專利名稱：治療性腺機能減退的藥物組合物和方法
技術領域：
本發明涉及在凝膠制劑中含有睪酮的藥物組合物及其使用方法。
背景技術：
A.男性的睪酮代謝睪酮是男性的主要循環雄激素。每天產生的6-7mg睪酮中超過95％都是由睪丸中約5億個萊迪希細胞分泌的。垂體產生的兩種激素，促黃體激素(“LH”)和促濾泡素(“FSH”)，是發育和維持睪丸機能所必需的。
調節萊迪希細胞數量和功能的最重要的激素是LH。在性腺正常的男性中，增加的睪酮濃度通過負反饋途徑抑制下丘腦釋放促性腺素釋放激素(“GRH”)，通常可以抑制垂體分泌LH。FSH促進精子發生且對于精子的正常成熟是必需的。垂體對FSH的分泌通常受到負反饋途徑(通過增加睪酮濃度)的抑制。
睪酮主要負責發育并維持男性的第二性征。體內，循環的睪酮通過兩種不同的途徑代謝成各種17-酮類固醇。睪酮可以被5α-還原酶代謝為二氫睪酮(“DHT”)。體內有兩種形式的5α-還原酶一種主要在肝臟和非生殖上皮中被發現，另一種在男性的泌尿生殖道和兩性的生殖上皮中被發現。睪酮還可以被在肝臟、脂肪和睪丸中發現的芳香酶代謝成雌二醇(“E2”)。
睪酮在血液循環中的98％與蛋白質結合。男性中，大約40％的結合是與高親合性性激素結合球蛋白(“SHBG”)結合。剩下的60％與白蛋白微弱結合。因此，由臨床試驗室獲得了大量對睪酮的測量結果。這里使用的術語“游離”睪酮是指血液中未與蛋白質結合的睪酮部分。這里使用的術語“總睪酮”或“睪酮”是指游離的睪酮和與蛋白質結合的睪酮。這里使用的術語“生物可利用的睪酮”是指非SHBG結合的睪酮，包括與白蛋白微弱結合的睪酮。
睪酮向DHT的轉變在很多方面都是重要的。例如，與睪酮相比，DHT以更大的親和力與SHBG結合。此外，在很多組織中，睪酮的活性依賴于還原為DHT，后者能和胞質受體蛋白結合。類固醇受體復合體然后被轉運到細胞核，它在這里引發轉錄和與雄激素作用有關的細胞變化。DHT也被認為可降低前列腺體積并抑制前列腺中腫瘤的發生。因此，鑒于DHT和睪酮在正常人體機能中的重要性，研究者經常以總雄激素(“DHT+T”)或DHT與睪酮的比率(“DHT/T比率”)測定并報告患者的雄激素濃度。
下表來自UCLA-Harbor Medical Center，它總結了正常成年男性的激素濃度范圍表1正常男性的激素水平
文獻中報道的睪酮半衰期有相當大的變異，從10到100分鐘不等。然而，研究者承認，正常年輕男性中循環睪酮有晝間變異。最大水平大約出現在早上6:00-8:00，隨后整天的水平都下降。特征曲線的最大睪酮水平為720ng/dL，最小水平為430ng/dL。然而，這種晝夜周期的生理意義性還不清楚。
B.性腺機能減退的男性和目前對性腺機能減退的治療男性性腺機能減退是由各種睪酮濃度低于正常水平的病理生理學狀況引起的。性腺機能減退狀況有時和許多生理變化有關，比如對性的興趣減退、陽萎、機體肌肉質量減輕、骨密度降低、情緒和精力水平低落。
研究者通常將性腺機能減退歸為三種類型。原發性性腺機能減退包括由于先天或獲得性無睪癥、XYY綜合征、XX男性、假特納氏綜合征、性腺發育不良、萊迪希細胞瘤、睪丸異常下降(maldescended testes)、精索靜脈曲張、單純塞爾托利細胞綜合征、隱睪、雙側扭轉、睪丸消失綜合征、睪丸切除、克萊恩費爾特綜合征、化學療法、酒精或重金屬造成的中毒損傷、以及全身性疾病(腎衰竭、肝硬化、糖尿病、營養不良性肌強直造成的睪丸障礙。原發性性腺機能減退的患者有完整的反饋機制，即低血清睪酮濃度是與高FSH和LH濃度相關的。然而，由于睪丸或其它缺陷，高LH濃度不能有效刺激睪酮產生。
繼發性性腺機能減退涉及自發性促性腺激素或LH釋放激素缺乏。這種類型的性腺機能減退包括卡爾曼綜合征、普-拉-威綜合征、勞-穆-比綜合征、垂體機能不全/腺瘤、帕斯考利尼綜合征、血色素沉著病、血催乳素過多或是由于腫瘤、外傷、輻射或肥胖造成的垂體-下丘腦損傷。由于繼發性性腺機能減退患者未顯示完整的反饋途徑，則較低的睪酮濃度與升高的LH或FSH水平無關，因此，這些男性有低的睪酮血清水平，但促性腺激素在正常至較低范圍內。
第三種性腺機能減退可能與年齡有關。大約20-30歲后，男性的平均血清睪酮會緩慢但持續降低。研究者估算出每年約下降1-2％。在男性中進行橫切面研究發現，80歲時的平均睪酮值約為30歲時的75％。由于SHBG的血清濃度隨著男性年齡增加，生物可利用的睪酮和游離睪酮的降低較之總睪酮的降低更甚。研究者估計，大約50％的50-70歲健康男性的生物可利用睪酮的水平低于正常范圍的下限。此外，隨著男性年齡增加，睪酮濃度的晝夜節律通常會退化、衰減或完全消失。與衰老有關的主要的問題出在下丘腦-垂體單元內。例如，研究者發現，隨著年齡的增加，盡管睪酮水平較低，但LH的水平不會增加。不論其原因，老年男性中未經治療的睪酮缺乏會導致許多生理變化，包括性機能障礙、性欲減退、肌肉量減少、骨密度降低、情緒低落、以及認識機能減退。主要的結果是老年性腺機能減退，或是通常所指的“男性絕經期”。
現在，性腺機能減退是最常見的男性的激素不足，每1000名男性中就有5人受到其影響。目前，據預測，在所有年齡的大約四百萬至五百萬性腺機能減退的美國男性中只有5％正在接受睪酮替代治療。因此，很長時間以來，研究者都在研究對男性輸遞睪酮的方法。這些方法包括肌肉內注射(43％)、口服替代品(24％)、丸狀植入劑(23％)和透皮貼劑(10％)。表2顯示了關于這些方法的總結。
表2各種睪酮制劑的給藥方式和劑量
如下面要討論的，目前使用的所有的睪酮替代法都有一種或多種缺點，比如不受歡迎的藥代動力學特點或皮膚剌激。因此，盡管對有效的睪酮替代法的需求已經有幾十年，但是還沒有研制出能克服這些問題的其它的替代療法。本發明描述了可克服這些與目前的睪酮替代法有關的問題的1％的睪酮的水醇凝膠。
1.皮下丸狀植入劑自從40年代以來，皮下植入劑就已經被用作一種睪酮替代的方法。這種植入劑是通過將睪酮結晶融化成圓柱形制備的。如今，已經制出了含有100mg(長6mm、表面積為117mm2)或200mg(長12mm、表面積為202mm2)睪酮的丸狀植入劑。根據各個體的要求，患者接受的劑量從100-1,200mg。使用套針和套管或者通過直視手術將植入劑通過皮下插入相對移動較少的部位。通常，植入劑被放在下腹壁或臀部。插入是在局部麻醉下進行的，用粘合敷料或細縫線使傷口閉合。
植入劑有一些嚴重的缺點。首先，植入需要手術過程，而許多性腺機能減退的男性不愿接受手術。其次，植入療法有擠出(8.5％)、出血(2.3％)或感染(0.6％)的風險。結痂也是一種風險。可能最重要的是，睪酮丸狀植入劑治療的藥代動力學特點無法為男性提供合適而一致的睪酮水平。一般，皮下睪酮植入劑會產生超過生理學上限的血清睪酮水平，且它緩慢降低，結果在下一次皮下注射前就達到了低于正常的睪酮水平。例如，在最近的一次藥代動力學研究中，接受了6個植入劑(1,200mg睪酮)的性腺機能減退患者在治療后的最初兩天內，出現了最初的短期突發性釋放。在以后的兩個月內保持穩定(第2天1,015ng/dL；第63天990ng/dL)。此后到第300天睪酮水平回落到了基線。DHT血清濃度也在基線上顯著升高，大約在植入后的第63天出現了峰值且大大超過了正常水平的上限。從第21天-第189天，DHT/T的比率顯著升高。
圖1顯示了該研究中睪酮、DHT和DHT/T的藥代動力學特點。參見Jockenhovel等，Pharmacokinetics and Pharmacodynamics ofSubcutaneous Testosterone Implan ts in Hypogonadal Men，45 CLINICALENDOCRINOLOGY 61-71(1996)。其它與植入劑有關的研究有類似的不令人滿意的藥代動力學特點。
2.注射睪酮的酯50年代以來，研究者試驗通過肌肉內儲存注射睪酮酯類(如庚酸酯、環戊丙酸酯)以提高性腺機能減退的男性的睪酮血清水平。最近的研究涉及注射含在油基載體中的睪酮buciclate或睪酮十一烷酸酯。其它的研究者還注射了睪酮微囊制劑。
睪酮酯注射治療有許多問題。接受注射治療的患者通常抱怨這種輸遞機制很痛苦并會造成局部皮膚反應。此外，睪酮微囊治療需要在肌肉內同時注射兩次相對較大的體積，由于溶液的高粘度和有堵塞針頭的可能，這對于注射而言是困難的。其它的人通常發現，睪酮注射治療不方便是因為注射通常需要患者每兩周或三周去拜訪他的醫師。
同樣重要的是，以注射為基礎的睪酮替代治療也產生了令人不滿意的藥代動力學特點。曲線通常顯示，在最初的24-48小時內有超過生理性上限的睪酮濃度，然后在以后的數周逐漸降低，通常降至低于生理性下限。這些高的血清睪酮水平，與E2的增加是平行的，也被認為是使一些患者發生粉刺和男性乳房發育，以及發生紅細胞增多癥(偶爾發生，尤其發生在使用可注射的睪酮酯類的老年患者中)的原因。當注射睪酮buciclate時，治療僅能提供正常的雄激素血清水平，血清睪酮超過基線的最大增加平均不超過172ng/dL(6nmol/dL)。由于性欲、性交能力、情緒和精力被認為會隨血清睪酮水平而有波動，睪酮注射對于這些變數的影響很不成功。因此，睪酮注射仍然是不令人滿意的睪酮替代療法。
3.雄激素的口服/舌下/頰含制劑在70年代，研究者開始采用雄激素(例如氟甲睪酮、17α-甲基-睪酮或睪酮十一烷酸酯)的口服、舌下或頰含制劑作為睪酮替代的方式。最近，研究者以舌下給予睪酮-羥丙基-β-環糊精包合物進行了試驗。可以預言，氟甲睪酮和甲基睪酮都是17-烷基化的，因此與肝臟毒性有關。由于這些物質必需首先通過肝臟，它們還會對血清脂類特點造成不利的影響(增加LDL并降低HDL)，同時會對碳水化合物代謝造成不利影響。而睪酮十一烷酸酯在通過腸淋巴管時被優先吸收，它在美國尚未批準。
口服、舌下或頰含輸遞機制的藥代動力學特點同樣是不令人滿意的，因為患者會達到超過生理學上限的睪酮水平隨后很快回落到基線。例如，最近的一個關于頰含制劑的實驗顯示，患者在給藥30分鐘后達到血清激素水平的峰值，平均血清睪酮濃度為2,688+/-147ng/dL并在4-6小時后回落到基線。參見Dobs等，Pharmacokinetic Characteristics，Efficacy and Safety of Buccal Testosteronein Hypogonadal MalesA Pilot Study，83J.CLINICAL ENDOCRINOLOGY & METABOLISM33-39(1998)。到目前為止，這些睪酮輸遞機制改變生理參數(例如肌肉質量、肌肉強度、骨吸收、尿鈣排泄或骨形成)的能力是不確定的。同樣，研究者提出，超過生理睪酮水平也許對情緒參數(如憤怒、緊張和激動)沒有任何額外的有利影響。
4.睪酮透皮貼劑最近，睪酮輸遞系統涉及到了透皮貼劑。目前，市場上使用了三種透皮貼劑TESTODERM、TESTODERMTTS和ANDRODERM。
a.TESTODERMTESTODERM(Alza Pharmaceuticals，芒廷維尤，加利福尼亞州)是第一個研制的含有睪酮的透皮貼劑。目前有兩種規格的TESTODERM透皮貼劑(40或60cm2)。透皮貼劑含有10或15mg睪酮，每天輸遞4.0mg或6.0mg。TESTODERM被放在剃去毛的陰囊皮膚上，用電吹風加熱幾秒鐘以幫助粘貼。
圖2顯示了40cm2和60cm2兩種透皮貼劑的睪酮的典型藥代動力學特點。研究顯示，每日使用連續2-4周后，DHT的平均血漿濃度和DHT/T比正常水平提高了4-5倍。高的血清DHT水平估計是由于陰囊皮膚中5α-還原酶的代謝增強而造成的。
TESTODERM透皮劑也有一些問題。毫無疑問，許多男性極不喜歡為了最佳接觸而干剃陰囊毛的討厭過程。此外，當接受治療時，患者可能不能穿緊身的內衣。男性在運動或天氣熱時通常會除去透皮貼劑。許多情況下，男性的陰囊區域會有發癢和/或腫脹。最終，許多患者不能獲得足夠的血漿激素水平。
b.TESTODERMTTSTESTODERMTTS(Alza Pharmaceuticals，芒廷維尤，加利福尼亞州)是最近開發的非陰囊透皮貼劑。這是一種每天一次敷用于手臂、背或臀部上方的封閉貼劑。它由透明聚酯/乙烯-醋酸乙烯酯共聚物膜的柔軟韌背襯、睪酮的藥物儲庫以及涂有聚異丁烯粘合劑配方層的乙烯-醋酸乙烯酯共聚物膜構成的。在粘合劑表面上覆蓋有涂有硅酮的聚酯的保護性襯里。
敷貼后，血清睪酮濃度在2-4小時后升至最大值并在將其除去后的2小時內回落到基線。然而，許多男性不能獲得并/或維持正常范圍的睪酮水平。睪酮濃度的藥代動力學參數如下所示表3TESTODERMTTS睪酮參數
用TESTODERMTTS透皮貼劑獲得的典型的24小時的穩態睪酮濃度如圖3所示。
由于TESTODERM透皮貼劑敷用于陰囊皮膚而TESTODERM TTS透皮貼劑敷用于非陰囊皮膚，這兩種透皮貼劑使兩種主要睪酮代謝物DTH和E2達到不同的穩態濃度表4使用TESTODERM和TESTODERMTTS的激素水平
同樣，與陰囊透皮貼劑不同，TESTODERM TTS治療產生的DHT/T比率與安慰劑治療沒有差別。然而，這兩種透皮貼劑都有同樣的問題。在臨床研究中，在12％的患者中，TESTODERMTTS與暫時性癢病有關，3％的患者有紅斑，并有2％的患者有瘙癢。此外，在一項14天的研究中，42％的患者報告有三次或更多次的剝落，其中有33％是在運動是發生的。
c.ANDRODERMANDRODERM(Watson Laboratories公司，科羅納，加利福尼亞州)是一種敷用于非陰囊皮膚的含有睪酮的透皮貼劑。這種圓形的透皮貼劑的總表面積為37cm2。透皮貼劑由含有12.2mg睪酮的液體儲庫和含有乙醇、水、甘油單酯、脂肪酸酯和膠凝劑的增強滲透的載體組成。兩種透皮貼劑(以輪流的方式每晚用于背部、腹部、上臂或大腿)的建議劑量為輸遞4.1-6.8mg的睪酮。
圖4顯示了涉及ANDRODERM的臨床研究的穩態藥代動力學特點。通常，重復敷用ANDRODERM透皮貼劑時，血清睪酮水平在每次敷用后的8小時逐漸上升，在接下來的8小時保持穩定，然后回落。
臨床試驗中，大約三分之一的患者中，ANDRODERM會引起皮膚剌激，并有10％-15％的受試者稱，由于慢性皮膚剌激而無法繼續接受治療。據報道，在敷用ANDRODERM的部位預先敷用皮質類固醇乳膏可以減輕皮膚剌激的發生率和嚴重性。然而，最近的一項研究發現，非常討厭的是中斷治療的皮膚反應的發生率高達52％。參見Parker等，Experience with Transdermal Testosterone Replacement inHypogonadal Men，50CLINICAL ENDOCRINOLOGY(0XF)57-62(1999)。這一研究中提到三分之二的被調查人發現Andropatch不令人滿意。他們說透皮貼劑有噪聲、看上去不可分離、令人難堪、使用和除去時都不舒服，且通常不被社會接受。它們在游泳和沐浴時會滑落，運動伙伴對它們有粗俗的看法，并且在身體和四肢上會留下光禿禿的紅色印跡。當身體移動時，狗、妻子和孩子都會受到噪聲的干擾。那些活動不便或手指不靈巧的人(一些已經超過了70歲)發現，很難除去它的包裝以及將它敷用在背部。
d.透皮貼劑總結總之，與目前使用的其它睪酮輸遞機制相比，透皮貼劑通常可提供改進的藥代動力學特點。然而，如上所述，臨床和研究數據顯示，所有的這些透皮貼劑都有明顯的缺點，比如buritus、灼燒樣水泡和紅斑。此外，最近的一項研究總結到，與透皮貼劑有關的副作用比臨床試驗中的報道“明顯要高”。參見Parker，同上。因此，對多數男性而言，透皮貼劑仍然是不合適的睪酮替代治療手段。
5.DHT凝膠研究者最近開始研究以透皮凝膠的形式對皮膚敷用DHT。然而，DHT凝膠的藥代動力學與睪酮凝膠明顯不同。敷用DHT凝膠會導致血清睪酮、E2、LH和FSH水平降低。因此，DHT凝膠不能有效提高性腺機能減退的男性的睪酮水平。
因此，確切需要有安全并可有效提供最佳且可預測的藥代動力學特點的睪酮制劑。
發明概要本發明解決了上述問題并獲得了技術上的進步。本發明通常包括一種睪酮凝膠。在性腺機能減退的男性中每日透皮敷用這種凝膠會得到獨特的睪酮的藥代動力學穩態特點。長期治療可進一步增加骨礦物質密度、增強性欲、提高勃起頻率和滿意度、增加良好情緒、增加肌肉強度以及改善身體構成，且沒有明顯的皮膚剌激。本發明還涉及一種獨特的敷用睪酮凝膠的方法，它采用了含有與凝膠成分相容的聚乙烯襯里的包裝。
附圖簡述圖1是接受了皮下睪酮丸狀植入劑的患者在植入后300天內的睪酮濃度、DHT濃度和DHT/T比率的示意圖。
圖2是接受了40cm2或60cm2的TESTODERM透皮貼劑的患者的24小時睪酮藥代動力學特點。
圖3是接受了TESTODERMTTS透皮貼劑的患者的24小時睪酮藥代動力學特點。
圖4是接受了ANDRODERM透皮貼劑的患者的24小時睪酮藥代動力學特點。
圖5(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑前的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖5(b)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第1天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖5(c)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第30天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖5(d)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第90天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖5(e)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第180天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖(后期治療組)。
圖5(f)是用5.0g/天的AndroGel治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖5(g)是用10.0g/天的AndroGel治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖5(h)是用睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖6(a)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第1天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖6(b)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第30天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖6(c)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第90天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖(初期治療組)。
圖6(d)是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第180天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖(后期治療組)。
圖6(e)是用5.0g/天的AndroGel治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖6(f)是用10.0g/天的AndroGel治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖6(g)是用睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0、1、30、90和180天的24小時游離睪酮藥代動力學特點的示意圖。
圖7是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0-180天的DHT濃度的示意圖(初期治療組)。
圖8是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0-180天的DHT/T比率的示意圖(初期治療組)。
圖9是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0-180天的總雄激素濃度(DHT+T)的示意圖(初期治療組)。
圖10是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0-180天的E2濃度的示意圖(初期治療組)。
圖11是用5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性第0-180天的SHBG濃度的示意圖(初期治療組)。
圖12(a)是患有原發性性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的FSH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖12(b)是患有繼發性性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的FSH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖12(c)是患有與年齡相關的性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的FSH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖12(d)是患有未知起因的性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的FSH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖13(a)是患有原發性性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的LH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖13(b)是患有繼發性性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的LH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖13(c)是患有與年齡相關的性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的LH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖13(d)是患有未知起因的性腺機能減退并接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的男性第0-180天的LH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖14(a)是用5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性180天后髖BMD改變的柱狀圖。
圖14(b)是用5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑治療性腺機能減退的男性180天后脊柱BMD改變的柱狀圖。
圖15是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的PTH濃度的示意圖(初期治療組)。
圖16是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的SALP濃度的示意圖(初期治療組)。
圖17是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的骨鈣蛋白濃度的示意圖(初期治療組)。
圖18是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的I型前膠原濃度的示意圖(初期治療組)。
圖19是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的N-端肽/Cr比率的示意圖(初期治療組)。
圖20是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天的Ca/Cr比率的示意圖(初期治療組)。
圖21(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天性動機記分的示意圖。
圖21(b)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天總的性欲記分的示意圖。
圖21(c)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天性愉悅(有伴侶)記分的示意圖。
圖22(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天性行為記分的示意圖。
圖22(b)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天勃起滿意度記分的示意圖。
圖22(c)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天勃起百分比記分的示意圖。
圖23(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天良好情緒記分的示意圖。
圖23(b)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第0-180天情緒低落記分的示意圖。
圖24(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天腿部力量改變的柱狀圖。
圖24(b)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天手臂力量改變的柱狀圖。
圖25(a)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天總的體重變化的柱狀圖。
圖25(b)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天肌肉質量變化的柱狀圖。
圖25(c)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天脂肪質量變化的柱狀圖。
圖25(d)是性腺機能減退的男性在接受5.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或睪酮透皮貼劑的第90和180天體脂百分比變化的柱狀圖。
發明詳述由于本發明可以許多不同方式實施，這里討論了幾個特殊的實施方案，應該理解，這里的描述僅作為本發明原理的例證，而不能理解為將本發明限制在所列舉的實施方案之內。
本發明涉及一種經皮給藥的含有至少一種含在水醇凝膠中的活性藥物成分(例如，睪酮)的藥物組合物。就本發明的大方面而言，組合物中的活性成分可以包括促蛋白合成的類固醇，如雄異唑、勃拉睪酮、氯司替勃、乙雌烯醇、formyldienolone、4-羥基-19-去甲睪酮、美替諾龍、甲基去甲雄二烯醇酮、諾龍、羥甲睪酮、奎勃龍、司騰勃龍、群勃龍；雄激素類類固醇，如勃地酮、氟甲睪酮、美雄諾龍、美睪酮、美雄酮、17-甲基睪酮、17α-甲基睪酮3-環戊基烯醇醚、諾乙雄龍、normethandrone、氧雄龍、羥甲烯、普拉睪酮、雄諾龍、司坦唑醇、二氫睪酮、睪酮；以及孕激素，如阿那孕酮、氯地孕酮醋酸酯、地馬孕酮醋酸酯、地美孕酮、地美炔酮、二氫孕酮、乙炔基雌烷三醇(ethinylestrenol)、炔孕酮、炔諾醇、炔諾醇雙醋酸酯、氟孕酮(flurogestone)醋酸酯、孕二烯酮、孕諾酮己酸酯、鹵孕酮、17-羥基-16-亞甲基黃體酮、17β-羥基黃體酮、17α-羥基黃體酮己酸酯、美屈孕酮、甲羥孕酮、甲地孕酮醋酸酯、美侖孕酮、炔諾酮、炔諾酮醋酸酯、異炔諾酮、諾孕酮、諾孕酯、炔諾孕酮、諾孕烯酮、19-去甲黃體酮、諾乙烯酮、噴他孕酮、黃體酮、普美孕酮、奎孕酮和群孕酮；以及這些化合物的所有的對映異構體、異構體和衍生物。(基于The Merck Index，Merck & Co.羅韋，新澤西州(1998)提供的表)。
除了活性成分，凝膠中還含有一種或多種低級醇，比如乙醇或異丙醇；滲透增強劑；增稠劑；和水。此外，本發明還可任選的含有鹽類、軟化劑、穩定劑、抗微生物劑、芳香劑和推進劑。
“滲透增強劑”是一種已知能夠加速藥物通過皮膚輸遞的物質。這些物質也被稱為加速劑、佐劑和吸收促進劑，在這里將它們統統稱為“增強劑”。這類物質包括有各種不同作用機制的物質，包括提高藥物溶解度和擴散本領的物質，和通過改變角質層保留水分的能力、軟化皮膚、提高皮膚滲透性作為滲透輔助劑或開放毛囊或改變皮膚(如邊界層)的狀態從而提高經皮吸收的物質。
本發明的滲透增強劑是脂肪酸的功能性衍生物，這包括脂肪酸的電子等排修飾，或是脂肪酸羧基官能團的非酸性衍生物或對其進行電子等排修飾。一個實施例中，脂肪酸的功能性衍生物是不飽和的鏈烷酸，其中-COOH基團被其功能性衍生物取代，如它的醇、多元醇、酰胺以及取代的衍生物。術語“脂肪酸”是指有四(4)至二十四(24)個碳原子的脂肪酸。滲透增強劑的非限制性的實施例包括C8-C22脂肪酸如異硬脂酸、辛酸和油酸；C8-C22脂肪醇如油醇和月桂醇；C8-C22脂肪酸的低級烷基酯，如以及油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、硬脂酸丁酯和月桂酸甲酯；C6-C8二酸的二(低級)烷基酯，如己二酸二異丙酯；C8-C22脂肪酸的單酸甘油酯，如單月桂酸甘油酯；四氫糠醇聚乙二醇醚；聚乙二醇、丙二醇；2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇；二乙二醇一甲醚；聚環氧乙烷的烷基芳基醚；聚環氧乙烷一甲基醚；聚環氧乙烷二甲基醚；二甲基亞砜；甘油；乙酸乙酯；乙酰乙酸酯；N-烷基吡咯烷酮和萜烯。
這里使用的增稠劑包括陰離子聚合物，如聚丙烯酸(CARBOPOL，來自俄亥俄州克利夫蘭的B.F.Goodrich Specialty Polymers and Chemicals Division)，羧甲基纖維素等。其它的增稠劑、增強劑和佐劑通常可以在United StatesPharmacopeia/National Formulary(2000)；Remington’s The Science andPractice of Pharmacy，Meade出版公司，中找到。
組合物中藥物的量取決于特定的藥物、所需治療效果以及凝膠需提供治療效果的時間跨度。以“藥理學有效量”使用這種組合物。這意味著組合物中的藥物濃度是要求在使用凝膠的時間內輸遞的藥物應達到治療水平。這種輸遞依賴于包括藥物、劑型、使用各個劑量單位的時間、藥物從凝膠中流出的速度、敷藥部位的表面積等在內的許多變量。必需的藥量可以基于有和沒有增強劑時藥物通過凝膠和皮膚的流動速度用實驗確定。
直到最近才能在美國市場上獲得商品名為AndroGel(來自伊利諾斯州迪爾菲爾德的Unimed Pharmaceuticals公司，本申請的受讓人之一)這樣的睪酮凝膠。一個實施方案中，這種凝膠大致含有以下數量的物質表5AndroGel的組成
*相當于67g乙醇精通此領域的技術人員會知道，在本發明的精神和范圍之內，該制劑的成分在量上是可以變化的。例如，組合物中可以含有約0.1-10.0g的睪酮、大約0.1-5.0g的聚羧乙烯(carbopol)，大約0.1-5.0g的肉豆蔻酸異丙酯，以及大約30.0-98.0g的乙醇。
治療有效劑量的凝膠由使用者擦在給定的皮膚區域上。將水醇性凝膠和親脂性睪酮組合有助于將睪酮輸送到皮膚的外層，它在這里被吸收然后緩慢釋放到血液中。如這里提供的數據所證實的那樣，使用本發明的凝膠可產生持續的效果。
用標準藥理方法可以確定活性成分的毒性和治療效果，例如，測定LD50(使總體的50％致死的劑量)和ED50(對總體的50％起到治療效果的劑量)。毒性和有效的劑量比值是治療指數，可將其表示成LD50/ED50。可導致較大治療指數的化合物是優選的。由于可能使用有毒性副作用的化合物，在設計輸遞系統將此類化合物靶向受影響的組織部位時要小心，以便對未受影響的細胞的潛在損傷最小化，從而減小副作用。
這里使用的術語“治療”是指對人類癥狀或疾病的任何治療，包括(1)防止疾病或癥狀在受試者中發生，受試者可能有患病的傾向但還未被診斷出患病，(2)抑制疾病或癥狀，即，阻止其發展，(3)減輕疾病或癥狀，即，使癥狀消退，或(4)減輕由疾病造成的癥狀，即，停止疾病癥狀。
盡管本發明的實施例涉及治療與性腺機能減退的男性有關的病癥，但本發明的組合物和方法也可用來治療人和任何動物(如，狗、豬、羊、馬、牛、貓、動物園的動物和其它商業上養殖的禽畜)的此類疾病。
通過以下實施例進一步闡述了本發明，這些實施例不能以任何方式理解為是對本發明的限制。在此特并入本申請中提到的所有參考資料以供參考。除非另有說明，本發明的實踐將使用藥理學和制藥的常規技術，這些技術是精通此領域的技術人員已知的。
實施例實施例1男性受試者性腺機能減退的治療本發明的一個實施例涉及以透皮敷用AndroGel作為治療男性性腺機能減退的方法。如下所述，敷用這種凝膠會產生獨特的睪酮藥代動力學特點，并且伴有對其它幾種性激素的調節。對性腺機能減退的男性受試者敷用睪酮凝膠也會導致(1)增加骨礦物質密度，(2)提高性欲，(3)增加勃起能力和滿意度，(4)提高良好情緒，(5)增加肌肉力量，以及(6)改善身體組成，比如增加總的肌肉質量和減小總的體脂質量。此外，這種凝膠不會產生明顯的皮膚剌激。
方法這一實施例中，將性腺機能減退的男性收入美國16個中心內進行研究。患者在19-68歲之間，且單一的清晨血清睪酮水平小于或等于300ng/dL(10.4nmol/L)。一共有227名患者有73、78和76名患者分別隨機接受5.0g/天的AndroGel(向皮膚輸遞50mg/天睪酮，其中約有10％或5mg被吸收)、10.0g/天的AndroGel(向皮膚輸遞100mg/天睪酮，其中約有10％或10mg被吸收)或ANDRODERM睪酮透皮貼劑(“T透皮貼劑”)(向皮膚輸遞50mg/天睪酮)。
如下表所示，患者的基線特征沒有顯著的與組有關的差異。
表6.性腺機能減退男性的基線特征
受試者中有41％患者(93/227)以前沒有接受過睪酮替代治療。以前治療過的性腺機能減退的男性在至少6周內未注射睪酮酯，并且在篩選檢查前四周未口服或透皮給予雄激素。由治療史、體格檢查、全血細胞計數、尿檢和血清生物化學檢查證明，除了性腺機能減退外，受試者健康狀況良好。如果受試者服用降脂藥或鎮定劑，則至少在收入治療前三個月要將劑量穩定。少于5％的受試者在研究期間在服用鈣或維生素D補充劑。受試者沒有慢性病史、嗜酒史或藥物濫用史。它們有正常的直腸檢查結果，PSA水平小于4ng/mL，尿流速為12mL/s或更快。如果患者有可能影響睪酮吸收的全身性皮膚病或用ANDRODERM透皮貼劑治療有皮膚剌激史，則將他們排除.將低于正常體重80％或超過正常體重140％的受試者排除。
隨機的多中心的平行研究將兩種劑量的AndroGel和ANDRODERM睪酮透皮貼劑進行了比較。研究對AndroGel劑量是雙盲的，對睪酮透皮貼劑是公開標鑒的。在研究的最初三個月(第1-90天)，使受試者隨機接受5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel或非兩種陰囊透皮貼劑。在接下來的三個月(第91-180天)，給予受試者以下治療之一5.0g/天的AndroGel、10.0g/天的AndroGel、7.5g/天的AndroGel或兩種非陰囊透皮貼劑。在第60天時測量敷用AndroGel患者的單一的敷用前的血清睪酮，如果這一水平在300-1,000ng/dL(10.4-34.7nmol/L)的正常范圍內，則讓他們保持原始劑量。讓那些睪酮水平低于300ng/dL且原來是敷用5.0g/天的AndroGel以及那些睪酮水平高于1,000ng/dL且原來是采用10.0g/天的AndroGel的患者在第91-180天時采用7.5g/天的AndroGel。
由此，在第90天時，基于第60天的敷用前血清睪酮水平，在AndroGel組中進行了劑量調整。5.0g/天的AndroGel組中的20名受試者將劑量升至7.5g/天。10.0g/天的AndroGel組中的20名受試者將劑量降至7.5g/天。睪酮透皮貼劑組中有三名患者由于無法耐受透皮貼劑而改用5.0g/天AndroGel。一名10.0g/天AndroGel的受試者改用5.0g/天AndroGel，一名5.0g/天AndroGel的受試者改用2.5g/天AndroGel。因此，進入研究第91-180天的患者的人數為51人接受5.0g/天AndroGel、40人接受7.5g/天AndroGel、52人接受10.0g/天AndroGel、并有52人繼續接受ANDRODERM透皮貼劑。因此可以把這一實施例中的治療描述為兩種情況，“初期”或“后期”治療組。
受試者在第0、30、60、90、120、150和180天回到研究中心進行臨床檢查、皮膚剌激和副作用評定。在第0、30、90、120和180天收集空腹血樣以測定鈣、無機磷、甲狀旁腺激素(“PTH”)、骨鈣蛋白、I型前膠原和骨特異性堿性磷酸酶(“SALP”)。此外，在第0、30、90、120和180天收集兩小時禁食尿樣以測定尿肌酐、鈣以及I型膠原交聯的N-端肽(“N-端肽”)。按以下方法進行其它測定(1)血液學血紅蛋白、血細胞比容、紅細胞計數、血小板、白細胞計數及分類分析(中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜曙紅細胞和嗜堿細胞)；(2)化學堿性磷酸酶、丙氨酸轉氨酶、血清谷丙轉氨酶(“ALT/SGPT”)、天冬氨酸轉氨酶/血清谷草轉氨酶(“AST/SGOT”)、總膽紅素、肌酐、葡萄糖、和電解質(鈉、鉀、氯、碳酸氫鹽、鈣和無機磷)；(3)脂類總膽固醇、高密度脂蛋白(“HDL”)、低密度脂蛋白(“LDL”)和甘油三酯；(4)尿檢顏色、外觀、比重、pH、蛋白、葡萄糖、酮體、血、膽紅素和亞硝酸鹽；以及
(5)其它在所有臨床檢查時進行PSA(第90-180天篩選)、催乳激素(篩選)、以及睪酮(篩選)，包括電解質、葡萄糖、腎功能和肝功能檢查以及脂類特點。在第0和第180天分析骨礦物質密度(“BMD”)。
A.AndroGel和ANDRODERM透皮貼劑多劑量玻璃瓶中大約包裝了250g AndroGel，它在每次開動泵時輸遞2.25g凝膠。給指定敷用5.0g/天AndroGel睪酮的患者一瓶AndroGel和一瓶安慰凝膠(含有載體，但沒有睪酮)，而給指定使用10.0g/天AndroGel睪酮的患者兩瓶AndroGel。然后教患者輪流將瓶中的內含物敷用到右邊和左邊的上臂/肩部和腹部的左側和右側。例如，在研究的第一天，患者將第一個瓶子開動兩次，分別敷用于左和右上臂/肩膀，并將第二個瓶子開動兩次，分別敷用于左和右腹部。在以下的治療天數中，正好相反敷用。在整個研究中使敷用位置持續交替。對皮膚敷用凝膠后，凝膠在幾分鐘內干燥。患者在敷用凝膠后立即用肥皂和水徹底洗手。
7.5g/天AndroGel的組以標鑒公開的方式接受劑量。90天后，供給調整到7.5g/天AndroGel的受試者三個瓶子，一個含有安慰劑，另兩個含有AndroGel。讓受試者向上述四個不同的身體部位敷用安慰劑瓶子一次和AndroGel瓶子三次。每天以上述同樣的順序輪換這些位置。
向研究中約三分之一的患者提供每片輸遞2.5mg/天睪酮ANDRODERM透皮貼劑。教這些患者每天一次向背部、腹部、上臂或大腿皮膚上干凈、干燥的部位敷用兩片睪酮透皮貼劑。敷用位置是循環的，在向同一位置敷用時要間隔大約7天。
在研究中評價患者的那天，在給藥前進行評價后敷用凝膠/透皮貼劑。在其余各天中，大約在早上8:00敷用睪酮凝膠或透皮貼劑，共180天。
B.研究方法和結果1.激素藥代動力學第0、1、30、90和180天時，在敷用AndroGel或透皮貼劑前30、15和0分鐘以及后2、4、8、12、16和24小時收集患者的血樣以測定睪酮和游離睪酮。此外，受試者在第60、120和150天回來，并在敷用凝膠或透皮貼劑之前采取其血樣一次。第0、30、60、90、120、150和180天時，對在敷用凝膠之前收集的血樣進行血清DHT、E2、FSH、LH和SHBG測定。將所有用來測定激素的血樣冷凍保存于-20℃直至測定。在可能的任何時候，在一次分析中測量一個患者所有樣品的每一激素水平。當時在UCLA-Harbor Medical Center的內分泌研究室進行激素測定。下表總結了對各個患者測得的藥代動力學參數表7藥代動力學參數
a.睪酮藥代動力學(1)方法用乙酸乙酯和己烷萃取后用來自ICN(科斯達梅薩，加利福尼亞)的試劑通過特異性放射免疫測定法(“RIA”)測定血清睪酮水平。在睪酮RIA中所用抗血清的交叉反應性為，DHT是2.0％、雄烯二酮是2.3％、3-β-雄烷二醇是0.8％、本膽烷醇酮是0.6％、所有其它所測的類固醇為小于0.01％。用這一測定法測得的血清睪酮的定量下限(“LLQ”)為25ng/dL(0.87nmol/L)。通過在無類固醇血清中添加不同數量的睪酮(0.9nmol/L-52nmol/L)測得的該睪酮測定法的平均準確度是104％，范圍從92％-117％。正常成年男性中，睪酮測定的批內分析和批間分析系數分別為7.3和11.1％。正常成年男性中，在UCLA-Harbor Medical Center測得的睪酮濃度范圍是298-1,043ng/dL(10.33-36.17nmol/L)。
(2)基線濃度如表8和圖5(a)所示，在基線時，24小時的平均血清睪酮濃度(Cavg)在組之間是類似的，并且低于成年人的正常范圍。此外，一天中血清濃度的變異(分別基于24小時內的最大濃度和最小濃度Cmax和Cmin)在三個組中也是類似的。圖5(a)顯示，平均睪酮水平的最大值在上午8-10點之間有最大值(即，在0-2小時)，在8-12小時后有最小值，這證明了血清睪酮的輕度晝間變異。每組中大約三分之一患者的Cavg在第0天時在較低的正常成年男性范圍之內(5.0g/天AndroGel凝膠組為24/73，10.0g/天AndroGel凝膠組為26/78，睪酮透皮貼劑組為25/76)。除了三人外，所有受試者符合進入研究的血清睪酮標準(低于300ng/dL(10.4nmol/L))。
表8(a)初期治療組的基線藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍*)表8(b)后期治療組的基線睪酮藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍)(3)第一天圖5(b)和表8(c)-(d)顯示了所有三個初期治療組在第一次透皮敷用睪酮后的藥代動力學特點。簡而言之，用AndroGel和睪酮透皮貼劑治療僅在幾小時內就使患者的睪酮濃度增加到了正常范圍。然而，即便在第一天，藥代動力學特點在AndroGel和透皮貼劑組之間就有顯著的差異。睪酮透皮貼劑組的血清睪酮上升的很快，在約12小時(Tmax)時就達到了最大濃度(Cmax)。相反，在敷用AndroGel后血清睪酮水平穩步上升到正常范圍，5.0g/天AndroGel組和10.0g/天AndroGel組分別在22小時和16小時后達到Cmax。
表8(c)初期治療組第一天的睪酮藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍*)表8(d)后期治療組第一天的睪酮藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍)(4)第30、90和180天圖5(c)和5(d)顯示了用AndroGel治療的患者在第30和90天獨特的24小時藥代動力學特點。在AndroGel組中，血清睪酮水平在用藥不久以后有小的不同程度的增加。這一水平然后回落到相對恒定的水平。相反，在睪酮透皮貼劑組中，患者的睪酮水平在最初的8-12小時有所提高，然后的8小時中保持穩定，然后再降至前一天的基線水平。此外，在凝膠敷用后的第30和90天，10.0g/天AndroGel組的Cavg是5.0g/天AndroGel組的1.4倍，是睪酮透皮貼劑組的1.9倍。睪酮透皮貼劑組的Cmin也大大低于正常范圍的下限。第30天時，睪酮透皮貼劑組的蓄積率為0.94，這顯示沒有蓄積。5.0g/天AndroGel組和10.0g/天AndroGel組的蓄積率明顯較高，分別為1.54和1.9。第90天時，各組之間的蓄積率仍然不同。這一數據表明，AndroGel制劑有長于睪酮透皮貼劑的有效半衰期。
圖5(e)顯示了治療組在第180天時的24小時藥代動力學特點。總而言之，如表8(e)所示，在繼續他們初期的隨機治療組的患者中得到的血清睪酮濃度和藥代動力學參數與第30和90天的數據是類似的。表8(f)顯示，調整到7.5g/天AndroGel組是不均一的。以前在10.0g/天AndroGel組中的患者的血清睪酮水平趨向于高于以前接受5.0g/天的患者。在第180天時，10.0g/天組中在第90天時轉為7.5g/天的患者的Cavg是744ng/dL，這是從5.0g/天轉為7.5g/天的患者的Cavg(為450ng/dL)的1.7倍。即便將劑量提高2.5g/天，由5.0變為7.5g/天，但Cavg仍低于還在5.0g/天組中那些患者的Cavg。在由10.0變為7.5g/天的組中，Cavg與留在10.0g/天組中而沒有改變劑量的患者是類似的。這些結果說明，許多低反應者實際上可能是未按要求使用的患者。例如，如果患者沒有正確使用AndroGel(例如，優先使用安慰劑或在沐浴前使用)，則提高劑量不會增加任何好處。
圖5(f)-(h)比較了5.0g/天AndroGel組、10.0g/天AndroGel組和睪酮透皮貼劑組分別在第0、1、30、90和180天的藥代動力學特點。總而言之，睪酮透皮貼劑組的平均血清睪酮水平在整個治療期間都保持在正常范圍的下限。相反，5.0g/天AndroGel組的平均血清睪酮水平保持在大約490-570ng/dL，而10.0g/天AndroGel組大約在630-860ng/dL。
表8(e)初期治療組第1天的睪酮藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍)表8(f)后期治療組第30、90和180日的睪酮藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍)(5)AndroGel的劑量比值表8(g)顯示了第30、90和180時AUC0-24從治療前基線上的增加(凈AUC0-24)。為得到劑量比值，用“治療”作為唯一因素進行了轉化的為對數值AUC的生物等效性評價。從扣除了睪酮的內分泌對AUC的貢獻(第0天的AUC)并對敷用劑量的兩倍差值進行調節后，將各個AUC進行比較。第30天時的AUC比例是0.95(90％C.I.0.75-1.19)，第90天時是0.92(90％C.I.0.73-1.17)。將第30天和90天的數據合并，AUC比例為0.93(90％C.I.0.79-1.10)。
數據顯示了AndroGel治療的劑量比值。10.0g/天組從第0天至第30天或第90天AUC0-24升高的幾何平均值是5.0g/天組的兩倍。每2.5g/天AndroGel使血清睪酮Cavg水平平均升高了125ng/dL。換句話說，這一數據顯示，0.1g/天AndroGel使血清睪酮濃度平均升高了5ng/dL。這種劑量比例有助于醫師調節劑量。由于AndroGel是以2.5g的包裝提供的(含有25mg睪酮)，每2.5g包裝將使血清總睪酮的Cavg平均升高125ng/dL。
表8(g)透皮睪酮敷用后第30、90和180天的凈AUC0-24(nmol*h/L)
10.0g/天和5.0g/天組得到的AUC0-24比治療前基線的提高大約是采用睪酮透皮貼劑所得結果的2.7倍和1.7倍。
b.血清游離睪酮濃度的藥代動力學(1)方法經平衡滲析過夜后，對滲析液進行RIA以測定血清游離睪酮，采用進行睪酮測定同樣的RIA試劑。用平衡滲析法估算出的血清游離睪酮的LLQ為22pmol/L。將成年男性范圍內不同劑量的睪酮添加到無類固醇的血清中，回收的游離睪酮的量其變異系數在11.0-18.5％范圍內。正常成年男性游離睪酮的批內分析和批間分析系數分別為15％和16.8％。如UCLA-Harbor Medical Center的估計，正常成年男性的游離睪酮濃度范圍為3.48-17.9ng/dL(121-620pmol/L)。
(2)藥代動力學結果總之，如表9所示，血清游離睪酮的藥代動力學參數反映了如上所述的血清總睪酮。在基線時(第0天)，平均血清游離睪酮濃度(Cavg)在三個組中是類似的，且在成年男性范圍的下限。最大血清游離睪酮濃度出現在早上8-10點之間，最小值大約在8-16小時后出現。這一數據與血清睪酮的輕度晝間變異是一致的。
圖6(a)顯示了三個治療組第一天的24小時藥代動力學特點。敷用睪酮透皮貼劑后，血清游離睪酮的峰值在12小時出現，這比AndroGel組的峰值提前了大約4小時。睪酮透皮貼劑組的血清游離睪酮水平然后下降，而AndroGel組的血清游離睪酮水平則繼續升高。
圖6(b)和6(c)顯示了用AndroGel治療的組中游離睪酮的藥代動力學特點與第30和90天的睪酮的獨特特點類似。敷用AndroGel后，三個治療組的平均血清游離睪酮水平在正常范圍內。與總睪酮結果類似，在10.0g/天組中得到的游離睪酮Cavg是5.0g/天組的1.4倍，是睪酮透皮貼劑組的1.7倍。此外，睪酮透皮貼劑的蓄積率明顯低于5.0g/天AndroGel組和10.0g/天AndroGel組。
圖6(d)顯示了后期治療組在第180天的游離睪酮濃度。簡而言之，游離睪酮濃度與血清睪酮有類似的模式。對于仍留在原來三個隨機組中的患者，24小時藥代動力學參數與第30天和第90天的參數類似。同樣，在調整為接受7.5g/天AndroGel的患者中，該組結果是不均一的。由5.0升至7.5g/天的患者的游離睪酮Cavg仍比留在5.0g/天組的受試者低29％。從10.0降至7.5g/天的患者的游離睪酮Cavg比留在10.0g/天組的受試者高11％。
圖6(e)-6(g)顯示了三個治療組中受試者在整個180天治療期間的游離睪酮濃度。同樣，游離睪酮水平與睪酮水平是類似的。所有三個組的平均游離睪酮水平都在正常范圍內，且10.0g/天組的平均游離睪酮水平一直高于5.0g/天和睪酮透皮貼劑組。
表9后期治療組游離睪酮的藥代動力學參數(平均值±標準偏差)
*中值(范圍)c.血清DHT濃度血清DHT是用高錳酸鉀處理樣品再在萃取后通過RIA測定的。DHT測定的方法和試劑是由DSL(韋伯斯特，得克薩斯州)提供的。對DHT進行RIA時所使用抗血清的交叉反應性對3-β-雄烷二醇是6.5％，對3-α-雄烷二醇是1.2％，對3-α-雄烷二醇葡糖苷酸是0.4％，對睪酮是0.4％(用高錳酸鉀處理并萃取后)，所測其它類固醇低于0.01％。添加35nmol/L(1,000pg/dL)睪酮到無類固醇的血清并對樣品進行DHT測定進一步證實了其對睪酮的低交叉反應性。添加35nmol/L以上睪酮的結果低于0.1nmol/L的DHT。該測定法中血清DHT的LLQ是0.43nmol/L。將0.43nmol/L-9nmol/L范圍中不同量的DHT加入無類固醇血清，如此測得的DHT測定的平均準確度(回收率)是101％，在83-114％的范圍之內。正常成年男性范圍內，DHT測定的批內分析和和批間分析變異系數分別為7.8和16.6％。UCLA-HarborMedical Center測定的正常成年男性的DHT在30.7-193.2ng/dL(1.06-6.66nmol/L)之間。
如表10所示，治療前平均血清DHT濃度在36和42ng/dL之間，在所有三個初期治療組中都接近正常范圍的下限。治療前沒有一名患者的DHT濃度超過正常范圍的上限，盡管幾乎一半(103名)患者的這一濃度低于下限值。
圖7顯示治療后，不同治療組的平均DHT濃度之間有統計學上顯著的差異，即接受AndroGel的患者的平均DHT濃度高于使用透皮貼劑的患者，并顯示了平均血清DHT濃度的劑量依賴性。特別地，敷用睪酮透皮貼劑后平均血清DHT水平升高到基線的約1.3倍。相反，敷用5.0g/天和10.0g/天AndroGel后血清DHT分別增加到基線的3.6和4.8倍。
表10初期治療組在每個觀察日的DHT濃度(ng/dL)(平均值±標準偏差)
DHT濃度的升高似乎可歸因于皮膚中5α-還原酶的濃度和定位。例如，陰囊皮膚中有大量的5α-還原酶可能會增加TESTODERM透皮貼劑中DHT的濃度。相反，ANDRODERM和TESTODERMTTS透皮貼劑使DHT水平幾乎沒有變化，這是因為透皮貼劑的表面積較小且幾乎沒有5α-還原酶定位于非陰囊皮膚。AndroGel可能會使DHT水平上升，因為這種凝膠敷用于相對較大的皮膚區域故而使睪酮暴露于較大量的酶。
到目前為止，還沒有報道升高的DHT水平有任何不利的臨床反應。此外，有證據證明，升高的DHT水平可能抑制前列腺癌。
d.DHT/T比例UCLA-Harbor Medical Center報道正常成年男性的DHT/T比例在0.052-0.328之間。這一實施例中，第0天時，所有三個治療組的這一平均比例都在正常范圍內。如圖8和表11所示，在180天內觀察到治療和濃度依賴性的增加。特別地，AndroGel治療組有最大的DHT/T比例的增加。然而，所有觀察日時，所有治療組的平均比例都保持在正常范圍內。
表11初期治療組在每個觀察日的DHT/T
比例(平均值±標準偏差)
e.總雄激素(DHT+T)UCLA-Harbor Medical Center確定的正常總雄激素濃度在372-1,350ng/dL之間。如圖9和表12所示，在治療前的第0天，所有三個治療組的平均用藥前總雄激素濃度都低于正常水平的下限。在所有的治療觀察日，兩個AndroGel組的總雄激素濃度都在正常范圍內。相反，接受睪酮透皮貼劑患者的平均濃度僅僅在第60天和第120天在正常范圍內，而在第30、90、150和180天時則低于正常范圍的下限。
表12初期治療組在每個觀察日的總雄激素(DHT+T)(ng/dL)(平均值±標準偏差)
f.E2濃度無需萃取，用來自ICN(科斯達梅薩，加利福尼亞)的試劑直接測定血清E2水平。E2批內分析和批間分析的變異系數分別為6.5和7.1％。UCLA-Harbor MedicalCenter報道了正常成年男性的平均E2濃度在7.1-46.1pg/mL(63-169pmol/L)。E2的LLQ為18pmol/L。E2抗體的交叉反應性對雌酮是6.9％，對馬烯雌酮(eguilenin)是0.4％，對所測的其它類固醇小于0.01％。將不同量的E2(18-275pmol/L)加入無類固醇血清以估算E2測定的準確度。與加入量相比，E2的平均回收率為99.1％，在95-101％之間。
圖10顯示了整個180天研究中的E2濃度。所有三個治療組的治療前平均E2濃度為23-24pg/mL。研究中，睪酮透皮貼劑組的E2水平在治療期間平均升高了9.2％，5.0g/天AndroGel組升高了30.9％，10.0g/天AndroGel組升高了45.5％。所有的平均濃度都在正常范圍內。
表13初期治療組在每個觀察日的雌二醇濃度(pg/mL)(平均值±標準偏差)
據信，E2對于維持骨骼正常是重要的。此外，E2對血清脂類的特點有正面效果。
g.血清SHBG濃度血清SHBG濃度是用來自Delfia(Wallac，Gaithersberg，MD)的熒光免疫測定法(“FIA”)測量的。批內和批間分析的系數分別為5％和12％。LLQ為0.5nmol/L。UCLA-Harbor Medical Center確定，成年正常男性SHBG測定的范圍為0.8-46.6nmol/L。
如圖11和表11所示，三個治療組在基線時的血清SHBG水平是類似的并在正常成年男性的范圍之內。在任一治療回訪日，沒有治療組顯示明顯不同于基線的重大變化。睪酮替代后，所有三個組中血清SHBG水平都有輕微的降低。最顯著的變化發生在10.0g/天AndroGel組中。
表14初期治療組在每個觀察日的SHBG濃度(nmol/L)(平均值±標準偏差)
h.促性腺激素用Delfia(Wallac，Gaithersberg，MD)提供的試劑以高靈敏度和特異性固相FIA測定血清FSH和LH。LH和FSH熒光免疫測定的批內分析變異系數分別為4.3和5.2％；LH和FHS的批間分析變異系數分別為11.0％和12.0％。LH和FSH測定的LLQ都是0.2IU/L。在同一測定中檢測由同一受試者獲得的所有樣品。UCLA-HarborMedical Center報道成年正常男性LH的范圍為1.0-8.1U/L，FSH為1.0-6.9U/L。
(1)FSH表15(a)-(d)根據造成性腺機能減退的原因(1)原發性，(2)繼發性，(3)年齡相關性，(4)未知原因顯示了在180天的治療中FSH的濃度。
如上面的討論，原發性性腺機能減退的患者有完整的反饋抑制途徑，但睪丸不分泌睪酮。其結果是，增加的血清睪酮水平會導致血清FSH濃度降低。在這一實施例中，總共有94名患者被診斷為患有原發性性腺機能減退。對這些患者，三個治療組中，第0天時平均FSH濃度為21-26mIU/mL，超過正常范圍的上限。如圖12(a)和表15(a)所示，治療中，平均FSH濃度在所有三個治療組中都降低了。然而，只有10.0g/天AndroGel組在治療的頭90天內使平均濃度降到了正常范圍內。以10.0克/天AndroGel治療需要約120天達到穩定。敷用5.0g/天AndroGel的患者的平均FSH濃度到第30天即有所下降，在第120天又有一個下降階段并持續到治療結束時為止。接受睪酮透皮貼劑的患者的平均FSH濃度似在30天后達到穩態，但明顯高于正常范圍。
表15(a)初期治療組中原發性性腺機能減退的患者在各個觀察日的FSH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
繼發性性腺機能減退的患者有缺陷的睪酮負反饋系統。如圖12(b)所示，在44名被診斷為繼發性性腺機能減退的患者中，平均FSH濃度在治療中下降，盡管睪酮透皮貼劑的這種隨著時間的下降沒有統計學上的顯著性。5.0g/天AndroGel組的患者在30天內平均FSH濃度的下降約為35％，到第60天內沒有進一步明顯的下降。90天后，患者平均FSH濃度緩慢地返回治療前的值。到第30天，所有10.0g/天AndroGel組的患者的FSH濃度都低于下限值。
表15(b)初期治療組中繼發性性腺機能減退的患者在各個觀察日的FSH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
25名患者被診斷為患有與年齡有關的性腺機能減退。如圖12(c)所示，5.0g/天AndroGel組的平均治療前FSH濃度高于正常范圍。這一組的平均濃度到第30天在正常范圍內，在第90天和180天時下降了50％以上。10.0g/天AndroGel組中FSH平均濃度的降低顯示了更快的響應。所有六名患者的這一濃度在30天內都降到了正常值下限以下，并在研究期間保持這一水平。接受睪酮透皮貼劑的六名患者在平均FSH水平上沒有一致的模式；然而在繼續治療時有朝向較低FSH水平的總體趨勢。
表15(c)初期治療組中與年齡相關的性腺機能減退的患者在各個觀察日的FSH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
研究中有64名患者患有不明原因的性腺機能減退。如圖12(d)所示，所有三個組中的患者都有顯著且較快的FSH濃度下降，最大的下降出現在10.0g/天AndroGel組中。10.0g/天AndroGel組的平均FSH濃度到30天下降了幾乎90％并將這一效果保持到了第180天。5.0g/天AndroGel組在30天內產生了約75％的平均FSH濃度的降低，并在治療的其余階段維持這一水平。接受睪酮透皮貼劑的21名患者的平均FSH濃度在30天內降低了50％，這一趨勢持續到第90天，其濃度約為治療前數值的三分之一。
表15(d)初期治療組中未知原因的性腺機能減退患者在各個觀察日的FSH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
數據顯示，在所有四個亞群中都有一定程度的對FSH分泌的反饋抑制。原發性性腺機能減退組在FSH水平降低的程度和速度上都顯示了劑量依賴的特性。繼發性和年齡相關組中反饋過程的敏感性明顯降低，因為只有最高的睪酮劑量對FSH分泌才有顯著且長期的影響。相反，不明原因組患者的反饋抑制途徑即便在外源睪酮劑量最低時都有很高的反應性。
(2)LH對同樣的四個亞群還分別測定了LH對睪酮的反應。表16(a)-(d)顯示了整個治療階段的LH濃度。
如圖13(a)和表16(a)所示，原發性性腺機能減退患者中，治療前的LH濃度約為正常范圍上限值的175％。所有組治療過程中平均LH濃度都是降低的。然而，只有在AndroGel組中平均LH濃度才足以降到正常范圍內。和FSH一樣，接受AndroGel的原發性性腺機能減退的男性在LH反應的速度和程度上都顯示了劑量依賴性。
表16(a)原發性性腺機能減退患者在各個觀察日的LH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
繼發性性腺機能減退的男性對外源睪酮不是很敏感。對于44名被診斷為繼發性性腺機能減退的患者，治療前的平均濃度都在正常范圍下限之內。如圖13(b)和表16(b)所示，所有三組的平均LH濃度在治療時都降低了。
表16(b)繼發性性腺機能減退的患者在各個觀察日的LH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
如圖13(c)和表16(c)所示，患有與年齡相關的性腺機能減退的25名患者中，無一人的治療前LH濃度在正常范圍之外。所有時間和治療效果對AndroGel患者是顯著的，但對使用睪酮透皮貼劑的患者并不明顯。
表16(c)與年齡相關的性腺機能減退的患者在各個觀察日的LH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
對于64名患有未知原因的性腺機能減退的患者，沒有一人的治療前LH濃度超過上限值。然而，其中15％的人的治療前濃度低于正常值的下限。如圖13(d)和表16(d)所示，在所有三個治療組中，未知原因的患者的LH濃度下降得相對較快。
表16(d)未知原因的性腺機能減退的患者在各個觀察日的LH濃度(mIU/mL)(平均值±標準偏差)
(3)總結LH和FSH接受AndroGel或睪酮透皮貼劑的患者只有在長期治療后才可達到“激素穩態”。特別地，與FSH和LH有關的數據顯示，這些激素在治療數周后才能達到穩態。由于睪酮濃度被FSH和LG負抑制，只有在其他這些激素也已經達到穩態后睪酮水平才能真正達到穩態。然而，由于這些激素在反饋機制完好(由于性腺機能減退的原因這可能不存在)時只調節內源睪酮(這在性腺機能減退的男性中開始是較小的)，FSH和/或LH的水平對達到的實際睪酮水平可能幾乎沒有影響。其凈結果是，即便睪酮的Cavg、Cmin和Cmax在治療數日后保持相對穩定，患者的睪酮也未達到“激素穩態”。
2骨礦物質密度(“BMD”)和類似的標記a.BMDBDM是在第0天和第180天用Hologic QDR 2000或4500A(Hologic，沃爾瑟姆，馬薩諸塞州)的雙能量X射線吸收測量術(“DEXA”)在腰椎和左髖區測定的。脊椎的BMD是以L1至L4的BMD平均值計算的。左髖部的BMD包括沃德三角(股骨頸小梁三角)，它是以頸、轉子和轉子間區的平均BMD計算的。掃描是集中在Hologic分析和處理的。由于某些地方沒有特殊的DEXA設備，BMD測定是在16個中心中的13個(227名患者中的206名)進行的。
表17和圖14(a)-(b)顯示，治療前，三個治療組之間髖部或脊柱的BMD是不同的。BMD的明顯增加只發生在10.0g/天AndroGel組和由10.0轉為7.5g/天AndroGel組的患者中。六個月中，髖部的BMD升高了大約1％，脊柱的BMD升高了約2％。接受5.0g/天AndroGel的患者髖部和脊柱的BMD平均升高了0.6％和1％，在接受睪酮透皮貼劑的患者中沒有觀察到升高現象。
表17后期治療組第0天和第180天的BMD濃度平均值(±標準偏差)
基線的髖部和脊柱BMD以及第180天時BMD的變化與第0天的平均血清睪酮濃度之間沒有明顯的相關性。睪酮替代后髖部或脊柱BMD的變化在患有原發性、繼發性、與年齡相關或未知原因的性腺機能減退的受試者中沒有明顯差異；且在第一次接受睪酮替代和以前進行過睪酮替代的受試者中也沒有區別。脊柱BMD的變化與基線BMD值是負相關的，這說明BMD最大的升高發生在最初BMD最低的受試者中。用睪酮治療后髖部BMD(不是脊柱BMD)的升高和血清睪酮水平的變化是相關的。
b.骨成骨細胞活性標記許多血清和尿液的骨形成標記的測定支持了上述結果。特別地，所有治療組，血清標記(PTH、SALP、骨鈣蛋白、I型前膠原)的平均濃度在治療期間一般是升高的。此外，兩種尿液的骨形成標記(N-端肽/肌酐比值和鈣/肌酐比值)的比值證實了骨吸收的降低。
(1)PTH(甲狀旁腺或Calciotropic激素)用來自Nichol’s Institute(圣胡安-卡皮斯特拉諾，加利福尼亞州)的雙位點免疫放射測定(“IRMA”)試劑盒測定血清中完整的PTH。PTH測定的LLC為12.5ng/L。批內和批間分析的變異系數分別為6.9和9.6％。UCLA-Harbor Medical Center以前報道，正常成年男性的PTH在6.8-66.4ng/L之間。
表18提供了180天研究中的PTH濃度。圖15顯示，基線時，所有治療組的平均血清PTH水平都在正常男性的范圍內。第90天時，所有受試者的血清PTH都有統計學上顯著的增加，這是沒有組間差異的。所有三個組中血清PTH的增加都一直保持到第180天。
表18后期治療組各個觀察日的PTH濃度(平均值±標準偏差)
(2)SALPSALP是用Hybritech(圣地亞哥，加利福尼亞州)提供的試劑通過IRMA定量的。SALP測定的LLQ為3.8μg/L；批內和批間分析的清密度系數分別為2.9和6.5％。UCLA-Harbor Medical Center報道，正常成年男性的SALP濃度在2.4-16.6μg/L之間。
治療前的SALP濃度在正常范圍之內。圖16和表19顯示，在第一個90天內，SALP水平隨著睪酮治療而增加，且它在睪酮透皮貼劑組中有統計學的差異。此后血清SALP在所有治療組中都保持穩定。
表19后期治療組各個觀察日的SALP濃度(平均值±標準偏差)
(3)骨鈣蛋白用來自Immutopics(圣克利門蒂，加利福尼亞州)的IRMA測定了血清骨鈣蛋白。LLQ為0.45μg/L。批內和批間分析的系數分別為5.6和4.4％。UCLA-HarborMedical Center報道，正常成年男性的骨鈣蛋白測定范圍在2.9-12.7μg/L之間。
如圖17和表20所示，所有治療組的基線平均血清骨鈣蛋白水平都在正常范圍內。在最初90天的治療中，所有受試者的平均血清骨鈣蛋白隨著睪酮治療而增加，且在組之間沒有顯著的差異。繼續治療時，血清骨鈣蛋白到第180天要么保持穩定要么下降。
表20后期治療組各個觀察日的骨鈣蛋白濃度(平均值±標準偏差)
(4)I型前膠原用來自Incstar公司(Stillwater，明尼蘇達州)的RIA試劑盒測定血清I型前膠原。LLQ為5μg/L。批內和批間分析的精密度分別為6.6和3.6％。UCLA-HarborMedical Center報道，正常成年男性的I型前膠原濃度在56-310μg/L之間。
圖18和表21顯示，血清前膠原通常以和血清骨鈣蛋白一樣的模式變化。所有治療組的基線平均水平類似且都在正常范圍內。透皮治療后，所有受試者的血清前膠原都顯著增加，且在組之間沒有差異。前膠原的增加在第30天時最高，然后保持穩定直至第120天。到第180天，血清前膠原水平回到基線值。
表21后期治療組各個觀察日的前膠原濃度(平均值±標準偏差)
c.尿液骨更新標記N-端肽/Cr和Ca/Cr比例UCLA-Harbor病理實驗室通過自動分析儀用標準臨床化學方法估計了尿液鈣和肌酐。這一方法是用Roche Diagnostics Systems制造的COBAS MIRA自動化學分析系統進行的。肌酐測定的靈敏度為8.9mg/dL，LLQ為8.9mg/dL。根據UCLA-Harbor Medical Center，正常成年男性的肌酐水平在2.1mM-45.1mM之間。鈣測定的靈敏度為0.7mg/dL，LLQ為0.7mg/dL。尿鈣的正常范圍在0.21mM-7.91mM之間。
用Ostex(西雅圖，華盛頓州)的酶聯免疫吸附測定(“ELISA”)測定了N-端肽。N-端肽測定的LLQ為5nM骨膠原當量(“BCE”)。批內和批間分析的精密度分別為4.6和8.9％。N-端肽測定的正常范圍是48-2529nM BCE。調節樣品體積或將樣品稀釋后重新測定血清/尿液骨標記水平過低或過高的樣品，以確保可在合適的精密度和準確度測定所有的樣品。
正常成年男性的N-端肽/Cr比例在13-119nM BCE/nM Cr之間。如圖19和表22所示，基線時，所有三個治療組的尿液N-端肽/Cr比例是類似的，但在治療的最初90天，10.0g/天AndroGel組明顯降低，而5.0g/天AndroGel組或睪酮透皮貼劑組卻沒有。這種下降一直保持，故在180天時，10.0g/天AndroGel和由10.0g/天變為7.5g/天組中的受試者的N-端肽/Cr比例一直低于基線。180天時睪酮透皮貼劑治療組的這一比例也降低了。
表22初期治療組各個觀察日的N-端肽/Cr比例(平均值±標準偏差)
Ca/Cr比例的正常范圍在0.022-0.745mM/mM之間。圖20顯示，三個治療組的基線尿液Ca/Cr比例沒有顯著差異。透皮睪酮替代治療后，所有治療組的尿液Ca/Cr比例在第90天時都沒有明顯降低。繼續睪酮替代治療直至第180天，尿液Ca/Cr有明顯變化，且在各個治療組之間沒有顯著差異。
表23初期治療組各個觀察日的Ca/Cr比例(平均值±標準偏差)
有趣的是，第90天時，Ca/Cr比例對基線的變化與基線Ca/Cr比例正好是相反的。同樣，尿液N-端肽/Cr比例的變化與基線N-端肽/Cr比例也是成反比的(r＝0.80，p＝0.0001)。因此在基線時有最高骨吸收標記的受試者在透皮睪酮替代治療時這些標記的降低也最大。基線值最高的受試者其尿液骨吸收標記的降低也最顯著，這說明，骨代謝疾病最嚴重的性腺機能減退的受試者對睪酮替代治療有最強的反應。
d.血清鈣血清鈣在基線時沒有明顯的組間差異，且在睪酮替代治療后也沒有顯著變化。血清鈣水平在睪酮替代治療期間未顯示明顯變化。
3.性欲、性行為和情緒性功能和情緒是在敷用凝膠和透皮貼劑期間，通過調查問卷，讓患者在第0天和第30、60、90、120、150和180天回訪前連續7天每天回答一次而評價的。受試者記錄了他們在這7天中的每一天是否有性幻想、對性的期望、調情、性相互作用(如，性行為參數)和性高潮、勃起、手淫、射精、性交(如，性行為參數)。以0(沒有)或1(有)記錄結果以供分析并將7天內受試者記錄參數的天數相加。將四個性動機參數的平均值作為性動機記分并將五個性動機參數的平均值作為性動機平均記分(0-7)。還用7點Likert型尺度(0-7)估計了受試者的性欲、性愉悅和勃起滿意度的水平，同時以0-100％估計了完全勃起的百分比。受試者以0-7評價他們的情緒。估計的參數包括正面的情緒反應活躍、友好、充滿精力、感覺良好，以及負面的情緒反應憤怒、急躁、悲傷、勞累、緊張。計算周平均記分。前面已經描述了這些問卷的細節，在此將其全部并入以供參考。參見Wang等，Testosterone Replacement Therapy Improves Mood in Hypogonadal Men--AClinical Research Center Study，81 J.CLINICAL ENDOCRINOLOGY & METABOLISM3578-3583(1996).
a.性欲如圖21(a)所示，基線時，所有治療組的性動機都是一樣的。透皮睪酮治療后，整體的性動機有明顯提高。然而，總記分對基線的變化在三個治療組之間沒有差異。
性欲是由對(1)總的性欲，(2)沒有伴侶時性活動的滿意度和(3)有伴侶時性活動的滿意度的線性尺度上的響應值估算的。如圖21(b)和表24所示，透皮睪酮治療后總的性欲增加了，且沒有組間的差異。總的來說，有和沒有伴侶時的性滿意度(圖21(c)和表25和26)也一起增加了。
類似的，所有受試者的性行為記分都明顯提高了。性行為對基線值的增加在透皮制劑之間沒有差異。
表24初期治療組第0-180天總的性需求的變化(平均值±標準偏差)
表25初期治療組第0-180天無伴侶時性愉悅的變化(平均值±標準偏差)
表26初期治療組第0-180天有伴侶時性愉悅的變化(平均值±標準偏差)
b.性行為圖22(a)顯示，當所有的治療組有同樣的基線性行為值時，所有組中這一值都隨著透皮睪酮治療而提高。此外，總的來說，受試者自己估計的勃起滿意度(圖22(b)和表27)以及完全勃起的百分比(圖22(c)和表28)也隨著睪酮替代治療而增加，且在各組之間沒有顯著差異。
性功能的改善和睪酮劑量或輸遞方法沒有關系。這種改善與通過不同睪酮制劑得到的血清睪酮水平也沒有關系。這些數據說明，一旦達到了閾值(血清睪酮水平可以在較低的正常范圍內)，性功能就會正常化。使血清睪酮水平超過正常范圍的上限不會進一步改善性動機或行為。
表27初期治療組第0-180天勃起的滿意度隨時間的變化(平均值±標準偏差)
表28初期治療組第0-180天完全勃起百分比的變化(平均值±標準偏差)
c.情緒正面情緒和負面情緒對睪酮替代治療的總的反應顯示在圖23(a)和23(b)中。所有三個治療組在基線時都有類似的記分，且所有的受試者在正面情緒方面都有所改善。類似的，基線時三個組負面情緒的總記分是類似的，對透皮睪酮治療的反應顯示出顯著減少且在各組之間沒有差異。特別地，正面情緒參數(如對良好狀態和精力水平的感覺)提高了，負面情緒參數(如悲傷和煩躁)降低了。在第30天時觀察到了情緒的改善并隨著治療的繼續一直保持。情緒參數的改善不依賴于血清睪酮水平增加的幅度。一旦血清睪酮水平增加至較低的正常范圍，就會發生情緒參數的最大改善。因此，性腺機能減退的男性中性功能和情緒對睪酮治療的反應顯然依賴于能否達到較低的正常范圍的血清睪酮閾值。
4.肌肉力量在第0、90和180天估計了肌肉力量。臺上按壓和坐式壓腿練習中，一次重復最大值(“1-RM”)技術被用來測量肌肉力量。所測肌肉群包括臀部、腿部、肩部、手臂和胸部的肌肉。1-RM技術估算了產生用來進行試驗的肌肉能力的最大力。步行和拉伸5-10分鐘后，以可能代表患者最大力量的重量開始試驗。每次增加約2-10磅重復試驗直至患者無法以滿意的形式舉起增加的重量。對227名患者中的167人進行了肌肉力量評定。由于沒有所需設備，16個中心中有四個沒有參加肌肉力量試驗。
圖24(a)和24(b)以及表29顯示了以手臂/胸部和壓腿試驗進行的肌肉力量試驗的反應。基線時，三個治療組在手臂/胸部或腿部肌肉力量上沒有統計學上顯著的差異。通常，在第90天和180天時，所有三個治療組在手臂和腿部肌肉力量上都有所改進，且沒有組間的差異。這些結果顯示了第90天和180天時肌肉力量的增加，腿部力量的增加的程度大于手臂，這在治療組間或在不同的評定日之間沒有差異。在第90天調節劑量對肌肉力量對透皮睪酮制劑的反應沒有明顯影響。
表29后期治療組第0、90和180天的肌肉力量以及第0-90天和0-180天肌肉力量的變化
5.身體組成用Hologic 2000或4500A系列的DEXA在第0、90和180天測定了身體組成。由于16個研究中心中有3個沒有Hologic DEXA設備，對227名患者中的168人進行了這些測定。由Hologic(沃爾瑟姆，馬薩諸塞州)集中分析和處理所有的身體組成測定結果。
基線時，三個治療組在總體重(“TBM”)、機體總肌肉重(“TLN”)、脂肪百分比(“PFT”)和機體總脂肪重(“TFT”)上沒有顯著差異。如圖25(a)和表30所示，所有治療組TBM都有所增加。TBM的增加主要是由于TLN的增加。圖25(b)和表30顯示，用睪酮替代治療90天后，10.0g/天AndroGel組中TLN的增加明顯高于其它兩組。第180天時，在所有AndroGel治療組中TLN的增加都進一步提高或保持，睪酮透皮貼劑組也是這樣。
圖25(c)和(d)顯示，所有透皮AndroGel治療組中TFT和PFT都減少了。在治療的第90天，5.0g/天和10.0g/天AndroGel組的TFT明顯減少，但在睪酮透皮貼劑組沒有變化。這種減少保持到了第180天。相應的，在第90天和第180天，PFT在所有AndroGel治療組仍明顯較低，但在睪酮透皮貼劑組沒有明顯減少。
與睪酮替代治療有關的TLN的增加和TFT的減少與通過睪酮透皮貼劑和不同劑量AndroGel而達到的血清睪酮水平明顯相關。以10.0g/天敷用睪酮凝膠使肌肉質量的增加要高于睪酮透皮貼劑和5.0g/天AndroGel組。變化在治療90天后出現并保持或增強到第180天。即便受試者停止上面的睪酮治療達六周之久，身體組成的這種變化仍舊很明顯。TFT和PFT的減少還與所達到的血清睪酮水平有關，且在治療組之間沒有差異。睪酮透皮貼劑組在180天治療后沒有顯示PFT或TFT的減少。用AndroGel(50-10.0g/天)治療90天降低了PFT和TFT。這種降低在5.0和7.5g/天組中保持到了第180天，但沒有隨用更高劑量AndroGel繼續治療而進一步降低。
表30后期治療組從基線到第90天以及從基線到第180天身體組成參數(DEXA)的平均變化
6.脂類特點和血液化學基線時，血清總膽固醇、HDL膽固醇和LDL膽固醇水平在所有治療組之間沒有顯著差異。透皮睪酮替代治療后，血清總膽固醇、HDL膽固醇和LDL膽固醇(圖5(d))和甘油三酯(數據未顯示)的總體的治療效果沒有組間差異。血清總膽固醇隨時間(p＝0.0001)有顯著的變化，第30、90和180天的濃度明顯低于第0天的濃度。
睪酮替代治療期間，大約70-95％的受試者在血清脂類特點上沒有明顯改變。第180天時，睪酮透皮貼劑、5.0g/天AndroGel和10.0g/天AndroGel組中分別有17.2、20.4和12.2％的受試者由原本較高的總膽固醇水平降到了(各個中心實驗室的)正常范圍。第180天時，睪酮透皮貼劑、AndroGel5.0、7.5和10.0g/天組中分別有9.8、4.0、9.1和12.5％的受試者其血清HDL-膽固醇水平(原來正常)降至低于(各個中心實驗室的)正常范圍。任一治療組的腎功能或肝功能都沒有臨床上顯著的變化。
7.皮膚剌激每次回訪時都用以下評分進行皮膚剌激評定0＝沒有紅斑；1＝略有紅斑；2＝中等程度紅斑，有明顯的界限；3＝強烈紅腫；以及4＝強烈紅斑，并帶有水腫和水泡/糜爛。
對每日以試驗劑量敷用AndroGel的耐受性要明顯高于滲透性增強的睪酮透皮貼劑。AndroGel5.0g/組中有三名患者(5.7％)在敷用部位出現了最輕微的皮膚剌激(紅斑)，在AndroGel10.0g/天組中也有三名患者(5.3％)有此現象。透皮貼劑組中有65.8％的患者發生了從最輕微到嚴重(輕微的紅斑到嚴重的帶有水泡的水腫)的不同強度的皮膚剌激。由于出現與睪酮透皮貼劑有關的皮膚剌激，有16名患者沒有繼續研究；其中14人在治療部位出現了中等程度至嚴重的皮膚反應。接受AndroGel的患者中沒有因皮膚不良反應中止研究的。開放系統和AndroGel制劑中較低濃度的乙醇明顯降低了皮膚剌激，其結果是在睪酮替代治療時得到了較好的耐受性和持續程度。
此外，根據發放和回收的AndroGel瓶重量的不同，1-90天內5.0g/天和10.0g/天AndroGel組的平均順從性分別為93.1％和96.0％。三個AndroGel組從91-180天的順從性保持在93％以上。相反，基于對受試者返還的透皮貼劑的計算，睪酮透皮貼劑的順從性在第1-90天為65％，第91-180天為74％。根據患者的記錄，睪酮透皮貼劑組較低的順從性很大程度上是由于皮膚反應造成的。
表31始終留在初期治療組的患者中與皮膚有關的不良事件的發生第1-180天
實施例2凝膠輸遞劑型和裝置本發明還涉及調劑和包裝凝膠的方法。一個實施方案中，本發明包括每次開動能夠輸遞約2.5g睪酮凝膠的手持泵。另一實施方案中，凝膠被包裝在含有聚乙烯襯里的箔包裝中。每個包裝中含有大約2.5g睪酮凝膠。患者只需沿著打孔的邊緣撕開包裝取出凝膠即可。然而，由于肉豆蔻酸異丙酯與聚乙烯襯里結合，在凝膠中加入了額外的肉豆蔻酸異丙酯以在采用這種輸遞方案時得到制藥上有效的凝膠。特別地，當用箔包裝調劑凝膠時，在凝膠組合物中使用了大約41％或更多的肉豆蔻酸異丙酯(即，用約0.705g代替表5中的約0.5g)以補償這種現象。
還可以用硬質多劑量容器(如，用手持泵)調劑該組合物，容器中有較大的組合物的一個箔包裝。這種較大的包裝還包括上述聚乙烯襯里。
這兩個實施方案都使患者能夠向身體輸遞精確但遞增量的凝膠(例如，2.5g、5.0g、7.5g等)。因此，這些輸遞機制使得能夠根據特殊的需要和患者的特征以單位劑量敷用該凝膠。
盡管已經根據特殊的實施方案和實施例描述了本發明，但應該知道，利用本發明概念的其它實施方案可能也不背離本發明的范圍。以權利要求的要素和落在基本原理的真正精神和范圍內的任何及所有修飾、變化或等價物限定了本發明。
權利要求
1.一種制備含睪酮凝膠的劑量包裝的方法，該方法包括以下步驟-提供包含聚乙烯襯里的箔包裝，-提供透皮睪酮凝膠，它包含0.1-10％(w/w)的睪酮，0.1-5.0％(w/w)的聚丙烯酸，0.1-5.0％(w/w)的肉豆蔻酸異丙酯，30-98％(w/w)的乙醇，-在所述凝膠進一步加入額外的相對于上述肉豆蔻酸異丙酯量的41％的肉豆蔻酸異丙酯。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述透皮睪酮凝膠包含0.5-5.0％(w/w)的睪酮，0.1-2.0％(w/w)的聚丙烯酸，0.1-2.0％(w/w)的肉豆蔻酸異丙酯，40-90％(w/w)的乙醇。
3.如權利要求1或2所述的方法，其中所述聚丙烯酸是聚羧乙烯。
4.如權利要求1-3任一項所述的方法，其中所述劑量包裝是單位劑量箔包裝。
5.如權利要求4所述的方法，其中所述劑量包裝含有2.5克、5.0克或7.5克凝膠。
6.如權利要求1-3任一項所述的方法，其中劑量包裝是多劑量容器。
7.如權利要求6所述的方法，其中所述多劑量容器具有手持泵。
8.如權利要求7所述的方法，其中容器允許輸遞遞增量的凝膠。
9.如權利要求8所述的方法，其中遞增量的凝膠是2.5克、5.0克或7.5克。
10.用權利要求1-9任一項所述的方法獲得的劑量包裝。
11.具有聚乙烯襯里的劑量包裝，它含有透皮睪酮凝膠，該劑量包裝允許有效輸遞凝膠，該凝膠包含0.1-10％(w/w)的睪酮，0.1-5.0％(w/w)的聚丙烯酸，0.1-5.0％(w/w)的肉豆蔻酸異丙酯，30-98％(w/w)的乙醇，其中包裝所含的凝膠中加入了與輸遞的凝膠相比額外量的肉豆蔻酸異丙酯。
12.如權利要求11所述的劑量包裝，它允許有效的輸遞凝膠，該凝膠包含0.5-5.0％(w/w)的睪酮，0.1-2.0％(w/w)的聚丙烯酸，0.1-2.0％(w/w)的肉豆蔻酸異丙酯，40-90％(w/w)的乙醇。
13.如權利要求11或12所述的劑量包裝，其中所述聚丙烯酸是聚羧乙烯。
14.如權利要求11-13任一項所述的劑量包裝，其中所述劑量包裝是單位劑量箔包裝。
15.如權利要求14所述的劑量包裝，其中所述劑量包裝含有2.5克、5.0克或7.5克凝膠。
16.如權利要求11-13任一項所述的劑量包裝，其中所述劑量包裝是多劑量容器。
17.如權利要求16所述的劑量包裝，其中所述多劑量容器具有手持泵。
18.如權利要求17所述的劑量包裝，其中所述容器允許輸遞遞增量的凝膠。
19.如權利要求18所述的劑量包裝，其中遞增量的凝膠是2.5克、5.0克或7.5克。
20.如權利要求10-19任一項所述的劑量包裝，其用于治療性腺機能減退。
21.透皮睪酮凝膠在制備用于治療患者性腺機能減退的藥物中的用途，所述凝膠由權利要求10-19任一項所述的劑量包裝或權利要求1-19所述的方法獲得的劑量包裝來輸遞。
22.如權利要求21所述的用途，其中所述患者是性腺機能減退的男性。
全文摘要
揭示了一種可有效治療性腺機能減退的藥物組合物。這一組合物包括雄激素或促蛋白合成的類固醇、C1－C4醇、滲透增強劑如肉豆蔻酸異丙酯和水。還揭示了用這種組合物治療性腺機能減退的方法。
文檔編號A61K47/10GK101077350SQ20071010927
公開日2007年11月28日 申請日期2001年8月29日 優先權日2000年8月30日
發明者R·E·杜德利, S·G·科臺爾, O·帕拉齊 申請人:優尼麥德藥物股份有限公司, 貝辛 依斯苛芙斯科實驗室