專利名稱：：2’-氟-4’-取代-核苷類似物、其合成方法及其應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及核苷類似物、其制備方法及其應用，尤其涉及2'-氟-4'-取代核苷類似物、其制備方法及應用。
背景技術：
：1981年美國發現第一例艾滋病患者，到1983年科學家即分離鑒定出了艾滋病病毒(HIV)，發現HIV屬于逆轉錄病毒科的慢病毒亞科，僅由9749個核苷酸組成。目前對HIV復制循環過程已經基本搞清，研究發現其繁殖過程大致分為以下步驟吸附、侵入和脫殼、逆轉錄、整合、病毒RNA和蛋白質的合成、裝配、釋放和成熟，其中每個環節均可作為篩選HIV藥物的靶點，其中蛋白質的合成和病毒基因組核酸復制是最關鍵的步驟。目前篩選抗HIV藥物的焦點集中于尋找這些特異性酶的抑制劑，包括逆轉錄酶(RT)抑制劑、蛋白質合成酶抑制劑和逆轉錄酶啟動因子抑制劑等。HIV的逆轉錄酶是一種多功能酶，同時具有依賴RNA的DNA聚合酶、依賴DNA的DNA聚合酶和RhaseH活性。HIV首先以病毒基因組的RNA為模板，以宿主細胞的運轉RNA為引物，進行(-)鏈DNA的合成，然后以同樣的方式合成(+)鏈DNA。當逆轉錄結束以后，HIV所攜帶的全部遺傳信息從單鏈RNA轉化為雙鏈mDNA。逆轉錄酶抑制劑可以阻止mDNA的延長，干擾HIV的逆轉錄過程，從而成為化學治療艾滋病的藥物。根據抑制劑的作用機理不同，可以把它們分為兩類1)核苷類逆轉錄酶抑制劑，其作用于HIVDNA逆轉錄過程中，通過嵌入到病毒DNA中，促使其成為缺陷DNA而使HIV的宿主細胞的DNA整合后無法復制，從而達到抗HIV的作用，現有藥物為齊多夫定(AZT)、去羥肌苷(ddl)、扎西他濱(ddC)、司他夫定(d4T)、拉米夫定(3TC)、阿巴卡韋(Abacavir);2)非核苷類逆轉錄酶抑制劑，其作用機制是阻止HIVRNA直接連接到RT，不讓其編碼成DNA。現有藥物奈韋拉平(Nevirapine)、Delavirdine禾口Efavirenz。1987年第一個上市的抗HIV藥物齊多夫定即為核苷類逆轉錄酶抑制劑，雖然該藥物毒性很大，并且未能治愈一例病人，但是它可以減輕癥狀，延長患者的生命。隨后又有幾個核苷類似物抗HIV藥物上巿，因此，核苷類似物是一類重要的可能具有抗HIV活性的化合物。目前這些藥物都存在一定的缺陷，一方面是藥效有限，另一方面是長期服用有嚴重的毒副作用，并且會產生抗性。因此，新型核苷類似物的合成依然是一個重要的研究方向。為了發現更有效的核苷類抗病毒藥物，人們對核苷進行了各種各樣的修飾，其中含有氟的核苷類似物即為其中的一類。(Clark,J.PCTPatentAppl"WO2005003174;Ismaili,H.M.A.PCTPatentAppl.,WO0160315A22001)。研究表明該類化合物都有不同程度的抗病毒活性，是一類新型的具有抗病毒活性的化合物。但是在現有的文獻中，迄今尚未見到本發明之含2'-氟-4'-取代-D-和L-核苷類似物的合成，以及將其用于制備抗HIV和抗HBV及HCV病毒藥物的相關報道。
發明內容本發明的主要目的在于提供一種含2'-氟-4'-取代核苷類似物；另一目的在于提供該類化合物的合成方法；又一目的在于提供該類化合物在藥物方面的應用。為實現本發明目的，技術方案如下實現該本發明2'-氟-4'-取代核苷類似物，具有通式(I)結構OH(I)XX。，XR=CH3，CN，N3，C三CH;R'=H,F;X=F,OH,NH2;Y=H,CH3,F,OH，NH2。其可以通過活性化合物(I)或其潛藥或其5'-磷酸酯與有機酸或無機酸反應形成鹽，以鹽的形式存在。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>本發明含2'-氟-4，-取代-核苷類似物在制備藥物中的應用，將其應用于制備抗HBV或抗HCV或抗HIV病毒藥物中，所述抗HBV病毒藥物為抗乙肝藥物;所述抗HCV病毒藥物為抗丙肝藥物；所述抗HIV病毒藥物為抗艾滋病藥物。本發明含2'-氟-4'-取代核苷類似物的制備反應，當R-N3時路徑如下化合物U的合成將化合物i(D-核糖或L-核糖)溶于HCl/MeOH中，在水浴下保溫密閉攪拌，加入吡啶終止反應，減壓抽干，得淺黃色糖漿狀物質化合物ii;化合物iii的合成將化合物ii溶于干燥的吡啶中，冰鹽浴下緩慢滴加苯甲酰氯，室溫下攪拌反應，反應完畢后將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗滌至水層呈弱堿性，再用冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿狀物質化合物iii。化合物iv的合成將苯甲酰化物化合物iii溶于氯仿中，加入紅磷，冰水浴攪拌下緩慢滴加溴，攪拌30min左右，緩慢滴加冰水，室溫攪拌，然后加入碎冰攪融，再將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得深黃色糖槳，用硅膠柱分離得白色干糖漿化合物iv。化合物v的合成將化合物iv溶解在干燥的吡啶中，冰水浴下緩慢滴加醋酐，攪拌30min左右，撤去冰水浴，室溫攪拌約7h，升溫到4(TC保持約lh。加入碎冰攪融后，將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿狀化合物V。化合物vi的合成將化合物V溶于干燥的二氯甲垸中，冰水浴下緩慢通入干燥的HC1氣體，加入冰水洗滌，分出有機層，用飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿。重結晶得白色固體化合物Vi。化合物Vii的合成將化合物Vi溶于干燥的二氯甲烷中和干燥的DMF中，-15匸左右攪拌下緩慢加入302(:12，-15°0攪拌30!^11左右，自然升至室溫反應，在0t:下分3次加入咪唑，混合液室溫攪拌，反應完畢后向反應液加入CH2C12稀釋，用冰水洗滌，水層用CH2Cl2提取，有機層合并后用無水硫酸鈉干燥，減壓抽干溶劑得淺黃色糖漿。用硅膠柱分離純化得白色固體化合物vii。化合物viii的合成將化合物vii溶于乙酸乙酯中，攪拌下加入Et3N3HF，升溫至6(TC左右攪拌約3h，7(TC攪拌約1.5h。加入冰鹽水終止反應，然后用二氯甲垸提取，有機層合并后依次用鹽水、水、飽和碳酸氫鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干溶劑得深黃色糖漿。純化得淺黃色糖漿，粗品結晶得白色晶體化合物viii。化合物ix的合成將化合物viii溶解于無水二氯甲烷中，加入HBr-AcOH的混合溶液，室溫攪拌反應。反應完畢后將混合物蒸干，用二氯甲烷溶解剩余物，并用碳酸氫鈉洗滌二氯甲烷溶液，將二氯甲垸蒸去，得到糖漿狀物。同時，將保護過的胞嘧啶和(NH4)2S04在HMDS中氮氣保護下回流反應，反應完畢，減壓蒸去溶劑，得到甲硅烷基化的胞噴啶。將上述反應中得到的糖槳狀物溶于二氯乙垸中，加入到甲硅垸基化的胞嘧啶中，混合物在N2保護下回流反應。用冰終止反應，二氯甲烷萃取，二氯甲烷層依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。干燥后蒸除溶劑，得到白色固體，柱色譜分離純化，得到化合物ix。化合物x的合成將化合物ix溶于飽和的NH3-CH30H，室溫攪拌反應。反應完畢后將溶劑蒸干，所得剩余物通過柱色譜純化，得到化合物x。化合物xi的合成將化合物x，咪唑、三苯基膦，溶解在四氫呋喃中，向其中緩慢加入溶解有碘的四氫呋喃溶液。室溫攪拌反應。反應完畢后蒸除溶劑，向剩余物中加入乙酸乙酯，過濾。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色譜分離得到化合物xi。化合物xii的合成將化合物xi溶解在四氫呋喃中，向其中加入DBU。在6(TC左右攪拌反應。反應完畢后蒸干溶劑，剩余物柱色譜分離得到化合物xii。化合物xiii的合成在0'C左右，將溶有IC1的DMF溶液加入到溶有NaN3的DMF溶液中，冰點攪拌約10分鐘，將溶有化合物xii的DMF緩慢加入到上述溶液，繼續反應。反應完畢后向混合溶液中加入亞硫酸鈉，直到碘的顏色完全消失。減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得到化合物xii化合物xiv的合成將化合物xiii溶于DMF中，攪拌下加入醋酸銀，室溫反應，反應完畢后過濾。在減壓下移除溶劑，剩余物用柱色譜純化，得到化合物xivo化合物XV的合成將化合物xiv溶于三乙胺甲醇溶液中，室溫攪拌反應，反應結束后蒸除溶劑，剩余物用柱色譜純化，得到化合物xv。本發明含2'-氟-4'-取代核苷類似物的制備反應，當R=CH3,CN,C=CH時路徑如下化合物b的合成取化合物a，加入丙酮，攪拌條件下慢慢加入濃硫酸，室溫下攪拌反應，TLC檢測反應結束后，用濃氨水調節pH值，過濾，減壓蒸去大部分丙酮，在攪拌條件下加入0.4%稀鹽酸，在丙酮回流條件下反應，化合物a全部水解成化合物b。用固體NaHC03中和反應液，過濾，濾液在減壓下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲烷溶解，用無水Na2S04干燥過夜，過濾，蒸去溶劑后，得到黃色粘稠油狀物b。化合物c的合成將化合物b和三乙胺溶于二氯甲烷，冰鹽浴下慢慢滴加對氯苯甲酰氯，保持O'C以下機械攪拌反應。反應完畢后加入飽和NaHC03水溶液，二氯甲烷層用水、飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，過濾，減壓蒸去溶劑，并重結晶剩余物，得白色晶體化合物c。化合物d的合成化合物c溶解到無水二氯甲烷中，在氮氣保護下，加入咪唑和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSC1)。室溫反應，反應結束后，用鹽酸中和反應，分出兩層，有機層分別用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水Na2S04干燥，蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜進行分離純化，得到化合物d。化合物e的合成化合物d加入到甲醇鈉-甲醇的混合物液中，室溫反應。反應結束后用稀醋酸中和，過濾，用甲醇洗滌，減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得化合物e。化合物f的合成在約-6(TC條件下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，在相同的溫度下，攪拌約15分鐘后，滴加化合物e的二氯甲烷溶液。在約-65'C攪拌反應約30分鐘，加入三乙胺，室溫攪拌反應。反應結束后向反應液中加入水，分出有機層，有機層用無水硫酸鎂干燥。蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化得化合物f。化合物g的合成在反應瓶中放入氫氧化鈉和水，攪拌均勻后，加入甲醛水溶液、95%乙醇，然后再加入化合物f。約35f下攪拌反應。反應結束后，邊攪拌邊用冰水冷卻反應瓶，直至產物完全析出。抽濾，固體用水洗滌至中性并烘干，所得固體溶解到無水甲醇中，再加入硼氫化鈉，回流反應，反應結束后用稀鹽酸中和反應液，用二氯甲垸萃取反應液，無水Na2S04干燥后蒸除溶劑，得化合物g。化合物h的合成化合物g溶解到甲醇中，加入DowexH+(事先用甲醇洗滌)，室溫反應，反應完畢后將樹脂過濾除去，并用甲醇反復洗滌樹脂，溶液蒸干得固體。將所得固體溶于丙酮中，攪拌條件下慢慢加入濃硫酸(催化量)，室溫攪拌反應，用濃氨水調節pH值，過濾，減壓蒸去丙酮，得到化合物h。化合物i的合成在約-6(TC下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，滴完后攪袢約15分鐘，滴加化合物h的二氯甲烷溶液，滴完后約-60'C反應約30分鐘，加入三乙胺，室溫反應約30分鐘后加入水終止反應，分出有機層，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化得固體。將C1CH2P(C6H5)3C1加入到無水四氫呋喃中，冷卻到約-78。C，加入n-BuLi的正己垸溶液攪拌反應約lh，然后加入所得固體的干燥四氫呋喃溶液。溫度逐漸升高到0'C左右，繼續反應。反應完畢后小心滴加飽和的NH4C1溶液，用乙酸乙酯萃取，有機層用鹽水洗滌兩次，最后用無水MgS04干燥，減壓蒸除溶劑，得到的剩余物溶解到無水四氫呋喃中，冷卻到-78'C左右，慢慢滴加n-BuLi的正己烷溶液。攪拌反應2h左右，小心地用飽和NH4C1溶液終止反應。有機層用飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用快速硅膠柱分離純化，得化合物i。化合物j的合成將化合物i加入到稀鹽酸溶液中，室溫攪拌反應，反應完畢后用固體NaHC03中和，過濾，濾液在減壓條件下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲烷溶解，并用無水Na2S04干燥后過濾，蒸去溶劑，得化合物j。化合物k的合成將化合物j溶解到吡啶中，滴加BzCl，室溫反應，反應完畢后蒸干溶劑，剩余物純化后得化合物k。化合物1的合成將化合物k和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧溶于二氯甲垸中，冷至0。C左右，將混合的次氯酸鈉溶液、NaHC03和水混合溶液加入到反應液，0'C左右反應約30分鐘，加入異丙醇，室溫攪拌。分出的二氯甲垸層用水洗滌2次，無水MgS04干燥，過濾，蒸去溶劑得到的剩余物進行重結晶，得到化合物1。化合物m的合成將化合物k加入到無水乙醇和乙酸乙酯的混合液中，冷至0'C左右，分批加入硼氫化鈉，攪拌反應，反應完畢后用稀醋酸中和，過濾，濾液蒸干，剩余物再用二氯甲烷溶解，然后水洗，二氯甲垸層用無水MgS04干燥，過濾，減壓蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶劑重結晶，得到固體物。將所得固體物溶于吡啶中，在O'C左右滴加BzCl，滴加完畢后，室溫反應，反應完畢后蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯萃取，飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2S04干燥，過濾，蒸去溶劑，剩余物柱色譜分離純化得化合物m。化合物n的合成將化合物m溶于甲醇中，加入濃鹽酸/二氧六環的混合溶液，室溫反應，反應完畢后用NaHC03中和反應液，過濾，濾液減壓蒸餾除去溶劑，剩余物溶于適量二氯甲烷中，用無水Na2S04干燥過夜，濾液蒸干，用柱色譜分離純化得化合物n。化合物O的合成化合物n溶解在二氯甲烷中，室溫條件下加入DAST攪拌反應，反應完畢后將混合物倒入飽和NaHC03溶液中，分出有機層，并用飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2S04干燥，柱色譜分離純化得到化合物o。化合物p的合成將化合物o加入到甲酸溶液中，在室溫下攪拌反應，反應完畢后減壓蒸去溶劑，剩余物與甲苯共蒸得固體物，將所得固體物溶于干燥吡啶和醋酸酐溶液，室溫反應，反應完畢后將反應液濃縮，然后與甲苯共蒸，得到化合物p。化合物q的合成化合物p溶于無水二氯甲烷中，將其冷至0'C左右，然后慢慢通HC1氣體至飽和，室溫下真空蒸去溶劑，剩余物真空干燥得到化合物q。化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤與六甲基硅氮烷(HMDS)在(NHU)2S04存在下加熱回流至得到透明溶液，真空下蒸去溶劑得到白色固體，將該固體溶于1,2-二氯乙烷中，再加入化合物q的1,2-二氯乙垸溶液及分子篩，在氮氣保護下室溫攪拌反應，TLC檢測反應完全后，在反應液中加入二氯甲烷，并用硅藻土過濾，濾液分別用飽和NaHC03和食鹽水洗滌，有機層用無水Na2S04干燥過夜，蒸去溶劑得到的剩余物用減壓硅膠柱分離得到化合物r。化合物s的合成將化合物r溶解在NH3-CH30H飽和的溶液中，室溫攪拌反應，反應完畢后蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜分離純化得到化合物s。本發明有益效果在于，通過對糖基和堿基的修飾，使該D-和L-核苷類似物含氟基團、炔基、疊氮、氰基等特殊結構彌補目前D-和L-核苷類似物毒副作用大、活性較小的不足；且該合成方法簡便可行，收率較高，將其應用于制備抗HBV或抗HCV或抗HIV病毒藥物，具有較好的應用價值。具體實施例方式根據本發明通式化合物I的合成路線并結合實施例對發明進行進一步說明，但并非限制本發明的范圍。實施例1當堿基為胞嘧啶時化合物15的合成化合物ii的合成將化合物i(D-核糖或L-核糖)(8.66mmol)溶于31.2mlHCl/MeOH(0.2mmol/L)中，在27'C水浴下保溫密閉攪拌3h，加入7.8ml吡啶終止反應，減壓抽千，得淺黃色糖漿狀物質化合物ii(96%);化合物iii的合成將化合物ii(7.92mmol)溶于21ml干燥的吡啶中，冰鹽浴下緩慢滴加5.2ml苯甲酰氯(0.0447mo1)，室溫下攪拌17h后將反應液倒入39ml冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的3mol/L硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗滌至水層呈弱堿性，再用冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽干得淺黃色糖漿狀物質化合物iii(80.0%)。NMR(CDC13)Sppm:7.28~8.10(m，15H,OBz),5.87(m，1H，H-3)，5.68(d,1H，H-2),5.16(s,1H,H-1),4.72(m,2H,H-5)，4.52(q，1H,H-4),3.42(s,3H,OCH3)。化合物iv的合成將苯甲酰化物化合物iii(0.0027mmol)溶于13mol氯仿中，加入紅磷(390mg，0.0126mol)冰水浴攪拌下緩慢滴加溴(1.3ml，0.025mmol)，攪拌30min后，緩慢滴加冰水1.3ml，室溫攪拌4h,然后加入7g碎冰攪融，再將反應液倒入14ml冰水中，氯仿提取。有機層飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽干得深黃色糖漿，用硅膠柱分離(石油醚丙酮梯度洗脫)得白色干糖漿化合物iv(64.2%)。'HNMR(CDC13)Sppm:7.32~8.10(m,15H,OBz)，5.90(m,1H，H-3),5.70(d,1H,H-2),5.63(s，1H,H-l)，4.55~4.79(m，3H，H-5,H-4)。化合物v的合成將化合物iv(2.73mmo1)溶解在5ml干燥的吡啶中，冰水浴下緩慢滴加醋酐(0.0276mol),攪拌30min后，撤去冰水浴，室溫攪拌7h,升溫到4(TC保持lh。加入6.5g碎冰攪融后，將反應液倒入13ml冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的3mol/L硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽干得淺黃色糖漿狀化合物v(92.1%)。'HNMR(CDCI3)Sppm:7.30~8.10(m,15H,OBz),6.43(s,1H，H-1),5.90(m,1H,H-3),5.80(d,1H，H-2),4.50~4.80(m,2H,H-5),2.00(s，3H，CH3COO-)。化合物vi的合成將化合物v(2.57mmol)溶于26ml干燥的二氯甲烷中，冰水浴下緩慢通入干燥的HC1氣體2.5h，加入冰水19.5ml洗滌，分出有機層，用飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽千得淺黃色糖漿。用正己垸、二氯甲烷混合溶劑重結晶得白色固體化合物vi(65.1%)。'HNMR(CDCl3)Sppm:7.36~8.14(m,15H,OBz),6.68(d,J=4.4Hz,IH,H-l),5.59(dd,1H，H-3)，4.64~4.80(m,4H,H-2,H-4andH-5)。M.p.l39140。C。化合物vii的合成將化合物vi(2.81mmol)溶于13ml干燥的二氯甲烷中和3.5ml干燥的DMF中，-15。C攪拌下緩慢加入S02C12(0.0079mmol)，-15。C攪拌30min后，自然升至室溫，反應3h，在0'C下分3次加入咪唑(0.0407mmol)，混合液室溫攪拌15h，反應液加入CH2Cl2(26ml)稀釋，用冰水G5ml)洗滌，水層用CH2Cl2提取，有機層合并后用無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽干溶劑得淺黃色糖漿。用硅膠柱分離純化(石油醚丙酮梯度洗脫)得白色固體化合物vii(76.0%)。'HNMR(CDCl3)S卯m:7.008.10(m,15H,OBz),6.71(d,J^4.4Hz,1H,H-l),5.59(dd,1H,H-3)，5.25(dd,1H,H-2),4.56~4.81(m,3H,H-4,H-5)。M.p.l28129。C。化合物viii的合成將化合物vii(2.2mtno1)溶于乙酸乙酯(54ml)中，攪拌下加入Et3N'3HF(2.08ml，0.013mmo1)，升溫至60。C攪拌3h,70。C攪拌1.5h。加入冰鹽水UOml)終止反應，然后用二氯甲烷提取，有機層合并后依次用鹽水、水、飽和碳酸氫鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥4h以上，減壓抽干溶劑得深黃色糖漿。用硅膠漏斗(5cmX5cm)純化(二氯甲垸洗脫)得淺黃色糖漿(86.8%),粗品在95%的乙醇溶液中結晶得白色晶體化合物viii(66.4%)。'HNMR(CDC13)Sppm:7.31~8.10(m,15H,OBz)，6.71(d,戶9.0Hz,1H,H-l)，5.68(dd,/=19.44Hz,1H,H-3),5.32(d,J:48.2Hz,1H,H-2),4.65~4.77(m,3H,H-4,H-5)。M.p.8082。C。化合物ix的合成將化合物viii(6.0mmo1)溶解于無水二氯甲垸(20ml)中，加入HBr-AcOH(45%，V/V，4.6ml，25mmo1)的混合溶液，室溫攪拌反應20h。將混合物蒸干，用二氯甲烷(50ml)溶解剩余物，并用碳酸氫鈉(3X30ml)洗滌二氯甲烷溶液，將二氯甲垸蒸去，得到糖漿狀物。同時，將保護過的胞嘧啶(15mmol)和(NH4)2S04(O.lg)在HMDS(30ml)中氮氣保護下回流反應17h，減壓蒸去溶劑，得到甲硅垸基化的胞嘧啶。將上述反應中得到的糖漿狀物溶于二氯乙烷(25ml)中，加入到甲硅烷基化的胞嘧啶中，混合物在N2保護下回流反應15h。用冰終止反應，用二氯甲烷(3X45ml)萃取，二氯甲烷層依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。干燥后蒸除溶劑，得到白色固體，柱色譜分離(1%MeOH-CHCl3)純化，得到化合物ix(71%)。NMR(CDC13)Sppm:8,07(d，J=9.86Hz,IH),7.45(d,J=9.82Hz,IH),7.26~8.10(m,10H,OBz),6.03(d,J=9.0Hz,IH,H-1),5.64(dd，JH9.44Hz，IH,H-3),5.26(d,J=48.2Hz,IH,H-2)，4.65~4.77(m,3H,H-4,H國5)。化合物x的合成將化合物ixG.60mmo1)溶于飽和的NHrCH3OH(30ml)室溫攪拌反應15h。將溶劑蒸干，所得剩余物通過柱色譜(15:lCHCl3-MeOH)純化，得到化合物x(800/。)。'HNMR(CDC13)Sppm:8.10(d,J=9.86Hz,IH),7.40(d，J=9.82Hz,1H)，6.03(d,J^9.0Hz，1H，H-1),5.64(dd,J=19.44Hz,IH,H-3),5.26(d,J=48.2Hz,IH,H-2),4.50(m,1H，H-4),3.70~3.77(m,2H,H-5)。化合物xi的合成將化合物x(9.46mmol)，咪唑U8.93mmo1)、三苯基膦U4.19mmo1)，溶解在四氫呋喃(50ml)中，向其中緩慢加入溶解有碘(14.18mmo1)的四氫呋喃溶液15ml。室溫攪拌反應3h。蒸除溶劑，向剩余物中加入乙酸乙酯(100ml)，過濾。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色譜分離得到化合物xi(83.9%)。'HNMR(CDC13)Sppm:8.06(d,J=9.86Hz,1H),7.43(d,J-9.82Hz,1H)，6.01(d,7=9.0Hz,1H,H-l),5.66(dd,J-19.44Hz,1H，H-3)，5.22(d,J-48.2Hz,1H,H-2),4.57(m,1H,H-4),3.5S3.69(m,2H,H-5)。化合物xii的合成將化合物xi(5.88mmo1)溶解在四氫呋喃(50ml)中，向其中加入DBU(6.44mmo1)。在60'C攪拌3h。蒸干溶劑，剩余物柱色譜分離得到化合物xii(75.1%)。直接用于下一步反應。化合物xiii的合成在0°C，將溶有ICl(13.9mmol)的15mlDMF溶液加入到溶有NaN3(9.75mmol)的DMF(15ml)溶液中，(TC攪拌10分鐘，將溶有化合物xii(6.8mmo1)的DMF(20ml)緩慢加入到上述溶液。(TC反應1小時。向混合溶液中加入亞硫酸鈉，直到碘的顏色完全消失。減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得到化合物xii(77.6%)。直接用于下一步反應。化合物xiv的合成將化合物xiii(5mmo1)溶于DMF(15ml)中，攪拌下加入醋酸銀(6mmo1),室溫反應8h，過濾。在減壓下移除溶劑(5(TC以下)，剩余物用柱色譜純化，得到化合物xiv(71.3°/。)。'HNMR(DMSO-6/6，300MHz)5:8,12(d，1H)，7.40(d，1H)，7.26(br,2H)，6.12(dd,1H),5.87(d,1H),5.09(t,1H),4.90(dt,1H),4.18(dt,1H),3.74-3.87(m，2H)，2.12(s,3H，CH3)。化合物xv的合成將化合物xiv(5mmol)溶于5。/。的三乙胺甲醇溶液(100ml)中，室溫攪拌12h，蒸除溶劑，剩余物用柱色譜純化，得到化合物xv(89.0%)。ESI-MS:287[M+H]。'HNMR(DMSO-c4，300MHz)S:8.14(d,1H),7.32(d,1H)，7.21(br,2H),6.08(dd,1H),5.82(d,1H)，5.11(t，1H),4.92(dt,1H),4.16(dt,1H),3.62-3.69(m,2H)。實施例2當4'-位取代基為炔基，堿基為1,6-二氨基嘌呤時化合物25的合成化合物b的合成取化合物a(60g)，加入丙酮(2L)，攪拌條件下慢慢加入濃硫酸(40ml)，室溫下攪拌反應40分鐘，TLC檢測反應結束，用濃氨水調節pH=7~8，過濾，減壓蒸去大部分丙酮，剩余丙酮和水約150ml，在攪拌條件下加入0.4%稀鹽酸(150ml),在丙酮回流條件下反應20分鐘，化合物a全部水解成化合物b。用固體NaHC03中和反應液至pH=7~8，過濾，濾液在減壓下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲垸溶解(200ml)，用無水Na2S04干燥過夜，過濾，蒸去溶劑后，得到黃色粘稠油狀物b(73g，95%),ESI-MS:191[M+H]。化合物c的合成將化合物b(154g，0.81mol)和三乙胺G39ml，2.43moI)溶于二氯甲烷(1.50L)中，冰鹽浴冷至0"，慢慢滴加對氯苯甲酰氯U13ml，0.891mol)，保持(TC以下機械攪拌反應4h，加入飽和NaHC03水溶液(500ml)，二氯甲烷層用水、飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，過濾，減壓蒸去溶劑，并重結晶剩余物，得白色晶體化合物c(196g，74.6%)，ESI-MS:330[M+H]。化合物d的合成化合物c((U14mo1)溶解到無水二氯甲烷(600ml)中，在氮氣保護下，加入咪唑(15.5g，0.228mol)和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSCI)(18.9g，(U25mo1)。室溫反應3h后，用1N鹽酸中和反應，分出兩層，有機層分別用水和飽和食鹽水洗漆后，用無水Na2S04干燥，蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜進行分離純化，得到化合物d,產率69.2%，ESI-MS:444[M+H〗。化合物e的合成化合物d(0.64mmo1)加入到0.2N甲醇鈉-甲醇(15ml)的混合物液中，室溫反應4h，用稀醋酸中和，過濾，用甲醇洗滌，減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得化合物e，產率75%，ESI-MS:305[M+H]。化合物f的合成-60匸下向草酰氯(3.41111，38.7mmo1)的二氯甲烷(80.0ml)溶液中逐滴滴加DMSO(5.5ml，77.5mmoD，在相同的溫度下，攪拌15分鐘后，滴加化合物e(25.7mmoD的二氯甲院(100ml)溶液。在-65'C攪拌反應30分鐘，加入三乙胺(10.9ml，78.2讓o1)，室溫攪拌反應30分鐘。反應混合物中加入水，分出有機層，有機層用無水硫酸鎂干燥。蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離醇化得化合物f，產率94.6%,ESI-MS:303[M+H]。化合物g的合成在反應瓶中放入氫氧化鈉(1.3g)和水(11.5ml)，攪拌均勻后加入30%的甲醛水溶液、7.2ml95。/。乙醇，然后加入化合物f(25mmo1)。控制反應溫度在3035'C下攪拌2h。反應結束后，邊攪拌邊用冰水冷卻反應瓶，直至產物完全析出。抽濾，固體用水洗滌至中性并烘干，所得固體溶解到無水甲醇中，再加入硼氫化鈉(0.925g，25mmo1)，回流反應lh,用稀鹽酸中和反應液，二氯甲垸萃取(3X50ml)，加入無水Na2S04干燥，蒸除溶劑，得化合物g，產率90.5%，ESI-MS:335[M+H]。化合物h的合成化合物g(9.7mmo1)溶解到甲醇(260ml)中，加入DowexH+(40ml,事先用甲醇洗滌)，室溫反應4h，將樹脂過濾除去，并用甲醇反復洗滌樹脂，溶液蒸干得固體。將所得固體溶于丙酮(200ml)中，攪袢條件下慢慢加入濃硫酸(催化量，2ml)，室溫攪拌反應約0.5h，用濃氨水調節？11=7~8，過濾，減壓蒸去大部分丙酮，再加入0.4%稀鹽酸(40ml),丙酮回流條件下反應20分鐘，用NaHC03中和反應液至pH-78，過濾，減壓下蒸除溶劑，剩余物用適量二氯甲垸溶解，用無水Na2S04干燥后，蒸去溶劑，得到化合物h，產率肌2%，ESI-MS:261[M+H]。化合物i的合成-6(TC向草酰氯G.4ml，38.7mmo1)的二氯甲垸(80ml)溶液中逐滴滴加DMSO(5.5ml，77.5mmo1)，滴完攪拌15分鐘后，滴加化合物h(25.7mmo1)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴完后-60。C反應30分鐘，加入三乙胺(10.9ml，78.2mmo1)，室溫反應30分鐘后加入水終止反應，分出有機層，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化得固體。將C1CH2P(C6H5)3C1(2.15g，6.19mmo1)加入到無水四氫呋喃(50ml)中，冷卻到-78°C，加入n-BuLi的正己烷溶液(1.6M，4.0ml)攪拌反應lh，然后加入所得固體(1.51mmol)的干燥四氫呋喃溶液(50ml)。冷卻溫度逐漸升高到0°C，繼續反應3h。小心滴加飽和的NH4C1溶液(lOml)，用乙酸乙酯萃取(2X100ml),有機層用鹽水洗滌兩次(2X75ml)，最后用無水MgS04干燥，減壓蒸除溶劑，得到的剩余物溶解到無水四氫呋喃U0ml)中，冷卻至i」-78'C，慢慢滴加n-BuLi的正己垸溶液(1.6M,20ml)。攪拌反應2h，小心地用飽和NH4C1溶液(20ml)終止反應。有機層用飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用快速硅膠柱分離純化，得化合物i，產率48.5%,ESI-MS:255[M+H〗。化合物j的合成將化合物i(lOmmol)加入到0.2%的鹽酸溶液(50ml)中，室溫攪拌反應6h，用固體NaHC03中和反應至pH-78,過濾，濾液在減壓條件下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲垸溶解，并用無水Na2S04干燥后過濾，蒸去溶劑，得化合物j,產率99肌ESI-MS:215[M+H]。化合物k的合成將化合物j(5mmo1)溶解到吡啶(20ml)中，滴加BzCl(5mmo1)，室溫反應6h，蒸干，剩余物純化后得化合物k，產率85.3%，ESI-MS:319[M+H]。化合物1的合成將化合物k(59.3mmo1)和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧(0.059mmo1)溶于二氯甲烷(99ml)中，冷至(TC，將次氯酸鈉溶液(33.6ml，8.5~13.5%有效氯)、NaHC03(11.2g)和水(190ml)混合溶液加入到反應液，0'C反應30分鐘，加入異丙醇(1.95ml)，室溫反應10分鐘，分出的二氯甲垸層用水洗滌2次，無水MgS04干燥，過濾，蒸去溶劑得到的剩余物進行重結晶，得到化合物l，產率87.8%，ESI-MS:317[M+H]。化合物m的合成將化合物k(0.05mol)加入到無水乙醇(60ml)和乙酸乙酯(30ml)的混合液中，冷至0°C，分批加入硼氫化鈉(23.3g，612mmol)，然后在O'C攪拌反應lh，用稀醋酸中和至pH-78，過濾，濾液蒸干，剩余物再用二氯甲烷溶解，然后水洗，二氯甲烷層用無水MgS04干燥，過濾，減壓蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶劑重結晶，得到固體物。將所得固體物溶于吡啶中，在0'C條件下，滴加BzCl(50mmo1)，滴加完畢后，室溫反應3h，蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯萃取，飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2S04干燥，過濾，蒸去溶劑，剩余物柱色譜分離純化得化合物m，產率89.7%，ESI-MS:423[M+H〗。化合物n的合成將化合物m(4mmo1)溶于甲醇(22ml)中，加入4.0M的鹽酸/二氧六環混合溶液(20ml)，室溫反應10h，用NaHC03中和反應液至pH=7~8，過濾，濾液減壓蒸餾除去溶劑，剩余物溶于適量二氯甲烷中，用無水Na2S04干燥過夜，濾液蒸干，用柱色譜分離純化得化合物n，產率89.5%，ESI-MS:397[M+H]。化合物o的合成化合物n(1.76mmd)溶解在二氯甲烷中，室溫條件下加入DAST(0.4ml，3.03mmol)攪拌12h，將混合物倒入10ml飽和NaHC03溶液中，分出有機層，并用飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2SCU干燥，柱色譜分離純化得到化合物o，產率11.5%，ESI-MS:399[M+H〗。化合物p的合成將化合物o(lOmmol)加入到20ml濃度為80%的甲酸溶液中，在室溫下攪拌反應12h，減壓蒸去溶劑，剩余物與甲苯共蒸得固體物，將所得固體物溶于干燥吡啶和醋酸酐溶液，室溫反應4h，反應液濃縮后與甲苯共蒸，得到化合物p，產率90.3%，ESI-MS:427[M+H]。'HNMR(CDCl3，300MHz)S:2.07(s,3H),2.85(s,1H),4.62-4.77(m,2H)，4.89-5.07(m，3H)，7.32陽8.17(m,10H)。化合物q的合成化合物p(4.76mmo1)溶于無水二氯甲烷(40ml)中，將其冷至0'C，然后慢慢通HC1氣體至飽和(約3h)，室溫下真空蒸去溶劑，剩余物真空干燥2小時得到化合物q，產率87.P/。，化合物q直接用于下一歩反應。化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤(4.78mmo1)與六甲基硅氮烷(HMDS,9ml)在(NH4)2S04(50mg)存在下加熱回流至得到透明溶液(約5h)，真空下蒸去溶劑得到白色固體，將該固體溶于1,2-二氯乙烷G5ml)中，再加入化合物q的1，2-二氯乙烷溶液(4.56mmol，30ml)及0.4nm分子篩(2.6g)，在氮氣保護下室溫攪拌6天，TLC檢測反應完全后，在反應液中加入二氯甲烷(80ml)，并且用硅藻土過濾，濾液分別用飽和NaHC03和食鹽水洗滌，有機層用無水Na2S04干燥過夜，蒸去溶劑得到的剩余物用減壓硅膠柱分離得到化合物r,產率78.5%，ESI掘:517[M+H]。'HNMR(CDC13，300MHz)S:2.85(s,1H)，4.67-4.79(m,2H),4.92-5.13(m,3H)，5.79(br,1H),7.32隱8.17(m,9H),8.35(s,1H)。化合物25的合成將化合物r(3.60mmo1)溶解在飽和的NH3-甲醇溶液(30ml)中，室溫攪拌反應15h，蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜分離純化得到化合物25，產率78.9%,ESI-MS:309[M+H]。'HNMR(CDC13，300MHz)5:2.85(s,1H),3.69-3.79(m,2H),4.79-5.07(m,3H),5.60(br,1H),5.79(br,1H),7.32-8.17(m,4H),8.35(s，1H)。本發明體外抗HIV活性實驗化合物l、15、19、36、39、46、50、52在細胞培養內的抗HIV-1活性1.材料和方法1.1材料1.1.1藥物待試藥物化合物l、9、15、19、36、39、46、50、52，無批號，水不溶，DMSO可溶解，實驗時用DMSO溶解配成適當濃度后用培養基稀釋，立即加入細胞培養。陽性對照藥(1)齊多夫定(Zidovudine，AZT)為臨床應用的已知核苷類HIV-1逆轉錄酶抑制劑，為白色粉末，購自上海迪賽諾化學制藥有限公司，批號040201b，(2)奈韋拉平(nevir叩ine，NVP)購自南京澤眾醫化信息研究中心(批號0301001),為臨床應用的已知非核苷類逆轉錄酶抑制劑。1.1.2病毒HIV-1IIIB實驗病毒株，為美國MountSinaiMedicalCenter蔣建東博士贈予，在H9細胞中擴增，"96"C凍存。1.1.3細胞傳代人T淋巴細胞MT-4,為美國科羅拉多大學醫學研究中心張興權教授贈送，本室傳代，496'C保存。細胞培養基RPMIMedium1640培養基，加10%胎牛血清、100IU/ml青霉素、100pg/ml鏈霉素和卡那霉素及含L-谷氨酰胺。37'C，5%<:02培養箱中培養，每三天傳代一次。1.1.4主要試劑RPMIMedium1640培養基為美國GIBCO公司產品；胎牛血清(FetalBovineSerum)為天津市川頁生化制品有限公司產品；青霉素和鏈霉素為華北制藥廠產品；卡那霉素為上海旭東海普藥業有限公司口廣叩5四氮唑藍(Thiazolylblue,MTT)，梓檬酸為美國Sigma公司產品；TritonX-100為瑞典KEBOABSTOCKHOLM公司產品；N,N二甲基甲酰胺(N,N-DimethylFormamide)為北京化工廠產品；HIV-1P24抗原檢測試劑盒用荷蘭BioMerieux公司產品。1.1.5主要儀器EmaxTM酶標儀為美國MolICularDevices公司產品；實驗在3級生物安全實驗室中進行。1.2實驗方法96孔培養板，設藥物及陽性對照藥抑制病毒實驗組，每孔加入待測藥物的不同濃度DMSO溶液lOOul或陽性對照藥AZT和NVP或大鼠口服藥物不同劑量組后不同時間取血不同稀釋組，每孔lOOul，同時設細胞對照和病毒對照組陽性藥AZT和NVP對照組。MT-4細胞用100TCID50HIV-1IIIB感染1.5小時后，用培養基洗滌1次后，配成2xl()s細胞/mr接種于藥物抑制病毒實驗組和陽性對照藥物組及病毒對照組的96孔培養板中。細胞對照組加等量培養液，培養4天后。用顯微鏡觀察細胞病變，同時用MTT染色測定毒性，上清液按說明書方法測定P24抗原。分別計算抑制率、半數有毒濃度(CC5Q)和半數有效濃度(IC50)及SI。2結果2.1化合物1，9，15，19，36，39，46，50，52在MT-4細胞培養內對HIV-1的抑制作用用MTT法測定化合物1，9，15，19，36，39，46，50，52對細胞的毒性和抗HIV-1活性，并比較藥物用HIV-1感染細胞和未感染細胞測定細胞毒性對CCm)禾口SI的影響。結果見表l。表1化合物1，9，15,19，36，39，46，50,52及陽性藥物AZT和NVP在MT-4細胞培養內抗HIV-1活性<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>由表1和表2可知，新型2'-氟-4'-取代-核苷均具有良好的抗HIV活性，尤其化合物1、化合物15和化合物19具有很好的應用開發前景。該類化合物的開發，將為艾滋病患者帶來福音。本發明體外抗HCV活性實驗1.材料及方法1.1細胞培養HCV復制細胞(Awa,5)在Dulbecco's改進的包含10%牛胎兒血清和lmg/mL的G418的Eagle介質中培養。293-Sip-L細胞在Dulbecco's改進的含10%牛胎兒血清和250ug/mL的G418及150ug/mL的潮霉素B的Kagle介質中培養。]2HCV感染測定方法(RT-PCR方法)用60mm直徑的Petri培養皿中的細胞在包含100yL的HCV陽性的培養基中培育12小時。然后細胞在不包含HCV的新鮮介質中培育并且每天更換一次。細胞在感染7天后檢測HCV-RNA時，細胞需要胰蛋白酶化并用離心法用Dulbecco's改進的Eagle介質清洗兩次。第二次洗滌的上層部分(作為對照)和洗過的細胞成對收集來進RNA提取和RT-PCR檢測。e-肌動蛋白mRNA同時測定以做對照。1.3HCV-RNA的定量檢測采用全自動PCR酶聯免疫法來定量測定HCV-RNA(2.0版，RocheDiagnostics,Branchburg,NJ)。2.結果.化合物17在6，0.6和0.06ng/mL時有抑制效果(見下表)。HCV-RNA水平用全自動PCR酶聯免疫法來測定。<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>由此看來，化合物17對HCV有較強的抑制作用。權利要求1.其具有通式(I)結構的2’-氟-4’-取代-核苷類似物，或其與有機酸或無機酸反應形成的鹽或其5’-磷酸酯，其特征在于，通式(I)結構如下其中R＝CH3，CN，N3，C≡CH；X＝F，OH，NH2；Y＝H，CH3，F，OH，NH2。2、如權利要求1所述的2'-氟-4'-取代核苷類似物，其特征在于，所述化合物是以下化合物之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>19<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>20<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>21<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>22<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>23<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>24<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>25<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>26<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>27<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>28<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>29<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>30<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>31<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>32<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>33<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>34<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>35<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>36<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>37<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>38<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>39<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>40<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>41<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>423、如權利要求1所述的核苷類似物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟-化合物ii的合成將化合物ID-核糖或L-核糖溶于HCl/MeOH中，在水浴下保溫密閉攪拌，加入吡啶終止反應，減壓抽干，得淺黃色糖漿狀物質化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物iii的合成將化合物ii溶于干燥的吡啶中，冰鹽浴下緩慢滴加苯甲酰氯，室溫下攪拌反應，反應完畢后將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗滌至水層呈弱堿性，再用冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿狀物質化合物Ui;化合物iv的合成將苯甲酰化物化合物iii溶于氯仿中，加入紅磷，冰水浴攪拌下緩慢滴加溴，攪拌30min左右，緩慢滴加冰水，室溫攪拌，然后加入碎冰攪融，再將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得深黃色糖漿，用硅膠柱分離得白色干糖漿化合物iv;化合物V的合成將化合物iv溶解在干燥的吡啶中，冰水浴下緩慢滴加醋酐，攪拌30min左右，撤去冰水浴，室溫攪拌約7h，升溫到4(TC保持約lh。加入碎冰攪融后，將反應液倒入冰水中，氯仿提取。有機層用冰水、預冷的硫酸、飽和碳酸氫鈉依次洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿狀化合物v;化合物vi的合成將化合物V溶于干燥的二氯甲垸中，冰水浴下緩慢通入干燥的HC1氣體，加入冰水洗滌，分出有機層，用飽和碳酸氫鈉洗至水層呈弱堿性，冰水洗至水層呈中性，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干得淺黃色糖漿。重結晶得白色固體化合物vi;化合物Vii的合成將化合物Vi溶于干燥的二氯甲烷中和干燥的DMF中，-15"左右攪拌下緩慢加入802<:12，-15"攪拌301^1!左右，自然升至室溫反應，在0'C下分3次加入咪唑，混合液室溫攪拌，反應完畢后向反應液加入CH2C12稀釋，用冰水洗滌，水層用CH2Cl2提取，有機層合并后用無水硫酸鈉干燥，減壓抽干溶劑得淺黃色糖漿。用硅膠柱分離純化得白色固體化合物vi;。化合物viii的合成將化合物vii溶于乙酸乙酯中，攪拌下加入Et3N3HF，升溫至6(TC左右攪拌約3h，70'C攪拌約1.5h;加入冰鹽水終止反應，然后用二氯甲垸提取，有機層合并后依次用鹽水、水、飽和碳酸氫鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓抽干溶劑得深黃色糖漿；純化得淺黃色糖漿，粗品結晶得白色晶體化合物viii;化合物ix的合成將化合物viii溶解于無水二氯甲烷中，加入HBr-AcOH的混合溶液，室溫攪拌反應；反應完畢后將混合物蒸干，用二氯甲烷溶解剩余物，并用碳酸氫鈉洗滌二氯甲垸溶液，將二氯甲垸蒸去，得到糖漿狀物。同時，將保護過的6-氨基嘌呤和(NH4)2S04在HMDS中氮氣保護下回流反應，反應完畢，減壓蒸去溶劑，得到甲硅烷基化的6-氨基嘌呤。將上述反應中得到的糖漿狀物溶于二氯乙烷中，加入到甲硅烷基化的6-氨基嘌呤中，混合物在N2保護下回流反應；用冰終止反應，二氯甲烷萃取，二氯甲烷層依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。干燥后蒸除溶劑，得到白色固體，柱色譜分離純化，得到化合物ix;化合物x的合成將化合物ix溶于飽和的NHrCH30H,室溫攪拌反應，反應完畢后將溶劑蒸干，所得剩余物通過柱色譜純化，得到化合物x;化合物xi的合成將化合物X，咪唑、三苯基膦，溶解在四氫呋喃中，向其中緩慢加入溶解有碘的四氫呋喃溶液；室溫攪拌反應。反應完畢后蒸除溶劑，向剩余物中加入乙酸乙酯，過濾。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色譜分離得到化合物xi;化合物xii的合成將化合物xi溶解在四氫呋喃中，向其中加入DBU;在6(TC左右攪拌反應，反應完畢后蒸干溶劑，剩余物柱色譜分離得到化合物xii;化合物xiii的合成在0'C左右，將溶有IC1的DMF溶液加入到溶有NaN3的DMF溶液中，冰點攪拌約10分鐘，將溶有化合物xii的DMF緩慢加入到上述溶液，繼續反應；反應完畢后向混合溶液中加入亞硫酸鈉，直到碘的顏色完全消失；減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得到化合物xii;化合物xiv的合成將化合物xiii溶于DMF中，攪拌下加入醋酸銀，室溫反應，反應完畢后過濾；在減壓下移除溶劑，剩余物用柱色譜純化，得到化合物xiv;化合物XV的合成將化合物xiv溶于三乙胺甲醇溶液中，室溫攪拌反應，反應結束后蒸除溶劑，剩余物用柱色譜純化，得到化合物XV。4、如權利要求1所述的核苷類似物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟-PqrsTBDMS=t-butyldimethylsilyl化合物b的合成取化合物a，加入丙酮，攪拌條件下慢慢加入濃硫酸，室溫下攪拌反應，TLC檢測反應結束后，用濃氨水調節pH值，過濾，減壓蒸去大部分丙酮，在攪拌條件下加入0.4%稀鹽酸，在丙酮回流條件下反應，化合物a全部水解成化合物b;用固體NaHC03中和反應液，過濾，濾液在減壓下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲垸溶解，用無水Na2S04干燥過夜，過濾，蒸去溶劑后，得到黃色粘稠油狀物b;化合物C的合成將化合物b和三乙胺溶于二氯甲垸，冰鹽浴下慢慢滴加對氯苯甲酰氯，保持0°C以下機械攪拌反應；反應完畢后加入飽和NaHC03水溶液，二氯甲烷層用水、飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，過濾，減壓蒸去溶劑，并重結晶剩余物，得白色晶體化合物C;化合物d的合成化合物C溶解到無水二氯甲烷中，在氮氣保護下，加入咪唑和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSC1);室溫反應，反應結束后，用鹽酸中和反應，分出兩層，有機層分別用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水Na2S04干燥，蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜進行分離純化，得到化合物d;化合物e的合成化合物d加入到甲醇鈉-甲醇的混合物液中，室溫反應；反應結束后用稀醋酸中和，過濾，用甲醇洗滌，減壓蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化，得化合物e;化合物f的合成在約-6(TC條件下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO,在相同的溫度下，攪拌約15分鐘后，滴加化合物e的二氯甲烷溶液；在約-65t:攪拌反應約30分鐘，加入三乙胺，室溫攪拌反應；反應結束后向反應液中加入水，分出有機層，有機層用無水硫酸鎂干燥，蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化得化合物f;化合物g的合成在反應瓶中放入氫氧化鈉和水，攪拌均勻后，加入甲醛水溶液、95%乙醇，然后再加入化合物f，35。C下攪拌反應；反應結束后，邊攪拌邊用冰水冷卻反應瓶，直至產物完全析出；抽濾，固體用水洗滌至中性并烘干，所得固體溶解到無水甲醇中，再加入硼氫化鈉，回流反應，反應結束后用稀鹽酸中和反應液，用二氯甲烷萃取反應液，無水Na2S04干燥后蒸除溶劑，得化合物g;化合物h的合成化合物g溶解到甲醇中，加入DowexH+(事先用甲醇洗滌)，室溫反應，反應完畢后將樹脂過濾除去，并用甲醇反復洗滌樹脂，溶液蒸干得固體；將所得固體溶于丙酮中，攪拌條件下慢慢加入濃硫酸(催化量)，室溫攪拌反應，用濃氨水調節pH值，過濾，減壓蒸去丙酮，得到化合物h;化合物i的合成在約-6(TC下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，滴完后攪拌約15分鐘，滴加化合物h的二氯甲烷溶液，滴完后約-6(TC反應30分鐘，加入三乙胺，室溫反應約30分鐘后加入水終止反應，分出有機層，有機層用無水Na2S04干燥，蒸除溶劑，剩余物用柱色譜分離純化得固體；將C1CH2P(C6H5)3C1加入到無水四氫呋喃中，冷卻到約-78",加入n-BuLi的正己垸溶液攪拌反應約lh，然后加入所得固體的干燥四氫呋喃溶液，溫度逐漸升高到0t:左右，繼續反應；反應完畢后小心滴加飽和的NH4C1溶液，用乙酸乙酯萃取，有機層用鹽水洗滌兩次，最后用無水MgSCU干燥，減壓蒸除溶劑，得到的剩余物溶解到無水四氫呋喃中，冷卻到-78°C左右，慢慢滴加n-BuLi的正己烷溶液。攪拌反應2h左右，小心地用飽和NH4C1溶液終止反應；有機層用飽和食鹽水洗滌，無水MgS04干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用快速硅膠柱分離純化，得化合物i;化合物j的合成將化合物i加入到稀鹽酸溶液中，室溫攪拌反應，反應完畢后用固體NaHC03中和，過濾，濾液在減壓條件下蒸去溶劑，剩余物用二氯甲垸溶解，并用無水Na2S04干燥后過濾，蒸去溶劑，得化合物j;化合物k的合成將化合物j溶解到吡啶中，滴力nBzCl，室溫反應，反應完畢后蒸千溶劑，剩余物純化后得化合物k;化合物1的合成將化合物k和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧溶于二氯甲烷中，冷至0'C左右，將混合的次氯酸鈉溶液、NaHC03和水混合溶液加入到反應液，0。C左右反應約30分鐘，加入異丙醇，室溫攪拌，分出的二氯甲烷層用水洗滌2次，無水MgS04干燥，過濾，蒸去溶劑得到的剩余物進行重結晶，得到化合物1;化合物m的合成將化合物k加入到無水乙醇和乙酸乙酯的混合液中，冷至0'C左右，分批加入硼氫化鈉，攪拌反應，反應完畢后用稀醋酸中和，過濾，濾液蒸干，剩余物再用二氯甲垸溶解，然后水洗，二氯甲烷層用無水MgSCU干燥，過濾，減壓蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶劑重結晶，得到固體物；將所得固體物溶于吡啶中，在0'C左右滴加BzCl，滴加完畢后，室溫反應，反應完畢后蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯萃取，飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2S04干燥，過濾，蒸去溶劑，剩余物柱色譜分離純化得化合物m;化合物n的合成將化合物m溶于甲醇中，加入濃鹽酸/二氧六環的混合溶液，室溫反應，反應完畢后用NaHC03中和反應液，過濾，濾液減壓蒸餾除去溶劑，剩余物溶于適量二氯甲烷中，用無水Na2S04干燥過夜，濾液蒸干，用柱色譜分離純化得化合物n;化合物o的合成化合物n溶解在二氯甲烷中，室溫條件下加入DAST攪拌反應，反應完畢后將混合物倒入飽和NaHC03溶液中，分出有機層，并用飽和NaHC03溶液洗滌，無水Na2S04干燥，柱色譜分離純化得到化合物o;化合物p的合成將化合物o加入到甲酸溶液中，在室溫下攪拌反應，反應完畢后減壓蒸去溶劑，剩余物與甲苯共蒸得固體物，將所得固體物溶于干燥吡錠和醋酸酐溶液，室溫反應，反應完畢后將反應液濃縮，然后與甲苯共蒸，得到化合物p;化合物q的合成化合物p溶于無水二氯甲烷中，將其冷至0。C左右，然后慢慢通HC1氣體至飽和，室溫下真空蒸去溶劑，剩余物真空干燥得到化合物q;化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤與六甲基硅氮烷(HMDS)在(NH4)2S04存在下加熱回流至得到透明溶液，真空下蒸去溶劑得到白色固體，將該固體溶于,2-二氯乙垸中，再加入化合物q的1，2-二氯乙烷溶液及分子篩，在氮氣保護下室溫攪拌反應，TLC檢測反應完全后，在反應液中加入二氯甲垸，并用硅藻土過濾，濾液分別用飽和NaHC03和食鹽水洗滌，有機層用無水Na2S04干燥過夜，蒸去溶劑得到的剩余物用減壓硅膠柱分離得到化合物r;化合物s的合成將化合物r溶解在NH3-CH3OH飽和的溶液中，室溫攪拌反應，反應完畢后蒸除溶劑，剩余物通過柱色譜分離純化得到化合物s。5、如權利要求1或2中所述的2'-氟-4'-取代核苷類似物在制備藥物中的應用，其特征在于，將其應用于制備抗HBV病毒藥物或抗HCV病毒藥物或抗HIV病毒藥物。6、如權利要求5中所述的2'-氟-4'-取代-核苷類似物在制備藥物中的應用，其特征在于，HBV病毒藥物為抗乙肝藥物，HCV病毒藥物為抗丙肝藥物，HIV病毒藥物為抗艾滋病藥物。全文摘要本發明公開了核苷類似物、其制備方法及其應用，具體涉及含2’-氟-4’-取代核苷類似物或其鹽或其5’-磷酸酯、其制備方法及其應用，該化合物有如右通式。將其應用于治療病毒感染，尤其是HBV，HCV或HIV的感染，具有較好的活性。文檔編號A61K31/7042GK101434627SQ20081017749公開日2009年5月20日申請日期2007年8月7日優先權日2007年7月16日發明者包新洪,常俊標,威王,強王,祁秀香,郭曉河申請人:鄭州大學