一種用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法

專利名稱：：一種用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法
技術領域：
：本發明屬于食品加工技術或制藥
技術領域：
，具體涉及功能性食品加工技術，特別是用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法。
背景技術：
：ACE抑制劑是降血壓藥物中發展最快的一種，但是合成的血管緊張素轉化酶具有不良反應，如引發蛋白尿和白細胞減少等，另外，在停藥后易引起"停藥綜合癥"，嚴重威脅患者的生命安全。來源于食物蛋白質的降血壓肽完全可以克服藥物治療中出現的種種副作用，它只對高血壓患者起到降壓作用，對血壓正常者卻無降壓作用；這些肽是經酶在溫和條件下水解獲得，安全性高，同時它還有免疫調節等其他作用。因此，開發天然降血壓肽產品將成為非藥物治療中的重要組成部分。目前已有研究發現大豆蛋白、膠原蛋白和酪蛋白等蛋白質經堿性蛋白酶水解后的產物具有ACE抑制活性，并通過離子交換色譜、高效液相色譜等分析了部分有抑制活性的組分。這些研究選擇的原料多為動物蛋白質，且分離方法或者成本太高，或者肽中灰分含量較高而影響其活性等，不適合大規模生產。利用堿性蛋白酶水解大米分離蛋白生產降血壓肽國內外目前還未見報道。為了克服上述方法的不足，本發明利用來源廣泛的碎米或米渣為原料，分離提取碎米或米渣中的蛋白質，利用堿性蛋白酶水解大米分離蛋白，水解產物經大孔吸附樹脂脫鹽后，獲得具有ACE抑制活性的小分子肽。
發明內容本發明的目前可通過以下技術方案來實現。將重量百分比濃度為5-15%(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應溫度40-50°C、加酶量O.5-2%、反應時間120-180min,攪拌酶解。然后經大孔吸附樹脂脫鹽，經脫鹽后的小分子肽再經濃縮或干燥，進一步制成液態或固態制劑。具體地來說，本發明工藝包括3個主要步驟，即大米分離蛋白的制備—酶解大米分離蛋白—脫鹽精制，其中脫鹽精制選擇大孔吸附樹脂。具體的制備方法將分離得到的大米分離蛋白配制成濃度為5-15%的溶液，調節pH值為8-10,石咸性蛋白酶的添加量為0.5-2%。40-50。C水解120-1801^11后，離心分離。上清液經濃縮后經大孔吸附樹脂脫鹽精制，樹脂為NKA,用40-80%的酒精洗脫。洗脫液經濃縮回收酒精后，進行噴霧或冷凍干燥，即可獲得具有ACE抑制活性的大米降血壓肽制口P。本發明具有的優點1.提供了一種制備降血壓肽的新方法本發明制品具有生理功能，對ACE具有極強的抑制活性。同其他生物活性肽一樣，具有直接、快速、主動、完整吸收的特點，特別是對高血壓等心血管疾病有療效。本發明的制成品可作為功能食品、食品、食品添加劑、藥物增效劑等。2.工藝科學合理、簡單易行3.原料來源廣泛本發明所選擇的原料來源廣泛，資源豐富，使本發明具有較強的適用性。具體實施方式實施例1采用廣西南寧龐博生物工程有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為150萬U/g)，工藝條件為大米分離蛋白濃度15%，pH值為8，反應溫度5(TC，加酶量1%,反應時間12Omin。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算ICw,以及灰分等其他指標見表l。表l大米降血壓肽制品主要理化指標<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例2采用無錫杰能科生物工程有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為60萬U/g)，工藝條件為大米分離蛋白濃度10%，pH值為9.5,反應溫度40°C,加酶量2%,反應時間18Omin。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算IC5。，以及灰分等其他指標見表2。表2大米降血壓肽制品主要理化指標項目指標IC5。/(mg/mL)1.35灰分(以干基計)/%6.5可溶性氮(以干基計)/%88.2肽(以干基計)/%77.6pH(10%水溶液)6.9實施例3采用諾維信(中國)生物技術有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為2.4AU/g),工藝條件為大米分離蛋白濃度10%，pH值為8.5,反應溫度45。C，加酶量1°/。，反應時間150min。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算IC5。，以及灰分等其他指標見表3。表3大米P爭血壓肽制品主要理化指標項目指才示IC5。/(mg/mL)0.5灰分(以干基計)/%3.0可溶性氮(以干基計)/%92,4肽(以干基計)/%81.2pH(10%水溶液)7.0權利要求1.一種用大米蛋白制備降血壓肽的方法，其特征在于將重量百分比濃度為5-15％(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應溫度40-50℃、加酶量0.5-2％、反應時間120-180min，攪拌酶解。然后經大孔吸附樹脂脫鹽，制得具有ACE抑制活性的小分子肽。2.根據權利要求1所述的大米分離蛋白制備P爭血壓肽的方法，其特征在于經脫鹽后的小分子肽再經濃縮或干燥，進一步制成液態或固態制劑。全文摘要本發明公開了一種用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法，其技術要點是將重量百分比濃度為5-15％(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應溫度40-50℃、加酶量1-2％、反應時間120-180min，攪拌酶解。然后經大孔吸附樹脂脫鹽，樹脂為NKA，用40-80％的酒精洗脫。經脫鹽后的小分子肽再經濃縮或干燥，制得具有血管緊張素轉化酶(ACE)抑制活性的小分子肽。本發明所具有的特點提供了一種制備降壓肽的新方法；工藝科學合理、簡單易行；原料來源廣泛。文檔編號A61P9/00GK101126105SQ20071005257公開日2008年2月20日申請日期2007年6月28日優先權日2007年6月28日發明者英劉,楊國燕,陳季旺申請人:武漢工業學院