專利名稱：：一種黃豆苷元粉針劑及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種黃豆苷元藥物，特別是涉及黃豆苷元藥物的新劑型及其制備方法。
背景技術：
：冠心病、心絞痛是臨床常見且具有危害性的疾病，近年來，心腦血管的發(fā)病率明顯增多，己經(jīng)成為威脅人類健康的第一大殺手，被世界醫(yī)學界稱為"時代瘟疫"。我國每年因心腦血管疾病死亡的人數(shù)就達到了260萬，平均每小時死亡約300人，特別是發(fā)病和死亡的年齡也R益呈現(xiàn)年輕化趨勢。據(jù)資料分析，現(xiàn)在全球有近四分之一人口為心腦血管及相關疾病所威脅，有三分之一人的人生為心腦血管疾病陰影所籠罩，最后有五分之一的人口死于心腦血管相關疾病。因此，與心腦血管疾病的抗爭不分區(qū)域、人種，已成為全人類的挑戰(zhàn)之一。而根據(jù)世界衛(wèi)生組織預測，至2020年，非傳染性疾病將占我國死亡原因的79%，其中心腦血管疾病占首位。這不得不引起我們的重視。黃豆苷元(Daidzein)為豆科葛屬植物根中的主要有效成分之一，其結構式為最初，黃豆苷元用于治療高血壓、冠心病、腦血栓、眩暈癥等，后來又發(fā)現(xiàn)其具有對抗D-半乳糖的致老化作用，能增強學習記憶能力，用于防治腦缺血及治療腦損傷。另外，黃豆苷元具有雌激素樣作用，治療絕經(jīng)后女性心血管疾病，降低乳腺癌、子宮內膜癌等。但是黃豆苷元在水中溶解度較低，其溶解度僅為lmg/ml，致使其口服吸收差，生物利用度低，在一定程度上限制了其臨床療效的發(fā)揮。由于黃豆苷元的溶解度低的特點，使其劑型通常為片劑和膠囊劑。為保證療效，近年來國家標準在片劑、膠囊劑的檢查項目中都增加了以水為溶劑的溶出度檢査，且限度為標示量的70%，增加了片劑和膠囊劑生產的難度。本發(fā)明的目的在于提供一種生物利用率高的黃豆苷元粉針劑。本發(fā)明的另一目的是提供這種黃豆苷元粉針劑的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種黃豆苷元粉針劑，其特征在于它是由黃豆苷元、
發(fā)明內容藥用增溶劑和支架劑按重量份比l:616:320配比而制成的粉針劑。其中所述增溶劑為聚山梨酯80或/和聚乙烯吡咯垸酮K30或/和羥丙基(3環(huán)糊精;所述支架劑為泊洛沙姆188或/和甘露醇。上述溶劑優(yōu)選為聚山梨酯80，支架劑優(yōu)選為泊洛沙姆188。上述聚山梨酯80分子量為1310，結構式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>泊洛沙姆(Poloxamer)為聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，商品名為普流尼克(Pluronic)。這是一類新型的高分子非離子表面活性劑。其通式為HO(C2H40)a(C3H60)b(C2H40)CH。其中a和c為2130，b為1567。含聚氧乙烯為81.8±1.9%。本發(fā)明之所以加入支架劑是為了防止藥物在冷凍干燥中抽真空時與水蒸汽一起分散，或干后變成絨毛狀的松散結構，以改善其外觀，維持原體積，使其不塌陷、不鈹縮、表面光潔，且色澤均勻。本發(fā)明的另一目的是這樣實現(xiàn)的上述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于它是按以下步驟制成-a、稱取所述量的增溶劑，加入注射用水，使之溶解；b、稱取所述量的黃豆苷元、支架劑，加入乙醇使之溶解；c、將a、b步驟所得的兩種溶液混勻，置5080。C下減壓揮去溶劑乙醇；加入注射用水至處方量；d、滅菌將上述配制的溶液進行常溫過濾滅菌；e、冷凍干燥進行冷凍干燥得成品。上述泊洛沙姆188分子量為76809510，結構式:上述a歩驟中每1克增溶劑加入418毫升注射用水；b歩驟每1克黃豆苷元加入90110毫升乙醇。為了達到更好的溶解效果，a步驟的溶解的方法可以采用超聲5~30分鐘使之溶解；或者采用在80'C以下水浴中加熱至完全溶解。為了使用方便，在d步驟中滅菌后進行分裝，每支粉針劑為5毫升，含有活性成份黃豆苷元0.01g0.2g。上述冷凍干燥是在低溫低壓條件下，將冷凍溶液從冷凍狀態(tài)下不經(jīng)液態(tài)直接升華除去水分所完成的干燥，其可用于解決水針劑貯存過程中質量不穩(wěn)定的問題(如有效成分易降解、析出沉淀等)。其中e步驟中所述的將分裝好的樣品置于凍干機中冷凍干燥，其具體操作優(yōu)選如下歩驟預凍凍干機板層溫度-50。C-3(TC，預凍樣品4h14h;冷阱溫度-60。C-40。C;一次干燥，除去游離水分真空條件下，板層溫度梯度為-50"0°(:均勻梯度升溫，升溫速率為515°C/h;并-30。C-20。C保溫3h8h，-20°<:-101:保溫9h15h，-l(TC保溫10h40h;冷阱溫度-50。C-40。C;二次干燥，除去結合水真空條件下，板層溫度梯度為0'C2(TC均勻梯度升溫，升溫速率為1020°C/h;并在20。C保溫3h8h;2(TC30。C均勻梯度升溫，升溫速率為10°C/h;3(TC保溫2h6h;冷阱溫度-50。C-40。C。為了更好地理解本發(fā)明的實質，下面將用發(fā)明人在發(fā)明過程中的各個環(huán)節(jié)的試驗及結果來清楚說明本發(fā)明產品及其制備方法。試驗l:黃豆苷元增溶劑單因素篩選。取0.05g黃豆苷元，精密稱定，分別與0.2g聚山梨酯80、聚乙烯吡咯烷酮K30、羥丙基P環(huán)糊精、甘油、PEG400(聚乙二醇400)及泊洛沙姆188混勻，加5ml去離子水研磨，使其成過飽和溶液。倒入具塞離心管中，充分振搖，置3000r/min離心10min，吸取上清液，過0.22pm濾膜后立即進樣lpL,HPLC測定。計算其在不同增溶輔料中的溶解度，并重復2次，結果見表l。表1黃豆苷元增溶劑單因素考察結果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>結果表明聚山梨酯80增溶效果優(yōu)于其他輔料。試驗2:各增溶劑與聚山梨酯80之間交互作用篩選。取0.05g黃豆苷元、O.lg聚山梨酯80，精密稱定，分別與0.1g聚山梨酯80、聚乙烯吡咯烷酮K30、羥丙基P環(huán)糊精、甘油、PEG400(聚乙二醇400)及泊洛沙姆188混合，加5ml去離子水研磨，使其成過飽和溶液。倒入具塞離心管中，充分振搖，置3000r/min離心10min，吸取上清液，過0.22nm濾膜后立即進樣lpL，HPLC測定。計算其在不同增溶輔料中的溶解度，并重復2次，結果見表2。表2各增溶輔料與聚山梨酯80之間交互作用考察結果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結果表明制備方法n、m均優(yōu)于制備方法i。試驗4:以黃豆苷元溶液澄清時間為評價指標進行制備方法的篩選。將試驗3中制備方法n、in所制備的黃豆苷元水溶液在室溫條件下放置，肉眼觀察其澄明度，直至溶液丌始出現(xiàn)細微的顆粒沉淀物，記錄下時間，結果見表4。表4澄清時間的考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結果表明制備方法II優(yōu)于制備方法III。試驗5:以凍干前黃豆苷元溶液澄明度為評價指標進行支架劑的篩選。取0.05g黃豆苷元，精密稱定，分別與0.2g泊洛沙姆188、羥丙基P環(huán)糊精、甘露醇、葡萄糖混勻，加無水乙醇5ml研磨5分鐘，使其充分溶解。并與5ml含有0.3g聚山梨酯80的去離子水混合，6(TC下減壓蒸發(fā)干燥，揮去乙醇后，加去離子水定容至5ml。以溶液的澄明度作為評價指標，進行支架劑的篩選。結果見表5。表5凍干前溶液澄明度的考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結果表明泊洛沙姆188和甘露醇優(yōu)于HP-(3-CD和葡萄糖。試驗6:以黃豆苷元凍干粉針成型為評價指標進行支架劑的篩選。將試驗5中泊洛沙姆188和甘露醇的澄清溶液同時進行冷凍干燥，以黃豆苷元凍干粉針成型為評價指標進行支架劑的篩選，結果見表6。表6黃豆苷元凍干粉針成型考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結果表明泊洛沙姆188、甘露醇成型效果均好。試驗7:以黃豆苷元凍干后復溶時間為評價指標進行支架劑的篩選。將試驗6中凍干的黃豆苷元粉針樣品溶解于62.5ml水中，放置于室溫條件下，肉眼觀察溶液的澄明度直至溶液開始出現(xiàn)細微顆粒沉淀物，記錄下時間，并以溶液的復溶時間為評價指標進行支架劑的篩選，結果見表7。表7黃豆苷元凍干后復溶時間考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結果表明泊洛沙姆188優(yōu)于甘露醇。試驗8:黃豆苷元與聚山梨酯80比例的篩選。取0.05g黃豆苷元，精密稱定，加無水乙醇5ml研磨5min使之溶解。取不同量聚山梨酯80，精密稱定，加入5ml去離子水，超聲10min使之溶解。再將兩溶液混合均勻，60。C下減壓蒸發(fā)干燥揮去乙醇，加去離子水定容至5ml，過0.22pm濾膜，用流動相稀釋，進高效液相色譜儀測定黃豆苷元溶解度。以溶液的澄清度、黃豆苷元溶解度作為評價指標，進行黃豆苷元與聚山梨酯80比例的篩選，結果見表8。表8溶液的澄清度和溶解度考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結果表明，黃豆苷元與泊洛沙姆188比例大于等于1:3時，黃豆苷元凍干粉針劑成型較好。為了更好地了解本發(fā)明黃豆苷元粉針劑的使用效果，發(fā)明人做了如下試驗試驗采用交叉設計自身比較法研究了比格犬單次口服(op)不同劑量黃豆苷元片(黃豆苷元含量25，100和400mg'kg")和單次靜脈注射(iv)黃豆苷元凍干粉針(25mg'kg—1)后的血漿藥物濃度，繪制血藥濃度一時間曲線，采用梯形法計算藥時曲線下面積AUC(o-z),口服給藥的AUC(o-z)與靜脈給藥的AUC(o-z)的比值即為口服給藥的絕對生物利用度。結果6只比格犬的生物利用度在11.6%20.3%之間，平均為15.7±3.8%(見圖1)。表明黃豆苷元凍干粉針生物利用度顯著高于黃豆苷元片。綜上所述，本發(fā)明的有益效果是1、由于本發(fā)明方法的特點是利用冷凍的溶液在低溫低壓條件下，從冷凍狀態(tài)下未經(jīng)液態(tài)直接升華除去水分完成干燥，凍干的固體物質由于微小的冰晶體的升華而呈現(xiàn)多孔結構，并保持原先凍結時的體積，加水后極易溶解，生物利用率高。2、由于本發(fā)明方法制得的本發(fā)明產品，加水后極易溶解而復原，并且制品干燥過程是在真空條件下進行的，不易氧化，而9599%以上的水份又能冷凍干燥排出，有利于制品的長期保存。3、由于本發(fā)明方法的特殊工藝，解決了黃豆苷元質量不穩(wěn)定的問題，具有成型好、速溶、穩(wěn)定和使用方便等優(yōu)點，一方面滿足了臨床需求及藥物的理化性質；另外一方面可避免產品在貯藏過程中出現(xiàn)的不穩(wěn)定等問題，從而保證了藥物的安全性、有效性和穩(wěn)定性。圖1比格犬口服不同劑量黃豆苷元片和注射黃豆苷元凍干粉針后血藥濃度一時間曲線。具體實施例方式下面通過附圖和實施例對本發(fā)明作進一步說明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。實施例1:黃豆苷元50g泊洛沙姆500g聚山梨酯80500g注射用水加至5000ml制成1000支其中泊洛沙姆為粉針劑的載體及支架劑，聚山梨酯80為增溶劑。制備方法如下-(1)配液在潔凈室內稱取50g黃豆苷元與500g泊洛沙姆，混勻，加入無水乙醇5000ml,研磨5min使其完全溶解。再稱取500g聚山梨酯80，加入4800ml滅菌注射用水，超聲10min使溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，6(TC下減壓揮去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。(2)滅菌及分裝將上述配制的溶液用經(jīng)過滅菌的Sartobran-p過濾器抽濾(cp0.22nm，德國SARTORIUS公司)，無菌分裝在15ml西林瓶中，每瓶5ml。(3)凍干將分裝好的樣品置凍干機中預凍5小時，預凍溫度控制在-5(TC，開啟真空泵弁加熱隔板，板層溫度梯度為-5(TC(TC均勻梯度升溫，升溫速率為10°C/h，并-30。C保溫3h，-20°0保溫％，-1(TC保溫35h，O'C保溫5h，0'C2(TC均勻梯度升溫，升溫速率為20。C/h，2(TC保溫8h;20。C3(TC均勻梯度升溫，升溫速率為10°C/h，3(TC保溫4h。冷阱溫度-5(TC。樣品封口，包裝。實施例2黃豆苷元甘露醇聚山梨酯80注射用水加至10g200g160g5000ml制成1000支其中甘露醇為粉針劑的載體及支架劑，聚山梨酯80為增溶劑。制備方法如下(1)配液:在潔凈室內稱取10g黃豆苷元與200g甘露醇，混勻，加入無水乙醇1100ml，研磨5min使其完全溶解。再稱取160g聚山梨酯80，加入640ml滅菌注射用水，超聲5分鐘使溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，50'C下減壓揮去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。其余步驟同實施例1。實施例3黃豆苷元泊洛沙姆188聚乙烯吡咯烷酮K30注射用水加至制成200g600g1200g5000ml1000支其中泊洛沙姆188為粉針劑的載體及支架劑，聚乙烯吡咯烷酮K30為增溶劑。制備方法如下(l)配液在潔凈室內稱取200g黃豆苷元與600g泊洛沙姆188，混勻，加入無水乙醇18000ml，研磨15min使其完全溶解。再稱取1200g聚乙烯吡咯烷酮K30，加入4800ml滅菌注射用水，超聲20分鐘使溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，8(TC下減壓揮去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。其余步驟同實施例1。實施例4黃豆苷元60g泊洛沙姆188300g聚山梨酯80500g注射用水加至5000mlSS1000支其中泊洛沙姆188為粉針劑的載體及支架劑，聚山梨酯80為增溶劑。制備方法如下(1)配液在潔凈室內稱取60g黃豆苷元與300g泊洛沙姆，混勻，加無水乙醇6000ml研磨8分鐘，使其完全溶解。再稱取500g聚山梨酯80，加入4800ml滅菌注射用水，8(TC水浴微熱使完全溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，6(TC下?lián)]去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。其余步驟同實施例l。實施例5黃豆苷元100g泊洛沙姆1882000g羥丙基e環(huán)糊精600g注射用水加至5000ml制成1000支其中泊洛沙姆188為粉針劑的載體及支架劑，羥丙基P環(huán)糊精為增溶劑。制備方法如下(1)配液在潔凈室內稱取100g黃豆苷元與2000g泊洛沙姆，混勻，加無水乙醇10000ml研磨8分鐘，使其完全溶解。再稱取600g羥丙基p環(huán)糊精，加入2400ml滅菌注射用水，75"C水浴微熱使完全溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，8(TC下?lián)]去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。其余步驟同實施例1。實施例6黃豆苷元10g泊洛沙姆30g聚山梨酯80150g注射用水加至5000ml制成1000支其中泊洛沙姆188為粉針劑的載體及支架劑，羥丙基(3環(huán)糊精為增溶劑。制備方法如下；(1)配液在潔凈室內稱取10g黃豆苷元與30g泊洛沙姆，混勻，加無水乙醇900ml研磨5分鐘，使其完全溶解。再稱取150g聚山梨酯80，加入2000ml滅菌注射用水，8(TC水浴微熱使完全溶解。將上述所得的兩種溶液混勻，6(TC下?lián)]去乙醇，加入滅菌注射用水至5000ml。其余步驟同實施例l。權利要求1、一種黃豆苷元粉針劑，其特征在于它是由黃豆苷元、增溶劑和支架劑按重量份比1∶6～16∶3～20配制而成粉針劑。2、根據(jù)權利要求1所述的黃豆苷元粉針劑，其特征在于所述增溶劑為聚山梨酯80或/和聚乙烯吡咯烷酮K30或/和羥丙基P環(huán)糊精；所述支架劑為泊洛沙姆188或/和甘露醇。3、根據(jù)權利要求2所述的黃豆苷元粉針劑，其特征在于所述增溶劑為聚山梨酯80;所述支架劑為泊洛沙姆188。4、根據(jù)權利要求13中任一權利要求所述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于它是按以下步驟制成a、稱取所述量的增溶劑，加入注射用水，使之溶解；b、稱取所述量的黃豆苷元、支架劑，加入乙醇使之溶解；c、將a、b步驟所得的兩種溶液混勻，置50。C8(TC下減壓揮去溶劑乙醇；加入注射用水至處方量；d、滅菌將上述配制的溶液進行常溫過濾滅菌；e、冷凍干燥進行冷凍干燥得成品。5、根據(jù)權利要求4所述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于a歩驟每l克增溶劑加入418毫升注射用水；b步驟每1克黃豆苷元加入90110毫升乙醇。6、根據(jù)權利要求5所述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于a步驟所述溶解采用超聲溶解530分鐘或80'C以下水浴中加熱至完全溶解。7、根據(jù)權利要求6所述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于d步驟中滅菌后分裝，每支粉針劑為5毫升，其中含有活性成份黃豆苷元0.01g0.2g。8、根據(jù)權利要求47中任一權利要求所述的黃豆苷元粉針劑的制備方法，其特征在于e步驟所述冷凍干燥為預凍凍干機板層溫度-5(TC-3(TC，預凍時間4h14h;冷阱溫度-6(TC-4(TC;一次干燥，除去游離水分真空條件下，板層溫度梯度為-50匸0〔均勻梯度升溫，升溫速率為515。C/h;并-30。C-20。C保溫3h8h，-20°C-10°C保溫9h15h，-10°C保溫10h40h;冷阱溫度-50。C-40。C;二次干燥，除去結合水真空條件下，板層溫度梯度為0'C2(TC均勻梯度升溫，升溫速率為1020°C/h;并在20'C保溫3h8h;2(TC30。C均勻梯度升溫，升溫速率為10°C/h;30。C保溫2h6h;冷阱溫度-50。C-40。C。全文摘要本發(fā)明提供一種黃豆苷元粉針劑，其特征在于它是由黃豆苷元、增溶劑和支架劑按重量份比1∶6～16∶3～20配制而成粉針劑。本發(fā)明產品加水后極易溶解，生物利用率高，具有成型好、速溶、穩(wěn)定和使用方便等優(yōu)點。文檔編號A61K47/34GK101292959SQ20081006988公開日2008年10月29日申請日期2008年6月25日優(yōu)先權日2008年6月25日發(fā)明者毅張,楊大堅,歐陽勇,黃小平申請人:重慶市中藥研究院