專利名稱::具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02及其制備方法、用途的制作方法
技術領域:
:本發明涉及生物
技術領域:
,特別是功能性乳酸菌的分離株及應用。技術背景對由酒精引起的肝損傷的保護研究,西歐國家側重在酒精急性中毒或酒精肝病的治療,以被動治療方法為主;東南亞國家包括我國,大部分研究出發點以解酒、醒酒為目的,而忽視了預防、調節這一重要環節。并且進入體內的藥物大多數要經過肝臟的轉化。肝病患者肝功能減退,許多藥物進入體內,勢必增加肝臟負擔。這些物質在肝中代謝又會進一步損傷肝臟,形成累積損傷過程,反而會進一步損害肝臟。乳酸菌具有調節生理活性,預防疾病發生以及安全性極高的特點。乳酸菌的酒精性肝損傷保護作用在于其具有抗氧化活性,預防肝臟脂質過氧化,有效清除肝損傷產生的有害自由基;具有抗大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的生長,維持腸道菌群平衡,減少內毒素生成和吸收,有效預防肝損傷時細菌易位和降低內毒素血癥的發生。發酵乳制品的肝損傷保護作用的強弱與其所使用的乳酸菌的種類密切相關。從眾多乳酸菌種篩選出適合生產肝損傷保護的菌種具有重要的意義。如將具有肝損傷保護作用的乳酸菌開發成保健食品,長期服用可預防、緩解和輔助治療肝損傷,這種方式必將為人們所接受。在食品向天然型和功能型發展的今天,生產功能性酸乳這種產品是乳酸菌制品發展的方向之一,酒精性肝損傷保護功能性乳酸菌產品的開發有較廣闊的前景,頗具有市場潛力。
發明內容本發明目的在于為了克服前述和其它缺點,發明一種具有酒精性肝損傷保護作用的乳酸菌——嗜熱鏈球菌grx02。本發明保藏于2008年5月28日,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址北京市朝陽區大屯路,中國科學院微生物研究所。保藏號為CGMCCNo:2525。經試驗本發明是一種功能性乳酸菌,特別在肝損傷保護方面具有功能特性,如將本發明嗜熱鏈球菌grx02開發成保健食品,長期服用可預防、緩解和輔助治療肝損傷。本發明的另一目的在于發明上述嗜熱鏈球菌grx02的制備方法包括以下步驟1)采用培養基從新疆民族傳統乳制品中分離獲得乳酸菌;2)篩選出具有抗氧化活性、抗致病菌特性和破壞內毒素能力的乳酸菌;3)通過動物實驗比較從經步驟2)篩選出的乳酸菌中篩選出對酒精性肝損傷具有保護功能的乳酸菌,即為嗜熱鏈球菌grx02。經過以上方法獲得的乳酸菌通過法國梅埃里公司API系列試劑條和16SrDNA序列測定所進行的鑒定,確定該菌株為嗜熱鏈球菌(&r印tococc^Aemwp//^),鑒定準確率均超過99%。本發明的第三目的是發明所述嗜熱鏈球菌grx02的應用可用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的食物。還可用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的發酵乳。本發明提供的菌株發酵的各種產物可起到保護酒精性肝損傷的作用,該菌株發酵的牛奶,獲得的經乳酸菌發酵的各種發酵乳產品、乳酸菌飲料產品等,都獲得了具有不同程度的保護酒精性肝損傷的特性。利用本發明菌株發酵脫脂牛乳或其它食品原料,經過干燥等加工處理,具有較好的穩定性和較長產品貨架期,還是用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的藥物組合物的較好選擇。長期服用可預防、緩解和輔助治療肝損傷,特別適合長期大量飲酒人員,用無任何毒副作用。圖1為嗜熱鏈球菌grx02革蘭氏染色顯微觀察圖。圖2為嗜熱鏈球菌grx02DNA的熒光圖譜。圖3為嗜熱鏈球菌grx0216SrDNA-PCR產物的熒光圖譜。圖4為對照組小鼠的肝切片的HE染色圖片(200倍)。圖5為模型組小鼠的肝切片的HE染色圖片(200倍)。圖6為藥物組小鼠的肝切片的HE染色圖片(200倍)。圖7為乳酸菌對照C8M組小鼠的肝切片的HE染色圖片(200倍)。圖8為嗜熱鏈球菌grx02組小鼠的肝切片的HE染色圖片(200倍)。具體實施方式本發明者試圖獲得新的嗜熱鏈球菌菌株。該菌株可以發酵牛乳表現出具有肝損傷保護的功能特性——抗氧化活性、抗致病菌特性、破壞內毒素能力。發明通過從新疆傳統乳制品中分離獲得的大量乳酸菌中利用研究抗氧化活性、抗致病菌特性的乳酸菌菌株。再通過細菌形態學、生理學和培養特征,并通過法國梅埃里公司API系列試劑條、菌株16SrDNA基因部分類聚序列進行分析鑒定,結果證實了本發明的菌株是嗜熱鏈球菌grx02。1.樣品來源本發明菌株來源于我國新疆民族傳統乳制品一酸馬奶。酸馬奶(Koumiss)是以新鮮馬奶為原料,經乳酸菌和酵母菌等微生物共同自然發酵形成的酸性低酒精含量乳飲料。2.樣品采集將樣品采集后放入事先準備好的緩沖溶液中,冷藏,2天之內對樣品進行分離。3.乳酸菌分離將新疆民族傳統乳制品酸馬奶樣品采用PTYG培養物于37"C培養24小時后。將該培養物涂布在PTYG瓊脂平板上,然后在37。C培養3天,挑取單菌落,并進一步純化,檢測細菌特征,如下文所述的革蘭氏染色如圖l所示。將分離獲得的菌株用含11%脫脂乳的培養物培養后,加入保護劑,凍干、保存在-18"C,然后用于各種檢測細菌特征的試驗。4.菌株的鑒定在生理生化基礎上進一步進行API鑒定及16SrDNA序列測定進行鑒定,上述細菌是嗜熱鏈球菌grx02。(1)使用法國梅埃里公司API系列鑒定試劑條進行糖發酵分析。在37°C,在厭氧條件下將嗜熱鏈球菌grx02在MRS瓊脂平板上培養48小時,然后用懸浮培養基將所得培養物懸浮,懸浮液的濁度與McFarland2的相同。然后,將該培養細胞接種到API50CHL試劑條中,在其上層覆蓋一層無菌石蠟,以便檢測對49種糖的發酵能力。使用API識別軟件程序分析了糖發酵能力。結果顯示,該菌株的糖發酵能力與嗜熱鏈球菌類似(表l),符合率為96.3%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(2)菌株16SrDNA序列鑒定。采用細菌基因組DNA小量抽提試劑盒,按照說明進行操作,所提嗜熱鏈球菌grx02基因組DNA電泳條帶清晰,說明基因組DNA完整性較好可用于PCR等分子生物學操作(如圖2所示)。以基因組DNA作為模板,采用50pl反應體系進行PCR擴增,其中模板DNA5|il(大約100ng),2.5mMdNTP4^1,10xbuffer5^1,10pmol上下游引物各1.5^1,Taq酶1.5U,Mg2+3^1,以ddH20補至50W。PCR循環參數為94°C預變性5min;94。C變性lmin,64。C退火45s,72。C延伸lmin,循環35次;72°C延伸8min。吸取PCR產物5^1與l^ilLoadingbuffer混合,用1.0%瓊脂糖凝膠電泳,電壓為80V。電泳結束后用溴化乙錠(EB)染色20-30min,拍照。可見約1500bp的條帶即為目標條帶(如圖3所示)。測序工作由上海生工生物工程技術服務有限公司完成,測序結果嗜熱鏈球菌grx02的16SrDNA序列長度為1456bp。與Genbank中發表的序列比對,本發明菌株以同源性高達99.65%被證實屬于嗜熱鏈球菌。API鑒定與16SrDNA序列測定結果一致,本發明菌株為嗜熱鏈球菌".f/ze/TwopMws)grx02。5.耐酸特性在肉湯培養基中,按1:1與11%脫脂乳培養基混合,用10mol/L的HC1調節pH值,pH值分別調整為l.O、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5。然后接種3%嗜熱鏈球菌grx02培養液,37'C厭氧培養2天。結果發現嗜熱鏈球菌grx02在pH值2.0時37i:培養48h活菌數量為10"cfli/mL。表2本發明嗜熱鏈球菌grx02的耐酸特性<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>6.耐膽鹽特性具體是,為了研究菌株的抗膽汁能力,在100mL、11%的脫脂乳中加入豬膽鹽,使膽汁的濃度分別為1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0°/。、3.5°/。和4.0%,然后將lmL(109cfU/mL左右)的嗜熱鏈球菌grx02培養物接種于這些脫脂乳中,分別厭氧培養2天。然后用保存在4'C的MRS肉湯培養物以10倍逐級稀釋培養液,之后將稀釋液涂布到平扳上厭氧培養,檢測活細胞數。表3本發明嗜熱鏈球菌grx02的耐膽汁特性<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>膽汁濃度分別為1.0%2.5%的脫脂乳中細菌37-C培養2天時活菌數量均在105-8cfU/mL的范圍內;膽汁濃度為3.0%和3.5%的脫脂乳中細菌的數量均為103—5cfU/mL;膽汁濃度為4.0%的脫脂乳中經過2天培養活菌的數量仍能超過102cfu/mL,證明本發明菌株對膽汁具有抗性。7.抗氧化特性(1)SOD活性具體是,經三次活化的嗜熱鏈球菌grx02按3。/。的接種量接種于15mL,11%脫脂乳中,在37'C進行培養,發酵液在4'C,3500rpm條件下離心20min。取上清液,調pH到6.0后,采用鄰苯三酚自氧化法測定SOD活性。從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,SOD活性大于25U/mL的菌株數占15.38%,小于20U/mL的菌株數占38.46%,嗜熱鏈球菌grx02的SOD活性明顯高于其它菌株,其活性含量能達到28.77U/mL。(2)清除DPPH自由基能力具體是,經三次活化的嗜熱鏈球菌grx02按3%的接種量接種于15mL,11%脫脂乳中,在37"C進行培養,菌株發酵液在4-C,3500rpm條件下離心20min后,取上清液,與95%的乙醇按體積比稀釋成不同百分濃度,將不同稀釋濃度的菌株發酵上清液及等體積濃度為30mg/LDPPH溶液加入同一具塞試管中,搖勻,30min后用95%乙醇作參比測定其吸光度,計算清除率。發酵液上清清除DPPH'能力均隨著濃度的升高其清除能力增強,發酵液濃度與DPPH-清除率呈線性關系。從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,清除50。/。DPPH-時,所需消耗的發酵液濃度小于3.40%的菌株數占11.54%,所需消耗的發酵液濃度大于3.60%的菌株數占61.54%。嗜熱鏈球菌grx02的清除DPPH,能力明顯高于其它菌株,所需消耗的grx02發酵液濃度為3.34%。(3)總抗氧化能力具體是,經三次活化的嗜熱鏈球菌grx02按3%的接種量接種于15mL,11%脫脂乳中,在37。C進行培養,菌株發酵液在4'C,3500rpm條件下離心20min后,取上清液,調pH在6.0。按試劑盒說明書(南京建成生物工程有限公司)測定總抗氧化能力(T-AOC)。從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,總抗氧化能力大于15U/mL的菌株數占15.38%,小于10U/mL的菌株數占69.23%,嗜熱鏈球菌grx02總抗氧化能力明顯高于其它菌株,其抗氧能力能達到17.35U/mL。綜上所述,本發明嗜熱鏈球菌grx02具有較高的抗氧化活性。8.對致病菌的抑制特性(1)對大腸桿菌抑制能力采用單層瓊脂平板擴散法。將埃希氏大腸桿菌接種于液體LB培養基中,37。C振蕩培養4h后,平板計數法計活菌數,4"C冷藏,備用。通過稀釋控制大腸桿菌活菌數在106cfli/mL,此濃度易致病。分別吸取大腸桿菌菌液O.lmL于固體LB培養基平板上,用無菌涂抹棒涂布均勻,于超凈工作臺內通無菌空氣,放置lh待表面的菌液固定在平板的表面后打孔,孔的直徑10mm,孔深3mm,將菌株樣液0.2mL(108cfo/mL)注入孔內,于37'C培養8h觀察結果、測定抑菌圈直徑。每個平板三個孔,做兩個平板平行,用于分析。從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,抑菌直徑大于22mm的菌株數占26.92%,小于20mm的菌株數占46.15%,嗜熱鏈球菌grx02抑制大腸桿菌能力比較好,抑菌直徑在23mm左右。(2)對沙門氏菌抑制能力將傷寒沙門氏菌接種于液體LB培養基中,37。C培養6h后,平板計數法計活菌數,4'C冷藏,備用。操作步驟同上。從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,抑菌直徑大于24mm的菌株數占30.77%,小于22mm的菌株數占46.15%,嗜熱鏈球菌grx02抑制沙門氏菌能力比較好,抑菌直徑在26mm左右。綜上所述,本發明嗜熱鏈球菌grx02具有較強的抗致病菌能力。9.在共培養時破壞內毒素特性將0.2mL濃度為10eu/mL的內毒素與O.lmL(108cfh/mL)菌液一起接于MRS培養液中,使內毒素終濃度在leu/mL,將leu/mL的內毒素與乳酸菌在37。C共培養,在6h、12h、24h時利用鱟試劑盒(上海市醫學化驗所)測定內毒素含量,觀察乳酸菌不同培養時間破壞內毒素能力。與內毒素共培養條件下,從新疆共分離獲得的26株乳酸菌中,相對于陽性對照OD值0.86左右,菌株破壞內毒素至OD值下降到0.30的菌株數占19.23%,嗜熱鏈球菌grx02可明顯破壞內毒素,隨著培養時間的延長破壞內毒素的能力有不同程度的提高,OD值能下降到0.19。說明本發明嗜熱鏈球菌grx02具有較強的破壞內毒素能力。10.保護酒精肝損傷特性獲得的經該菌株發酵的乳產品,經小鼠急性酒精性肝損傷實驗,獲得了保護肝損傷的特性。昆明種小鼠卯只,雌雄各半,體重2224g,購自南京江寧湯山青龍山實驗動物中心提供;合格證SCXK(蘇)2002-0018。標準配方桿狀飼料喂養,自由進水。小鼠飼養及實驗均在本校醫學院清潔級實驗動物室內進行。將90只小鼠隨機分為9組空白對照組、模型組、陽性藥物組、乳酸菌對照組C8M、嗜熱鏈球菌grx02組,乳酸菌組分高劑量組、中劑量組、低劑量組,每組10只。空白對照組自由進食;模型組采用蒸餾水10mL/kg連續灌胃10d,與末次灌胃lh后灌50%酒精12mL/kg;陽性藥物組采用東寶肝泰10mL/kg(含東寶肝泰0.08g/mL)灌胃,連續10d與末次灌胃lh后灌50%酒精12mL/kg;乳酸菌高、中、低劑量三組釆用乳酸菌10.0mL/kg(108、107、106cfU/mL)連續灌胃10d,與末次灌胃lh后灌50。/。酒精12mL/kg。灌酒后,動物造模后出現腸道受損,二便失常,毛發漸干枯無光澤,精神萎靡不振等表現,各乳酸菌組的上述一般狀況較模型組明顯改善,可能與乳酸菌具有保護腸道作用有關。禁食12h后,摘眼球取血,解剖取肝臟測定各指標。結果如表4,表5。表4嗜熱鏈球菌grx02對小鼠血清中ALT、AST、TG、ALB、TP的影響(n=10,f±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與正常空白組比較AP<0.05,AAPO.01;與酒精模型組比較*P<0.05,**P<0.01表5嗜熱鏈球菌grx02對小鼠肝臟中MDA、GSH、SOD、ADH的影響(n=10,7±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注同表4。由表4、5可看出模型組與空白組的各指標比較,具有顯著性差異(P<0.05)說明模型建立成功。酒精刺激將使肝細胞受到一定程度的損傷,ALT、AST含量明顯上升,而嗜熱鏈球菌gnc02有效地降低了肝細胞的損傷(P<0.05),并且,效果明顯優于乳酸菌對照組C8M。嗜熱鏈球菌grx02的總蛋白含量、白蛋白含量明顯高于模型組(P<0.05),但劑量關系不明確。嗜熱鏈球菌grx02拮抗了酒精所致抗氧化酶活性的降低,抑制了自由基的產生,SOD活性明顯高于模型組(P<0.01),MDA含量明顯低于模型組(P<0.01),減少了酒精所致肝臟GSH的耗竭,GSH活性明顯高于模型組(P<0.01)與藥物組無顯著差異。并且,效果明顯優于乳酸菌對照組CsM。取各組小鼠肝臟左葉同一位置評價乳酸菌在體內的護肝效果,小鼠病理切片如圖4至8所示空白對照組中央靜脈位于肝小葉中,肝小葉結構清晰,肝細胞索結構完整,呈放射狀,肝細胞胞質半滿,無網狀結構,核仁清晰,雙核細胞較多,無炎性浸潤。酒精模型組肝小葉界限不清,肝血竇模糊變窄,肝細胞胞質渾濁,肝細胞腫脹變形,有網狀結構,可見度不清晰,少數核固縮,較多炎性細胞浸潤。藥物組較模型組為好,輕度炎癥細胞浸潤,核固縮輕微。乳酸菌對照組C8M較少炎性細胞浸潤,少數肝細胞腫脹,輕度損傷。嗜熱鏈球菌grx02組基本接近正常,雙核細胞較多。ll.菌株保藏將本發明菌株于2008年5月28日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址北京市朝陽區大屯路,中國科學院微生物研究所。保藏號為CGMCCNo:2525。應用示例1、含嗜熱鏈球菌grx02的酸乳的制作方法將鮮乳加熱到50'C以上,加入6%的白砂糖攪拌至完全溶解,預熱到6065°C,20Mpa壓力均質,9(TC左右殺菌5-8分鐘,冷卻至4245°C,接種嗜熱鏈球菌grx02。接種數量為2~3%。4042'C發酵至pH值為4.24.5,冷卻、冷藏,即制成凝固型酸乳。發酵結束后經攪拌,添加果醬果汁等,冷藏,即制成含活性嗜熱^l球菌grx02酸乳。2、含嗜熱鏈球菌grx02乳酸菌飲料的制作方法按應用實施例1制備好酸乳,將酸乳用殺菌并冷卻的水、糖漿、乳化穩定劑等混合物稀釋3_4倍左右,制成可直接飲用的含活性嗜熱鏈球菌grx02的乳酸菌飲料。3、含嗜熱鏈球菌grx02冰淇淋的制作方法按應用實施例1制備好酸乳,冰淇淋原料配比如表5所示。表51000kg冰淇淋配方<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>將除酸乳以外的其它物料混合,預熱到6065。C,采用20Mpa30Mpa進行均質,然后在80°C/20s殺菌,冷卻到4050°C,與酸乳混合,采用20Mpa30Mpa進行均質,在2'C4"C時,老化時間6h,經凝凍后經過硬化的為硬質冰淇淋,不經硬化的為軟質冰淇淋。4、含嗜熱鏈球菌grx02粉末狀食品的制作方法將嗜熱鏈球菌grx02酸乳冷凍至-40°C-60°C,經干燥,至含水量為3%-5%,壓碎成粉末狀,可將粉末狀產品加入奶粉、低聚糖、麥芽糊精、風味劑等制成粉末狀或片塊狀產品,用于日常食用。以上本發明提供的菌株發酵的各種產物可起到保護酒精性肝損傷的作用,該菌株發酵的牛奶,獲得的經乳酸菌發酵的各種發酵乳產品、乳酸菌飲料產品等,都獲得了具有不同程度的保護酒精性肝損傷的特性。5、含嗜熱鏈球菌grx02藥物組合物的制作方法及病例防治示例原料配比如表6所示。表6原料配料表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>按照比例將脫脂奶粉、乳糖、酵母粉、蛋白胨以純凈水混合均勻,預熱到6065°C,20Mpa壓力均質,90。C左右殺菌2030分鐘,冷卻至4243。C,接種3。/。嗜熱鏈球菌grx02發酵齊IJ,42。C發酵至pH值為4.14.5,離心,冷凍干燥至水份含量小于3%。即制備成嗜熱鏈球菌grx02冷凍干燥物,將冷凍干燥物與麥芽糊精等量混合后裝入膠囊中,即制成含嗜熱鏈球菌grx02的藥物組合該產品長期服用可預防、緩解和輔助治療肝損傷,特別是長期大量飲酒人員。長期服用無任何毒副作用,每天服用1—2次,每次至少含本發明活菌數量超過107個。<110>揚州大學<120>具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02及其制備方法、應用<160>1<210>1<211>1456<212>DNA<213>乳酸菌<220><223>從新疆民族傳統乳制品中分離<400>1gggattggcgcgtgctatacatgcaagtagaacgctgaagagaggagcttgctcttcttg60gatgagttgcgaacgggtgagtaacgcgtaggtaacctgccttgtagcgggggataacta120ttggaaacgatagctaataccgcataacaatggatg狄acatgtcatttatttgaaaggg180gcaattgttccactacaagatggacctgcgttgtattagctagtaggtgaggtaatggct240cacctaggcgacgatacatagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagac300acggcccagaetcctecgggaggcagcagtagggaatcttcggc幼tgggggcaaccctg360accgagcaacgccgcgtgagtgaagaaggttttcggatcgtaaagctctgttgtaagtca420agaacgggtgtgagagtggaaagttcacactgtgacggtagc"accagaaagggacggc480taactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtcccgagcgttgtccggatttattgg540gcgtaaagcgagcgcaggcggtttgataagtctgaagttaaaggctgtggctcaaccata600gttcgctttggaaactgtcaaacttgagtgcag肌ggggagagtggaattccatgtgtag660cggtgaaatgcgtagatatatggaggaacaccggtggcgaaagcggctctctggtctgta720actgacgctgaggctcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccac780gccgtaaacgatgagtgctaggtgttggatcctttccgggattcagtgccgcagct肌cg840cattaagcactccgcctggggagtacgaccgcaaggttgaaactcaaaggaattgacggg900ggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcg肌gaaccttaccag960gtcttgacatcccgatgctatttctagagatagaaagttacttcggtacatcggtgacag1020gtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggtt肌gtcecgcaacgagc1080gcaacccctattgttagttgccatcattcagttgggcactctagcgagactgccggtaat1140aaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacac1200acgtgctacaatggttggtacaacgagttgcgagtcggtgacggcgagctaatctcttaa1260agccaatctcagttcggattgtaggctgcaactcgcctacatgaagtcggaatcgctagt1320aatcgcggatcagcacgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtca1380ccccacgagagtttgtaacacccgaagtcggtgaggtaaccttttggagccagccgccta1440aggtggacagatttgg權利要求1、具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02,其特征在于,保藏號為CGMCCNo2525。2、如權利要求1所述具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02的制備方法,其特征在于包括以下步驟1)采用培養基從新疆民族傳統乳制品中分離獲得乳酸菌;2)篩選出具有抗氧化活性、抗致病菌特性和破壞內毒素能力的乳酸菌;3)通過動物實驗比較從經步驟2)篩選出的乳酸菌中篩選出對酒精性肝損傷具有保護功能的乳酸菌,即為嗜熱鏈球菌grx02。3、如權利要求1所述具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的食物。4、如權利要求1所述具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的發酵乳。5、如權利要求1所述具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02用于制備具有酒精性肝損傷保護功能的藥物組合物。全文摘要具有酒精性肝損傷保護功能的嗜熱鏈球菌grx02及其制備方法、用途,涉及生物
技術領域:
,特別是功能性乳酸菌的分離株及應用。先采用培養基從新疆民族傳統乳制品中分離獲得乳酸菌;再篩選出具有抗氧化活性、抗致病菌特性和破壞內毒素能力的乳酸菌;再通過動物實驗比較從篩選出的乳酸菌中篩選出對酒精性肝損傷具有保護功能的乳酸菌,即為嗜熱鏈球菌grx02。本發明是一種功能性乳酸菌,特別在肝損傷保護方面具有功能特性,如將本發明嗜熱鏈球菌grx02開發成保健食品,長期服用可預防、緩解和輔助治療肝損傷。文檔編號A61P1/16GK101328469SQ20081002301公開日2008年12月24日申請日期2008年7月9日優先權日2008年7月9日發明者張宜鳳,朱小紅,楊振泉,王慧晶,顧瑞霞申請人:揚州大學