一種藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用的制作方法

專利名稱：：一種藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于中藥
技術領域：
。
背景技術：
：吉林華康藥業(yè)股份有限公司擁有中國發(fā)明專利《治療熱淋的中藥制劑》，專利號為02146487.1，授權公告號CNU68488C，其特征在于，每1000劑由以下重量配比的中藥原料制成，金銀花125375份，半枝蓮62187份，瞿麥37~112份，扁蓄37112份，石韋37U2份，木通1956份，車前子37112份，淡竹葉37112份，燈心草1237份，桑寄生62187份。本發(fā)明的制劑其功能主治為清熱解毒、利濕通淋。適用于熱淋(下焦?jié)駸嶙C)相當于急性泌尿系感染各癥。
發(fā)明內容本發(fā)明提供一種藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用，是《治療熱淋的中藥制劑》，專利號為02146487.1的藥物組合物的新的藥物用途，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成，金銀花125~375份，半枝蓮62187份，瞿麥37~112份，扁蓄37112份，石韋37-112份，木通19~56份，車前子37112份，淡竹葉37112份，燈心草1237份，桑寄生621S7份。本發(fā)明中，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成金銀花187312份，半枝蓮93156份，瞿麥56~93份，扁蓄5693份，石韋5693份，木通28~47份，車前子56~93份，淡竹葉56~93份，燈心草1931份，桑寄生93-156份。本發(fā)明中，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成金銀花190-270份，半枝蓮110136份，瞿麥6585份，扁蓄6585份，石韋6585份，木通6585份，車前子6585份，淡竹葉65~85份，燈心草12~28份，桑寄生U0136份。以上藥材重量份，若以克為單位計算可制成1000劑藥劑，如制成膠囊制劑1000粒，片劑1000片等。本發(fā)明的中藥制劑，在制備成藥劑時可加入藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體可以是淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素類及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、(3-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。本發(fā)明的中藥制劑可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑。本發(fā)明的制劑，優(yōu)選的是口服劑型，如膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸齊U、散齊廿、丹劑、膏劑，最優(yōu)選的是膠囊劑。本發(fā)明具有抗前列腺炎的作用，藥物配方中的中藥，其藥源豐富，價格低廉，攜帶方便，易為患者所接受。適用于廣大患者使用，故有相當可觀的社會效益及經濟效益。本發(fā)明的制劑在使用時根據病人的情況確定用法用量，可每日服三次，每次1~10粒/或片。本發(fā)明的中藥制劑可通過以下方法制備金銀花的半量，用乙醇提取，濾過，回收乙醇，濃縮備用，另取半枝蓮、瞿麥等9味加水煎煮濾過，濃縮備用。再取金銀花的半量、去雜質、粗粉碎，同以上二個備用的稠膏、合并，干燥，粉碎成細粉，過篩，得到活性成分，該活性成分可直接制成制劑，也可加入藥物可接受的載體制成藥物制劑。下面通過藥效學實驗來進一步驗證本發(fā)明。受試藥物1.本發(fā)明藥物以下簡稱銀花泌炎靈片(YinhuamiyanlingPian)，由吉林華康藥業(yè)股份有限公司提供，批號:050903。每片生藥含量為1,875g，高效液相色譜法進行定量測定，本品每片含金銀花，以氯原酸(C1QH1809)計不得少于3.60mg。2.配制方法臨用時將銀花泌炎靈片去薄膜衣后以蒸餾水配成所需濃度，用時搖勻，4r保存。3.劑量選擇成人每人每日口服16片，每片重0.5g，每片含原生藥1.875g,人按70kg計算，相當于0.428g生藥/kg,按人體與動物體表面積等效劑量比值計算，選擇小白鼠三種給藥劑量為15.0g、7.5g、3.75g生藥/kg;大白鼠為10.8g、5.4g、2.7g生藥/kg(分別相當于等效劑量的4倍，2倍和等效劑量)，動物均灌胃給藥(ig)。給藥途徑與臨床一致。動物1.Wistar大白鼠，封閉群，雌雄兼用，動物合格證號SCXK(吉)2003—0004。2.遠交系，昆明種小白鼠，封閉群，體重18-22g,動物合格證號SCXK(吉2003—0004。Wistar大白鼠和昆明種小白鼠均由長春高新醫(yī)學動物實驗研究中心提供。飼養(yǎng)條件動物室為普通級，室溫26X:，相對濕度為40%，通風良好，采用標準飼料飼養(yǎng)，小白鼠籠具26X16cm，雌雄分籠，每籠5只。大白鼠籠具50X35cm，雌雄分籠，每籠5只動物陽性對照藥物選擇l.阿司匹林(腸溶片)，臨床成人每日口服本品40mg，含乙酰水楊酸25mg,臨用時研碎，選擇劑量大白鼠0.2g/kg、小白鼠0.3g/kg(參照有關資料實驗劑量確定)，石家莊神威藥業(yè)股份有限公司生產，批號20050209。2呋塞米片，臨床成人每日四片，每片含呋喃苯胺酸20mg。天津力生制藥股份有限公司生產，按人體與動物體表面積等效劑量比值計算。選擇劑量大白鼠36mg/kg(5倍等效劑量)，批號040811。3前列通片，(國藥準字Z44022456號)與銀花泌炎靈片治療作用基本相同，給藥途徑一致，故選擇為陽性對照品。本品為糖衣片，除去糖衣后顯淺褐色至褐色，基片重0.34g，成人每天3次，每次6片，按人體與動物體表面積等效劑量比值計算，選擇大白鼠劑量為2.75g/kg，相當于5倍等效劑量，臨用時去糖衣，研碎，以蒸餾水配成所需濃度，動物均灌胃(ig)給藥，由廣州中一藥業(yè)有限公司生產，批號04507。4阿莫西林，成人每人每日2000mg，試驗選擇2倍等效劑量520mg/kg，黑龍江三勤制藥有限公司出品，批號031010儀器1、JN—A型精密扭力天平(上海第二天平儀器廠)2、SARTORIUSGMBHGOTTINGEN精密天平(精度0.00001)，德國3、L-301型生物顯微鏡(廣州光學儀器廠)4、超薄切片機LKB2088(瑞典制造)5Leitjl512石蠟切片機(德國制造)6SW-CJ-113標準型凈化工作臺(蘇州凈化設備廠)7WX-753型微循環(huán)顯微鏡(徐州醫(yī)用光學儀器廠)8生物醫(yī)學圖象分析儀(CIMA-400)9上海復星FORTUNE.IMS微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)10、恒溫振蕩培養(yǎng)箱，HZQ-XIOO，太倉市實驗設備廠ll雙人超凈工作臺，SW-CT-ZF型，中國蘇州12電熱鼓風干燥箱，101A-2型，中國上海；13真空冷凍干燥機，MRK，日本；14家用冷藏冰箱，BCD-226型，美菱，中國合肥。試劑角叉菜膠由沈陽藥學院中藥系提供，臨用時以生理鹽水配制，無批號；冰醋酸，由北京北化精細化學藥品有限公司生產，批號020730，25%消痔靈注射液，由廣州中醫(yī)藥業(yè)有限公司生產，批號H0031;氯化鈉(分析純)，北京化工廠生產；BactoTryptone，OXOID，英國；BactoYeastExtract,OXOID，英國；瓊脂粉，上?；瘜W試劑采購供應站試劑廠生產，批號77-07-14。蛋白棟，上海東海制藥廠生產。菌株標準菌株(AmericanTypeCultureCollectionATCC):大腸埃希氏菌ATCC44102、金黃色葡萄球菌ATCC26003、福氏志賀氏菌ATCC51571。均由中國藥品生物制品鑒定所提供。臨床分離菌株(ClinicalIsolatedBacterialStrainCIBS):金黃色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、變形桿菌株CIBSl(r72、克雷伯桿菌株CIBS861、糞腸球菌株CIBS859、綠膿桿菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大腸桿菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853。金黃色葡萄球菌，菌號26003(長春中醫(yī)學院附屬醫(yī)院細菌室提供)。數據統(tǒng)計方法試驗110結果數據均以(S士SD)表示，組間差異的顯著性采用t檢驗，試驗10、11結果采用f檢驗。試驗方法與結果1、銀花泌炎靈片對消痔靈致動物慢性前列腺炎模型的影響根據張氏等前列腺直接注射法制作非細菌性前列腺炎大白鼠模型。取Wistar大白鼠50只，雄性，體重350400g，經腹腔注射3。/。水合氯醛10ml/kg進行麻醉,在無菌條件下，下腹正中用酒精消毒后用鑷子提起皮膚，逐層切開皮膚，直達腹腔，提起膀胱及兩側精索，暴露膀胱背側前列腺背側葉，分別注入25。/。消痔靈注射液0.1ml，縫合肌肉、皮膚，碘酒消毒傷口。術后精心飼養(yǎng)7天，于第7天將大白鼠隨機分為5組，第l、2、3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，劑量分別為10.8g、5.4g、2.7g生藥/kg，第4組為前列通片陽性藥組，劑量為2.75g/kg，第5組為模型組，另取10只為正常對照組，14組按劑量灌胃給藥(ig)，其余給蒸餾水，連續(xù)給藥30天，于末次給藥l小時后，稱體重，斷頭處死大白鼠，解剖取前列腺稱重，然后各取前列腺的一半，置于lml生理鹽水中，充分混勻，于顯微鏡下測定前列腺液中白細胞數和卵磷脂小體數，其余前列腺用10%甲醛液固定，做病理組織學切片檢察。結果見表l、表2。表1銀花泌炎靈片對大白鼠慢性前列腺炎模型前列腺液的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>用藥組與模型對照組比較*P<0.05正常對照組與模型組比較##P〈0.01###P〈0.001前列腺液測定表明，模型組與正常對照組比較，白細胞數明顯升高，且卵磷脂小體數明顯降低，證實該模型成立，受試藥物銀花泌炎靈片高、中劑量組的白細胞數量與模型對照組比較明顯減少，卵磷脂小體數具有明顯升高，經統(tǒng)計學處理有顯著性差異P〈0.05。表2銀花泌炎靈片對大白鼠慢性前列腺炎模型的影響半定量分級組別劑量動物數(只)0級l級2級3級(g生藥/kg)銀花泌炎靈片10.85.42.7前列通片2.75模型對照正常對照注分級標準0級正常前列腺，間質無增寬和水腫，無炎細胞浸潤，無明顯纖維組織增生；l級腺體排列尚整齊，間質輕度增寬，水腫較輕微，有少量炎細胞浸潤和纖維組織增生；2級腺體排列較整齊，間質中度增寬，水腫較重，有較多炎細胞浸潤和纖維組織增生；3級腺體組織有破壞，間質明顯增寬，水腫明顯，可見大量炎細胞浸潤和較明顯纖維組織增生，被膜下有浸潤的炎細胞。病理組織學觀察結果(1)、正常對照組前列腺腺腔形狀不規(guī)則，腺上皮腺腔內凸出，形成多個皺襞伸向腺腔。腺上皮細胞呈柱狀或立方形，上皮增生不活躍，形成的乳頭少而短，腺腔內可見稀薄嗜伊紅分泌物。腺體間緊密排布，間質狹窄，間質成分明顯少于腺體，間質內含及少量平滑肌細胞、淋巴細胞和成纖維細胞。約為腺體的1/3，無明顯炎細胞。而且排列整齊，1073001063101036101064001000461010000(2)、模型組前列腺體排列疏松，腺上皮呈柱狀。腺上皮無明顯增生，間質明顯擴寬、水腫，可見多數淋巴細胞浸潤和成纖維細胞增生。纖維組織沉積較正常對照組多。有些部位纖維組織沉積較較正常對照組明顯增多。(3)、陽性對照藥組腺體排布較疏松，腺上皮較矮，腺上皮無明顯增生，未形成較多突向腺腔的乳頭。腺腔內可見少量嗜伊紅分泌物。腺體間緊密排布。間質輕度擴寬、淋巴細胞浸潤和成纖維細胞增生的程度較模型組明顯減輕，間質纖維組織沉積不明顯。(4)、高劑量組腺體排布趨于正常對照組的形態(tài)，腺上皮細胞呈柱狀或立方形，腺上皮增生不明顯，未形成多數突向腺腔的乳頭。腺腔內可見少量嗜伊紅分泌物。與模型組比較，間質寬度明顯變窄，水腫明顯減輕，浸潤的炎細胞稀疏。間質纖維組織沉積不明顯。(5)、中劑量組腺上皮無明顯增生，未形成較多突向腺腔的乳突，腺腔內可見少量嗜伊紅分泌物。腺體形態(tài)與陽性對照組相近，間質擴寬程度和間質水腫明顯減輕，浸潤的炎細胞數量減少，稀疏分布，間質纖維組織沉積不明顯。(6)、低劑量組腺體排列尚整齊，腺上皮無明顯增生，未形成較多突向腺腔的乳突，腺腔內可見少量嗜伊紅分泌物。間質擴寬和水腫較模型組有所減輕，間質炎細胞數量減少，可見少量間質纖維組織沉積。結論模型組腺體排布較疏松，紊亂，間質明顯水腫擴寬，可見多數炎細胞浸潤，出現成纖維細胞增生和纖維組織沉積，有些部位纖維組織沉積明顯增多，表明建立的慢性前列腺炎模型是成功的。銀花泌炎靈片高、中劑量組及陽性藥對照組，前列腺腺體排布趨于正常，前列腺間質擴寬、水腫程度較模型組明顯減輕，間質浸潤的炎細胞明顯減少，間質纖維組織沉積明顯減輕，其中高劑量的改善作用最明顯。2銀花泌炎靈片對大鼠非細菌性前列腺炎的影響取大鼠60只，體重300—350g，后隨機分為6組，1—3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，劑量分別為10.8g、5.4g、2.7g生藥/kg，4組為陽性藥前列通片組，劑量為2.75g/kg，5組為模型對照組，6組為正常對照組，14組均灌胃(ig)給藥，模型對照組及正常對照組按給藥高劑量給予同體積蒸餾水。每天1次，連續(xù)10天，于末次給藥后lh按戴氏法稍加改良，每鼠以腹腔注射3M水合氯醛10ml/kg麻醉，無菌條件下剖開腹腔，于每鼠前列腺內注入滅菌1.5%角叉菜膠0.05ml，(正常對照組注射無菌生理鹽水)，縫合，24h斷頭處死大鼠，(其間再行給藥一次)，取前列腺稱重，后取半個前列腺于lml生理鹽水中，充分混勻，用毛細管吸取前列腺混懸液，滴入血細胞計數池內，移入顯微鏡下，用低倍鏡計數，按白細胞方法鏡下記錄白細胞數和卵磷質小體數；同時將前列腺液接種于普通血瓊脂平板上，37°C培養(yǎng)24h。檢查有無菌落生長。剩余前列腺用福爾馬林固定，取大鼠前列腺做病理組織學檢査。結果見表3、表4。表3對大白鼠非細菌性前列腺炎模型前列腺液檢驗指標的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表3結果表明，銀花泌炎靈片10.8g生藥/kg、5.4g生藥/kg劑量組對大鼠角叉菜膠性前列腺炎模型具有明顯的抑制白細胞增生及提高卵磷質小體密度作用，與模型對照組比較分別PO.Ol、P<0.05。同時前列腺液培養(yǎng)均未見菌落生長。組織病理學觀察結果表明，正常對照組前列腺腺腔規(guī)整，腺體間緊密排布，間質狹窄，無明顯炎細胞浸潤。模型對照組前列腺體排列疏松，紊亂，間質明顯擴寬、水腫，可見多數淋巴細胞浸潤和成纖維細胞增生。纖維組織沉積較正常對照組多。有些部位可見前列腺被膜下炎細胞浸潤明顯(前列腺炎模型成功)。銀花泌炎靈片10.8g生藥/kg劑量組腺體排布趨于正常對照組程度，腺上皮增生不明顯。間質寬度較模型組明顯縮窄，水腫輕微，浸潤的炎細胞稀疏。大部分被膜未見明顯炎細胞浸潤。銀花泌炎靈片5.4g生藥/kg劑量組腺體排布較疏松，間質擴寬程度明顯減輕，間質浸潤的炎細胞數量減少，水腫減輕，前列腺被膜下可見少數炎細胞浸潤。陽性藥前列通片組腺體形態(tài)與銀花泌炎靈片5.4g生藥/kg劑量組相近，間質擴寬程度較模型對照組減輕，間質浸潤的炎細胞數量較少。綜上所述，銀花泌炎靈片對大鼠前列腺炎有明顯減輕作用，尤其以高劑量作用顯著。表4銀花泌炎靈片對大鼠非細菌性前列腺炎模型的影響半定量分級組另lj劑量動物數(只)o級1級2級3級(g生藥/kg)銀花泌炎靈片10.81073005.41064002.7102800前列通片2.75106400模型對照100145正常對照1010000注分級標準(半定量分級標準見表2分級標準)由表4結果表明，銀花泌炎靈片高、中劑量組均有減輕前列腺組織病變的作用，其中給藥高劑量組作用最為明顯。3、銀花泌炎靈片對大腸桿菌所致大鼠細菌性前列腺炎的影響取大鼠60只，體重280—340g，后隨機分為六組，按戴氏法以0.1ml大腸肝菌(1.4X107/ml)致炎(方法同2)，致炎前5天開始按表4所示組別與劑量分組給藥(ig),模型組及正常對照組按給藥高劑量給予同體積蒸餾水。每天1次，致炎后繼續(xù)給藥3天，于末次給藥后lh，斷頭處死大鼠，分別在無菌條件下取前列腺50mg，于lml生理鹽水中，充分混勻，鏡下記錄白細胞數和卵磷質小體數；同時將前列腺液接種于普通血瓊脂平板上，37°C培養(yǎng)48h。記錄菌落數，同時各組取前列腺用福爾馬林固定做病理組織學檢査。表5銀花泌炎靈片對大腸桿菌致大鼠細菌性前列腺炎模型前列腺液檢驗指標的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>給藥組與模型對照組比較*P<0.05**P<0.01正常對照組與模型對照組比較**P<0.01***P<0.001由表5結果表明，銀花泌炎靈片10.8g生藥/kg、5.4g生藥/kg劑量組對大腸桿菌致大鼠細菌性前列腺炎模型具有明顯的減少白細胞數量及提高卵磷質小體密度作用，同時還可降低前列腺炎大鼠前列腺中的細菌數，與模型對照組比較均有統(tǒng)計學意義，P<0.01、P<0.05。4、對小白鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響選取健康小白鼠50只,體重為18-22g，雌雄各半，隨機分為5組，每組動物IO只。第l、2、3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，劑量分別15.0g、7.5g、3.75g生藥/kg，第4組為陽性藥阿司匹林，劑量為0.3g/kg，第5組為對照組，動物連續(xù)灌胃給藥5天，于末次給藥lh后尾靜脈注射0.5。/。伊文思藍溶液0.01mL/g,立即腹腔注射0.6。/。醋酸生理鹽水0.2ml/只,20min后脫頸椎處死小白鼠，輕擦腹部lmin，剖開腹腔用適量生理鹽水反復沖洗,收集洗出液，濾紙濾過,并用生理鹽水調整容積至6mL,用離心機(3000rPm)離心15min，取上清于752型分光光度計中(波長590nm)測定OD值,比較各組的差異,并直接計算抑制率。結果見表6。表6銀花泌炎靈片對小白鼠腹腔毛細血管通透性的影響(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>與對照組比較*P<0.05**P<0.01表6結果顯示，銀花泌炎靈片高、中劑量對醋酸致小白鼠腹腔毛細血管通透性增高具有明顯抑制作用(與對照組比較，PO.05)，但其作用不如陽性藥物(PO.01)5、對大白鼠胸腔白細胞游走的影響''取大白鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，每組動物10只，1—3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，劑量分別為10.8g、5.4g、2.7g/kg，4組為陽性藥阿司匹林組，劑量為0.2g/kg，5組為對照組，實驗時14組按劑量灌胃(ig)給藥，每天1次，連續(xù)5天，對照組按給藥高劑量組給予同體積蒸餾水。于末次給藥lh后，將大白鼠用乙醚淺麻醉，仰位固定于手術臺上。在大鼠右側胸腔注入0.5M角叉菜膠0.5ml，5小時后斷頭處死大鼠，在橫隔周邊部打開胸腔，用注射器吸出胸腔液，記錄滲出量和白細胞數，結果見表7。表7銀花泌炎靈片對大白鼠胸腔白細胞游走的影響(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>與對照組比較*P<0.05**P<0.01由表7可知，銀花泌炎靈片高、中劑量均大白鼠胸腔白細胞游走具有一定的抑制作用，但其作用弱于陽性對照藥阿斯匹林。6、對大白鼠角叉菜膠性足腫脹的影響取大白鼠50只，雄性，隨機分為五組，每組動物10只，1—3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，劑量分別為10.8g、5.4g、2.7g/kg，4組為陽性藥阿司匹林組，劑量為0.2g/kg，5組為對照組，實驗時l"4組按劑量灌胃(ig)給藥，每天1次，連續(xù)7天，對照組按給藥高劑量組給予同體積蒸餾水。用自制窄帶尺測量大白鼠左后足踝關節(jié)周長。于末次給藥30min后，分別在大白鼠右后足皮下注射"/。角叉菜膠混懸液0.1ml/只。每小時測右后足踝關節(jié)周長1次，共6h。以每鼠左后足自身為對照，以左右后足踝關節(jié)周長之差為炎癥腫脹度(mm)，結果見表8表8銀花泌炎靈片對大白鼠角叉菜膠性足腫脹的影響(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>由表8結果表明，銀花泌炎靈片10.8g/kg組對l~5h大白鼠角叉菜膠性足腫脹具有明顯的抑制作用；銀花泌炎靈片10.8g生藥/kg組和5.4g生藥/kg組12h有抑制作用，但其作用不如陽性藥阿司匹林，說明本品具有一定的抗炎作用。7、對小白鼠扭體反應發(fā)生率的影響取小白鼠50只，雌雄各半，按表9所示劑量隨機分成五組，每組動物IO只，動物ig給藥，每天l次，連續(xù)5天(陽性藥物當日給藥)，對照組給同體積蒸餾水，于末次給藥后lh,每鼠由腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g(體重)，5min后開始觀察并記錄lOmin內小白鼠扭體反應次數，結果見表9。計算公式對照組扭體次均數一給藥組扭體次均數抑制率=-xioo%對照組扭體次均數表9銀花泌炎靈片對小白鼠扭體反應的影響(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>與對照組比較***P〈0.001由表9結果表明，銀花泌炎靈片高、中、低三個劑量均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，抑制率分別為47.21%、42.49%、51.07%。但作用不如陽性藥阿司匹林組。8、對大白鼠的利尿作用取大白鼠50只，隨機分為5組，第l、2、3組為銀花泌炎靈片高、中、低劑量組，第4組為陽性藥呋塞米片組，第5組為對照組。各給藥組按劑量灌胃給藥，連續(xù)5天，對照組給同體積蒸餾水，于末次給藥后0.5小時，各鼠按2.5ml/100g的生理鹽水腹腔注射，并輕壓下腹部使膀胱排空(試驗前一天禁食不僅水18hr)，立即將大白鼠放入代謝籠內，一個籠放動物l只，60分鐘后收集各組動物的尿量共3次，每次60分鐘。將各組大白鼠相應時間內的尿量的均值進行組間比較，作統(tǒng)計學處理，結果見表IO。表10銀花泌炎靈片對大白鼠尿量的影響(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>與對照組比較*P<0.05***P<0.001由上表結果表明銀花泌炎靈片高劑量組對小白鼠的利尿作用顯著(*P<0.05)，但作用不如陽性藥組(***P<0.005)，中劑量組和低劑量組作用效果不明顯。9、銀花泌炎靈片對大鼠棉球肉芽組織增生的影響取大鼠50只，每鼠以腹腔注射3%水合氯醛10ml/kg麻醉麻醉，在無菌條件下，將大鼠左右蹊部用碘酒消毒，75%酒精脫碘后，各切開l-1.5cm長小口，用眼科鑷將20mg(滅菌)棉球埋入皮下，隨即縫合皮膚，動物穩(wěn)定一天，隨機分成5，每組10只，按表ll所示劑量，動物均ig給藥，每天1次，連續(xù)7天，對照組給同體積蒸餾水。于第7天將大鼠處死，打開原切口，取出棉球，剔除脂肪組織，放烘箱7(TC烘干，稱重。結果見表11。計算公式肉芽腫重量=(兩個肉芽腫重量/2)—20mg對照組肉芽腫重均數一給藥組肉芽腫重均數抑制率=-xl00%對照組肉芽腫重均數表11銀花泌炎靈片對大鼠棉球肉芽組織增生的影響組別劑量動物數(只，帛球肉芽腫重抑制率(g生藥/kg)(mg)(%)銀花泌10.81080.7±17.68**29.46炎靈片5.41087.1±18.80*23.862.710101.2±35.6611.54阿斯匹林0.2g/kg1074.1±8.76***35.23對照10114.4±29.87與對照組比較*P<0.05林P〈0.01林舉P〈0.001由表11可知，銀花泌炎靈片10.8g生藥/kg、5.4g生藥/kg兩種劑量對棉球肉芽組織增生具有明顯的抑制作用，其中10.8g生藥/kg組經統(tǒng)計學處理P〈0.01，但作用不如陽性對照藥阿斯匹林。10、銀花泌炎靈片對金黃色葡萄球菌體內感染小白鼠的保護作用將金黃色葡萄球菌凍干品，復蘇后接種于液體培養(yǎng)基中，于培養(yǎng)箱中37"C進行培養(yǎng)18小時，取出后用生理鹽水以IO倍順序稀釋，同時加入5%濃度胃粘膜素(以強化毒力)制成不同梯度的菌懸液。經預試驗，本試驗條件下腹腔注射金黃色葡萄球菌最小致死量(MLD)為10"。正式試驗，取小鼠75只，雌雄各半，體重18-20g，隨機分為5組，每組15只，第l、2、3組為銀花泌炎靈片組，劑量分別為31.2g、15.6g、7.8g生藥/kg(分別相當于小鼠等效劑量的8倍、4倍、2倍)，第4組為陽性藥阿莫西林膠囊組，劑量為0.52g/kg(相當于2倍等效劑量)，第5組為正常對照組給蒸餾水10ml/kg，每日ig給藥2次，上、下午各一次，連續(xù)給藥5天，于第5天給藥后腹腔注射10"金黃色葡萄球菌懸液，每只0.5ml，并繼續(xù)給藥，觀察24h死亡動物數，計算死亡率并進行x2統(tǒng)計學處理，結果見表12。表12銀花泌炎靈片對金黃色葡萄球菌體內感染小鼠保護作用<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表12結果表明，銀花泌炎靈片31.2g生藥/kg劑量組對金黃色葡萄球菌致小鼠體內感染有明顯的保護作用與對照組比較P<0.05，其它兩個劑量也有不同程度的抑制趨勢，但統(tǒng)計學處理無明顯性差異。說明本品具有明顯的體內抑菌作用。11、銀花泌炎靈片對大腸桿菌體內感染小白鼠的保護作用將大腸桿菌凍干品，復蘇后接種于液體培養(yǎng)基中，于培養(yǎng)箱中37C進行培養(yǎng)18小時，取出后用生理鹽水以IO倍順序稀釋，同時加入5%濃度胃粘膜素(以強化毒力)制成不同梯度的菌懸液。經預試驗，本試驗條件下腹腔注射金黃色葡萄球菌最小致死量(MLD)為菌原液。正式試驗，取小鼠75只，雌雄各半，體重18-20g，隨機分為5組，每組15只，第1、2、3組為銀花泌炎靈片組，劑量分別為31.2g、15.6g、7.8g生藥/kg(分別相當于小鼠等效劑量的8倍、4倍、2倍)，第4組為陽性藥阿莫西林膠囊組，劑量為0.52g/kg(相當于2倍等效劑量)，第5組為正常對照組給蒸餾水10ml/kg，每日ig給藥2次，上、下午各一次，連續(xù)給藥5天，于第5天給藥后腹腔注射IO"金黃色葡萄球菌懸液，每只0.5ml，并繼續(xù)給藥，觀察24h死亡動物數，計算死亡率并進行x2統(tǒng)計學處理，結果見表13。表13銀花泌炎靈片對大腸桿菌體內感染小鼠保護作用組別劑量動物數死亡數存活率P值(g生藥/kg)(只)(只)(%)銀花泌31.215473.3<0.05炎靈片15.615753.3>0.057.8151136.7>0.05阿莫西林0.5215473.3<0.01對照蒸餾水15146.7表13結果表明，銀花泌炎靈片31.2g生藥/kg劑量組對金黃色葡萄球菌致小鼠體內感染有明顯的保護作用與對照組比較P<0.01，其它兩個劑量也有不同程度的抑制趨勢，但統(tǒng)計學處理無明顯性差異。說明本品具有明顯的體內抑菌作用。12、銀花泌炎靈片體外抑菌試驗和殺菌試驗l.最低抑菌濃度(MIC)測定將銀花泌炎靈片藥粉用LB液體培養(yǎng)基分別配制成300、250、200、150、100、80、60、40、20、10mg.mr1。實驗設21組，l-10組分別加入上述300mg.ml"-10mg.ml"10個濃度的藥液,每組3只平行對照管；11-20組為只加上述相同濃度銀花秘炎靈片藥液不加菌液組，做為觀察藥物是否污染的藥物對照組，每組3只平行對照管；21組為不加銀花泌炎靈片藥液只加細菌的對照組，同時設3只平行對照管。將接種細菌稀釋適宜倍數后涂平板，37'C孵箱內培養(yǎng)過夜，菌落計數并拍照。將各組試驗管置37"C恒溫振蕩培養(yǎng)箱內培養(yǎng)1618小時后，將觀察未見細菌生長(與藥液對照組比較)的最低藥物濃度以上各藥物組分別將管內液體稀釋適宜倍數涂平板，37"C孵箱內培養(yǎng)過夜。菌落計數并拍照。抑菌率達到99.99%的最低藥物濃度即為最低抑菌濃度(MIC)。測定結果表14和表15。2.最低殺菌濃度(MBC)測定將銀花泌炎靈片藥粉用LB液體培養(yǎng)基分別配制成300、250、200、150、100、80、60、40、20、10mg.mr1。實驗設21組，1-10組分別加入上述300mg.ml丄10mg.mr110個濃度的藥液，每組3只平行對照管；11-20組為只加上述相同濃度銀花秘炎靈片藥液不加菌液組，做為觀察藥物是否污染的藥物對照組，每組3只平行對照管；21組為不加銀花泌炎靈片藥液只加細菌的對照組，同時設3只平行對照管。經接種菌液后，置37'C恒溫振蕩培養(yǎng)箱內培養(yǎng)1618小時。觀察藥物最低抑菌濃度(MIC)以上的各試驗管培養(yǎng)物，分別吸取0.1ml，移至普通平板瓊脂培養(yǎng)基上，用玻璃棒涂勻菌液，置37"C培養(yǎng)過夜，平板培養(yǎng)基中，計數少于5個菌落者作為該藥物的最低殺菌濃度(MBC)。測定結果見表15。3.結果與分析銀化泌炎靈片對大腸埃希氏菌株ATCC44102、金黃色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志賀氏菌株ATCC51571;臨床分離金黃色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、變形桿菌株CIBS1072、克雷伯桿菌株CIBS861、糞腸球菌株CIBS859、綠膿桿菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大腸桿菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853體外抑菌實驗均有較好的抑菌及殺菌效果。銀化泌炎靈片對大腸桿菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853、表皮葡萄球菌株CIBS2972、變形桿菌株CIBS1072、糞腸球菌株CIBS859、大腸埃希氏菌株ATCC44102、金黃色葡萄球菌株ATCC26003的MIC均為80mg.ml";金黃色葡萄球菌株CIBS831的MIC為100mg.ml";克雷伯桿菌株CIBS861的MIC為150mg.ml";腐生葡萄球菌株CIBS3586和綠膿桿菌株CIBS868的MIC均為60mg.ml";真菌白色念珠球菌株CIBS861和福氏志賀氏菌ATCC51571的MIC均為40mg-ml"。金黃色葡萄球菌株CIBS831和大腸埃希氏菌株ATCC44102的MBC均為300mg.ml";大腸桿菌菌株CIBS872、變形桿菌株CIBS1072和金黃色葡萄球菌ATCC26003的MBC均為250rng-rnr1;大腸桿菌菌株CIBS614、CIBS853、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、克雷伯桿菌株CIBS861、糞腸球菌株CIBS859、真菌白色念珠球菌株CIBS861的MBC均為200mg.ml";福氏志賀氏菌ATCC51571的MBC為150mg.mr1，綠膿桿菌株CIBS868的MBC為80mg.mr1。從上面的結果可以看出，銀花泌炎靈片對大腸桿菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853，表皮葡萄球菌株CIBS2972、變形桿菌株CIBS1072、糞腸球菌株CIBS859、綠膿桿菌株CIBS868、真菌白色念珠球菌株CIBS850和大腸埃希氏菌株ATCC44102、金黃色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志賀氏菌株ATCC51571均有一定的抑菌作用；銀花泌炎靈片對大腸桿菌株CIBS614、CIBS853,表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、克雷伯桿菌株CIBS861、糞腸球菌株CIBS859、綠膿桿菌株CIBS868、福氏志賀氏菌株ATCC51571和真菌白色念珠球菌株CIBS861均有一定的殺菌作用。上述試驗結果表明，銀花泌炎靈片對標準菌株細菌大腸埃希氏菌株ATCC44102、金黃色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志賀氏菌株ATCC51571;臨床分離金黃色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、變形桿菌株CIBS1072、克雷伯桿菌株CIBS861、糞腸球菌株CIBS859、綠膿桿菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大腸桿菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853具有一定的抑制作用。表14銀花泌炎靈片對不同培養(yǎng)菌株的抑菌率(％)(單位-mg.mr1扭Sn=3)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>表15銀花泌炎靈片對體外培養(yǎng)不同菌株抑菌實驗MIC及MBC計算結果(單{立mg'mr1)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>結論通過動物試驗研究結果表明，銀花泌炎靈片不同劑量均對慢性前列腺炎動物模型具有明顯的治療作用。同時對細菌性、非細菌性兩種急性前列腺炎模型亦有明顯的抑制作用，證明本品對前列腺炎有明顯治療作用。試驗還證實了該藥的抗炎效果，實驗者認為其抗炎活性可能是本品的藥理基礎。本品對小白鼠腹腔毛細血管通透性、大白鼠角叉菜膠性足腫脹及大白鼠棉球肉芽組織增生有明顯的抑制作用。對小白鼠體內感染金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有明顯的保護作用，體外抑菌、殺菌試驗結果表明對標準菌株細菌大腸埃希氏菌株、金黃色葡萄球菌株、福氏志賀氏菌株；臨床分離的金黃色葡萄球菌株、表皮葡萄球菌株、腐生葡萄球菌株等菌株均有一定的抑菌及殺菌作用。表明本品具有抗炎、抑菌、殺菌作用；另外，本品還具有明顯的利尿及減少小白鼠扭體反應發(fā)生率等作用。綜上所述，銀花泌炎靈片具有較好的治療急、慢性前列腺炎(新的適應癥)作用，同時該藥還有抗炎、止痛、改善微循環(huán)及利尿等多方面藥理作用。具體實施例方式實施例1:片劑處方金銀花270g,半枝蓮136,瞿麥85g扁蓄85g,石韋85g,木通85g,車前子85g，淡竹葉85g,燈心草28g,桑寄生136g,制成1000片。制法金銀花的80%，用70%乙醇回流提取2次，每次3小時，加乙醇量依次為生藥量的8倍、6倍，合并提取液，濾過，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.21.5(6(TC)時備用，另取半枝蓮、瞿麥等9味加水煎煮提取3次，煎煮時間依次為1,5小時、1.5小時、1小時，加水量依次為生藥量的10倍、8倍、6倍合并提取液，濾過，濃縮至相對密度為1.101.35(6(TC)時備用。再取金銀花的半量、去雜質、粗粉碎，同以上二個備用的稠膏合并，干燥，粉碎成細粉，過篩，制成顆粒，干燥，壓制成1000片，包糖衣，即得。實施例2:膠囊劑處方金銀花270g，半枝蓮136g,瞿麥85g，扁蓄85g，石韋85g,木通85g，車前子85g,淡竹葉85g，燈心草28g,桑寄生136g，制成1000粒膠囊。制法金銀花的80%，用70%乙醇回流提取2次，每次3小時，加乙醇量依次為生藥量的8倍、6倍，合并提取液，濾過，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.21.5(6(TC)時備用，另取半枝蓮、瞿麥等9味加水煎煮提取3次，煎煮時間依次為1.5小時、1.5小時、1小時，加水量依次為生藥量的10倍、8倍、6倍合并提取液，濾過，濃縮至相對密度為1.101.35(6(TC)時備用。再取金銀花的半量、去雜質、粗粉碎，同以上二個備用的稠膏合并，干燥，粉碎成細粉，過篩，制成顆粒，干燥，裝入1000粒膠囊即得。權利要求1、一種藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成，金銀花125～375份，半枝蓮62～187份，瞿麥37～112份，扁蓄37～112份，石韋37～112份，木通19～56份，車前子37～112份，淡竹葉37～112份，燈心草12～37份，桑寄生62～187份。2、如權利要求1所述的藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成金銀花187-312份，半枝蓮93156份，翟麥5693份，扁蓄5693份，石韋5693份，木通2847份，車前子56~93份，淡竹葉5693份，燈心草19~31份，桑寄生93156份。3、如權利要求2所述的藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成金銀花190-270份，半枝蓮110-136份，瞿麥6585份，扁蓄6585份，石韋6585份，木通6585份，車前子6585份，淡竹葉6585份，燈心草12-28份，桑寄生110136份。全文摘要本發(fā)明涉及一種藥物組合物在制備抗前列腺炎的藥物中的應用，屬于中藥領域。是《治療熱淋的中藥制劑》，專利號為02146487.1的藥物組合物的新的藥物用途，該藥物組合物由以下重量配比的中藥原料制成，金銀花125～375份，半枝蓮62～187份，瞿麥37～112份，扁蓄37～112份，石韋37～112份，木通19～56份，車前子37～112份，淡竹葉37～112份，燈心草12～37份，桑寄生62～187份。本發(fā)明具有抗前列腺炎的作用，藥物配方中的中藥，其藥源豐富，價格低廉，攜帶方便，易為患者所接受。適用于廣大患者使用，故有相當可觀的社會效益及經濟效益。文檔編號A61K36/899GK101181540SQ20071005635公開日2008年5月21日申請日期2007年11月27日優(yōu)先權日2007年11月27日發(fā)明者劉傳貴,張廣民,朱繼忠,李春燕,王福文,董長萍,賈學忠,波路,閆智力申請人:吉林華康藥業(yè)股份有限公司