專利名稱：炎琥寧凍干粉針劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥劑及其制備方法，具體地說是炎琥寧凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術：
炎琥寧，化學名稱為14-脫羥-11，12-二脫氫穿心蓮內酯-3，19-二琥珀酸半酯鉀鈉鹽，分子式C28H34KNaO10·H2O；分子量610.68。其能抑制早期毛細血管通透性增高與炎性滲出和水腫，能特異性地興奮垂體-腎上腺皮質功能，促進ACTH釋放，增加垂體前葉中ACTH的生物合成；體外具有滅活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多種病毒的作用。動物實驗有抗早、中孕作用。有清熱解毒及抗病毒作用，主要用于病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染。
現有的注射用炎琥寧為炎琥寧的無菌凍干品，可加適量的無菌注射用氯化鈉作稀釋劑。將其按貯藏條件(密閉，在陰涼干燥處)保存，因其pH環境不穩定，所以含量下降較快，有的一年后含量即降至下限，無法達到2年效期。
發明內容
本發明的目的在于針對上述不足提供一種化學穩定、有效期長的炎琥寧凍干粉針劑；本發明的另一個目的在于提供所述粉針劑的制備方法。
注射用炎琥寧失效的主要原因為水解及氧化作用，故需提高注射用炎琥寧的穩定性關鍵為控制溶液的pH值及添加適當的抗氧化劑。
因此，本發明使用炎琥寧、離子緩沖對及抗氧化劑作為主要原料制備成凍干粉針劑。所述的離子緩沖對為磷酸鹽緩沖對、碳酸鹽緩沖對或氨基酸鹽緩沖對，優選為磷酸鹽緩沖對。所述的抗氧化劑為L-半胱氨酸鹽酸鹽、L-半胱氨酸或亞硫酸氫鈉，優選為L-半胱氨酸鹽酸鹽。
進一步，本發明確立了一個優選配方，其包括下列重量比的主要原料炎琥寧720～880、磷酸氫二鈉80.64～98.56、磷酸二氫鈉58.05～70.95、L-半胱氨酸鹽酸鹽4.41～8.36。更優選地，炎琥寧800、磷酸氫二鈉89.6、磷酸二氫鈉64.5、L-半胱氨酸鹽酸鹽4.9～7.6。
本發明還提供了制備上述粉針劑的方法，其特征在于該方法包括步驟取炎琥寧用注射用水溶解調節pH至6.0～7.0，加入離子緩沖對水溶液以及抗氧化劑水溶液，攪勻后用活性炭吸附處理，調節pH至6.3～7.1，補加注射用水至全量，攪拌均勻后凍干即得。
更具體地說，該方法包括步驟量取配制量70％的45℃～60℃的注射用水，邊攪拌邊加入處方量的炎琥寧，保持溫度45℃～60℃，待全部溶解后，立即冷卻至室溫，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.0～7.0，加入離子緩沖對水溶液，攪勻后加入重量百分比0.2～1.0％的活性炭，攪拌吸附20分鐘，除炭，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.3～7.1，補加注射用水至全量，攪拌均勻后凍干即得。
優選地，該方法包括步驟量取配制量70％的50℃～55℃的注射用水，邊攪拌邊加入處方量的炎琥寧，保持溫度50℃～55℃，待全部溶解后，立即冷卻至室溫，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.6～6.8，加入離子緩沖對水溶液以及抗氧化劑水溶液，攪勻后加入重量百分比0.4～0.7％的活性炭，攪拌吸附20分鐘，除炭，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至優選6.7～6.9，補加注射用水至全量，攪拌均勻。冷卻至30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝。
本發明制備方法在配制過程全程充氮保護，以最大限度防止炎琥寧的氧化。
本發明所述的全量是指按照處方總量與注射用水的重量體積比1∶14～21添加注射用水。
本發明凍干粉針劑由于加入了離子緩沖對以及抗氧化劑，使得其pH環境穩定，氧化速度慢，有效地提高了其保存期。
圖1是血管刺激給藥組實驗結果；圖2是血管刺激對照組實驗結果；圖3是肌肉刺激給藥組實驗結果；圖4是肌肉刺激對照組實驗結果。
具體實施例方式
下面實施例用于進一步說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
實施例1 炎琥寧凍干粉針劑的制備取炎琥寧800g，用14000ml 55℃的注射用水保持在50℃～55℃溶解，調pH值至6.7；分別取磷酸氫二鈉89.6g和磷酸二氫鈉64.5g，用1000ml的注射用水溶解；取L-半胱氨酸鹽酸鹽6g，用1000ml注射用水溶解，將上述三種溶液混合均勻，活性炭吸附，除炭，調節pH值至6.8，補加注射用水至20000ml，攪拌均勻，30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝，即得成品。
實施例2 炎琥寧凍干粉針劑的制備取炎琥寧720g，用12000ml 50℃的注射用水溶解，調pH值至6.0；分別取磷酸氫二鈉80.64g和磷酸二氫鈉50.05g，用注射用水溶解；取L-半胱氨酸鹽酸鹽4.9g，用注射用水溶解，將上述三種溶液混合均勻，按重量比0.4％加入活性炭吸附，除炭，調節pH值至6.3，補加注射用水至13000ml，攪拌均勻，30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝，即得成品。
實施例3 炎琥寧凍干粉針劑的制備取炎琥寧880g，用13000ml 60℃的注射用水溶解，調pH值至7.0；分別取磷酸氫二鈉98.56g和磷酸二氫鈉70.95g，用注射用水1000ml溶解；取L-半胱氨酸鹽酸鹽7.6g，用注射用水1000ml溶解，將上述三種溶液混合均勻，按重量比0.7％加入活性炭吸附20分鐘，除炭，調節pH值至6.9，補加注射用水至25000ml，攪拌均勻，30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝，即得成品。
實施例4 炎琥寧凍干粉針劑的制備取炎琥寧850g，用12000ml 53℃的注射用水溶解，調pH值至6.6；分別取磷酸氫二鈉80g和磷酸二氫鈉60g，用注射用水溶解；取L-半胱氨酸鹽酸鹽4.41g，用注射用水溶解，將上述三種溶液混合均勻，按重量比0.2％加入活性炭吸附20分鐘，除炭，調節pH值至7.1，補加注射用水至22000ml，攪拌均勻，30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝，即得成品。
實施例5 炎琥寧凍干粉針劑的制備取炎琥寧750g，用10000ml 45℃的注射用水溶解，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.8；分別取磷酸氫二鈉90g和磷酸二氫鈉65g，用注射用水溶解；取L-半胱氨酸鹽酸鹽8.36g，用注射用水溶解，將上述三種溶液混合均勻，按重量比1.0％加入活性炭吸附，除炭，用10％碳酸氫鈉溶液調節pH值至6.7，補加注射用水至20000ml，攪拌均勻，30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝，即得成品。
實施例6 注射劑安全性試驗研究(1)過敏性試驗取豚鼠18只，雌雄各半，體重250～300g，隨機分為陰性對照組(5％葡萄糖注射液)、陽性對照組(5％卵白蛋白生理鹽水溶液)和注射用炎琥寧受試物組(用5％葡萄糖注射液配成1.6mg/ml)，每組6只。各組動物間日腹腔注射相應藥液0.5ml/只，共三次。分別在首次給藥后14天，21天，每組隨機取三只，靜脈注射相應藥液1ml/只，給藥后立即觀察動物有無噴嚏、搔鼻、干咳或咳嗽、顫抖、豎毛、抽搐、呼吸困難、大小便失禁、休克和死亡的過敏反應，觀察時間為15分鐘。過敏反應分級見表1。
表1過敏反應分級及結果判定方法
結果為陰性對照組的豚鼠過敏反應級數均為0，無過敏反應；陽性對照組豚鼠出現噴嚏、搔鼻、干嘔或咳嗽、抽搐、顫抖、呼吸困難、大小便失禁、休克等過敏反應，且皆于15min內死亡，過敏反應級數為四級，試驗條件成立。注射用炎琥寧組6只豚鼠均無過敏反應，過敏反應級數均為0。注射用炎琥寧對豚鼠無致敏作用。結果見表2。
表2注射用炎琥寧過敏試驗結果
(-)無過敏反應 (+)有過敏反應
(2)溶血性試驗取家兔心臟穿刺采血10ml，以玻璃球攪拌去纖維蛋白后，用生理鹽水洗滌后離心(3000rpm)，去掉上清液，再以生理鹽水反復洗滌數次(均離心棄上清)直至上清液無紅色，然后按體積比用生理鹽水配成2％紅細胞混懸液備用。
取試管7支，按表3所示各管分別加入不同體積的試藥液和相同體積的紅細胞混懸液，其中第6管不加藥，為0.9％氯化鈉溶液空白對照，第7管加蒸餾水做完全溶血對照(陽性對照管)。各管輕輕搖勻后，置37℃水浴中溫孵4小時，觀察0.25小時至4.0小時內各管是否有溶血及紅細胞聚集現象，按表4標準判斷。結果見表5。
表3體外溶血試驗加樣表
表4溶血結果判斷
表5注射用炎琥寧體外溶血及細胞凝集試驗結果
實驗結果表明，注射用炎琥寧(用5％葡萄糖注射液配成1.6mg/ml)組和0.9％氯化鈉溶液組各管在0.25～4.0小時內均無溶血現象，也無凝集反應，蒸餾水組在各時間點完全溶血，產生紅色透明溶液。
(3)血管刺激試驗取2.5～3.0kg家兔3只，雌雄兼用，采用同體左右耳對照，左耳由耳緣靜脈緩慢注射注射用炎琥寧(用5％葡萄糖注射液配成1.6mg/ml，給藥容量為5.0ml/只)，右耳給予等容量的葡萄糖注射液做對照，每日1次，連續3日。每日肉眼觀察兩組家兔耳注射部位及周圍血管是否有水腫、充血等刺激現象，并按表6的標準進行肉眼觀察評分。末次注射后，處死動物，分別剪取注射部位耳緣靜脈及周圍組織約2cm，用10％的甲醛固定后，石蠟切片，HE染色，顯微鏡下觀察其炎性細胞浸潤、血管周圍組織出血、血栓形成及壞死等情況。
表6血管刺激性肉眼觀察評分標準
結果注射用炎琥寧連續給藥3天，肉眼觀察家兔耳靜脈血管及周圍組織，未見明顯紅腫、充血的異常現象。按評分標準判斷無刺激性，結果見表7。顯微鏡下觀察可見左耳注射用炎琥寧注射部位處血管內皮連續、完整、未見增生、腫脹，血管周圍組織未見明顯炎性細胞浸潤及壞死，管腔內無血栓形成(如圖1所示)；右耳(5％葡萄糖注射液)注射部位血管內皮細胞、血管腔及周圍組織均未見明顯異常(如圖2所示)。按評分標準判斷注射用炎琥寧無明顯血管刺激性。
表7注射用炎琥寧血管刺激性肉眼觀察評分
(4)肌肉刺激性試驗取健康家兔3只，體重在2.5-3.0kg之間，雄性，各家兔左側股四頭肌內以無菌注射器注入注射用炎琥寧(用5％葡萄糖注射液配成1.6mg/ml)1ml，右側注入葡萄糖注射液1ml作為對照，然后觀察注藥后48h注射局部肌肉有無出現充血、紅腫、變性、壞死等現象，并按肌肉刺激反應分級標準(見表8)打分和評判結果。肉眼觀察后，處死動物，取注射部位肌肉2cm3，甲醛固定，進行病理組織學檢查。
表8肌肉刺激反應分級標準
結果，通過肉眼和組織學檢查，注射用炎琥寧對家兔股四頭肌注射給藥后，未產生充血、紅腫、變性、壞死等現象，結果見表9。顯微鏡下觀察可見注射用炎琥寧組和葡萄糖注射液組注射部位肌肉組織均未見腫脹、增生，細胞形態完好，未見炎性細胞浸潤及壞死，(如圖3、4所示)。表明注射用炎琥寧無肌肉刺激性。
表9注射用炎琥寧肌肉刺激肉眼評分
實施例7 加速試驗結果取3批樣品，按市售包裝，在溫度40℃±2℃，相對濕度75％±5％條件下放置6個月，進行加速試驗，結果見表10。
表10加速試驗
通過六個月的恒溫加速觀察，3批注射用炎琥寧pH值和含量均合格，其他各項檢查均符合規定。樣品在超過加速觀察期限6個月后于第8個月再次送檢，結果pH值和含量仍較穩定，表明炎琥寧粉針劑在陰涼干燥處保存，在2年效期內可保持質量穩定。
權利要求
1.炎琥寧凍干粉針劑，其通過下述主要原料制備獲得炎琥寧、離子緩沖對、抗氧化劑。
2.如權利要求1所述的粉針劑，其特征在于，所述的離子緩沖對為磷酸鹽緩沖對、碳酸鹽緩沖對或氨基酸鹽緩沖對。
3.如權利要求1所述的粉針劑，其特征在于，所述的抗氧化劑為L-半胱氨酸鹽酸鹽、L-半胱氨酸或亞硫酸氫鈉。
4.如權利要求1所述的粉針劑，其特征在于，所述的離子緩沖對為磷酸鹽緩沖對，所述的抗氧化劑為L-半胱氨酸鹽酸鹽。
5.如權利要求4所述的粉針劑，其特征在于，該粉針劑由下列重量份的主要原料制成炎琥寧720～880、磷酸氫二鈉80.64～98.56、磷酸二氫鈉58.05～70.95、L-半胱氨酸鹽酸鹽4.41～8.36。
6.如權利要求5所述的粉針劑，其特征在于，該粉針劑由下列重量份的主要原料制成炎琥寧800、磷酸氫二鈉89.6、磷酸二氫鈉64.5、L-半胱氨酸鹽酸鹽4.9～7.6。
7.一種制備權利要求1～6任一項所述注射劑的方法，其包括步驟取炎琥寧用注射用水溶解，調節pH至6.0～7.0，加入離子緩沖對水溶液以及抗氧化劑水溶液，用活性炭吸附處理，調節pH至6.3～7.1，補加注射用水至全量，攪拌均勻后凍干即得。
8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于，該方法包括步驟量取配制量70％的45℃～60℃的注射用水，邊攪拌邊加入處方量的炎琥寧，保持溫度45℃～60℃，待全部溶解后，立即冷卻至室溫，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.0～7.0，加入離子緩沖對水溶液，攪勻后加入重量百分比0.2～1.0％的活性炭，攪拌吸附20分鐘，除炭，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.3～7.1，補加注射用水至全量，攪拌均勻后凍干即得。
9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，該方法包括步驟量取配制量70％的50℃～55℃的注射用水，邊攪拌邊加入處方量的炎琥寧，保持溫度50℃～55℃，待全部溶解后，立即冷卻至室溫，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.6～6.8，加入離子緩沖對水溶液以及抗氧化劑水溶液，攪勻后加入重量百分比0.4～0.7％的活性炭，攪拌吸附20分鐘，除炭，用10％碳酸氫鈉溶液調pH值至6.7～6.9，補加注射用水至全量，攪拌均勻，冷卻至30℃以下精濾，灌裝，半壓塞，凍干，壓塞，軋蓋，目檢，包裝。
10.如權利要求7～9任一項所述的制備方法，其特征在于，配制過程全程充氮保護。
全文摘要
本發明提供了一種炎琥寧凍干粉針劑，該粉針劑由炎琥寧、離子緩沖對以及抗氧化劑制成，優選的離子緩沖對采用磷酸鹽緩沖對，抗氧化劑選擇L－半胱氨酸鹽酸鹽。本發明凍干粉針劑由于加入了離子緩沖對以及抗氧化劑，使得其pH環境穩定，氧化速度慢，有效地提高了其保存期。
文檔編號A61K9/19GK101057841SQ20071010379
公開日2007年10月24日 申請日期2007年5月30日 優先權日2007年5月30日
發明者方同華 申請人:黑龍江省珍寶島制藥有限公司