素無法抑制病毒RNA在感染24小時在細胞內累積后也提示需要病毒RNA合成的病毒NS5B被成功地轉譯和處理。因此，病毒RNA的復制不由遺傳霉素調控。表1顯示遺傳霉素的抗病毒活性的總結。細胞病變效應檢測(CPEA)是病毒引起細胞死亡的測定；產生的值保護50%的細胞免受病毒引起死亡的藥物有效濃度(EC5。)。產量減少檢測是感染的細胞釋放的活性感染性病毒顆粒數目的測定；產生的值是降低病毒滴度50%的藥物有效濃度(EC5。)。殺死50%細胞所需的細胞中毒濃度被定義為(1:5。，且是對藥品內在毒性的測定。雖然不想以任何特定的理論進行限制，目前的數據表明遺傳霉素以及可能的其它含有2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖成分的抗病毒劑減小了病毒顆粒的感染性并抑制病毒的傳播和改善病毒感染的癥狀。表1.遺傳霉素對黃病毒和瘟病毒的抗病毒活性的總結<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>aDV=登革熱病毒，YFV=黃熱病毒，BVDV=牛病毒性腹瀉病毒bBHK=幼倉鼠腎，BND=寬吻海豚細胞，MDBK=馬-達氏牛腎eCPEA=細胞病變效應檢測(CPEA)，檢測細胞死亡；EC5。=保護50%的細胞免受病毒引起死亡的藥物有效濃度產量減少檢測是感染的細胞釋放的活性感染性病毒顆粒數目的測定；產生的值是降低病毒滴度50%的藥物有效濃度dYRA=產量減少檢測。檢測感染的細胞釋放的活性感染性病毒顆粒數目的減少EC5。=使病毒滴度降低50%的藥物有效濃度6CC5。=殺死50%細胞所需的細胞中毒濃度fnd=未定遺傳霉素具有不可逆轉的耳毒性和腎毒性的可能，如大多數氨基糖苷類一樣。毒性較低的新類似物將大大有助于治療和/或與預防正義單鏈RNA包膜病毒感染。斜勾-雄條藩成,分遺傳霉素的結構-功能分析，與其接近結構類似物卡那霉素B和慶大霉素比較，發現只有遺傳霉素具有對cpBVDV活性，通過顯著提高感染細胞的活力顯示(圖3)。此外，慶大霉素和卡那霉素再實驗濃度下降低感染細胞的細胞活力。所有這三個化合物結構上有共同的環n(2-脫氧鏈霉胺類)，表明遺傳霉素的正義單鏈RNA包膜的抗病毒活性與環II沒有關系。此外，慶大霉素和遺傳霉素關于環III是相同的，從而排除它作為抗病毒成分。因此，環I，2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖(式I)，似乎確定遺傳霉素作為正義單鏈RNA包膜的抗病毒劑的特性。當確認時，不包含2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖成分的其它有關氨基糖苷類，如巴龍霉素，沒有對BVDV的抗病毒活性。此外，結構上不相關的抗生素，例如，四環素和夫西地酸，對BVDV無效。此結構-功能分析不同于蛋白質合成的氨基糖苷類抑制，通過結合到30S核糖體的A點(20)，對此遺傳霉素特性約束與環II的存在相關(圖3A)(21)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>式I關于環I的化學結構，遺傳霉素的2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油_D_葡糖-吡喃庚糖成分，吡喃糖環的碳_3和碳_4(式I和圖3A)用羥基取代，并在兩個取代中相同和配置為卡那霉素的環I的結構(圖3A)，其沒有抗病毒活性。然而，對于遺傳霉素，在2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖成分的碳_6上的取代不同于卡那霉素的環I，醇作為通過碳-6的附加甲基取代的仲醇。因此，這兩個化合物的結構相關的差異與吡喃糖環外部的碳原子，碳_6的官能化相關。仲羥基加上位置_6上甲基取代的組合給遺傳霉素至小亞基核糖體最低的親和力(明哥特_勒克萊爾等，1999年；普菲斯特PS等2005)。這些觀察表明，對遺傳霉素抗病毒活性的結構要求不同于那些確定轉譯的抑制，并支持結論2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖成分負責遺傳霉素的正義單鏈RNA包膜抗病毒活性。本發明的一個實施例提供下式II表示的抗病毒化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>式II其中&包括H、環烷基、碳水化合物、肽或核苷酸基團其中R2和R3各獨立地包括H、烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、卣代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、鹵代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素其中R4、R5和R6各獨立地包括0R2、鹵素、S(0)nR8、CR具。Rn、CH20R、CN、C02R、C0NR12R13和服12113，其中R和R8-R13獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基、雜芳基烷基，并且n=0-2附帶條件是當R2和R3=H，且R4、R5和R6=0H時，&不包括H。本發明優選的化合物包括式H表示的那些化合物，其中&選自H和環己胺類似物鏈霉胺和2-脫氧鏈霉胺組成的群組，R2和R3是H，以及R4、R5和R6是0H。此處所述的術語"低烷基"包括支鏈和直鏈Q到C6烷基。術語"環烷基"包括C3到Q。環烷基，例如環丙基、環己基和環癸基。術語"脂肪酸"包括飽和或不飽和、直鏈或支鏈的Q-C^羧酸。組合物本發明的另一個實施例提供包括或基本上由抗病毒劑組成的組合物，其包括2_氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖成分和/或能抑制正義單鏈RNA包膜病毒傳播和感染的其類似物，藥劑學上可接受的載體，當以生理學上合適的方式試用至多細胞生物體，如人類或動物時，降低所述生物體內的RNA病毒的滴度并預防或改善所述生物體內感染有關的癥狀的發生。本發明的抗病毒劑可以包括2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖-吡喃庚糖本身或其類似物。所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分可以如上述進行修飾或不修飾。一種優選的抗病毒劑是遺傳霉素。所述的組合物的抗病毒劑存在的濃度以重量計從約0.001%到約40%，優選為以重量計從約0.1%到約1%。所述組合物也可以進一步包括一種或多種添加劑，例如抗菌劑、抗病毒劑、抗真菌劑、止痛劑、抗氧化劑、緩沖劑、遮光劑、化妝用劑、芳香劑、潤滑劑、油齊U、增濕齊U、醇、干燥齊U、防腐齊U、乳化齊iJ、增稠齊iJ、清潔齊iJ、增塑齊iJ、滲透促進劑，或它們的混合物。此外，藥劑學上可接受的載體無結合至核糖體RNA的組分并抑制包膜病毒蛋白質的轉譯，和/或病毒顆粒的組裝或釋放。可以使用各種載體，只要它們與人體或動物的血液和組織相容，以使所述組合物可以被注射或吸收而不導致有害的生理效果或干擾活性成分的功能。對于水溶性抗病毒劑，所述載體可以是水。此外，所述的組合物可以進一步包括附加抗病毒劑。具體而言，通過不同于遺傳霉素及其類似物機制的行為抑制病毒復制的抗病毒劑，當其與本發明的抗病毒劑結合時，可以增強抗病毒反應并允許減少劑量，從而減小毒性和使不期望的副作用最小化。而且具有不同機制的行為的此類抗病毒劑的結合可以用于減小病毒發展耐藥性的傾向。此類抗病毒劑的例子包括干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。本發明的一個代表性可注射實施例包括2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖_吡喃庚糖和/或其類似物，濃度從約0.Olmg/mL至約500mg/mL，懸浮在等滲氯化鈉的載體溶液中，該載體溶液包含適當的防腐劑，諸如約O.1至約1.5%苯甲醇，穩定劑，諸如約0.25至約1%羧甲基纖維素鈉和約0.005至約0.1聚山梨醇酯80，加上足量氫氧化鈉或鹽酸以調節pH至約5.0至約7.5之間(所有百分比都以重量計)。病毒本發明含2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖-吡喃庚糖基的抗病毒劑選擇性用于正義單鏈RNA包膜病毒。負義單鏈RNA包膜病毒，例如流感病毒，以及雙鏈DNA病毒，例如，單純皰疹病毒(HSV)和乙型肝炎病毒(HBV)不受影響。典型的正義單鏈RNA包膜病毒包括丙肝病毒(HCV)、西尼羅病毒(WNV)、黃熱(YFV)、登革熱病毒(DV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、馬動脈炎病毒(EAV)和辛德畢斯病毒(SINV)。正義單鏈RNA包膜病毒的一個科，黃病毒具有單分體、線性、正極性的單鏈RNA基因組、長度9.6-12.3kb。病毒顆粒被包覆且為球形。在所述科中有幾個屬，包括黃病毒屬，具有黃熱病病毒、西尼羅病毒和登革熱病毒種；肝炎病毒屬，唯一丙肝病毒種；以及瘟病毒屬，包括牛病毒性腹瀉病毒和馬動脈炎病毒(EAV)種，其它感染非人類的哺乳動物。由黃病毒科所造成的主要疾病包括登革熱、圣路易斯腦炎、西尼羅腦炎、黃熱病和丙型肝炎。辛德畢斯病毒(SINV)是披膜病毒科的成員，在甲病毒亞科。該病毒由蚊子傳播并導致人體辛德比斯熱，癥狀包括關節痛、皮疹和不適。類似物關于遺傳霉素的環I，2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油_D_葡糖-吡喃庚糖基成分(式I;同樣式II，其中R15R2和R3=H，以及R4，R5和R6=OH)可以利用各種修飾基團進行官能化以形成與本發明的抗病毒劑一樣活性的衍生物。例如，連接至碳-3，_4，和/或-6羥基可被官能化以形成衍生物。在非限制的例子中，羥基可以利用鹵代烷或其它烷化劑烷基化以形成烷氧基團，使用本領域技術人員熟知的方法。作為選擇，使用諸如酰氯或酸酐的酰化劑，例如醋酸酐，酰化羥基以形成酰氧基。同樣，連接至碳-2的氨基可以被烷基化或酰基化以分別形成烷和酰胺基。例如，酰基基團可以是脂肪酸，具有4-28碳范圍；和烷基基團可以是具有l-6碳范圍的低烷基，如甲基、乙基、正丁基或正己基。附加的修飾或官能化基團包括烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基、卣代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、卣代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素。本文中所使用的術語"類似物"包括上述衍生物，其中2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分已被利用各種修飾基團取代或官能化。該術語還包括下述的分子，其中一個核心分子的一個或多個功能團，例如，羥基或氨基，已被其它原子或基團取代。此外術語"類似物"也包括2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖與其他生物相關分子的軛合物，例如，肽和其他碳水化合物，如下所述。關于等量取代化學，2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖-吡喃庚糖基成分的羥基和/或氨基基團可以利用鹵素取代，如氟和氯。其它羥基和/或氨基取代可以包括S(0)nR、0R、酰氧基、CR^RpCH2OR、CN、C02R和CONR凡，其中R、&、R2、R3獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基和雜芳基烷基，并且n=0-2，該合成方法對本領域技術人員是熟知的。修飾的具體有用方面是碳-6羥基基團，在吡喃糖環外部。式III的化合物是羥基基團的衍生物，如上所述。下面式IV的化合物是類似物，其中6-羥基基團已由另一功能基團(X)取代，如上所述。式III<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>式IV2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖與碳水化合物、脂肪酸、肽或核酸、以及它們的衍生物的軛合物，在治療多細胞生物體特別是人類的正義單鏈RNA包膜病毒感染中也有用，降低病毒顆粒的傳染性，從而抑制病毒的傳播及改善的病毒感染癥狀。修飾或未修飾2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分的軛合物可以包括但不限于碳水化合物、其它氨基糖、氨基糖等排物，例如，鏈霉胺和2-脫氧鏈霉胺、脂肪酸、肽和/或核酸、以及它們的衍生物和類似物。此處上文所述的結構修飾影響親脂/親水平衡(也稱為LogP或LogK。J、水溶性、極性和其它直接與藥物吸收和分布有關的理化特性。這種修飾可以提高本發明的抗病毒制劑的療效。它們可能也有助于緩和潛在毒性。治療的方法在另一個實施例中，本發明提供一種用于治療多細胞生物體特別是人類的正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法，包括給感染了RNA包膜病毒的生物體以生理學上適當的方式施用一組合物，其中該組合物包括至少一種抗病毒劑，其包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7_雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖或其類似物，其可以抑制正義單鏈RNA包膜病毒組裝、釋放和/或傳播，以及藥劑學上可接受的載體。優選的抗病毒劑包括遺傳霉素或其類似物。抗病毒效果是通過降低病毒顆粒的傳染性實現。此治療可以用于預防最初感染，減慢存在的感染進程或改善存在正義單鏈RNA包膜病毒感染或病毒爆發期的癥狀。所述抗病毒劑存在的濃度以重量計從約0.001%到約40%，優選以重量計約0.1%至約1%。所述的組合物至少每日被施用一次，并在包括至少一日的時間段。所述的治療方法還包括診斷所述正義單鏈RNA包膜病毒在所述生物體內的臨床癥狀的初步步驟。這些臨床癥狀包括可檢測的體液中的病毒抗體存在、體液中的病毒滴度的診斷水平、疼痛、腫脹、發高燒、炎癥、發紅、麻剌感、癢、皮膚損傷、或它們的組合。所述治療正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法還可包括一組合物的使用，該組合物進一步包括一添加劑，例如抗菌齊U、穩定齊U、抗真菌齊U、止痛齊U、抗氧化齊U、緩沖齊U、遮光齊U、化妝用齊U、芳香齊U、潤滑齊U、油齊U、增濕齊U、醇、干燥齊U、防腐齊iJ、乳化齊iJ、增稠齊iJ、清潔齊iJ、增塑齊iJ、滲透促進劑，或它們的混合物。此外，所述治療正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法還可包括一組合物的使用，該組合物進一步包括附加抗病毒劑。具體而言，通過不同于遺傳霉素及其類似物機制的行為抑制病毒復制的抗病毒劑，當其與本發明的抗病毒劑結合時，可以增強抗病毒反應并允許減少劑量，從而減小毒性和使不期望的副作用最小化。而且具有不同機制的行為的此類抗病毒劑的結合可以用于減小病毒發展耐藥性的傾向。此類附加抗病毒劑的例子包括干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。所述組合物的施用可以是局部、口服、舌下、粘膜、經膜、皮下、靜脈、肌肉、含服、腸外、陰道、肛門、經皮、側腦室注射、經由離子電泳作用，或它們的組合。本發明的另一實施例提供防止正義單鏈RNA包膜病毒感染傳播的方法。該方法包括給感染了正義單鏈RNA包膜病毒的生物體以生理學上適當的方式施用一組合物，其中該組合物包括至少一種含有氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖或其類似物的抗病毒劑，以及藥劑學上可接受的載體。通過降低病毒顆粒的傳染性抑制病毒傳播。優選的抗病毒劑是遺傳霉素或其類似物。實例實例1.原料與方法化學藥品所有的細胞培養用品獲得自英杰(Invitrogen)(卡爾斯巴德，加利福利亞，美國)。除非列明，所有其他試劑都是由SigmaAldrich(圣路易斯，密蘇里州，美國)提供。細胞和病毒MDBK細胞(ATCC-CCL22)種在含4.5克葡萄糖4.5和10%馬血清的達樂伯克改良培養基(DMEM)中，或在最低必需培養基(MEM)具有10%無BVDA抗體的照射胎牛血清。在細胞培養基或只在模擬感染的細胞培養基中，50到70%融合細胞的單層感染了斑純化cpBVDV株NADL或ncpBVDV株NY-1。在我們的研究中使用的cpBVDV的滴度足以產生0.1到0.5感染(MOI)的輸入多重性。經過利用病毒在細胞培養孵化l小時(5%二氧化碳，37°0的初步培養，培養基中已更改為新的無病毒培養基。對于氨基糖甙類或干擾素的實驗，藥品以所需最終濃度加入至50到70%的融合細胞單層并接著成長另外24到72小時。干擾素被用作積極抗病毒控制。細胞生活力MDBK細胞以密度l-2xl(f細胞/孔鍍在96孔板中。在初始感染后1小時隨后的一日，清洗細胞并將含有不同濃度的抑制劑添加至細胞并和培養所需時間。細胞生活力被使用刃天青(resaruzin)(奧爾馬爾藍色(almarBlue))指示劑染料評估[10]。染料轉換(AFU)的定量分析測定用具有激發/發射=550/580nm熒光板讀出器測量。對于毒性研究，細胞生活力表現為控制百分比(AFUtaated/AFU。。ntral)。細胞生活力的藥物介導的保護表示如下的存活百分比％存活=[(AFUt咖ted)BVDV-AFU一jBVDV]/[(AFU。。—》模擬-(AFUe。ntral)BVDV]，其中(AFUteeated)BVDV是感染BVDV并用一定遺傳霉素稀釋液治療的細胞的AFU，(AFUe。ntMl)BVDV是感染BVDV并不治療的細胞的AFU，和(AFUe。ntral)是模擬感染并不治療的細胞的AFU。50%有效濃度(EC5。)被定義為提供了對病毒引起細胞病變效應的細胞的50%保護的化合物的濃度，并利用對數內插法計算[11]。16[OO93]板生活力試驗MDBK細胞被BVDV的NADL株感染，MOI為0.1并分布到膠原涂層，24孔板。在培養6小時后，在37t:和5%二氧化碳下用磷酸緩沖液(PBS)清洗細胞一次，隨后將2.5%甲基纖維素加入含5X熱滅活馬血清的匿EM的培養基。5日后進行結晶紫染色。測定病毒滴度12孔組織培養板的每個孔種有1.5xl05MDBK細胞并在37。C具有5%二氧化碳下培養24小時。然后，在去除培養基和沖洗單層之后，細胞感染BVDV約1到2的M01以確保感染效率。接著病毒在4t:被吸收到細胞1小時并在增加生長培養基中遺傳霉素所需的濃度之前用冷PBS沖洗。在感染后24小時和48小時，從每個孔收獲0.25ml等分試樣的上清液并在進一步病毒滴度分析之前在-7(TC下儲存。要確定病毒滴度，制備收獲的上清液的10倍稀釋液(10—1到10—8)且50微升每份稀釋液被置于8個直立孔中的每個孔，96孔板的每份稀釋液含有50微升MDBK細胞。細胞然后在37t:培養96到120小時且孔由于病毒的細胞病變效應(CPE)而被記下，以根據里德-明希(Reed-Muench)確定病毒滴度[12]。對于ncpBVDV(NY-l)，滴度板在120h利用20%丙酮固定。用BVDVMAb20.10.6利用免疫過氧化物試驗系統檢測存在的病毒。病毒NS3蛋白免疫印跡(WesternBlot)分析在存在或不存在25微克/毫升遺傳霉素情況下MDBK細胞感染BVDV的NADL株(MOI10)。根據以前的出版物[13]，18到24小時感染后時間點被選擇以確定感染細胞中的病毒蛋白質。此外，以前曾表明在MDBK細胞中在36小時，具有高MOI，細胞單層惡化非常迅速，導致病毒誘導的細胞死亡[14]。因此，在24小時感染后，細胞培養液被去除，細胞用PBS洗幾次。接著，2x濃縮的電泳樣品緩沖液被加入，從盤上刮下細胞并轉移至微型離心機。為了降低粘度，樣本簡短地經聲波處理或通過26規針多次并煮沸5分鐘。15微克溶菌樣本連續10%SDS-PAGE，然后被轉漬。在封閉液中封閉1小時(PBS中0.05%吐溫20中5%奶粉)，膜被培養養具有一抗(MAb20.10.6)[15]1:1，000稀釋在封閉液中60分鐘，室溫并并PBS中0.05%吐溫20清洗。在利用二抗(抗'鼠IgG-HRP;西格瑪)培育之后，l:200稀釋封閉液60分鐘，室溫，NS3被利用阿默舍姆(Amersham)ECL試劑盒根據制造商的指示檢測(阿默舍姆生物科學，皮斯卡塔韋，新澤西州，美國)。檢測細胞內病毒RNA的RT-PCR技術定量使用感染后24小時時間點，因為整體病毒RNA合成在感染后48小時在感染細胞中下降約兩至三倍，所述在感染細胞在病毒生產減少可能是由于在該高MOI觀測的快速細胞死亡[14]。因此，在存在或缺席6和12微克/毫升遺傳霉素情況下，在用BVDV的NADL株(MOI10)感染后24小時，培養基被從細胞單層去除并用PBS洗3次。使用RNAeasy試劑盒(恰根，瓦倫西亞，加利福利亞，美國)分離RNA。50微升RT定量PCR(qPCR)是根據先前的出版物[16]進行，利用相應核苷酸103'123(5-TAGCCATGCCCTTAGTAGGAC-3)的前置引子、相應核苷酸176196(5-GACGACTACCCTGTACTCAGG-3)的反置引子和TaqMan探針(6:羧基熒光素-AACAGTGGTGAGTTCGTTGGATGGCTT-6-羧基四甲基羅丹明)。PCR擴增包括在94。C變性40周期20s和退火和延長1分鐘在62°C的ABI7000序列檢測器。在三個復制反應中所有樣本進行了分析。圖1顯示，遺傳霉素對NADL介導的細胞毒作用保護在感染后72小時。頂部畫面顯17示遺傳霉素(31-250微克/毫升)對MDBK細胞生活力無影響。細胞生活力表示為遺傳霉素治療細胞對控制(未治療)細胞的細胞生活力百分比。底部畫面顯示遺傳霉素(1.5-25微克/毫升)提高感染細胞的細胞生活力，相比未經處理的病毒感染細胞。細胞生活力表示為遺傳霉素治療的NADL感染的細胞對未治療的感染細胞的細胞生活力百分比。細胞生活力在96孔板中估定，用刃天青(Resaruzin)(奧爾馬爾藍色)指示劑染料(22)。染料轉換的定量分析測定用具有激發/發射=550/580nm熒光板讀出器測量。誤差線顯示每一濃度的遺傳霉素(n=6)的標準誤差。實例2.圖2顯示遺傳霉素抑制病毒載量在感染NADL或NY-1的MDBK細胞中。畫面A顯示遺傳霉素，6、12和25微克/毫升，在感染后24、48和72小時對NADL的活性病毒滴度的影響。畫面B顯示遺傳霉素，6、12和25微克/毫升，在感染后24、48和72小時對NY-1的活性病毒滴度的影響。根據里德_明希測定病毒滴度(斯佩克特，S.和隆茨，G.，1986年，臨床病毒學手冊，Elsevier科學出版有限公司，紐約，pp.194，斯奈德，M.L.，斯圖爾特，W.C.，克雷瑟，J.l，PRV和TGE微型化中和試驗，1981年，血清微型化技術，NVSL，USDA，埃姆斯，艾奧瓦州，pp.44-45)，分別使用NADL或NT-1的CPE或NS3Mab20.10.6。誤差線表示每個時間點和遺傳霉素(n=3)規定的濃度的標準誤差。實例3.圖3顯示遺傳霉素介導的對NADL的細胞保護作用，相比卡那霉素和慶大霉素。畫面B顯示只有遺傳霉素提供對NADL的細胞保護作用。所有氨基糖苷類使用6，12和25微克/毫升。細胞生活力在96孔板中估定，用刃天青(奧爾馬爾藍色)指示劑染料(22)。染料轉換的定量分析測定用具有激發/發射=550/580nm熒光板讀出器測量。誤差線顯示每一氨基糖苷和指定濃度的標準誤差。實例4.圖4顯示遺傳霉素對NS3的轉譯和處理無影響。畫面A:在缺席或存在25yg/ml遺傳霉素情況下MDBK細胞感染BVDV的NADL株，并在感染后24小時，膜和胞液碎片被制備。樣本經過SDS-PAGE和免疫印跡分析，利用NS3的一抗(Mab20.10.6)。畫面B顯示在存在6和12iig/ml遺傳霉素情況下感染BVDV的NADL株的MDBK細胞中細胞內病毒RNA在感染后24小時的逆轉錄定量PCR分析。病毒RNA表達被定義為從遺傳霉素處理的感染細胞收集的病毒RNA對從未處理的感染細胞檢測的RNA的百分比。誤差線表示每個指定的條件(n=3)的標準差。實例5.這個例子描述本發明的使用遺傳霉素的注射用組合物。遺傳霉素，O.l-10mg/kg，溶解在含1.0%防腐劑苯甲醇和1%羧甲基纖維素鈉和0.05%吐溫80作為穩定劑的等張氯化鈉的無菌載體溶液中。利用氫氧化鈉或鹽酸調整PH到7.0。實例6.這個例子描述本發明的注射用組合物，使用2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖_吡喃庚糖和其它附加抗病毒劑干擾素。2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，O.l-10mg/kg，溶解在含1.0%防腐劑苯甲醇和1%羧甲基纖維素鈉和0.05%吐溫80作為穩定劑的等張氯化鈉的無菌載體溶液中。利用氫氧化鈉或鹽酸調整18pH到7.0。加入干擾素IOOOIU。實例7.這個例子說明本發明所述的治療登革病毒感染的方法。顯示登革出血熱(DHF)癥狀的病人每日注射實例5的組合物，注射7日。所述劑量范圍從0.1到10mg/kg。實例8.這個例子說明本發明所述的治療HCV感染的方法。病人被診斷為具有HCV的臨床癥狀，包括血液中HCV的存在。該病人每日注射實例6的組合物，注射至少30日。本發明的抗病毒劑的劑量范圍從0.1到10mg/kg。檢測血液中HCV的存在。持續反應意味病人在體制治療6個月保持無HCV。這并不意味著病人痊愈，但在體內活性HCV水平非常低且可能不造成很大損害。本領域技術人員將會認識到前述實例是為了舉例說明本發明，而不是為了限制本發明于所揭示的具體形式。被本發明和所附權利要求包含的其它實施例可以被預想到。[cms]參考文獻1.沃特HJ，瑟夫LB.丙型肝炎病毒感染恢復、持久性和后遺癥長期結果的觀點，西民肝病2000;20(1):17-35。2.科恩J.丙型肝炎的科學挑戰，1999年7月2日;285(5424):26-30。3.登革熱/登革出血熱，威克利流行病學研究，2000年6月16日，75(24):193-6。4.利特MS，安德森DK，瑞特澤爾E.BVDV與黃病毒科成員病毒性比較，J.根.崴歐爾，1988年10月，69(pt10):2637-43。5.布朗利J.，克拉克MC，，霍華德CJ，致命牛粘膜病的實驗生產，獸醫研究，1984年6月2日，114(22):535-6。6.柏林SR，邁克魯肯RC，卡特利MF，通過重復感染細胞病變BVDV感染非細胞病變BVDV在牛體內產出的嚴重臨床疾病，阿姆J維特研究，1985，3，46(3):573-6。7.布朗利J.BVDV發病機制病毒生物型的途徑，ArchVirolSu卯l，1991年，3:79-96。8.別克沃德VE，比爾BE，多尼RO，BVDV作為丙型肝炎病毒的抗病毒制劑代理模型評價抗病毒劑，抗病毒研究，2003年9月；60(1):1-15。9.格里菲思JK，巴納克瑞松森納R，威德默G，特茲坡瑞S和巴龍霉素和遺傳霉素抑制細胞內隱孢子蟲而不影響通過宿主細胞的細胞質藥物輸送含義，感染與免疫，1998年8月，66(8):3874-83。10.霍華德MT，謝特斯BH，彼得LM，弗拉尼KM，解斯特蘭德RF，阿特金斯JF，氨基糖甙類序列特異性誘導停止通讀治療杜氏肌影響營養不良含義，A皿Neurol.2000年8月，48(2):164-9。11.斯蒂芬森J.抗生素顯示保證治療遺傳性疾病，賈馬，2001.4.25,285(16):2067-8。12.巴頓-戴維斯ER，科迪爾L，肖特瑪DI，利蘭德SE，斯威尼HL，氨基糖甙類抗生素恢復mdx鼠的肌營養不良蛋白功能，JClinInvest.1999.8月，104(4):375-81。13.丹尼爾森KG，納珀爾JE，肯特爾FS，比特爾JS，梅迪納D，德班EM，鼠標乳腺細胞，COMMA-D，保留在體內克隆形態發生能力，InVitroCellDevBiol。1989年6月，25(6):19535-43。14.桑泰爾RF，艾倫NE，小霍布斯JN，饒RN，施密特RJ，對潮霉素B和G418篩選的顯性L細胞在小鼠抗選擇標記基因的原核表達，基因，1984年10月，30(l-3):147-56。15.卡巴納斯MJ，威茲克孜D，莫多萊J.通過氨基糖苷類抗生素轉譯的核糖體易位的抑制，生化生物物理研究通訊，1978年8月14日，83(3):991-7。16.尤斯蒂斯DC，威廉JM，真核蛋白質的合成中氨基糖苷類的行動機制，AntimicrobAgentsChemother.1984年7月，26(1):53-60。17.朗格蘭德N，哈爾L，霍爾姆森H.新霉素抑制BHK細胞的HSV1感染，生化生物物理研究通訊，1986年11月26,141(1):198-203。18.朗格蘭德N，奧揚AM，馬斯登HS，克若斯A，葛洛瑞搜JC，摩爾LJ，等，在單純皰疹病毒1型定位吸附至細胞受體的編碼蛋白質區域，JVirol.1990年3月，64(3):1271-7。19.扎普ML，斯特恩S，格林MR，選擇性阻止RNA結合的艾滋病毒的小分子蛋白抑制病毒的功能和生產，細胞，1993年9月24,74(6):969-78。20.本維尼斯特R，戴維斯J.氨基糖甙類抗生素中的結構-活性關系羥基和氨基團體的作用，AntimicrobAgentsChemother.1973年10月，4(4):402-9。21.維桑Q，韋斯特夫E.綁定到細菌16S核糖體RNAA點低核苷酸的遺傳霉素晶體結構，JMolBiol.2003年2月28日，326(4):1175-88。22.馬茲歐EA，索里曼kF，膠質瘤細胞相對于多巴胺產生的活性氧樣本的抗氧化能力，JA卯lToxicol.2004年03年4月，24(2):99-106。權利要求一種式II的化合物其中R1包括H、環烷基、碳水化合物、肽或核苷酸基團其中R2和R3各獨立地包括H、烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素其中R4、R5和R6各獨立地包括OR2、鹵素、S(O)nR8、CR9R10R11、CH2OR、CN、CO2R、CONR12R13和NR12R13，其中R和R8-R13獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基、雜芳基烷基，并且n＝0-2附帶條件是當R2和R3＝H，且R4、R5和R6＝OH時，R1不包括H。FPA00001014008000011.tif2.如權利要求l所述的化合物，其中&選自鏈霉胺或2-脫氧鏈霉胺組成的群組R2和R3是H以及R4、R5和R6是0H。3.—種用于治療正義單鏈RNA包膜病毒感染的組合物，包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物。4.如權利要求3所述的組合物，其中所述組合物降低病毒顆粒的傳染性。5.如權利要求3所述的組合物，其中所述病毒感染由選自以下組成的群組中的正義單鏈RNA包膜病毒引起丙肝病毒(HCV)、西尼羅病毒(WNV)、黃熱(YFV)、登革熱病毒(DV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、馬動脈炎病毒(EAV)和辛德畢斯病毒(SINV)，或所述病毒的組合。6.如權利要求3所述的組合物，其中所述氨基糖苷成分包括至少一個未修飾的2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分。7.如權利要求3所述的組合物，其中所述氨基糖苷成分包括至少一個2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分的軛合物。8.如權利要求3所述的組合物，其中所述氨基糖苷成分包括遺傳霉素或其類似物。9.如權利要求8所述的組合物，其中所述遺傳霉素的類似物利用所述2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖基成分的至少一個修飾基團進行官能化。10.如權利要求3所述的組合物，其中所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖_吡喃庚糖基成分利用一修飾基團進行官能化。11.如權利要求10所述的組合物，其中所述碳_6的羥基基團被利用修飾基團官能化。12.如權利要求10所述的組合物，其中所述修飾基團選自以下組成的群組烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、卣代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、卣代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素。13.如權利要求ll所述的組合物，其中所述修飾基團選自以下組成的群組烷基、環烷基、羥烷基、烷氧基烷基、卣代烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烯基、烯基烷基、炔基、炔基烷基、酰基、芳酰基、雜芳酰基、氨基羰基和烷氧基羰基，所有這些基團可以任選地被以下基團取代羥基、烷氧基、烷基、卣代烷基、卣代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷硫基、烷基亞硫酰基、烷基磺酰基、氰基、硝基和/或鹵素。14.如權利要求3所述的組合物，其中所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖_吡喃庚糖基成分的羥基或氨基基團中的一個利用選自以下群組的取代基取代鹵素、S(0)nR、NR^2、0R、酰氧基、CRil^RpCH20R、CN、C02R、CONR^，其中R、&、R2、R3獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基和雜芳基烷基，并且n=0-2。15.如權利要求14所述的組合物，其中所述碳-6的羥基利用選自以下群組的取代基取代:鹵素、S(0)nR、NR凡、0R、酰氧基、CR鵬、CH20R、CN、C02R、CONR^,其中R、R"R2、R3獨立地選自以下組成的群組H、烷基、環烷基、烷氧基烷基、鹵代烷基、芳烷基和雜芳基烷基，并且n=0-2。16.如權利要求3所述的組合物，其中所述2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油_D_葡糖_吡喃庚糖基成分的所述2-氨基基團被利用酰基基團官能化。17.如權利要求16所述的組合物，其中所述酰基基團是一脂肪酸。18.如權利要求3所述的組合物，其中所述2-氨基-2，7-雙脫氧-a_D_甘油_D_葡糖_吡喃庚糖基成分的所述2-氨基基團被酰基取代。19.如權利要求18所述的組合物，其中所述酰基基團是甲基。20.如權利要求3所述的組合物，其中所述的組合物還包括藥劑學上可接受的載體且該載體無結合至核糖體RNA的組分并抑制包膜病毒蛋白質的轉譯，和/或病毒顆粒的組裝或釋放。21.如權利要求3所述的組合物，其中所述氨基糖苷成分存在的濃度以重量計從約0.001%到約40%。22.如權利要求3所述的組合物，其中所述組合物進一步包括至少一種添加劑。23.如權利要求22所述的組合物，其中所述添加劑選自以下組成的群組抗菌劑、穩定齊U、抗真菌齊U、止痛齊U、抗氧化齊U、緩沖齊U、遮光齊U、化妝用齊U、芳香齊U、潤滑劑、油齊U、增濕齊U、醇、干燥劑、防腐劑、乳化劑、增稠劑、清潔劑、增塑劑、滲透促進劑，或它們的混合物。24.如權利要求3所述的組合物，其中所述的組合物用于治療多細胞生物體。25.—種用于治療多細胞生物體中正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法，包括給感染了正義單鏈RNA包膜病毒的多細胞生物體施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。26.如權利要求25所述的方法，其中所述組合物降低病毒顆粒的傳染性。27.如權利要求25所述的方法，其中所述氨基糖苷成分存在的濃度以重量計從約0.001%到約40%。28.如權利要求25所述的方法，其中所述的組合物至少每日被施用一次。29.如權利要求25所述的方法，其中在包括至少一日的時間段，所述的組合物施用于所述生物體。30.—種用于治療多細胞生物體中正義單鏈RNA包膜病毒感染的方法，包括a)診斷所述正義單鏈RNA包膜病毒在所述生物體內表現的臨床癥狀；及b)給所述生物體施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2-氨基-2，7-雙脫氧_a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。31.如權利要求30所述的方法，其中病毒感染通過降低病毒顆粒的傳染性被抑制。32.如權利要求30所述的方法，其中所述臨床癥狀包括可檢測的體液中的病毒抗體存在、體液中的病毒滴度的診斷水平、疼痛、腫脹、發高燒、炎癥、發紅、麻剌感、癢、皮膚損傷、或它們的組合。33.如權利要求25所述的方法，其中所述藥劑學上可接受的載體進一步包括至少一種添加劑。34.如權利要求33所述的方法，其中所述添加劑選自以下組成的群組抗菌劑、穩定劑、抗真菌劑、止痛劑、抗氧化劑、緩沖劑、遮光劑、化妝用劑、芳香劑、潤滑劑、油劑、增濕劑、醇、干燥劑、防腐劑、乳化劑、增稠劑、清潔劑、增塑劑、滲透促進劑，或它們的混合物。35.如權利要求25所述的方法，其中所述組合物的施用可以是局部、口服、舌下、粘膜、經膜、皮下、靜脈、肌肉、含服、腸外、陰道、肛門、經皮、側腦室注射、經由離子電泳作用，或它們的組合。36.如權利要求30所述的方法，其中所述組合物的施用可以是局部、口服、舌下、粘膜、經膜、皮下、靜脈、肌肉、含服、腸外、陰道、肛門、經皮、側腦室注射、經由離子電泳作用，或它們的組合。37.—種用于防止正義單鏈RNA包膜病毒感染傳播的方法，包括給感染了正義單鏈RNA包膜病毒的生物體以生理學上適當的方式施用一組合物，該組合物包括氨基糖苷成分2_氨基_2，7-雙脫氧-a-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，或其類似物，以及藥劑學上可接受的載體。38.如權利要求37所述的方法，其中病毒感染通過降低病毒顆粒的傳染性被抑制。39.如權利要求3所述的組合物，進一步包括至少一種附加抗病毒劑。40.如權利要求39所述的組合物，其中所述的抗病毒劑選自以下組成的群組干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。41.如權利要求8所述的組合物，進一步包括至少一種選自以下組成群組的附加抗病毒劑干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。42.如權利要求25所述的方法，其中所述的組合物進一步包括至少一種附加抗病毒劑。43.如權利要求42所述的方法，其中所述的抗病毒劑選自以下組成的群組干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。44.如權利要求30所述的方法，其中所述的組合物進一步包括至少一種附加抗病毒劑。45.如權利要求44所述的方法，其中所述的抗病毒劑選自以下組成的群組干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。46.如權利要求37所述的方法，其中所述的組合物進一步包括至少一種附加抗病毒劑。47.如權利要求46所述的方法，其中所述的抗病毒劑選自以下組成的群組干擾素、三氮唑核苷和正亞氨基糖。全文摘要本發明涉及一種化合物、組合物和方法，包括式(II)表示的氨基糖苷成分，用于治療和預防正義單鏈RNA包膜病毒感染的傳播。本發明的一個實施例使用遺傳霉素或其類似物，包括2-氨基-2，7-雙脫氧-α-D-甘油-D-葡糖-吡喃庚糖，作為抗病毒劑。本發明所述的化合物、組合物和方法應用于丙肝病毒、西尼羅病毒、黃熱病毒、登革熱病毒、牛病毒性腹瀉病毒、馬動脈炎病毒和/或辛德畢斯病毒(SINV)導致的感染。文檔編號A61K31/70GK101772347SQ200880101722公開日2010年7月7日申請日期2008年6月6日優先權日2007年6月7日發明者亞歷山大·V·貝克,愛德華·J·杜博維,黑茲爾·H·司徒申請人:肝炎與病毒研究所