專利名稱：一種千層塔提取物及其制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，具體涉一種千層塔提取物及其制備方法。
技術背景千層塔別名蛇足石杉、山芝、蛇足草，為石杉科石杉屬的一種藥用蕨類植物。在我 國分布廣泛，民間常將全草用于治療跌打損傷、淤血腫痛、精神分裂等疾病。千層塔植 物成分復雜，目前國內外研究較多的是其生物堿成分，其中的石杉堿甲是一種高效、低 毒、可逆并高選擇性抑制乙酰膽堿酯酶的藥物，可用于治療重癥肌無力、提高學習以及 改善老年人的記憶功能等。有關千層塔植物中黃酮類物質的研究還未見報道，尤其是層塔植物中黃酮類物質與 石杉堿甲配伍使用后的增效減毒作用，我們研究發現從千層塔中提取的總黃酮具有抗氧 化、抗衰老以及增強機體免疫力等功能，與石杉堿甲配伍使用，具有增效減毒的作用， 其突出優勢是不但大大提高了石杉堿甲的安全性，而且臨床療效顯著，尤其是治療血管 性癡呆效果更為顯著。發明內容本發明的千層塔提取物，該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包 含石杉堿甲，總黃酮包括黃酮和黃酮醇，該提取物中總生物堿的含量以重量表示為 10-90%，總黃酮的含量以重量表示為10-90%。本發明千層塔提取物其制備方法如下取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用稀乙醇回流提取，提取液過濾，濾 渣備用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼續減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮，粗總黃酮用去 離子水溶解，過濾，用大孔吸附樹脂柱層析，收集稀乙醇洗脫液，減壓濃縮得稠膏狀， 進一步結晶或純化得總黃酮；將乙醇提取藥渣和濾渣合并干燥，加入適量鹽酸浸泡使其 充分膨脹后，酸解，收集酸解液，減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，用氨水調PH，靜置 過濾，收集濾液，濾液用氯仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓 回收氯仿后藥液繼續濃縮成膏狀物，減壓干燥得粗總生物堿，粗總生物堿用硅膠柱層析， 再用氯仿和乙醇按一定比例洗脫，收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，有機溶劑 充分結晶，總生物堿。其中大孔吸附樹脂柱為市售的各種型號包括D101、AB-8、NKA、
DM130、 HZ掘、HP20、 sp207、 SP825等所有市售型號。本發明千層塔提取物，可以作為活性成分與藥物載體配制成藥劑學上的各種制劑， 該制劑包括口服、注射和局部給藥。本發明千層塔提取物，可以用于制備改善記憶，阻止和治療老年癡呆的藥物。本發明千層塔提取物測定方法如下總黃酮含量測定方法采用分光光度法測定總黃酮含量，即利用黃酮類化合物與鋁鹽反應生成紅色絡合物，以蘆丁為標準品在500nm處測定吸光度。總生物堿含量測定方法采用分光光度法測定總黃酮含量，以石杉堿甲為標準品測定吸光度。實施例一 (本發明提取物的制備方法)取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用藥材8倍量的60%的乙醇回流提 取3次，每次6小時，合并3次提取液，過濾，濾渣備用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼 續減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮。粗總黃酮用適量的去離子水溶解，靜置，過濾，濾液按h IO上裝有大孔樹脂的層 析柱，先用去離子水洗脫，再用70%的乙醇洗脫，收集70%的乙醇洗脫液，減壓濃縮 得稠膏狀，得粗總黃酮，總黃酮進一步純化得本發明提取物中的總黃酮。將上述乙醇提取藥渣和濾渣合并揮干，按藥渣量加入10倍量的PH為3的鹽酸浸 泡10小時，讓其充分膨脹后，在50-6(TC酸解3次，每次50分鐘。收集3次酸解液， 減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，.用氨水調PH為9-10，靜置，過濾，收集濾液。濾液用 等體積的氯仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓回收氯仿后藥液 繼續濃縮成膏狀物，減壓干燥得粗總生物堿。粗生物堿按膏藥量的3-5%加200目的層析硅膠拌樣，自然揮干氯仿，上柱，先用 氯仿和乙醇按一定比例洗脫(TLC跟蹤檢驗)，再用氯仿和乙醇按適當比例洗脫(TLC 檢驗)，收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，加入約3倍量的丙酮攪拌混合均勻 (可重復3-4次)，充分結晶，吸取上清夜，抽濾，結晶品減壓干燥，得總生物堿。
實施例二 (本發明提取物的臨床療效觀察)資料與方法病例選擇VD患者，年齡50 80歲，性別不限，符合美國精神障礙 診斷與統計手冊第4版(DSM-IV)中的癡呆診斷標準和VD診斷標準患者有照料者或 知情者；既往有中風史，或根據體檢、CT或MRI檢查證實，Hachinski缺血指數(HIS) 》7分，簡明智力檢查量表(MMSE)得分為15 24分。排除標準有意識障礙，譫妄， 癲癇，精神病，重度失語，明顯感覺運動損害，有神經心理測驗證據的病例均不能入組。 且排除其他能引起記憶、認知功能障礙的腦部疾病和系統性疾病，嚴重心、腎功能不全 者。治療組中男性19例，女性13例，年齡50 79歲，平均60.8士14.8歲。既往有高 血壓病史22例，有糖尿病史15例，有冠心病史10例；對照組中男20例，女13例， 年齡50 80歲，平均60.4± 12.9歲。既往有高血壓病史21例，有糖尿病史10例，有 冠心病史14例。兩組患者的年齡、性別、文化程度、梗死病灶數、癡呆病程、癡呆量 表及HIS缺血評分等方面無顯著性差異(PX)05)，具有可比性。治療方法兩組均予常 規治療，包括調整血壓，控制血糖及防治并發癥。對照組給予石杉堿甲0.2mg，每日2次口服治療組本發明提取物壓制成片0.2g (含石杉堿甲O.lmg)，每日2次口服療程均為2個月，治療期間均不用影響智能的藥物，治療前后均進行必要的血常規、 尿常規、肝功能、血糖、血脂、心電圖等檢査。療效評定標準①簡明精神狀態檢査表MMSE，檢測患者治療前后的認知功能(定 向力、記憶力、計算力、語言能力、視空間及運用能力等)；②評定治療前后的日常生 活能力(ADL評分采用Batherel指數量表)。結論本研究結果顯示本發明提取物組治療前后MMSE、 ADL評分及血液流變學 比較均有明顯改善(PO 05)，與對照組相比兩組治療后有顯著性差異(PO 05)，治療組 優于對照組。本發明提取物制劑，主要含有總生物堿和總黃酮等化學成分，我們研究發現總黃酮 具有擴張血管，改善微循環及細胞代謝，減少毛細血管通透性，降低血管阻力，增加腦 血流量和改善腦缺氧，清除自由基，降低血液黏稠度，減少微血栓形成，改善血流動力 學的作用，因此我們認為本發明提取物對血管性癡呆患者認知能力及血液流變學的改善 有顯著療效，兩者配伍可明顯改善認知功能，擴張血管，改善微循環，增加腦血流量和 改善血流動力學，對血管性癡呆患者的治療和預防均有較大的臨床意義。
實施例三(本發明提取物制劑制備) 1、巴布齊ij制備處方成分重量(g)本發明提取物0.2聚丙烯酸酯18月桂氮卓酮0.6月桂酸1.8丙二醇5.4乙酸乙酯15按照通常巴布劑的做作進行，將上述攪拌均勻，涂布于聚酯防粘層上，60度干燥2 分鐘后，覆蓋聚氨基甲酯膜背襯層，切片即可。2、 粉針劑制備處方成分 重量(g)本發明提取物 0.05 鹽酸 適量 甘露醇 50按照常規凍干粉針的操作進行，將本發明提取物加適量鹽酸溶解，加入甘露醇， 定容至1000ml，調節PH值至4.0 — 5.5之間，除菌過濾，冷凍干燥即得。3、 片劑制備處方(200片):成分 重量(g)本發明提取物 0.2乳糖 4.8糊精 10 微晶纖維素 10 硬脂酸鎂 0.2按照常規片劑的操作方法，以上混合均勻，濕法制粒，最后加入硬脂酸鎂混合均勻 壓制成每片200mg。4、滴丸劑制備處方成分 重量(g)本發明提取物 O.lg聚乙二醇6000 10g聚乙二醇4000 20g聚山梨酯80 0.3g乙醇 lml制成 1000丸制法將石杉堿甲溶解于乙醇中充分溶解，成為石杉堿甲分散乙醇液，加入已熔融的聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚山梨酯80組成的基質中，充分攪拌至均勻，以二 甲基硅油為冷卻劑，15。C下滴制成丸，擦丸，干燥，即得。
權利要求
1、一種千層塔提取物，其特征在于該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包含石杉堿甲，總黃酮包括黃酮和黃酮醇。
2. 根據權利要求1所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物中總生物堿的含量以重量表 示為10-90%，總黃酮的含量以重量表示為10-90%。
3. 根據權利要求1所述的千層塔提取物，其制備方法如下取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用稀乙醇回流提取，提取液過濾，濾渣備 用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼續減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮，粗總黃酮用去離子水溶 解，過濾，用大孔吸附樹脂柱層析，收集稀乙醇洗脫液，減壓濃縮得稠膏狀，進一步結晶或 純化得總黃酮；將乙醇提取藥渣和濾渣合并干燥，加入適量鹽酸浸泡使其充分膨脹后，酸解， 收集酸解液，減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，用氨水調PH，靜置過濾，收集濾液，濾液用氯 仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓回收氯仿后藥液繼續濃縮成膏狀 物，減壓干燥得粗總生物堿，粗總生物堿用層析硅膠層析，再用氯仿和乙醇按一定比例洗脫， 收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，有機溶劑充分結晶得總生物堿。
4. 根據權利要求1所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物可以作為活性成分與藥物載 體配制成藥劑學上的各種制劑。
5. 根據權利要求1一4所述的千層塔提取物，其特征在于該制劑的給藥途徑可以是口服、注 射和局部給藥。
6. 根據權利要求1一5所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物可以用于制備改善記憶， 阻止和治療老年癡呆的藥物。
全文摘要
本發明涉及一種千層塔提取物，該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包含石杉堿甲，在提取物中含量以重量表示為10-90％，總黃酮包括黃酮和黃酮醇，在提取物中含量以重量表示為10-90％。
文檔編號A61P25/28GK101396380SQ20071015205
公開日2009年4月1日 申請日期2007年9月28日 優先權日2007年9月28日
發明者張文芳, 趙守明 申請人:趙守明;張文芳