豇豆基因型耐濕能力的技術鑒定方法

專利名稱：豇豆基因型耐濕能力的技術鑒定方法
技術領域：
本發明涉及到蔬菜作物濕害脅迫下其耐濕程度的高低， 具體來說是涉及豇豆耐濕能力的鑒定方法。
背景技術：
濕澇害(waterlogging)是濕害(wet)和淹澇害(flood)的統 稱，前者是指土壤水分達到飽和時造成嫌氣環境，因氧氣虧 缺改變了植抹的代謝，對植抹正常生長發育所產生的危害， 后者為地面積水淹沒作物基部或全部而造成的危害。與洪澇 相比，濕澇害屬于緩變型水害，不易被及時發現。在世界許 多地方，如中國、日本、印度、巴基斯坦、澳大利亞等許多 國家及濕潤地區和半干旱地區，濕澇危害嚴重威脅著農作物 的生產，影響高產與穩產，成為廣泛關注的嚴重問題。
豇豆是耐熱耐旱的一年生作物。我國南方等地區夏季降 雨量較大，長豇豆生長季節，常出現遠遠超過其生理需水量 的情況，極易造成濕害，最終導致其產量和品質的下降。盡 管從形態學和生理學等角度進行過豇豆品種耐濕特征的描 述，如Osunkoya等研究了水分脅迫對豇豆幼苗生長的影響， Timsina等研究了淹水處理'下豇豆品種的植抹水分關系與生 長，以及早熟性與淹水程度的互作效應。但是豇豆品種耐濕 性的鑒定和篩選尚缺乏研究，影響品種利用工作，有必要研 究不同基因型的耐濕性和耐濕遺傳規律。傳統的簽定方法指 標多需要測定濕害指數、株高、單抹鮮重、根冠比、根瘤數、 根系活力、葉片含水量、葉綠素含量、類胡蘿卜素含量、可 溶性蛋白質含量、相對膜透性、傷害率和SOD活性共13項 指標；不集中、綜合性差、鑒定效果不準確，不能進行耐濕 預測等缺點。

發明內容
本發明的目的在于提供一種方法操作簡便，適應性廣的豇豆基因型耐濕能力的技術鑒定方法，以解決上述問題。
本發明的技術方案為Il豆基因型耐濕能力的技術鑒定 方法，它是對培養的豇豆幼苗進行淹水處理后，測定葉片含 水量、葉綠素含量、傷害率，利用F = -l.48 + 2.15X7+0.17X8-0.95X 12;式中X 7. X 8、 X 12分別代表葉片含水量、葉綠素含 量、傷害率的a值；01 =(淹水處理下性狀表型值/自然條件下 性狀表型值)x100。/。。淹水處理下性狀表型值分別為淹水處理 后檢測到的葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的測定值；自 然條件下性狀表型值分別是自然條件下所檢測到的葉片含水 量、葉綠素含量、傷害率的測定值。
該方法克服了傳統的簽定方法指標多但不集中、綜合性 差、鑒定效果不準確，不能進行耐濕預測等缺點；本方法系 統性、綜合性強；方法操作簡便，適應性廣，可資其他植物 耐濕能力鑒定借鑒；能判別未知虹豆基因型的耐濕性；預測 釭豆基因型耐濕能力的準確性高。
具體實施例方式
1、 上述的幼苗培養具體步驟為選擇無病害、飽滿的種 子，用70%的酒精表面消毒2min去離子水充分沖洗后，》文 于濕潤濾紙上，在恒溫培養箱(28。C士1。C)中萌發2天。將萌 發后的12個扛豆品種的種子(每個品種IOO粒種子)播種到育 苗盆內，每盆均裝入相同重量和肥力相當的土壤。待出苗后 管理一致，保證其生長正常。
2、 濕害處理及指標測定的具體步驟為上述出土的幼苗 生長2周后，選擇生長一致的幼苗進行淹水處理(水面高于土 表約lcm),對照組為正常澆水，實驗采用完全隨機設計，3 次重復，每個重復各8林，處理15天后分別測定濕害指數、 抹高、單抹鮮重、根冠比、根瘤數、根系活力、葉片含水量、 葉綠素含量、類胡蘿卜素含量、可溶性蛋白質含量、相對膜 透性、傷害率和SOD活性共13項指標。
3、 建立優化回歸方程，確定基因型綜合評價值(F)的 具體步驟為先求出每次重復的a值，公式為01 =(淹水處 理下性狀表型值/自然條件下性狀表型值)x100。/。，然后取其 平均值。數據轉化依照模糊數學中隸屬函數的方法，計算各 品種各項指標隸屬函數值F。最后取其平均值，即為耐濕性的綜合評價值。
測定指標與耐濕性呈正相關F『(X『Xmin)/(X眼x-Xmin)
測定指標與耐濕性呈負相關Fii = 1 -(Xij-Xmin)/(Xmax-Xmin) F,i為第i個材料第j個性狀的隸屬值，Xjj為第i個材料
第j個性狀脅迫對非脅迫的比值，Xmax、 Xmin分別為該性狀
中最大、最小比值。
利用回歸方程對虹豆耐濕能力進行預測的具體步驟為
把耐濕綜合評價值(F)作因變量，經逐步回歸篩選出對F值有 顯著效應的自變量，建立最優回歸方程F = -1.48 + 2.15X 7 + 0.17X 8- 0.95X |2 。式中X 7. X 8、 X 12分別代表葉片含水量、 葉綠素含量、傷害率的a值；a =(淹水處理下性狀表型值/ 自然條件下性狀表型值>100%。淹水處理下性狀表型值分別 為淹水處理后檢測到的葉片.含水量、葉綠素含量、傷害率的 測定值；自然條件下性狀表型值分別是自然條件下所檢測到 的葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的測定值。經檢驗，方 程關系極顯著。由逐步回歸可知，在13項單項指標中，上述 3個指標對耐濕鹽性影響最大，故在鑒定中可有選擇地測定 這些指標，進一步使苗期鑒定工作簡單化。其中以上， 品種耐濕性高，0.50< F<0.60,則表示該品種耐濕性中等； DS0.5，該品種耐濕性差。經對12個虹豆品種綜合評價值與 方程預測值進行相關分析，二者的相關系數R = 0.91,達到 極顯著水平。說明用此回歸方法可預測長豇豆品種的耐濕性。 以泰國3工豆為例i兌明
根據前面的技術方案中所介紹的培養條件進行幼苗的培 養及濕害處理，以及分別測定葉片含水量、葉綠素含量、傷 害率，計算出其對應的a值，結果分別為0.97、 0.77和0.14。 然后fC入,^式F = -1.48 + 2.15X 7 + 0.17X 8 - 0.95X 12 (X 7、 X8、 X。分別代表葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的a值)，計 算得出其F值為0.60，根據上述F值的含義，可知該品種屬 于耐濕性強的品種。對新的豇豆種質通過控制在相同條件下 的3項指標的測定，求出其F值，就可以判別其耐濕能力水 平。
權利要求
1、一種豇豆基因型耐濕能力的技術鑒定方法，它是對培養的豇豆幼苗進行淹水處理后，測定葉片含水量、葉綠素含量、傷害率，利用F＝-1.48+2.15X7+0.17X8-0.95X12；式中X7 X8、X12分別代表葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的α值；α＝(淹水處理下性狀表型值/自然條件下性狀表型值)×100％。
2、 如權利要求1所述虹豆基因型耐濕能力的技術鑒定方 法，其特征在于所述培養的豇豆幼步驟為選擇無病害、飽 滿的種子，用70%的酒精表面消毒2min去離子水充分沖洗 后，放于濕潤濾紙上，在28。C士1。C恒溫培養箱中萌發2天； 將萌發后的虹豆品種的種子播種到育苗盆內進行培養。
3、 如權利要求1所述豆工豆基因型耐濕能力的技術鑒定方 法，其特征在于所述所述淹水處理將出土的幼苗生長2周 后，選擇生長一致的幼苗進行淹水處理，水面高于土表約 lcm;對照組為正常澆水。
4、 如權利要求1所述釭豆基因型耐濕能力的技術鑒定方 法，其特征在于所述以上，品種耐濕性高，0.50< F<0.60,則表示該品種耐濕性中等；該品種耐濕性差。
全文摘要
本發明公開了一種豇豆基因型耐濕能力的技術鑒定方法，它是對培養的豇豆幼苗進行淹水處理后，測定葉片含水量、葉綠素含量、傷害率，利用F＝-1.48+2.15X₇+0.17X₈-0.95X₁₂；式中X₇、X₈、X₁₂分別代表葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的α值；α＝(淹水處理下性狀表型值/自然條件下性狀表型值)×100％。淹水處理下性狀表型值分別為淹水處理后檢測到的葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的測定值；自然條件下性狀表型值分別是自然條件下所檢測到的葉片含水量、葉綠素含量、傷害率的測定值。該方法克服了傳統的簽定方法指標多但不集中、綜合性差、鑒定效果不準確，不能進行耐濕預測等缺點。
文檔編號A61B19/00GK101315358SQ20081004842
公開日2008年12月3日 申請日期2008年7月17日 優先權日2008年7月17日
發明者張鳳銀, 曾長立, 胡志輝, 陳禪友 申請人:江漢大學