專利名稱：：一種替拉扎明非腸道含水制劑及其制備方法
技術領域：
：本發明屬藥物制劑
技術領域：
，具體涉及一種替拉扎明非腸道含水制劑及其制備方法。
背景技術：
：替拉扎明，英文名稱tir鄰azamine或TPZ，化學名稱3-氨基-1,2，4苯并三嗪-1，4-二氧化物(3-Amino-1，2,4-benzotuiazine-1,4-dioxide)，又名Win59075或SR4233，其化學結構式如下OO(替拉扎明的化學結構式)分子式C7,2分子量178替拉扎明是一種新型的生物還原活性物。它在腫瘤組織乏氧細胞內能夠被還原生成一種具有細胞毒性作用的代謝產物。這種代謝產物對乏氧細胞的殺傷作用顯著超過它的母體化合物,使腫瘤組織內乏氧細胞死亡，可以同時顯著增加腫瘤放射治療及腫瘤一系列化學治療藥物的抗腫瘤作用，因而作為一種新穎的乏氧細胞增敏劑被引入基礎及臨床實驗。替拉扎明的作用機制替拉扎明對乏氧細胞具有特異的細胞毒性。在乏氧細胞存在的情況下，替拉扎明在細胞內代謝產生自由基，自由基與DNA大分子結合，導致DNA損害和細胞死亡。Katherineb等認為替拉扎明在細胞核內代謝是替拉扎明引起DNA破壞及產生細胞毒性的主要原因。他們還通過大量的試驗證實替拉扎明在乏氧細胞內抑制DNA復制的作用顯著高于電離輻射。同時，delahoussayeym等對替拉扎明的代謝機制進行深入的研究:替拉扎明經乏氧細胞核內某些還原酶作用后的代謝產物均可DNA單鏈斷裂。而另一方面DNA的雙鏈斷裂是由于替拉扎明被細胞核內一未知的依賴NADPH活性的還原酶還原產生的化合物所致。替拉扎明作為放療增敏劑:與放射線聯合治療惡性實體腫瘤的作用機制經過長期的研究證實，幾乎所有的人類惡性實體腫瘤中無論腫瘤的大小均存在乏氧細胞,一般約占腫瘤細胞的10%~20%左右，也有高達50%或者少至1%,還有一些細胞介于乏氧狀態與有氧狀態之間。惡性實體腫瘤內的乏氧細胞當氧張力低于0.5rranHg時就會產生對放射治療的抵抗性,其氧增強比(Oxygenationenhancementrate0ER)為2530,即殺滅乏氧細胞所需劑量是殺滅有氧細胞所需劑量的三倍。在有氧狀態下，由于分子氧的存在而把應在照射中能得到修復的損傷固定下來，不再產生修復。因此,腫瘤乏氧細胞經照射后產生的損傷中，由于乏氧，可以使它們得到修復，也就增加了對放射線的抵抗性。替拉扎明能選擇性的殺傷乏氧細胞,低LET射線則主要殺傷非乏氧細胞，兩者聯合應用,將使放射治療的效果大大增強。Brown等報道了對荷SCCVII、RIF、EMT6、KHT/R瘤的C3H/Km小鼠和BALB/c小鼠實驗的結果在分次照射前給予008mmol/Kg的替拉扎明，采用體內實驗/離體存活分析方法進行評價，證明替拉扎明可以顯著增加輻射所引起的腫瘤細胞死亡，并且替拉扎明劑量修飾因子(DMF)值顯著大于傳統放射增敏劑SR2508。替拉扎明作為化療增敏劑與順鉑聯合應用治療惡性腫瘤的分子機制的研究進展。以往研究表明，腫瘤細胞對順鉑的敏感性取決于兩種DNA交聯修復蛋白Erccl和XRA的表達,且順鉑能上調ERCC1的表達。Goldbergz等應用替拉扎明和順鉑對兩種不同的細胞株分別進行處理，兩種細胞株一種對順鉑高度敏感一種對順鉑不敏感,處理方法分為同時用藥和先后用藥兩種，結果發現兩種處理方法對順鉑敏感組ERCClmRNA和蛋白表達均沒有顯著改變。在順鉑不敏感組，替拉扎明可以上調ERCC1的表達，而順鉑對ERCC1的表達沒有影響。XRA的表達在各組均未見改變。據此，Goldbergz等認為替拉扎明與順鉑的協同作用，并非由于替拉扎明抑制ERCC1和XRA的表達所致，替拉扎明的乏氧細胞毒性也許起到了更為重要的作用。目前國外針對替拉扎明與放射治療和化學藥物聯合應用治療惡性實體腫瘤的臨床試驗已經大規模的展開。替拉扎明作為一種放射治療、化學治療的增敏藥物，與放射治療與化學治療聯合應用時具有協同的抗腫瘤活性,增加了放射治療、化學治療對腫瘤的殺傷效應，毒副反應可以耐受，沒有出現危及生命的或不可恢復的毒副作用，為抗腫瘤治療開辟了新的領域。因此，在腫瘤的治療中，預期有很好的應用前景。1992年12月29日出版的US5175827公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物與放射治療結合用于治療腫瘤的應用。1，2，4-苯并三嗪氧化物使腫瘤細胞對放射治療敏感，并且使患者更順應治療的用藥程式。Holden等(1992)在"用SR-4233加強烷基化試劑在FSaIIC鼠纖維肉瘤中的活性"(JNCI84:187-193)公開了SR-4233(即3-氨基-1，2，4-苯并三嗪-1，4-二氧化物，該化合物是已知的，并且在下文中被稱作替拉扎明)與抗腫瘤垸基化試劑結合的應用。國際申請PC/US1989/01037公開了用作放射增敏劑和選擇性細胞毒劑的1，2，4-苯并三嗪氧化物。其他有關的專利包括US3868372和US4001410，公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物的衍生物。國際申請PCT/US1996/13550公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物的制劑。它是一種非腸道的含水制劑，其主要特征為含有檸檬酸鹽緩沖液，并且限定了檸檬酸鹽的濃度為0.001M—O.IM，最優選的處方中加入的檸檬酸為0.9605克，加水稀釋至1000ml。同時規定了主藥替拉扎明的優選劑量范圍為0.5—0.810克，最優選的處方中加入替拉扎明0.7克，加水稀釋至1000ml。經過換算，該專利中提到的替拉扎明的濃度范圍為0.0028M—0.0046M。但是，替拉扎明的缺點是在非腸道給藥的藥物載體中的溶解度不夠，并且在這些載體中不穩定。原有同類制劑在低溫存放過程中存在不穩定、貯藏期較短、易受溫度影響而析出等缺陷。在對替拉扎明的水性制劑研究中，我們發現替拉扎明在水中的溶解性非常差，按照現有技術(包括國際申請PCT/US1996/13550中公開的技術方案)配制的注射液非常的不穩定，在常溫(20'C)條件下放置一段時間，就會析出少量結晶，后證明結晶為替拉扎明。而在低溫(4°C)放置24小時后，也會有替拉扎明結晶析出。由于替拉扎明水性制劑是作為注射液使用，主藥替拉扎明的析出會嚴重影響患者使用的安全性和有效性，增大藥物使用的風險。因此，研制出一種更為安全、穩定、有效、且符合人體注射要求的替拉扎明水性制劑，成為了藥物制劑研究工作者的當務之急。
發明內容本發明的目的，在于找到一種更穩定的替拉扎明非腸道含水制劑，以解決現有技術方案中替拉扎明放置容易析出的問題，增強該制劑的穩定性和安全性，滿足臨床和廣大患者對該藥的需求。為提高替拉扎明制劑的穩定性和延長貯藏期，我們對新型替拉扎明的非腸道含水制劑進行了全面地研究。替拉扎明的生化性質表明該分子既不是高極性的，也不是高親脂性的，其結晶結構是通過分子間力牢固鍵合的，因此替拉扎明可以是水合形式。且高溫高壓應激反應結果表明，替拉扎明生理鹽水制劑pH值明顯變化，表明該制劑需要一定程度的緩沖。已知控制適當的pH對于保持替拉扎明制劑的穩定性很重要。允許施用適當的藥用可接受的酸性化合物或緩沖體系。優選的酸性化合物包括藥用可接受的pKa在2~4.5之間的有機酸，這些酸包括2-羥基垸醇酸，如枸櫞酸、乳酸、酒石酸或蘋果酸。如使用藥用可接受的緩沖體系，從緩沖體系類別中選擇可有效地維持PH在5以下，優選在2~4.5范圍間，緩沖劑的配制是使用廣為所知的方法。新處方通過調整替拉扎明的非腸道含水制劑的緩沖劑，選取醋酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液作為溶劑環境來提高替拉扎明制劑的穩定性和貯藏時間。磷酸鹽緩沖液(PH2)甲液取磷酸16.6毫升，加水至1000毫升搖勻；乙液取磷酸二氫鈉71.63克，加水使溶解成1000毫升。取上述甲液72.5毫升與乙液27.5毫升混合。醋酸銨緩沖液(PH3.5)取醋酸銨25克，加水25毫升溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38毫升，用2mol/L鹽酸溶液準確調節ph至3.5，用水稀釋至100毫升。醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH3.6)取醋酸鈉5.l克，加冰醋酸20毫升，再加水稀釋至250毫升。枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液(pH4.0)甲液取枸櫞酸21克或無水枸櫞酸19.2克，加水使溶解成1000毫升。乙液取磷酸氫二鈉71.63克，加水使溶解成1000毫升，取上述甲液61.45毫升與乙液38.55毫升混合，搖勻，既得。醋酸-醋酸鉀緩沖液(pH4.3)取醋酸鉀14克，加冰醋酸20.5毫升，再加水稀釋至1000毫。醋酸-醋酸鈉緩沖液(PH4.5)取醋酸鈉18克，加冰醋酸9.8毫升，再加水稀釋至1000毫升。醋酸-醋酸銨緩沖液(pH4.5)取醋酸銨7.7克，加水50毫升溶解后，加冰醋酸6毫升，稀釋至100毫升。最優是醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH3.6)。本發明提供了一種替拉扎明非腸道含水制劑，其中包括濃度為l一500mmo1/1的藥學制劑中可接受的除檸檬酸、乳酸外的有機酸鹽緩沖液或無機酸鹽緩沖液或者由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液和濃度為0.01—4mmo1/1的替拉扎明或其可用的鹽。其中所述制劑的pH值為2.0~7.0。進一步的，其中所述的有機酸鹽緩沖液為醋酸鹽緩沖液；所述無機酸鹽緩沖液為磷酸鹽緩沖液；所述由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液為枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液；所述制劑的pH值為2.0~7.0。所述非腸道含水制劑優選處方1000ml水溶液基本組成為0.00178克一O.712克替拉扎明或其可藥用鹽；0.0819克一41克醋酸鈉；0.321ml—160ml冰醋酸；pH值為2.5~6.5。更優選處方中醋酸-醋酸鈉緩沖液濃度為5—10ramo1/1，替拉扎明或其可藥用鹽濃度為0.05—3.3mmo1/1的，其1000ml水溶液基本組成為0.0089克一O.59克替拉扎明或其可藥用鹽；0.4095克一27.3克醋酸鈉；1.605ml—107ml冰醋酸；pH值為3.0~6.0。最優選處方1000ml水溶液基本組成為0.5克替拉扎明或其可藥用鹽；20.4克醋酸鈉；80ml冰醋酸；pH值為3.6。或者最優選處方1000ml水溶液基本組成為0.015克替拉扎明或其可藥用鹽；0.612克醋酸鈉；2.4ml冰醋酸；pH值為6.0。本發明還提供了一種制備替拉扎明非腸道含水制劑的方法，其特征在于用水配制所述的緩沖液，升高溫度，并使緩沖液溫度保持50-60°C，緩慢加入替拉扎明或其可藥用鹽攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加或不添加注射用制劑所用的附加劑，加適量水至1000毫升，調PH，即得。根據所需用途，制成大輸液添加注射用制劑所用的附加劑；制成小針可添加也可不添加注射用制劑所用的附加劑。其中所述附加劑可以為輸液制劑常用的等滲調節劑(如氯化鈉、葡萄糖等)，穩定劑和抗氧化劑等。本發明還提供了一種包含有化合物替拉扎明的非腸道含水制劑在制備治療癌瘤的藥物中的用途，其中所述制劑處方包括濃度為l一500mmo1/1的藥學制劑中可接受的除檸檬酸、乳酸外的有機酸鹽緩沖液或無機酸鹽緩沖液或者由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液和濃度為0.01—4mmo1/1的替拉扎明或其可用的鹽；pH值為2.0~7.0。具體實施例方式7下面結合以下實例對本發明做進一步描述，但本發明并不僅僅限于此。制劑制備實施例一A:替拉扎明0.712克B:醋酸鈉41克C:冰醋酸160毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為^。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二A:替拉扎明0.0089克B:醋酸鈉0.4095克C:冰醋酸1.605毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約5(TC，緩慢加入/.攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.0。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例三-A:替拉扎明0.59克B:醋酸鈉27.3克C:冰醋酸107毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約55'C，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為6.0。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射制劑制備實施例四-A:替拉扎明0.00178克B:醋酸鈉Q.0819克C:冰醋酸0.321亳升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.5。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例五A:替拉扎明0.5克B:醋酸鈉20.4克C:冰醋酸80毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.6。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例六A:替拉扎明0.015克B:醋酸鈉0.612克C:冰醋酸2.4毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約50'C，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉、葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.0。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例七A:替拉扎明0.00178克B:醋酸鉀0.098克C:冰醋酸0.144毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.8。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例八:A:替拉扎明0.713克B:醋酸鉀49.07克C:冰醋酸71.8毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約55'C，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為2.3。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例九A:替拉扎明0.0089克B:醋酸鉀0.4908克C:冰醋酸0.72毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC,緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.5。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例十A:替拉扎明0.594克B:醋酸鉀32.71克C:冰醋酸48毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約5(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.5。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例十一A:替拉扎明0.5克B:醋酸鉀7.7克C:冰醋酸6毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為4.3。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例十二A:替拉扎明0.015克B:醋酸鉀0.231克C:冰醋酸0.18毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉、葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.5。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例十三-a)替拉扎明0.00178克b)醋酸銨0.0771克c)冰醋酸0.06毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.4。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例十四-A:替拉扎明0.713克B:醋酸銨38.54克C:冰醋酸30毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.1。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例十五A:替拉扎明0.297克B:醋酸銨12.85克C:冰醋酸10毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.8。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例十六A:替拉扎明0.594克B:醋酸銨25.69克C:冰醋酸20毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.5。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例十七A:替拉扎明0.5克B:醋酸銨7.7克C:冰醋酸6毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為4.3。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射制劑制備實施例十八A:替拉扎明0.015克B:醋酸銨0.231克C:冰醋酸0.18毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.8。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例十九a)替拉扎明0.594克b)磷酸二氫鈉68.9克c)磷酸6毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為4.1。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二十a)替拉扎明0.713克b)磷酸二氫鈉205.6克c)磷酸18毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約60'C，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為2.0。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二十一a)替拉扎明0.00178克b)磷酸二氫鈉0.411克c)磷酸0.036毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉、葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.5。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例二十二-A:替拉扎明0.015克B:磷酸二氫鈉1.557克C:磷酸0.138毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.4。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例二十三-A:替拉扎明0.5克B:磷酸二氫鈉51.9克C:磷酸4.6毫升取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為3.5。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二十四a)替拉扎明0.594克b)枸櫞酸35克c)磷酸二氫鈉26克取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為5.2。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二十五A:替拉扎明0.713克B:枸櫞酸105.l克C:磷酸二氫鈉78克取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為2.0。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。制劑制備實施例二十六-a)替拉扎明0.00891克b)枸櫞酸0.21克c)磷酸二氫鈉0.156克取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約60'C，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.6。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例二十七A:替拉扎明0.015克B:枸櫞酸0.39克C:磷酸二氫鈉0.828克取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加氯化鈉、葡萄糖等滲透壓調節劑，加適量水至1000毫升，pH約為6.7。制劑用途靜脈滴注。制劑制備實施例二十八A:替拉扎明0.5克B:枸櫞酸13克C:磷酸二氫鈉27.6克取約500毫升水溶解B和C，適量升溫，使溶液溫度保持約6(TC，緩慢加入A攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后加適量水至1000毫升，pH約為4.0。灌封至20ml的安瓿中，封口，包裝即得。制劑用途靜脈注射。穩定性對比研究根據以上發明的技術方案，我們選取了醋酸-醋酸鈉緩沖液(實施例四)、醋酸-醋酸鉀緩沖液(實施例十)、醋酸-醋酸銨緩沖液(實施例十五)、磷酸鹽緩沖液(實施例十七)、枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液(實施例二十五)以及國際申請PCT/US1996/13550說明書實施例檸檬酸緩沖液作為主要的穩定體系，配制出澄明的替拉扎明溶液，并在2(TC恒溫條件和4'C恒溫條件儲存，觀察其外觀及析出情況。具體如下20'C恒溫條件，觀察濃度為0.5g/1不同配方的替拉扎明含水制劑的穩定性，結果見表一表一、不同配方的替拉扎明溶液在20'C恒溫條件下的穩定性<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>4。C恒溫條件，觀察濃度為0.5g/l不同配方的替拉扎明含水制劑的穩定性，結果見表二:表二、不同配方的替拉扎明溶液在4'C恒溫條件下的穩定性<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>動物藥理試驗對比研究為了觀察本發明的技術方案中的配方在使用過程中動物的反應和耐受性，我們進行了家兔血管刺激試驗和肌肉刺激試驗，并與國際申請PCT/US1996/13550中的采用檸檬酸緩沖液的注射液進行對比研究。一、替拉扎明注射液血管刺激試驗試驗目的觀察靜脈注射新配方的替拉扎明注射液與替拉扎明檸檬酸鹽注射液的血管刺激反應比較。試驗材料1、受試藥物替拉扎明醋酸鈉注射液(實施例五)、替拉扎明醋酸鉀注射液(實施例十一)、替拉扎明醋酸銨注射液(實施例十七)、替拉扎明磷酸鹽注射液(實施例二十三)、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液(實施例二十八)、替拉扎明檸檬酸鈉注射液(國際申請PCT/US1996/13550說明書中實施例)。2、0.9%氯化鈉注射液。3、動物家兔，新西蘭種普通級，雌雄各半，體重1.8-2.4kg。試驗方法家兔12只，固定于兔箱內，其中6只分別于一側耳緣靜脈無菌操作緩慢注射0.7rag/ml替拉扎明注射液生理鹽水溶液l.Oml,在另一側注射同體積的生理鹽水。另6只分別于一側耳緣靜脈無菌操作緩慢注射每天注射1次，注射藥物分別為0.7mg/ml的替拉扎明醋酸鈉注射液、替拉扎明醋酸鉀注射液、替拉扎明醋酸銨注射液、替拉扎明磷酸鹽注射液、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液、替拉扎明檸檬酸鈉注射液1.0ml，在另一側注射同體積的生理鹽水。在同一部位連續3次，于最后一次給藥后約24小時觀察注射部位血管及周圍組織的反應，并以頸動脈放血方式處死家兔，取注射部位及其前方3cm血管及周圍組織，作常規病理組織學觀察。試驗結果家兔緩慢靜脈注射替拉扎明醋酸鈉注射液，在其前方靜脈和周圍組織肉眼未見明顯的紅、腫或壞死等異常現象。組織學切片檢查發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明醋酸鈉注射液的家兔耳緣靜脈血管結構正常，無出血、炎癥、組織變性和壞死等反應。家兔緩慢靜脈注射替拉扎明醋酸鉀注射液，在其前方靜脈和周圍組織肉眼未見明顯的紅、腫或壞死等異常現象。組織學切片檢查發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明醋酸鉀注射液的家兔耳緣靜脈血管結構正常，無出血、炎癥、組織變性和壞死等反應。家兔緩慢靜脈注射替拉扎明醋酸銨注射液，在其前方靜脈和周圍組織肉眼未見明顯的紅、腫或壞死等異常現象。組織學切片檢査發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明醋酸銨注射液的家兔耳緣靜脈血管結構正常，無出血、炎癥、組織變性和壞死等反應。家兔緩慢注射替拉扎明磷酸鹽注射液，在其前方靜脈和周圍組織出現細微肉眼可見的紅、腫現象。組織學切片檢査發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明磷酸鹽注射液的家兔耳緣靜脈血管有少量的出血、炎癥反應。家兔緩慢注射替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液，在其前方靜脈和周圍組織出現細微肉眼可見的紅、腫現象。組織學切片檢查發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液的家兔耳緣靜脈血管有少量的出血、炎癥反應。家兔緩慢注射替拉扎明檸檬酸鹽注射液，在其前方靜脈和周圍組織出現細微肉眼可見的紅、腫現象。組織學切片檢查發現，與靜脈注射生理鹽水相比，靜脈注射替拉扎明檸檬酸鹽注射液的家兔耳緣靜脈血管有少量的出血、炎癥反應。試驗結論結果表明，緩慢靜脈注射替拉扎明醋酸鈉注射液、替拉扎明醋酸鉀注射液、替拉扎明醋酸銨注射液無血管刺激反應。較替拉扎明磷酸鹽注射液、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液和已有的替拉扎明檸檬酸鹽注射液血管刺激小。二、替拉扎明葡萄糖注射液肌肉注射刺激試驗試驗目的觀察肌肉注射不同配方的替拉扎明注射液對肌肉的刺激反應。試驗材料1、受試藥物替拉扎明醋酸鈉注射液(實施例五)、替拉扎明醋酸鉀注射液(實施例十一)、替拉扎明醋酸銨注射液(實施例十七)、替拉扎明磷酸鹽注射液(實施例二十三)、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液(實施例二十八)、替拉扎明檸檬酸鈉注射液(國際申請18PCT/US1996/13550說明書中實施例)。2、0.9%氯化鈉注射液。3、動物家兔，新西蘭種普通級，雌雄兼用。試驗方法家兔七只，分別在其左右兩股四頭肌內上下交叉注射替拉扎明醋酸鈉注射液、替拉扎明醋酸鉀注射液、替拉扎明醋酸銨注射液、替拉扎明磷酸鹽注射液、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液、替拉扎明檸檬酸鈉注射液2.0ml/只或生理鹽水2.0ml/只，注射后48小時擊頭致昏，縱向切開股四頭肌，觀察注射局部形態、色澤等，并按表三換算成反應等級。表三.刺激反應級數<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>試驗結果家兔股四頭肌分別注射上述配方的替拉扎明注射液的部位均與生理鹽水一樣，反應級數為O級，無明顯變化。試驗結論替拉扎明醋酸鈉注射液、替拉扎明醋酸鉀注射液、替拉扎明醋酸銨注射液、替拉扎明磷酸鹽注射液、替拉扎明枸櫞酸-磷酸氫二鈉注射液、替拉扎明檸檬酸鈉注射液(國際申請PCT/US1996/13550)均無明顯的刺激反應。權利要求1、一種替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于其基本組成為濃度為1-500mmol/l的除檸檬酸、乳酸外的有機酸鹽緩沖液或無機酸鹽緩沖液或者由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液，濃度為0.01-4mmol/l的替拉扎明或其可藥用鹽，pH值為2.0～7.0。2、如權利要求1所述的替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于所述的有機酸鹽緩沖液為醋酸鹽緩沖液；所述無機酸鹽緩沖液為磷酸鹽緩沖液；所述由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液為枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液；pH值為2.07.0。3、如權利要求2所述的替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于lOOOml水溶液基本組成為0.00178克一0.712克替拉扎明或其可藥用鹽；0.0819克_41克醋酸鈉；0.321ml—160ml冰醋酸；pH值為2.56.5。4、如權利要求3所述的替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于1000ml水溶液基本組成為0.0089克一0.59克替拉扎明或其可藥用鹽；0.4095克_27.3克醋酸鈉；1.605ml—107ml冰醋酸；pH值為3.0~6.0。5、如權利要求4所述的替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于1000ml水溶液基本組成為0.5克替拉扎明或其可藥用鹽；20.4克醋酸鈉；80ml冰醋酸；pH值為3.6。6、如權利要求4所述的替拉扎明非腸道含水制劑，其特征在于1000ml水溶液基本組成為0.015克替拉扎明或其可藥用鹽；0.612克醋酸鈉；2.4ml冰醋酸；pH值為6.0。7、一種制備如權利要求1所述的替拉扎明非腸道含水制劑的方法，其特征在于用水配制所述的緩沖液，升高溫度，并使緩沖液溫度保持50-6(TC，緩慢加入替拉扎明或其可藥用鹽攪拌使完全溶解，冷卻至常溫后，添加或不添加輸液制劑所用的附加劑，加適量水至1000毫升，調PH,即得。8、如權利要求1所述的替拉扎明非腸道含水制劑在制備治療癌瘤的藥物中的用途。全文摘要本發明提供了一種替拉扎明非腸道含水制劑及其制備方法，其中所述制劑包括濃度為1-500mmol/l的藥學制劑中可接受的除檸檬酸、乳酸外的有機酸鹽緩沖液或無機酸鹽緩沖液或者由無機酸鹽和有機酸組成的緩沖液和濃度為0.01-4mmol/l的替拉扎明或其可用的鹽。其中所述制劑的pH值為2.0～7.0。解決了現有技術中替拉扎明溶液放置容易析出的問題，增強該制劑的穩定性和安全性，滿足臨床和廣大患者對該藥的需求。文檔編號A61K31/53GK101683346SQ20081016158公開日2010年3月31日申請日期2008年9月24日優先權日2008年9月24日發明者孟昭珂,杜九齡,郭殿武申請人:杭州民生藥業有限公司