專利名稱：糖肽合劑在制備腫瘤輔助治療藥物、保健食品中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種糖肽合劑及其新用途，具體來說是從海洋魚類中提取的海洋低聚肽與來源 于真菌或植物的生物活性多糖的聯合制劑在制備腫瘤輔助治療藥物、保健食品中的用途。屬 醫藥、食品保健領域。
背景技術：
最新的研究顯示，我國59種惡性腫瘤發病率20年間升高約50% ! 2006年衛生部統計數 據顯示惡性腫瘤目前已經成為中國城市和農村居民的第一殺手！目前化療和放療是除外科手 術以外，治療實體腫瘤的最有效方法。但是化、放療在治療腫瘤的同時，也對正常的機體組 織細胞有一定的殺傷作用，特別是對增殖較快的組織細胞，如造血免疫組織細胞、消化道粘 膜上皮細胞、性腺組織細胞等。化療對腫瘤組織和正常組織的作用主要包括影響核酸代謝， 直接破壞DNA的結構功能與復制，造成組織細胞mRNA的轉錄和翻譯、紡錘絲聚合或解聚 功能的障礙，破壞生物膜，阻斷細胞信號傳導和增殖調控等。化療除了對骨髓的抑制作用外， 消化道粘膜上皮也是較早受累的組織。因此放化療患者常常出現惡心、嘔吐、厭食和腹瀉， 有時甚至出現便血，嚴重影響病人的攝食和吸收，加重營養不良的發生。
腫瘤病人在其本身癌細胞代謝異常增生消耗大量能源的情況下，放化療導致的食欲不振、 惡心嘔吐和組織消耗使本來就處于能量不足的機體更加速向嚴重營養不良發展，機體綜合耐 受能力下降。IH常機體組織細胞包括腫瘤細胞修復時對營養物質的需求增加，同時由于消化 道攝入、吸收減少，病人的營養狀況惡化，機體免疫力降低，產生與分解代謝相關的一系列 臨床病理過程體重下降(由其是蛋白組織分解造成的瘦體重下降)、肌力下降、活動能力降 低、院內感染增加、傷口愈合和組織修復延遲等。這些病理過程反過來又嚴重影響了機體對 腫瘤藥物的耐受性，成為嚴重影響腫瘤放化療愚者生存率的重要因素。國外資料顯示，在醫 院接受放化療的患者，至少有20% 40%是死于嚴重營養不良而不是腫瘤本身。由此可見， 腫瘤患者放化療期間的營養支持十分必要。
氮平衡是接受化、放療病人營養支持中需要重點考慮的內容。絕大多數接受化、放療的
腫瘤病人都存在負氮平衡，持續性的負氮平衡會進一歩加重藥物的副反應，降低機體免疫力，
這樣造成惡性循環，嚴重影響腫瘤病人的生存率。動物實驗也證明，機體蛋白質消耗可增加
化療藥物的毒性和致死性，增加飲食蛋白的動物比常規或低蛋白飲食的動物，化療藥物的副反應減少。然而國內外研究顯示，很多化、放療病人即使接受了高蛋白、高熱量的飲食，在 治療期間仍有明顯的體重降低和營養不良，這往往與飲食中蛋白質的吸收利用率較低有關。 因而，探索更易消化吸收，生物利用率高的蛋白補充產品具有十分重要的現實意義！
肽與蛋白質都是氨基酸以酰胺鍵互相連接在一起形成的化合物，在結構上，肽處于氨基 酸和蛋白質的中間位置，但它具有氨基酸與蛋白質所不能替代的功能。長期以來，人們僅僅 把食物蛋白質當作一種營養豐富的成分，認為蛋白質只有水解成游離氨基酸后才能被吸收。 但是近年來的研究發現，蛋白質經消化道酶促水解后，主要以IO個以下氨基酸組成的寡肽形 式被吸收。大量研究證明，寡肽與氨基酸在小腸的吸收載體不同，寡肽的吸收效率更高，同 時寡肽的滲透壓比氨基酸低。因此，蛋白質以多肽的形式被吸收，既避免了氨基酸之間的吸 收競爭，又能減少高滲透壓對人體產生的不良影響，且吸收的寡肽能直接參與蛋白質的合成， 因此提高了機體對蛋白質的利用率，同時具有保護胃粘膜，抗潰瘍形成的作用。在氨基酸運 輸系統功能出現障礙的情況下，攝入寡肽也能夠獲得很好的吸收效果。
除作為優質氮源外，多年的研究已經證實，所有細胞都能合成多肽物質，這些肽類物質 參與機體復雜的生理活動，涉及到分子識別、信號轉導、細胞分化及個體發育等很多領域， 具有免疫調節、抗菌、抗腫瘤、保護心血管、抗氧化、抗衰老等作用。機體免疫功能低下是 腫瘤得以發生發展的因素之一，腫瘤一旦發生后往往又反作用于機體免疫功能系統，致使免 疫功能紊亂或低下。因此，提高機體免疫功能對腫瘤治療以及術后存活率都具有重要意義。 研究表明，大多數具有抗腫瘤活性的海洋活性蛋白和肽類可通過增強免疫細胞(如NK)的 活性和/或誘導細胞因子的分泌等不同方式來提高機體的免疫功能，是較好的生物反應調節 劑。
Takuma等從日本產蟲下夷扇貝分離出具有強抑制腫瘤活性的糖蛋白，并用L5178Y淋巴細 胞作為靶細胞對抑瘤機制進行過探索，證明其抑瘤作用是通過激活巨噬細胞產生的。1996年 Kobayashi等研究發現海綿中的多肽(AGL-ll)能明顯延長荷B16瘤小鼠的壽命，正常小鼠及 荷B16瘤小鼠體內試驗顯示AGL-11還能明顯提高NK細胞的活性。國內研究發現，以每天20mg 南海長牡蠣的提取液，連續10d胃詞荷HAC鼠肝癌的Balb/c小鼠，小鼠的各項免疫指標均明 顯回升，包括T細胞數、T輔助細胞百分比、絲裂原誘發的淋巴細胞轉化強度和NK細胞的殺 傷活性，瘤重顯著減輕，小鼠存活期延長。冬青等也報道牡蠣水提取物能夠提高正常鼠外周 血白細胞的總數、總T細胞百分比、T輔助細胞百分比，并使得T輔助細胞與T抑制細胞比值 明顯增高，NK細胞活性增強。對有絲分裂原引起的T淋巴細胞增殖及B淋巴細胞增殖也有明 顯的增強作用，提示了牡蠣提取物對整個免疫系統均有正向調節作用。此外，李鵬等發現僧 帽牡蠣天然活性多肽Bpo-l (高分子部分)可有效抑制人胃癌BGC-823細胞的增殖活動，細胞分裂指數下降。低分子量部分(5.3KD)對人肺腺癌A549生長有抑制作用，使用O.l mg/mL牡 蠣低分子量活性物質對A549生長抑制率為62.2%，細胞分裂指數下降28.95%。這說明牡蠣中 的抗癌活性成分多樣，除了增強免疫抗癌的多糖和糖蛋白以外，還存在直接殺傷癌細胞的蛋 白組分。顧謙群等發現，櫛孔扇貝糖蛋白能顯著抑制S180實體瘤瘤重，并能提高小鼠腹腔巨 噬細胞的吞噬率和NK細胞的活性，增加小鼠免疫器官重量。進一歩的實驗揭示梓孔扇貝糖蛋 白對腫瘤的抑制作用不是直接的細胞毒作用，而是通過增強荷瘤鼠的免疫功能而產生的。
生物活性多糖是指一類對人體具有某種特殊生物學功能的高分子碳水化合物聚合體。它 們廣泛存在于自然界中的動物、植物、微生物和海洋生物等所有生物體內，資源豐富。近年 來，大量研究顯示生物活性多糖具有抗腫瘤的作用，其主要的作用機制有以下幾個方面(1) 增強和調節機體免疫功能。通過增強免疫器官、細胞和體液免疫功能，促進細胞因子釋放， 活化補體等特異性和非特異性免疫功能等多途徑、多層面發揮強大的機體整體免疫網絡功能， 間接殺死腫瘤細胞而實現抗腫瘤作用；(2)抗氧化與抗自由基損傷。最近，越來越多的研究 表明活性氧類(ROS)在電離輻射引起的損傷中起到重要的調節作用。ROS造成DNA鏈斷 裂，脂質過氧化和蛋白質修飾。電離輻射擊中靶分子后，靶分子發生電離與繼發產生自由基， 從而導致生物膜，DNA大分子、蛋白質以及一系列小分子的糖脂損傷，最終導致多種自由基 對細胞的功能和結構造成損傷，從而表現為各種病理癥狀。許多研究者認為，生物活性多糖 能夠清除輻射產生的H+、 OH，、 &02等自由基，即消除輻射的間接作用以防止其對機體的損 傷；(3)抗突變與恢復細胞間通訊。突變是腫瘤發生的前提，研究顯示生物活性多糖可以通 過提高肝臟中谷胱肝肽轉移酶和細胞色素P-450酶活性、增強DNA切除修復等，發揮抑制 化學致突變物或輻射引起的致突變和致癌作用。此外生物活性多糖還可以通過改變細胞形態， 使癌細胞DNA缺損和恢復細胞間通訊來產生抗腫瘤作用；(4)誘導癌細胞分化與凋亡。生 物活性多糖可通過開放細胞膜通道和促進細胞內鈣釋放兩條途徑增加癌細胞內012+濃度，啟 動癌細胞凋亡機制，并可以阻止SGC27卯人胃癌細胞內G0/G1期進入S期，發生Gl期阻 滯，升高癌細胞凋亡指數及誘導腫瘤細胞野生型P53水平的增加而抗癌，還可以通過影響腫 瘤基因、抑癌基因、細胞因子的表達或通過激活細胞凋亡中的關鍵蛋白酶Caspase-3來誘導癌 細胞分化和凋亡發揮抗腫瘤作用；(5)改變細胞膜流動性及細胞膜泵的活性。腫瘤的發生通 常伴隨著細胞膜泵的活性增高，致使細胞正常代謝和生理功能發生紊亂失調，生物活性多糖 能明顯抑制腫瘤細胞膜泵的活性，穩定細胞周圍的正常生理環境而發揮抗腫瘤作用。(6)其 它，靈芝、枸杞、茯苓等生物活性多糖具有細胞毒性，可直接殺死腫瘤細胞。
20世紀80年代末，古巴、加拿大和美國學者就先后用鯊魚骨多糖藥物制劑在臨床上用 于治療晚期癌癥，并取得了良好的效果。美國FDA已批準灰樹花多糖作為治療晚期乳腺癌和前列腺癌的有效制劑直接進入II期臨床試驗。將海藻多糖與5-氟尿嘧啶等配制成復方抗癌 制劑，臨床應用結果顯示，與單用5-氟尿嘧啶相比，復方制劑的抗癌效果顯著增強，而毒性 明顯降低。目前我國已正式批準上市、在臨床上用于抗腫瘤的多糖類藥品以菌藻類多糖為主, 品種有靈芝多糖、香菇多糖、豬苓多糖、人參多糖、海藻多糖等。還有一些生物活性多糖， 如銀耳多糖、冬蟲夏草多糖、猴菇菌多糖、昆布多糖、剌五加多糖等仍在進一歩研究之中。
由此看來，國內外對生物活性多糖的抗腫瘤作用研究已取得了令人矚目的成就，許多抗 腫瘤生物活性多糖藥品和保健食品已相繼問世，經濟效益十分顯著。但目前對于海洋生物活 性肽與生物活性多糖聯合應用在改善腫瘤放化療患者營養狀況和免疫功能方面的研究還很 少，如果通過開發藥物、保健食品及食品達到改善腫瘤放化療患者的營養狀況和免疫功能， 改善腫瘤患者的生活質量之功效，既經濟又實用，將對我國的衛生保健行業帶來很大的前景。
發明內容
本發明的目的是提供一種糖肽合劑及其在制備改善腫瘤放化療患者的營養狀況和免疫功 能藥物、保健食品或食品中的用途。
本發明提供的糖肽合劑，是由海洋低聚肽與生物活性多糖配比而成。
其中所述的海洋低聚肽是以海洋魚類的魚皮、魚肉或魚骨為主要原料，經酶法水解生產 的、能被三氯乙酸溶解、相對分子質量在1000以下的一組低分子量的寡肽混合物，包括海洋 膠原肽(來源于魚皮)、海洋蛋白肽(來源于魚肉)和海洋骨源肽(來源于魚骨)，具有容易 吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。
其中所述的生物活性多糖包括香菇多糖、靈芝多糖、豬苓多糖、人參多糖、枸杞多糖、 海藻多糖。
其中所述的藥物、保健食品為粉劑、顆粒劑、膠囊、片劑、丸劑、口服液。 其中所述的食品為淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品。
具體實施方案
下面結合具體實施方案對本發明作進一歩的說明，這些實例應被理解為僅是舉例說明，
而非以任何方式限制本發明的范圍。
實施例1:海洋膠原肽和香菇多糖合劑改善荷瘤小鼠免疫功能的作用
健康清潔級雄性ICR小鼠60只，體重20.0土2.0g，由北京大學醫學部實驗動物中心提供，
清潔級動物房飼養，飼養環境溫度25"C，濕度60。/。RH。小鼠適應性飼養3天后，制備S180
移植瘤模型，實驗方法和療效評價均按抗癌藥物研究與實驗技術指導原則進行。將荷瘤小鼠稱重后隨機分成5組，即生理鹽水組、陽性對照組(5-氟尿嘧啶)、海洋膠原肽和香菇多糖合 劑(以下簡稱糖肽合劑)0.075、 0.15、 0.45g/kgbw組，每組12只小鼠。本實驗所用糖肽合劑 中海洋膠原肽與香菇多糖的配比為20比1。各組小鼠分別用生理鹽水和高、中、低濃度糖肽 合劑溶液灌胃，每Fi 1次，每次0.2ml/20g體重，陽性對照組以5-氟尿嘧啶(150mg/kg體重)， 連續14d，第15日處死動物，剝瘤、稱重、計算抑瘤率抑瘤率(％)=(1-給藥組平均瘤重/對 照組平均瘤重)X100M。固定實體瘤組織標本作石蠟切片，HE染色，光鏡組織學觀察。同時 制備各組小鼠脾細胞懸液，按照保健食品檢驗與評價技術規范的方法測定荷瘤小鼠T淋巴細 胞增殖能力和NK細胞活性。
實驗結束時糖肽合劑各劑量組均對S180荷瘤小鼠的腫瘤生長產生了不同程度的抑制作 用，病理組織學檢査顯示糖肽合劑各劑量組荷瘤小鼠腫瘤組織中有異型細胞數量較生理鹽水 組明顯減少，且大部分細胞出現變性、壞死。糖肽合劑高、中劑量組脾T淋巴細胞增殖能力 明顯高于生理鹽水組，高劑量組NK細胞活性明顯高于生理鹽水組，差異均有顯著性(P0.05)。
結果顯示，本發明制劑具有抑制腫瘤生長和增強荷瘤小鼠免疫力的作用。
表1糖肽合劑對荷瘤小鼠腫瘤S180肉瘤生長的影響
組別
齊ll 量(mg/kg)
重(g) 抑瘤率(％)
生理鹽水組
5-氟尿嘧啶組
糖肽合劑低劑量組
糖肽合劑中劑量組
糖肽合劑高劑量組
150 75 150 450
1.96±0.19 0.99±0.10* 1.47±0.18* 1.3410.18* 1.30±0.22*
52.6
28.3 31.9
38.4
;生理鹽水組比較，差異有顯著件(PO.05)
表2糖肽合劑對荷瘤小鼠脾T淋巴細胞增殖和NK細胞活性的影響
組別
劑量(mg/kg)
脾T淋巴細胞 增殖能力
NK細胞活性(。/。)
生理鹽水組
5-氟尿嘧啶組
糖肽合劑低劑量組
糖肽合劑中劑量組
糖肽合劑高劑量組
150 75 150 450
0.36±0.09 0.51±0.08* 0.32±0.08 0.45±0.10* 0.48±0.09*
27.7±6.0 33.5±5.4* 25.3±5.3 28.1±5.8 33.2±5.1*
:與生理鹽水組比較，差異有顯著性(P<0.05)
實施例2:海洋膠原肽和香燕多糖合劑改善腫瘤放化療患者營養狀況的觀察 于2006 2007年收集61例經臨床及病理學確診，且無放化療禁忌癥惡性腫瘤患者作為 研究對象，年齡30 66歲，其中男性32例，女29例。其中肺癌18例、胃癌20例、食管 癌15例、結腸癌8例。將患者按照體重及腫瘤類型分為治療組(31例)和對照組(30例)，治療組病例在放化療療程開始前一周服用海洋膠原肽和香菇多糖合劑(以下簡稱糖肽合劑， 其中海洋膠原肽與香菇多糖配比為20比1) 10g/次，2次/日，口服，2個療程后統計療效。 對照組病理只接受常規放化療治療。記錄治療前和治療后患者的癥狀、體征、臨床數據及病 人的精神狀態、主觀感覺等，以卡氏計分法評估患者的體力狀況；記錄治療前后患者的體重 變化并測定治療前后患者血清前白蛋白和白蛋白水平，以評估患者的營養狀況。
治療前兩組病例體力狀況、體重和血清前白蛋白及白蛋白水平沒有明顯差異，治療后對 照組卡氏評分提高者9例，穩定者11例，下降者10例；治療組卡氏評分提高者13例，穩定 者14例，下降者4例；經統計分析，兩組之間卡氏評分的變化具有顯著差異，表明糖肽合劑 具有改善患者體力狀況的作用。治療后治療組平均體重及血清白蛋白水平明顯高于對照組， 差異具有統計學意義。
上述結果顯示，糖肽合劑具有改善腫瘤放化療患者營養狀況的作用。
表3 糖肽合劑對腫瘤放化療患者體重及血清前白蛋白和白蛋白水平的影響
組.別體重(kg)前白蛋白(g/L)(g/L)
治療前 治療后治療前 治療后治療前治療后
對照組50.4±6.6 49.8±5.3213.9±15.4 188.6±13.034.8±0.733.4±1.2
糖肽合劑治療組50.0±6.6 53.0±6.4*213.6±16.0 191.9±11.834.6±0.834.7±0.8*
*:與對照組比較，差異有顯著性(PO.05)
8
權利要求
1、一種糖肽合劑產品，是由海洋低聚肽與生物活性多糖配比而成。
2、 權利要求1所述的糖肽合劑產品在制備改善腫瘤放化療患者的營養狀況和免疫功能藥物、 保健食品或食品中的用途。
3、 如權利要求l，其中所述的海洋低聚肽是以海洋魚類的魚皮、魚肉或魚骨為主要原料，經 酶法水解生產的、能被三氯乙酸溶解、相對分子質量在1000以下的一組低分子量的寡肽混合 物，具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。
4、 如權利要求l，其中所述的生物活性多糖包括香菇多糖、靈芝多糖、豬苓多糖、人參多糖、 枸杞多糖、海藻多糖。
5、 如權利要求2，其中所述的藥物、保健食品為粉劑、顆粒劑、膠囊、片劑、丸劑、口服液。
6、 如權利要求2，其中所述的食品為淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品。
全文摘要
本發明涉及一種糖肽合劑產品及其在制備改善腫瘤放化療患者的營養狀況和免疫功能藥物、保健食品或食品中的用途。糖肽合劑是由海洋低聚肽與生物活性多糖按照一定比例配比而成。其中的海洋低聚肽是以海洋魚類的魚皮、魚肉或魚骨為主要原料，經酶法水解生產的、能被三氯乙酸溶解、相對分子質量在1000以下的一組低分子量的寡肽混合物，具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。其中的生物活性多糖包括香菇多糖、靈芝多糖、豬苓多糖、人參多糖、枸杞多糖、海藻多糖。經動物實驗和臨床觀察證實，海洋低聚肽和生物活性多糖配比而成的糖肽合劑具有改善荷瘤小鼠的免疫功能和改善腫瘤放化療患者的營養狀況的作用。
文檔編號A61K9/20GK101544686SQ20081008940
公開日2009年9月30日 申請日期2008年3月28日 優先權日2008年3月28日
發明者勇 李, 王軍波 申請人:李 勇;王軍波