一種洛伐他汀結構類似物及其制備方法與用途的制作方法

專利名稱：：一種洛伐他汀結構類似物及其制備方法與用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種降血脂藥物，特別涉及一種洛伐他汀結構類似物及其制備方法和用途。
背景技術：
：洛伐他汀(Lovastatin)化學名稱為(5)-2-甲基丁酸-(l&3&7&8&8a/)—1,2,3,7,8,8a-六氫-3,7-二甲基-8-口-[(2R，4R)-4-羥基-6氧代-2-四氫吡喃基]-乙基卜l-萘酯)(US4231938)屬于3—羥基一3—甲基戊二酰輔酶A(HMG—CoA)還原酶抑制劑，是用于治療家族性高膽固醇癥的第一個他汀類調血脂藥物，其化學結構如式l所示。用-CH3取代式I所示的洛伐他汀分子2"位上的H可以獲得辛伐他汀(Simvastatin)(US4444784)，其抑制膽固醇合成的生物活性強于洛伐他汀。目前，尋找進一步開發洛伐他汀衍生物的可行途徑，以獲得其有效替代物是研究的一個方向。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式l
發明內容本發明的目的在于制備一種新的洛伐他汀衍生物，以開發具有藥用生物活性的物質。在對洛伐他汀發酵代謝各產物結構分析研究中，本發明發現一種類似于洛伐他汀結構的新化合物，其化學結構見式A(圖l)。該化合物是以洛伐他汀為原料，將洛伐他汀經堿水解、環化、上保護基、與2-甲基-2-丁烯酰氯進行酯化反應，再在酸性條件下脫保護后得到，分子式為(324113405，分子量為402.5，其化學名稱為(2Z)-(lS,2S,6R,8S,8aR)-l,2,6,7,8,8a誦六氫-l-(2-((2R，4R)-四氫-4-羥基-6-氧-2H-吡喃)乙基)-2，6-二甲基萘基-8-(2-甲基丁-2-烯酸)酯制備上述洛伐他汀結構類似物的化學反應過程具體如下(1)水解強堿條件下，在甲醇-水的溶液中回流反應，使洛伐他汀分子中的兩個酯基都水解，內酯環開環，得到化合物B;HO.水解洛伐他汀化合物B其中，上述水解反應所用堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀等無機強堿。在回流過程中可通過TLC監測反應至反應完畢，然后純化產物。(2)閉環化合物B在芳香族類溶劑里回流反應，使水解打開的內酯環重新環合，得化合物C;關環化合物B化合物C其中，上述閉環反應所用的芳香族溶劑如甲苯、苯、二甲苯。反應時間以反應完全為準，可以通過TLC進行檢測，一般為3—12小時。(3)上保護對化合物C內酯環上的羥基進行保護，得化合物D;化合物C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物D中的R表示羥基保護基。上述步驟(3)上保護反應中可用硅垸化試劑(包括氯硅垸類化合物，如二甲基叔丁基氯硅垸)選擇性保護內酯環上的羥基，在惰性有機溶劑(如二氯甲垸、四氫呋喃)中，在有機堿(如咪唑)存在的條件下進行反應，反應溫度15—35°C，反應時間為9—18小時。(4)酯化化合物D在無水條件下，與2-甲基-2-丁烯酰氯進行酯化反應得化合物E;上述步驟(4)酯化反應是在有機堿性催化劑存在的條件下，將反應底物在有機溶劑中回流至反應完成。所用的有機堿性催化劑如DMAP(4-二甲氨基吡啶)，有機溶劑可以是體積比為1:2的吡啶和甲苯，回流時間一般為5—12小時，可以通過TLC對反應進程進行監測。反應完成后，減壓蒸餾脫除溶劑，殘留物用乙酸乙酯溶解，分別用稀鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗滌后，分離有機層，然后干燥得到化合物E。(5)脫保護脫除化合物E內酯環上的羥基保護基，得到本發明的洛伐他汀結構類似物化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物E<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物A。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>上述步驟(5)脫保護反應對于硅烷保護基是在有機溶液中，用無機酸溶液脫除，其中，所用的有機溶劑包括乙腈等，所用的無機酸如氫氟酸、鹽酸、硫酸、硝酸等。反應完成后，加入飽和碳酸氫鈉溶液，等氣泡消失完后，用乙酸乙酯萃取，有機相經飽和食鹽水洗滌后用無水硫酸鎂干燥，除去溶劑，粗產物用石油醚和乙酸乙酯重結晶得白色固體產物化合物A。本發明通過對洛伐他汀的分子結構進行改造得到式A所示的洛伐他汀結構類似物(見圖1)，實驗鼠高血脂模型試驗結果表明該化合物具有一定的降血膽固醇和低密度脂蛋白的作用，是一種具有藥用價值(如抑制膽固醇合成)的生物活性物質，可作為洛伐他汀的替代物。而且，該化合物在相當于洛伐他汀的2"-3"位之間是雙鍵，這樣的分子結構可作為進一步衍生合成其他洛伐他汀類似物的平臺，以開發出更為有效的洛伐他汀替代物。圖1是本發明的洛伐他汀結構類似物的分子結構圖；圖2是本發明洛伐他汀結構類似物的核磁共振碳譜；圖3是本發明洛伐他汀結構類似物的質譜。具體實施方式下面通過實施例，并結合附圖具體說明本發明，但不以任何方式限制本發明的范圍。實施例l、化合物A的合成包括以下步驟(1)化合物B的制備在帶機械攪拌的250ml三口瓶中，加入70ml甲醇水溶液(6:1)，冰浴冷卻，將10.0g氫氧化鈉分批加入溶解后，控制溫度5'C，加入10.0g洛伐他汀，然后升溫回流24h,反應完畢，減IE除太甲醇和水，殘留物40ml水溶解后，于15'C以下,用8M的鹽酸溶液酸化至pI^2左右，有大量黃色沉淀生成，劇烈攪拌沉淀完全后，過濾，以石油醚淋洗，然后干燥得8.1g，收率96%。(2)化合物C的制備將化合物B8.0g加入250ml燒瓶中，加入100ml干燥甲苯溶解，加熱回流脫水，5h后反應完全，減壓脫除溶劑，得土黃色固體，加入30ml石油醚攪拌5min,過濾得微黃色固體6.7g，收率88.5%。(3)化合物D的制備將化合物C6.5g,置于150ml燒瓶中，加入60ml二氯甲垸溶解，加入4.0g咪唑，和4.1g二甲基叔丁基氯硅烷，于室溫反應12h，反應完成后，反應液分別用水、稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗滌后，分離有機層，用無水硫酸鎂干燥后，減壓脫除溶劑得粗產品，用石油醚和乙酸乙酯重結晶得白色固體7.1g。(4)化合物E的制備在干燥好的150ml三口瓶中，力卩入0.2gDMAP(4-二甲氨基吡啶)，15ml干燥吡啶和30ml干燥甲苯，升溫回流2h，冷卻后加入化合物D2.0g，然后滴加1.8g2-甲基-2-丁烯酰氯，加完后升溫回流反應6小時，反應完成后，減壓脫除溶劑，殘留物用40ml乙酸乙酯溶解，分別用稀鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液，飽和食鹽水洗滌后，分離有機層，用無水硫酸鎂干燥后，脫除溶劑得紅褐色油狀物1.9g。(5)化合物A的制備將化合物E用25ml乙腈溶解后，加入0.3ml40%氫氟酸，室溫下攪拌反應，TLC檢測反應，2h后，反應完成，加入飽和碳酸氫鈉溶液，等氣泡消失完后，用60ml乙酸乙酯分三次萃取，有機相經飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥。除去溶劑，粗產物用石油醚和乙酸乙酯重結晶得白色固體1.4g，即為目的產物化合物A，其HPLC純度為97%以上，該產物的核磁共振碳譜和質譜分析分別如圖2和圖3所示。實施例二、化合物A的急性毒性實驗取小白鼠20只，雌雄各半，灌胃給化合物A,劑量為2000mg/kg。給藥后連續觀察14天，記錄小白鼠出現的反應情況。試驗結果為受試小鼠在給藥后連續觀察了14天，無一例死亡，其他指征如活動度、步態、呼吸、進食、毛色、大小便均正常。得出化合物A的LD5o大于2000mg/kg體重，其急性毒性比洛伐他汀(LD5()大于1000mg/kg體重)小。因此，可以認為化合物A的急性毒性很小。實施例三、化合物A的調血脂作用取Wistar大鼠32只，雄性，體重180-210g，實驗前先喂養3天適應環境，實驗時先稱重并隨機分為4組，然后分組喂養，艮P:m正m^M組甩普通飼料喂養；6-s,^m^i66g#a^^0.5。/。g/ml的羧甲基纖維素鈉(CMC)溶液0.5ml;(2)高脂模型組以下述高脂飼料配方建立高脂大鼠動物模型按10kg普通飼料添加膽酸25g、膽固醇130g、甲基硫氧嘧啶20g、豬油500g、雞蛋500g;每天傍晚6-8點按大鼠每100g體重給予0.5%g/mlCMC溶液0.5ml;(3)高脂+化合物A低劑量組用上述高脂飼料喂養；每天傍晚6-8點按大鼠每100g體重給予含0.12%g/ml化合物A的0.5%CMC溶液0.5ml(化合物A的用量相當于6mg/kg體重/天)；(4)高脂+化合物A高劑量組:用上述高脂飼料喂養；每天傍晚6-8點按大鼠每100g體重給予含0.24%g/ml化合物A的0.5%CMC溶液0.5ml(化合物A的用量相當于12mg/kg體重/天)。連續喂養、給藥2月和3月后分別剪尾取血(取血前動物禁食16小時)，以市售試劑盒，用全自動生化分析儀測定全血總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度膽固醇(LDL-C)水平。實驗結果見表l，顯示與普通飼料喂養的大鼠相比，以高脂飼料喂養大鼠2月，血中總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平均顯著升高，提示高脂血癥動物模型建立成功。化合物A6mg/kg/d和12mg/kg/d灌胃給予2月，均無明顯降低TC和LDL-C的作用。但連續給藥3月，可見該藥呈時間依賴性降低全血TC和LDL-C水平的作用。高劑量組明顯降低LDL-C水平。表1.化合物A對實驗性高血脂大鼠調脂作用觀察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>**與相應正常對照組比,p0.01^與相應高脂模型組比,pO.05;※與相應2月處理組比,p<0.05;試驗結果表明化合物A在使用適當劑量時，對實驗性大鼠高血脂模型有一定降血膽固醇和低密度脂蛋白作用。權利要求1.式A所示結構的化合物，其分子式為C24H34O5，分子量為402.5。式A2.—種含有至少一根至少部分涂有含有下述物質的組合物的纖維的須條a)至少一種松香，b)至少一種甲硅烷基化的聚胺，c)至少一種成膜物質，d)至少一種有機硅烷偶聯劑。3.根據權利要求1或2的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計為45-99wt%。4.根據權利要求3的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計為60-90wt呢。5.根據權利要求4的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計為70-85wt%。6.根據權利要求3的須條，其特征在于所述至少一種松香選自化學改性松香。7.根據權利要求6的須條、其特征在于所述至少一種松香含有至少一個縮水甘油醚基和至少一個聚乙二醇基。8.根據權利要求1或2的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質在組合物中的量以固體總量計為O.1-0.10wt%。9.根據權利要求8的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質在組合物中的量以固體總量計為O.l-5wt%。10.根據權利要求9的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質在組合物中的量以固體總量計為O.5-2wt%。11.根據權利要求書8的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質選自聚亞烷基多元醇和聚亞氧烷基多元醇。化合物D化合物E5)脫除化合物E內酯環上的羥基保護基，得到式A所示的化合物。化合物E式A3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中的芳香族溶劑選自甲本、本、一甲本。4.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)是用硅垸化試劑選擇性保護內酯環上的羥基。5.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述硅烷化試劑是二甲基叔丁基氯娃院o6.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟5)是在有機溶劑中用無機酸溶液脫除硅垸保護基。7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟5)所用的有機溶劑為乙腈，所用的無機酸選自氫氟酸、鹽酸、硫酸、硝酸。8.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)采用有機堿性催化劑，將化合物D與2-甲基-2-丁烯酰氯在有機溶劑中回流反應。9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中使用的有機堿性催化劑是4-二甲氨基吡啶，有機溶劑是體積比為l:2的吡卩定和甲苯。10.權利要求1所述的化合物在制備降血脂藥物中的應用。全文摘要本發明涉及一種洛伐他汀結構類似物，其結構如式A所示，分子式為C₂₄H₃₄O₅，分子量為402.5。該化合物的制備是以洛伐他汀為原料，將洛伐他汀經堿水解、環化、上保護基、與2-甲基-2-丁烯酰氯進行酯化反應，再在酸性條件下脫保護后得到。通過進行實驗大鼠高血脂模型試驗，結果表明該化合物有一定的降血膽固醇和低密度脂蛋白的作用，可用于制備降血脂的藥物，而且，該化合物還可作為進一步衍生合成其他洛伐他汀類似物的平臺。文檔編號A61P3/06GK101230055SQ200710195760公開日2008年7月30日申請日期2007年12月14日優先權日2006年12月26日發明者晶何,冉啟平,吳舉斌,明郭,珊陳申請人:重慶大新藥業股份有限公司;北大方正集團有限公司