專利名稱：：一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物的制作方法
技術領域：
：本發明屬醫藥領域，涉及一種抗菌藥物的新劑型，特別涉及一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物。
背景技術：
：陰道炎等婦科疾病給女性在工作和生活方面帶來了諸多不便，對身體造成了巨大損害，主要分為細菌性、霉菌性、滴蟲性、念珠菌性陰道炎四種。同時，動物的子宮內膜炎及陰道炎也給養殖業帶來了巨大的經濟損失，其主要致病菌有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌等需氧菌及脆弱擬桿菌、壞死桿菌等厭氧菌。子宮內膜炎多為細菌混合感染，且多發于產后以及陰道炎引起的繼發感染，導致母畜的流產、不孕、不育等，給養殖業造成了巨大的經濟損失。目前，臨床上由于抗生素的濫用，使得許多致病菌產生了耐藥株。同時，由于診斷水平的限制，在臨床上無法快速、準確地診斷出這些婦科、產科疾病的具體致病菌，從而造成了錯誤用藥，不能及時、有效地治療疾病。例如，由厭氧菌引起的子宮內膜炎，由于臨床醫師未能即時、準確地診斷出該致病菌，而使用常規抗生素藥物，從而不能及時有效地治療疾病。替硝唑屬硝基咪唑類藥物，又稱甲硝磺酰咪唑、甲硝乙基磺酰咪唑、磺甲硝咪唑，化學名1-[2-(乙基磺酰基)乙基]-2-甲基-5_硝基-1H咪唑。抗厭氧菌譜廣，對大多數專性厭氧菌，如脆弱擬桿菌、梭狀芽胞桿菌、真桿菌、梭形桿菌、陰道嗜血桿菌、消化球菌、消化鏈球菌、韋榮球菌等以及滴蟲、阿米E原蟲、梨形鞭毛蟲等均有抑制作用。目前，替硝唑已有片劑、膠囊、栓劑、凝膠劑等劑型。但是，這些劑型在臨床上主要用于治療女性陰道炎、宮頸炎等，而對于大型家畜在子宮投藥時則有諸多不便。例如由于替硝唑栓劑或凝膠劑為固態，而患畜由于子宮發炎對于外界刺激較為敏感，因此在投藥時，對患畜造成了較多刺激。納米銀即粒徑為1nm100nm的銀單質，由于其抗菌譜廣、抗菌活性強、不易產生耐藥性等優點，同時具有促進創傷修復的功能，在臨床抗菌領域倍受青睞。據報道，納米銀在0.05mg/L時即可殺死大多數致病菌。替硝唑和納米銀分別屬于抗厭氧菌和需氧菌藥物，且抗菌譜廣。然而由于替硝唑難溶于水，溶解度較低，難以快速發揮其治療作用。例如替硝唑栓劑在置入生殖道崩解后，由于其難溶性使得該藥無法與致病菌充分接觸，不能充分發揮其抗菌作用，且單用該藥根本無法治愈子宮內膜炎等疾病。同時納米銀易發生團聚，而納米材料的生物活性與粒徑大小有著密切聯系，因此在一定程度上減弱了其治療效果。上述缺點限制了這兩種藥物在臨床上的應用。
發明內容針對上述現有技術存在的缺陷與不足，本發明的目的在于提供一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，能有效治療由需氧菌及厭氧菌引起的陰道炎、子宮內膜炎，促進創傷修復，減少這些疾病給人們帶來的痛苦。實現上述發明目的的技術方案是，一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，是由下述組份制成的(用量為質量份)替硝唑0.10份1.50份納米銀溶膠0.008份0.020份微乳基質96.92份99.6份輔料0.30份3.00份所述的微乳基質是由下述質量份的原料組成表面活性劑24.30份39.60份油相物質為茶油1.45份17.14份蒸餾水54.00份70.00份所述的表面活性劑是非離子型表面活性劑聚氧乙烯醚40氫化蓖麻油或Tween80和Span80的混合物；所述的油相為茶油、肉豆蔻酸異丙酯、乙酸乙酯或石蠟油中的一種；所述的輔料是二甲基亞砜。制備本發明藥物的配方優選質量(份)配比范圍是替硝唑0.40份1.00份納米銀溶膠優選0.010份0.020份微乳基質96.92份99.6份輔料0.30份3.00份所述的微乳基質是由下述質量份的原料組成表面活性劑28.30份35.60份油相1.67份16.67份蒸餾水58.00份68.00份。本發明藥物的最佳質量(份)配比是替硝唑0.60份，納米銀溶膠0.10份，輔料2.00份，表面活性劑27.00份，油相物質3.00，蒸餾水60.00份。所述的微乳基質中表面活性劑和油的質量比為12:11.5:1，優選9:14:1。本發明所選的二甲基亞砜作為一種溶劑，提高藥物的溶解度，且毒性極低。在制備過程中如果體系粘度較大，可以適當加熱和超聲乳化處理，有利于體系乳化和分散均勻。本發明的藥物與現有技術相比，具有以下優點1)本發明的藥物是由表面活性劑、助表面活性劑、油和水組成的透明的、各向同性的、熱力學穩定的分散體系，其作為藥物載體，具有增溶性、緩釋、滲透性好，同時具有一定的抗菌作用。2)本發明選用的替硝唑、納米銀分屬于抗厭氧菌和抗需氧菌藥物，二者復合后具有一定的協同作用。例如替硝唑復合納米銀微乳對厭氧菌-魏氏梭菌的最小抑菌濃度(MIC)為替硝唑-0.1mg/L、納米銀-0.004mg/mL。而單用替硝唑、納米銀作用于魏氏梭菌時其最小抑菌濃度分別為0.2mg/L和0.0275mg/L，該結果顯示它們復合后具有明顯的協同抗菌作用。所選微乳基質中各成分均無毒、無刺激性。而臨床上多數治療藥物具有刺激性，且需要幾種藥物的聯合用藥，從而增加了治療成本。因此將這兩種藥物通過微乳將其復合起來，一方面無需考慮致病菌的種屬問題，可直接用藥；另一方面也解決了納米銀容易團聚的問題，且不易產生耐藥株。從而為臨床快速治愈陰道炎、子宮內膜炎等疾病提供一種新的藥物。圖1是本發明替硝唑復合納米銀微乳的透射電鏡照片。.具體實施方式以下通實施例來進一步闡述本發明藥物的制備方法。實施例11)稱取各原料聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油24.00g、肉豆蔻酸異丙酯2.00g、二甲基亞砜(含替硝唑)1.37g、納米銀溶膠3.64g、蒸餾水54.OOg，備用；2)將聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油、肉豆蔻酸異丙酯、二甲基亞砜和納米銀溶膠攪拌混勻，作為油相；3)在常溫條件下迅速攪拌油相，同時緩慢滴加水相，不斷攪拌直至體系呈透明的液體，即是本發明的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物。實施例2組分含量聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油27.00g肉豆蔻酸異丙酯3.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.09g納米銀溶膠3.45g蒸餾水65.00g制備方法同實施例1實施例3組分含量聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油18.00g肉豆蔻酸異丙酯3.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.51g納米銀溶膠3.00g蒸餾水45.00g制備方法同實施例1實施例4組分聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油肉豆蔻酸異丙酯二甲基亞砜(含替硝唑)納米銀溶膠蒸餾水制備方法同實施例1實施例5組分聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油茶油二甲基亞砜(含替硝唑)納米銀溶膠蒸餾水制備方法同實施例1組分聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油茶油二甲基亞砜(含替硝唑)21.00g7.00g2.28g7.27g52.00g12.00g1.00g0.77g2.05g32.00g14.00g2.00g0.81g納米銀溶膠蒸餾水制備方法同實施例l實施例7組分聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻茶油二甲基亞砜(含替硝唑)納米銀溶膠一蒸餾水制備方法同實施例l實施例8組分聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油乙酸乙酯二甲基亞砜(含替硝唑)納米銀溶膠蒸餾水制備方法同實施例l實施例9組分2.20g30.00g12.00g6,00g1.04gg34.00g18.90g2.10g0.81g3.23g50.00g聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油16.00g乙酸乙酯4.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.71g納米銀溶膠2.18g蒸餾水40.00g制備方法同實施例1實施例10組分含量聚氧乙烯醚(40)氫化蓖麻油15.00g乙酸乙酯10.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.63g納米銀溶膠2.30g蒸餾水36.00g制備方法同實施例l實施例11組分含量Tween809.00gSpan801.00g石蠟油1.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.08g納米銀溶膠3.27g蒸餾水25.00g實施例12組分含量Tween808.00gSpan802.00g石蠟油2.00g二甲基亞砜(含替硝唑)1.20g納米銀溶膠3.31g蒸餾水25.00g實施例13組分含量Tween803.00gSpan803.00g石蠟油3.00g二甲基亞砜(含替硝唑)0.41g納米銀溶膠1.20g蒸餾水15.00g以下通過發明人給出的穩定性試驗、藥效觀察試驗來進一步闡述本發明所述藥物的有益效果。實施例1穩定性測定試驗以下是本發明替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物的穩定性測定，將樣品進行離心、光照、耐寒和耐熱處理檢測其穩定性，是否有分層和結晶析出。1.離心加速試驗對微乳穩定性的影響取制得的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物液適量于離心管中，密封管口,置離心機中，以4000r/min的轉速離心30min，微乳液仍保持澄清透明，未見替硝唑和納米銀析出及油水分層現象。2.光穩定性實驗將部分替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物和空白微乳裝入玻璃瓶中，密封置于日光下，室溫光照10d，于1d、3d、5d、10d取樣。結果表明，替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物顏色由黃色變為黃褐色，但仍保持澄清透明，無分層。空白微乳液無變化，保持原來無色狀態。3.溫度穩定性實驗取部分替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，分裝于幾個玻璃瓶中，密封之后置于4'C、25°C、40°C、6(TC條件下留樣考察30d，每隔5d取樣觀察。結果表明，該微乳此四種溫度條件下均保持澄清透明的外觀，未破乳、分層和結晶析出。在低溫4匸被凍成冰狀，置于3(TC水浴使之溶化后，很快恢復原來澄清透明的狀態，未見分層、破乳和結晶析出，穩定性好。本發明的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，粒徑lnm100nm，見圖l。它是由輔料二甲基亞砜對替硝唑藥物增溶的結果，替硝唑藥物的含量達到.10份1.50份。該藥物體系穩定，呈黃色；粘度可以根據需要調整，比表面大，表面張力低，能使藥物很好的附著于發病部位，干擾細菌內部DNA的合成并能與氧代謝酶(-SH)結合，而發揮抑菌或殺菌作用。該體系在低溫4"C下長期放置沒有結晶析出，可見是一種穩定的藥物劑型，而且制備方法簡單、安全性高，用于臨床治療陰道炎、子宮內膜炎等疾病。試驗例2本發明藥物的臨床藥效觀察120頭奶牛有以下癥狀有時拱腰努責，從陰門流出少量粘性或粘膿性分泌物，有的含白色組織碎片，呈污紅或棕黃色，且有臭味，臥下時排出量增多；無全身癥狀或體溫略有升高，精神沉郁，食欲下降，反芻、泌乳減少；直腸檢查可感知子宮角變粗，子宮壁增厚、稍硬、敏感，收縮反應減弱；陰道檢査子宮頸外口腫脹、充血、稍有開張，陰道底部蓄積有滲出物，確診為子宮內膜炎，隨機分為8組。0.4份、0.6份、0.8份替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物治療組各15例；替硝唑栓劑、0.2%。納米銀溶膠、金乳康、醋酸洗必泰栓對照組各15例；生理鹽水對照組15例。8組病牛年齡、體重、營養狀況等無顯著差異。受試藥物0.4份、0.6份、0.8份替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物；替硝唑栓劑、0.2%。納米銀溶膠、金乳康、醋酸洗必泰栓；生理鹽水。2.治療方法用藥前，首先對病牛進行直腸適度按摩，促使子宮收縮，排出子宮內容物。之后對陰門及陰門周圍進行消毒，并用生理鹽水沖洗子宮，繼續按摩直腸，使子宮排盡內容物。各受試藥物均采用子宮內直接投藥，每天一次，連用3天。陽性對照組用替硝唑栓劑、0.2%。納米銀溶膠、金乳康、醋酸洗必泰栓；陰性對照組用生理鹽水；治療組分別用0.4份、0.6份、0.8份替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物。3.療效判定標準當母牛性周期恢復正常，用藥后第一次發情時陰門內排出的黏液呈蛋清樣透明，直腸檢査質地正常，收縮反應良好為有效；在治療后23個發情期內配種受孕者為治愈；經12個療程后母牛發情期恢復正常，發情時陰門內排出的內容物稍混濁，子宮體積變小，收縮反應良好者為好轉。4.結果見表1。表1替硝唑復合納米銀微乳對奶牛子宮內膜炎的治療作用<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結果表明，替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物高(0.8份)、中(0.6份)劑量組治愈率明顯高于對照組。權利要求1.一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，其特征在于它是由下述質量份的原料組制成替硝唑0.10份～1.50份納米銀溶膠0.008份～0.020份微乳基質96.92份～99.6份輔料0.30份～3.00份所述的微乳基質是由下述質量份的原料制成表面活性劑24.30份～39.60份油相物質為茶油1.45份～17.14份蒸餾水54.00份～70.00份所述的表面活性劑是非離子型表面活性劑聚氧乙烯醚40氫化蓖麻油或Tween80和Span80的混合物；所述的油相為茶油、肉豆蔻酸異丙酯、乙酸乙酯或石蠟油中的一種；所述的輔料是二甲基亞砜。2.根據權利要求1所述的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，其中各原料的優選質量份是替石肖唾0.40傷、1.00份纟內米銀溶月交tt選0.010份0.020傷、微乳基質96.92份99.6份輔料0.30份3.00份所述的微乳基質是由下述質量配比的原料組成表面活性劑28.30份35.60份油相1.67份16.67份蒸餾水58.00份68.00份。3.根據權利要求1所述的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，其中各原料的最佳質量份是替硝唑0.60份，納米銀溶膠O.IO份，輔料2.00份，表面活性劑27.00份，油相物質3.00，蒸餾水60.00份。4.根據權利要求l所述的替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，其特征是:若表面活性劑為Tween80和Span80的混合物時油相為石蠟油。全文摘要本發明公開了一種替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物，它是以0.10份～1.50份替硝唑和0.008份～0.020份納米銀為藥用成分、96.92份～99.67份微乳基質和0.30份～3.00份輔料按一定比例混合攪拌均勻，即得替硝唑復合納米銀微乳抗菌藥物。本發明外觀呈黃色，顆粒粒徑1nm～100nm，穩定性好，既能干擾菌體DNA的合成，同時能與氧代謝酶(-SH)結合中斷其呼吸代謝過程，殺死需氧及厭氧致病菌，并能促進創傷的恢復，從而快速、有效地治愈陰道炎、子宮內膜炎等疾病，且制備簡單、安全性高。文檔編號A61K33/24GK101229126SQ20081001737公開日2008年7月30日申請日期2008年1月23日優先權日2008年1月23日發明者歐陽五慶,許利耕申請人:西北農林科技大學