專利名稱：胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-o-l-纈氨酸酯和藥學上可接受的鹽及其制備和應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，涉及胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -0~L-纈氨酸酯 和其藥學上可接受的鹽及其制備和用途，如胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -O"L-纈 氨酸酯的三氟乙酸鹽、硫酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氯乙酸鹽、丙酸鹽、 丁酸鹽、對甲苯磺酸鹽、馬來酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽等。口服 胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -纈氨酸酯，可以明顯提高胞嘧啶阿拉伯糖苷的 口服生物利用度。胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -^L-纈氨酸酯和其藥學上可接受 的鹽在臨床上可以口服或靜脈給藥形式治療白血病。
背景技術：
胞嘧啶阿拉伯糖苷對多種動物腫瘤有抑制作用，與常用抗腫瘤藥物無 交叉耐藥現象。胞嘧啶阿拉伯糖苷在體內受磷酸激酶的活化轉變成三磷酸 胞嘧啶阿拉伯糖苷而發揮作用，對DNA多聚酶有強大的抑制作用，干擾核 苷酸摻入DNA;并抑制核苷酸還原酶阻止胞嘧啶核苷酸還原為脫氧胞嘧啶核 苷酸，影響DNA的復制導致細胞死亡。胞嘧啶阿拉伯糖苷是周期特異性藥 物，作用于S期，并對G,/S， S/G2邊界有延緩作用。可誘導人早幼性白血 病HL-60細胞向單核細胞系統分化。在臨床上主要用于急性粒細胞白血病， 特別是成人急性非淋巴細胞白血病。也可以治療惡性淋巴瘤、肺癌、消化 道癌、頭頸部癌。對病毒性眼病、帶狀皰疹、單純皰疹性結膜炎也有效。 胞嘧啶阿拉伯糖苷通常與柔紅霉素、硫鳥嘌呤、多柔比星、潑尼松、長春 新堿等聯合用藥，用于白血病的治療。
胞嘧啶阿拉伯糖苷口服吸收較少，易被胃腸道粘膜和肝中胞嘧啶核苷 脫氨酶脫氨而失活，故不作口服使用。靜脈注射后迅速進入全身，廣泛分 布于體液、組織和細胞內，40%進入腦脊液，在靜脈注射后2h,腦脊液濃 度可以達到血漿藥物濃度的40 50%,且腦脊液中脫氨酶水平較低，故轉變 成尿嘧啶阿拉伯糖苷較少。胞嘧啶阿拉伯糖苷在肝臟代謝成無活性的尿嘧 啶阿拉伯糖苷，24h內909i的代謝物由尿液中排出，僅見10%以下的原形藥 物，靜脈注射后血漿分布半衰期是10-15 min，血漿消除半衰期是2-2.5h， 鞘內注射時血漿半衰期是ll h。用于急性粒細胞白血病的治療時，常用靜脈注射或靜脈滴注，每天100 200 mg/m2,或2 6 mg/Kg，連用5 7天， 劑量從小增大直至出現骨髓抑制，停藥5 7天后或骨髓恢復后再重復使用。 因此為了提高患者用藥的順應性和降低使用成本，在保證胞嘧啶阿拉 伯糖苷藥理活性的同時，提高它的口服生物利用度，發展胞嘧啶阿拉伯糖 苷口服給藥形式是非常用意義的。
發明內容
本發明的目的是提供一種能夠提高胞嘧啶阿拉伯糖苷口服生物利用度 且能夠治療白血病的化合物和其藥學上可接受的鹽及其制備和用途。
本發明提供了一種新型的化合物胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -0~L-纈氨酸酯， 其結構式是
分子式是C"H22N406，分子量是342. 15。
本發明還提供了上述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸酯的藥學上 可接受的鹽，包括三氟乙酸鹽、硫酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氯乙酸鹽、 丙酸鹽、丁酸鹽、對甲苯磺酸鹽、馬來酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽 等。
本發明提供了胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -纈氨酸酯及其藥學上可接受 的鹽可用以下制備方法制得，以胞嘧啶阿拉伯糖苷和,叔丁氧甲酰基-L-纈氨酸為原料，以羰基二咪唑為催化劑，在溶劑中進行酯化反應即得。酯 化反應的溫度是30 120 'C;胞嘧啶阿拉伯糖苷和L-纈氨酸用量摩爾比是 1: 0.9 1.3;所用的試劑是4-二甲基氨基吡啶、四氫呋喃、N， N-二甲基 甲酰胺，三乙胺，三氟乙酸、硫酸、甲酸、乙酸、三氯乙酸、丙酸、丁酸、 對甲苯磺酸、馬來酸、乳酸、磷酸、甲磺酸。
本發明提供的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸酯及其藥學上可接受 的鹽能夠提高胞嘧啶阿拉伯糖苷的口服生物利用度。本發明提供的胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -^L-纈氨酸酯及其藥學上可接受 的鹽與相應的藥用輔料組合制成可供口服或靜脈給藥用的制劑，如片劑、 膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射劑以及凍干粉針劑，單位制劑活性成分的 含量是1 200 mg。
本發明的優點第一次提供了胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -O"L-纈氨酸酯和 其藥學上可接受的鹽及其制備與用途。胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸 酯及其藥學上可接受的鹽能夠顯著提高胞嘧啶阿拉伯糖苷的口服生物利用 度，有望開發成治療白血病的口服制劑。
具體實施方式
，
(1) 胞嘧啶阿拉伯糖苷5， 纈氨酸酯三氟乙酸鹽的制備
(叔丁氧甲酰基-丄-纈氨酸與羰基二咪唑反應，反應溶劑是環己垸，反 應溫度是35 °C，反應時間90分鐘；將該反應液慢慢滴加到胞嘧啶阿拉伯 糖苷、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺與^f二甲基甲酰胺的混和液中。繼續 反應l小時，溫度80 °C。減壓蒸去低沸點溶劑，將余下的^^二甲基甲 酰胺溶液用冰醋酸調pH值至7.4，減壓蒸去^^二甲基甲酰胺，殘余物以 乙酸乙酯稀釋，依次用蒸餾水和飽和食鹽水洗。有機層濃縮到一定程度， 用硅膠拌樣，經硅膠柱層析，甲醇和乙酸乙酯梯度洗脫，收集柱層析物， 濃縮，減壓蒸去溶劑，殘余物以三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液(6: 4) 溶解，4-8小時后，減壓蒸去溶劑，殘余物用水溶解，蒸干，得到白色固 體即胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -纈氨酸酯三氟乙酸鹽。 收率51%,卿203 209 。C，純度99.5%
lH麗R(600MHz， DMS0-d6， S ppm) : 9. 92(1H， br)， 8.63-8.77 (4H， 2br)， 7.82—7.87 (1H， d， J = 7.8 Hz), 6.20 (1H， d， J = 7. 8 Hz), 6.04 (1H， d, J = 3.4Hz)， 5.91 (1H， br), 4.53-4.61 (1H， dd， J=11.6， J = 8. 3)， 4.34-4.37 (1H， dd， J = 11.6， J = 3.8)， 4.08 (2H， m)， 4.01 (1H， m)， 3.90 (1H， m), 2.20 (1H， m)， 1,00細，m)。
(2) 胞嘧啶阿拉伯糖苷5' 纈氨酸酯三氯乙酸鹽的制備
^叔丁氧甲酰基-纈氨酸與羰基二咪唑反應，反應溶劑是環己垸，反 應溫度是45 °C，反應時間90分鐘；將該反應液慢慢滴加到胞嘧啶阿拉伯 糖苷、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺與W^二甲基甲酰胺的混和液中。繼續 反應1小時，溫度70 'C。減壓蒸去低沸點溶劑，將余下的A^二甲基甲酰胺溶液用冰醋酸調pH值至7.4,減壓蒸去^f二甲基甲酰胺，殘余物以 乙酸乙酯稀釋，依次用蒸餾水和飽和食鹽水洗。有機層濃縮到一定程度， 用硅膠拌樣，經硅膠柱層析，甲醇和乙酸乙酯梯度洗脫，收集柱層析物， 濃縮，減壓蒸去溶劑，殘余物以三氯乙酸和二氯甲烷的混合溶液(6: 4) 溶解，4-8小時后，減壓蒸去溶劑，殘余物用水溶解，蒸干，得到白色固 體即胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -0"L-纈氨酸酯三氯乙酸鹽。
收率45,2%, mp 212 215 。C，純度98.9%. (3)胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^"L-纈氨酸酯甲酸鹽的制備
^叔丁氧甲酰基-丄-纈氨酸與羰基二咪唑反應，反應溶劑是環己烷，反 應溫度是60 'C，反應時間90分鐘；將該反應液慢慢滴加到胞嘧啶阿拉伯 糖苷、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺與^f二甲基甲酰胺的混和液中。繼續 反應1小時，溫度90 °C。減壓蒸去低沸點溶劑，將余下的W^二甲基甲 酰胺溶液用冰醋酸調pH值至7.4，減壓蒸去A^二甲基甲酰胺，殘余物以 乙酸乙酯稀釋，依次用蒸餾水和飽和食鹽水洗。有機層濃縮到一定程度， 用硅膠拌樣，經硅膠柱層析，甲醇和乙酸乙酯梯度洗脫，收集柱層析物， 濃縮，減壓蒸去溶劑，殘余物以甲酸和二氯甲垸的混合溶液(6: 4)溶解， 4-8小時后，減壓蒸去溶劑，殘余物用水溶解，蒸干，得到白色固體即胞嘧 啶阿拉伯糖苷5' -O"L-纈氨酸酯甲酸鹽。 收率37.1%, mp 192 196 。C，純度99.4%.
(4)對所得到的產品胞嘧啶阿拉伯糖苷5， 纈氨酸酯三氟乙酸鹽進行
大鼠體內藥物動力學研究
大鼠(體重在200-250g之間)分別口服胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨 酸酯三氟乙酸鹽水溶液和胞嘧啶阿拉伯糖苷水溶液(給藥劑量以胞嘧啶阿 拉伯糖苷計均為15 mg/Kg)，同時大鼠靜脈注射阿糖胞苷水溶液(6 mg/Kg)。 測定血漿中胞嘧啶阿拉伯糖苷的濃度。
表l可以得出，大鼠口服胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -^L-纈氨酸酯三氟 ^酸鹽水溶液和胞嘧啶阿拉伯糖苷水溶液后，胞嘧啶阿拉伯糖苷的生物利 用度分別是65.8%和19. 1%。因此，胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -O"L-纈氨酸酯
三氟乙酸鹽能明顯提高胞嘧啶阿拉伯糖苷的口服生物利用度。 表1 口服胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -&卜纈氨酸酯三氟乙酸鹽(8)和胞嘧啶阿 拉伯糖苷后，胞嘧啶阿拉伯糖苷的藥動學參數<formula>formula see original document page 8</formula>說明大鼠靜脈注射胞嘧啶阿拉伯糖苷水溶液(6mg/Kg)后，平均AUQh 是24. 78 ug'h/mL。
AUC。-t:血藥濃度-時間曲線下面積；t1/2:體內半衰期；C,:血藥濃度峰值; F: 口服生物利用度。
(5)胞嘧啶阿拉伯糖苷5， -^L-纈氨酸酯三氟乙酸鹽片劑的制備 胞嘧啶阿拉伯糖苷5， 纈氨酸酯三氟乙酸鹽50g
乳糖 110 g
微晶纖維素 140 g
羧甲基淀粉鈉 24 g
硬脂酸鎂_^_￡_
Sij^ 誦片
制備工藝將分別過100目篩的主藥與輔料混合，用95%乙醇制粒，用18 目篩制粒，60 'C通風干燥，以16目篩整粒后加入硬脂酸鎂混合均勻，打 片。
權利要求
1、胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-O-L-纈氨酸酯(A)，其結構式是分子式是C14H22N4O6，分子量是342.15。
2、根據權利要求1所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^"L-纈氨酸酯，其特 征在于其藥學上可以接受的鹽，選自三氟乙酸鹽或硫酸鹽或甲酸鹽或乙酸 鹽或三氯乙酸鹽或丙酸鹽或丁酸鹽或對甲苯磺酸鹽或馬來酸鹽或乳酸鹽、 磷酸鹽或甲磺酸鹽。
3、根據權利要求1所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸酯，其 特征在于胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^"L-纈氨酸酯的制備方法，以胞嘧啶阿 拉伯糖苷和&叔丁氧甲酰基-L-纈氨酸為原料，以羰基二咪唑為催化劑，在 溶劑中進行酯化反應即得；酯化反應的溫度是30 120 'C;胞嘧啶阿拉伯糖苷和L-纈氨酸用量摩 爾比是l: 0.9 1.3;所用的試劑是4-二甲基氨基吡啶、四氫呋喃、N, N-二甲基甲酰胺，三乙胺。
4、 根據權利要求1所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸酯，其特 征在于:其藥學上可以接受的鹽的制備方法，化合物A與三氟乙酸或硫酸、 甲酸或乙酸或三氯乙酸或丙酸或丁酸或對甲苯磺酸或馬來酸或乳酸或磷酸 或甲磺酸反應即得。
5、 根據權利要求2所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氮酸酯的藥學Hi OH竹分子式是C14H22NA，分子量是342. 15或其藥學上可以接受的鹽作為活性成 分，與相應的藥用輔料組合制成可供口服或靜脈給藥用的制劑；單位制劑 活性成分的含量是1 200 mg。上可以接受的鹽，其特征在于化合物與酸成鹽，所用的酸包括三氟乙酸或 硫酸或甲酸或乙酸或三氯乙酸或丙酸或丁酸或對甲苯磺酸或馬來酸或乳酸 或磷酸或甲磺酸；優選酸是三氟乙酸。
6、 根據權利要求1所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' 纈氨酸酯，其特 征在于:其在提高胞嘧啶阿拉伯糖苷口服生物利用度上的應用。
7、 根據權利要求2所述的胞嘧啶阿拉伯糖苷5' -^L-纈氨酸酯藥學上 可以接受的鹽，其特征在于:在提高胞嘧啶阿拉伯糖苷口服生物利用度上的 應用。
8、 一種具有治療白血病的藥用組合物，其特征在于以胞嘧啶阿拉伯糖 苷5' -O"L-纈氨酸酯，其結構式如下
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，涉及胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-O-L-纈氨酸酯和其藥學上可接受的鹽及其制備和用途，如胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-O-L-纈氨酸酯的三氟乙酸鹽、硫酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氯乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、對甲苯磺酸鹽、馬來酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽等。口服胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-O-L-纈氨酸酯，可以明顯提高胞嘧啶阿拉伯糖苷的口服生物利用度。胞嘧啶阿拉伯糖苷5’-O-L-纈氨酸酯和其藥學上可接受的鹽在臨床上可以口服或靜脈給藥形式治療白血病。
文檔編號A61P35/02GK101423540SQ20081015431
公開日2009年5月6日 申請日期2008年12月22日 優先權日2008年12月22日
發明者郝素華 申請人:郝素華