專利名稱：一種紫杉醇或多烯紫杉醇的靜脈注射乳劑的制作方法
技術領域：
本發明屬中藥制藥領域，具體涉及抗癌藥物紫杉醇或多烯紫杉醇的靜脈注射用乳 劑及其制備方法。本發明的靜脈注射乳劑，其中的乳化劑十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯 的剌激性小、性質穩定，且具有逆轉腫瘤耐藥的作用，有望實現抗癌藥物紫杉醇或多 烯紫杉醇更好的療效。
背景技術：
紫杉醇和多烯紫杉醇是目前臨床應用廣譜化療藥物之一。它們是二十世紀七十年 代自紅豆杉或其種屬的樹皮或針葉中獲得的二萜類化合物，對于卵巢癌、乳腺癌、結 腸癌、非小細胞肺癌、頭頸癌、黑色素瘤均有較好的治療作用。其作用機制是促進微 管聚合，減慢微管的解聚速度，達到阻止細胞分裂的效果。
研究表明，紫杉醇或多烯紫杉醇在水中幾乎不溶(溶解度〈0.006mg/ml)，水溶液 無法直接給藥。目前，紫杉醇的臨床應用制劑是以Cremaphor EL為增溶劑、乙醇為共 溶劑的注射劑，每毫升含有6mg紫杉醇、527mg Crem叩hor EL (聚氧乙基蓖麻油)和 49.7% (容積百分數)USP規格無水乙醇。臨床實踐顯現，Cremaphor EL會引起嚴重的 過敏反應，如面紅、心跳過速、呼吸困難、皮疹等，使用前需要給予抗組胺藥物和激 素等。多烯紫杉醇注射液釆用大量吐溫80也會引起嚴重的過敏反應。
近年來，有關技術領域進行了若干關于紫杉烷類的新型給藥系統的研究，如乳劑、 脂質體、長循環脂質體、納米粒、環糊精等。其中乳劑的乳化劑采用蛋黃卵磷脂、吐 溫80、 PEG化磷脂等乳化劑，都能一定程度上提高紫杉醇或者多烯紫杉醇的溶解度和 延緩藥物釋放，但是其中的磷脂易氧化產生有害物質；脂質體的包封率、藥物穩定性 和泄露等工藝復雜。聚合物膠束多釆用生物降解材料、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物。 大多數處于實驗室階段，其中紫杉醇的白蛋白納米粒混懸液已經被美國FDA批準，紫 杉醇的脂質體在國內也已經處于臨床研究階段。對紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑 的更新成為研究人員的關注點。十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯是一種具有良好生理耐受性的表面活性劑，其粘度隨 濃度的增大無明顯變化，可以實現無痛給藥。安全性考察顯示，十二羥基硬脂酸聚乙 二醇酯的紅血球溶解量低于吐溫80十倍以上，組胺水平低幾十到幾百倍，且其作為乳 化劑使用前無需使用抗組胺劑和類皮質激素；有文獻報道，十二羥基硬脂酸聚乙二醇 酯具有逆轉腫瘤細胞對多種抗腫瘤藥物耐藥性的特點。因此，十二羥基硬脂酸聚乙二 醇酯作為抗腫瘤藥物乳劑的乳化劑，具有毒副作用小、可提高耐藥腫瘤細胞對紫杉醇 敏感程度的優點。目前尚無利用十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯為乳化劑進行紫杉醇乳劑 研究的報道。
乳劑是難溶性和不溶性藥物的良好載體，且可以實現穩定藥物、減輕刺激性、降 低毒副作用的目的。成功上市的含藥脂肪乳包括地西泮、異丙酚、甲芐咪唑丙泊酚靜 脈乳，治療化療失敗的晚期非小細胞肺癌的橄香烯靜脈注射乳劑等。因此靜脈乳劑安 全性確定、性質穩定、易于產業化，臨床前景廣闊。
發明內容
本發明目的是對紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑進行更新，提供一種刺激性小、 性質穩定，療效好的紫杉烷類靜脈注射乳劑。
本發明提供的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，由難溶性的紫杉醇或多烯紫杉 醇和注射用油、乳化劑和其它藥劑學上必要的輔料按下述配比(W/V)組成
組成
紫杉醇或多烯紫杉醇 注射用油 有機溶劑 乳化劑 抗氧劑 等滲調節劑 pH調節劑 注射用水
所述的乳化劑選自十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯或其與卵磷脂、Tween80、 Span20、 聚氧乙烯(氫化)蓖麻油、或單油酸甘油酯中的混合物的一種或一種以上的混合物，
含量％ (W/V) 0.01-5% 0. H0%
0- 腦 0. 1-10%
0. 01-0. 5%
1- 10%
調節pH至5. O-IO優選十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯；
所述的注射用油選自紅花油、魚油、大豆油、辛癸酸甘油酯、甘油三酯、月見草 油、沙棘油或葵花籽油或其中一種以上的混合物；
所述的有機溶劑選自甘油、丙二醇、PEG400、乙醇或異丙醇或其中一種以上的混 合物；
所述的等滲調節劑選自甘油、山梨醇、甘露醇或葡萄糖；
所述的抗氧劑為生育酚；
所述的pH調節劑為NaOH或鹽酸。
本發明紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑通過下述制備方法
按配方量稱取或量取紫杉醇和多烯紫杉醇、注射油、乳化劑、助乳化劑和抗氧劑， 在20-8(TC條件下混合攪拌溶解得油相；按配方量取注射用水和等滲調節劑，在20-80 t:條件下攪拌均勻得到水相，將油相和水相在20-8(TC條件下混合，采用剪切乳化或攪 拌乳化10-100分鐘，轉速為500-12000轉/分，用pH調節劑調節至5. 0-10. 0，得到初 乳，測定其粒徑約0.5-20um，將初乳通過高壓均質機乳化、機械攪拌乳化機、超聲乳 化或膠體磨乳化分散、微射流儀等制備注射乳，粒徑符合藥典對靜脈注射乳劑的要求， 分裝，充氮，滅菌，得紫杉醇注射乳劑。
產品為白色或乳白色液體，偶有乳光，載藥量為O. 1-5mg/ml，平均粒徑為80-800 nra， pH為5. 5-8. 5。
經粒徑穩定性考察實驗和溶血性對比試驗，結果顯示本注射乳劑的穩定性良好， 溶血性顯著小于市售紫杉醇注射劑，有助于提高紫杉醇的給藥安全性和有效性。
本發明的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑其突出的特點是，采用十二羥基硬脂 酸聚乙二醇酯替代現有技術紫杉醇或多烯紫杉醇注射液中Cremophor EL或吐溫80，能 降低注射劑的過敏反應；釆用合適的注射用油及乳化劑等組分及合適的制備方法，其 制備工藝方法簡便可行，適用于大量制備和工業化生產，載藥量大，穩定性好，可貯 存2年之久。
本發明乳劑可制備成含藥量不同的紫杉醇乳劑，直接用于靜脈注射或稀釋后均可。 直接使用時，使用方便，能防止輸液中間的污染，用藥安全、刺激性小，減少了輸液 時的疼痛，易為患者接受。該乳劑可以作為紫杉醇給藥載體，又可以作為病人的營養 補充劑，且因為粒徑效應，具有一定的靶向作用。
圖1是實施例1-6處方4'C下的粒徑穩定性考察結果。 圖2是實施例1-6處方37. 5。C的粒徑穩定性考察結果。 圖3是注射乳劑于市售注射劑的溶血性對比試驗結果。
具體實施例方式
實施例l制備含藥0.01%紫杉醇的紫杉醇乳劑
稱取紫杉醇或多烯紫杉醇100 mg，大豆油100 g，乙醇25 g， Solutol 15 20 g 及生育酚O. lg，攪拌溶解得到油相，加入甘油22.5g，加入注射用水至1000 ml， 40 。C下混和，用剪切乳化攪拌器乳化40 min (轉速1500轉/分鐘)，用氫氧化鈉(0. 1 mol) 調節pH至7.0，使用高壓均質機20000 psi下循環6次，過濾滅菌后分裝，充氮得到 紫杉醇乳劑成品，該乳化劑平均粒徑113.8nm，紫杉醇含量為0. 00965%， pH為7. 0。
實施例2制備含藥0.05%紫杉醇的紫杉醇乳劑
稱取紫杉醇或多烯紫杉醇500 rag，大豆油100 g，乙醇25 g， Solutol 15 20 g 及生育酚O. lg，攪拌溶解得到油相，加入甘油22.5g，加入注射用水至l000 ml， 40 t下混和，用剪切乳化攪拌器乳化60 min (轉速2000轉/分鐘)，用鹽酸(0.1 mol) 調節pH至6.0，使用高壓均質機20000 psi下循環5次，過濾滅菌后分裝，充氮得到 紫杉醇乳劑成品，該乳化劑平均粒徑119.2nm，紫杉醇含量為0.00487%, pH為6. 17。
實施例3制備含藥0. 12%紫杉醇的紫杉醇乳劑
稱取紫杉醇或多烯紫杉醇1.2 g，中鏈油IOO g，乙醇30 g， Solutol 15 20 g， 及生育酚O. 1 g，攪拌溶解得到油相，加入甘油22.5 g，加入注射用水至1000 ml， 40 'C下混和，用剪切乳化攪拌器乳化40 min (轉速2000轉/分鐘)，用氫氧化鈉(0.1 mol) 調節至pH至7.0，使用高壓均質機15000 psi下循環5次，過濾滅菌后分裝，充氮得 到紫杉醇乳劑成品，該乳化劑平均粒徑120nm，紫杉醇含量為0.1.1942%， pH為6. 89
實施例4制備含藥0. 5%紫杉醇的紫杉醇乳劑稱取紫杉醇或多烯紫杉醇5. 0 g，中鏈油200 g，乙醇50g， Solutol 15 25 g， 及生育酚O. 1 g，攪拌得到油相，加入甘油22. 5 g，加入注射用水至1000 ml， 4(TC下 混和，用剪切乳化攪拌器乳化50 min (轉速2000轉/分鐘)，用鹽酸(0.1 mol)調節 pH至6.4，使用高壓均質機在20000 psi下循環6次，過濾滅菌后分裝，充氮得到紫 杉醇或多烯紫杉醇注射乳劑，平均粒徑為180.2 nm，紫杉醇含量為0.4951%， pH為 6.51
實施例5制備含藥1%紫杉醇的紫杉醇乳劑
稱取紫杉醇或多烯紫杉醇10.0 g，中鏈油400 g，乙醇50g， Solutol 15 25 g， 及生育酚O. lg，攪拌得到油相，加入甘油22.5g，加入注射用水至1000 ml， 40'C下 混和，用剪切乳化攪拌器乳化50 min (轉速2000轉/分鐘)，用鹽酸(0.1 mol)調節 pH至6.4，使用高壓均質機在20000 psi下循環6次，過濾滅菌后分裝，充氮得到紫 杉醇或多烯紫杉醇注射乳劑，平均粒徑為156.1 nm，紫杉醇含量為0.9851%， pH為 6.51
實施例6穩定性評價
1. 取制得的注射乳劑l ml置離心管中，3000 r/min離心10 min，無分層現象。
2. 各處方于-2(TC冷凍24 h，后38 'C下融化，反復3個循環后，乳劑狀態無變化， 無分層現象。
3. 各處方于4。C放置，分別于0、 5、 15、 25、 30、 45天取樣品5yl稀釋至lml，采 用納米粒徑測定儀測定粒徑，評價其儲存條件下的穩定性，粒徑變化如圖l，粒徑無 顯著變化，可見該注射乳劑4。C儲存條件下穩定性良好
4. 各處方于38 。C放置，分別于0、 5、 15、 25、 30、 45天取樣品5 u 1稀釋至1 ml， 采用納米粒徑測定儀測定粒徑，評價其38'C下的穩定性，粒徑變化如圖2，粒徑無 顯著變化，可見該注射乳劑在38'C下穩定性良好。
實施例7溶血性考察
制備2%兔紅細胞混懸液。采用生理鹽水將本發明注射乳劑和市售注射液分別配置 成藥物濃度為0. 2 mg/mL， 0. 4mg/mL， 0. 6mg/mL， ，0. 8rag/mL， 1.0mg/mL， 1.2mg/mL。取10mL具塞離心管，分別加入2.5mL上述稀釋藥液，取2. 5mL生理鹽水作為陰性對照 管，取ff鮮蒸餾水2. 5mL作為陽性對照管。向上述各管中分別加入2. 5mL 2%紅細胞混 懸液后輕輕搖勻后，置于37。C水浴中恒溫lh，置于離心機中4000r.mirT'離心15rain， 吸取上清液于比色皿中，分別于577nm處測得各管吸光度。溶血度的計算公式，溶血 度％= (A樣一A陰)/ (A陽一A陰)xl00%。結果顯示本發明注射乳劑的溶血性顯
著小于市售紫杉醇注射劑，有助于提高紫杉醇的給藥安全性和有效性。
權利要求
1、一種紫杉醇或多烯紫杉醇的靜脈注射乳劑，其特征是由紫杉醇或多烯紫杉醇和注射用油、乳化劑和其它藥劑學上必要的輔料按下述配比W/V組成組成 含量％W/V紫杉醇或多烯紫杉醇0.01-5％注射用油 0.1-40％有機溶劑 0-10％乳化劑0.1-10％抗氧劑0.01-0.5％等滲調節劑1-10％pH調節劑 調節pH至5.0-10注射用水 適量；所述的乳化劑為十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯。
2、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 乳化劑還選自十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯與卵磷脂、Tween80、 Span20、聚氧乙 烯(氫化)蓖麻油、或單油酸甘油酯的混合物的一種或一種以上的混合物。
3、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 注射用油選自紅花油、魚油、大豆油、辛癸酸甘油酯、甘油三酯、月見草油、沙 棘油、葵花籽油中的一種或一種以上的混合物。
4、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 有機溶劑選自甘油、丙二醇、PEG400、乙醇或異丙醇中的一種或一種以上的混合 物。
5、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 等滲調節劑為甘油、山梨醇、甘露醇或葡萄糖。
6、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 抗氧劑為生育酚。
7、 根據權利要求1所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑，其特征是所述的 pH調節劑為NaOH或鹽酸。
8、權利要求1的所述的紫杉醇或多烯紫杉醇靜脈注射乳劑的制備方法，其特征 是通過下述步驟按配方量稱取或量取紫杉醇或多烯紫杉醇、注射油、乳化劑、助乳化劑和抗 氧劑，在20-80'C條件下混合攪拌溶解得油相；按配方量取注射用水和等滲調節 劑，在20-8(TC條件下攪拌均勻得到水相，將油相和水相在20-8(TC條件下混合， 采用剪切乳化或攪拌乳化10-100分鐘，轉速為500-12000轉/分，用pH調節劑 調節至5.0-10.0，得初乳；將初乳通過高壓均質機乳化、機械攪拌乳化機、超 聲乳化或膠體磨乳化分散或微射流儀制備注射乳，分裝，充氮，滅菌，得紫杉醇 或多烯紫杉醇注射乳劑。
全文摘要
本發明屬中藥制藥領域，具體涉及抗癌藥物紫杉醇或多烯紫杉醇的新型靜脈注射用乳劑及其制備方法。本發明由紫杉醇或多烯紫杉醇和注射用油、乳化劑尤其是十二羥基硬脂酸聚乙二醇酯和其它藥劑學上必要的輔料組成，經試驗，結果顯示本注射乳劑的穩定性良好，溶血性顯著小于市售紫杉醇注射劑，有助于提高紫杉醇的給藥安全性和有效性。本發明的靜脈注射乳劑，可以直接用于靜脈注射，用藥安全、刺激性小，易為患者接受，且可作為能量補充劑。產品穩定性好，載藥量大，使用方便，制備工藝方法簡便，適用于大生產。
文檔編號A61K9/107GK101433533SQ20071017041
公開日2009年5月20日 申請日期2007年11月14日 優先權日2007年11月14日
發明者侯惠民, 陸偉躍, 衛 陳 申請人:復旦大學