包含縮氨基脲和縮氨基硫脲的藥物組合物和治療炎癥、疼痛和發熱病癥和防止炎癥體征...的制作方法

專利名稱：：包含縮氨基脲和縮氨基硫脲的藥物組合物和治療炎癥、疼痛和發熱病癥和防止炎癥體征...的制作方法
技術領域：
：本發明申請要求保護包含至少縮氨基脲或縮氨基硫脲，或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物的藥物組合物，該組合物用于治療炎癥、發熱和疼痛的炎癥病癥、炎癥水腫和外周或中心神經性疼痛病癥或防止炎癥體征或癥狀。還要求保護包含至少縮氨基脲或縮氨基硫脲、或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物的組合物，并且治療有效量的這些化合物與藥物學上可接受的載體或賦形劑或者受控釋放系統混合在一起或包含其中，以溶液或固體狀態用于人類和獸醫使用。作為用于口服給藥的固體制劑的藥物學上可接受賦形劑的實例，可以例舉淀粉、乳糖、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、滑石和硬脂酸鎂，或其混合物。作為用于口服給藥的液體制劑的藥物學上可接受賦形劑的實例，可以例舉丙二醇、丙三醇、山梨糖醇、蔗糖、葡萄糖和果糖。作為用于非腸道給藥的液體制劑的藥物學上可接受賦形劑的實例，可以選擇聚乙烯吡咯烷酮、克列莫佛、吐溫80。
背景技術：
：縮氨基硫脲的通式其是具有廣泛生物學應用的化合物，呈現出抗腫瘤、抗病毒、抗細菌、抗瘧藥、抗結核病、抗真菌、抗HIV和抗痙攣活性[Beraldo，H.；Gambino,D.；MinireviewsinMedicinalChemistry,4,159,2004,West,D.X.；Padhye,S.B.；Sonawane,P.B.,StructureandBonding,76,1,1991；Dimmock,J.R.,Pandeya,S.N.,Quail,J.ff.,Pugazhenthi,U.,Allen,T.M.,Kao,G.Y.,Balzarini,J.,DeClercp,E.,Eur.J.Med.Chem.,30,303,1995]。縮氨基脲是上述化合物的類似物，其中氧置換了硫。許多研究報道了縮氨基脲的抗疫攣活性[Beraldo，H.；Gambino,D.；MinireviewsinMedicinalChemistry，4，159-165，2004；Dimmock,J.R.，Pandeya,S.N.，Quail，J.W.，Pugazhenthi,U.，Allen，T.M.，Kao,G.Y.，Balzarini,J.，De-Clercq，E.，Eur.J.Med.Chem.，30，303，1995；Dimmock,J.R.；Sidhu，K.K.；Thayer,R.S.；Mack，P.；Duffy,M.J.；Reid，R.S.；Quail，J.W.；Pugazhenthi,U.；Ong，A.；Bikker，J.A.；Weaver,D.F.，J.Med.Chem.，36，16，1993；Dimmock,J.R.；Puthucode，R.N.；Smith，J.M.；Heltherington，M.；Quail，W.J.；Pughazen-ti，U.；Leshler,T.；Stables，J.P.，J.Med.Chem.，39，3984，1996]。特別地，源自芳香基縮氨基脲的化合物呈現出抗痙攣活性。[Kadaba，P.K.；Un，Z.；美國專利US5942527，1999；Dimmock,J.R.；Puthu-code，R.N.；W09640628,MX9709311,JP11506109，US5741818,1997；Fu-jibayashi,Y.；Yokoyama,A.；US5843400，1996]。已經報道了導致縮氨基脲和縮胺硫脲生物活性顯著改變的結構變化[West，D.X.；Padhye,S.B.；Sonawane,P.B.,StructureandBonding,76,1,1991；Kadaba,P.K.；Lin,Z.；US專利US5942527,1999]。在現有技術中，報道了縮氨基脲和縮氨基硫脲在兩個癲癇癥的實驗模型(戊撐四唑(PTZ)和最大電休克(MES)篩選)中呈現出抗痙攣活性[Dimmock，J.R.；Sidhu,K.K.；Thayer,R.S.；Mack,P.；Duffy,M.J.；Reid,R.S.；Quail,J.ff.；Pugazhenthi,U.；Ong,A.；Bikker,J.A.；Weaver,D.F.,J.Med.Chem.,36,16,1993；Dimmock,J.R.；Pandeya,S.N.；Quail,J.ff.；Pugazhenthi,U.；Allen,T.M.；Kao,G.Y.；Balzarini,J.；DeClercq,E.,Eur.J.Med.Chem.,30,303,1995；Dimmock,J.R.；Sidhu,K.K.；Tumber,S.D.；Basran,S.K.；Chen,M.；Quail,J.ff.；Yang,J.；Rozas,I.；Weaver,D.F.,Eur.J.Med.Chem.,30,287,1995；Dimmock,J.R.；Puthucode,R.N.；Smith,J.M.；Heltherington,M.；Quail,WJ.；Pughazenti,U.；Leshler,T.；Stables,J.P.,J.Med.Chem.,39,3984,1996；Dimmock,J.R.；Vashishtha,S.C；Stables,J.P.,Eur.J.Med.Chem.,35,241,2000；Kadaba,P.K.；Lin,Z.，U.S.專利US5942527,1999；Dimmock,J.R.；Puthucode,R.N.，W09640628,MX9709311,JP11506109,US5741818,1997；Fujibayashi,Y.；Yokoyama,A.，US5843400,1996]。以下將描述報道了縮氨基脲和縮氨基硫脲抗痙攣活性的專利。US5942527(1999)-Kadaba等制備了含有腙、胼、縮氨基硫脲和縮氨基脲的新型藥物組合物，并且在大鼠電休克誘發癲癇模型中評價了它們的抗痙攣活性。以100mg/Kg的劑量口服給藥后，該組合物是有活性的，并且呈現出較低的神經毒性。US5741818(1997)、(MX9709311、W09640628、AU9659938、FI9704447、N09705663、EP836591、CZ9703874、NZ309707、U9802637、JP11506109、BR9609408、AU715897、KR99022408)-Dimmock等制備了源自4-苯氧基-或4-苯硫-苯甲醛的縮氨基脲，并且在大鼠電休克誘發癲癇模型中評價了它們的抗痙攣活性。該化合物在高達500mg/Kg的劑量時未表現出神經毒性。W09406758(1996)-Dimmock制備了芳基縮氨基脲，并且評價它們的抗痙攣活性。這些化合物比苯妥英、苯巴比妥和相應的氨基脲的活性更高。它們是穩定的，可以口服給藥，并且表現出低或無神經毒性。W02003066038(2003)Beraldo等報道了一種使用環糊精及其衍生物制備縮氨基脲和/或縮氨基硫脲制劑的方法，以及通過該方法獲得的產品。該制劑實現了65-85%抗痙攣藥劑量的降低。對所研究的化合物還觀察到止痛藥的效果。疼痛和炎癥的病理生理學感染、化學和物理刺激、缺氧、自體免疫反應、其他的內源性或外源性因素可能引起細胞損傷，并且根據強度和持續時間，可能還會引起細胞死亡。這些有害因素的存在引起了局部的和非特異性的反應，通常具有保護功能，稱為炎癥。該反應促使清除引起細胞損傷的刺激物以及由于該損傷引起的壞死組織，從而使得組織再生[TraceyK.J.,Nature,420,853，2002]。與炎癥反應以及與某些代表患者痛苦最重要原因的炎癥無關的病理學狀況有關的癥狀之一是疼痛。根據國際疼痛研究協會(IASP)，疼痛定義為與實際或潛在傷害相關的、感覺、情緒和認知尺度上的不愉悅感受。通過神經元的傷害性刺激的檢測稱為傷害感受，并且對于這些刺激敏感的神經元定義為傷害感受器。這些傷害感受器通常不受無害刺激的激活，因為它們表現出很高的激活閾值。然而，通過炎癥會提高它們的敏感度。根據它們刺激活動的區域，傷害感受器的細胞體位于背根或三叉神經節。這些傷害感受器與脊髓背角或腦干中的神經元形成突觸。這些次級神經元投射至間腦中的某些結構，它們在其中與投射至大腦皮層的神經元形成突觸fffoolf,CT.&Salter,M.ff.Science,2881765，2000]。傷害感受器的致敏作用可以引起受傷部位或鄰近組織的異常性疼痛和痛覺過敏。還報道了疼痛可以是自發地，而不需要額外的刺激[W00lf，CJ.&Salter，M.W.Science,288，1765，2000]。IASP將痛覺過敏定義為對傷害性刺激的加重反應，并且將異常性疼痛定義為與無害刺激相關的疼痛。這些反應是保護性機制，因為它們促使了旨在受傷部位的額外刺激和愈合過程的行為。傷害感受器強烈且連續活化后背角神經元增強的反應性通過中樞神經系統引起了低和高的感覺刺激過程的變化。因此，無害機械刺激可以解釋為有害的，并且可能提高由有害刺激引起的疼痛強度[Cervero，F.&Laird.J.M.Pain,68,13，1996]。涉及神經元敏感性提高的一些機制已經得到鑒定增強的鈉通道表達，增強的谷氨酸受體活性，氨基丁酸(GABA)對神經元興奮性作用的改變和增強的鈣流入[Jensen，T.S.Cephalalgia,21，765，2001]。疼痛過程中涉及的許多神經元變化和炎癥反應的其他呈現可能是由特定的介質組(前列腺素類)的作用引起的。在組織受傷以后，存在環氧合酶(cox)的快速誘導，并且炎癥滲出物中類花生酸(主要是前列腺素(PG))的濃度會提高。非留體抗炎藥物(NSAID)抑制了C0X的活性，并且因此抑制了花生四烯酸轉化成PGG2和PGH2。PGH2是其他催化其轉化成其他類花生酸如PGD2、PGE2、PGI2、PGF2q和TXA2的酶的底物[Bertolini,A.；Ottani,A.；Sandrini,M.Pharmacol.Res.，44，37，2001]。雖然疼痛代表了大部分研究的炎癥癥狀，因為其表示引起患者最大不適的癥狀，但是其他的局部表現與炎癥反應也是有關的。在最重要并且最易鑒定的中間，可以提及水腫和細胞遷移。炎性水腫是由于血管舒張和提高的血管滲透性引起的血漿溢出所導致的。與淤血相關的血管舒張和增加的趨化性因子產生也會引起增加的細胞遷移至炎性部位。在遷移細胞中，嗜中性白細胞占到了大多數，并且在防御反應中起更重要的作用。當炎癥反應持續數天或者更長時間時，可能發生血管生成和增殖反應，從而導致維管組織的形成[TraceyKJ.，Nature，420，853，2002]。除局部表現以外，還可能發生一些全身反應。炎癥反應的一個重要組成部分，主要是與感染和癌癥相關時，是發熱。發熱是對體內溫度上升超過日常變化的正常范圍的應答，并且認為是對病理過程的防御機制。當然，它也是用作指示感染狀態的最古老的癥狀。發熱是由下丘腦調設定點的向上變化引起的，而這是由于大腦自身中的異常情況或者多種炎性或非炎性細胞產生的內源性熱原的作用引起的[Kluger,M.J.Physiol.Rev.71，93，1991]。首先，急性炎癥反應代表了一種防御機理，這使得宿主除去細胞碎片和微生物，并且促使組織再生。然而，在一些情況種，與急性炎癥相關的疼痛和水腫可能是強烈的，并且體現出患者的巨大不適。更糟的情況是當炎癥持續數天或數月時，導致大范圍的組織毀壞，同時對宿主造成提高的損害。一些實例包括類風濕性關節炎、狼瘡、牛皮癬等。當炎癥導致強烈疼痛或水腫時，或炎癥變成慢性時，通常需要用抗炎藥進行治療。非留體抗炎藥(NSAID)代表了大部分用于減弱炎癥體征和癥狀的藥理學群。NSAID代表具有某些相同作用機理的不同藥物群。它們的止痛和抗水腫作用是重要炎癥介質的合成受到抑制的結果。在NSAID中，有非選擇性的(雙氯芬酸，吲哚美辛和布洛芬)和C0X2選擇的抑制劑(塞來考昔，羅非考昔和艾托考昔)。另一方面，甾類抗炎藥物呈現出對炎癥介質產生的寬泛抑制作用。除了抑制多數類花生酸類物質的產生，它們還抑制炎癥細胞因子、氧化亞氮、黏著分子等的產生。這些藥物具有有效的抗炎和免疫抑制活性，這證明它們可以用于劇烈炎癥病癥的治療，這些炎癥病癥如類風濕性關節炎，狼瘡，牛皮癬，哮喘和過敏性休克。其中最常使用的留類抗炎藥物是地塞米松、潑尼松、倍他米松、布地奈德和倍氯米松。一些不太常規的藥物也已經用于緩解與不同炎癥或非炎癥病癥相關的疼痛。最初批準用作抗高血壓藥物的a2"腎上腺素激動劑已經用于促進麻醉，因為它們具有抗焦慮和止痛活性。當常規藥物不起作用時，它們還用來減輕與不同病理學狀態相關的疼痛[Quan，D.B.；Wandres,D.L；Schroeder，DJ.Ann.Pharmacother.27，313，1993]。用常規藥物不能輕易獲得其緩解的一種疼痛與腦、脊髓或外周神經的損傷有關。神經性疼痛，如它所定義的，它的發生可能與不同形式的癌癥、糖尿病、截肢、神經的外傷損害等有關。用于降低表征這些疼痛狀況的神經元活動過度的治療通常提供了一些緩解。已經使用了許多抗癲癇藥物。卡馬西平和苯妥英是最早用于治療三叉神經痛的抗癲癇藥，三叉神經疼痛是神經性疼痛的一種最常見類型。現今，已經表明其他形式的神經性疼痛可以通過抗癲癇藥得到緩解，并且增加了還具有止痛活性的這些藥物的數量。臨床研究已經表明了拉莫三嗪、加巴噴丁、普加巴林和托吡酯的止痛功效。丙戊酸、噻加賓和非爾氨酯也已經在臨床研究之中。使用這些藥物治療后神經元興奮性的降低歸因于鈉通道的阻斷，而其他的作用還可以提供其止痛作用[Jensen，T.S.Ce-phalalgia21.-765，2001]。雖然有很多不同種類的具有止痛活性的藥物，但還是有很多疼痛狀況不能通過可獲得的藥物而得到有效緩解。現有技術中不存在具有止痛、退熱和抗炎活性的縮氨基脲、縮氨基硫脲和/或其衍生物的藥物組合物，而這是本發明的特征。發明詳述本發明的特征在于與藥物學上可接受的賦形劑混合或包含其中的縮氨基脲和/或縮氨基硫脲，或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物的藥物組合物，以溶液或固體狀態，用于治療炎癥、疼痛或發燒病癥以及防止炎癥體征和癥狀。本發明的化合物可以和常規載體或介質一起用于藥物組合物中，優選作為片劑、膠囊、丸劑、粉劑和顆粒劑的劑型和所需量的縮氨基脲和/或縮氨基硫脲口服給藥于人或動物。此外，可以用作栓劑、無菌胃腸外用溶液、無菌胃腸外用懸浮液、無菌非胃腸外用溶液或無菌非胃腸外用懸浮液、口服溶液或口服懸浮液、水包油或油包水型懸浮液、乳劑。本發明要求保護縮氨基脲和縮氨基硫脲，以苯甲醛縮氨基脲(BS)作為非限制性實施例，它們具有抗炎活性。在口服給藥BS羧甲基纖維素懸浮液后觀察到該活性，羧甲基纖維素是一種藥物學上可接受的賦形劑，并且在溶解于二甲基亞砜的BS的非腸道(腹膜內)給藥之后也觀察到了該活性。在口服給藥的組合物中，優選以0.1至5%的濃度范圍來使用羧甲基纖維素。通過甲醛引起的傷害性疼痛反應，卡拉膠引起的熱的或機械的異常性疼痛、手掌水腫和細胞遷移，細菌性內毒素引起的發熱反應和棉花引起的維管組織形成的抑制來表征抗炎活性。此外，急性和亞急性毒性試驗沒有表明BS的口服給藥引起試驗動物中的毒性體征或癥狀。BS的口服或非腸道(腹膜內)給藥顯著抑制了小鼠中甲醛引起的傷害性反應。該反應包括兩個不同的階段。早期階段，緊隨注射之后開始，持續約5分鐘，其似乎主要是由直接C纖維活化引起的。后期階段，開始于甲醛注射大約15分鐘之后，持續約15分鐘，其看來取決于局部炎癥以及N-甲基-d-天冬氨酸(NM-DA)和非-NMDA受體的活化以及脊髓中氧化亞氮(NO)的產生。通常，甲醛引起的傷害性反應的第二個階段通過抗炎藥物來抑制，而第一或第二個階段都可以通過中樞作用藥物如阿片樣物質和抗抑郁藥而得到抑制[Tiolsen等，Pain51，5，1992]。甲醛誘導的傷害性疼痛的第二階段的更顯著的抑制表明BS具有更像抗炎藥物的藥物學活性。有趣的是，其他具有抗痙攣活性的藥物，如拉莫三嗪、卡馬西平和苯妥英也可以更有效地抑制甲醛引起的傷痛性反應的第二階段[Blackbum-Mimro等，Eur.J.Pharmacol.445，231，2002]。BS的口腔或非腸道(腹膜內)給藥還可以抑制大鼠中由卡拉膠引起的熱痛覺增敏和機械異常性疼痛，但是不能抑制熱板模型中小鼠的傷害性反應。卡拉膠引起的痛覺增敏和異常性疼痛與多種炎癥介質的局部產生相關，這些炎癥介質敏化和激活了傷害性感受器[Handy禾口Moore，Neuropharmacology,37,37,1998；Poole等，Br.J.Pharmacol.126，649，1999；Zhang等，J.Pharmacol.Exp.Ther.283，1069.1997]，以及與NMDA[Chapman等，Br.J.Pharmacol.116,268,1995]和非NMDA[Sluka等，Pain59，95，1994]受體的激活和NO產生[Meller等，Neuroscience60,367,1994]引起的中樞神經系統中突觸傳遞的促進有關。在該試驗模型中，抑制炎癥介質產生或活化的藥物，如非留體抗炎藥、緩激肽受體拮抗劑和N0合成抑制劑，以及抑制中心傷痛性過程的藥物，如N0合成抑制劑以及NMDA和非NMDA拮抗劑，減少了傷害性行為[Poole等，Br.J.Pharmacol.126.649，1999；Zhang等，J.Pharmacol.Exp.Ther.283,1069.1997Chapman等，Br.J.Pharmacol.116，268，1995；Meller等，Neuroscience60.367，1994;Sluka等，Pain59，95，1994]。另一方面，熱板模型中的傷害性反應是傷害性傳入神經纖維通過高于它們活化闕值的溫度的即時并且直接活化所引起的[Caterina等，Nature389，816，1997]。用中樞作用藥物，如鴉片類鎮_M[Hammond&Proudfit.BrainRes.188,79,1980]，5_胃fe月安[Ogren&Holm,J.NeuralTransm.47，253，1980]和去甲腎上腺素[Tura&Tura,BrainRes.518，19，1990]吸收抑制劑和a2-腎上腺素受體激動劑[Takano&Yaksh,J.Pharmacol.Exp.Ther.261，764，1992]之后，通常在熱板模型中觀察到抗傷害性作用，但是用抑制炎癥介質合成或活化的藥物治療后沒有觀察到這種作用[Engelhardt等，Inflam.Res.44，423，1995，Correa等，Br.J.Pharmacol.117，552，1996；Fantetti等，Arzneimittel-Forschung49，137，1999]。熱板模型中卡拉膠引起的異常性疼痛而非傷害性反應的抑制作用也支持了更明顯的外周作用，以解釋BS抗傷害性作用。BS的口服或非腸道給藥引起運動失調或肌肉松弛效應是不太可能的，因為小鼠在轉輪上耗費的時間沒有改變。因此，BS對運動失調或肌肉松弛效應引起的傷害性反應方面的任何效應都是不太可能的。熱板模型中抗傷害性效應的缺乏也表明之前三個模型中觀察到的BS抗傷害性效應并不是由于由運動失調或肌肉松弛效應導致的非特異性作用而引起的。BS的口服或非腸道(腹膜內)給藥還抑制了大鼠中卡拉膠引起的水腫。這些結果給更像抗炎藥物的作用提供了更多支持。卡拉膠引起的水腫是由包括前列腺素、緩激肽、N0、5-羥色胺和組胺的多種炎癥介質的局部作用引起的[Wirth等，AgentsandActionsSupplement38，428，1992;Stochla禾口Maslinski，AgentsandActions12,201,1982；Zhang等，J.Pharmacol.Exo.Ther.283,1069,1997;Holsapple等，AgentsandActions10,368-373，1980]。BS的口服給藥還抑制了炎癥反應的增殖期，在本發明中，觀察到7天的BS處理抑制了大鼠中通過皮下棉花植入物引起的維管組織形成。在該模型中，棉花誘發了炎性血管生成反應，其重現了機械和天然損傷后發生愈合的許多特征，損傷例如為氣囊血管成形術、動脈粥樣硬化、炎癥滑膜和外科傷口。由于與BS結構相關的化合物作為Na+通道抑制劑[llyin等，Br.J.Pharmacol.144，801，2005；Shao等，J.Med.Chem.47，4277，2004]，這可能表明了該藥物抑制血管形成的一種可能的機理與其對離子通道的作用有關。已經表明Ca2+和Na+通道的阻斷劑可以抑制體內或體外實驗模型中的血管生成[Alliegro等，J.Exp.Zool.267,245,1993；RochaeSilva等，Inflammation22，643，1998]。此外，抗炎藥，包括甾體的和非甾體的，抑制體內或體外的血管生成[Hori等，Br.J.Pharmacol.118，1584，1996Jones等，NatureMed.5，1418，1999；Ghosh等，J.Pharmacol.Exp.Ther.295,8802,2000]。由于BS具有類似抗炎藥效果的特性，因此其可以抑制促成新血管形成的炎癥介質的合成或釋放。BS的口服給藥還抑制了大鼠中由卡拉膠腹膜內注射引起的細胞遷移。在該模型中，卡拉膠誘導腹膜腔內多種炎癥介質的生成。這些介質刺激細胞趨化性，主要是中性粒細胞。這有可能是BS抑制了促進細胞遷移的炎癥介質的產生或作用。最后，BS的口服給藥抑制了大鼠中由細菌性內毒素靜脈注射引起的發熱反應。表明了內毒素刺激了許多內源性熱原的產生，包括白細胞間介素-1、白細胞間介素-6、干擾素、腫瘤壞死因子和前列腺素，其改變下丘腦神經元的活性。這些變化導致產熱的增加和熱損失的減少，因此，體溫升高[Kluger，MJ.Physiol.Rev.71，93，1991]。由于BS具有很類似抗炎藥的特性，其退熱活性可能與抑制產熱介質產生有關。重要的是，BS本身不能引起體溫的變化，這表明產熱試驗中觀察到的效應是真正的抗高熱效應。可以通過一些非限制性實施例來更好地了解本發明，如下具體實施方案實施例1評估縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對小鼠運動效能的作用，使用苯甲酵縮氨基脲作為非限制性實例。評價了BS對Swiss雄性小鼠(20_30g)運動效能的作用，以研究用BS處理的動物中的傷害性行為的抑制是否是中樞抑制作用的結果。在滾輪中對它們的運動效能進行評估。在試驗前的一天，將小鼠在該裝置中進行訓練。在試驗期間，將它們放在滾輪(14rpm)中，并且測定它們待在裝置中的時間。截止時間為1分鐘。在基礎測量之后，用BS處理動物(10、25或50mg/kg，腹膜內，或100或200mg/kg，口服)。鹽水中25%的二甲基亞砜(DMS0)+10%的吐溫80是用于腹膜內給藥的載體，0.5%的羧甲基纖維素，用于口服給藥的藥物學上可接受的賦形劑。腹膜內或口服給藥30或60分鐘后，再次在滾輪裝置中評價動物。結果表明BS沒有改變動物的運動效能。在疼痛模型中評估結果時，這是重要的，因為它們表明該模型中的任何效果并不是由BS引起的運動失調或肌肉松弛作用所引起的。實施例2評估小鼠中縮氨基脲、縮胺硫脲及組合對甲酵引起的傷害件反應的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。在甲醛(0.92%，20iiL)引起的傷害性反應中，將炎性刺激物皮下注入Swiss小鼠的右后爪中。在甲醛注射后，確定動物舔其注射過的爪的時間為0-5min(第一階段)和15-30分鐘(第二階段)。生理鹽水中25%的二甲基亞砜(DMS0)+10%的吐溫80用作腹膜內給藥的載體，0.5%的羧甲基纖維素，用于口服給藥的藥物學上可接受的賦形劑。腹膜內或口服給藥30或60分鐘之后，各自注射甲醛，并且按照所述的進行傷害性評估。只有通過腹腔內途徑給藥的50mg/kg劑量的BS抑制了甲醛誘導的傷害性反應的第一階段。然而，之前的腹膜內或口服給藥BS(10，25或50mg/kg，腹膜內，或100或200mg/kg,口服)顯著抑制了甲醛誘導的傷害性反應的第二階段。實施例3評估大鼠中縮氨基脲、縮胺硫脲及組合在對卡拉膠引起的熱和機械異常性疼痛的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。BS還抑制了Wistar雄性大鼠(200_250g)中由卡拉膠引起的熱和機械異常性疼痛模型中的傷害性反應。在熱異常性疼痛的模型中，在施用熱刺激后，在Hargreaves裝置(模型7370，UgoBasile，意大利)中對爪撤離的潛伏期進行評估。在機械異常性疼痛的模型中，測定對一連串用尼龍細線接觸右后爪跖面10次的爪退縮的頻率。生理鹽水中25%的二甲基亞砜(DMS0)+10%的吐溫80用作腹膜內給藥的載體，0.5%的羧甲基纖維素，用于口服給藥的藥物學上可接受的賦形劑。腹膜內或口服給藥30或60分鐘后，分別將卡拉膠(1%，50yl，懸浮于生理鹽水中)注入右后爪的跖面中，并且按照所述的在使用熱刺激之后評估爪撤離的潛伏期和對機械刺激的爪退縮的頻率。之前用BS(50mg/kg，腹膜內，-30min；100或200mg/kg，口腔，-60min)對動物的處理抑制了卡拉膠誘導的熱和機械異常性疼痛。實施例4評估大鼠中縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對卡拉膠引起的爪水腫的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。使用器官充滿度測量器(模型7140，UgoBasile，意大利)評估爪水腫。在任何處理前確定基本的爪體積，并且通過將卡拉膠足底內注入右后爪中來誘導水腫(l%，50iU，懸浮于生理鹽水中)。生理鹽水中25%的二甲基亞砜(DMS0)+10%的吐溫80用作腹膜內給藥的賦形劑，0.5%的羧甲基纖維素，用于口服給藥的藥物學上可接受的賦形劑。腹膜內或口服給藥30或60分鐘后，分別注射卡拉膠(1%，5(^1，懸浮于生理鹽水中)，并且按照所述的評估爪水腫。BS(50mg/kg，腹膜內，-30min，或200mg/kg，口服，-60min)抑制了卡拉膠誘導的爪水腫。實施例5評估熱板模型中縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對熱誘導的小鼠傷害性反應的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。在該模型中，將小鼠暴露于熱金屬表面(54°C)，并且確定其舔爪或跳離平板的潛伏期。生理鹽水中25%的二甲基亞砜(DMS0)+10%的吐溫80用作腹膜內給藥的載體，0.5%的羧甲基纖維素，用于口服給藥的藥物學上可接受的賦形劑。腹膜內或口服給藥30或60分鐘后，分別將小鼠暴露于熱板，并且按照所述的確定顯示傷害性行為的時間。BS(10、25或50mg/kg，腹膜內，_30min；100或200mg/kg,口服，-60min)在該模型中沒有誘導抗傷害性效果。實施例6評估小鼠中縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對小鼠中通過皮下棺入棉花誘導的維管組織形成的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。在維管組織形成的模型中，將小棉球(10mg)皮下植入小鼠的背部。7天后，將小鼠安樂死，取出小棉球加周圍維管組織，并且測定其質量。0.5%的羧甲基纖維素，藥物學上可接受的賦形劑，用于口服給藥。在7天內給予BS(200mg/kg.天，口服)。最后一次給藥24小時后，將動物安樂，取出小棉球加周圍維管組織，并且測定其質量。BS(200mg/kg.天，口服，7天)抑制了維管組織的形成。實施例7評估大鼠中縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對細菌性內毒素引起的發熱反應的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。在該模型中，將大腸桿菌內毒素(50yg/kg)靜脈注射至大鼠中，并且測定6h期間的結腸溫度。0.5%的羧甲基纖維素，藥物學上可接受的賦形劑，用于口服給藥。BS(200mg/kg.天，口服，-60min)抑制了內毒素引起的發熱反應。BS自身(200mg/kg，口服)沒有改變的結腸溫度。實施例8評估大鼠中縮氨基脲、縮氨基硫脲及組合對卡拉膠引起的細胞遷移的作用，使用苯甲醛縮氨基脲作為非限制性實例。在該模型中，將卡拉膠(500yg，lml，懸浮于鹽水中)注入大鼠的腹膜腔中。3小時之后，將動物安樂死，將10ml磷酸鹽緩沖液注入腹膜腔中。取出腹腔灌洗液并且離心。取出上清液，將沉淀懸浮于2ml的磷酸鹽緩沖液中。將20ill等份試樣加入400u1Turk’s溶液。通過顯微鏡檢查測定細胞數。0.5%的羧甲基纖維素，藥物學上可接受的賦形劑，用于口服給藥。BS(200mg/kg.天，口腔，-60min)抑制了由卡拉膠引起的細胞遷移。實施例9縮氨基脲和/或縮氨基硫脲及其衍生物和后者的結合的毒性鑒定。毒理學研究是基于國際公認為用于化學試驗的參考標準的已制定規程(0-ECD試驗指南)。遵循0ECD420指南-Fixed-DoseProcedureforAssessingOralAcuteToxicity(用于測定口服急性毒性的固定劑量程序)(0E⑶，2001)。在大鼠中，只口服一個劑量的物質(300mg/kg或2000mg/kg)。30分鐘后對大鼠進行仔細觀察，并且每小時進行重復直到12h。在頭4h期間不提供食物，并且對動物進行多于13天的觀察(每日，從1100am到1:00pm)。在這之后，將動物安樂死，并且進行肉眼和顯微鏡尸檢。使用0ECD407指南-Repeated-doseProcedureforAssessingOralSubacuteToXicity(用于測定口服亞急性毒性的重復劑量程序)(0ECD,1995)。28天期間每天(從11:00am到1:00pm)口服給藥測試物質。在整個時期對動物進行每日觀察。使用劑量為100、300、500mg/kg的BS。進行急性(肉眼和顯微鏡分析)和亞急性(肉眼和顯微鏡分析，生物化學和血液學分析)毒性測試的實驗室分析。作為急性毒性測試中高劑量給藥(2.000mg/kg)結果的死亡事件形成了化學物質分類和標記的全球協調系統中的5類。這意味著該化合物表現出低急性毒理學危險度，雖然它們在某些情況中對于脆弱人群是危險的(UnitedNations,2005)在急性毒理學試驗中，300mg/kg的劑量引起了運動效能的減少和理毛行為，這在幾小時后恢復了。由于該劑量沒有引起明顯的毒性，然后使用了2000mg/kg的劑量。該較高劑量引起了某些毒性征象，如表1中所示。至于BS，可逆性在第二天發生。表2還顯示了用BS處理大鼠28天的過程中引起的體重變化。較高劑量的BS減少了體重增加。表1:BS和BS-0-⑶急性毒性的評估(單次劑量)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>T/M=處理老鼠的數量/死亡數量。給藥后的觀察=第30分鐘，第1小時，之后每小時直至12小時，之后每24小時(一天兩次)直至第14天。所觀察到的體征的標準分數運動失調(0)，一般活動(4)，待在籠角(0)，痙攣(0)，握力(4)，理毛的(0)，豎毛(0)，虛脫(0)，往復(4)，身體緊張(4)。*安樂死的動物表2=BS和BS-β-⑶引起的體重變化的評估<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>數據以平均值士標準誤差(η=5)來表示。字母指的是各時期性別、藥物的比較。Duncan試驗(P<0,05)。*處理期間動物的死亡。權利要求一種用于治療炎癥、發熱和疼痛炎性病癥、炎性水腫和外周或中樞神經性疼痛病癥或預防炎癥體征和癥狀的藥物組合物，其至少包含縮氨基脲或縮氨基硫脲，或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物，根據結構式其中R、R1、R2和R3是H，芳基或烷基，X是氧或硫。FPA00001011287500011.tif2.權利要求1的藥物組合物，至少包含與藥物學上可接受的載體或賦形劑混合的或包含在其中的治療有效量的縮氨基脲，或縮氨基硫脲，或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。3.權利要求1的藥物組合物，其中作為給人和獸醫使用的持續或受控釋放系統來提供所述縮氨基脲或縮氨基硫脲。4.權利要求2的藥物組合物，其中藥物賦形劑是羧甲基纖維素，以0.1-5%的濃度范圍，用于口服給藥。5.權利要求2的藥物組合物，其中藥物賦形劑是淀粉、乳糖、維晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、滑石、硬脂酸鎂或其混合物，并且組合物是用于口服給藥的固體形式。6.權利要求2的藥物組合物，其中藥物賦形物是丙二醇、甘油、山梨糖醇、蔗糖、葡萄糖或果糖，并且組合物是用于口服給藥的液體形式。7.權利要求1的藥物組合物，其中藥物賦形劑是聚乙烯吡咯烷酮、克列莫佛、吐溫80，組合物是用于非腸道給藥的液體形式。8.一種治療炎癥、疼痛性炎性病癥、炎性水腫和外周疼痛病癥的方法，包括將藥物學上有效量的權利要求1或2任一項中所述化合物給藥于需要該治療的患者的步驟。9.權利要求8的方法，其中患者是人。10.權利要求8的方法，其中患者是動物。11.一種治療發熱病癥的方法，包括將藥物學上有效量的權利要求1或2任一項中所述化合物給藥于需要該治療的患者的步驟。12.權利要求11的方法，其中患者是人。13.權利要求11的方法，其中患者是動物。14.一種治療外周或中樞神經性疼痛病癥的方法，包括將有效量的權利要求1或2任一項中所述化合物給藥于需要該治療的患者的步驟。15.權利要求14的方法，其中患者是人。16.權利要求14的方法，其中患者是動物。17.一種預防炎癥體征和癥狀的方法，將有效量的權利要求1或2任一項中所述化合物給藥于需要該治療的患者的步驟。18.權利要求17的方法，其中患者是人。19.權利要求17的方法，其中患者是動物。全文摘要本專利申請涉及用于治療炎癥、發熱和疼痛炎性病癥、炎癥水腫和外周或中樞神經性疼痛病癥或預防炎癥體征或癥狀的藥物組合物，其包含至少縮氨基脲或縮氨基硫脲，或其藥物學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。還要求了包含至少縮氨基脲、或縮氨基硫脲、或其藥物學可接受的鹽、水合物或溶劑化物的組合物，治療有效量的這些化合物與藥物學上可接受的載體或賦形劑混合或包含其中，或縮氨基硫脲，作為給人或獸醫使用的溶液或固體狀態的持續或受控釋放系統來提供。文檔編號A61K31/175GK101835470SQ200880101602公開日2010年9月15日申請日期2008年1月25日優先權日2007年7月2日發明者H·德奧利維拉伯拉多,L·R·德索扎泰克塞拉,M·C·多來托,M·德馬圖斯科爾豪,R·品托維埃拉,R·達里奧西尼斯特拉,S·帕索斯安德拉德申請人:米納斯吉拉斯聯合大學