專利名稱：：谷胱甘肽傳遞系統的制作方法
技術領域：
：本發明是關于生物傳遞系統，特別是關于谷胱甘肽傳遞系統。現有技術物質要進入腦內會因為血腦屏障的阻礙而受到限制，血腦屏障是由許多腦微血管中的內皮細胞構成，細胞間因為緊密連接(tightjunction),其間隙非常微小，所以可以提供有效的保護作用，以避免外來毒素進入腦中。目前認為僅有脂溶性分子及分子量較低的物質才能利用被動擴散(passivediffusion)的機制通過血腦屏障，進而進入腦中。所以，一些活性物質，例如專門用于治療腦部或神經方面疾病的蛋白質藥物，或作用于中樞神經的多肽類止痛藥物，因為其分子量大、親水性高，所以并不能藉由被動擴散通過血腦屏障進入腦中，并且因為容易遭受血液中酶分解，無法有效通過血腦屏障，發揮其藥效。目前文獻上提及能夠遞送親水性或大分子藥物穿透血腦屏障的藥物傳遞系統，除了利用化學修飾增加藥物的疏水性藉以通過血腦屏障外，另外就是利用吸收介導的轉運(absorption-mediatedtransport,AMT)、載體介導的細月包轉運(carrier-mediatedtranscytosis,CMT)或受體介導的纟田胞轉運(receptor-mediatedtrancytosis,RMT)這三種方式將藥物載體帶進腦中，其中以吸收介導的轉運(AMT)方式進入腦中的，大部分是以帶電荷的藥物載體為主，藉由電荷吸附在內皮細胞后，再通過血腦屏障進入腦中。以載體介導的細胞轉運(CMT)方式通過血腦屏障的，大都是一些親水性的金屬離子，如鈉、鉀，或是一些二肽(di-peptide)、三肽(tri-peptide)或葡萄糖，借著內皮細胞上面的轉運體(transporter)，進入腦中。而一些大分子，如胰島素(insulin)、運鐵蛋白(transfemn)或低密度脂蛋白(low-densitylipoprotein,LDL)，則是利用受體介導的細胞轉運(RMT)的方式，通過血腦屏障進入腦中。谷胱甘肽(glutathione,GSH)為一種內源性的抗氧化劑，缺乏時會造成多種神經性病癥。血中的谷胱甘肽(GSH)濃度長期過低也將會造成慢性疲勞綜合癥(chronicfatiguesyndrome,CFS)。1988年，KiwadaHiroshi等在JP63002922專利中，曾提及將長碳鏈的酰基谷胱甘肽(N-acylglutathione)(例如棕櫚酸谷胱甘肽(N-palmitoylglutathione))與磷脂質(例如磷脂膽堿(phosphotidylcholine))制備成脂質體，可利用其蓄積于肝臟的特性，靶向肝臟，增加藥物于肝臟的遞送速度，進而治療肝臟相關疾病。1994年時，BerislavV.Zlokovic等曽報導，利用天竺鼠可以證實谷胱甘肽(GSH)這種三肽可以經由特殊傳遞途徑，不纟皮分解^C壞，完整地自血液進入腦微血管中，再通過血腦屏障(bloodbrainbarrier,BBB)后，進入天竺鼠的腦中，此特殊途徑為谷胱甘肽轉運體(GSH-transporter)。在1995年時，BerislavV.Zlokovic也曽于其發表的文獻中提及谷胱甘肽(GSH)以毫摩爾(millimolar)的濃度存在于腦星狀細胞(astrocyte)及內皮細胞(endothelium)中。RamKannan等在1995年的文獻中曾才艮導，腦內皮細胞對谷胱甘肽(GSH)的吞噬作用與鈉離子濃度有關。若鈉離子較低，會抑制腦內皮細胞對谷胱甘肽(GSH)的吞噬作用。同時并指出，鈉依賴型谷胱甘肽轉運體(Na-dependentGSHtransporter)負責吞謹作用，位于血腦屏障的血液側(luminalside)。非鈉依賴型谷胱甘月太專爭運體(Na-independentGSHtransporter)負責排出作用(efflux),位于血腦屏障的腦腔側(abluminalside)。并且以大鼠及天竺鼠的腦，經表達轉錄后，建立大白鼠肝小管谷胱甘肽轉運體(rathepaticcanalicularGSHtransporter,RcGshT)系統，以分析cDNA片段(片段5,78及11~12)的方式，證實其中片段7為鈉依賴型谷胱甘肽轉運體。片段5及11為非鈉依賴型谷胱甘肽轉運體。在1999年的文獻中，使用小鼠腦內皮細胞才朱(mousebrainendothelialcellline,MBEC-4)作為血腦屏障的體外模型，并且證實鈉依賴型谷胱甘肽轉運體(Na-dependentGSHtransporter)是位于小鼠腦內皮細月包才朱的血液側。RamKannan等更在2000年時，證實在人類腦血管內皮細胞(humancerebrovascularendothelialcell,HCEC)中，谷胱甘肽(GSH)的確是利用鈉依賴型谷胱甘肽轉運體(Na-dependentGSHtransporter)來遞送進入血腦屏障。并且膜(luminalplasmamembrane)。2003年，ZhaoZhiyang等在US2003/109555專利中，也提到將谷胱甘肽s-轉移酶/谷胱甘肽((glutathiones-tmnsferase,GST)/(glutathione,GSH))，利:用磺胺(sulfonamide)共價鍵，結合于抗癌藥物上，制備成藥物前體后，能夠主動靶定于特定的癌細胞上，并且能在切斷磺胺共價^:后，釋放藥物以達到療效。所以，此改質方法可以保護藥物的胺基團，增加藥物的溶解度及改變藥物于身體的吸收及分布。此專利的重點，主要著重于如何以磺胺共價鍵鍵合，將谷胱甘肽s-轉移酶/谷胱甘肽(GST/GSH)合成于特定抗癌藥物上。
發明內容本發明提供一種傳遞系統，包括載體或活性物質，以及連接于該載體或活性物質上的谷胱甘肽或其衍生物。本發明還提供一種化合物，包括基團，該基團包括維生素E衍生物或磷脂質衍生物，與該基團連接的聚乙二醇或其衍生物，以及與該聚乙二醇或其衍生物連接的谷胱甘肽或其衍生物。具體地，本發明提供如下方面(1)一種傳遞系統，包括載體或活性物質；以及連接于該載體或活性物質上的谷胱甘肽或其衍生物。(2)上述(l)所述的傳遞系統，其中該載體是包括納米微粒、高分子納米微粒、固化脂質納米微粒、高分子微嚢、脂質體、微乳或液態納米微粒。(3)上述(2)所述的傳遞系統，其中該脂質體是包括卵磷脂或氫化卵磷脂。(4)上述(3)所述的傳遞系統，其中該脂質體還包括膽固醇、水溶性維生素E或十八胺。(5)上述(3)所述的傳遞系統，其中該卵磷脂或氫化卵磷脂的摩爾比大體介于0.5~100%。(6)上述(4)所述的傳遞系統，其中該膽固醇或水溶性維生素E的摩爾比大體介于0.005~75%,十八胺的摩爾比大體介于0.00125%。(7)上述(l)所述的傳遞系統，其中該載體還包括活性物質，包封于該載體內部。(8)上述(7)所述的傳遞系統，其中該活性物質包括小分子化合物、多肽、蛋白質、DNA質體、寡核酸或基因片段。(9)上述(7)所述的傳遞系統，其中該活性物質的摩爾比大體介于0細550%。(10)上述(l)所述的傳遞系統，其中該載體或活性物質是靶向于器官組織上的或血腦屏障上的谷胱甘肽轉運體。(11)上述(7)所述的傳遞系統，其中該活性物質是對腦內皮細胞具有穿透率。(12)上述(ll)所述的傳遞系統，其中該活性物質的細胞穿透率大體介于0.01~100%。(13)—種化合物，包括基團，包括維生素E衍生物或磷脂質衍生物；與該基團連接的聚乙二醇或其衍生物；以及與該聚乙二醇或其衍生物連接的谷胱甘肽或其衍生物。(14)上述(13)所述的化合物，其中該維生素E衍生物包括生育酚衍生物或生育三烯醇衍生物。(15)上述(13)所述的化合物，其中該維生素E衍生物包括a-生育酚、卩-生育酚、Y-生育酚、S-生育酚、a-生育三烯醇、(3-生育三烯醇、Y-生育三烯醇、S-生育三烯醇、琥珀酸a-生育酚、琥珀酸(3-生育酚、琥珀酸y-生育酚、琥珀酸S-生育酚、琥珀酸a-生育三烯醇、琥珀酸(3-生育三烯醇、琥珀酸y-生育三烯醇、琥珀酸S-生育三烯醇、醋酸a-生育酚、醋酸(3-生育酚、醋酸Y-生育酚、醋酸S-生育酚、醋酸a-生育三烯醇、醋酸(3-生育三烯醇、醋酸Y-生育三烯醇、醋酸S-生育三烯醇、煙酸a-生育酚、煙酸p-生育酚、煙酸Y-生育酚、煙酸5-生育酚、煙酸a-生育三烯醇、煙酸P-生育三烯醇、煙酸Y-生育三烯醇、煙酸5-生育三烯醇、磷酸a-生育酚、磷酸(3-生育酚、磷酸，生育酚、磷酸S-生育酚、磷酸a-生育三烯醇、磷酸P-生育三烯醇、磷酸Y-生育三烯醇或磷酸5-生育三烯醇。(16)上述(13)所述的化合物，其中該磷脂質衍生物具有化學式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中A,為神經鞘胺醇，R,包括辛酰基或椋櫚酰基。(17)上述(13)所述的化合物，其中該磷脂質衍生物具有化學式(II)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中A2為磷酸乙醇胺，R2包括肉豆蔻酰基、棕櫚酰基、硬脂酰基或油酰基。(18)上述(13)所述的化合物，其中該聚乙二醇或其衍生物的聚合度大體介于6-210。(19)上述(13)所述的化合物，其中當該基團為維生素E衍生物時，該聚乙二醇或其衍生物的分子量大體介于300~10，000。(20)上述(13)所述的化合物，其中該聚乙二醇衍生物是包括羧酸、馬來酰亞胺、PDP、酰胺或生物素。為讓本發明的上述目的、特征及優點能更明顯易懂，下文特舉較佳實施例，并配合所附圖，作詳細說明如下圖1是為本發明的傳遞系統。圖2是為本發明不同曱硫腦啡呔(met-enkephalin)載體的最大可能效果(maximalpossibleeffect,MPE)。圖3是為本發明不同曱硫腦啡呔載體的曲面下面積(areaundercurve,AUC)。圖4是為本發明不同加巴噴丁(gabapentin)載體的最大可能效果。圖5是為本發明不同加巴噴丁載體的曲面下面積。圖6是為本發明未包封的曱硫腦啡呔與曱硫腦啡呔載體的血中穩定性比主要組件符號說明10~傳遞系統；20~脂質體；30~配體；40基團(維生素E衍生物或磷脂質衍生物);50聚乙二醇或其衍生物；60-谷胱甘肽或其衍生物。具體實施例方式本發明提供一種傳遞系統，包括載體或活性物質，以及連接于載體或活性物質上的谷胱甘肽谷胱甘肽或其衍生物。上述載體可包括納米微粒、高分子納米微粒、固化脂質納米微粒、高分子微嚢、脂質體、微乳或液態納米微粒。而脂質體可包括例如大豆卵磷脂(soyledthin)的卵磷脂類或例如氬化大豆卵磷月旨(hydrogenatedsoylecithin)的氫化卯磷脂類成分。上述脂質體還可包括膽固醇、水溶性維生素E或十八胺(octadecylamine),以增加血中穩定性或電荷數量。在脂質體中，卵磷脂或氫化卵磷脂的摩爾比大體介于0.5~100%，膽固醇或水溶性維生素E的摩爾比大體介于0.005~75%，而十八胺的摩爾比大體介于0.001~25%。此外，本發明載體可包封活性物質，例如小分子化合物、多肽、蛋白質、DNA質體、寡核酸或基因片段。此活性物質于載體中的摩爾比大體介于0.0005~95%，而載體的包封率大體介于0.5~100%。(glutathionetransporter),例如心臟、肺臟、肝臟、腎臟或血腦屏障上的谷胱甘肽轉運體。細胞組成的血腦屏障層，其穿透率大體介于0.01~100%。本發明還提供一種化合物，包括由維生素E衍生物或磷脂質衍生物組成的基團，與基團連接的聚乙二醇或其衍生物，以及與聚乙二醇或其衍生物連接的谷胱甘肽或其衍生物。上述維生素E衍生物可包括a-生育酚(a-tocopherol)、(3-生育酚(|3-tocopherol)、y-生育酚("y隱tocopherol)、5-生育酚(5-tocophero1)、a-生育三晞醇(a-tocotrienol)、卩-生育三烯醇((3-tocotrieno1)、y-生育三烯醇(Y畫tocotrienol)、5-生育三烯醇(5-tocotrieno1)、琥珀酸a-生育酚(a-tocopherolsuccinate)、琥珀酸(3-生育酚(卩-tocopherolsuccinate)、琥珀酸y-生育酚(^-tocopherolsuccinate)、琥珀酸5-生育酚(5-tocopherolsuccinate)、琥珀酸a-生育三烯醇(a-tocotrienolsuccinate)、；虎3白酉l1(3-生育三歸醇(卩-tocotrienolsuccinate)、琥玉白酸y-生育三烯醇(y-tocotrienolsuccinate)、琥珀酸S-生育三烯醇(S-tocotrienolsuccinate)、醋酸a-生育酚(a隱tocopherolacetate)、醋酸卩-生育酚(卩-tocopherolacetate)、醋酸y-生育酚(^-tocopherolacetate)、醋酸5-生育酚(^-tocopherolacetate)、醋酸a-生育三烯醇(a-tocotrienolacetate)、醋酸卩-生育三蜂醇(卩-tocotrienolacetate)、醋酸y-生育三梯醇(y-tocotrienolacetate)、醋酸5-生育三歸醇(5-tocotrienolacetate)、煙酸a-生育酚(a-tocopherolnicotinate)、煙酸(3-生育酚((3-tocophero1nicotinate)、》因酉臾y一生育酉分(^-tocopherolnicotinate)、煙酸5-生育盼(5-tocophero1nicotinate)、煙酸a-生育三婦醇(a-tocotrienolnicotinate)、煙酸(3-生育三歸醇((3-tocotrieno1nicotinate)、煙酸y-生育三烯醇(y-tocotrienolnicotinate)、》因酸5-生育三丈希酉享(5-tocotrieno1nicotinate)、石粦酉臾a-生育酚(a-tocopherolphosphate)、磷酸P畫生育酚(卩-tocopherolphosphate)、磷酸y-生育酚(^-tocopherolphosphate)、磷酸§-生育酚(^-tocopherolphosphate)、石粦酸a-生育三歸酉享(a-tocotrienolphosphate)、石粦酸卩畫生育三辨醇(P-tocotrienolphosphate)、石粦酸y陽生育三蜂醇(y-tocotrienolphosphate)或碌酸5-生育三》希酉事(5-tocotrienolphosphate)。上述磷脂質衍生物可具有下列化學式(i)或(n)化學式(I)中，A,可為神經鞘氨醇(sphingosine)，&可包括辛酰基(octanoyl)或棕櫚酰基(palmitoyl)。化學式(II)中，A2可為磷酸乙醇胺(phosphoethanoamine)，R2可包才舌肉豆蔻酰基(myristoyl)、才宗扭]酰基(palmitoyl)、硬脂酰基(stearoyl)或油酰基(oleoyl)。上述聚乙二醇或其衍生物的聚合度(polymerizationnumber)大體介于6~210。此聚乙二醇或其衍生物的分子量可隨連接不同的維生素E衍生物或磷脂質衍生物而改變，例如，當連接基團為維生素E衍生物時，聚乙二醇或其衍生物的分子量大體介于300~10,000，當連接基團為例如化學式(I)所示的磷脂質衍生物時，聚乙二醇或其衍生物的分子量大體介于750-5,000,當連接基團為例如化學式(II)所示的磷脂質衍生物時，聚乙二醇或其衍生物的分子量大體介于3505，000。上述聚乙二醇衍生物可包括羧酸、馬來酰亞胺(maleimide)、PDP、酰胺(amide)或生物素(biotin)。請參閱圖1,說明本發明的傳遞系統。傳遞系統10包括脂質體20與連接其上的配體30。配體30包括由維生素E衍生物或磷脂質衍生物組成的基團40,與基團40連接的聚乙二醇或其衍生物50，以及與聚乙二醇或其衍生物50連接的谷胱甘肽或其衍生物60。本發明利用連接谷胱甘肽配體的靶向載體運送例如蛋白質、多肽或d、分子化合物的活性物質，使活性物質藉由載體介導的細胞轉運(carrier-mediatedtranscytosis,CMT)或受體介導的纟田月包專爭運(receptor—mediatedtranscytosis,RMT)的方式通過血腦屏障，進行腦部或神經疾病的治療。實施例實施例1TPGS-谷胱甘肽制備<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>首先，取l當量的N-Cbz谷氨酰胺(N-Cbzglutamine)與1當量的羥基琥珀碌b亞胺(N-hydroxysuccinimide,HOSu)溶于15毫升的二曱醚(dimethylether,DME)溶劑，并冷卻至攝氏0度。之后，在相同溫度下，加入1當量的二環己基碳二亞胺(dicyclohexylcarbodiimide，DIC)攪拌反應4小時。反應混合物于冷凍靜置2小時后過濾。過濾掉二環己基尿素(dicyclohexylurea,DCU)并抽干溶劑后，所得的純化合物產率為98%。接著，將殘余物浸于乙醚/己烷溶液中并過濾。之后，在烘箱中干燥，以得到白色固體。之后，將上述白色固體、1當量的半胱氨酸鋰與5當量的碳酸鈉混合溶于15毫升水中，并加入乙腈溶劑，以生成步驟2的中間產物。上述混合物繼續在室溫中強烈攪拌3~6小時，直至TLC分析結果指出步驟2的中間產物消失為止。接著，以200毫升的水清洗溶液，有機層以石克酸鈉干燥并過濾。最后，在烘箱中濃縮，以得到化合物2。接著，將化合物2與1當量的羥基琥珀硫亞胺(N-hydroxysuccinimide，HOSu)溶于15毫升的二甲醚(dimethylether,DME)溶劑，并冷卻至攝氏0度。之后，在相同溫度下，加入1當量的二環己基碳二亞胺(dicyclohexylcarbodiimide，DIC)攪拌反應4小時。反應混合物于冷凍靜置2小時后過濾。過濾掉二環己基尿素并抽干溶劑后，加入1當量的甘氨酸鋰與5當量的碳酸鈉混合溶于15毫升水中，并加入乙腈溶劑，以生成步驟4的中間產物。上述混合物繼續在室溫中強烈攪拌36小時，直至TLC分析結果指出步驟4的中間產物消失為止。接著，以200毫升的水清洗溶液，有機層以硫酸鈉千燥并過濾。最后，在烘箱中濃縮，以得到化合物3。接著，加入琥珀酸a-生育酚聚乙二醇1000(a-tocopherylpolyethyleneglycol1000succinate,TPGS-OH)與化合物3進行偶合酯化反應，以得到化合物4。接著，加入10%的Pd/C催化劑(上述三肽-TPGS重量的0.2倍)至溶有化合物4的100毫升甲醇中。之后，將上述懸浮液于室溫充滿氬氣環境中攪拌16小時并過濾。殘留物以乙醇結晶，以得到化合物5。接著，在二氯曱烷存在下，加入三乙基硅烷(triethylsilane)與TFA對化合物5進行去保護，以得到化合物6，即為TPGS-谷胱甘肽化合物。曱硫腦啡呔載體溶液制備首先，取0.5克的脂質置于12.5毫升的氧化鋯研磨缽中。本實施例脂質組成包括83.2。/。的大豆磷脂膽堿(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、4.2%的琥珀酸a畫生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)、4.2%的谷胱甘肽-TPGS(glutathione-TPGS，GSH-TPGS)以及8.4%的膽固醇。同時，取適量的曱硫腦啡呔溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制備4%的藥物溶液。之后，取0.5毫升的藥物溶液與5顆氧化鋯研磨球(直徑10毫米)置于研磨缽中，并以500rpm研磨1小時，以形成凝稠膏狀物。之后，取0.2克的祐稠膏狀物置于IO毫升燒杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM，pH7.4),于室溫下進行水合反應1小時，即可獲得經谷胱甘肽(GSH)修飾的曱硫腦啡呔脂質體溶液。脂質體中的曱硫腦啡呔濃度為0.56mg/mL,包封率達33.3%。脂質體平均粒徑為173.1納米，分子量多分散性指數(polydispersityindex,PI)為0.243。實施例2~6實施例26的制備方法與實施例1類似，其差別在于載體組成的不同，請參閱表l與表2。表1(摩爾比)___<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例7加巴噴丁載體溶液制備首先，取0.5克的脂質置于12.5毫升的氧化鋯研磨缽中。本實施例脂質組成包括83.2。/。的大豆磷脂膽堿(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、4.2%的琥珀酸a-生育酚鹽聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)、4.2%的谷胱甘肽-TPGS(glutathione-TPGS，GSH-TPGS)以及8.4%的膽固醇。同時，取適量的加巴噴丁溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4)，以制備10。/。的藥物溶液。之后，取0.5毫升的藥物溶液與5顆氧化鋯研磨球(直徑10毫米)置于研磨缽中，并以500rpm研磨1小時，以形成祐稠膏狀物。之后，取0.2克的黏稠膏狀物置于10毫升燒杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM，pH7.4)，于室溫下進行水合反應1小時，即可獲得經谷胱甘肽(GSH)修飾的加巴噴丁脂質體溶液。脂質體中的加巴噴丁濃度為1.08mg/mL,包封率達35.7%。脂質體平均粒徑為147.7納米，分子量多分散性指數(polydispersityindex,PI)為0.157。對比例1曱硫腦啡呔載體溶液制備首先，取0.5克的脂質置于12.5毫升的氧化鋯研磨缽中。本實施例脂質組成包括83.2。/。的大豆磷脂膽堿(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、8.4%的琥珀酸a-生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a畫tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500),TPGS)以及8.4%的膽固醇。同時，取適量的曱石克腦啡呔溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制備4%的藥物溶液。之后，取0.5毫升的藥物溶液與5顆氧化鋯研磨球(直徑10毫米)置于研磨缽中，并以500rpm研磨1小時，以形成黏稠膏狀物。之后，取0.2克的黏稠膏狀物置于10毫升燒杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM,pH7.4),于室溫下進行水合反應1小時，即可獲得曱硫腦啡呔脂質體溶液。脂質體中的曱硫腦啡呔濃度為0.57mg/mL,包封率達31.1%。脂質體平均粒徑為164.1納米，分子量多分散性指數(polydispersityindex,PI)為0.281。只十比例23對比例2~3的制備方法與對比例1類似，其差別在于載體組成的不同，請參閱表3與表4。表3(摩爾比)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>加巴噴丁載體溶液制備首先，取0.5克的脂質置于12.5毫升的氧化鋯研磨缽中。本實施例脂質組成包括83.2。/。的大豆磷脂膽堿(soybeanphosphatidylcholine,SPC)、8.4%的琥珀酸a-生育酚聚乙二醇(PEG1500)(a-tocopherolsuccinate-polyethyleneglycol(PEG1500)，TPGS)以及8.4。/。的膽固醇。同時，取適量的加巴噴丁溶于10mM的磷酸水溶液(pH7.4),以制備10。/。的藥物溶液。之后，取0.5毫升的藥物溶液與5顆氧化鋯研磨球(直徑10毫米)置于研磨缽中，并以500rpm研磨1小時，以形成祐稠膏狀物。之后，取0.2克的黏稠膏狀物置于10毫升燒杯中，并加入1.8毫升的磷酸水溶液(10mM,pH7.4)，于室溫下進行水合反應1小時，即可獲得加巴噴丁脂質體溶液。脂質體中的加巴噴丁濃度為1.17mg/mL,包封率達38.5%。脂質體平均粒徑為155.8納米，分子量多分散性指數(polydispersityindex,PI)為0.186。曱硫腦啡呔脂質體體外穿透率測試1本發明利用模擬人體血腦屏障的RBE4/glioma細胞模型量測曱硫腦啡呔的穿透率。實施例12(經谷胱甘肽修飾、及對試結果，請參閱表5。表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例1167.79.81.3實施例2165.29.81.2測試結果發現，實施例l、2的穿透率(9.8%)明顯較對比例1(3.4%)高出許多，大約2.82倍。曱硫腦啡呔脂質體體外穿透率測試2本發明利用模擬人體血腦屏障的RBE4/glioma細胞模型量測曱硫腦啡呔的穿透率。實施例3(經谷胱甘肽修飾)及對比例2(未經谷胱甘肽修飾)的測試結果，請參閱表6。表6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>測試結果發現，實施例3的穿透率(6.99%)明顯較對比例2(3.55%)高出許多，大約1.96倍。此外，若先以谷胱甘肽與細胞培養30分鐘后，再測試實施例3的穿透率，結果發現穿透率降低0.25%。原因是先行加入的谷胱甘肽會先將細胞上的谷胱甘肽受體占滿，造成實施例3無法經由與谷胱甘肽受體的結合，而通過血腦屏障。所以，可以證實谷胱甘肽-曱硫腦啡呔脂質體配方，是經由與谷胱甘肽受體的結合，誘發受體介導的細胞轉運(receptor-mediatedtranscytosis)或載體介導的纟田月包4爭運(carrier-mediatedtranscytosis)4乍用而通過血月鹵屏障。曱硫腦啡呔脂質體熱板測試本發明利用熱板藥效實驗測試小鼠靜脈注射給藥后，在攝氏55度的熱板上對熱的止痛效果。結果請參閱圖2，曱硫腦啡呔溶液以30mg/kg的劑量給藥后，并無明顯止痛效果產生，證實未經靶向修飾的曱硫腦啡呔無法經由靜脈注射小鼠產生藥效。對比例3為未經谷胱甘肽修飾的曱硫腦啡呔脂質體配方，在30mg/kg的給藥劑量下，給藥90分鐘后，可達到最大可能效果(MPE=13%)。實施例5為經過谷胱甘肽修飾的曱硫腦啡呔脂質體配方，在30mg/kg的給藥劑量下，給藥60分鐘后，可達到最大可能效果(MPE二37。/。)。繼續參閱圖3，由曲線下面積(areaundercurve,AUC)數據可發現，實施例5的止痛效果為對比例3的3.2倍，更為曱硫腦啡呔溶液止痛效果的14.7倍。由此可證實經谷胱甘肽修飾的藥物載體，的確可有效保護藥物并穿透血腦屏障，達到止痛效果。加巴噴丁脂質體熱板測試本發明利用熱板藥效實驗測試小鼠靜脈注射給藥后，在攝氏55度的熱板上對熱的止痛效果。結果請參閱圖4，加巴噴丁溶液以30mg/kg的劑量給藥后，并無明顯止痛效果產生，證實未經靶向修飾的加巴噴丁無法經由靜脈注射小鼠產生藥效。對比例4為未經谷胱甘肽修飾的加巴噴丁脂質體配方，在10mg/kg的給藥劑量下，給藥270分鐘后，可達到最大可能效果(MPE=3.15%)。實施例7為經過谷胱甘肽修飾的加巴噴丁脂質體配方，在10mg/kg的給藥劑量下，給藥180分鐘后，可達到最大可能效果(MPE=4.47%)。繼續參閱圖5,由曲線下面積(areaundercurve,AUC)^t據可發現，實施例7的止痛效果為對比例4的1.544咅，更為加巴噴丁;容液止痛效果的2.76倍。由此可證實經谷胱甘肽修飾的藥物載體，的確可有效保護藥物并穿透血腦屏障，達到止痛效果。甲硫腦啡呔脂質體血中穩定性測試首先，取實施例5制作的載體溶液與胎牛血清(FBS)以1:l(體積比)的比例混合，并置于攝氏37度的水浴。待分別0、1、2及4小時后，取出上述混合液進行柱層析分析(SephroxCL-4B，75mmx120mm)。之后，測定曱硫腦啡呔于脂質體內的殘留濃度，結果請參閱圖6。結果發現，實施例5制作的載體溶液，置血清中4小時后，其曱硫腦啡呔濃度仍維持起始濃度的93%以上。然未包封的曱硫腦啡呔在血中的殘存量卻不到2%。由此可知，本發明載體確實可提升藥物在血液中的穩定性。雖然本發明已以較佳實施例披露如上，然其并非用以限定本發明，任何熟習此項技藝者，在不脫離本發明的精神和范圍內，當可作更動與潤飾，因此本發明的保護范圍當視后附的權利要求所界定者為準。權利要求1.一種化合物，包括基團，包括維生素E衍生物或磷脂質衍生物；與該基團連接的聚乙二醇或其衍生物；以及與該聚乙二醇或其衍生物連接的谷胱甘肽或其衍生物。2.如權利要求第1項所述的化合物，其中該維生素E衍生物包括生育酚衍生物或生育三烯醇書t生物。3.如權利要求第1項所述的化合物，其中該維生素E衍生物包括a-生育酚、p-生育酚、y-生育酚、s-生育酚、a-生育三烯醇、(3-生育三烯醇、y-生育三烯醇、5-生育三烯醇、琥珀酸a-生育酚、琥珀酸p-生育酚、琥珀酸y-生育酚、琥珀酸5-生育酚、琥珀酸a-生育三烯醇、琥珀酸(3-生育三烯醇、琥珀酸Y-生育三烯醇、琥珀酸S-生育三烯醇、醋酸a-生育酚、醋酸P-生育酚、醋酸Y-生育酚、醋酸S-生育酚、醋酸a-生育三烯醇、醋酸(3-生育三烯醇、醋酸Y-生育三烯醇、醋酸5-生育三烯醇、煙酸a-生育酚、煙酸(3-生育酚、煙酸y-生育酚、煙酸5-生育酚、煙酸a-生育三烯醇、煙酸P-生育三烯醇、煙酸y-生育三烯醇、煙酸5-生育三烯醇、磷酸a-生育酚、磷酸P-生育酚、磷酸Y-生育酚、磷酸s-生育酚、磷酸a-生育三烯醇、磷酸|3-生育三烯醇、磷酸y-生育三烯醇或磷酸S-生育三烯醇。4.如權利要求第1項所述的化合物，其中該磷脂質衍生物具有化學式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)其中A，為神經鞘胺醇，R,包括辛酰基或棕櫚酰基。5.如權利要求第1項所述的化合物，其中該磷脂質衍生物具有化學式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(II)其中A2為磷酸乙醇胺，R2包括肉豆蔻酰基、棕櫚酰基、硬脂酰基或油酰基。6.如權利要求第1項所述的化合物，其中該聚乙二醇或其衍生物的聚合度大體介于6~210。7.如權利要求第1項所述的化合物，其中當該基團為維生素E衍生物時，該聚乙二醇或其衍生物的分子量大體介于30010，000。8.如權利要求第1項所述的化合物，其中該聚乙二醇衍生物是包括羧酸、馬來酰亞胺、PDP、酰胺或生物素。全文摘要本發明提供一種傳遞系統，包括載體或活性物質，以及連接于該載體或活性物質上的谷胱甘肽或其衍生物。本發明還提供一種化合物，包括基團，該基團包括維生素E衍生物或磷脂質衍生物，與該基團連接的聚乙二醇或其衍生物，以及與該聚乙二醇或其衍生物連接的谷胱甘肽或其衍生物。文檔編號A61P39/00GK101385859SQ200810169358公開日2009年3月18日申請日期2006年1月19日優先權日2005年12月19日發明者呂欣芝,林一峰,王藹君,簡啟恒,黎世達申請人:財團法人工業技術研究院