專利名稱：：用于靜脈和腦內注射的兩元溶液型制劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種藥物的溶液型制劑，具體地說是替莫唑胺(Temozolomide)和溶解替莫唑胺的溶劑組成的供靜脈和腦內局部應用的新制劑。技術背景替莫唑胺(Temozolomide)化學名3，4-二氫-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，l-d]-1，2，3，5-四嗪-8-酰胺，由Schering-Plough公司開發。1999年FDA批準其口服膠囊制劑，用于治療成人膠質細胞瘤和黑色素瘤，特別是多形性膠質母細胞瘤或間變性星形細胞瘤的一線治療。據歐美的臨床統計表明，顱內原發惡性腫瘤的發病率為21/10萬，膠質瘤約占60%，其中高度惡性的膠質瘤占70%-85%，由于惡性的膠質細胞瘤分化不全，且深入神經細胞深處，手術不可能全部切除，復發率100%。替莫唑胺的出現是治療惡性神經膠質瘤一大進展。目前替莫唑胺只有口服膠囊制劑，雖然口服制劑使用方便，但口服藥物影響吸收的因素較多，文獻報道替莫唑胺口服給藥后吸收呈明顯的個體差異，其生物利用度在70-90%，這是由于在口服后7/29的病人出現惡心，胃腸道功能紊亂所致。而且對于口服制劑在臨床應用的治療方案是一次150mg/n^,—曰一次連續28天為一個療程，治療時間長，每日的惡心和嘔吐的不良反應極大的影響了患者的適應性。另外，口服制劑冷藏(2-l(TC)保存，使用不方便。靜脈給藥不直接刺激胃腸道，而且可調節經脈給藥的速度，控制血中藥物濃度，改變給藥周期，如每周一次，給四次，提高療效和減少毒性。靜脈給藥在體內可以獲得穩定的、最佳的藥物濃度，不存在生物利用度的問題(在研究生物利用度時，靜脈給藥作為100%，非靜脈途徑給藥存在吸收多少的問題)。替莫唑胺是治療腦腫瘤和黑色素瘤的有效藥物，腦瘤手術后的病人往往有神志不清，口服困難，因此不能及時服用藥物從而拖延治療時間，而靜脈給藥可及時治療，提高病人治療效果，在術后和術中的腦瘤病人可將靜脈注射藥物直接用到腫瘤部位，以提高治療作用。黑色素瘤常引起肝轉移，靜脈注射劑可用于肝動脈給藥。替莫唑胺是藥前藥物，本身沒有藥物活性，因此靜脈給藥對血管沒有刺激性，適合作靜脈注射劑。但由于替莫唑胺特殊的理化性質，開發液體制劑十分具有難度。由于替莫唑胺在水溶液中極不穩定，按常規制劑技術不能制成靜脈注射液。先靈公司對該品的后續開發也進行了不懈的努力，在usp6251886中公開了-種以微粒化的懸浮液形式給藥的替莫唑胺，但是因為容易導致血管堵塞該制劑并不理想。Usp005018(CN1685371)公開了該品的一種凍干粉針劑，用于靜脈注射。冷凍干燥一般是將藥物各種賦型成份和溶劑，預先進行低溫凍結成固體，然后在真空的條件下使水蒸汽直接升華出來，而物質本身剩留在凍結時的冰架中，因此真空干燥技術費工費時，成本高昂，且過多的賦型成份不能用于腦內的局部治療。研究發現，按常規方法配制替莫唑胺注射液，即用注射用水，0.9%氯化鈉配制替莫唑胺注射液，替莫唑胺極不穩定，在室溫放置1小時含量下降達0.5-2%,5小時后即可下降達5%以上，而在40'C半小時含量即可下降3(W以上。所以普通的溶劑配制的替莫唑胺，在輸注期間，短短幾小時內，就又明顯的降解，很難滿足替莫唑胺質量穩定性的要求，因此需要研究使替莫唑胺穩定且無刺激的溶劑技術。
發明內容本發明是研制一種供靜脈和腦內局部應用的注射液，是通過研究替莫唑胺溶液劑化學穩定性來完成的，化學穩定性是測定替莫唑胺的含量變化和有關物質的變化情況，并在小鼠腦內注射觀察藥物溶劑毒性反應。凍干粉制劑含多種賦型成份，僅可供靜脈注射，不能腦內局部應用，且生產工藝復雜和成本高。可供腦內應用的注射液，要求制劑的添加成份單一，無毒無剌激，符合人體生理要求，又能滿足制劑的要求。本發明①采用二元制劑方法，即藥物和溶劑分別裝在兩個不同制劑瓶中，使用時將溶劑注射藥物中，溶解后使用，二元制劑方法可解決藥物長期穩定性問題(2年以上)；本發明②是發現使替莫唑胺穩定的溶劑，正如在技術背景所述，應用普通常用溶劑，如注射用水，0.9%氯化鈉配制替莫唑胺注射液，替莫唑胺極不穩定，在輸液的短短幾小時內，已有明顯分解失效，本發明的穩定劑使替莫唑胺在輸入的液體中48小時含量無明顯變化，使用符合要求。本發明的替莫唑胺溶劑為對人體無毒無害酸性物質，如醋酸，乳酸，磷酸等。更為重要的是本發明發現這些酸性物質用于穩定替莫唑胺的最佳用量僅為藥物的1/4(按分子量計算)，酸堿度符合制劑的要求，因此沒有刺激性。
發明內容替莫唑胺注射劑穩定性研究表1替莫唑胺注射劑穩定劑試驗一醋酸的穩定作用和最佳條件_藥物穩定劑克分子濃度比含量(％)和室溫放置時間(h)替莫唑胺(mM)醋酸(mM)藥物醋酸128244810ml40ml1:410010095909010ml20ml1:2100100100989510ml10ml1:110010010010010010ml5ml1:0.5100100100100100函2.5ml10.2510010010010010010ml2ml10.210010010010010010ml1.25ml10.12510098959595歸0109897927054表2替莫唑胺注射劑穩定劑試驗一乳酸的穩定作用和最佳條件_藥物穩定劑克分子濃度比含量(％)和室溫放置時間(h)替莫唑胺(mM)乳酸(mM)藥物乳酸128244810ml80ml1:8989390909010ml11:410010095909010ml2(M1:21001001009595l(M10ml1:110010010010010010ml5ml1:0.510010010010010010ml2.5ml1:0.2510010010010010010ml2ml1:0.210010010010010010ml1.25ml1:0.12510097959595表3替莫唑胺注射劑穩定劑試驗一磷酸的穩定作用和最佳條件_藥物_穩定劑克分子濃度比含量(％)和室溫放置時間(h)替莫唑胺(mM)磷酸(mM)藥物磷酸1282448麵德l1:41009893909010ml20ml1:2100100100959510ml10ml1:110010010010010010ml5ml1:0.510010010010010010ml2.5ml1:0.2510010010010010010ml2ml1:0.210010010010010010ml_1.25ml1:0.125_10096959590緩沖溶液對替莫唑胺注射液穩定的影響緩沖溶液在pH3-5范圍，緩沖溶液對替莫唑胺有穩定作用，但與濃度有關，高濃度緩沖溶液可使替莫唑胺不穩定，pH3-5的緩沖溶液不如最佳用量的醋酸和乳酸。結果見下表表1緩沖溶液對替莫唑胺注射液穩定的影響-一醋酸緩沖液_藥物穩定劑pH含量(％)和室溫放置時間(h)替莫唑胺(mM)醋酸緩沖液(mM)128244810ml3100100989590麵l(M4100100979489編10ml5100100908880麵80ml31009085807810ml80ml41008580787610ml80ml59585787575表2緩沖溶液對替莫唑胺注射液穩定的影響一-乳酸緩沖液藥物穩定劑pH含量(％)和室溫放置時間(h)替莫唑胺(mM)乳酸緩沖液(mM)_128244810ml10ml41009595909010ml10ml510095909085畫80ml310090858075麵80ml49590807875l(M80ml59585787573口服和靜脈給藥對小鼠抑瘤作用口服和靜脈給藥對小鼠抑瘤作用，昆明種小鼠，每組10天，雄性，S180腫瘤，0.2ml接種小鼠右側前肢體下，第二天給藥，靜脈給藥為300mg/kg，每三天一次，給藥兩次，總藥量600rag/kg;口服給藥為100mg/kg，每天一次，給藥六次。總藥量600mg/kg，結果表明，在總劑量相同的情況下，靜脈給藥作用明顯好于口服給藥。(結果見表l)_表l口服和靜脈給藥對小鼠抑瘤作用_組別給藥方案體重變化平均瘤重(g)抑瘤率(％)_開始結束_對照23.328.52.30靜脈給藥300mg/kg，q3dX223.526.80.865.2口服給藥100mg/kg，qdX623.226.41.247.8q3dX2:3天給藥1次，共給2次qdX6:每天一次，共給6次腦內注射替莫唑胺的毒性比較，在小鼠腦內注射本專利替莫唑胺和凍干粉配方替莫唑胺，觀察小鼠的毒性死亡。本專利替莫唑胺為實施例l的配方，凍干粉為替莫唑胺+甘露醇(1:1)，用醋酸調pH至3，用28號針頭在小鼠腦內注射50ml藥物，觀察一周小鼠死亡數。結果表明，本專利藥物死亡為2/10，凍干粉為9/10，對照生理鹽水為1/10。實施例以下通過實施例說明本發明，這些實施例不應作為對本發明的限制。實施例l替莫唑胺粉針替莫唑胺真空干燥，分裝到棕色注射用10ral小瓶，裝量50、100和200mg。實施例2替莫唑胺溶劑取冰醋酸3.9ml加注射用水到2500ni1，分裝到注射用小瓶，裝量2.5、5和10ml。實施例3取2.5ml/瓶加入到50mg/瓶替莫唑胺溶劑溶解，在室溫48小時內含量不少于99%。實施例4取5ml/瓶加入到50mg/瓶替莫唑胺溶劑溶解，在室溫48小時內含量不少于99%。實施例5取10ml/瓶加入到50tng/瓶替莫唑胺溶劑溶解，在室溫48小時內含量不少于99%。實施例6本專利替莫唑胺注射液在輸液瓶中的穩定性(0.9%生理鹽水)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>權利要求1.一種替莫唑胺二元溶液劑型，其組成的特征描述如下①替莫唑胺粉針和②溶解藥物的溶劑2.權利要求1中溶解藥物溶劑為注射用水和酸性物質組成。3.權利要求2的溶解藥物的溶劑中酸性物質為醋酸、擰檬酸、磷酸、乳酸、酒石酸、琥珀酸或他們的混合物。4.權利要求3的酸性物質與藥物替莫唑胺的比例為0.125-1(按分子量計算)。5.權利要求3中優選的酸性物質與藥物的比例為0.2-0.3。6.權利要求3中優選的酸性物質與藥物的比例為0.25。7.權利要求3中在酸性物質中優選醋酸。全文摘要本發明公開了一種用于靜脈和腦內注射的二元溶液型制劑，如右。該制劑的主要活性成分為替莫唑胺，其組成為二元體系，包括替莫唑胺無菌粉和溶解藥物的溶劑。利用該溶劑的組合配伍可獲得使用型替莫唑胺溶液劑。本發明的特點是①二元制劑在室溫穩定兩年以上；②配制使用的藥液在室溫至少穩定48小時，可以滿足注射給藥的使用要求；③溶劑無毒無刺激，配制藥物可用于手術中腦內給藥，立體定位瘤內注射局部化療。文檔編號A61K9/08GK101467967SQ20071030478公開日2009年7月1日申請日期2007年12月29日優先權日2007年12月29日發明者馮志媛,張秀國,陳圓圓申請人:北京京衛燕康藥物研究所有限公司