一種野黃芩苷元衍生物、其制備方法和用途的制作方法

專利名稱：：一種野黃芩苷元衍生物、其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
：本發明屬藥物化學領域，涉及一類新型的野黃芩苷元衍生物，具體涉及野黃芩苷元8位Mannich堿衍生物、及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應用。
背景技術：
：燈盞花是菊科飛蓬屬植物短葶飛蓬￡Wg"o"Srev&cop/"e6^m"7fo"dMa^的全草，又名燈盞細辛、燈盞菊等，主要分布于我國南方各地。二十世紀70年代經臨床驗證，證明燈盞花粗提物對高血壓、腦溢血、腦血栓形成、腦栓塞多發性神經炎、慢性珠網膜炎及其后遺癥具有明顯療效，由此引起人們對燈盞花粗提物有效成分研究的廣泛興趣。經過多年研究，從燈盞花中分離鑒定了多種化學成分，如吡喃酮類、黃酮類、內酯類、氨基酸類、多糖類等，并發現燈盞乙素(又名野黃芩苷)是燈盞花提取物的主要活性成分，其粗提物作為心腦血管治療藥物已用于臨床；研究表明，燈盞乙素還具有抗腫瘤、抗HIV病毒、抗肝纖維化、抗老年癡呆、神經保護等廣泛藥理活性。但燈盞乙素存在純度低、溶解性差、生物利用度低、體內半衰期短、且毒副作用嚴重等問題，以燈盞乙素為先導物進行結構改造，以期發現藥理活性及療效更理想的治療藥物將具有重要意義。對燈盞乙素的體內代謝研究發現，野黃芩苷元為其活性代謝物，具有較強生物活性，但野黃芩苷元的水溶性和脂溶性都較差，難透過生物膜，故吸收極差，生物利用度非常低。因此，以野黃芩苷元為先導物，通過化學結構修飾，增強其脂溶性或水溶性有可能發現藥理活性更強的藥物。對野黃芩苷元的構效關系研究表明A環上羥基的存在是生物活性所必需，并且多個羥基相鄰時，生物活性較高，當酚羥基甲基化或糖苷化則導致活性降低或消失；2，3-位雙鍵被飽和后，由于分子失去平面性，導致生物活性大大降低；A環上8-位碳上有氨基、取代氨基或硝基取代時，則細胞毒性增強。基于上述研究結果，利用野黃芩苷元8-位H具有較強酸性的特征，通過Mannich反應引入含氮基團，以期改善目標物的溶解性，提高其生物利用度和增強藥理活性。
發明內容本發明的目的在于提供一類新型的野黃芩苷元衍生物(野黃芩苷元8位Mannich堿衍生物)及其藥學上可接受的鹽；本發明的另一目的在于公開該類化合物的制備方法；本發明的第三個目的在于公開該類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發明所提供的野黃芩苷元8位Ma皿ich堿衍生物的化學結構通式為式中R'、R2可以相同或不同，R，、R2代表H、C廣C,2脂肪烷烴、C廣C7脂肪環烷烴、取代的C3C7脂肪環烷烴、芳基、供電子或吸電子取代的芳基、C廣Q脂肪醇及其酯、C廣C6羧酸及其酯、-CHR3COOH及其酯，或R,、112分別與C、O及N原子環合形成四元環、五元環、六元環或七元環；其中，R3為氨基酸殘基。本發明所提出的野黃芩苷元衍生物可通過以下方法制備得到上述化學反應式給出了野黃芩苷元8位Mannich堿衍生物的合成方法。以野黃芩苷元為起始原料，在溶劑中，經酸催化(也可不用酸催化)下與甲醛和有機胺(包括伯胺、仲胺、氨基酸及其酯)發生Mannich反應，所得產物經重結晶或柱層析純化，得野黃芩苷元8位Mannich堿衍生物。其具體制備方法描述如下Mannich反應所用溶劑為乙醚、四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、水、C,Q脂肪醇、二氯甲烷、氯仿、C3Q脂肪酮、苯、正庚垸、甲苯、吡啶或上述兩種溶劑的混合物，優選溶劑為二甲基亞砜、四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、水、甲醇、丙酮、吡啶、甲醇-吡啶混合液；Mannich反應所用酸催化劑為各種質子酸或Lewis酸，優選酸催化劑為鹽酸、三氟化硼乙醚、樟腦磺酸；反應所用甲醛為甲醛水溶液、三聚甲醛、多聚甲醛、二甲氧基甲烷，優選甲醛為甲醛水溶液；反應所用有機胺包括有機伯胺、有機仲胺、氨基酸及其酯；野黃芩苷元與甲醛和有機胺的摩爾投料比為1.0:1.0-5.0:1.0-5.0，優選摩爾投料比為1.0:3.0-4.0:3.0~4.0;縮合反應溫度為(K200'C,優選反應溫度為室溫80'C;縮合反應時間為2~72小時，優選反應時間為2~24小時。本發明提供的野黃芩苷元衍生物可與任何合適的酸通過藥學上常規成鹽的方法得到其藥物學上可接受的鹽，所述的酸為無機酸(如鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等)；有機酸(如甲酸、乙酸、丙酸、苯甲酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸等；烷基磺酸，如甲基磺酸、乙基磺酸等；芳基磺酸，如苯磺酸、對甲苯磺酸等)均可使用。本發明的野黃芩苷元衍生物進行了如下的生物活性篩選1、抗肝癌細胞BEL-7402將肝癌細胞BEL-7402分別消化計數，并接種于96孔板(5000個細胞/L),24小時后以磷酸鹽緩沖液(PBS，pH7.4)洗滌2遍，加入含不同濃度的藥物，培養72小時；洗滌后，用0.4°/。磺酰羅丹明(SRB)溶液室溫下染色15分鐘，1%冰醋酸洗3遍，空氣中將染色的細胞干燥，以10mmol/LTris-HCl溶解，并用DynatechMR7000儀測540nrn波長的吸光度值，每株細胞獨立重復3遍，計算藥物對肝癌細胞BEL-7402生長的抑制率，試驗結果見表l。2、抗肺癌細胞A-549將肺癌細胞A-549分別消化計數，并接種于96孔板(5000個細胞/L)，24小時后以磷酸鹽緩沖液(PBS，pH7.4)洗滌2遍，加入含不同濃度的藥物，培養72小時；洗漆后，用0.4%磺酰羅丹明(SRB)溶液室溫下染色15分鐘，1%冰醋酸洗3遍，空氣中將染色的細胞千燥，以10mmol/LTris-HCl溶解，并用DynatechMR7000儀測540nrn波長的吸光度值，每株細胞獨立重復3遍，計算藥物對肺癌細胞A-549生長的抑制率，試驗結果見表2。具體實施方式實施例l8-(A^-二甲基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4fiM-苯并吡喃的制備在反應瓶中依次加入二甲胺2.0mmol、37%甲醛水溶液2.0mmol、野黃芩苷元570mg(1.19mmol)、甲醇20ml和催化量鹽酸，攪拌均勻，升溫回流攪拌反應至原料反應完全，過濾析出的固體，濾餅用少量甲醇洗滌，干燥，所得粗品用WiV-二甲基甲酰胺和水的混合溶劑重結晶，得黃色粉末固體342.1mg，收率83.8%。'HNMR(DMS0-4j,400MHz)&12.67(brs,1H，5-OH),7.90(d,/=8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),6.92(d,J=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6)，6.60(s,1H,Ar-H3),4.15(s，2H,CH2),2.56(s，6H,CH3);HR陽TOFMS(+Q)附/z:344,1125([C,8H,8N06+H]+計算值344.1134)。實施例28-(AL嗎啉基)—亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4樂l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例1，只是將二甲胺用嗎啉替代，得8-(iV-嗎啉基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-l-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率72.4%。'H畫R(DMSO-4400MHz)512.98(brs,1H,5-OH),7.96(d,/=8.8Hz,2H，Ar,-H3,5),6.95(d，J=8.8Hz，2H,Ar，-H2,6),6.80(s,1H，Ar-H3),4.03(s,2H,CH2),3.65(m,4H,2xCH力，2.71(m，4H,2xCH2);HR-TOFMS(+Q)m/z:386.1202([<:2必19>}07+司+計算值386.1240)。實施例38-(W-哌啶基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4樂l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例1，只是將二甲胺用哌啶替代，得8-(^-哌啶基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4/M-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率73.7%。'HNMR(DMSO陽4400MHz)5:12.73(brs,1H，5-OH)，7.94(d,/=8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),6.93(d，J=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6)，6.69(s,1H，Ar-H3),4.13(s,2H,CH2)，2.78(m,4H,2xCH2),1.62(m,4H，2xCH2)，1.49(m，2H,CH2);HR墨TOFMS(+Q)m/z:384.1455([C2,H2,N06+H]+計算值384.1447)。實施例48-(^-甲基-^-乙基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-1-苯并吡喃的制備操作過程同實施例1，只是將二甲胺用iV-甲基乙基胺替代，得8-(W-甲基-7V-乙基)-亞甲胺基-5,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率56.3%。'HNMR(DMSO-4400MHz)《12.70(brs，1H,5-OH),7.91(d,7=8.8Hz,2H，Ar，-H3'5),6.93((!，/=8.8Hz,2H，Ar，-H2，6),6.66(s,1H,Ar-H3),4.21(s,2H,CH2)，2.91(d,/=7,2Hz,2H,CH2),2.53(s,3H,CH3),1.21(t,/=7.2Hz，3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)/w/z:384.1258([d9HwN06+H]+計算值358.1291)。實施例58-(V-四氫吡咯基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4/f-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例I,只是將二甲胺用四氫吡咯替代，得8-(W-四氫吡咯基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率38.1%。'HNMR(DMSO-4,400MHz)&12.80(brs，1H,5-OH),7.90(d,/=8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),6.928.8Hz,2H,Ar，-H2,6),6.63(s，1H,Ar-H3),4.30(s，2H，CH2),3.04(m，4H，2xCH2),1.88(m,4H,2xCH2);HR-TOFMS(+Q)m/z:370.1280([C20Hl9NO6+H]+計算值370.1291)。實施例68-(7VyV-二異丙基)-亞甲胺基-5,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4/M-苯并吡喃的制備操作過程同實施例1，只是將二甲胺用二異丙胺替代，得8-(iV,iV-二異丙基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率78.2%。HR-TOFMS(+Q)w/z:400.1772([C22H25N06+H]+計算值400.1760)。實施例78-(八yV-二環己基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4iy-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例1，只是將二甲胺用二環己胺替代，得8-(MiV-二環己基)-亞甲胺基-5,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率62.6%。HR-TOFMS(+Q)附/z:480.2380([<22811331^06+11]+計算值480.2386)。實施例88-(7V-叔丁基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備在反應瓶中依次加入叔丁胺4.0mmol、37%甲醛水溶液4.0mmol、野黃芩苷元570mg(1.19mmol)、甲醇20ml和少量吡啶，攪拌均勻，室溫攪拌反應至原料反應完全，過濾析出的固體，濾餅用少量甲醇洗滌，干燥，所得粗品用甲醇和水的混合溶劑重結晶，得黃色粉末固體245.16mg,收率55.5%。'HNMR(DMSO-^，400MHz)&12.55(brs，1H,5-OH),7.84(d,J=8.8Hz,2H，Ar，-H3，5),6.90(d,/=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6),6.53(s,1H,Ar-H3),4,22(s,2H,CH2),1.37(s,9H,3xCH3);HR-TOFMS(+Q)w/z:372,1457([C2oH2,N06+H]+計算值372.1447)。實施例98-(7V-《式-4-甲基環己基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4fiM-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用反式-4-甲基環己胺替代，得8-(A^-^^t-4-甲基環己基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率36.6%。'HNMR(DMSO-^，400MHz)512.56(brs,1H，5陽OH)，7.85(d，《/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),6.91(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6),6.55(s,1H,Ar-H3),4.28(s,2H，CH2)，2.95(m，1H,HNCH),2.11(m，2H,CH2),1.72(m，2H，CH2),1.35(m,3H,CH2，CH)，0.96(m,2H,CH2)，0.85(d,J=6.0Hz,3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)m/z:412.1756([C23H2sN06+H]+計算值412.1760)。實施例108-(AL異丙基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用異丙胺替代，得8-(^-異丙基)-亞甲胺基-5，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉術固體，收率32.3%。'HNMR(DMSO-A,400MHz)512.56(brs,1H,5-OH),7.85(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5)，6.91(d，/=8.8Hz，2H,Ar，-H2,6),6.54(s,1H,Ar-H3),4.25(s，2H,CH2),3.31(m，1H，HNCH),1.28(d,J=6.4Hz，6H,2xCH3);HR-TOFMS(+Q)m/z:358.1306([C19H19N06+H]+計算值358.1291)。實施例118-(iV-環己基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用環己胺替代，得8-(^-環己基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率31.4%。'H畫R(DMSO-c4，400MHz)&12.57(brs，1H，5-OH),7.86((!，/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),6.91(d，J=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6)，6.56(s,1H,Ar-H3),4.29(s，2H,CH2),3.02(m,1H,HNCH),2.07(m,2H,CH2),1.75(m，2H,CH2)，1.59(m,1H,CH),1,122~1.403(m,5H,CH2);HR-TOFMS(+Q)m/z:398.1608([C22H23N06+H]+計算值398.1604)。實施例128-(iV-乙基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4樂l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用乙胺替代，得8-(W-乙基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率64.3%。'HNMR(DMS0-4,400MHz)&12.55(brs,1H,5-OH),7.87(d,/=8.4Hz,2H,Ar，-H3,5),6.91(d,/=8.4Hz,2H,Ar，-H2,6),6.63(s,1H，Ar-H3),4.25(s,2H,CH2),3.00(q,J=7.2Hz,2H,HNCH2),1.22(t,/=7.2Hz，3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)ot/z:344.1142([C18H17N06+H]+計算值344.1134)。實施例138-(7V-正丁基)-亞甲胺基-5，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用正丁胺替代，得8-(//-正丁基)-亞甲胺基-5，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率24.3%。NMR(DMSO-4400MHz)《12.58(brs,1H，5-OH),7.878.4Hz,2H,Ar，-H3,5),6.91(d，■/=8.4Hz，2H,Ar，-H2,6)，6.55(s,1H，Ar-H3)，4.27(s，2H,CH2),2.93(t,/=7.2Hz，2H,HNCH2)，1.61(m,2H,CH2),1.35(m,2H,CH2),0.88(t,J=7.2Hz，3H，CH3);HR-TOFMS(+Q)m/z:372.1438([C2oH2,N06+H]+計算值372.1447)。實施例148-(iV-環丙萄-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用環丙胺替代，得8-(7^-環丙基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉水固體，收率45.7%。HR-TOFMS(+Q)m/z:356.1125([C,9HnN06+H]+計算值356.1134)。實施例158-(^_甲基)_亞甲胺基_5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-1-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用甲胺水溶液替代，得8-(7V-甲基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率60.1%。HR-TOFMS(+Q)/n/z:330.0991([C,7H,5N06+H]+計算值330.0978)。實施例168-(iV-羥乙基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用乙醇胺替代，得8-(^-羥乙基)-亞甲胺基-5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率47.2%。HR-TOFMS(+Q)/w/z:360.1065([C,sHnN07+H]+計算值360.1083)。實施例17'8-(iV-苯甲基)-亞甲胺基-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4H-l-苯并吡喃的制備操作過程同實施例8，只是將叔丁胺用芐胺替代，得8-(^-苯甲基)-亞甲胺基-5，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃的黃色粉末固體，收率48.8%。HR-TOFMS(+Q)w/z:406.1298([C23H,9N06+H]+計算值406.1291)。實施例18③-iV-[5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4仏l-苯并吡喃-8-基l-丙氨酸在反應瓶中依次加入0丙氨酸3.0mmo1、37%甲醛水溶液3.0mmol、野黃苳苷元570mg(1.19mmo1)、甲醇25ml和少量吡啶，攪拌均勻，室溫攪拌反應至原料反應完全，過濾析出的固體，濾餅用少量甲醇洗滌，干燥，所得粗品用甲醇-水混合溶劑重結晶，得黃色粉末固體263.0mg，收率57.1%。'HNMR(DMSO-^，400MHz)《12.95(brs，1H,5-OH)，7.99(d,/=8.4Hz,2H，Ar，-H3,5),6.94(d,J=8.4Hz,2H,Ar，-H2,6),6.77(s,1H,Ar-H3),4.30(s,2H,ArCH2),3.56(q，/=7.2Hz,1H，HNCH),1.37(d,=7.2Hz，3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)m/z:388.1030([C19H17N08+H]+計算值388.1032)。實施例19A45，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃-8-基-甘氨酸操作過程同實施例18，只是將(^-丙氨酸用甘氨酸替代，得A45,6,7-三羥基-4-氧_2_(4-羥基苯基)-4//_1_苯并吡喃-8-基]-甘氨酸的黃色粉末固體，收率29.6%。'HNMR(DMSO-4,400MHz)5:13.00(brs,1H,5-OH),8.00(d,J=8.4Hz,2H,Ar，-H3,5),6.94(d,/=8.4Hz，2H，Ar，-H2,6)，6,77(s，1H，Ar-H3),4.34(s,2H，ArCH2),3.44(s,2HCH2);HR墨TOFMS(+Q)m/z:374,0885([C,8H,sN08+H]+計算值374.0876)。實施例20/M7V-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4^-l-苯并吡喃-8-基ll-丙氨酸操作過程同實施例18，只是將(^-丙氨酸用A丙氨酸替代，得A[A45，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]]-丙氨酸的黃色粉末固體，收率64.9%。'H畫R(DMSO-A,400MHz)《12.88(brs,1H，5-OH),7.92(d,J=8.8Hz,2H，Ar，陽H3,5),6.92(d,J=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6)，6.65(s，1H,Ar-H3),4.28(s,2H,ArCH2),3.12(t，/=6.4Hz，2H,HNCH2)，2.58(t,=6.4Hz，2H,CH2COOH);HR-TOFMS(+Q)ah/z:388.1045([CwHnNOs+H]+計算值:388.1032)。實施例21③-A45，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4iM-苯并吡喃-8-基-脯氨酸操作過程同實施例18，只是將f^-丙氨酸用(^-脯氨酸替代，得OAq5，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]-脯氨酸的黃色粉末固體，收率64.4%。'H畫R(DMSO-4400MHz)&12.97(brs,1H,5-OH)，7.99(d，J=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),6.94(d，/=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6),6.79(s,1H，Ar-H3),4.31(s，2H,ArCH2N),3.68(dd,力=6.0Hz,力=9.4Hz,1H,CHCOOH)，3.15(qd,力=2.4Hz,力=9.4Hz,力=17.0Hz,1H，NCH2),2.73(qd,力=2.0Hz，《/2=9.6Hz，力=17.0Hz,1H，NCH2)，2.25(m，1H,CH2),1.93(m，1H,CH2),1.87(m,1H，CH2)，1.70(m,1H，CH2);HR-TOFMS(+Q)w/z:414.1197([C2,H,9NOs+H]+計算值:414.1189)。實施例22問-7V-[5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃-8-基I-絲氨酸操作過程同實施例18，只是將0丙氨酸用(^-絲氨酸替代，得OA45，6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4/M-苯并吡喃-8-基]-絲氨酸的黃色粉末固體，收率51.3%。'HNMR(DMSO-c4，400MHz)&12.97(brs，1H，5-OH)，7.99(d，■/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),6.93(d,J=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6),6.78(s，1H,Ar-H3),4.38(s，2H,ArCH2N),3.87(dd，力=4.0Hz,力=11.2Hz，1H，CHCOOH)，3.72(dd,力=6.4Hz,力=11.2Hz,1H,CH2OH)，3.52(dd,力=4.0Hz，J2=6.4Hz,1H,CH2OH);HR-TOFMS(+Q)m/z:404.1003([Ci9HnN09+H]+計算值404.0982)。實施例23問-A45,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4樂l-苯并吡喃-8-基I-天冬氨酸操作過程同實施例18，只是將0>丙氨酸用^)-天冬氨酸替代，得③-A45,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]-天冬氨酸的黃色粉末固體，收率55,2%。HR陽TOFMS(+Q)w/z:432.0918([C2oHnNO,。+H]+計算值432.0931)。實施例24OA45，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4/7-l-苯并吡喃-8-基-苯丙氨酸操作過程同實施例18，只是將0丙氨酸用@-苯丙氨酸替代，得③-A45,6,7-三輕基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]-苯丙氨酸的黃色粉末固體，收率35.7%。HR-TOFMS(+Q)m/z:464.1360([C25H2,N08+H]+計算值464.1345)。實施例25③-iV-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4iy-l-苯并吡喃-8-基-纈氨酸操作過程同實施例18，只是將O丙氨酸用O纈氨酸替代，得OA45,6,7-三羥基4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]-纈氨酸的黃色粉末固體，收率43.5%。HR-TOFMS(+Q)w々416.1330([C2,H2,N08+H]+計算值416.1345)。實施例26y-[A45,6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃-8-基lI-氨基丁酸操作過程同實施例18，只是將O丙氨酸用y-氨基丁酸替代，得y-[A45,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]]-氨基丁酸的黃色粉末固體，收率49.3%。'HNMR(DMSO-&,400MHz)&12.67(brs,1H,5-OH),7.88(d，/=8.8Hz，2H，Ar，-H3,5),6.92(d,J=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6),6.59(s，1H，Ar-H3),4.26(s,2H,ArCH2NH)，2.96(t,J=7.2Hz,2H,NHCH2),2.34(t,J=7爭2Hz，2H，CH2COOH),1.84(penta,/=7.2Hz,2H,CH2);HR-TOFMS(+Q)w/z:402.1179([C2oH,9N08+H〗+計算值402.1189)。實施例27A[7V-5，6，7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4好-l-苯并吡喃-8-基I卜氨基丁酸操作過程同實施例18，只是將f^-丙氨酸用^氨基丁酸替代，得A[iV-[5,6,7-三羥基-4-氧-2-(4-羥基苯基)-4//-1-苯并吡喃-8-基]]-氨基丁酸的黃色粉末固體，收率26.9%。'HNMR(DMSO-4400MHz)《12.80(brs,1H，5-OH)，7.92(d,8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),6.92(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6)，6.69(s,1H,Ar-H3)，4.31(m,2H,ArCH2NH),3.41(m，1H,NHCH),2.48(m，2H，CH2COOH),1.31(d,6.4Hz，3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)w/z:402.1162([C2oH,9N08+H]+計算值402.1189)。實施例28生物活性測試結果表一化合物對肝癌細胞BEL-7402生長的抑制率<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本發明不限于上述實施例權利要求1.一類具有如下通式(I)的野黃芩苷元衍生物及其藥學上可接受的鹽其特征在于R1、R2可以相同或不同，R1、R2代表H、C1～C12脂肪烷烴、C3～C7脂肪環烷烴、取代的C3～C7脂肪環烷烴、芳基、供電子或吸電子取代的芳基、C1～C6脂肪醇及其酯、C1～C6羧酸及其酯、-CHR3COOH及其酯，或R1、R2分別與C、O及N原子環合形成四元環、五元環、六元環或七元環；其中，R3為氨基酸殘基。2.如權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于當分子中存在手性碳時，所述化合物為消旋體或光學活性體。3.如權利要求1~2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于所述的藥學上可接受的鹽是野黃芩苷元衍生物(1)與鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、苯甲酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、擰檬酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸的鹽。4.如權利要求1~3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于化合物的制備包括如下步驟-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>以野黃芩苷元為起始原料，在溶劑中，經酸催化(也可不用酸催化)下與甲醛和有機胺(包括伯胺、仲胺、氨基酸及其酯)發生Mannich反應，所得產物經重結晶或柱層析純化，得野黃芩苷元8位Mannich堿衍生物；再與合適的酸成鹽，即得野黃芩苷元衍生物鹽。5.如權利要求4所述的野黃芩苷元衍生物(I)或其藥學上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Maimich反應所用溶劑為乙醚、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、+HCHO+R,R2NH二甲基亞砜、水、C,C6脂肪醇、二氯甲烷、氯仿、C廣C8脂肪酮、苯、正庚垸、甲苯、吡啶或上述兩種溶劑的混合物；Mannich反應所用酸催化劑為各種質子酸或Lewis酸；反應所用甲醛為甲醛水溶液、三聚甲醛、多聚甲醛、二甲氧基甲烷；反應所用有機胺包括有機伯胺、有機仲胺、氨基酸及其酯；野黃芩苷元與甲醛和有機胺的摩爾投料比為1.0:1.0~5.0:1.0~5.0;縮合反應溫度為0200°C;縮合反應時間為272小時。6.如權利要求1所述的野黃芩苷元衍生物及其藥學上可接受的鹽的用途，在制備抗腫瘤藥物中的應用。全文摘要本發明涉及一類新型的野黃芩苷元衍生物(I)，以及它的制備方法和用途。藥理實驗證明，這類化合物具有明顯的抗腫瘤活性，可用于制備抗腫瘤藥物中的應用。文檔編號A61K31/4025GK101337957SQ20081004587公開日2009年1月7日申請日期2008年8月22日優先權日2008年8月22日發明者貝吳,怡沈,勇鄧,鐘裕國申請人:四川大學