專利名稱：抗病毒劑在治療醫(yī)學病癥中的用途的制作方法
抗病毒劑在治療醫(yī)學病癥中的用途
該申請涉及醫(yī)學病癥的治療或免疫反應(yīng)的改善。更具體而言，它涉及抗病毒化合
物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療多種醫(yī)學病癥或改善免疫反應(yīng)。 用于具體病癥的現(xiàn)有醫(yī)學治療典型地應(yīng)該試圖通過物理和/或化學方法除去所 述病癥的原因。例如，治療由細菌感染引起的膿腫可能涉及膿腫排液(draining)連同抗生 素的使用。通常，醫(yī)學治療限于特定的醫(yī)學病癥，并且可以被諸如病原體的藥物耐受性削 弱。因此，將許多研究努力花費在開發(fā)關(guān)于以前認為的不治之癥的新式治療，以提高恢復(fù)速 度，或克服藥物耐受性或需求中的其它改變。 身體的天然免疫系統(tǒng)能夠處理一定范圍的否則將導致醫(yī)學病癥的病原體，異物， 等。 一般地，被免疫系統(tǒng)采用的方法分成先天反應(yīng)(其包括發(fā)炎，補體蛋白質(zhì)與外來細胞的 結(jié)合，和吞噬細胞對細胞的攻擊，并且能夠?qū)π骂愋偷母腥狙杆俚胤磻?yīng))和靶定特定的抗 原的適應(yīng)反應(yīng)(包括抗體和T細胞)。雖然對于新的感染反應(yīng)相對緩慢，但適應(yīng)系統(tǒng)具有 巨大特異性并且還能建立免疫記憶，從而允許對隨后的由相同病原體引起的再感染迅速反 應(yīng)。 認為某些醫(yī)學病癥包括免疫反應(yīng)的部分或完全失活。例如，免疫反應(yīng)有時可以被 有意抑制，諸如在移植患者情況下以防止移植排斥。這樣的抑制通常通過施用糖皮質(zhì)激素， 細胞抑制劑，或其它免疫抑制藥物實現(xiàn)。許多病癥諸如AIDS (由HIV感染所引起)，某些惡 性疾病，藥物濫用和營養(yǎng)不良也引起有害的免疫機能缺陷。在兩種情況下，失去免疫功能可 以導致嚴重的疾病，因此必須采用另外的行為防止這個。在免疫反應(yīng)已經(jīng)受到有意抑制的 情況下，則必須直接靶定潛在的感染源，諸如通過抗生素的預(yù)防性施用。在免疫機能缺陷不 是醫(yī)學程序的先決條件的情況下，例如在嚴重的飲食缺陷或晚期HIV感染中，則適合于試 圖通過使用試劑諸如熱增加或抗反轉(zhuǎn)錄病毒處理而增加免疫功能。 然而，還需要在患者(或貌似健康個體)中最優(yōu)化免疫反應(yīng)的活性，并且因此改善 其它疾病的癥狀，在所述患者(或貌似健康個體)中，免疫功能不是顯著抑制的，但是免疫 系統(tǒng)沒有在最佳水平運轉(zhuǎn)。這些病癥在常規(guī)意義上不被認為是免疫缺陷的，并且患有該病 癥的患者不易受到與充分免疫抑制有關(guān)的典型機會感染的影響。因而這些個體一般被認為 是免疫活性的，并且最優(yōu)化它們的免疫功能的潛在優(yōu)點沒有被預(yù)先重視。本發(fā)明已經(jīng)被構(gòu) 思成至少部分地解決該問題。為了本發(fā)明的目的，因此將這樣的個體在下文稱為免疫活性 的。 根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供有效針對巨細胞病毒(CMV)的化合物在制備藥物中 的用途，所述藥物用于改善CMV-血清反應(yīng)陽性的免疫活性個體的免疫反應(yīng)。
用于本文中時，術(shù)語"有效針對CMV"意欲指的是針對CMV的化合物的ID5。小于 1000 iiM。 用于本文中時，"改善免疫反應(yīng)"意欲指的是減少特異于巨細胞病毒的效應(yīng)子和/
或記憶T細胞的數(shù)目，和/或增加幼稚(naiVe)T細胞數(shù)目。在一個實施方案中，所述減少 (CMV-特異性效應(yīng)子和/或記憶T細胞)和增加(幼稚T細胞)的至少之一至少是20% 。 在另一個實施方案中，所述減少和增加的至少之一至少是40% 。在又一個實施方案中，所述減少和增加的至少之一至少是60%。據(jù)信，在血流和淋巴系統(tǒng)中，通過吸收過量的淋巴系統(tǒng) 資源，通過抑制幼稚T細胞數(shù)目和通過分泌可溶性因子，這些特異性于CMV的效應(yīng)子和記憶 T細胞有助于免疫功能的減少。 用于本文中時，"血清反應(yīng)陽性的"具有指示血液中特異于CMV的抗體的可檢測存 在的普通含義，并且指示過去感染的歷史。 在一個實施方案中，將CMV特異性記憶或效應(yīng)子T細胞數(shù)目取成由CD4+T細胞數(shù) 目表示，所述CD4+T細胞在其表面上已經(jīng)失去了 CD28分子的表達。根據(jù)van Leeuwen等的 出版物，免疫學雜志(J. Immunology) ， 2004，這些CD4+CD28-T細胞是CMV-特異性CD4+T細 胞反應(yīng)的特有特性。因而，將這些細胞在外周血中的比例或數(shù)量取成表示用于確定CMV-特 異性免疫反應(yīng)的有價值方式。該值可以用于確定這樣的個體，在所述個體中CMV-特異性免 疫反應(yīng)的大小指示它們特別有可能受益于所述治療。另外，該測量可以用于監(jiān)測對于治療 的反應(yīng)，并且因此可以用于指導反應(yīng)功效和潛在的需要以修正治療劑量。
在一個實施方案中，將CMV特異性記憶或效應(yīng)子T細胞數(shù)目取成由CD4+T細胞數(shù) 目表示，所述CD4+T細胞在其表面上已經(jīng)失去了 CD27分子的表達。根據(jù)Pourgheysari等 的出版物，J. Virology (病毒學雜志)，2007， CD4+CD27-T細胞是CMV-特異性CD4+T細胞反 應(yīng)的特有特性。因而，將這些細胞在外周血中的比例或數(shù)量取成表示用于確定CMV-特異性 免疫反應(yīng)的有價值方式。該值可以用于確定這樣的個體，在所述個體中CMV-特異性免疫反 應(yīng)大小指示它們特別有可能受益于所述治療。另外，該測量可以用于監(jiān)測對于治療的反應(yīng)， 并且因此可以用于指導反應(yīng)功效和潛在的需要以修正治療劑量。 在一個實施方案中，將CMV特異性記憶或效應(yīng)子T細胞數(shù)目取成由CD4+T細胞數(shù) 目表示，所述CD4+T細胞在其表面上已經(jīng)獲得了 CD57分子的表達。根據(jù)Pourgheysari等 的出版物，J. Virology (病毒學雜志)，2007， CD4+CD57+T細胞是CMV-特異性CD4+T細胞反 應(yīng)的特有特性。因而，將這些細胞在外周血中的比例或數(shù)量取成表示用于確定CMV-特異性 免疫反應(yīng)的有價值方式。該值可以用于確定這樣的個體，在所述個體中CMV-特異性免疫反 應(yīng)大小指示它們特別有可能受益于所述治療。另外，該測量可以用于監(jiān)測對于治療的反應(yīng)， 并且因此可以用于指導反應(yīng)功效和潛在的需要以修正治療劑量。 應(yīng)當理解，CMV-特異性記憶或效應(yīng)子T細胞數(shù)目可以通過CD4+T細胞表面上的 CD27、CD28或CD57的任何組合的表達模式測量。備選地或另外地，CMV-特異性記憶或效應(yīng) 子T細胞數(shù)目可以通過CD8+T細胞表面上的CD27、 CD28或CD57的任何組合的表達模式測 量。已經(jīng)失去CD27或CD28表達的CD8+細胞在外周血中的比例或數(shù)目在CMV血清反應(yīng)陽 性的個體中增加。表達CD57分子的CD8+T細胞數(shù)目在CMV血清反應(yīng)陽性的個體中增加。
用 于本文 中 時，如Crumpacker等，Growth inhibition by acylogimnosineofherpesviruses isolated from human infections (由從人感染分離的 皰疹病毒的?；B苷引起的生長抑制)，Antimicrobial Agents and Chemother即y (抗微 生物劑和化學治療)，1979， 15巻，第5號，642-645頁的測定中所限定，測量ID5。值。
在一個實施方案中，所述藥物用于改善患有本發(fā)明第二方面中列出的至少一種病 癥的CMV血清反應(yīng)陽性的免疫活性個體的免疫反應(yīng)。 在一個實施方案中，改善免疫反應(yīng)包括減少CMV-特異性免疫反應(yīng)，和因此改善總 的免疫反應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供有效針對CMV的化合物在制備藥物中的用途，所述 藥物用于治療免疫活性個體中的CMV。 用于本文中時，"CMV的治療"意欲表示更多CMV感染效果之一的改善，并且不應(yīng)該 被認為需要從感染個體完全除去CMV。在一個實施方案中，CMV的治療可以通過特異于巨細 胞病毒的效應(yīng)子和/或記憶T細胞的比例減少來表示。如上，CMV-特異性記憶或效應(yīng)子T 細胞的數(shù)目可以由CD4+T細胞或CD8+T細胞數(shù)目表示，所述CD4+T細胞或CD8+T細胞已經(jīng) 失去了 CD28或CD27的表達，或獲得了 CD57表達，或這些的任何組合。
根據(jù)本發(fā)明的第三方面，提供有效針對CMV的化合物在制備藥物中的用途，所述 藥物用于改善選自下列病癥的癥狀HIV感染；情緒失調(diào)，包括抑郁，疲勞或焦慮；精神分裂 癥；慢性疲勞綜合征；炎性病癥諸如類風濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，結(jié)節(jié)病，關(guān)節(jié)強直 性脊柱炎，牛皮癬關(guān)節(jié)病，Wegener肉芽腫病，及其它血管炎；自身免疫病癥諸如多發(fā)性硬 化，Sjorgen綜合征，糖尿病，原發(fā)性膽硬化，和全身硬化；惡性疾??；結(jié)節(jié)病或淀粉樣變；慢 性細菌、病毒或寄生物感染，包括病毒性肝炎和Chagas??；瘧疾；慢性肺病諸如支氣管擴張 癥或囊性纖維變性；急性冠狀綜合征諸如不穩(wěn)定性心絞痛；動脈(例如主動脈的)動脈瘤； 動脈粥樣硬化；和腦血管閉塞("中風")。 根據(jù)本發(fā)明的第四方面，提供具有針對CMV的ID5。大于20 ii M(如在Crumpacker 等的測定中所限定)的核苷類似物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療免疫活性患者 中CMV-介導的病癥。 在一個實施方案中，核苷類似物具有至少50iiM的針對CMV的ID5。。在另一個實
施方案中，核苷類似物具有至少100 ii M的針對CMV的ID5。。 在一個實施方案中，核苷類似物具有小于1000 ii M的針對CMV的ID5。。 根據(jù)本發(fā)明的第五方面，提供一種醫(yī)學治療方法，所述方法包括將有效針對CMV
的化合物施用到CMV-血清反應(yīng)陽性的免疫活性患者以減少針對CMV的免疫反應(yīng)。 下列要點適用于本發(fā)明的全部方面。 在優(yōu)選實施方案中，所述化合物或核苷類似物選自阿昔洛韋，泛昔洛韋和伐昔洛 韋。 巨細胞病毒(CMV)是人皰疹病毒，皰疹病毒科(Herpesviridae)家族中的一種。其 它人皰疹病毒導致疾病諸如口部的和/或生殖器皰疹(單純性皰疹病毒)，水痘和帶狀皰疹 (水痘帶狀皰疹病毒)，和Burkitt淋巴瘤(Epstein-Barr病毒)。 CMV感染在免疫活性個體中是非常普遍的并且一般認為是無癥狀的。感染率(基 于身體中抗體的可檢測的存在)根據(jù)地理區(qū)域改變在非洲，非常大多數(shù)的人群在五歲年 齡以前感染；在日本，大部分人群在二十歲的年齡以前感染；而在歐洲和北美，大約70%的 人在六十歲的年齡以前感染。 在可能發(fā)生在任何年齡的原發(fā)感染以后，CMV典型地在免疫活性的人中保持潛伏； 這被認為是CMV-特異性免疫反應(yīng)作用的結(jié)果，其一般能限制溶胞病毒的復(fù)制。雖然目前準 確的細節(jié)是不清楚的，但是相信病毒可以在原發(fā)感染以后進入"潛伏"狀態(tài)，但是經(jīng)歷再激 活的事件，其間免疫反應(yīng)對于控制廣泛的病毒傳播很關(guān)鍵。 該再激活可以頻繁發(fā)生的事實是由下列事實揭示的，即接受強烈免疫抑制治療的 患者經(jīng)常在數(shù)周之內(nèi)遭受臨床CMV病毒再激活。CMV再激活，和由此引起的組織損傷，是重免疫抑制患者諸如已經(jīng)接受異源移植或具有晚期HIV感染的那些患者中充分公認的問題。 在這樣的情況下，已知CMV導致疾病諸如肺炎、結(jié)腸炎、和視網(wǎng)膜炎。 在CMV感染潛伏期間，被感染的人保持血清反應(yīng)陽性，并且這里所描述的治療藥 物和方法保持可適用。 本發(fā)明由這樣的發(fā)現(xiàn)而產(chǎn)生，即與像以前認為的無癥狀不同，免疫活性的人中的 CMV感染事實上對某些醫(yī)學病癥的嚴重性有貢獻。這些可以廣泛分成兩個類別(在本文中 共同稱為CMV-介導的病癥)
1)繼發(fā)于CMV感染的免疫功能損傷 被CMV感染可以產(chǎn)生天然免疫功能的改變和損傷，這是由于發(fā)展CMV-特異性免疫 反應(yīng)的緣故。這可以采取多種形式，包括-減少的免疫功能，特別是在生理學或心理應(yīng)激的時期；-增加的免疫衰老發(fā)展，如例如通過記憶T細胞的積累或幼稚T細胞的加速損失所 示；-減小的針對其它免疫原的疫苗反應(yīng)。 這對于其中免疫系統(tǒng)已經(jīng)被損害或處于損害風險的那些是特別相關(guān)的，諸如-已過中年的個體；-經(jīng)歷腎滲析的患者；-處于瘧疾感染風險中的患者； _已經(jīng)接受同種異源移植的患者；-已經(jīng)經(jīng)歷冠狀動脈放支架或外科代管的患者；-具有可識別的危險因素的患者中腦血管閉塞("中風")的預(yù)防；-經(jīng)歷太空探險的個體，諸如宇航員。 2)其它醫(yī)學病癥癥狀嚴重性的增加 這些可以發(fā)生在許多醫(yī)學病癥中，包括-在疾病任何階段的HIV感染；-情緒失調(diào)，包括抑郁，疲勞或焦慮；-精神分裂癥；-慢性疲勞綜合征； _炎性病癥諸如類風濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，結(jié)節(jié)病，關(guān)節(jié)強直性脊柱炎，牛 皮癬關(guān)節(jié)病，Wegener肉芽腫病，及其它血管炎；-自身免疫病癥諸如多發(fā)性硬化，Sjorgen綜合征，糖尿病(包括并發(fā)癥諸如勃起
功能障礙)，原發(fā)性膽硬化，和全身硬化；-惡性疾??；-結(jié)節(jié)病或淀粉樣變；-慢性細菌、病毒或寄生物感染，包括病毒性肝炎和Chagas??；
-癥疾；-慢性肺病諸如支氣管擴張癥或囊性纖維變性；
-急性冠狀綜合征諸如不穩(wěn)定性心絞痛； _動脈(例如主動脈的)動脈瘤；
6
-動脈粥樣硬化；-腦血管閉塞("中風")；-阿爾茨海默病；-大粒性淋巴細胞增多； _Guillan_Barre綜合征；-炎性腸病諸如局限性回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎；
-醇攝取繼發(fā)的臨床病癥。 不希望受限于理論，相信上面列出的醫(yī)學病癥在CMV-感染患者中是加重的。這被 認為與臨床后遺癥的發(fā)展有關(guān)，所述臨床后遺癥由CMV感染產(chǎn)生的不成比例地大免疫反應(yīng) 的免疫調(diào)制效應(yīng)產(chǎn)生。因此可能在不需要根除感染的條件下，通過使用抗病毒藥物，減少該 免疫反應(yīng)來改善醫(yī)學病癥的治療。 巨細胞病毒感染可以加重這些疾病的臨診癥狀的證據(jù)來自兩個觀察。上面列出的 病癥與增加的CMV血清陽性流行程度(和對照組對比)有關(guān)或經(jīng)常與升高的CD28-T細胞 水平有關(guān)，可以用其表示升高的CMV-特異性免疫反應(yīng)。因此，針對CMV的免疫反應(yīng)在患有 這些病癥的患者中放大，并且可能反映和/或促進輕微的免疫抑制或免疫失調(diào)狀態(tài)，所述 免疫抑制或免疫失調(diào)狀態(tài)可以通過本發(fā)明的方面至少部分逆轉(zhuǎn)。 已知某些抗病毒藥物用于治療皰疹病毒感染。具體地，已知核苷類似物諸如阿昔 洛韋(也稱為aciclovir(9-(2-羥基乙氧基甲基)鳥嘌呤-GB 1 523865)用于治療人皰疹 病毒，其最有效針對單純性皰疹病毒(HSV-1和HSV-2)和水痘帶狀皰疹病毒(VZV)。阿昔洛 韋在體外具有針對CMV復(fù)制的最小活性，其ID5。(藥物將病毒蝕斑形成減少50%或以上的 濃度)大于100 iiM，分別與針對HSV-1 、HSV-2和VZV的值0. 15 ii M、 1. 62 ii M和3. 75 ii M相 比(根據(jù)Crumpacker等的測定)。伐昔洛韋是阿昔洛韋的L_纈氨酸酯并且起阿昔洛韋前 藥的作用，并且因此具有相同作用機理。這兩種藥物都在通常劑量產(chǎn)生許多副作用，包括惡 心、嘔吐、腹瀉和/或頭痛。 更昔洛韋和纈更昔洛韋分別是阿昔洛韋和伐昔洛韋的同源物，其已經(jīng)由于它們針 對CMV顯著改善的活性而被開發(fā)。這些藥物廣泛用于在免疫抑制患者中處理CMV疾病。然 而，更昔洛韋被認為是潛在的人類致癌劑，致畸劑，和誘變劑，并且被認為可能導致精子發(fā) 生的抑制。已知的副作用包括粒性白細胞減少，中性白細胞減少，貧血，血小板減少，發(fā)燒， 惡心，嘔吐，消化不良，腹瀉，腹痛，脹氣，食欲缺乏，升高的肝酶類，頭痛，意識混亂，幻覺，癲 癇發(fā)作，在注射位點的疼痛和靜脈炎(由于高pH)，出汗，皮疹，癢病和增加的血清肌酸酐和 血脲濃度。 噴昔洛韋是阿昔洛韋的類似物，其能夠在較少副作用情況下治療皰疹病毒感染。 噴昔洛韋的抗病毒譜類似于阿昔洛韋的抗病毒譜，并且它因此具有最小的針對CMV的活 性。泛昔洛韋是噴昔洛韋的前藥，具有改善的生物利用率。 因此在本領(lǐng)域中存在針對免疫活性患者中的CMV治療的偏見，其基于下列看法
-大多數(shù)抗病毒藥物不能有效治療CMV ;-能治療CMV的那些藥物具有不可接受的高毒性和副作用水平； -CMV感染是近于普遍存在的，并且已經(jīng)被認為是在免疫活性患者中無癥狀的。 然而，發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，CMV感染不是完全無癥狀的，而且意外地是，事實上在用抗病毒藥物治療CMV感染患者中存在益處，所述抗病毒藥物具有針對巨細胞病毒的低活性，如通過體外測定所估算。當對患者給藥時，這些藥物導致對于巨細胞病毒免疫反應(yīng)的大量減少，最可能通過它們減少CMV再激活的亞臨床事件，并且由此限制CMV-特異性免疫反應(yīng)的周期性剌激的能力。 施用到患者的劑量正常應(yīng)該由處方醫(yī)師確定并且通常應(yīng)該根據(jù)個體患者的年齡、體重和反應(yīng)，以及患者癥狀的嚴重性而變化。然而，在大多數(shù)情況下，有效的治療劑每日劑量應(yīng)該在200-2000mg范圍內(nèi)，且優(yōu)選地，在400-1000mg范圍內(nèi)(例如對于伐昔洛韋或阿昔洛韋)，其以單劑量或分劑量施用。然而，在一些情況下，可能必需使用這些限度以外的劑 雖然有效成分可以作為原始的化學藥品單獨施用，但是優(yōu)選地，其以藥物制劑的形式存在。本發(fā)明的制劑包含有效成分及其藥用載體，和任意其它治療成分。所述載體在與制劑的其它成分可相容和對其受體無害的意義上必須是"可接受的"。
為了避免疑問，本發(fā)明有效成分的活性可以受藥物制劑的其它成分的影響。有效成分可以與藥物制劑的任何其它成分形成"聯(lián)合治療"。例如，一種可能的這樣的聯(lián)合治療涉及在本發(fā)明任何方面的制劑的一種中使用鋅。備選的聯(lián)合治療可以包括在本發(fā)明制劑的一種中使用"抑制素"藥物諸如辛伐他汀，或在用于處理肌骨胳疾病的制劑中包含抗腫瘤壞死因子(TNF)藥物諸如英夫利昔單抗。 便利地，制劑的單位劑量含有200mg和800mg之間的有效成分。優(yōu)選地，所述制劑
適于每天施用一至六次，諸如二至四次。適于鼻部或口腔施用的制劑，諸如在下文中描述的
自推進粉末分配制劑，可以包含0. 1至20重量％，例如約2重量％的有效成分。 所述制劑包括采用適于口服、眼部、直腸的、腸胃外的(包括皮下的，陰道的，腹膜
內(nèi)的，肌肉內(nèi)的和靜脈內(nèi)的)，關(guān)節(jié)內(nèi)的，鼻部的或口腔施用形式的那些。 適于口服施用的本發(fā)明制劑可以采用離散單元的形式，諸如膠囊、扁囊劑、片劑或
錠劑，各自含有預(yù)定量的有效成分；采用粉末劑或顆粒劑的形式；采用水性液體或非性水
液體中的溶液或懸浮液的形式；或采用水包油乳劑或油包水乳劑的形式。有效成分也可以
采用丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑的形式。對于這樣的制劑，載體中有效成分的一定范圍的
稀釋是適合的，諸如1%至99%，優(yōu)選5%至50%和更優(yōu)選10%至25%稀釋。根據(jù)稀釋水
平，制劑應(yīng)該是室溫下在約2(TC的區(qū)域)的液體(或低熔化的固體。 直腸施用的制劑可以采用結(jié)合有效成分和載體諸如可可油的栓劑形式，或采用灌腸劑的形式。 適于腸胃外施用的制劑包括溶液，混懸劑或乳劑，如上所述，便利地包括，優(yōu)選與受體血液等滲壓的有效成分的無菌水制劑。 適于關(guān)節(jié)內(nèi)施用的制劑可以采用有效成分的無菌水制劑的形式，其可以采用微晶
形式，例如，采用水性微晶混懸劑形式或作為微團分散劑或混懸劑。還可以使用脂質(zhì)體制劑
或可生物降解的聚合物系統(tǒng)提供有效成分，特別是用于關(guān)節(jié)內(nèi)的和眼部施用。 根據(jù)本發(fā)明的滴劑可以包括無菌的水性或油性溶液。適于包含在滴劑中的
防腐劑，殺細菌劑和殺真菌劑是苯汞鹽(0.002% )，苯扎氯銨(0.01% )和醋酸氯己定
(0.01% )。用于制備油質(zhì)溶液的適合溶劑包括甘油，稀釋的醇和丙二醇。 適于施用到鼻腔和口腔的制劑包括適于吸入或吹入的那些，并且包括粉末制劑，自推進制劑和噴霧制劑諸如氣溶膠和霧化器。所述制劑在分散時，優(yōu)選具有在10至200 m范圍內(nèi)的粒子尺寸。 這樣的制劑可以采用來自粉末吸入裝置或自推進粉末分配制劑的用于肺部施用的精細粉碎粉末形式，其中作為精細粉碎粉末的有效成分可以構(gòu)成制劑的高達99. 9重 自推進粉末分配制劑優(yōu)選包括固體有效成分的分散顆粒，和在大氣壓力下具有18°C以下沸點的液體推進劑。 一般地，推進劑構(gòu)成制劑的50至99. 9重量％，而有效成分構(gòu)成制劑的0. 1至20重量％，例如約2重量％。 本發(fā)明制劑還可以采用自推進制劑的形式，其中有效成分存在于溶液中。
這樣的自推進制劑可以包括有效成分，推進劑和助溶劑(co-solvent)，并且有利地包括抗氧化穩(wěn)定劑。適合的助溶劑是低級烷基醇及其混合物。助溶劑可以構(gòu)成制劑的5至40重量％，雖然優(yōu)選小于制劑的20重量％?？寡趸€(wěn)定劑可以結(jié)合在這樣的溶液制劑中以抑制有效成分的生物致劣并且方便地是堿金屬抗壞血酸鹽或亞硫酸氫鹽(bisulphites)。它們優(yōu)選以所述制劑的高達0. 25重量％的量存在。 本發(fā)明的制劑也可以采用用于噴霧器或霧化器中的有效成分的水性的或稀釋的醇溶液，任選是無菌溶液，其中使用加速空氣流產(chǎn)生由溶液的小微滴組成的細霧。這樣的制劑通常含有調(diào)味劑諸如糖精鈉和揮發(fā)性油。緩沖劑諸如偏亞硫酸氫鈉(sodiummetabisulphite)和表面活性劑也可以包括在這樣的制劑中，其應(yīng)當也含有防腐劑諸如羥基苯甲酸甲酯。 適于鼻部施用的其它制劑包括具有20至500微米粒子尺寸的粉末，將其以采取鼻吸的方式施用，即通過從保持接近鼻子的粉末容器中經(jīng)由鼻部通道迅速吸入。
除上述成分外，本發(fā)明的制劑可以包括一種或多種另外的成分諸如稀釋劑，緩沖劑，調(diào)味劑，粘合劑，表面活性劑，增稠劑，潤滑劑，防腐劑例如羥基苯甲酸甲酯(包括抗氧化劑)，乳化劑等。在本發(fā)明制劑中使用的特別優(yōu)選的載體或稀釋劑是C18至C24單-不飽和脂肪酸諸如油酸的低級烷基酯，例如油酸乙酯。其它適合的載體或稀釋劑包括癸酯或辛酯或甘油三酯，或其混合物，諸如以商品名Miglyol銷售的那些辛/癸甘油三酯，例如Miglyol 810。 現(xiàn)在將僅參考附圖來舉例描述本發(fā)明，其中
圖1顯示CMV感染對于外周血中T細胞計數(shù)的影響； 圖2顯示CMV感染對于外周血中CD8+T細胞計數(shù)的影響； 圖3顯示CMV感染對于外周血中記憶和效應(yīng)子CD8+T細胞計數(shù)的影響； 圖4顯示CMV感染對于外周血中幼稚CD8+T細胞計數(shù)的影響； 圖5顯示CMV感染對于脫氫表雄酮(DHEA)和相應(yīng)的硫酸酯(DHEAS)的血液比例
的影響； 圖6顯示通過用CMV-感染細胞的溶胞產(chǎn)物剌激來自八個健康供體的外周血顯示的CMV-特異性CD4+T細胞表型； 圖7顯示通過用含有來自CMV的免疫顯性肽的HLA-肽四聚體染色來自健康供體的外周血而產(chǎn)生的CMV-特異性CD8+T細胞的表型； 圖8顯示CMV血清反應(yīng)陽性的健康供體和血清反應(yīng)陰性的那些之間的CD4+T細胞特性的比較； 圖9顯示給藥阿昔洛韋(ACV)或伐昔洛韋(VCV)的患者和對照組之間的CMV-特異性T細胞計數(shù)的比較； 圖10顯示使用阿昔洛韋或伐昔洛韋的治療對CD4+T細胞針對CMV反應(yīng)的時間依賴性影響； 圖11顯示通過Elispot分析測量的給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間抗原特異性T細胞數(shù)目的比較； 圖12顯示給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間的CD27-， CD28-，或CD57+CD4+T細胞比例的比較； 圖13顯示在給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間的CD27-CD4+T細胞比例的比較； 圖14顯示在給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間的CD28-CD4+T細胞比例的比較； 圖15顯示在給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間的CD57+CD4+T細胞比例的比較； 圖16顯示在給藥阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者和對照組之間的CD57+CD8+T細胞比例的比較； 圖17顯示在用阿昔洛韋治療以后的一名患者中，如通過用CMV溶胞產(chǎn)物剌激所測量的CMV-特異性CD4+T細胞的比例； 圖18顯示在用阿昔洛韋治療以后的一名患者中，如通過Elispot分析所測量的CMV-特異性CD4+T細胞比例的測量值；禾口 參考圖l，可以看到，被CMV感染在全部年齡中導致增加的T細胞計數(shù)。通過利用自動細胞("Coulter")計數(shù)器和熒光細胞(FACS)分析，測定外周血樣品中的絕對淋巴細胞計數(shù)進行T細胞計數(shù)，以確定T細胞在淋巴亞型中的百分比。 參考圖2，可以看出，T細胞的增加主要體現(xiàn)在具有CD8共受體的T細胞增加上，其是造成細胞毒素活性的原因。類似地，從圖3可以看出，存在"抗原經(jīng)歷的"記憶和效應(yīng)子CD8T細胞的相應(yīng)大量增加。最后，由圖4可以看出，CMV感染也與外周血中幼稚T細胞數(shù)目減少有關(guān)。 而且，從這些與CMV血清反應(yīng)陽性的個體有關(guān)的細胞計數(shù)的絕對值可以看出，與
和其它病毒感染有關(guān)的免疫反應(yīng)相比，CMV-特異性免疫反應(yīng)異乎尋常地高。 圖5顯示對于CMV測試血清反應(yīng)陽性的或血清反應(yīng)陰性的個體測量的類固醇特性
(采用DHEA/DHEAS比例的形式)?？梢钥闯?，當和對照(CMV血清反應(yīng)陰性的)組對比時，
CMV感染產(chǎn)生更大差距的比例，和平均比例的增加。增加的DHEA/DHEAS比例是炎性病癥特
有的并且與輕微的免疫抑制有關(guān)。 參考圖6， CMV-特異性的T細胞是通過響應(yīng)于用CMV抗原(溶胞產(chǎn)物)剌激而表達干擾素-Y檢測的，并且這些細胞的表型是通過用針對CD45RA， CD45R0， CD28， CD27或CD57的抗體染色來評估?？梢钥闯?，CMV-特異性CD4+T細胞的特征在于CD27和/或CD28表達的失去，和/或CD57表達的獲得。這些觀察提供關(guān)于CMV感染對總CD4+T細胞池上的CD27， CD28和CD57表達的影響的解釋，如圖8和12-15中所記載。
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參考圖7， CMV-特異性的CD8+T細胞是通過用含有來自CMV的免疫顯性肽的HLA-肽四聚體染色外周血T細胞而檢測的。使用四聚體的陽性染色顯示在y-軸上，并且這些細胞的表型進一步通過用針對CD27， CD28， CD57， CD45RA或CD45R0的抗體染色來表征，如x-軸上所示。可以再次看出，CMV-特異性CD8+T細胞主要顯示CD27-， CD28-和CD57+表型。這些觀察提供關(guān)于CMV感染對總CD8+T細胞池上的CD27， CD28和CD57表達的影響的解釋，如圖16中所記載。 參考圖8，用針對CD27， CD28或CD57的抗體染色來自35位健康供體的外周血的CD4+T細胞。可以看出，表達這些標記物的CD4+T細胞的百分比在CMV-血清反應(yīng)陽性(n =24)和血清反應(yīng)陰性(n = 11)個體中是不同的。與血清反應(yīng)陰性的個體相比，血清反應(yīng)陽性的個體在CD4+群中具有更大的CD27-，CD28-和CD57+細胞的比例。CD4+CD28-T細胞增加到總的CD4+T細胞群的大約2%以上實際上僅在CMV-血清反應(yīng)陽性的個體中看到。
實施例1 在服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的CMV血清反應(yīng)陽性或血清反應(yīng)陰性供體的組中測量CMV-特異性免疫反應(yīng)。將其與年齡-匹配的對照組比較。給藥于這些供體的劑量典型地是400mg b. d.的阿昔洛韋或500mg o. d.或b. d.的伐昔洛韋。進行了 (1)這些供體的總T細胞特性，和(2)它們的CMV-特異性反應(yīng)的綜合分析。將結(jié)果與CMV血清反應(yīng)陽性或血清反應(yīng)陰性供體的年齡相配的對照組對比。結(jié)果顯示在圖9至16中。
參考圖9，血液從健康對照CMV血清反應(yīng)陽性的供體(n = 14)或服用阿昔洛韋(ACV 400mg b.d.)或伐昔洛韋(VCV 500mg o. d.或b. d.)的CMV血清反應(yīng)陽性的患者(n=15)獲得，并且用葡萄球菌腸毒素B(作為陽性對照)或來自卯65和IE-1的CMV溶胞產(chǎn)物或CMV肽池溫育?？乖?特異性T細胞通過干擾素_ Y的表達檢測。可以看出，CMV-特異性T細胞的數(shù)目在服用ACV或VCV的患者中是減少的。 參考圖10 ，血液從服用阿昔洛韋(ACV 400mg b. d.)或伐昔洛韋(VCV500mgo.d.或b.d.)的患者獲得并且用CMV溶胞產(chǎn)物溫育?？乖?特異性T細胞通過干擾素-Y的表達檢測。可以再次看出，CMV-特異性T細胞的數(shù)目在服用ACV或VCV的患者中是減少的。 參考圖ll，用CMV溶胞產(chǎn)物剌激來自健康CMV血清反應(yīng)陽性供體或服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者的血液并且通過Elispot分析測量抗原-特異性的T細胞的數(shù)目。在服用ACV或VCV的患者中觀察到減少的針對CMV的Elispot反應(yīng)。 在圖12中，用針對CD27， CD28或CD57的抗體染色35位CMV-血清反應(yīng)陽性或血清反應(yīng)陰性健康供體的外周血中的CD4+T細胞。將這些顯示在左欄上。對服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者進行類似的分析(右手欄)。可以看出，與健康供體相比，已經(jīng)失去CD27或CD28表達或已經(jīng)獲得CD57表達的CD4+T細胞的百分比在服用ACV或VCV的CMV-血清反應(yīng)陽性的患者中較低。 參考圖13，用針對CD27的抗體染色25位健康供體或服用ACV或VCV的患者的外周血中的CD4+T細胞?？梢钥闯?，已經(jīng)失去CD27表達的CD4+T細胞的百分比在服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的CMV-血清反應(yīng)陽性的患者中是減少的。 參考圖14，用針對CD28的抗體染色25位健康供體或服用ACV或VCV的患者的外周血中的CD4+T細胞?？梢钥闯?，已經(jīng)失去CD28表達的CD4+T細胞的百分比在服用阿昔洛
11韋或伐昔洛韋的CMV-血清反應(yīng)陽性的患者中是減少的。 參考圖15，用針對CD57的抗體染色25位健康供體或服用ACV或VCV的患者的外 周血中的CD4+T細胞?？梢钥闯觯呀?jīng)獲得CD57表達的CD4+T細胞的百分比在服用阿昔洛 韋或伐昔洛韋的CMV-血清反應(yīng)陽性的患者中是減少的。 在圖16中，用針對CD57的抗體染色健康供體或服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者 的外周血中的CD8+T細胞。與健康的對照相比，在CMV血清反應(yīng)陽性供體中表達CD57的 CD8+T細胞的百分比在服用阿昔洛韋或伐昔洛韋的患者中是減少的。
實施例2 在用阿昔洛韋40mg b. d.治療以前，和在3和14個月以后，從單一個體取外周血， 并且分析其CMV-特異性免疫反應(yīng)。結(jié)果顯示在圖17和18中。 參考圖17，用CMV溶胞產(chǎn)物剌激血液，并且測量響應(yīng)于抗原而產(chǎn)生干擾素-Y的 CD4+T細胞的百分比。可以看出，該百分比在處理時是減少的。 最后，參考圖18，用CMV溶胞產(chǎn)物或來自CMV卯65或IE_1的肽池剌激血液，并且利 用干擾素-Y的Elispot分析檢測CMV-特異性T細胞的數(shù)目?？梢钥闯?，該反應(yīng)的量級通 過處理減小。
1權(quán)利要求
有效針對巨細胞病毒(CMV)的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于改善CMV-血清反應(yīng)陽性的免疫活性個體的免疫反應(yīng)。
2. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD4+T細胞總數(shù)比例的 CD4+CD28-T細胞數(shù)目。
3. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD4+T細胞總數(shù)比例的 CD4+CD27-T細胞數(shù)目。
4. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD4+T細胞總數(shù)比例的 CD4+CD57+T細胞數(shù)目。
5. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD8+T細胞總數(shù)比例的 CD8+CD28-T細胞數(shù)目。
6. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD8+T細胞總數(shù)比例的 CD8+CD27-T細胞數(shù)目。
7. 權(quán)利要求l的用途，其中改善所述免疫反應(yīng)包括減少作為CD8+T細胞總數(shù)比例的 CD8+CD57+T細胞數(shù)目。
8. 權(quán)利要求2至7任一項的用途，其中所述減少至少是20%。
9. 有效針對CMV的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療免疫活性個體中的CMV。
10. 有效針對CMV的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于改善選自下列病癥的癥狀HIV感染；情緒失調(diào)，包括抑郁，疲勞或焦慮；精神分裂癥；慢性疲勞綜合征；炎性 病癥諸如類風濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，結(jié)節(jié)病，關(guān)節(jié)強直性脊柱炎，牛皮癬關(guān)節(jié)病， Wegener肉芽腫病，及其它血管炎；自身免疫病癥諸如多發(fā)性硬化，Sjorgen綜合征，糖尿 病，原發(fā)性膽硬化，和全身硬化；惡性疾?。唤Y(jié)節(jié)病或淀粉樣變；慢性細菌、病毒或寄生物感 染，包括病毒性肝炎和Chagas??；癥疾；慢性肺病諸如支氣管擴張癥或囊性纖維變性；急性 冠狀綜合征諸如不穩(wěn)定性心絞痛；動脈(例如主動脈的)動脈瘤；動脈粥樣硬化；和腦血管 閉塞("中風")。
11. 一種醫(yī)學治療方法，所述方法包括將有效針對CMV的化合物施用到CMV血清反應(yīng)陽 性的免疫活性患者以減少針對CMV的免疫反應(yīng)。
12. 權(quán)利要求1至IO任一項的用途，或權(quán)利要求11的方法，其中所述化合物選自阿昔 洛韋、泛昔洛韋和伐昔洛韋。
13. 具有大于20iiM的針對CMV的ID5。的核苷類似物在制備藥物中的用途，所述藥物 用于治療免疫活性患者中CMV-介導的病癥。
14. 權(quán)利要求13的用途，其中所述核苷類似物具有至少50 ii M的針對CMV的ID5。。
15. 權(quán)利要求13或14的用途，其中所述核苷類似物選自阿昔洛韋、泛昔洛韋和伐昔洛韋。
全文摘要
本發(fā)明提供有效針對巨細胞病毒(CMV)的化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于改善CMV-血清反應(yīng)陽性的、免疫活性的個體的免疫反應(yīng)，或用于改善某些其它的醫(yī)學病癥。適合的化合物包括核苷類似物阿昔洛韋，泛昔洛韋，和伐昔洛韋。被巨細胞病毒感染是普遍的并且通常被認為在免疫活性個體中是無癥狀的并且在不使用高細胞毒性藥物的情況下是不可治療的。本文中提出，事實上，CMV感染產(chǎn)生不成比例地大免疫反應(yīng)，因此削弱免疫系統(tǒng)響應(yīng)其它感染的能力(并且由此不是無癥狀的)。另外，用相對小劑量的具有低細胞毒性(并且因此類似低功效)的藥物治療可以減少該CMV-特異性免疫反應(yīng)的量級，從而增加總免疫反應(yīng)，并且改善其它醫(yī)學病癥的癥狀。
文檔編號A61P31/00GK101765424SQ200880100844
公開日2010年6月30日 申請日期2008年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月30日
發(fā)明者保羅·奧斯汀·亨利·默斯 申請人:伯明翰大學