專利名稱：用抗cd20抗體治療累及骨髓的非霍奇金淋巴瘤患者的制作方法
用抗CD20抗體治療累及骨髓的非霍奇金淋巴瘤患者發明領域本發明涉及在放射免疫治療之前降低B細胞淋巴瘤患者骨髓中的癌 性B細胞數的方法，該方法包括施用抗CD20抗體。還提供治療累及相 關骨髓的淋巴瘤患者的聯合治療方法。發明背景B細胞淋巴瘤的方文射免疫治療(radioimmunotherapy )由于累及骨 髓(marrow involvement),即癌性B淋巴細胞對骨髓的浸潤，而受到限制。 這在兩個方面使放射免疫治療復雜化(1)與骨髓中的患病細胞結合的 抗體會遞送一定劑量的輻射到骨髓中，從而引起不必要的骨髓抑制；(2) 正常細胞和祖先細胞在骨髓中的擁擠(marrow crowding)將減弱健康骨 髓儲備，以致患者實際上比沒有骨髓累及的患者更接近第3或4級血細 胞減少。在任一種情況下，當例如采用偶聯同位素如卯Y或mi的B細 胞損耗抗體時，患者都可能對放射免疫治療有較差的耐受性。因此，骨 髓累及程度超過25%的患者一般被排除在放射免疫治療之外。Wiseman和同事發現，臨床參數基線血小板計數和骨髓累及程度， 是接受Y2B8 ( —種與9DY偶聯的抗CD20抗體)治療的低級濾泡型非霍 奇金淋巴瘤患者體內血液毒性的準確預測指標。例如，在不累及骨髓的 患者中出現第4^U6l小板咸少的患者占8% (2/25),而這在有0.1-5% 骨髓累及的患者中占25%(1/4)，在有5-20%骨髓累及的患者中占45% (5/11),在有20-25%骨髓累及的患者中占100%(6/6) (Wiseman等， IDEC-Y2B8放射免疫治療基線的骨髓累及和血小板計數比劑量測定法 是更好的血液毒性預報者。血液(Blood) 1998, 11月增刊，92 (10) : 417a (1721) Poster Board #/ Session: 393-III )。有用的是，開發降低非霍奇金淋巴瘤患者中骨髓的累及程度的方法，以便這些患者可以從新的放射免疫治療中受益，并籍此提供另 一途徑的 療法和減少復發的可能性。本發明提供了這些方法。發明概述本發明涉及治療伴隨有骨髓累及的B細胞淋巴瘤患者的方法，該方 法包括施用單克隆抗體或其片段，以便降低或緩解所述骨髓累及。具體 地，本發明包括在放射免疫治療前降低非霍奇金淋巴瘤患者骨髓中的癌 性B細胞數的方法，其包括給所述患者施用有效量的治療性抗體。這些 方法也可以用于在施用被細胞毒性部分(如毒素)標記的抗體、或任何 可能損害位于浸潤骨髓的靶細胞附近的健康骨髓祖先細胞的免疫治療劑 前，降低骨髓累及。盡管也可以采用針對其它B細胞表面標志的抗體如抗CD19抗體， 但優選采用抗CD20抗體。作為靶標的細胞表面蛋白質應具有主要在癌 性B細胞上表達而且一般不在正常細胞或B細胞前體上表達的特性，并 且當與抗體結合時優選不脫落、內化或調制(modulate )。術語抗體"片段"包括治療性抗體的任何在治療上有效的部分或衍 生物，其能有效地結合目的靶標并產生預期結果。這包括Fabz片段、Fab 片段、Fv片段、域缺失抗體等。優選地，本發明所用抗體是人抗體、嵌 合抗體或人源化抗體，以便該抗體含有能夠刺激人效應子功能(effector functions)的人恒定區結構域。優選的抗體是嵌合抗CD20抗體 Rituximab (美國市場上為Rituxan ,英國市場上為Mabthera )。本發明的最大受益患者將是在采用本公開的免疫治療處理前骨髓累 及程度超過25%的患者。這些患者可以通過采用釋放y射線的同位素(如 mIn)放射性標記的抗體進行預先的診斷顯像來確定。這些患者也可以 通過骨髓活組織檢查來確定。根據Wiseman等的研究，這些患者會由于放射免疫治療而有很高的 機率發生血小板減少。然而，由于在放射免疫治療后發生此不良反應的 才幾率將根據骨髓累及的程度而增加，所以具有任何骨髓累及程度的任何 患者都將受益于本發明，因為他們將由于本〃厶開治療后放射免疫治療誘發血小板減少的危險性降低而得益。本發明所用劑量可以隨患者、骨髓累及的程度和所用抗體而改變。嵌合抗CD20抗體如Rituximab可以按每周至少約50 mg/m2的劑量持續 至少4周給藥。優選的劑量給藥方案是每周約375mg/m2，持續4周。由于本發明方法的目的在于降低預備接受放射免疫治療的淋巴瘤患 者中的骨髓累及，所以本發明的治療方法自然包括在骨髓凈化后采用放 射性標記抗體進行治療。該放射性標記抗體也可以指向通常出現在癌細 胞而非正常細胞上的任何B細胞表面標志。優選地，該放射性標記抗體 是抗CD20抗體。優選的放射性標記是釋放P射線的同位素如9GY或1311，但也可以采 用任何放射性同位素，只要它可以有效地與該抗體偶聯、具有相對短的 衰變射程(decay range )、并能成功地殺傷附近細胞(即它所把向的細胞) 即可。優選的放射性標記抗CD20抗體是Y2B8。患者一般應在損耗抗體施用后一周內接受治療，只要他們沒有嚴重 的血細胞減少(如血小板<150，000 )即可。如果該患者在損耗抗體治療 后出現血細胞減少，則應允許在放射免疫治療前進行恢復，例如最低 AGC >1000或血小板>150，000。在允許外周血和/或骨髓中細胞恢復的情 況下，可以直接在免疫治療前再次施用損耗抗體。例如，可以直接在免 疫治療前或與之重疊的時期按約250mg/m2的量持續大約2周施用此第二 劑量。放射性標記抗體的劑量也將隨患者、抗體的特異性、半衰期、穩定 性等、當然還有疾病的程度而改變。》丈射性標記抗CD20抗體如YAB8 按約0.1 - 0.5 mCi/kg的劑量施用。應當明了 ，本文公開的治療方法可以與其它已知的治療方法如化療 或放療聯合。為了在放射治療后實現自體骨髓或干細胞移植，可以在采 用抗CD20抗體治療后、采用所述》文射性標記抗體治療前，從所述患者 收集骨髓或外周血干細胞。為了在損耗抗體或放射性標記抗體施用前上調CD20或其它耙蛋白 質在癌性B細胞表面上的表達，采用細胞因子治療患者可能也是有用的。對于CD20的上調，可以用于此目的的細胞因子有IL-4、 GM-CSF和 TNF-a。細胞因子也可以在損耗抗體或放射性抗體施用的同時、之前或 之后施用，以便刺激免疫效應子功能。用于此目的的細胞因子包括a干 擾素、GM-CSF和G-CSF。可以采用化學療法方案補充本文公開的治療方法，并且化學療法方 案可以與所述放射性抗體的施用同時地或相繼地按4壬4可順序進行。該化 學療法方案可以選自CHOP、 ICE、米托蒽醌(MUozantrone )、阿糖胞 普、DVP、 ATRA、伊達比星、hoelzer化學療法方案、La La化學療法 方案、ABVD、 CEOP、 2-CdA、 FLAG & IDA (聯合或不聯合隨后的 G-CSF治療)、VAD、 M&P、 C-Weekly、 ABCM、 MOPP和DHAP。 優選的化學療法方案是CHOP。本發明方法可以用于治療各種B細胞淋巴瘤，但在所述B細胞淋巴 瘤是非霍奇金淋巴瘤(NHL)時尤其有用。Rituximab已經,皮批準用于治療 4氐分級濾泡性NHL，但本發明人驚奇地發現Rituximab對于中分級和高 分級的NHL(包括大體積疾病(bulkydisease)在內)也是有益的。因此，可 以通過本發明方法治療的淋巴瘤包括低分級/濾泡性非霍奇金淋巴瘤 (NHL)(low grade/ follicular non醒Hodgkin，s lymphoma)、小淋巴細胞(SL) NHL 、中分級/濾泡性NHL(intermediate grade/ follicular NHL)、中分級 彌漫性NHL(intermediate grade diffuse NHL)、 'lt性淋巴細胞白血病 (CLL)、高分級免疫母細胞性NHL(high grade immunoblasticNHL)、高 分級淋巴母細胞性NHL(Wgh grade lymphoblastic NHL)、高分級小無裂 細胞NHL(high grade small nondeaved cell NHL)、 大體積疾病 NHL(bulky disease NHL)、套細胞淋巴瘤、AIDS相關淋巴瘤和瓦爾登斯 特倫巨球蛋白血癥，只要是這些淋巴瘤伴隨有使放射免疫治療的可用性 復雜化的骨髓累及即可。現在我們通過以下數據舉例說明示例性治療條件。復發性或頑固性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的放射免疫治療Y2B8的I/II期 9。Y試驗此I/II期試驗包括58名復發性或頑固性NHL患者，平均年齡60歲、 43%的骨髓累及、60。/。大體積損傷〉5cm (White等，第七屆國際惡性淋 巴瘤會議上的海報展示，Lugano，瑞士。腫瘤學年刊(Annals of Oncology),增刊3 (1999) 10:64 (215))。所有患者在接受5mCi mIn標記 的抗體In2B8后均通過Y攝像測量及系列尿和血液采樣進行了劑量測 定。在顯像和治療前，采用Rituximab清潔外周B細胞并優化放射性標 記抗體的分布。 一周后，給第2和3組的患者施用Y2B8 ( 0.2、 0.3或0.4 mCi/kg)。未進行骨髓或干細胞的收集。結果MTD為0.4 mCi/kg (對于血小板輕孩i減少的患者為0.3 mCi/kg )。大 體上不良反應是血液性的、暫時的和可逆的。整體而言，5名患者(10%) 出現最低血小板計數<10，000/mm3 ，而14名患者(28%)出現最低 AGC<500。 3名患者(6%)在一年的觀察期中出現需要進行住院治療的感 染。僅2。/。的患者出現HAMA/HACA。平均血清免疫球蛋白在一年的觀 察期內保持正常。在所有的組織學研究中ORR為67% (26% CR和41 % PR)，而對于患有低級NHL的患者為82%。按Kaplan Meier的方法 學，對于反應者平均TTP為12.9+個月，反應的持續時間為11.7+個月。 在患有基線脾腫大的患者中，4/8 (50%)患者有反應，相對地，在無脾腫 大的患者中為74% (29/39) (p= 0.1761)。兩個臨床參數，即基線活組 織檢查中的基線血小板計數和骨髓累及程度，比劑量測定參數更好地預 測了血液毒性的嚴重性。
權利要求
1. 治療伴隨有骨髓累及的B細胞淋巴瘤患者的方法，其包括施用抗CD20抗體或其片段，以便降低或緩解所述骨髓累及。
2. 權利要求l的方法，其中所述骨髓累及最初超過25%。
3. 權利要求2的方法，其中所述治療可將所述骨髓累及降低至不到 25 % 。
4. 權利要求1的方法，其中所述抗CD20抗體是人抗體、嵌合抗體 或人源化抗體。
5. 權利要求4的方法，其中所述抗CD20抗體是嵌合抗CD20抗體。
6. 權利要求5的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體是Rituximab 。
7. 權利要求6的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 50mg/m2的劑量施用至少4周。
8. 權利要求7的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 375mg/m2的劑量施用4周。
9. 權利要求l的方法，其還包括隨后施用放射性標記抗體。
10. 權利要求9的方法，其中所述放射性標記抗體是抗CD20抗體。
11. 權利要求10的方法，其中所述放射性標記抗CD20抗體是Y2B8。
12. 權利要求11的方法，其中所述放射性標記抗CD20抗體按約0. 1 -0. 5 mCi/kg的劑量施用。
13. 權利要求9的方法，其中與所述放射性標記抗體同時或相繼地以 任何順序再次施用抗CD20抗體。
14. 權利要求13的方法，其中按約250mg/m2的劑量給予至少一個劑 量的所述再次施用的抗CD20抗體。
15. 權利要求9的方法，其中在采用抗CD20抗體治療之后、采用所 述放射性標記抗體治療之前從所述患者收集骨髓或外周血干細胞。
16. 權利要求1的方法，其中在施用所述抗CD20抗體之前通過施用 至少一種細胞因子使癌性B細胞表面上CD20的表達上調。
17. 權利要求16的方法，其中所迷細胞因子選自IL-4、 GM-CSF和TNF- a 。
18. 權利要求9的方法，其還包括與所迷放射性標記抗體的施用同時 或相繼地以任何順序采用化學療法治療。
19. 權利要求19的方法，其中所述化學療法選自CHOP、 ICE、米托 蒽醌、阿糖胞苷、DVP、 ATRA、伊達比星、hoelzer化學療法、La La化 學療法、ABVD、 CEOP、 2-CdA、 FLAG & IDA (聯合或不聯合隨后的G-CSF 治療)、VAD、 M & P、 C-Weekly、 ABCM、 MOPP和DHAP。
20. 權利要求19的方法，其中所述化學療法是CHOP。
21. 權利要求1的方法，其還包括與所述抗CD20抗體同時或相繼地以任何順序施用至少 一種細胞因子。
22. 權利要求22的方法，其中所述至少一種細胞因子選自a干擾素、 GM-CSF和G-CSF。
23. 權利要求1的方法，其中所述B細胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤 (NHL)。
24. 權利要求23的方法，其中所述NHL選自低級/濾泡型非霍奇金淋 巴瘤(NHL)、小淋巴細胞(SL) NHL、中等級別/濾泡型NHL、中等級別彌 散性NHL、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、高級別免疫母細胞性NHL、高級 別淋巴母細胞性NHL、高級別小無裂細胞NHL、大體積疾病NHL、套細胞 淋巴瘤、AIDS相關淋巴瘤和瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥。
25. 在放射免疫治療之前降低非霍奇金淋巴瘤患者骨髓內癌性B細胞 數的方法，其包括給所迷患者施用有效量的抗CD20抗體。
26. 權利要求25的方法，其中所述抗CD20抗體是人抗體、嵌合抗體 或人源化抗體。
27. 權利要求26的方法，其中所述抗體是嵌合抗體。
28. 權利要求27的方法，其中所述嵌合抗體是Rituximab 。
29. 權利要求25的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 50mg/in2的劑量施用至少4周。
30. 權利要求29的方法，其中所述嵌合抗CD20抗體按每周至少約 375mg/m2的劑量施用4周。
全文摘要
本發明涉及在放射免疫治療前通過施用靶向癌性B細胞的單克隆抗體降低B細胞淋巴瘤患者中的骨髓累及的方法。
文檔編號A61K38/00GK101259270SQ200810092138
公開日2008年9月10日 申請日期2000年7月25日 優先權日1999年8月11日
發明者W·H·拉斯泰特 申請人:拜奧根Idec公司