專利名稱：：復(fù)方丹參片在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及復(fù)方丹參片在制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。技術(shù)背景復(fù)方丹參片由上海中藥二廠于1975年研制，中華人民共和國藥典1977年版、1985年版、1995年版、2000年版、2005年版均有收載。根據(jù)2005年版藥典之記載，本品由丹參浸膏、三七和冰片組成，其中丹參苦中微寒，可活血通脈，又可祛淤養(yǎng)血；三七味甘微苦，為活血化淤之要藥，可增加冠脈血流量；冰片性辛寒，為開竅醒神、清熱止痛之上品。以上諸藥配伍，有活血化淤，通經(jīng)活絡(luò)，理氣止痛，醒神開竅之功效。本品是臨床用于治療氣滯血瘀所致的胸痹，癥見胸悶、心前區(qū)剌痛；冠心病心絞痛見上述證候者的常用中成藥。復(fù)方丹參片進入臨床三十多年來，大量的醫(yī)學(xué)實驗和臨床應(yīng)用實踐證明其藥理作用和臨床運用范圍遠(yuǎn)大于中國藥典中所述的功能與主治病癥。現(xiàn)綜述如下1.復(fù)方丹參片目前主要發(fā)現(xiàn)有以下藥理作用1.1擴張冠狀動脈、增加血流量的作用王筠默等在《復(fù)方丹參片的藥理作用研究》(中成藥研究，1984，(II):22.24)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參片能顯著增加離體豚鼠灌流心臟的冠脈流量，并隨濃度增加而作用加強；對缺氧引起的心衰灌流心臟，亦有增加冠脈流量的作用。1.2抗心肌缺血作用潘文軍在《復(fù)方丹參片對家兔實驗性心肌梗塞和心肌酶譜的影響》(沈陽藥科大學(xué)學(xué)報2005，22(1):5355)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參濃縮片具有較好的抑制家兔心肌梗死作用和改善心肌酶譜的作用。高秀梅(《復(fù)方丹參方抗大鼠心肌缺血作用研究》天津中醫(yī)藥，2003:(1):2342)采用冠脈結(jié)扎大鼠模型，以心肌缺血面積、心肌酶、自由基作為藥效指標(biāo)。觀察復(fù)方丹參片抗心肌缺血作用。結(jié)果顯示，本品可使大鼠梗死面積縮小，降低心電圖ST段，血漿LDH含量下降，SOD含量升高。1.3抗心律失常作用王筠默等在《復(fù)方丹參片的藥理作用研究》(中成藥研究，1984，(II):22.24)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參片給小鼠灌胃，可顯著抑制氯仿引起小鼠心室纖維顫動，也可縮短氯化鋇引起大鼠心律失常的時間。1.4對心肌缺血再灌注損傷的保護作用張昱，等(《復(fù)方丹參片對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用》河南中醫(yī)藥學(xué)刊，1997:12(6):1517)認(rèn)為復(fù)方丹參片顯著縮短大鼠再灌注心律失常的持續(xù)時間，也能減少心肌MDA含量，提高S0D活性；提示其抗再灌注心律失常作用可能與抑制脂質(zhì)過氧化，減少自由基損傷有關(guān)。本品對離體大鼠心臟缺血再灌注所致心功能低下狀態(tài)也有明顯改善，心肌組織Ca2+含量明顯減少；提示其作用機制可能通過減少缺血再灌注心肌的鈣聚集，保護線粒體功能以及抑制黃嘌呤氧化酶的生成，防止脂質(zhì)過氧化等途徑實現(xiàn)的。1.5減輕抗精神病藥物對心臟的影響莊建華在《復(fù)方丹參片在抗精神病藥物對心臟影響中的作用》(國醫(yī)論壇，2000:15(2):4041)一文中認(rèn)為復(fù)方丹參片可減輕抗精神病藥物對心臟的影響和毒性，而且在改善抗精神病藥物引起T波或Q—T間期延長方面有非常明顯的作用。1.6對腦缺血的保護作用范照冬(《復(fù)方丹參片對大鼠實驗性腦缺血的保護作用研究》山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000:10(2):34)研究表明復(fù)方丹參片降低腦缺血模型大鼠腦指數(shù)，顯著降低腦缺血模型大鼠腦含水量，并使腦血管通透性顯著降低，減輕腦水腫，促進腦組織缺血性損傷恢復(fù)，對缺血性腦組織有明顯保護作用。朱永林(《復(fù)方丹參片對慢性腦缺血大鼠腦內(nèi)HIF-lci表達(dá)的影響》實用神經(jīng)疾病雜志2005:8(5):1819)研究表明治療組大鼠腦內(nèi)HIF-lci表達(dá)明顯增強。認(rèn)為復(fù)方丹參片可顯著增加2VO大鼠腦內(nèi)HIF-la表達(dá)，促進慢性腦缺血的代償修復(fù)。1.7對實驗性血栓形成的影響屈彩琴(《復(fù)方丹參片對大鼠實驗性血栓形成的影響》河北中醫(yī)，1999:21(4):252)研究表明，復(fù)方丹參片明顯延長大鼠血栓形成時間，劑量增加，作用增強。作者認(rèn)為復(fù)方丹參片對血栓形成有確切預(yù)防作用。1.8對阿爾茨海默病大鼠腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響覃仁安在《復(fù)方丹參片對阿爾茨海默病大鼠腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響》(中草藥，2004:35(8):905908)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參片降低興奮性氨基酸含量，以對抗興奮性氨基酸的毒性，這可能是其防治阿爾茨海默病的機制之一。同時覃仁安《復(fù)方丹參片對阿爾茨海默病大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙和腦組織13—AP含量的影響》(中華中醫(yī)藥雜志，2005:20(6):377378)的研究表明復(fù)方丹參片對實驗性AD大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙有明顯的改善作用，并能抑制腦組織中J3—AP的產(chǎn)生1.9抗肺纖維化宋建平(《復(fù)方丹參片、生脈飲、烏蛇散對平陽霉素所致肺纖維化模型大鼠的影響(J).中醫(yī)雜志，2002:43(2):142143)采用氣管內(nèi)滴入平陽霉素的方法復(fù)制模型，以復(fù)方丹參片灌胃治療，結(jié)果肺系數(shù)、肺組織HYP含量及肺泡炎、肺纖維化程度低于模型對照組。2復(fù)方丹參片目前主要可用于治療以下臨床病癥2.1老年性心腦血管病李正喜(《復(fù)方丹參片治療老年性心腦血管病133例療效觀察》貴州醫(yī)藥，1989:13(2):121122)運用復(fù)方丹參片治療老年性心腦血管病133例，結(jié)果表明患者心電圖、腦血流圖、肝功能和血脂以及治療前后癥狀均有顯著差異。認(rèn)為復(fù)方丹參片對亞急性心肌梗塞ST段及T波改變者效果較佳；且隨著療程延長，療效愈高。2.2顱腦外傷后神衰綜合癥張翼鹿(《復(fù)方丹參片治療顱腦外傷后神衰綜合癥122例》云南中醫(yī)雜志，1984:5(5):2426)應(yīng)用復(fù)方丹參片治療顱腦外傷后神衰綜合癥122例，有效率達(dá)90.2%。腦血流圖提示，用藥后血管彈性均較服藥前好轉(zhuǎn)。說明復(fù)方丹參片能增加腦血流量，改善腦血液循環(huán)和調(diào)節(jié)組織的修復(fù)與再生，進一步促進中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的恢復(fù)。2.3肝臟疾病2.3.1.脂肪肝魏德新在《克朗寧并復(fù)方丹參片治療脂肪肝49例》(中國中西醫(yī)結(jié)合雜志2000:20(10):788789)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參片能促進肝臟循環(huán)，抑制外源性膽固醇的吸收，改善了肝臟脂肪代謝，從而達(dá)到治療脂肪肝的目的。2.3.2乙型肝炎孔武明，龔均，董蕾在《復(fù)方丹參片聯(lián)合維生素E對慢性乙型肝炎肝纖維化的影響研究》(中國實用內(nèi)科雜志，2005:25(9):799801)—文中認(rèn)為復(fù)方丹參片聯(lián)合維生素E對肝纖維化的發(fā)展具有一定的阻斷作用，無明顯副反應(yīng)。能改善肝臟微循環(huán)，抑制星狀細(xì)胞激活及膠原形成，提高淋巴細(xì)胞活性，改善肝纖維化，延緩肝炎病理發(fā)展。另外，丹參作為天然的抗氧化劑，可以保護肝細(xì)胞膜和線粒體膜的完整性和通透性，清除有細(xì)胞毒性的氧自由基是其藥理作用之一。3.3.3肝硬化孫權(quán)，等在《促肝細(xì)胞生長素聯(lián)合復(fù)方丹參片治療肝硬變腹水32例》(中西醫(yī)結(jié)合雜志，1998增刊(下)165)—文中認(rèn)為促肝細(xì)胞生長素與復(fù)方丹參片聯(lián)合應(yīng)用對改善微循環(huán)，防止肝細(xì)胞進行性壞死，提高血清白蛋白，消除腹水，恢復(fù)肝功能有一定療效。成娟在《肝蘇顆粒聯(lián)合復(fù)方丹參片治療肝纖維化28例》(江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000:12(3):7)—文中認(rèn)為肝蘇顆粒和丹參具有同樣的抗肝纖維化作用，兩藥聯(lián)用，作用增強。2.4治療高血壓病譚孝在《硝苯地平和復(fù)方丹參片治療老年高血壓臨床分析》(中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，1998:8(6):6970)—文中認(rèn)為兩藥結(jié)合治療高血壓、冠心病、心絞痛效果更佳，對伴有冠心病、心絞痛、腦血管病的老年高血壓患者尤為適用。洪梅在《復(fù)方丹參片治療恢復(fù)期妊高征療效觀察》(河南實用神經(jīng)雜志，2002:5(2):66)—文中認(rèn)為在常規(guī)給予降壓藥的同時加用復(fù)方丹參片對于降血壓，改善腎血流量，消除尿蛋白有較好的療效，且副作用少。認(rèn)為在妊高征的恢復(fù)期治療中，復(fù)方丹參片是一種安全有效的藥物。2.5其它臨床應(yīng)用曹銀娥在《復(fù)方丹參片治療老年皮膚瘙癢癥》(山東醫(yī)藥，1997:37(8):6263)—文中用本品治療皮膚瘙癢癥，主要通過提高皮膚血液供給，改善皮膚營養(yǎng)狀況，使皮膚瘙癢癥狀緩解或消退。張青文，劉奇莉在《復(fù)方丹參片治療胃腸痙攣性腹痛》(中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥)一文中認(rèn)為復(fù)方丹參片具有鈣拮抗和改善微循環(huán)的作用，從而緩解平滑肌痙攣性腹痛，療效與阿托品對照差異雖無顯著性，但副作用少，具有臨床實用價值。李立東在《復(fù)方丹參片治療Colles骨折療效觀察》(交通醫(yī)學(xué)，1999:13(1):120)—文中認(rèn)為在傳統(tǒng)方法的基礎(chǔ)上對78例Cblles骨折患者加服復(fù)方丹參片，愈合時間縮短，療效顯著。倪秀英，鄭榮在《復(fù)方丹參片治療I型慢性精神分裂癥效果觀察》(海峽藥學(xué)，2001:13(4):31)—文中認(rèn)為有助于I型慢性精神分裂癥陰性癥狀的治療效果。梅全喜在《復(fù)方丹參片的新用途》(家庭中醫(yī)藥)一文中認(rèn)為該方還可治療支氣管哮喘；神經(jīng)衰弱綜合征；痛經(jīng)；色素性紫癜性皮膚?。粶\層鞏膜炎；小兒耳聾；兒童繼發(fā)性癲癇。由此可見，復(fù)方丹參片除主要適用于心腦血管疾病的預(yù)防和慢性心腦血管疾病的長期治療之外，其臨床使用范圍正逐漸擴大。糖尿病是一種常見的代謝內(nèi)分泌病，能夠引發(fā)多種糖尿病并發(fā)癥，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性白內(nèi)障、糖尿病性皮膚病、糖尿病骨髓炎、糖尿病骨性關(guān)節(jié)病、糖尿病足等，嚴(yán)重影響患者的身體健康和生活質(zhì)量，對人體的危害僅次于癌癥，被稱為現(xiàn)代疾病中的第二殺手。目前全世界有糖尿病患者1.25億，世界各國共有超過三億人存在患上糖尿病的風(fēng)險，我國的糖尿病患者已達(dá)4000萬。對一些高發(fā)地區(qū)來說，糖尿病造成的經(jīng)濟損失甚至可能大于所謂的"世紀(jì)瘟疫艾滋病"。到了2025年，75%的糖尿病患者將集中在發(fā)展中國家。不少人擔(dān)心，城市化以及文化和社會的高速變革，可能是造成發(fā)展中國家糖尿病患者增加的重要因素。目前，糖尿病有擴大化和年輕化的傾向，因而危害人群的范圍越來越大。糖尿病狀態(tài)下，還原性葡萄糖和其他糖(例如果糖)可與機體內(nèi)各種蛋白質(zhì)中氨基酸殘基側(cè)鏈e-氨基或氨基末端的a氨基在非酶催化下反應(yīng)形成可逆的Schiff堿(幾小時)，再進一步反應(yīng)形成較穩(wěn)定但仍可逆的糖-蛋白質(zhì)酮胺結(jié)合物(幾天或幾周)，若為半衰期長的蛋白質(zhì)(如膠原蛋白、晶體蛋白、彈蛋白及神經(jīng)髓鞘等)，則繼續(xù)進行復(fù)雜的重組脫氫形成不可逆的糖化終末產(chǎn)物(AGEs)。AGEs以共價鍵的形式不可逆地與上述蛋白質(zhì)結(jié)合，即使血糖被糾正，AGEs亦不會下降，并隨著血糖濃度的升高及蛋白質(zhì)暴露于葡萄糖時間的延長而不斷堆積，稱為蛋白質(zhì)非酶糖化。糖化血紅蛋白是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物。糖化血紅蛋白越高表示血糖與血紅蛋白結(jié)合越多，糖尿病病情也越重。糖化血紅蛋白的英文代號為HbAlC。糖化血紅蛋白能夠反映過去2—3個月血糖控制的平均水平，它不受偶爾一次血糖升高或降低的影響，因此對糖化衄紅蛋白進行測定，可以比較全面地了解過去一段時間的血糖控制水平。世界權(quán)威機構(gòu)對于糖化血紅蛋白有著明確的控制指標(biāo)，ADA(美國糖尿病學(xué)會)建議糖化血紅蛋白控制在小于7X，IDF(國際糖尿病聯(lián)盟)建議糖化血紅蛋白控制標(biāo)準(zhǔn)為小于6.5%，目前我國將糖尿病患者糖化血紅蛋白的控制標(biāo)準(zhǔn)定為6.5%以下。由于糖化血紅蛋白可改變紅細(xì)胞對氧的親和力，會加速心腦血管并發(fā)癥的形成。它可引起腎小球基底膜增厚，誘發(fā)糖尿病腎病，并引起血脂和血粘度增高。糖化血紅蛋白升高，是心肌梗死、腦卒中死亡的一個高危因素。在男性患者中，糖化血紅蛋白每增加1Q/^，死亡率的相對危險性增加24%，女性患者增加28%。一旦糖化血紅蛋白超過7%，發(fā)生心腦血管疾病的危險性就增加50%以上。第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院的范泉等人研究發(fā)現(xiàn)，糖化血紅蛋白水平與冠狀動脈病變程度呈正相關(guān)，是冠心病的獨立危險因素。研究發(fā)現(xiàn)，單純冠心病組、冠心病合并糖耐量異常組和冠心病合并2型糖尿病組的糖化血紅蛋白水平升高指數(shù)分別為4.5%、6.7%和12.5%，差異顯著；冠狀動脈狹窄積分分別為5.8分、7.4分和14.5分，差異顯著。糖化血紅蛋白水平與冠脈病變積分呈正相關(guān)。該研究結(jié)果提示降低糖化血紅蛋白水平，對阻止和延緩動脈粥樣硬化及心血管并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展，具有重要的臨床意義。英國前瞻性研究證實糖化血紅蛋白每下降1。％，糖尿病相關(guān)的死亡率降低21%;心肌梗死發(fā)生率下降14%;腦卒中發(fā)生率下降12%:微血管病變發(fā)生率下降37%;白內(nèi)障摘除術(shù)下降19%;周圍血管疾病導(dǎo)致的截肢或死亡率下降43%:心力衰竭發(fā)生率下降16%。亦有研究報道，糖化血紅蛋白值高于8%的消渴患者容易繼發(fā)骨質(zhì)疏松癥；糖化血紅蛋白與牙周指標(biāo)尤其是附著喪失(AL)高度相關(guān)，通過對HbAlc的有效控制，AL趨向于好轉(zhuǎn)，并為牙周治療奠定了良好的基礎(chǔ)。因此，糖化血紅蛋白對糖尿病患者來說是一項非常重要的監(jiān)測指標(biāo)，它的高低直接決定將來各種嚴(yán)重影響糖尿病患者生活質(zhì)量的慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。目前學(xué)術(shù)界公認(rèn)，防治糖尿病慢性并發(fā)癥主要通過抑制醛糖還原酶活性和降低糖基化終末產(chǎn)物這兩條經(jīng)典途徑(參閱《糖尿病慢性并發(fā)癥》沈稚舟吳松華邵福源陳國輝主編上海醫(yī)科大學(xué)出版社1999年1月第1版《臨床糖尿病學(xué)》葉山東朱禧星編著安徽科學(xué)技術(shù)出版社2005年10月第1版)。例如，氨基胍是一類親核的肼化合物，它可與糖基化反應(yīng)中間產(chǎn)物3—脫氧葡萄糖酮醛和早期產(chǎn)物反應(yīng)，阻斷蛋白質(zhì)非酶早期糖化產(chǎn)物進一步形成糖化終末產(chǎn)物，明顯防止糖尿病多種慢性并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展，部分亦可能與抑制蛋白質(zhì)非酶糖化、減少自由基的形成有一定關(guān)系。此外，氨基胍還可抑制脂類和脂肪酸的氧化。但目前未見有關(guān)氨基胍對臨床糖尿病患者慢性并發(fā)癥治療作用的報道，其臨床療效和不良反應(yīng)尚待評價。胰島素是人體胰腺e細(xì)胞分泌的身體內(nèi)惟一的降血糖激素。胰島素抵抗是指體內(nèi)周圍組織對胰島素的敏感性降低，組織對胰島素不敏感，外周組織如肌肉、脂肪對胰島素促進葡萄糖攝取的作用發(fā)生了抵抗，使胰島素不能正常地發(fā)揮降血糖的功能。大量流行病學(xué)資料顯示，胰島素抵抗是促使糖尿病、高血壓、高血脂等疾病發(fā)生發(fā)展的重要原因。研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗普遍存在于2型糖尿病中，幾乎占90%以上，可能是2型糖尿病的發(fā)病主要因素之一。因此，糖尿病的藥物治療應(yīng)針對其病因，注重改善胰島素抵抗，以及對胰腺e細(xì)胞功能的保護，必須選用能改善胰島素抵抗的藥物。這些藥物主要是胰島素增敏劑，胰島素增敏劑可增加機體對自身胰島素的敏感性，使自身的胰島素得以"復(fù)活"而充分發(fā)揮作用，這樣就可使血糖能夠重新被機體組織細(xì)胞所攝取和利用，使血糖下降，達(dá)到長期穩(wěn)定和全面地控制血糖的目的，使人體可長久享用自身分泌的胰島素，使糖尿病患者得到及時有效及根本上的治療，預(yù)防糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，在眾多心血管疾病的危險因素中胰島素抵抗似處于核心地位，或者說胰島素抵抗是多種疾病，特別是糖尿病及心血管疾病共同的危險因素，是滋生多種代謝相關(guān)疾病的共同土壤。近年來2型糖尿病的發(fā)病機制取得了令人矚目的進展，胰島素抵抗和B細(xì)胞分泌缺陷是其發(fā)病的二個主要環(huán)節(jié)，B細(xì)胞仍能通過增加胰島素的分泌代償胰島素抵抗，使血糖維持在相對較低水平，改善糖耐量及胰島素耐量，從而抑制糖尿病并發(fā)癥的發(fā)展。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供復(fù)方丹參片的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。實際上，本發(fā)明涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白生成的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的白內(nèi)障的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的動脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的心肌梗死的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的腦卒中的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的心力衰竭的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的牙周炎的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。涉及復(fù)方丹參片在制備改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥物中的應(yīng)用。復(fù)方丹參片可以抑制糖基化終末產(chǎn)物——糖化血紅蛋白的形成，可以用于預(yù)防和抑制糖尿病糖化血紅蛋白的生成及其誘發(fā)的慢性并發(fā)癥的產(chǎn)生，這些慢性并發(fā)癥包括視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、動脈粥樣硬化、心肌梗死、腦卒中、心力衰竭、牙周炎、骨質(zhì)疏松；同時復(fù)方丹參片可以改善2型糖尿病胰島素抵抗，從而抑制善2型糖尿病的發(fā)展和并發(fā)癥的產(chǎn)生。為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面通過實驗例來進一步說明復(fù)方丹參片在制藥中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的復(fù)方丹參片用于制備預(yù)防和抑制糖尿病糖化血紅蛋白的生成及治療其誘發(fā)的慢性并發(fā)癥跟改善2型糖尿病胰島素抵抗、胰島素耐量、糖耐量是按照如下實施示例所表示的方法進行的研究。所涉及的方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠掌握和運用的技術(shù)手段，但以下實施示例不得理解為任何意義上的對本發(fā)明權(quán)利要求的限制。實施示例l:對糖尿病大鼠糖化血紅蛋白的形成的影響一、實驗材料。1、藥物及試劑復(fù)方丹參片，批號B7A008，廣州白云山和記黃浦中藥有限公司，使用制成研粉，蒸餾水溶解；成人用量為9粒/天，相當(dāng)于5.4g生藥/天；大鼠給藥低、中、高劑量分別為人臨床給藥劑量的3.5、7、14倍(按體重計算)，即分別約為0.3、0.6、1.2g生藥/kg。氨基胍(aminoguanidine，AG)，鏈脲佐菌素(str印tozotocin，STZ)，Sigma公司，臨用前用檸檬酸緩沖液配成濃度為P/。的STZ溶液；血糖試紙，瑞士羅氏制藥公司提供(批號449497);糖化血紅蛋白測定試劑盒(批號20070621)，由南京建成生物工程研究所提供。2、儀器冷凍離心機(J268型)Beckman公司；分光光度計(752型)上海第三分析儀器廠；高速冷凍離心機印pendorfCentrifuge5417R;熒光分光光度計(F24000型)日本日立公司；微量震蕩器0M22型)上海象華化工有限公司。3、實驗動物清潔級Sprague—Dawley(SD)大鼠，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。二、實驗方法1、糖尿病大鼠模型的建立與分組。隨機抽取10只大鼠作為正常對照組給普通詞料喂養(yǎng)。其余大鼠作為模型組，模型組大鼠給予高脂飼料(1%膽固醇，10%豬油，10%蛋黃粉，2%蔗糖，77%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)，4周后將模型組的動物禁食(不禁水)過夜，腹腔注射檸檬酸緩沖液(PH4.4)配置的STZ溶液30mg/kg。正常對照組腹腔注射同體積的檸檬酸緩沖液。3d后禁食過夜，尾靜脈用采血針取血測血糖。全血血糖》11mmol/L，尿糖+++++++，維持1周以上確定為糖尿病模型。2、分組給藥。將糖尿病大鼠分為5個組，分別為模型組、氨基胍給藥組、復(fù)方丹參片高、中、低劑量組，每組8只，組間及組內(nèi)動物分別作標(biāo)記。正常對照組給予正常飼料、飲用自來水，其余各組均給予高脂無糖詞料并及冷開水飲用。各給藥組給藥劑量見下表，模型對照組與正常對照組每天灌服等容量的蒸餾7_K，每天給藥1次，連續(xù)給藥12周。給藥后2周，每天監(jiān)測動物尿糖，尿糖++++、消瘦的動物每天皮下注射胰島素0.5u/kg。每周記錄動物的體重。實驗第12周后，動物禁食12h，烏拉坦腹腔注射麻醉，稱體重并記錄，眼球采血。3、檢測指標(biāo)。血糖、糖化血紅蛋白(使用SPSS11.0進行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)均用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差Gi"表示。各指標(biāo)采用單因素方差分析及t檢驗；對方差不齊的數(shù)據(jù)采用Kruskal-Wallis〃檢驗及g檢驗。)。檢測結(jié)果見表1:表1不同給藥組糖尿病大鼠血糖及糖化血紅蛋白的水平G土"<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與空白組比較，*p<0.05，**p<0.01;與模型組比較ttp<0.05,#ftp<0.01。從上表可以看出，與正常組比較，模型組糖尿病大鼠血糖及血漿糖化血紅蛋白的水平均顯著高于正常組(P<0.01)，提示用鏈脲佐菌素及高脂飼料造模的糖尿病大鼠血糖升高、糖基化產(chǎn)物增加。與模型組比較，氨基胍給藥組動物糖化血紅蛋白水平有所下降(p<0.05)，提示氨基胍具有減少糖尿病大鼠糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生；復(fù)方丹參片各劑量給藥組大鼠血糖及糖化血紅蛋白水平均有不同程度地下降(p〈0.05)，提示復(fù)方丹參片具有減少糖尿病大鼠糖基化產(chǎn)物的作用，其中以高劑量組的作用效果最為明顯。該結(jié)果提示復(fù)方丹參片可通過抑制糖化血紅蛋白的生成而起到防治高水平糖化血紅蛋白誘發(fā)的并發(fā)癥的作用。實施示例2:對2型糖尿病大鼠糖耐量、胰島素耐量、胰島素敏感指數(shù)的影響一、實驗材料1藥物及試劑復(fù)方丹參片，批號B7A008，廣州白云山和記黃浦中藥有限公司。試驗時用研缽研成粉末，用蒸餾水溶解；成人用量為9粒/天，相當(dāng)于5.4g生藥/天；大鼠給藥劑量為人臨床給藥劑量的10倍(按體重計算)，即分別約為0.9g生藥/kg。達(dá)美康，天津華津制藥廠，批號070813。鏈脲佐菌素(str印tozotocin，STZ)，Sigma公司，臨用前用檸檬酸緩沖液配成濃度為3%的STZ溶液。羅康全血糖儀、血糖試紙，均瑞士羅氏制藥公司提供(批號449497)。胰島素試劑盒，北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供，批號20071025。諾和靈，批號SVG0426,丹麥諾和諾德公司生產(chǎn)。2、實驗儀器。SN-695B型智能放免r測量儀，上海原子核研究所日環(huán)一廠生產(chǎn)。3、實驗動物。清潔級Sprague一Dawley(SD)$大鼠，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。二、實驗方法。1、糖尿病大鼠模型的建立與分組隨機抽取6只大鼠作為正常對照組給普通詞料喂養(yǎng)。其余大鼠作為模型組，模型組大鼠給予高脂飼料(1%膽固醇，10%豬油，10%蛋黃粉，10%蔗糖,69%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)，4周后將模型組的動物禁食(不禁水)過夜，腹腔注射檸檬酸緩沖液(PH4.4)配置的STZ溶液30mg/kg。正常對照組腹腔注射同體積的檸檬酸緩沖液。3d后禁食過夜，尾靜脈用采血針采血測血糖。全血血糖>11mmol/L，尿糖+++++++，維持1周以上確定為糖尿病模型。2、分組給藥。將糖尿病大鼠分為3個組，分別為模型組、達(dá)美康給藥組、復(fù)方丹參片組，每組10只，組間及組內(nèi)動物分別作標(biāo)記。正常對照組給予正常飼料，其余各組均給予高脂高糖飼料。各給藥組給藥劑量見下表，模型對照組與正常對照組每天灌服等容量的蒸餾水，每天給藥1次，連續(xù)給藥4周。3、檢測指標(biāo)。(1)、給藥前后血糖、胰島素、胰島素敏感指數(shù)的變化于給藥前、給藥后2周，動物禁食12h，烏拉坦腹腔注射麻醉，眼球采血，分離血清，測定給藥前后血糖(FBG)及胰島素水平(INS)，計算胰島素敏感指數(shù)(ISI)。結(jié)果見表2和表3。表2不同給藥組糖尿病大鼠給藥前后血糖的含量。土"<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注給藥后與給藥前比較，*p<0.05,**p<0.01。(檢驗方法:PairedT-Test)從表2可以看出，正常組大鼠治療前后空腹血糖水平的基本不變；模型組治療后的血糖較治療前略有升高，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);達(dá)美康給藥組治療前后血糖無明顯變化；復(fù)方丹參片給藥組治療后血糖下降，有極顯著性差異(p<0.01)。提示復(fù)方丹參片能改善2型糖尿病大鼠胰島功能，降低空腹血糖水平。表3不同給藥組糖尿病大鼠給藥前后胰島素、胰島素敏感指數(shù)的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注給藥后與給藥前比較，*p〈0.05，**p〈0.01。(檢驗方法WilcoxonSignedRankTest)從表3可以看出，正常組大鼠治療前后空腹胰島素水平略有下降，無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)，胰島素敏感指數(shù)不變；模型組治療后血糖較治療前略有升高、胰島素敏感指數(shù)下降，均無統(tǒng)計學(xué)差異(p〉0.05);達(dá)美康給藥組治療前后空腹胰島素水平下降，無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)，而胰島素敏感指數(shù)升高，有統(tǒng)計學(xué)差異(p〈0.05);復(fù)方丹參片給藥組治療后空腹胰島素水平下降，無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)，而胰島素敏感指數(shù)升高，有統(tǒng)計學(xué)差異(p〈0.05)。提示復(fù)方丹參片一定程度上能降低2型糖尿病大鼠胰島素水平的同時又能降低血糖，即改善胰島素抵抗，提高胰島素敏感指數(shù)。具體實施方式實施例1:取丹參450克加乙醇加熱回流1.5小時，提取液濾過，濾液回收乙醇并濃縮至適量，備用；藥渣加50%乙醇加熱回流1.5小時，提取液濾過，濾液回收乙醇并濃縮至適量，備用；藥渣加水煎煮2小時，煎液濾過，濾液濃縮至適量，三七141克粉碎成細(xì)粉，與上述濃縮液和適量的輔料制成顆粒，干燥；冰片8克研細(xì)，與上述顆?；靹?，壓成1000片，包糖衣或薄膜衣，即得。實施例2:取實施例1中復(fù)方丹參片，于飯前或飯后溫水送服26片，每天服用14次可抑制糖尿病糖化血紅蛋白的生成。實施例3:取實施例1中復(fù)方丹參片，于飯前或飯后溫水送服28片，每天服用14次可改善2型糖尿病胰島素抵抗。權(quán)利要求1、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白生成的藥物中的應(yīng)用。2、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用。3、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的白內(nèi)障的藥物中的應(yīng)用。4、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的動脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。5、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的心肌梗死的藥物中的應(yīng)用。6、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的腦卒中的藥物中的應(yīng)用。7、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的心力衰竭的藥物中的應(yīng)用。8、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的牙周炎的藥物中的應(yīng)用。9、復(fù)方丹參片在制備預(yù)防或抑制糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。10、復(fù)方丹參片在制備改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及復(fù)方丹參片在制藥領(lǐng)域中的新用途，復(fù)方丹參片可通過抑制糖化血紅蛋白的生成而起到防治高水平糖化血紅蛋白誘發(fā)的并發(fā)癥的作用，可以用于制備預(yù)防和抑制糖尿病糖化血紅蛋白的生成及治療其誘發(fā)的慢性并發(fā)癥的藥物，這些慢性并發(fā)癥包括視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、動脈粥樣硬化、心肌梗死、腦卒中、心力衰竭、牙周炎、骨質(zhì)疏松；可以改善2型糖尿病胰島素抵抗，抑制糖尿病的發(fā)展和并發(fā)癥的產(chǎn)生。本發(fā)明的優(yōu)點在于復(fù)方丹參片是歷史悠久、療效確切的中成藥，副作用少，資源豐富，制作工藝簡易，質(zhì)量穩(wěn)定可控，可以用于制備預(yù)防或治療糖尿病糖化血紅蛋白誘發(fā)的慢性并發(fā)癥的藥物，其市場前景十分廣闊。文檔編號A61K36/185GK101249136SQ20071003180公開日2008年8月27日申請日期2007年11月29日優(yōu)先權(quán)日2007年11月29日發(fā)明者賴小平申請人:東莞廣州中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥數(shù)理工程研究院