專利名稱：：治療胃部疾病的中藥組合物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及治療胃部疾病的中藥組合物，以小刺猴頭菌浸膏的提取物作為活性成分；IPC分類號為A61K36/06。技術背景-本發明所稱的猴頭菌為齒菌科真菌小刺猴頭菌(Hericiumcaput-medusae)，其菌絲體的發酵產物多年來作為原料藥應用于臨床。我國市場上以猴頭菌絲體培養浸膏為原料制成的藥品有胃樂新沖劑。盡管該制劑對胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎等顯示出良好的療效，但對菌絲體中有效成分的提取、分離、純化方法及活性成分的基本化學組成等問題仍未得到解決，長期以來一直制約著猴頭菌絲體的開發和利用。
發明內容本發明要解決的技術問題是提供治療胃部疾病的中藥組合物，以小剌猴頭菌浸膏的提取物作為活性成分。所述胃部疾病優選胃炎疾病，更優選慢性萎縮性胃炎疾病；或者優選胃潰瘍疾病。本發明的治療胃部疾病的中藥組合物以小刺猴頭菌浸膏的提取物作為活性成分，所述浸膏是如下制備的，取小刺猴頭純菌株，經深層培養，壓濾，將菌絲體再用熱水浸取，浸取液與發酵液合并，濃縮，干燥；所述培養的培養基配方為葡萄糖0.3—4%，磷酸二氫鉀0.03%，蛋白胨0.3%，氯化鈉0.05%，維生素B1適量，聚醚消沬劑適量；所述提取物是如下制備的，將猴頭菌浸膏用水稀釋，離心，向離心液加入乙醇至醇濃度為80%，離心，收集沉淀，溶于水，該溶液通過分子量范圍在8，OOO—IO,000的中空纖維超濾，收集濾液。經過藥理學實驗篩選，本發明組合物具有治療急、慢性胃炎，胃潰瘍，慢性萎縮性胃炎效果。按藥劑學方法，本發明組合物能夠制備多種臨床藥物制劑作為治療急、慢性胃炎，胃潰瘍，慢性萎縮性胃炎的藥物，所說的藥劑是任何一種藥劑學上所說的劑型，特別是作為各種口服劑型。本發明的藥物含有治療有效量的本發明組合物為活性成分，以及含有一種或多種藥學上可以接受的載體。所述載體是指藥學領域常規的藥物載休，包括稀釋劑、賦形刑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體。本發明的藥物可以通過口服、直腸、靜脈、肌肉注射或胃腸外給藥方式施用于這種治療的患者。按照藥學領域的常規生產方法制備各種劑型如片劑、顆粒劑、沖劑、膠囊、栓劑、噴霧劑、緩釋劑和注射劑。也可使其活性成分或組合物與多種載體或藥物混合，制成所需劑型。下述的藥理實驗證實了本發明組合物具有治療急、慢性胃炎，胃潰瘍，慢性萎縮性胃炎的藥理活性。一、本發明組合物對乙酸所致損傷型胃潰瘍的影響摘要本實驗觀察本發明組合物乙酸所致損傷型胃潰瘍大鼠的影響。分別連續灌胃給予乙酸所致損傷型胃潰瘍大鼠480mg/kg本發明組合物14天，對乙酸所致損傷型胃潰瘍均有顯著的抑制作用。藥物陽性藥為胃樂新，由白求恩醫大藥廠生產，批號041205。動物220-260g雄性大鼠。購自中國人民解放軍208醫院動物室。方法取大鼠禁食不禁水48小時，乙醚麻醉，仰位固定，腹部去毛，碘酒、酒精消毒，劍突下正中開2.5cm左右的切口，用彎止血鉗在右肝臟下方將十二指腸輕輕勾出，將胃部輕輕拉出腹外，在胃的腹側面胃體部與幽門竇交界處，用0.25ml注射器刺入大鼠胃漿膜下0.4-0.5mm，注入10%醋酸溶液0.05ml，將胃輕輕送回，縫合腹壁肌層及皮膚，消毒后常規飼養，于術次日起，分組，連續給藥14天，末次給藥2h，斷頭，結扎幽門和賁門，胃浸于1。％甲醛液中，固定10分鐘，沿胃大彎剪開，外翻洗滌，在注射醋酸溶液相應部位的粘膜面觀察潰瘍形成情況，以潰瘍最長徑和最短徑的均值作為潰瘍直徑，計算潰瘍指數。見表l。表1.本發明組合物對乙酸所致損傷型胃潰瘍的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注n=8，X±SD。※P〈0.05，※※※P〈0.001。小結480mg/kg本發明組合物14天，對乙酸所致損傷型胃潰瘍均有顯著的抑制作用。480mg/kg對乙酸所致損傷型胃潰瘍的抑制作用尤其顯著。二，本發明組合物對應激性胃潰瘍的影響摘要采用應激性胃潰瘍模型比較本發明組合物與胃樂新的抗潰瘍作用。分別連續灌胃給予大鼠480mg/kg本發明組合物15天，結果本發明組合物具有明顯的抗潰瘍作用。動物Wister大鼠32只，購自白求恩醫科大學動物室。藥物陽性藥為胃樂新，由白求恩醫大藥廠生產，批號041205。方法取大鼠50只，隨機分為5組，每組10只，每天灌胃給予480mg/kg本發明組合物及胃樂新各一次，對照組給予常水，連續給予15天，第14天給藥后將大鼠饑餓32h，次日下午16時用乙醚麻醉，將大鼠四肢用蠅綁在鐵籠上，同時將綁完的大鼠頭朝下，垂直放置18h，將動物拉頸處死。將其胃的賁門及幽門結扎，取全胃，并向內注入l^福爾馬林固定5min后，沿胃大彎剪開，平展于玻璃扳上，觀察判斷等級。結果對照組為3.87士0.35，480mg/kg本發明組合物為2.38土1.51(P<0.05)，胃樂新為2.13±1.13(P<0.001)。由此可見本發明組合物有非常明顯的抗潰瘍作用。三、本發明組合物對大鼠慢性萎縮性胃炎實驗研究摘要采用主動免疫加灌服膽汁及熱水的綜合方法觀察本發明組合物對大鼠慢性萎縮性胃炎CAG的治療作用，結果Xmg/kgHl、Xmg/kgL2可明顯改善CAG大鼠胃粘膜的變薄，并使胃黏膜固有腺體增多，有良好的治療CAG的作用。1.實驗材料及方法l.l動物Wistar雄性大鼠，購自長春高新醫學動物實驗研究中心，合格10-5112，體重220-260g。1.2藥物陽性藥為胃樂新，由白求恩醫大藥廠生產，批號041205。1.3模型的制備1.3.1佐劑抗原的制備取160-180gWistar大鼠，將其饑餓24h后處死取胃黏膜，每只鼠胃黏膜加生理鹽水3ml，利用組織勻漿機將其打勻，然后加入等體積液體石臘制備成均勻的乳劑，備用。1.3.2模型的制備取220-260g大鼠90只，在每只大鼠2點背部皮下注射佐劑抗原2ml，每點lml，2周后重復1次，再1周后又重復1次，共免疫3次；自免疫起每隔3天給人鼠灌服豬膽汁2ml/只(膽汁甘油二l:1);同時除灌服豬膽汁當天外，每天連續灌服35天55"C熱水。1.3.3動物處理首次免疫35天處死10只大鼠取胃作組織形態學檢測，可見胃黏膜腺體變薄，胃腺體減少，個別胃可見有潰瘍、出血、粘膜下大量細胞浸潤。1.3.4分組及給藥將余下大鼠隨機分為六組，即模型對照組，每天給予常水4ml/只，480mg/kg胃樂新，480mg/kg本發明組合物，每天給藥l次，連續給藥30天，并于每周稱重l次。1.3.5對胃粘膜病理組織中變化的影響動物自胃竇沿小彎至賁門取材，包埋切片。采用x2檢驗。2.結果2.1對胃黏膜組織形態學的影響見表2。從下表2可見，模型組胃黏膜變薄、腺體減少等現象的陰性率還是明顯高于給藥組，并伴有大量炎細胞浸潤從肌層增厚而本發明組合物對上述現象均有明顯的抑制作用而且未見肌層增厚現象。2.2對慢性萎縮性胃炎大鼠體重變化的影響見表3。表3表明，對慢性萎縮性胃炎大鼠體重的變化無影響。小結上述結果表明，本發明組合物對大鼠慢性萎縮性胃炎有一定的治療作用。表2.對慢性萎縮性胃炎胃粘膜組織形態學的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注同表l。表3.對慢性萎縮性胃炎大鼠體重變化的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從以上結果可以得出本發明的優點在于有效部位明確，結構清楚，服用量少，對于治療急、慢性胃炎，胃潰瘍，慢性萎縮性胃炎有顯著的療效。具體實施例方式取小刺猴頭純菌株，在27±1°C下斜面菌種培養7_9天，在27±1°C下一級搖瓶種子培養5—7天，在27±1°C下二級搖瓶種子培養5—7天，在27±1°C下一級種子罐培養5—7天，在27±1°C二級種子罐培養5—7天，在27±1°C下發酵5—7天，在100°C下加熱發酵液，過濾，濃縮成浸膏；所述斜面培養的培養基配方為馬鈴薯100:葡萄糖l:磷酸二氫鉀l:瓊脂1;所述搖瓶培養的培養基配方為葡萄糖3—4%，磷酸二氫鉀0.03%，蛋白胨O.3%，氯化鈉0.05%，維生素B1適量，聚醚消沫劑適量；所述種子罐培養和發酵的培養基配方為葡萄糖0.3%，磷酸二氫鉀0.03%，蛋白胨0.3%，氯化鈉0.05%，維生素B1適量，聚醚消沫劑適量；取猴頭菌發酵浸膏10kg，加水1一2倍稀釋，攪拌，離心，離心液加乙醇至醇濃度為80%，離心，收集沉淀，加蒸餾水配成水溶液，通過分子量范圍在8，000—10，000的中空纖維超濾，得到提取物160g。權利要求1、治療胃部疾病的中藥組合物，以小刺猴頭菌(Hericiumcaput-medusae)浸膏的提取物作為活性成分；所述浸膏是如下制備的，取小刺猴頭純菌株，經深層培養，壓濾，將菌絲體再用熱水浸取，浸取液與發酵液合并，濃縮，干燥；所述培養的培養基配方為葡萄糖0.3—4％，磷酸二氫鉀0.03％，蛋白胨0.3％，氯化鈉0.05％，維生素B1適量，聚醚消沫劑適量；所述提取物是如下制備的，將猴頭菌浸膏用水稀釋，離心，向離心液加入乙醇至醇濃度為80％，離心，收集沉淀，溶于水，該溶液通過分子量范圍在8,000—10,000的中空纖維超濾，收集濾液。2、根據權利要求l的應用，所述胃部疾病是胃炎疾病。3、根據權利要求l的應用，所述胃部疾病是胃潰瘍疾病。4、根據權利要求2的應用，所述胃炎疾病是慢性萎縮性胃炎疾病。全文摘要一種治療胃部疾病的中藥組合物，以小刺猴頭菌浸膏的提取物作為活性成分，所述浸膏是如下制備的，取小刺猴頭純菌株，經深層培養，壓濾，將菌絲體再用熱水浸取，浸取液與發酵液合并，濃縮，干燥。發明的優點在于有效部位明確，結構清楚，服用量少，對于治療急、慢性胃炎，胃潰瘍，慢性萎縮性胃炎有顯著的療效。文檔編號A61K36/06GK101375866SQ20081005123公開日2009年3月4日申請日期2008年9月28日優先權日2008年9月28日發明者屹馮,劉淑芳,孫立群,李鳳才,李敬軒申請人:白求恩醫科大學制藥廠