專利名稱：一種氯諾昔康微球及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種氯諾昔康微球及其制備方法。
背景技術：
骨性關節炎(Osteoarthritis, OA)，亦稱骨關節病、退行性骨關節炎，是關節炎中最常見 的一種疾病，是關節軟骨退化及損害后關節內骨質增生、變形，導致的關節功能改變。OA 是多發于中年以后的慢性、變性關節疾病，在中老年人群中有很高的發病率，其導致的關節 疼痛和功能障礙嚴重影響患者的生活質量。隨著世界老齡化人口的增加，OA的發病率也呈 逐年上升趨勢。
氯諾昔康是昔康類家族的新成員，其作用部位包括中樞神經系統和外周疼痛區，通過多 種機制起作用①在外周，其通過抑制環氧化酶(COX)的活性而抑制炎癥部位前列腺素的 合成，從而減少炎癥區的疼痛介質濃度而發揮鎮痛作用，該藥的COX!: COX2抑制率為0.6， 因此它具有傳統NSAID的良好鎮痛作用；②不抑制5 —脂氧化酶的活性，因此它不抑制白三 烯的合成，也不改變花生四烯酸向5—脂氧化酶的轉變途徑，而花生四烯酸及5—脂氧化酶的 代謝產物可抑制脊髓的疼痛感受器的沖動過程，從而使氯諾昔康具有與類阿片肽類似止痛藥 物相似的鎮痛效果；③同時抑制THP!單核細胞中內毒素誘導的白介素-6 (IL-6)的合成，以 及降低腫瘤壞死因子-a (TNF-a)和腫瘤壞死因子-lp (TNF-lp)的活性；④抑制iNOS (誘 導型NO合成酶)的活性，從而抑制NO的合成。
目前臨床上主要是以普通注射液的方式進行關節腔注射給藥，常規的注射劑關節腔給藥， 存在以下問題藥物半衰期短，長期、頻繁用藥降低病人的順從性，容易產生耐藥性；藥物 迅速滲漏引起全身吸收，存在嚴重的毒副反應，增加了病人的痛苦。近年來以聚合物為材料 通過乳化包囊等分散技術將藥物制備成脂質體、微乳、微球、納米囊、納米粒等微粒分散體 系，用作藥物緩、控釋的研究日益增多。該類制劑數日甚至數月注射一次，可顯著減少用藥 次數，增強藥物的安全性和有效性，提高患者的依從性。所謂微球(microspheres， MS)是一種 以適宜高分子材料為載體包裹或吸附藥物而制成的球形或類球形微粒，粒徑一般在l~50(Him 之間，屬于基質型骨架微粒，可以供注射、口服、滴鼻、皮下埋植或關節腔給藥使用，達到 提高藥物靶向性、延緩或控制藥物釋放、增加制劑穩定性等目的。
利用氯諾昔康治療骨性關節炎，既能達到鎮痛和抗炎的目的又能減少關節炎的破壞，防 止骨變性，修復受損關節。如果將氯諾昔康制成微球，則即可以達到很好的關節炎治療作用，
又可以減少患者的痛苦，增加制劑的順應性。
發明內容
針對上述現有技術，本發明提供了一種具有高度選擇性、作用強而持久、療效高、毒副 作用低的氯諾昔康微球，本發明還提供了該微球的制備方法。
一種氯諾昔康微球，載體為聚乳酸一羥基乙酸共聚物，緩釋藥物為氯諾昔康。 所述微球的平均粒徑為lnm 15^m。 所述微球粒徑的跨度為1-2。 所述氯諾昔康含量占整個微球質量的1% 15%。
一種氯諾昔康微球的制備方法，包括以下步驟將聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于二氯甲 烷，形成有機相；將緩釋藥物混懸于蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中， 提供能量5s 600s，得初乳隨后用注射器將初乳注入外水相中，提供能量20s 600s，得 到W/0/W復乳，攪拌，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸餾水洗滌3 5次， 得到微球，真空干燥12 120h，得到氯諾昔康微球干粉；其中，有機相濃度為5 300mg/mL， 內水相與有機相的體積比為1: 1 1: 80，外水相為明膠溶液或聚乙烯醇溶液，濃度為l 200g/L,外水相與有機相的體積比為1: 1 跳1，攪拌時間為0.5 12小時。
所述能量是通過剪切機、超聲儀、渦旋震蕩儀或攪拌器提供的。
所述有機相濃度為10 40mg/mL，內水相與有機相的體積比為1: 5 1: 20，外水相為明 膠溶液，其濃度為10 40g/L，外水相與有機相的體積比為5: 1 10: 1。通過剪切機提供能 量，剪切速度為8000 20000r/min，攪拌時間為1 4小時。
所述有機相濃度為40mg/mL，內水相與有機相的體積比為1: 5，外水相為明膠溶液，其 濃度為40g/L,外水相與有機相的體積比為5: 1,剪切速度為12000r/min，攪拌時間為3小 時。
本發明的氯諾昔康微球，由于氯諾昔康微球的載體在膝關節內緩慢水解，可不斷釋放出 包裹在微球中的藥物，藥物可高度選擇地作用于膝骨關節炎，使炎癥部位的藥物濃度增高， 作用強而持久，提高了藥物的療效，降低了毒副作用，避免了長期頻繁給藥的缺點，用于治 療關節炎能起到很好的效果。本發明的方法采用乳化溶劑揮發法，簡便可行。
圖1為本發明的氯諾昔康微球的掃描電子顯微鏡照片； 圖2為試驗例3中聚乳酸一羥基乙酸共聚物的DTA圖譜； 圖3為試驗例3中明膠的DTA圖譜；
圖4為試驗例3中氯諾昔康的DTA圖譜； 圖5為試驗例3中樣品D的DTA圖譜； 圖6為試驗例3中樣品E的DTA圖譜。
具體實施例方式
下面結合實施例及試驗例對本發明作進一步的說明，但不以任何形式限制本發明。 實施例l:氯諾昔康微球的制備
將80mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于2mL 二氯甲烷，形成濃度為40mg/mL的有機相； 將4mg緩釋藥物混懸于0.4mL蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪 切lmin，得初乳；隨后用注射器將初乳注入10mL的外水相明膠溶液(濃度40g/L)中，高 速剪切2min，得到W/0/W復乳，攪拌3小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體， 用蒸餾水洗滌3 5次，得到微球，真空干燥72小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速 剪切速度為12000r/min。
實施例2:氯諾昔康微球的制備
將80mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于2mL 二氯甲烷，形成濃度為40mg/mL的有機相； 將4mg緩釋藥物混懸于0.4mL蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪 切lmin，得初乳；隨后用注射器將初乳注入lOmL的外水相聚乙烯醇溶液(濃度40g/L)中， 高速剪切2min，得到W/0/W復乳，攪拌4小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液 體，用蒸餾水洗滌3 5次，得到微球，真空干燥90小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中， 高速剪切速度為16000r/min。
實施例3:氯諾昔康微球的制備
將20mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于2mL 二氯甲烷，形成濃度為10mg/mL的有機相； 將2mg緩釋藥物混懸于0.4mL蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪 切5s，得初乳；隨后用注射器將初乳注入20mL的明膠溶液(濃度20g/L)中，高速剪切lmin， 得到W/0/W復乳，攪拌2小時，使二氯甲烷完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸餾水洗 滌3 5次，得到微球，真空干燥48小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速剪切速度為 8000r/min。
實施例4:氯諾昔康微球的制備
將40mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于2mL 二氯甲烷，形成濃度為20mg/mL的有機相； 將6mg緩釋藥物混懸于0.4mL蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪 切2min，得初乳；隨后用注射器將初乳注入15mL的明膠溶液(濃度30g/L)中，高速剪切
4min，得到W/0/W復乳，攪拌6小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸 餾水洗滌3 5次，得到微球，真空干燥120小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速剪切 速度為20000r/min。
實施例5:氯諾昔康微球的制備
將5mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于lmL二氯甲烷，形成濃度為5mg/mL的有機相；將 4mg緩釋藥物混懸于lmL蒸鎦水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪切 4min，得初乳；隨后用注射器將初乳注入5mL的明膠溶液(濃度10g/L)中，高速剪切8min, 得到W/0/W復乳，攪拌0.5小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸餾水 洗滌3 5次，得到微球，真空干燥12小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速剪切速度 為2000r/min。
實施例6:氯諾昔康微球的制備
將320mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于4mL 二氯甲烷，形成濃度為80mg/mL的有機相； 將8mg緩釋藥物混懸于4mL蒸鎦水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪切 10min，得初乳；隨后用注射器將初乳注入40mL的明膠溶液(濃度80g/L)中，高速剪切10min， 得到W/0/W復乳，攪拌12小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸餾水洗 滌3 5次，得到微球，真空干燥120小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速剪切速度為 40000r/min。
實施例7:氯諾昔康微球的制備
將200mg聚乳酸一羥基乙酸共聚物溶于4mL 二氯甲垸，形成濃度為50mg/mL的有機相； 將8mg緩釋藥物混懸于4mL蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，高速剪切 8min，得初乳；隨后用注射器將初乳注入20mL的明膠溶液(濃度60g/L)中，高速剪切8min， 得到W/0/W復乳，攪拌10小時，使二氯甲垸完全揮發；離心，棄去上層液體，用蒸餾水洗 滌3 5次，得到微球，真空干燥100小時，得到氯諾昔康微球干粉。其中，高速剪切速度為 30000r/min。
試驗例l:氯諾昔康微球載藥量及包封率的測定
采用紫外分光光度儀測定氯諾昔康的含量精密稱取按實施例1中的制備方法制備的微 球20.0mg，置10ml量瓶中，然后加入乙睛2.0ml，超聲至微球完全溶解后，加水稀釋至刻度； 離心(10,000r/min) 10min，取上清液，過濾，376nm處測定吸收度，以lOpg/ml標準溶液作 對照，計算氯諾昔康的含量。
敏率(%)=微球，含量遷 投藥量
弁汰旦/n/、—微球中藥物含量謹 載藥里(%)—~微球重量XlQQ
所得微球的平均包封率》80%，載藥量為1% 15%。 試驗例2:氯諾昔康微球pH值、外觀形態、粒徑大小和分布的測定 按實施例1中的制備方法和參數制備三批氯諾昔康微球，按《中國藥典》2005年版附錄 VlH分別測定其pH，結果三批微球的pH值接近中性，關節腔注射無刺激性，滿足人體生 理需要，適合于關節腔注射。
光學顯微鏡下觀察氯諾昔康微球，并進行拍照，對微球的外觀形態進行評價氯諾昔康 微球外觀為黃色粉末，在光學顯微鏡下觀察呈球形或類球型，無粘連，如圖1所示。
取適量微球用少量醋酸甘油均勻分散于載玻片上，通過光學顯微鏡測定微球的粒徑并記 數。計數500個以上，考察微球的粒徑大小和分布。根據公式dav-Snd/In計算算術平均徑。 以微球的粒徑為橫坐標，每lpm為一單元劃分粒徑范圍，并以此范圍內微球個數除以總個數 得到的微球的分布頻率(％)為縱坐標繪制粒徑分布圖。以中間粒徑D50表示微球大小，以 跨度(D90-D10)/D50作指標，評價微球粒度分布的均勻性。結果微球的平均粒徑為lptn 15pm，跨度為l-2，表明微球粒度分布較均勻。 試驗例3:微球物相分析(DTA)驗證微球的形成
使用CDR-4P差動熱分析儀，以氧化鋁(A1203)為參比，掃描速度l(TOmin-l;進樣 量分別為樣品A (PLGA， 20mg);樣品B (明膠，20mg);樣品C (氯諾昔康，20mg);樣 品D (ABC的物理混合物，20mg);樣品E (Lnxc-PLGA-MS， 20mg)。
結果如圖2 圖6所示，在氯諾昔康的DTA曲線中出現1個明顯的吸熱峰，即氯諾昔康 的熔點特征峰228.6'C;在PLGA的DTA曲線中，在380.7'C和462.3'C處有2個明顯的吸熱 峰；在Lnxc-PLGA-MS的DTA曲線中，藥物的特征峰消失，并且與物理混合物DTA曲線明 顯不同，表明氯諾昔康在微球中并不是以結晶形態存在，而是以非結晶形態存在，形成了新 的物相。Lnxc-PLGA-MS的DTA圖譜與PLGA、明膠、氯諾昔康的DTA圖譜明顯不同的， 進一步證明PLGA微球的形成。
權利要求
1.一種氯諾昔康微球，其特征在于載體為聚乳酸—羥基乙酸共聚物，緩釋藥物為氯諾昔康。
2. 根據權利要求1所述的一種氯諾昔康微球，其特征在于微球的平均粒徑為lpm 15nm。
3. 根據權利要求1所述的一種氯諾昔康微球，其特征在于微球粒徑的跨度為l-2。
4. 根據權利要求1所述的一種氯諾昔康微球，其特征在于所述氯諾昔康含量占整個微球質 量的％ 15%。
5. —種權利要求1所述的一種氯諾昔康微球的制備方法，其特征在于包括以下步驟將聚 乳酸一羥基乙酸共聚物溶于二氯甲垸，形成有機相；將緩釋藥物混懸于蒸餾水中形成內水 相，然后將內水相滴加入有機相中，提供能量5s 600s，得初乳；隨后用注射器將初乳注 入外水相中，提供能量20s 600s，得到W/0/W復乳，攪拌，使二氯甲垸完全揮發；離 心，棄去上層液休，用蒸餾水洗滌3 5次，得到微球，真空干燥12 120h，得到氯諾昔 康微球干粉；其中，有機相濃度為5 300mg/mL，內水相與有機相的體積比為1: 1 1: 80，外水相為明膠溶液或聚乙烯醇溶液，濃度為l 200g/L，外水相與有機相的體積比為 1: 1 100: 1，攪拌時間為0. 5 12小時。
6. 根據權利要求5所述的一種氯諾昔康微球的制備方法，其特征在于所述能量是通過剪切機、超聲儀、渦旋震蕩儀或攪拌器提供的。
7. 根據權利要求5所述的一種氯諾昔康微球的制備方法，其特征在于所述有機相濃度為 10 40mg/mL,內水相與有機相的體積比為1: 5 1: 20，外水相為明膠溶液，其濃度為10 40g/L，外水相與有機相的體積比為5: 1 10: 1;所述能量是通過剪切機獲得，剪切速度為8000 20000r/min，攪拌時間為1 4小時。
8. 根據權利要求7所述的一種氯諾昔康微球的制備方法，其特征在于所述有機相濃度為 40mg/mL，內水相與有機相的體積比為1: 5，明膠溶液濃度為40g/L，外水相與有機相的 體積比為5: 1;所述剪切速度為12000r/min，攪拌時間為3小時。
全文摘要
本發明公開了氯諾昔康微球，載體為聚乳酸—羥基乙酸共聚物，緩釋藥物為氯諾昔康，微球的平均粒徑為1μm～15μm，跨度為1-2，氯諾昔康含量占整個微球質量的1％～15％。其制備方法為將聚乳酸—羥基乙酸共聚物溶于二氯甲烷，形成有機相；將緩釋藥物混懸于蒸餾水中形成內水相，然后將內水相滴加入有機相中，得初乳；隨后用注射器將初乳注入外水相中，得到W/O/W復乳，攪拌，使二氯甲烷完全揮發；離心，棄去上層液體，蒸餾水洗滌，得到微球，真空干燥，即為氯諾昔康微球干粉。本發明的微球提高了藥物的療效，降低了毒副作用，避免了長期頻繁給藥的缺點，用于治療關節炎能起到很好的效果。
文檔編號A61K31/542GK101371842SQ200810140389
公開日2009年2月25日 申請日期2008年10月17日 優先權日2008年10月17日
發明者席延衛, 娜 張, 畢秀麗, 洋 石, 竇明金, 黃桂華 申請人:山東大學