非環核苷膦酸酯類化合物及其組合物、制備方法和用途的制作方法

專利名稱：非環核苷膦酸酯類化合物及其組合物、制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物學領域，涉及藥物合成和藥理學領域，更具體而言，涉及含有氨基酸基團的非環核苷膦酸酯類化合物及其組合物、制備方法和在制備抗病毒藥物中的用途。
背景技術：
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是一個全球性的健康問題。據世界衛生組織估計，目前全世界大約有3.5億HBV攜帶者，僅中國就有1.2億HBV攜帶者。HBV慢性感染可引起慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)、肝硬化(liver cirrhosis)和原發性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)等相關疾病。目前治療乙型肝炎的主要藥物為干擾素和核苷類化合物。α-干擾素聯合利巴韋林不僅療效有限而且不良反應較多，因此核苷類化合物是近年來乙肝抗病毒藥物研究的主要領域[Current Medicinal Chemistry，2003，10，1825；Expert Opinion on Investigatinal Drugs 2003，12，1269；Current DrugTargets-Infections Disorders 2005，5，307]。
核苷類抗病毒藥物分為核苷類似物和非環核苷膦酸酯。非環核苷膦酸酯類似物具有廣譜的抗DNA病毒活性，該類化合物的特點是結構中具有穩定的膦酰基甲基醚結構，其O-C-P鍵連接使非環核苷膦酸酯具有很高的酶學及化學穩定性。和核苷類似物相比，由于非環核苷膦酸酯結構中具有膦酸酯部分，能有效地繞開病毒編碼激酶催化的初次磷酸化過程，因而對于不能編碼胸腺嘧啶激酶或胸腺嘧啶激酶水平較低的病毒能產生較好的抑制效果。目前上市的非環核苷膦酸酯類抗病毒藥物有西多福韋、阿德福韋酯以及替諾福韋酯三種藥物，其中阿德福韋酯是繼拉米夫定后上市的第二個小分子抗HBV藥物，而且對拉米夫定耐受的變異乙肝病毒(YMDD)有很強的活性(Expert Opinionon Pharmacotherapy 2004，5(11)2361-7.)。但非環核苷膦酸酯類藥物普遍存在化學性質不穩定，毒性比較大，口服生物利用度低等缺點。
為了增加該類藥物的代謝穩定性，延長作用時間，增加藥物生物利用度，降低藥物毒性，本發明提供一類新型非環核苷膦酸酯類化合物及其合成方法和用途。

發明內容
本發明的一個目的是提供下面通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物。
本發明的另一個目的是提供含有通式(I)所示化合物中的一種或多種為主要活性成分的藥物組合物。
本發明的又一個目的是提供通式(I)所示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物的制備方法。
本發明的還一目的是提供含有通式(I)所示化合物為主要活性成分的藥物組合物的制備方法。
本發明的再一個目的是提供通式(I)所示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物，以及含有式(I)所示化合物為主要活性成分的藥物組合物在制備治療病毒感染性疾病特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的藥物中的應用。
下面對本發明進行具體的說明。
本發明提供如下通式(I)所示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物
通式(I)中R1代表氫、氯、氟、氨基、羥基、直鏈或支鏈或環狀C1-C6的烷基氨基(例如，環丙基氨基)、直鏈或支鏈C1-C6的烷氧基(例如，甲氧基、乙氧基等)、取代芳香基氧基或者取代芳香基硫基(例如，對甲氧苯硫基等)；R2代表氫、氨基或者直鏈或支鏈C1-C6的烷基氨基；R5代表氫、環丙基或者直鏈或支鏈C1-C6的烷基(例如，甲基等)；R3和R4可以相同或不同，分別獨立為苯基、(IIa)或者(IIb)， 式中，R6和R8彼此獨立地代表氫、直鏈或支鏈C1-C6烷基、三氟乙基或者芐基；R7代表氫、芐基、直鏈或支鏈C1-C6烷基(例如，甲基、異丙基、3-甲基丙基等)或者天然氨基酸的側鏈；n為1或2；或者，當R3代表苯基，R4代表下式(IIc) 式中，R7、n定義如上。
本發明化合物存在一個或多個不對稱碳原子或磷原子，因此通式(I)包括單一旋光體，單一對映體，單一非對映體和非對映體混合物和外消旋體混合物。
R7可以是各種天然氨基酸或非天然氨基酸的側鏈，上述氨基酸的構型可以是L-型或D-型。
“藥學上可接受的無機或有機鹽”具體地可列舉本發明化合物與酸形成的鹽，適合成鹽的酸為鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸、或磷酸等無機酸；本發明化合物可與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、或苯磺酸等有機酸或者天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸成鹽；或與堿形成的鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、或鋁鹽等無機堿的鹽，銨鹽、甲胺鹽、乙胺鹽、乙醇胺鹽等，或與賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸等堿性氨基酸形成的鹽。
對于上述定義的C1-C6的烷基、C1-C6的烷氧基，其中的烷基可以是C1-C6的直鏈、支鏈或環烷基，具體為甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、環丁基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、1-甲基丁基、2-甲基丙基、己基、異己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基丁基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1，1，2-三甲基丙基、1，2，2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基或1-乙基-2-甲基丙基。這些基團中，優選為甲基、乙基、丙基、環丙基、異丙基、丁基等碳原子數為1-4個的烷基。
本發明的通式(I)所示的化合物中具有代表性的化合物結構式如下






/表示游離堿。


下面具體地描述本發明通式(I)結構化合物的制備方法，但這些具體方法不對本發明構成任何限制。
本發明通式(I)結構化合物可通過如下的方法制得，因此，本發明的另一目的是提供具有上述通式(I)結構化合物及其鹽的制備方法，然而該方法的條件，例如反應物、溶劑、堿、所用化合物的量、反應溫度、反應所需時間等不限于下面的解釋。本發明化合物還可以任選將在本說明書中描述的或本領域已知的各種合成方法組合起來而方便的制得，這樣的組合可由本發明所屬領域的技術人員容易的進行。
本發明通式(I)化合物的制備方法包括方法一(1)N-叔丁氧羰基-L-氨基酸與2-溴乙醇或氯甲基氯磺酸酯反應生成(IIIa)化合物； 其中R7和n定義如前，X為溴或氯，R9為叔丁氧羰基；(2)(IIIa)化合物與9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤(PMEA)單苯基酯反應生成膦酸酯；上述膦酸酯化合物在氯化氫飽和的1，4-二氧六環或乙酰氯/甲醇存在下脫去保護基生成(Ia)化合物；
或者，方法二(1)L-氨基酸酯與氯甲酸氯甲酯反應生成(IIIb)化合物，或者L-氨基酸酯與2-溴乙基氯甲酸酯反應生成(IIIc)化合物； 其中R6、R7、R8和n定義如前，X為溴或氯；(2)在堿存在下，化合物(IV) 與(IIIb)化合物反應生成下式(Ib)化合物，或者化合物(IV)和(IIIc)化合物反應生成(Ic)化合物；
其中R1、R2、R5、R6、R7、R8、n定義如前，適合的堿為三乙胺，N，N′-二環己基-4-嗎啉基-脒(DCMC)，1，8-二氮雜雙環[5，4，0]十一烷-7-烯(DBU)，N，N-二甲氨基吡啶(DMAP)，N，N-二異丙基乙基胺(DIEA)，嗎啉，N-甲基嗎啉，碳酸銫，碳酸鉀，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，氨基鈉等，其中優選的堿為DBU、DIEA、DCMC和三乙胺等有機堿。
而后根據需要，通過與相應的酸或堿反應可以將式(I)化合物制備成相應的藥學上可接受的鹽；按通常方法，式(I)化合物用水或含水溶劑重結晶，可以制備成其水合物、溶劑合物。
下面更詳細地描述本發明化合物的制備方法對于方法一，本發明式(I)化合物可按如下流程I制備流程I
a.DBU或三乙胺，DMF；b.氯化氫飽和的1，4二氧六環或乙酰氯/甲醇。
其中R7和n定義如前，R9為叔丁氧羰基。
(1)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯[J.Med.Chem.1994，37，12]和(IIIa)化合物[Bio.& Med.Chem.Lett.2007，17，465]在極性非質子溶劑中，有機堿作用下，于-10～80℃反應0.5～72小時，生成叔丁氧羰基保護的膦酸酯。最佳反應條件為在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，以三乙胺為堿在50～70℃反應2～16小時。
(2)膦酸酯在極性或非極性溶劑中，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環或乙酰氯/甲醇存在下室溫脫去保護基得到式(Ia)化合物。
(3)根據需要式(I)化合物可制備成相應的藥學上可接受的鹽。
對于方法二，本發明式(I)化合物可按如下流程II制備流程II
a.氯甲酸氯甲酯或2-溴乙基氯甲酸酯，DMAP，DIEAb.DBU或三乙胺，DMF；其中，R1、R2、R5、R6、R7、R8、X和n定義如前。
按照文獻方法[J.Org.Chem.1982，47(10)1962]可以制得原料L-氨基酸酯，按照[J.Med.Chem.2004，47(11)2864；J.Med.Chem.1999，42(12)2064]可以制得式(IV)的化合物。
(1)L-氨基酸酯與氯甲酸氯甲酯或2-溴乙基氯甲酸酯在極性或非極性溶劑中，堿性條件下，-10～100℃反應1～24小時得到鹵素取代的產物(IIIb)或(IIIc)。最佳反應條件為在二氯甲烷中，以DMAP和DIEA為堿在室溫反應2小時。
(2)化合物(IIIb)或(IIIc)與化合物(IV)在極性非質子溶劑中，有機堿作用下，于0～100℃反應0.5～72小時，生成含有氨基酸基團的膦酸雙酯產物(Ib)或(Ic)。最佳反應條件為以DMF或NMP(1-甲基-2-吡咯烷酮)為溶劑，DBU為堿在50～80℃反應2～16小時；或三乙胺為堿50～60℃反應1～3小時；或以DIEA為堿，室溫反應72小時。
(3)根據需要式(I)化合物可制備成相應的藥學上可接受的鹽。
流程III
其中，R1、R2、R5、R6和n定義如前。
化合物(Ib)與富馬酸可以在異丙醇，二氯甲烷，乙腈等溶劑中在0-200℃反應生成化合物(Ib)的富馬酸鹽。最佳反應條件為以乙腈作溶劑加熱回流2小時。
本發明化合物的藥理上可接受的鹽，具體地可列舉與鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸的鹽；與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸等有機酸和天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸成鹽；或與堿形成的鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽等無機堿的鹽，銨鹽，甲胺鹽，乙胺鹽，乙醇胺鹽等，或與賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸等堿性氨基酸形成的鹽。
本發明提供的式(I)所示的非環核苷膦酸酯類化合物及其藥學上可接受的鹽具有抗病毒活性，因此可在制備治療病毒感染性疾病特別是乙型肝炎病毒HBV或HIV病毒引起的感染性疾病的藥物中的應用。
本發明所要求保護的含有氨基酸基團的非環核苷膦酸酯類化合物及其藥學上可接受的鹽具有治療病毒感染性疾病特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的功能。
本發明所要求保護的含有氨基酸基團的非環核苷類化合物及其藥學上可接受的鹽具有與現有技術中核苷類小分子抗HBV藥物阿德福韋相似或更強的治療病毒感染性疾病的活性，所以這些化合物可用于制備新型的治療病毒感染性疾病，特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的藥物。
具體實施例方式
在下述制備例和實施例中更具體地解釋本發明。然而，應當理解，這些制備例和實施例是為了舉例說明本發明，而并不是以任何方式限制本發明的范圍。所有制備例和實施例中，熔點用MEL-TEMP熔點儀測定，溫度計未校正；1H-NMR用Varian Mercury 400核磁共振儀記錄，化學位移以δ(ppm)表示；分離用硅膠未說明均為200-300目。洗脫液的配比均為體積比。
式(IIIb)和(IIIc)化合物的制備制備例1 N-(氯甲氧基羰基)-L-脯氨酸甲基酯的制備 在-5～0℃，N2保護下，將脯氨酸甲酯鹽酸鹽(5.80g，0.035mol)，DIEA(11.3g，0.088mol)，DMAP(0.086g，0.70mmol)與二氯甲烷(20mL)的混合物滴加到氯甲酸氯甲酯(4.70g，0.036mol)與二氯甲烷(50mL)混合液中，滴畢，緩慢升至室溫后繼續反應2小時，加入乙酸乙酯(60mL)稀釋，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(90mL×3)，1當量的鹽酸(90mL×3)，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘留物柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)得到標題產品(6.64g，85.6％)。1H NMR(CDCl3)5.65-5.84(m，2H)，4.43(m，1H)，3.75(s，3H)，3.60(m，2H)，2.24(m，1H)，2.03(m，3H)。
EI-MS(m/z)221(6，M+)，128(20)，162(100)。
下表所列的化合物可以由各種脯氨酸酯或脯氨酸酯的鹽酸鹽為原料按照制備例1相同的步驟制備得到。
制備例2-8

制備例9 2-溴乙基氯甲酸酯的制備

三乙胺(16.2g，0.16mol)與二氯甲烷(70mL)混合后，在0℃下滴加至2-溴乙醇(20.0g，0.160mol)、固體光氣(15.8g，0.053mol)和干燥的二氯甲烷(320mL)混合液中，在0℃反應2小時后再升至室溫反應2小時，過濾，二氯甲烷(150mL)提取，水(80mL×2)洗，飽和氯化鈉液洗后無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮得到標題產物(17.1g，57.1％)。1H NMR(CDCl3)4.60(t，J＝6.31Hz，2H)，3.56(t，J＝6.31Hz，2H)。
制備例10N-(2-溴乙氧羰基)-L-脯氨酸甲基酯的制備 在-5～0℃，N2保護下將脯氨酸甲酯鹽酸鹽(5.00g，0.030mol)，DIEA(9.70g，0.075mol)，DMAP(0.073g，0.60mmol)與二氯甲烷(10mL)混合后滴加入2-溴乙基氯甲酸酯(5.90g，0.032mol)與二氯甲烷(60mL)的混合液中，滴畢，緩慢升至室溫后再反應2小時后加入乙酸乙酯(100mL)稀釋，飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL×3)、1當量鹽酸(100mL×3)、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘留物柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3.5∶1)得到標題產物(6.30g，75.0％)。1H NMR(CDCl3)4.30-4.45(m，3H)，3.74(s，3H)，3.44-3.55(m，4H)，2.18-2.25(m，1H)，1.89-2.00(m，3H)。
制備例11N-(2-溴乙氧羰基)-L-脯氨酸乙基酯的制備 按照制備例10的操作，以脯氨酸乙酯鹽酸鹽(2.73g，0.019mol)和2-溴乙基氯甲酸酯(3.76g，0.020mol)為原料反應得到標題產物(2.51g，44.7％)。1H NMR(CDCl3)4.32-4.41(m，3H)，4.19(q，J＝7.18Hz，2H)，3.61(m，1H)，3.43-3.55(m，3H)，2.23(m，1H)，1.87-2.04(m，3H)，1.26(t，J＝7.18Hz，3H)。EI-MS(m/z)293(3，M+)，107(32)，148(18)，220(100)。
下表所列的化合物可由制備例9所得化合物和各種氨基酸酯或氨基酸酯的鹽酸鹽為原料按照制備例10相同的步驟制備得到。
制備例12-17

式(Ia)化合物的制備制備例18(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基乙基)]酯的制備

9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(1.00g，2.90mmol)，(S)-叔丁基-1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-甲基丁基氨基甲酸酯(1.93g，5.70mmol)，DCMC(0.99g，3.40mmol)與DMF(20mL)混合后，加熱至30℃，體系全溶后加入DBU(2滴)后升溫至80℃反應4小時后加水，乙酸乙酯提取，有機層用1％檸檬酸洗滌兩次，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥。過濾，減壓濃縮，殘留物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得到標題產物(0.35g，20.2％)。
1H NMR(CDCl3)8.33(s，1H)，8.09(s，1H)，7.32(m，2H)，7.09-7.18(m，3H)，5.92(brs，2H)，5.30-5.40(m，1H)，4.41-4.43(m，4H)，4.30-4.34(m，4H)，3.93-3.96(m，3H)，1.84(m，1H)，1.43(s，9H)，1.40(m，1H)，1.15(m，1H)，0.83-0.91(m，6H)。EI-MS(m/z)606(12，M+)，163(100)。
制備例19(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙酰氧基乙基)]酯的制備 按照制備例18的操作，9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(0.51g，1.40mmol)與(S)-叔丁基-1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-苯乙基氨基甲酸酯(1.86g，5.10mmol)反應生成標題產物(0.26g，27.8％)。1H NMR(CDCl3)8.32(s，1H)，7.93(s，1H)，7.09-7.31(m，10H)，5.92(brs，2H)，5.54(m，1H)，4.82(m，1H)，4.26-4.45(m，6H)，3.93-3.96(m，4H)，3.02-3.16(m，2H)，1.40(s，9H).EI-MS(m/z)640(6，M+)，100(100)。
制備例20(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基乙基)]酯的制備
按照制備例18的操作，9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(0.51g，1.40mmol)與(S)-叔丁基-1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯反應(1.85g，5.70mmol)生成標題產物(0.13g，15.4％。)。1H NMR(CDCl3)8.34(s，1H)，7.96(s，1H)，7.32(m，2H)，7.12-7.21(m，3H)，5.88(brs，2H)，5.30-5.40(m，1H)，4.29-4.42(m，6H)，3.93-3.96(m，5H)，2.08-2.14(m，1H)，1.43(s，9H)，0.92(d，J＝6.89Hz，3H)，0.85(d，J＝6.89Hz，3H)。EI-MS(m/z)592(10，M+)，57(100)。
制備例21(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基甲氧基)]酯的制備 N2保護下9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(0.50g，1.40mmol)，DMF(15mL)與三乙胺(1.44g，0.014mol)混合后室溫攪拌使全部溶解，加入(S)-叔丁基-1-[(2-氯甲氧基)羰基]-2-甲基丁基氨基甲酸酯(1.00g，3.60mmol)和DMF(5mL)，升溫至50℃反應3～4小時后停止攪拌，加入1％檸檬酸(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分出有機相，水相用乙酸乙酯(20×2mL)萃取，合并乙酸乙酯層，用1％檸檬酸(20×2mL)，水及飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘余物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得到標題產物(48mg，5.6％)。1H NMR(CDCl3)8.35(s，1H)，7.94(s，1H)，7.32(m，2H)，7.12-7.19(m，3H)，5.76(brs，2H)，5.74(m，2H)，5.31(d，J＝8.08Hz，1H)，4.22-4.42(m，3H)，3.96-3.99(m，4H)，1.84(m，1H)，1.44(s，9H)，1.26(m，1H)，1.10(m，1H)，0.82-0.90(m，6H)。EI-MS(m/z)592(4，M+)，94(100)。
制備例22(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙酰氧基甲氧基)]酯的制備 按照制備例21的操作，9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(0.50g，1.40mmol)與(S)-叔丁基-1-[(2-氯甲氧基)羰基]-2-苯乙基氨基甲酸酯(1.12g，3.60mmol)反應生成標題產物(0.10g，11.1％)。1H NMR(CDCl3)8.31(s，1H)，7.93(s，1H)，7.12-7.33(m，10H)，6.20(brs，2H)，5.68-576(m，2H)，4.60(m，1H)，4.42(t，J＝4.76Hz，2H)，3.92-3.98(m，4H)，3.10(m，2H)，1.43(s，9H)。EI-MS(m/z)626(2，M+)，56(100)。
制備例23(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基甲氧基)]酯的制備 按照制備例21的操作，以9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯(0.50g，1.40mmol)與(S)-叔丁基-1-[(2-氯甲氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(1.00g，3.60mmol)反應生成標題產物(0.13g，15.7％)。1H NMR(CDCl3)8.34(s，1H)，7.95(s，1H)，7.32(m，2H)，7.19(t，J＝6.77Hz，1H)，7.12(d，J＝8.42Hz，2H)，5.84(brs，2H)，5.66-5.78(m，2H)，5.30(m，1H)，4.41(t，J＝4.76Hz，2H)，4.34(m，1H)，3.95-3.98(m，4H)，2.08-2.14(m，1H)，1.43(s，9H)，0.92(d，J＝6.89Hz，3H)，0.85(d，J＝6.89Hz，3H)。EI-MS(m/z)578(11，M+)，57(100)。
實施例1(2S)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤，[單苯基，單(2-氨基-3-甲基戊酰氧基乙基)]酯，二鹽酸鹽(化合物1)的制備制備例18制得的化合物(50mg，0.08mmol)溶于分子篩干燥的1，4-二氧六烷(1mL)，磁力攪拌，冰水浴下針筒注入15％氯化氫的1，4-二氧六烷溶液(0.1mL)，保溫反應1小時后室溫反應至原料完全消失。靜置30分鐘，將體系中上清液吸除，用乙酸乙酯、乙醚、二氯甲烷洗滌后加入蒸餾水冷凍干燥，得到標題產物(30mg，65.2％)。1H NMR(CD3OD)8.38(s，1H)，8.36(s，1H)，7.36(t，J＝7.34Hz，2H)，7.23(t，J＝7.70Hz，1H)，7.09(d，J＝7.70Hz，2H)，4.55(t，J＝4.60Hz，2H)，4.38-4.46(m，4H)，4.11(d，J＝7.70Hz，2H)，4.05(t，J＝4.80Hz，2H)，4.04(m，1H)，1.96-2.02(m，1H)，1.50and 1.30(m，2H)，0.92-0.98(m，6H)。EI-MS(m/z)506.0(12，M+)，157(100)。
下表所列的化合物2-6可由制備例19-23所得化合物為原料按照實施例1相同的步驟制備得到。
實施例2-6


實施例7(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(甲氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤富馬酸鹽(化合物7)的制備N2保護下，PMEA(0.40g，1.46mmol)，DMF(6mL)和DBU(0.44g，2.92mmol)，混合后升溫至45℃，加入上述制備例1生成的化合物(1.30g，5.86mmol)和DMF(5mL)的混合溶液，升溫于60℃反應2.5小時，加入異丙醇(30mL)，二氯甲烷(30mL)，1％檸檬酸，分層，有機相用1％檸檬酸洗滌兩次后飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)得到(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(甲氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(0.28g，0.44mmol)，加入乙腈(22mL)和富馬酸(0.051g，0.44mmol)，氮氣保護下回流2小時后濃縮至干，加入乙酸乙酯重結晶，得到化合物7(208mg，18.8％)。
1H NMR(CD3OD)8.19(s，1H)，8.15(s，1H)，6.71(s，2H)，5.48-5.61(m，4H)，4.41(t，J＝4.77Hz，2H)，4.27-4.39(m，2H)，3.94(t，J＝4.77Hz，2H)，3.92(d，J＝7.69Hz，2H)，3.68(s，6H)，3.41-3.51(m，4H)，2.18-2.24(m，2H)，1.84-1.96(m，6H)。MS(ESI)m/z(％)644.0(MH+，100)。M.p.96-98℃。
下表所列的化合物8-14可由制備例2-8所得化合物與PMEA按照實施例7相同的步驟制備得到。
實施例8-14

實施例15(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(甲氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物15)的制備N2保護下，PMEA(0.20g，0.73mmol)，DMF(5mL)，DBU(0.22g，1.46mmol)，與上述制備例10生成的化合物(0.82g，2.93mmol)混合后，升溫于80℃反應16小時，濃縮，加入水(30mL)，用二氯甲烷(10mL×3)提取，水(10mL×3)洗滌，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到標題產物(196mg，40.0％)。1H NMR(CDCl3)8.32(s，1H)，8.02(s，1H)，6.23(brs，2H)，4.40-4.44(m，2H)，4.19-1.38(m，10H)，3.96(t，J＝5.13Hz，2H)，3.84(m，2H)，3.72(s，6H)，3.46-3.62(m，4H)，2.17-2.24(m，2H)，1.90-2.02(m，6H)。MS(ESI)m/z(％)672.3(MH+)。
實施例16(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物16)的制備按照實施例15的操作，以PMEA(0.20g，0.73mmol)和上述制備例11生成的化合物(0.861g，2.93mmol)為原料反應生成標題產物(145mg，28.4％)。
1H NMR(CDCl3)8.30(s，1H)，7.94(s，1H)，6.03(brs，2H)，4.38(t，J＝4.69Hz，2H)，4.12-4.32(m，14H)，3.92(t，J＝4.54Hz，2H)，3.81(m，2H)，3.42-3.57(m，4H)，2.15-2.24(m，2H)，1.86-1.98(m，6H)，1.21(t，J＝6.30Hz，6H)。MS(ESI)m/z(％)700.2(MH+)。
實施例17(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤富馬酸鹽(化合物18)的制備N2保護下，2-氨基-6-環丙氨基-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.30g，0.92mmol)，DMF(5mL)和三乙胺(0.50g，4.58mmol)混合，升溫微溶后加入上述制備例2生成的化合物(0.86g，3.66mmol)和DMF(5mL)的混合溶液，升溫于55℃反應2小時后，加入異丙醇(30mL)，二氯甲烷(40mL)，1％檸檬酸(50mL)，分層，有機相用1％檸檬酸(10mL×3)洗滌，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)得到(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(41mg，6.1％)。
(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(96.8mg，0.13mmol)，乙腈(5mL)和富馬酸(15.5mg，0.13mmol)混合后，氮氣保護下回流2小時后趁熱抽濾，濾液減壓濃縮，殘余物加入乙酸乙酯重結晶，得到化合物18(18mg，收率16.2％)。
1H NMR(CD3OD)7.82(s，1H)，6.74(s，2H)，5.50-5.72(m，4H)，4.31-4.38(m，4H)，4.18(q，J＝7.30Hz，4H)，3.85-4.00(m，4H)，3.24-3.58(m，4H)，2.92(brs，1H)，2.17-2.21(m，2H)，1.86-2.01(m，6H)，1.24(t，J＝7.30Hz，6H)，0.88(m，2H)，0.62(m，2H)。MS(ESI)m/z(％)727.1(MH+)。
實施例18(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤富馬酸鹽(化合物19)的制備按照實施例17的操作，以2-氨基-6-環丙氨基-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.30g，0.92mmol)和上述制備例3(0.86g，3.66mmol)生成的化合物為原料反應生成(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(41mg，收率18.8％)。
(2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(150mg，0.20mmol)，乙腈(10mL)和富馬酸(23.1mg，0.20mmol)混合后，氮氣保護下回流2小時后趁熱抽濾，濾液濃縮至干，加入乙酸乙酯重結晶，得到化合物19(62mg，35.8％)。1H NMR(CD3OD)7.81(s，1H)，6.73(s，2H)，5.54-5.76(m，4H)，4.97-5.00(m，2H)，4.26-4.29(m，4H)，3.99(d，J＝8.01Hz，2H)，3.91(m，2H)，3.44-3.58(m，4H)，2.92(brs，1H)，2.17-2.28(m，2H)，1.90-2.02(m，6H)，1.22(m，12H)，0.87(m，2H)，0.66(m，2H)。MS(ESI)m/z(％)755.1(MH+)。
實施例19 (2S，2′S)-2-氨基-6-環丙胺基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(甲氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]乙基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(化合物20)的制備N2保護下，2-氨基-6-環丙氨基-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.20g，0.61mmol)，DMF(5mL)與DBU(0.19g，1.22mmol)混合，升溫微溶后加入上述制備例10生成的化合物(0.67g，2.40mmol)和DMF(5mL)的混合溶液，升溫于80℃反應12小時，濃縮，加入水(30mL)，用二氯甲烷(10mL×3)提取，水(10mL×3)洗滌，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)得到標題產物(70mg，16.3％)。1H NMR(CDCl3)7.59(s，1H)，5.79(brs，1H)，4.81(brs，2H)，4.12-4.41(m，12H)，3.90(t，J＝4.73Hz，2H)，3.78-3.82(m，2H)，3.70(d，J＝5.80Hz，6H)，3.40-3.58(m，4H)，3.00(brs，1H)，2.17-2.28(m，2H)，1.89-2.04(m，6H)，0.85(m，2H)，0.62(m，2H)。MS(ESI)m/z(％)727.3(MH+)。
實施例20(2S，2′S)-2-氨基-6-(4-甲氧基苯硫基)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(化合物21)的制備N2保護下，2-氨基-6-(4-甲氧苯硫基)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.20g，0.49mmol)，DMF(5mL)和三乙胺(0.25g，2.40mmol)混合，升溫微溶后加入上述制備例2生成的化合物(0.46g，1.95mmol)和DMF(5mL)的混合溶液，升溫于55℃反應2小時，加入乙酸乙酯(40mL)，1％檸檬酸(50mL)，分層，有機相用1％檸檬酸(10mL×2)洗滌，飽和氯化鈉溶液洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析(乙酸乙酯∶甲醇＝20∶1)得到標題產物(79mg，19.3％)。1H NMR(CDCl3)7.95(s，1H)，7.46(d，J＝6.90Hz，2H)，6.88(d，J＝6.90Hz，2H)，5.62-5.68(m，4H)，4.83(brs，2H)，4.29-4.32(m，2H)，4.18(t，J＝5.10Hz，2H)，4.12(q，J＝7.20Hz，4H)，3.81-3.86(m，4H)，3.78(s，3H)，3.38-3.57(m，4H)，2.13-2.21(m，2H)，1.86-1.91(m，6H)，1.18(t，J＝7.20Hz，6H)。MS(ESI)m/z(％)810.2(MH+)。
實施例21(2S，2′S)-2-氨基-6-(4-甲氧基苯硫基)-9-{2-[O，O′-雙[[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(化合物22)的制備按照實施例20的操作，2-氨基-6-(4-甲氧苯硫基)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.20g，0.49mmol)和上述制備例3生成的化合物(0.49g，1.94mmol)反應生成標題產物(98mg，23.3％)。1H NMR(CDCl3)7.75(s，1H)，7.47(d，J＝8.80Hz，2H)，6.87(d，J＝8.80Hz，2H)，5.44-5.72(m，4H)，4.92-4.97(m，2H)，4.90(brs，2H)，4.25-4.29(m，2H)，4.19(t，J＝4.83Hz，2H)，3.81-3.86(m，4H)，3.75(s，3H)，3.42-3.54(m，4H)，2.08-2.23(m，2H)，1.85-1.93(m，6H)，1.14-1.22(m，12H)。MS(ESI)m/z(％)838.2(MH+)。
實施例22(R)-9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤，雙{(S)-[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基}酯富馬酸鹽(化合物23)的制備按照實施例7的操作，(R)-9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(PMPA)(0.20g，0.70mmol)和上述制備例2生成的化合物(0.66g，2.79mmol)反應生成(R)-9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤，雙{(S)-[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基}酯(100mg，0.14mmol)，再與乙腈(10mL)和富馬酸(0.017g，0.14mmol)混合，氮氣保護下回流2小時后濃縮至干，加入乙酸乙酯重結晶，得到化合物23(110mg，19.6％)。1H NMR(CD3OD)8.18(s，1H)，8.11(s，1H)，6.71(s，2H)，5.41-5.56(m，4H)，4.22-4.38(m，3H)，4.12(q，J＝7.03Hz，4H)，3.78-4.02(m，4H)，3.42-3.49(m，4H)，2.17-2.25(m，2H)，1.87-1.96(m，6H)，1.16-1.23(m，9H)。MS(ESI)m/z(％)686.4(MH+).M.p.83-85℃。
實施例23(R)-9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤，雙{(S)-[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基}酯(化合物24)的制備按照實施例7的操作，PMPA(0.20g，0.70mmol)和上述制備例3生成的化合物(0.70g，2.79mmol)反應生成(90mg，0.13mmol)再與乙腈(8mL)和富馬酸(0.015g，0.13mmol)混合，氮氣保護下回流2小時后濃縮至干，加入乙酸乙酯重結晶，得到化合物24(66mg，收率11.5％)。1H NMR(CD3OD)8.18(s，1H)，8.12(s，1H)，6.71(s，2H)，5.52-5.60(m，4H)，4.88-4.97(m，2H)，4.19-4.33(m，4H)，3.83-4.07(m，2H)，3.75-3.81(m，1H)，3.39-3.48(m，4H)，2.15-2.22(m，2H)，1.86-1.97(m，6H)，1.16-1.22(m，15H)。MS(ESI)m/z(％)714.3(MH+).M.p.79-81℃。
下表所列的化合物可由PMEA或2-氨基-6-(取代)-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤和制備例12-17所得化合物為原料按照實施例19相同的步驟制備得到。
實施例24-31

實施例32 (2S，2′S)-2-氨基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(異丙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(化合物26)的制備按照實施例7條件，2-氨基-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.15g，0.55mmol)和上述制備例3生成的化合物(0.55g，2.20mmol)反應生成化合物26(15mg，3.9％)。1H NMR(CDCl3)8.66(s，1H)，7.94(s，1H)，5.81(brs，2H)，5.48-5.72(m，4H)，4.94-5.03(m，2H)4.22-4.35(m，4H)，3.83-3.92(m，4H)，3.38-3.58(m，4H)，2.10-2.25(m，2H)，1.83-2.04(m，6H)，1.16-1.23(m，12H)。MS(ESI)m/z(％)700.2(MH+，100)。
實施例33(2S，2′S)-2-氨基-9-{2-[O，O′-雙[[2-(乙氧羰基)吡咯烷基-1-羰氧基]甲基]膦酰基甲氧基]乙基}嘌呤(化合物25)的制備按照實施例7條件，2-氨基-9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]嘌呤(0.30g，1.10mmol)和上述制備例2生成的化合物(0.78g，3.30mmol)反應生成化合物25(23mg，3.1％)。1H NMR(CDCl3)8.67(s，1H)，7.99(s，1H)，5.82(brs，2H)，5.48-5.74(m，4H)，4.30-4.38(m，4H)4.10-4.21(m，4H)，3.84-3.99(m，4H)，3.41-3.62(m，4H)，2.08-2.24(m，2H)，1.83-2.04(m，6H)，1.23(t，J＝7.20Hz，6H)。MS(ESI)m/z(％)672.1(MH+，100)。
抗病毒實驗1、細胞毒性試驗采用四氮唑還原法檢測藥物對HepG 2215生長的抑制作用。取HepG 2215細胞一瓶，用胰酶消化后制備成單細胞懸液，計數后調整細胞濃度至2×104cell/ml，加入96孔培養板中。置于細胞培養箱中，37℃、5％CO2培養過夜。吸去上清液后加入含有不同濃度藥物的DMEM培養基(5％胎牛血清)。作用9天之后，各孔中加入10μl的MTT并繼續培養4小時。仔細吸去上清液，每孔加入150μl DMSO，輕輕振蕩后，用酶標儀檢測570nm處的OD值。
2、細胞藥物處理取HepG 2215細胞一瓶，用胰酶消化后制備成單細胞懸液，調節細胞濃度至2×104cell/ml，加入24孔細胞培養板中(1ml/well)。37℃、5％CO2培養過夜。取出24孔細胞培養板，吸出上清液后依次加入5個5倍稀釋濃度的藥物，以及陽性對照藥物。繼續培養，每3天更換含有藥物的培養基，并于第9天收集各孔上清液至離心管中-20℃凍存備用。
3、熒光定量PCR反應血清標本(100μl)置于裂解液(1mmol/L Tris-HCl，pH8.0，10mmol/L NaCl，0.1mmol/L EDTA，0.5％SDS，0.8mg/ml蛋白酶K)中，在37℃孵化5h，然后用酚氯仿和氯仿分別抽提兩次，再用乙醇沉淀。溶解在50μl水中以備作PCR擴增。
2μl病毒DNA放入48μl的反應混合物中，包括5mmol/L MgCl2、每種dNTP0.2mmol/L、2.5U的Gold Taq多聚酶，0.2U的UNG酶及引物各0.4mmol/L，探針0.15mmol/L。37℃ 5min后，95℃變性3min30s，94℃ 20s、60℃ 40s(熒光信號檢測)循環41次，最后4℃保存。檢測所用Taqman探針序列5’FAM-CCAGCAGCGCCTCCTCCTGC-3’TAMARA；引物序列Forward primer(正向引物)5’-CCC TCAGGCTCAGGGCATA-3’，Reverse primer(反向引物)5’-CTTCCTGACTGCCGATTGGT-3’。
4、試驗細胞系HepG 2215細胞，引自復旦大學分子病毒實驗室。該細胞株是用2個頭尾相連的HBV DNA全基因的重組質粒轉染受體細胞HepG2而成，可在體外穩定的分泌HBsAg、HBeAg和完整的Dane顆粒，還能產生大量的復制中間體(RI)。細胞培養于含10％胎牛血清的DMEM中。
5、陽性對照藥為阿德福韋雙特戊酸酯(Adefovir Dipivoxil，ADV)。抗病毒結果如下

a.EC50半數有效濃度；b.CC50半數細胞毒性濃度；c.SI作用選擇性指數(CC50/EC50)。
從上表可以看出，大部分化合物都顯示出較好的抗HBV的活性，其中，化合物7，8，9，19，22，26顯示出比陽性對照藥ADV更好的抗HBV活性，更好的選擇比。尤其是化合物19的抗病毒活性約是陽性對照藥ADV的20倍，SI值約是ADV的25倍。
權利要求
1.由下面通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物 式(I)中R1代表氫、氯、氟、氨基、羥基、直鏈或支鏈或環狀C1-C6的烷基氨基、直鏈或支鏈C1-C6的烷氧基、取代芳香基氧基或者取代芳香基硫基；R2代表氫、氨基或者直鏈或支鏈C1-C6的烷基氨基；R5代表氫、環丙基或者直鏈或支鏈C1-C6的烷基；R3和R4可以相同或不同，分別獨立為苯基、(IIa)或者(IIb)， 式中，R6和R8彼此獨立地代表氫、直鏈或支鏈C1-C6烷基、三氟乙基或者芐基；R7代表氫、芐基、直鏈或支鏈C1-C6烷基或者天然氨基酸的側鏈；n為1或2；或者，當R3代表苯基，R4代表下式(IIc) 式中，R7、n定義如上。
2.根據權利要求1所述的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物，其特征在于，所述的R1代表氫、氯、氟、氨基、羥基、環丙基氨基、甲氧基、乙氧基或者對甲氧苯硫基；R2代表氫或者氨基；R5代表氫、環丙基或者甲基；R3和R4可以相同或不同，分別獨立為苯基、(IIa)或者(IIb)， 式中，R6和R8彼此獨立地代表氫、直鏈或支鏈C1-C6烷基、三氟乙基或者芐基；R7代表氫、芐基、甲基、異丙基或者3-甲基丙基；n為1或2；或者，當R3代表苯基，R4代表下式(IIc) 式中，R7、n定義如上所述。
3.根據權利要求1或2所述的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物，其特征在于，所述的非環核苷膦酸酯類化合物為如下化合物之一
/表示游離堿；
4.根據權利要求1所述的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物或溶劑合物，其特征在于，所述的藥學上可接受的無機或有機鹽是通式(I)化合物與酸形成的鹽，所述的酸為鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、天冬氨酸或者谷氨酸；或通式(I)化合物與堿形成的鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、銨鹽、甲胺鹽、乙胺鹽或乙醇胺鹽；或通式(I)化合物與堿性氨基酸形成的鹽，所述的堿性氨基酸為賴氨酸、精氨酸或鳥氨酸。
5.一種通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)N-叔丁氧羰基-L-氨基酸與2-溴乙醇或氯甲基氯磺酸酯反應生成(IIIa)化合物； 其中R7和n定義如權利要求1所述，X為溴或氯，R9為叔丁氧羰基；(2)(IIIa)化合物與9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯反應生成膦酸酯；上述膦酸酯化合物在氯化氫飽和的1，4-二氧六環或乙酰氯/甲醇存在下脫去保護基生成(Ia)化合物；
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的(IIIa)化合物與9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單苯基酯，在極性非質子溶劑中，有機堿作用下，于-10～80℃反應0.5～72小時，生成叔丁氧羰基保護的膦酸酯。
7.一種通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)L-氨基酸酯與氯甲酸氯甲酯反應生成(IIIb)化合物，或者L-氨基酸酯與2-溴乙基氯甲酸酯反應生成(IIIc)化合物； 其中R6、R7、R8和n定義如權利要求1所述，X為溴或氯；(2)在堿存在下，化合物(IV) 與(IIIb)化合物反應生成下式(Ib)化合物，或者化合物(IV)和(IIIc)化合物反應生成下式(Ic)化合物； 其中R1、R2、R5、R6、R7、R8、n定義如權利要求1所述。
8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中的反應是在極性或非極性溶劑中，在堿性條件下，-10～100℃反應1～24小時，得到鹵素取代的產物(IIIb)或(IIIc)化合物；在步驟(2)中的反應是在極性非質子溶劑中，有機堿作用下，于0～100℃反應0.5～72小時。
9.一種治療病毒感染性疾病的藥物組合物，其特征在于，其包含通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物和溶劑合物中的一種或多種作為有效活性成分。
10.通式(I)表示的非環核苷膦酸酯類化合物及其各種光學異構體、各種晶型、藥學上可接受的無機或有機鹽、水合物和溶劑合物在制備治療病毒感染性疾病的藥物中的應用。
11.根據權利要求10所述的應用，其特征在于，所述的疾病是乙型肝炎病毒和HIV病毒引起的感染性疾病。
全文摘要
本發明提供一類如下通式(I)所示的非環核苷膦酸酯類化合物及其在藥學上可接受的無機或有機鹽，以及包含通式(I)化合物的組合物。本發明還提供該類化合物的制備方法及通式(I)化合物作為活性物質用于治療病毒感染性疾病，特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的用途。
文檔編號A61P1/00GK101066981SQ200710041280
公開日2007年11月7日 申請日期2007年5月25日 優先權日2007年5月25日
發明者楊玉社, 江賽紅, 盧鵬, 李戰, 嵇汝運 申請人:中國科學院上海藥物研究所, 南京長澳醫藥科技有限公司