用于治療癌癥的方法

專利名稱：：用于治療癌癥的方法
技術領域：
：本發明涉及癌癥的治療及更具體地涉及用于治療結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤(Desmoidtumor)、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的方法。現有技術以下為現有技術的列表，認為其對于描述本發明領域的技術狀態是相關的。將通過在括號中指出它們在下文列表中的編號，引證此處這些文獻。1.Bedwell,D.M.爭乂(1997).SuppressionofaCFTRprematurestopmutationinabronchialepithelialcellline(支氣管上皮細胞系中CFTR提前終止突變的抑制)Nat.Med.3:1280-1284。2.Wilschanski,M.,Yahav,Y.,Yaacov,Y.,Blau,H.,Bentur,L.,Rivlin,J.,Aviram,M.,Bdolah-Abram,T.,Bebok,Z.,Shushi,L.,Kerem,B.和Kerem,E.(2003).Gentamicin-inducedcorrectionofCFTRfunctioninpatientswithcysticfibrosisandCFTRstopmutations(在患有嚢性纖維化和CFTR終止突變的患者中，慶大霉素誘發的CFTR功能修正).N.Engl.J.Med.15:1433隱1441。3.Barton-Davis,E.R.,Cordier，L.,Shoturma,D.I.,Leland,S.E.和Sweeney,H.L.(1999).Aminoglycosideantibioticsrestoredystrophinfunctiontoskeletalmusclesofw血mice(氨基糖香類抗菌素恢復州血小鼠的骨縣月幾抗肌萎縮蛋白功能).J.Clin.Invest.104:375-38。4.Politano,L.,Nigro,G.,Nigro,V.,Piluso,G.,Papparella,S.,Paciello,O.牙口Comi,L.L(2003).GentamicinadministrationinDuchennepatientswithprematurestopcodon:Preliminaryresults(在具有提前終止密碼子的4Duchenne型患者中的慶大霉素施用初步結果).ActaMyol.1:15-21。5.Kerem,E.(2004).Pharmacologictherapyforstopmutations:howmuchCFTRactivityisenough(對于終止突變的藥理療法多少CFTR活性才足夠).Curr.Opin.Pulm.Med.6:547-52。6.Laurent-Puig,P.,Beroud,C.和Soussi,T(1998).APCgene:databaseofgermlineandsomaticmutationsinhumantumorsandcelllines(APC基因在人類腫瘤和細胞系中的生殖細胞突變和體細胞突變數據庫).NucleicAcidsResearch,26:269-270。7.Thompson,J.,Pratt,c.a.和Dahlberg,A.E.(2004).Effectsofanumberofclassesof50Sinhibitorsonstopcodonrea她roughduringproteinsynthesis(在蛋白合成期間，許多類別的50S抑制劑對終止密碼子通讀的作用).Antimicrob.AgentsChemother12:4889-4891。8.Atkinson,J和Martin,R.(1994).Mutationstononsensecodonsinhumangeneticdisease:implicationsforgenetherapybynonsensesuppressortRNAs(人類遺傳病中的無義密碼子的突變暗示通過無義抑制劑tRNA應用到基因療法).NucleicAcidsRes.8:1327-1334。9.美國專利第5,324,720號10.美國專利申請公布第2005/0171032號11.Alman,B.A.，Li，C.Pajerski,M.E.,Diaz畫Cano,S.和Wolfe,H.丄(1997).Increasedbeta-cateninproteinandsomaticAPCmutationsinsporadicaggressivefibromatoses(desmoidtumors)(在散發性侵襲性纖維瘤病(韌帶樣纖維瘤)中增加的p-鏈蛋白和體細胞APC突變).Am.J.Pathol.151:329-334。12.Bohm,M.,Kirch,H.,Otto,T.,Rubben,H.和Wieland,I.(1997).DeletionanalysisattheDEL-27,APCandMTSllociinbladdercancer:LOHattheDEL-27locuson5pl3-12isaprognosticmarkeroftumorprogression(在膀胱癌中DEL-27、APC和MTS1基因座的缺失分析位于5pl3-12的DEL-27基因座的LOH是腫瘤進展的預后標記物).Int.J.Cancer74:291-295。13.Oh,S,T.,Yoo,N.J.和Lee,J.Y.(1999).Frequentsomaticmutationsfothebeta-cateningeneinintestinal-typegastriccancer(腸型胃癌中的卩-鏈蛋白基因的頻繁體細胞突變).CancerRes.59:4257-4260。14.Wills,J.C.等人(2002)."Hotspots"canbumyou("熱點"會灼傷你),Am.J.Gastroenterology97(3):757-758。15.Fearnhead等人(2001).TheABCofAPC(APC的ABC).Hum.Mol.Genet.10:721-723。16.Crabtree等人(2003).Oncogene22:4257-4265。17.Albuquerque等人(2002).Hum.Mol.Genet.11:1549-1560。
背景技術：
：結腸直腸癌(CRC)是大腸癌癥且在男性和女性中為第三大常見癌癥，占所有癌癥的13%。約20%患者在診斷時患有轉移性疾病，且所有結腸直腸癌患者的50。/。將發展轉移灶并最終死于該疾病。僅在美國，約131,000人將被診斷為患有結腸直腸癌且每年將死亡56,000人。在普通人群中的終生CRC風險為5%，但此數字隨年齡急劇上升到70歲的年齡，約一半西方人群將發展腺瘤。所有CRC病例中有近85。/。在起源上為偶發性("體細胞CRC")而其余作為遺傳性基因突變("遺傳性CRC")的結果發生。結腸直腸癌源自腺瘤，其是在結腸中發育異常但非惡性的前驅病變。向惡瘤的進展發生于多個體細胞突變的積累過程中，最終導致惡性轉化并形成侵害性癌癥。在向CRC進展中突變的最關鍵基因中的一個為腺瘤性結腸息肉病(APC)肺瘤抑制物。因為爿尸C突變可在腺瘤-惡瘤順序中非常早地被檢測，已經建議將APC蛋白用作結腸直腸致癌作用的守門人，這意味著APC功能缺失與未來向惡性腫瘤進展非常緊密地相關。所有偶發性和遺傳性結腸直腸肺瘤中有約85%顯示了APC功能缺失。除了在遺傳性CRC和體細胞CRC中的作用，APC中的突變也已經在其它癌癥類型如韌帶樣纖維瘤(侵襲性纖維瘤病(fibromatose))(ll)、膀胱癌(12)、胃癌(13)和乳腺癌(14)中^皮闡明。APC是具有許多良好表征的功能區并與許多其它蛋白相互作用的大(312kDa)蛋白。然而，它在腫瘤發生中的關鍵作用似乎在于控制(3-鏈蛋白(卩-catenin)的細胞水平，因此其作為Wnt信號通路的負調節物起作用。當APC突變時，Wnt信號通路的效應蛋白(3-鏈蛋白積累并轉移到細胞核中。到達那里后，它結合到Tcf/LEF轉錄因子且引發范圍廣泛的基因的轉錄。(3-鏈蛋白的下游轉錄激活靶包括許多在結腸直腸惡瘤的發育和進展中涉及的基因，包括細胞周期蛋白Dl和致癌基因c-wyc。除了它在Wnt信號通路中的作用，APC功能缺失導致在缺乏APC的癌細胞中的細胞-細胞粘附的破壞。在CRC中的幾乎所有(95。/。)J尸C突變為產生具有異常功能的截短的蛋白產物的無義突變或移碼突變。爿尸C突變位點通常不隨機；存在對于APC-截短突變的良好表征的熱點。與在CRC中相同，數目龐大的其它人類遺傳性疾病產生自導致由突變基因編碼的蛋白合成的提前(premature)終止的突變，且治療這些疾病的一種方式是補充具有野生型拷貝的突變基因。若干年來，已知氨基糖苷類抗菌素可通過允許氨基酸結合到終止密碼子的位置，從而允許翻譯繼續直到轉錄的正常結束而抑制疾病-相關的提前終止突變。近期研究已經顯示氨基糖苷類可在哺乳動物轉錄子中，在體外及體內兩種情況下，將提前終止突變抑制至恢復生理上相關量的功能性蛋白的水平(l-5)。先前以常染色體隱性疾病嚢性纖維化(CF)及在具有無義突變的Duchenne型肌肉萎縮癥(DMD)患者中闡述了此方法的使用。在CF和DMD兩種患者中，所有病例中僅5%到10%歸因于編碼序列中的無義突變。相比之下，在患有結腸直腸腫瘤的患者中，在所有病例的約85%中，發現爿PC基因中的提前終止密碼子(6)。然而，目的為將全長APC蛋白恢復到缺少功能性APC蛋白的細胞中的研究迄今尚未被執行。氨基糖苷類如慶大霉素具有嚴重的劑量-限制性毒性且需要靜脈內施用，因此使它們成為對癌癥的無吸引力的長期治療。抑制終止密碼子突變的方法可有利于患有產生自一個重要基因中的終止密碼子突變的疾病的其它患者(例如，在患有APTR缺陷、抗凝血酶(antithromnin)III、acidspingumyelias和Hailey-Hailey疾病的患者中，在(8)中綜述)。最近，已經顯示大環內酯家族抗菌素可靶向核糖體50S亞基且誘導終止密碼子在原核系統通讀(7)。美國專利第5,324,720號和美國專利申請公布第2005/0171032號涉及使用某些大環內酯抗菌素治療癌癥的方法(9，發明概述本發明涉及大環內酯抗菌素用于制備治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥劑的用途，該大環內酯抗菌素為以下的一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；和螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。另外，本發明涉及用于治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥物組合物，該藥物組合物包括作為活性成分的治療有效量的大環內酯抗菌素及藥學上可接受的載體，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。本發明進一步涉及大環內酯抗菌素用于制備治療或預防表達突變^尸q;腺瘤性結腸息肉病)基因的癌癥的藥劑的用途，該大環內酯抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。另外，本發明涉及在哺乳動物中治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；乂人而治療或預防所述癌癥。本發明進一步涉及用于在哺乳動物中治療或預防表達突變APC基因的癌癥的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。另外，本發明涉及通過抑制J尸C基因中的提前終止突變而在哺乳動物中治療或預防癌癥的方法，該方法包括向所迷哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；和螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；從而抑制APC基因中的提前終止突變。附圖簡述圖1:顯示了APC基因中體細胞和生殖細胞突變譜。APC基因中的體細胞(《=8")和生殖細胞0=9/5)突變根據密碼子數目的分布。數據產生自ThierrySoussi(1998.),APCgene:databaseofgermlineandsomaticmutationsinhumantumorsandcelllines(APC基因在人類腫瘤和細胞系中的生殖細胞和體細胞突變數據庫).NucleicAcidsResearch26(1):269-270。圖2:顯示了泰樂菌素-誘導的突變的APC終止密碼子通讀。(A)構建成可以通讀特異性JPC終止突變的篩選化合物的報道質粒圖解。(B-D)使用此構建物獲得的結果顯示分別在J尸C熱點1061、1554和1450處與紅審素、螺旋霉素和慶大霉素相比，泰樂菌素誘導更高水平的通讀。圖3:顯示了泰樂菌素下調(3-鏈蛋白/Tcf信號轉導。用W(9尸/^L4S/f轉染對照或泰樂菌素-治療的CX-1細胞。轉染后48h,收集細胞并測量熒光素酶水平。圖4:顯示了泰樂菌素治療抑制細胞腫瘤發生。五周大的棵鼠被注射HT-29CRC細胞。注射后2天，0.4昭/ml泰樂菌素被添加到治療的小鼠組的飲用水中。每2天替換水。(A-D)注射后10天，泰樂菌素-治療的小鼠(B，D)的腫瘤尺寸與對照組(A，C)的腫瘤尺寸相比更小。(E)在第16天，處死小鼠。切除腫瘤并稱重。對于對照小鼠和泰樂菌素-治療的小鼠，按克計的平均腫瘤質量被顯示。圖5:顯示了泰樂菌素治療改變了腫瘤的組織學特性。從對照和泰樂菌素-治療的小鼠中除去腫瘤。固定腫瘤并用蘇木精和曙紅(H&E)染色劑染色。(A-F)染色結果揭示泰樂菌素治療導致腫瘤壞死而不影響血液供應(血管^皮箭頭表示)。顯示了來自三種不同的泰樂菌素-治療的小鼠(D-F)和三種不同的對照小鼠(A-C)的腫瘤的截面。圖6:顯示了泰樂菌素治療導致全長APC表達。從對照("NT")小鼠和泰樂菌素-治療的(0.8mg/ml、0.4mg/ml)小鼠中除去腫瘤。裂解腫瘤并用抗-APC抗體探查物質。HCT116細胞攜帶起尺寸標注物作用的野生型APC蛋白。泰樂菌素治療導致全長APC表達，且較高量的泰樂菌素相應地增加全長蛋白的表達。發明詳述本發明基于泰樂菌素、紅霉素和螺旋霉素(抗菌素大環內酯家族的成員)可誘導APC基因中的提前終止密碼子突變通讀的發現。目前本發明人已經確定，大環內酯抗菌素可具有和可以導致對于APC10基因中的提前終止密碼子的致癌熱點通讀的化合物一樣的臨床用途。本發明人調查了大環內酯是否可以通讀在APC中的致癌提前終止密碼子突變。本文提供了證據，說明抗菌素大環內酯家族的一個成員泰樂菌素及其他大環內酯化合物(如紅霉素、螺旋霉素)可誘導APC基因中提前終止密碼子的通讀。本發現在最大化對APC的終止密碼子抑制物的作用同時最小化副作用中可具有臨床應用性。臨床上有用的抑制爿尸C基因中的提前終止突變的方法的鑒別可對患有CRC的患者和其它患有表達突變爿尸C的不同類型的癌癥患者有利。例如，y4尸C突變已經在其它癌癥類型如韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌中被發現。因此，根據本發明一方面，提供了大環內酯抗菌素用于制備治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥劑的用途，所述大環內酯抗菌素為以下的一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。根據本發明另一方面，提供了用于治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥物組合物，該組合物包括作為活性成分的治療有效量的大環內酯抗菌素及藥學上可接受的載體，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。根據本發明除此以外的另一方面，提供了大環內酯抗菌素用于制備治療或預防表達突變APC基因的癌癥的藥劑的用途，該大環內酯抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。根據優選實施方式，癌癥選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌。優選地，大環內酯抗菌素為泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。根據本發明其它方面，提供了在哺乳動物中治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；^v而治療或預防所述癌癥。根據本發明除此以外的其它方面，提供了在哺乳動物中治療或預防表達突變APC基因的癌癥的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。根據本發明進一步方面，提供了通過抑制APC基因中的提前終止突變而在哺乳動物中治療或預防癌癥的方法，該方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；和螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；從而抑制APC基因中的提前終止突變。根據優選實施方式，癌癥選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳&泉癌。優選地，大環內酯抗菌素為泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。大環內酯抗菌素可為單一的活性劑(即單一大環內酯抗菌素)或兩種或(ore)更多種活性劑的組合。本文使用的術語"藥劑"指藥物組合物。特別是，它指包括在任何適合的藥學上可接受的載體(如賦形劑或稀釋劑)中的至少一種在本發明中描述的大環內酯抗菌素的藥物組合物，而且也指不同施用途徑要求的不同制劑。例如，藥劑可被配制用于口服施用，或可被配制用于不經腸或直腸施用。本文公開的藥物組合物的活性成分可包括至少一種大環內酯抗菌素，即單一活性劑(大環內酯抗菌素)或兩種或更多種活性劑。本文使用的術語"哺乳動物"指哺乳動物綱任何成員，包括人類。優選地，本文的哺乳動物為人類。本文使用的術語"治療(treating)"或"治療(treatment)"疾病或癥狀或疾病特征(如結腸直腸癌、結腸直腸腺瘤和腺癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌、乳腺癌、與任何一種類型的上文^L明的癌癥相關的腺瘤和腺癌)可包括以下的任何一種或多種(1)預防疾病，即導致臨床癥狀或疾病的征兆不在可能暴露于或預暴露于疾病的哺乳動物(如，在體細胞或生殖細胞中表達突變APC基因或顯示了疾病的家族史的哺乳動物)中發展而且除此以外不經歷或展現該疾病癥狀或征兆；(2)抑制疾病，即，停滯或降低疾病或它的臨床癥狀或征兆的發展速率；(3)緩解疾病，即，導致疾病或它的臨床癥狀或征兆的部分或完全消退；和(4)上文的涵蓋了不同臨床癥狀或征兆的(l)、(2)或(3)的組合。本文使用的術語"治療(treating)"或"治療(treatment)"也包括根除、除去、改變或控制原發性、局部或轉移的癌癥組織；及最小化或延遲癌癥(如結腸直腸癌)的擴散(轉移)。本文使用的術語"預防(preventing)"或"預防(prevention)"包括預防患者中的癌癥的復發、擴散或發作。術語"預防(preventing)"或"預防(prevention)"也包括預防與任何上文說明的類型的癌癥相關的腺瘤和腺癌。應理解，根據本發明治療或預防癌癥可涉及抑制提前終止突變的機制。提前終止密碼子產生截短的(突變的)蛋白。當用在提及提前終止突變或提前終止密碼子時，本文使用的術語"抑制(suppression)"或"抑制(suppressing)"指存在于突變的等位基因中但不存在于野生型基因(如APC基因(SEQ.ID.NO:2))中的終止密碼子的通讀過程。當提及翻譯過程時，本文使用的術語"通讀"指將終止密碼子("無義"密碼子)當作"有義"密碼子(即編碼氨基酸的密碼子)解讀或繞過所述終止密碼子。當提及終止密碼子時，本文使用的術語"提前"指作為DNA(mRNA)序列中的體細胞、生殖細胞或偶發性突變(如，移碼或無義突變)的結果而產生，但不存在于野生型DNA(mRNA)序列中的終止密碼子。"治療有效量"指當施用給哺乳動物以治療疾病(如結腸直腸癌、結腸直腸腺瘤或腺癌)時，足夠實現部分或完全治療或預防疾病的化合物(在本發明中描述的大環內酯抗菌素(antbiotic))的量。本文使用的"治療有效量"也包括足夠破壞、改變、控制或除去原發性、局部或轉移的癌細胞或組織；延遲或最小化癌癥的擴散；或在癌癥的治療或管理中提供治療益處的本發明化合物的量。"治療有效量，，也包括足夠導致癌細胞死亡的本發明化合物的量。"治療有效量"另外包括足夠誘導通讀乂尸C基因中提前終止密碼子的本發明大環內酯抗菌素(antiobiotic)的量。"治療有效量"另外包括足夠抑制JPC基因中的提前終止突變的大環內酯抗菌素的量。"治療有效量"可根據化合物、疾病和它的狀態或嚴重性、將被治療的哺乳動物的年齡、體重、其它醫學條件等而變化。治療有效量也可根據一種或多種以往或并存醫學、外科或放射療法千涉而改變。本文使用的術語"藥學上可接受的鹽"指一種或多種任何無毒的有機酸或無機酸分子與本發明化合物的反應產物。形成適合的鹽的示例性無機酸包括氫氯酸、氬溴酸、氬碘酸、硫酸和磷酸和酸性金屬鹽如磷酸氫二鈉(sodiummonohydrogenorthophosphate)和石危酉交氫《甲。形成適合的鹽的示例性有機酸包括單-、雙-和三羧酸。示例性的此類酸為，例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯曱酸、羥基苯甲酸、苯基乙酸、肉桂酸、水楊酸(salacylicacid)、甲磺酸、乙磺酸等。如在"泰樂菌素或其衍生物"、"紅霉素或其衍生物"、"竹桃霉素或其衍生物，，或"螺旋霉素或其衍生物"中使用的術語"衍生物"指衍生自母體化合物(如泰樂菌素、紅霉素、竹桃霉素、螺旋霉素)的化學改性化合物，其與母體化合物的一種或多種元素、取代基和/或官能團不同，以致衍生物具有與如在術語"治療"或"預防"(如減小腫瘤尺寸和質量，誘導通讀APC基因衍生物的例子為當施用給哺乳動物時，能夠提供(如通過代謝過程)本發明化合物或其活性代謝物的母體化合物的前藥，例如其酯或酰胺。紅霉素鹽及衍生物可包括(無限制性地)乳糖酸紅霉素、琥乙紅霉素、硬脂酸紅霉素、依托紅霉素、紅霉素estorate(erythromycinestorate)、醋硬脂紅霉素、葡庚糖酸紅霉素、紅霉素丙酸酯、紅霉素沙那西丁、紅霉素A、紅霉素B、紅霉素C、紅霉素D或紅霉素E、羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、地紅霉素、氟紅霉素，及諸如在美國專利第6777543、6825171和5,602,106號和WO2002/050093(其每一個通過引用以它們的全部內容被合并于本文)中顯示的那些的衍生物。泰樂菌素衍生物的非限制性例子為，例如替米考星(desmycosin)、泰樂菌素B或泰樂菌素衍生物如在美國專利第5,602,106、4,092,473、4,205,163和4,268,665號(其每一個通過引用以它們的全部內容—皮合并于本文)中描述的那些。竹桃霉素鹽及衍生物的非限制性例子為，如磷酸竹桃霉素(夾竹桃霉素(matromycin))、竹桃霉素2'-0-磷酸鹽、醋竹桃霉素和三乙酰竹桃霉素及衍生物如在美國專利第5,602,106、4,429,116、4,124,755和4,064,143號(其每一個通過引用以它們的全部內容被合并于本文)中描述的那些。15應理解，大環內酯抗菌素"螺旋霉素"涵蓋了在TheMerckIndex,AnEncyclopediaofChemicals,Drugs,andBiologicals，第"11片反，1989(第8708段)(其通過引用以其全部內容被合并于本文)中描述的化合物螺旋霉素I、II或m,或其任何組合(如螺旋霉素i、n和m的組合)中任何一個。螺旋霉素衍生物的一些非限制性例子為，如新螺旋霉素、二氫螺旋霉素及書t生物如在美國專利第5,602,106和4,174,391號(其每一個通過引用以它們的全部內容^支合并于本文)中描述的那些。應理解，在本發明中描述的活性成分(大環內酯抗菌素)也涵蓋其溶劑化物。本文使用的術語"溶劑化物"指由溶質(在本發明中為大環內酯抗菌素或鹽或其衍生物)和溶劑形成的化學計量可變的復合物。出于本發明目的，此類溶劑可能不影響溶質的生物活性。適合溶劑的例子包括，但不限于水、乙醇和乙酸。治療有效量的大環內酯抗菌素優選地以藥物組合物被施用給哺乳動物。本文使用的"藥物組合物"指本文描述的一種或多種化合物(大環內酯抗菌素)，與其它惰性化學組分如適合的藥學上可接受的載體的配制品。藥物組合物的目的為促進活性成分(大環內酯抗菌素)向哺乳動物的施用。本文使用的術語"藥學上可接受的載體"指不引起對受治療者(哺乳動物)的顯著刺激且不消去施用的活性成分的生物活性和特性的惰性無毒載體或f希釋劑。載體的例子(無限制地)為乳糖、蔗糖、水、有機溶劑和聚乙二醇。載體可包括其它賦形劑，如粘合劑、崩解劑、潤滑劑、表面活性劑(surfaceactiveagent)(表面活性劑(surfactant))、乳化劑、防腐劑和矯口未劑。用于在本發明背景下使用的藥物組合物包括其中活性成分以有效實現計劃目的的量被包括的組合物。根據本發明優選實施方式，組合物的施用途徑選自口服、不經腸或直腸。不經腸施用途徑可為，例如靜脈內、肌肉內、腹膜內、腫瘤內和皮下施用。特定的實施方式為口服途徑施用。適于口服施用的活性劑(活性成分)的劑型包括，例如固體、半固體、液體或氣體狀態的形式。特定的例子包括片劑、膠嚢、粉末、顆粒、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。然而，劑的形式不限于這些形式。劑型可被設計為提供即時釋放、持續釋放或脈沖釋放的抗癌活性劑(大環內酯抗菌素)。另外，本發明的抗癌活性劑可以通過將液體或精細粉末形式的活性劑與氣體或液體噴霧劑以及(如果必要的話)已知的助劑如發泡劑一起填充到非加壓容器如氣溶膠容器或噴霧器而制備的氣溶膠或吸入劑形式被施用。作為噴霧劑可使用加壓的氣體，例如，二氯氟曱烷、丙烷或氮氣。可通過利用已知方法，將本發明抗癌活性成分溶解、懸浮或乳化在水或非水溶劑如植物油、合成樹脂酸的甘油酯、高級脂肪酸的酯或丙二醇中而制備注射劑，且如果期望的話，進一步添加可常規地使用的添加劑如增溶劑、滲透調節劑(osmoregulatingagent)、乳化劑、穩定劑或防腐劑。對于直腸施用，可使用栓劑。可通過利用已知方法，將本發明抗癌活性成分與可在體溫下熔化但在室溫下為固體的賦形劑，如可可脂、碳蠟或聚乙二醇混合并模制所產生的物質而制備栓劑。抗癌活性劑可與化學療法、放射療法或其它活性劑共同施用。本發明抗癌活性成分的劑量可根據施用形式、施用途徑、靶疾病的程度或階段及類似因素被適當設置或調整。例如，對于治療結腸直腸癌，本發明化合物的有效施用速率的一般范圍可為2-100mg/kg體重/天。優選地，對于口服施用活性成分，劑量可被設置為2-30mg/kg體重/天，但劑量不被其限制。對于治療其它癌癥類型，如韌帶樣纖維瘤(侵襲性纖維瘤病(fibromatoses)),膀胱癌、胃癌和乳腺癌，劑量可在2-100mg/kg體重/天的范圍內。優選地，對于口服施用活性成分，劑量可被設置為2-50mg/kg體重/天，但劑量不被其限制。施用給哺乳動物，尤其人類的劑量應該足以預防癌癥、延遲它的發作或減慢(或終止)它的進展。本領域技術人員將意識到劑量將取決于各種因素，包括所用特定化合物的強度，及哺乳動物的年齡、物種、身體條件和體重。劑量的大小也將通過途徑、時間安排和施用頻率及任何可能伴隨特定化合物的施用的不利副作用的存在、性質和程度及預期生理效應被確定。適合劑量和劑量方案可通過本領域一般技術人員已知的傳統測距(range-finding)技術確定。一般，以小于化合物的最優劑量的較小劑量開始治療。此后，劑量以小的增量增加直到達到環境下的最優作用。有效劑量和治療草案可通過常規及傳統方式確定，以在實驗動物中以低劑量開始并隨后增加劑量，同時監控作用，并也系統地改變劑量方案。動物研究，優選哺乳動物研究，通常用于確定每千克重量生物活性劑的最大耐受劑量("MTD")。本領域技術人員按照規律外推在其它物種(包括人類)中有效的劑量，同時避免毒性。因此，根據上文，在治療應用中，根據本發明使用的活性劑的劑量除了其它影響選擇的劑量的因素之外根據活性劑、接受的患者的年齡、體重和臨床病況及施用療法的臨床醫師或從業者的經驗和判斷而變化。一般，劑量應該足以導致減慢，及優選地消退肺瘤生長及最優選地，導致癌癥的完全消退。活性成分(大環內酯抗菌素)的有效量為提供如被臨床醫師或其它具備資格的觀察者注意到的客觀可鑒別的改進的劑量。在患者中腫瘤的消退通常是就肺瘤的直徑進行測量。肺瘤直徑的減小表示消退。消退也可由治療已經停止后，肺瘤不能復發而表示。給藥可為一種施用或兩種或更多種施用的組合，如每日一次、每曰兩次、每周一次、每月一次，或以其它方式根據臨床醫師或從業者的判斷，將如年齡、體重、疾病嚴重性及每次施用中施用的劑量的因素考慮進來。18實施例方法和材料細胞培養在補充了10。/。胎牛血清(FCS)和100單位/ml青霉素或鏈霉素的Dulbecco改良的Eagle培養基(DMEM)中，培養HCT116CRC細胞(攜帶野生型APC的對照細胞)。在37。C下，將細胞保持在潮濕的、5。/。C02氣氛中。使用JetPEI(PolyPlusTransfecdon)轉染細胞。用0.5pg所描述的構建物轉染細胞，且48小時后，根據生產商說明書，用熒光素酶檢驗試劑盒(Promega，USA)測量熒光素酶水平。按上文所述保持細胞。用0.5貼pTOPFLASH和0.05貼Renilla(Promega，USA)轉染細胞。48小時后，通過使用熒光素酶檢驗試劑盒(Promega，USA)測量熒光素酶水平。體內小鼠實驗六只雌性棵鼠(SCID)被注射以lx107HT-29細胞。治療的組被喂以正常的小鼠飲食并接受含有0.4mg/ml泰樂菌素的飲用水，持續14天。對照組接受普通飲用水。14天后，處死小鼠，除去并稱重腫瘤。用H&E染色劑將來自對照小鼠和治療小鼠的腫瘤切片染色。載玻片被專業病理學家檢查。來自對照小鼠和治療小鼠的腫瘤被裂解、在SDS-PAGE凝膠上運行并轉移到硝酸纖維素膜(nitrocellulosemembrane)。用抗-APC抗體(致癌基因APCAB-2)孵育膜。/4尸C基因中的體細胞突變和生殖細胞突變譜。大多數已知的偶發性和遺傳性APC突變的位點在下文顯示。大多數常見爿戶C中的生殖細胞突變在密碼子1061和1309處出現。大多數爿尸C體細胞突變在密碼子1309、1450和1554(圖l)處具有熱點的MCR(突變密集區域)中簇集。在它們的熱點的大多數中具有突變的CRC細胞系是市場上可購買的且在實驗室生長。4尸C熱點和周邊序列提供全長野生型APC蛋白序列(SEQIDNO:l)和全長野生型乂PCDNA序列(SEQIDNO:2)。下表闡述了終止密碼子序列，及在^PC基因的突變熱點上在它們周邊的序列。注意熱點1061、1450和1554，形成的移碼或無義終止密碼子是TGA,而在熱點1309,終止密碼子為TAG(參見表1)。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表1.該表顯示了終止密碼子和通過熱點中的突變而產生的周邊序列。在突變位點1061和1309中，矩形顯示了突變事件的位點，其導致5-bp缺失，恰在缺失下游引發終止密碼子的形成。在密碼子1450，矩形顯示了產生終止密碼子(無義突變)的錯義突變的位點。恰在密碼子1554后的三角形說明了導致下游形成終止密碼子的腺嘌呤插入位點。在所有情況下，黑體密碼子代表了由無義突變或讀碼突變形成的終止密碼子。實施例1泰樂菌素-誘導的突變^尸C終止密碼子通讀在以下實驗中使用的泰樂菌素為從SigmaChemicals,Israel(目錄號T6134)購買的商業酒石酸泰樂菌素；螺旋霉素購自SigmaChemicals,Israel(目錄號S-9132);及紅霉素購自Fluka,Switzerland(目錄號45673)。竹桃霉素可從SigmaChemicals,Israel(目錄號T6514)獲得。雙熒光素酶報道質粒系統用于測量泰樂菌素對結腸直腸組織培養物細胞中的^尸C熱點終止密碼子突變的通讀的作用。在此系統中，海腎熒光素酶"I艮道基因位于APC野生型或突變的序列中的熱點上游，且螢火蟲熒光素酶報道基因位于APC野生型或突變的序列中的熱點下游，且兩個基因都在爿PC啟動子的轉錄控制下(圖2a)。海腎熒光素酶基因作為對于轉染效率、mRNA豐度和翻譯起始的水平的內部標準化對照起作用，因為兩種酶的翻譯皆起源于相同的翻譯起始信號。標準化之后，在螢火蟲熒光素酶活性中的不同反映了終止密碼子通讀的頻率。含有野生型或在APC熱點密碼子1061或1554處的APC突變序列的構建物被轉染到在不同量的大環內酯家族抗菌素存在下生長的HCT116結腸直腸癌細胞。數據顯示，當細胞以各種量(4-80pg/ml)泰樂菌素治療時，APC終止密碼子通讀水平顯著(圖2b，2c)。螺旋霉素、紅霉素和慶大霉素(氨基糖苷類抗菌素)誘導了更適中水平的終止密碼子通讀(圖2b、2c、2d)。實施例2泰樂菌素導致P-鏈蛋白/Tcf信號轉導的下調由于導致Wnt信號通路過度激活的突變，結腸直腸細胞系顯示了高水平的(3-鏈蛋白/Tcf-介導的轉錄。為了測量泰樂菌素對(3-鏈蛋白/Tcf-介導的轉錄水平的作用，在y4PC熱點1554處含有終止突變的CX-1CRC細胞被;77D/V^US//轉染，所述/rOP7^4S/f是一種廣泛用于測量Tcf和P-鏈蛋白轉錄活性的熒光素酶報道質粒(prOPi^4S//含有連接到熒光素酶報道基因的多聚Tcf-結合位點)。數據顯示以8嗎/ml泰樂菌素治療CX-1細胞導致了在(3-鏈蛋白/Tcf/LEF轉錄信號轉導中約50%的降低(圖3)。對于在密碼子1450處含有爿尸C熱點突變的SW1417細胞，顯示了相似結果(結果未顯示)。實施例3泰樂菌素治療抑制細胞腫瘤發生APC截短與腫瘤形成有關(15)。本發明人預言，在僅含截短APC的細胞系中的功能性全長APC蛋白的恢復將會導致腫瘤發生的降低。1X107個在y!PC密碼子1554處含有熱點突變的HT-29CRC細胞被注射到12只棵SCID小鼠中。治療小鼠組(6只小鼠)接受了0.4pg/ml泰樂菌素的飲用水溶液。監控肺瘤的生長并在對照小鼠和泰樂菌素-治療的小鼠之間的腫瘤尺寸上觀察到顯著不同。治療的小鼠具有與對照小鼠相比減小的腫瘤尺寸(圖4a)。在接受含有或不含泰樂菌素的飲用水14天后，處死小鼠并除去腫瘤。稱重肺瘤且泰樂菌素-治療的小鼠的腫瘤質量比對照組平均低約40%(圖4b)。實施例4對照小鼠和泰樂菌素-治療的小鼠之間腫瘤組織學特性不同來自對照小鼠和泰樂菌素-治療的小鼠的腫瘤切片以一種常規用于組織切片的染色劑，蘇木精和曙紅(H&E)染色劑染色且被專業病理學家檢查。此染色顯示了泰樂菌素治療導致腫瘤細胞的壞死和死亡(圖5)，其可解釋在治療小鼠中的較小腫瘤尺寸。雖然對腫瘤的血液供給未受影響，但是在泰樂菌素-治療的小鼠中發生腫瘤壞死，暗示泰樂菌素可到達腫瘤且導致細胞死亡。實施例5大環內酯抗菌素對壽命的作用1X10個在爿PC的密碼子1554處含有熱點突變的HT-29CRC細胞被注射到IO只三周大的棵SCID小鼠中。治療的小鼠被給予0.3-0.8昭/ml泰樂菌素、螺旋霉素、紅霉素或竹桃霉素的飲用水溶液。IO只對照小鼠接受不含抗菌素的飲用水。比較治療的小鼠的平均壽命與對照小鼠的壽命。另外，具有爿尸C中的終止突變且自發發展腫瘤并最終死亡的Apc;小鼠C57BL/6J-J;c^7J(JacksonLaboratories,貨號002020)被大環內酯抗菌素中每一個治療。比較治療的小鼠的壽命與對照未治療小鼠的壽命。實施例6在結腸癌癥模型中，以大環內酯鹽及衍生物的治療雌性棵SCID小鼠被注射以1X1(^個在J尸C的密碼子1554處含有熱點突變的HT-29CRC細胞或注射以1Xl(f個在APC的密碼子1450處含有熱點突變的SW1417CRC細胞。14天來，治療組被喂以正常小鼠飲食和含有0.4昭/ml以下一種的飲用水泰樂菌素鹽或泰樂菌素衍生物；紅霉素鹽或紅霉素衍生物；螺旋霉素鹽或螺旋霉素衍生物；或竹桃霉素鹽或竹桃霉素衍生物。也被注射以1X10個HT-29或SW1414CRC細胞的對照組被給予不含有大環內酯抗菌素衍生物或大環內酯抗菌素鹽的飲用水且被喂以同樣飲食。處死所有小鼠，除去腫瘤并稱重。來自10只對照小鼠及來自以泰樂菌素、紅霉素、螺旋霉素或竹桃霉素的鹽或衍生物中每一個治療的各組中的10只小鼠的腫瘤切片以H&E染色劑染色，且被專業病理學家檢查。病理學家檢查每個肺瘤切片的肺瘤壞死。劑量根據試驗化合物和預期達到的作用變化。另外，使用(治療的)和不使用(對照)大環內酯抗菌素中的每一個對C57BL/6J-v4/x^'"/J小鼠執行與上文相似的實驗(不提供致癌細胞)。討論在西方世界，結腸癌癥是癌癥死亡的主導原因中的一個。結腸癌癥的進展已經與為治療劑和診斷劑提供潛在靶點的分子變化密切相關。結腸癌癥的獨特特征為在單一基因中的突變在大多數腫瘤中^C發現。在編碼腺瘤性結腸息肉病(APC)蛋白的基因中的截短突變在〉80。/。的偶發性結腸紳瘤中被發現且也對家族性腺瘤性息肉病(FAP)，結腸癌癥的一種遺傳形式負責。APC蛋白功能缺失在大多數偶發性結腸肺瘤的發展中是極早的事件并在腺瘤前體息肉形成之前。這暗示APC蛋白對于維持腸和結腸上皮是必需的，且它的表達可為干涉提供適合的靶點。爿尸C基因編碼在Wnt-信號通路及在細胞間粘附中起不可缺少的作用(integralrole)的大的多域蛋白。多數(95%)的截短生殖細胞突變為產生具有異常功能的截短蛋白產物的無義突變或移碼突變。大多數普遍生殖細胞突變在密碼子1061和1309(在它們之間其占所有生殖細胞突變的三分之一)處發生(圖1)。23在熱點1061和1309處的突變被發現為移碼型和無義型。因此，一個等位基因可在密碼子1061或1309處含有移碼突變，且等位基因在密碼子1061或1309處可為無義(提前終止)突變(16，17)。相似地，在熱點1554處的突變可為移碼型或無義型。然而，迄今僅無義突變已經在密碼子1450處被鑒別。在大多數結腸直腸腺瘤和惡瘤，包括尺寸<5mm的腺瘤中發現了體細胞突變。超過60%的所有^尸C中的體細胞突變在<10%的位于密碼子1286和1513之間的基因編碼序列中發生；此區域被命名為突變密集區域(MCR)。在MCR中，存在對于體細胞突變的三個熱點，在密碼子1309、1450和1554處(圖1)。最可能APC在Wnt-信號轉導的作用為負責它在結腸直腸致癌作用中的作用。突變APC也可破壞細胞間粘附及細胞骨架的穩定性，這兩者皆在癌癥進展中起作用。另一個在密碼子1307處的4PC突變已經在一些患有結腸直腸癌和乳腺癌的人，及少數患有黑素瘤、皮膚癌和膀胱癌的個體中發現(14)。如同在結腸直腸癌中，數目龐大的其它人類遺傳性疾病(如嚢性纖維化(CF)、Duchenne型肌肉萎縮癥(DMD)(8))產生自導致由突變基因編碼的蛋白合成提前終止的突變，且治療這些疾病的一種方式可為補充具有野生型拷貝的細胞。多年來，已知氨基糖苷類抗菌素可通過使氨基酸結合在無義終止密碼子的位置中，從而允許翻譯繼續直至轉錄正常結束而抑制疾病-相關的提前終止突變。對終止密碼子抑制的易感性取決于終止密碼子類型且取決于終止密碼子周邊的局部序列環境。與UAA相比，UGA和UAG顯示了較高翻譯通讀。在爿PC基因突變熱點中的終止密碼子序列及在它周邊的序列已經被闡明。如可從表l中看出，在列舉的/^C熱點上形成的提前終止密碼子的類型為TGA或TAG。先前以常染色體隱性疾病嚢性纖維化(CF)及在具有無義突變的Duchenne(DMD)患者的子集中闡述了此方法的使用。在CF和DMD兩種患者中，所有病例中僅5%到10%歸因于編碼序列中的無義突變。相比之下，在患有結腸直腸腫瘤的患者中，在所有病例的約85%中，發現APC基因中的提前終止密碼子。雖然準確數字未^^皮確定，但是少于80%的結腸直腸癌病例僅具有無義突變，而在其它病例下，個體可具有一個具有移碼突變的等位基因和具有無義突變的另一個等位基因。迄今尚未進行目標為將全長APC蛋白恢復到缺少功能性APC蛋白的細胞中的研究。然而，氨基糖苷類如慶大霉素具有嚴重的劑量-限制性毒性且目前必須靜脈內施用，因此使它們成為對于這些類型疾病的無吸引力的長期治療。本發明人篩選了可通讀APC基因中致癌終止密碼子且導致在含有非功能性截短的APC蛋白產物的結腸直腸癌細胞中的功能性全長APC蛋白表達的其它化合物。為了篩選可通讀提前^尸C終止突變的化合物，本發明人構建了可有效且快速地測量不同化合物對特異提前/IPC終止密碼子的通讀水平的作用的報道檢驗系統。結果表明，先前已僅顯示了通讀原核終止密碼子的抗菌素大環內酯家族的成員泰樂菌素可通讀特異J尸C熱點突變。既然Wnt信號轉導水平是對于CRC細胞的腫瘤發生特性的標志，本發明人首先檢查了泰樂菌素是否可降低在CRC細胞中觀察的Wnt信號轉導的高水平。結果顯示泰樂菌素治療的確可降低試驗的CRC細胞中Tcf/(3-鏈蛋白-依賴性轉錄的水平。在下一步驟中，發明人調查了泰樂菌素是否可體內降低腫瘤發展。出于此目的，含有XPC熱點突變(密碼子1554)的HT-29CRC細胞被注射到棵鼠中。治療小鼠組接受泰樂菌素的飲用水溶液。數據顯示，與對照組相比，泰樂菌素治療導致腫瘤尺寸和質量的減小。另外，泰樂菌素治療導致了腫瘤細胞增多的死亡，但不影響微血管。提前終止密碼子通讀為對于在結腸直腸癌早期的患者或具有對于發展此類型癌癥的遺傳性背景的患者潛在的替代治療策略。總體看來，現在的結果說明了泰樂菌素和其它大環內酯抗菌素可實現在大量結腸直腸癌患者中突變的APC基因中的致病提前終止密碼子的通讀。此新方法可在產生自重要的編碼序列中的提前終止密碼子的結腸直腸癌和其它遺傳性人類疾病的臨床治療中開辟新的道路。實施例7在乳腺癌、膀胱癌、胃癌和韌帶樣纖維瘤模型中，以大環內酯抗菌素及它們的鹽及衍生物治療雌性棵SCID小鼠被注射以已知可在小鼠模型中引發乳腺癌且在爿PC熱點突變處含有突變的細胞。14天來，治療組被喂以正常小鼠飲食及含有0.3-0.8嗎/ml以下中一種的飲用水泰樂菌素或泰樂菌素鹽或泰樂菌素衍生物；紅霉素或紅霉素鹽或紅霉素衍生物；螺旋霉素或螺旋霉素鹽或螺旋霉素衍生物；或竹桃霉素或竹桃霉素鹽或竹桃霉素衍生物。也注射了相同乳腺癌細胞的對照組被給予不含大環內酯(macroloide)抗菌素或大環內酯抗菌素衍生物或大環內酯抗菌素鹽的飲用水，并喂以相同飲食。處死所有小鼠，除去腫瘤并稱重。來自對照小鼠及來自以泰樂菌素、紅霉素、螺旋霉素或竹桃霉素或大環內酯抗菌素鹽或大環內酯抗菌素衍生物中每一個治療的小鼠的腫瘤切片以H&E染色劑染色，并被專業病理學家檢查。病理學家4全查每一個肺瘤切片的腫瘤壞死。重復上文關于乳腺癌的方法，用于確定試驗活性劑關于膀胱癌、胃癌和韌帶樣纖維瘤的作用，除了誘發小鼠模型各自癌癥的適合細胞被注射入治療小鼠和對照小鼠中。實施例8在子宮內，大環內酯抗菌素對細胞腫瘤發生的作用10只懷有胎兒的懷孕的APC,小鼠被給予0.3-0.8pg/ml泰樂菌素、螺旋霉素、紅霉素或竹桃霉素的飲用水溶液。IO只懷孕對照小鼠接受不含抗菌素的飲用水。出生后，治療組的仔(幼)鼠繼續接受同樣的大環內酯抗菌素的飲用水溶液，而對照仔鼠接受不含抗菌素的飲用水。在它們出生后8周，處死仔鼠，并從它們的胃腸道除去肺瘤并稱重。仔鼠對照組的肺瘤質量與泰樂菌素-、螺旋霉素-、紅霉素-或竹桃霉素-治療組的仔鼠(在子宮內及在出生后皆接觸大環內酯)的腫瘤質量比較。實施例9在對照小鼠和大環內酯抗菌素-治療的小鼠間的腫瘤組織學特性不同在上述實驗中，來自對照小鼠和大環內酯抗菌素-治療的小鼠的腫瘤切片被蘇木精和曙紅(H&E)染色劑，一種常規用于組織切片的染色劑染色并被專業病理學家檢查。檢查染色以確定大環內酯治療是否導致腫瘤細胞的壞死和死亡。在本說明書中提到的所有公布、專利和專利申請通過引用以它們的全部內容被本文合并于說明書中，如同每個獨立的公布、專利或專利申請被詳細并單獨地說明通過引用合并于本文。權利要求1.大環內酯抗菌素用于制備治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥劑的用途，所述大環內酯抗菌素為以下的一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。2.—種藥物組合物，其用于治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥，該組合物包括作為活性成分的治療有效量的大環內酯抗菌素及藥學上可接受的載體，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。3.大環內酯抗菌素用于制備治療或預防表達突變/1尸C基因的癌癥的藥劑的用途，所述大環內酯抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。4.根據權利要求3所述的用途，其中所述癌癥選自結腸直腸癌、韋刃帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌。5.根據權利要求1或3所述的用途，其中所述大環內酯抗菌素為泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。6.根據權利要求2所述的藥物組合物，其中所述大環內酯抗菌素為泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。7.—種在哺乳動物中治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；/人而治療或預防所述癌癥。8.—種在哺乳動物中治療或預防表達突變爿尸C基因的癌癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。9.一種通過抑制基因中的提前終止突變而在哺乳動物中治療或預防癌癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物施用治療有效量的大環內酯抗菌素，該抗菌素為以下一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；從而抑制所述APC基因中的提前終止突變。10.根據權利要求8或9所述的方法，其中所述癌癥選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌。11.根據權利要求7到9中任一項所述的方法，其中所述大環內酯抗菌素為泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。全文摘要大環內酯抗菌素用于制備治療或預防選自結腸直腸癌、韌帶樣纖維瘤、膀胱癌、胃癌和乳腺癌的癌癥的藥劑的用途，該大環內酯抗菌素為以下的一種或多種泰樂菌素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；紅霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；竹桃霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物；及螺旋霉素、其藥學上可接受的鹽及其衍生物。也提供了用于治療或預防上文提到的癌癥的藥物組合物及方法及用于在哺乳動物中治療或預防表達突變APC基因的癌癥的方法。文檔編號A61P35/00GK101568343SQ200780027591公開日2009年10月28日申請日期2007年6月12日優先權日2006年6月12日發明者莉娜·羅西娜巴斯菲爾德申請人:雷蒙特亞特特拉維夫大學有限公司