專利名稱：一種治療心腦血管疾病的三七提取物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥領域，涉及一種新的以三七為來源的藥物組合物及其制備方法。
背景技術：
三七為五加科多年生草本植物三七Ranax notoginseng(Burk)F.H.Chen的根，主產(chǎn)于云南、廣西等地，別名參三七、田七。三七的主要活性成分是三七總皂苷(Panax Notoginseng Saponins，PNS)，其塊根中含皂苷約12％，目前已經(jīng)從三七各部位分離出20種達瑪烷型皂苷。國內外對三七總皂苷的藥理作用特別是心腦血管藥理作用的研究非常活躍，三七總皂苷商品名和處方名有三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等。三七總甙(PNS)為中藥三七的有效成分，它所含的人參皂甙單體水解后即生成人參二醇和人參三醇。人們從生藥三七中提取的PNS制劑與原生藥三七相比，具有質量穩(wěn)定、生物利用度高、使用方便、作用迅速、毒性低和安全性好的優(yōu)點。它可減低血小板表面活性、抗氧化、清除氧自由基、改善血液循環(huán)、耐缺氧，故有保護心肌、保護血管內皮、改善心功能等作用。用它治療缺血性心臟病、高血壓病、高黏血癥和高脂血癥等，療效顯著。
三七的提取物制劑較多，在臨床上有廣泛的應用，先前的三七提取物制劑受到當時技術水平的限制，普遍存在純度低、雜質成分多、顏色較深、工藝復雜，對于注射制劑還存在著安全隱患高的問題。近年來研究人員對三七的進一步研究表明，三七總皂苷中有效成分是三醇部分，因此三七三醇的含量影響著三七提取物制劑的療效。我們將新型強極性大孔吸附樹脂技術應用到三七的提取純化當中，很好地解決了上述問題。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的之一是提供一種新的三七提取物，本發(fā)明的另一個目的是提供該提取物的制備方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明采取了如下的技術手段我們提供了一種治療心腦血管疾病的三七提取物，含有80-99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白質。
我們所述的三七提取物可以按以下步驟制備1)處方量三七粉碎成粗顆粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液過濾；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏過夜，過濾，續(xù)濾液備用；3)續(xù)濾液上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，水沖洗后，70-85％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
其中較優(yōu)選的方案是提取步驟為處方量三七粗顆粒加入10倍量75％的乙醇提取三次，每次2小時。
制備工藝中所述的SA-1大孔吸附樹脂為強極性含有酰胺鍵的苯乙烯二乙烯苯骨架功能性大孔吸附樹脂，由天津市歐瑞生物科技有限公司研制開發(fā)。
較優(yōu)選的樹脂純化工藝是上大孔吸附樹脂吸附后，先用2倍床體積的水沖洗樹脂，再用2倍床體積80％的乙醇洗脫，流速為2小時每個床體積。
我們還提供了三七提取物在制備治療心腦血管疾病藥物中的用途，可以用于制備三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等。
本發(fā)明成功的制備了新的三七提取物，并且將該提取物進一步制備成三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等。使用新型強極性大孔吸附樹脂SA-1樹脂制備的該提取物克服了以往三七提取物制劑純度較低，顏色深，工藝復雜，尤其是用于注射制劑時因為有致敏物質導致不安全隱患高的問題。實踐證明，新的丹參降香提取物用于制備三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制劑工藝可控，質量穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，藥理實驗證明藥效優(yōu)于原工藝制備物。
下面用具體實施例進一步說明本發(fā)明，但是并不能用于唯一限定本發(fā)明。
具體實施例實施例1新的三七提取物的制備取1000g三七過粉碎機打成粗顆粒，加入10升70％乙醇提取三次，每次2小時，合并提取液過濾。續(xù)濾液回收乙醇后繼續(xù)濃縮到相對密度1.15-1.20(40℃)(實測值1.18)，充分攪拌下加入4倍量水分散，冷藏過夜，過濾。續(xù)濾液備用上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，流速2小時/BV，2BV水沖洗后，4BV80％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
樣品編號SQTQW-1實施例2三七提取物的制備取1000g三七過粉碎機打成粗顆粒，加入15升75％乙醇提取二次，每次2小時，合并提取液過濾。續(xù)濾液回收乙醇后繼續(xù)濃縮到相對密度1.15-1.20(40℃)(實測值1.16)，充分攪拌下加入5倍量水分散，冷藏過夜，過濾。續(xù)濾液備用上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，流速2小時/BV，2BV水沖洗后，3BV80％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
樣品編號SQTQW-2實施例3丹參降香提取物的制備取1000g三七過粉碎機打成粗顆粒，加入12升80％乙醇提取三次，每次3小時，合并提取液過濾。續(xù)濾液回收乙醇后繼續(xù)濃縮到相對密度1.15-1.20(40℃)(實測值1.19)，充分攪拌下加入5倍量水分散，冷藏過夜，過濾。續(xù)濾液備用上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，流速2小時/BV，2BV水沖洗后，3BV80％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
樣品編號SQTQW-3實施例4血栓通注射液的制備取實施例1制備的三七提取物SQTQW-1，加入600ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補充注射用水至1100ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實施例5血塞通注射液的制備取實施例2制備的三七提取物SQTQW-2，加入500ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補充注射用水至1000ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實施例6路路通注射液的制備取實施例3制備的三七提取物SQTQW-3，加入500ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補充注射用水至1000ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實施例7本發(fā)明新的血栓解注射液體外兔血栓溶解實驗實驗藥物本發(fā)明新的血栓解注射液。
原血栓解注射液取10ml，加入生理鹽水40ml制備成丹參注射溶液。
實驗動物1.0-1.5kg新西蘭兔2只實驗方法于兔頸靜脈取血，取兔靜脈血30ml于聚氯乙烯管中(自徑0.34cm)，室溫下讓其凝固，60min后用注射器推出凝塊，切成0.15cm3大小備用，共制備12塊，制得全血凝塊。取兔靜脈血30ml，用檸檬酸鈉抗凝，以800r/min離心10min，收集上層血漿及中層血小板，然后加入凝血酶，按每毫升血漿加0.1ml(10μ/ml)凝血酶的劑量，混勻后在平皿中形成凝塊，切成0.15cm3的小塊備用，共制備12塊，制得多血小板血漿凝塊。取濃度為20mg/ml(不含纖溶酶和纖溶酶原)的純纖維蛋原溶液2ml，加2ml(10μ/ml)的凝血酶，在自徑為0.5cm的小試管中形成凝塊，將凝塊輕輕搖出，切成0.15cm3的小塊備用，共制備12塊，制得純纖維蛋白凝塊。將制好的兔全血凝塊、兔多血小板血漿凝塊和純纖維蛋白凝塊分別投入高、低濃度的本發(fā)明新的血栓解注射液、原血栓解注射液溶液陽性對照液和生理鹽水陰性對照液中(均為600μl溶液)，置37℃恒溫水溶液中保溫并觀察其溶解情況，記錄其完全溶解時間，各實驗重復做3次。
實驗結果見表1
表1各組血栓完全溶解的時間比較(
)
注本發(fā)明注射液血栓凝塊溶解時間與原血栓解注射液對照組比較**P＜0.01實施例8利用血栓法測定本發(fā)明血塞通注射液對大白鼠血栓形成的影響實驗藥物本發(fā)明血塞通注射液。
原血塞通注射液。
實驗動物體重300-400克的SD大白鼠40只，雌雄各半。隨機分為空白對照、原血塞通注射液對照組、本發(fā)明血塞通注射液低劑量、本發(fā)明血塞通注射液高劑量四組份，每組10只。
實驗方法將大鼠給藥，給藥劑量，本發(fā)明血塞通注射液溶液低劑量組，本發(fā)明血塞通注射液溶液高劑量組，原血塞通注射液對照組灌胃?？瞻讓φ战M等容量生理鹽水，灌胃溶積均為6ml/kg，每天一次，共5天。大鼠給藥第5天，末次給藥后1小時后，動物稱重，iv 3％戊巴比妥納1ml/kg麻醉。仰臥位固定，取頸正中切口，分離氣管，分離雙側頸總A，V，在聚乙烯管中穿6cm5個0絲線，以肝素生理鹽水溶液充滿聚乙烯管，當聚乙烯管的一端插入左側頸外靜脈后，由聚乙烯管準確的注入肝素抗凝，再將聚乙烯管另一端插入右側頸動脈，打開動脈夾，造成A-V旁路，開放血流15min，取出硅膠管，抽出絲線(含血栓)，按號置于已稱重的小培養(yǎng)皿中，分析天平稱取血栓濕重，總重量減去絲線重量即得血栓重量。
結果見表2
表2各給藥組的血栓重量比較(x±s)
注與生理鹽水對照組比較**P＜0.01與丹參注射液對照組比較ΔΔP＜0.0權利要求
1.一種治療心腦血管疾病的三七提取物，含有80-99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白質。
2.如權利要求1所述的治療心腦血管疾病的三七提取物，是按以下步驟制備的1)處方量三七粉碎成粗顆粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液過濾；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏過夜，過濾，續(xù)濾液備用；3)續(xù)濾液上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，水沖洗后，70-85％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
3.如權利要求2所述的三七提取物的制備方法，其特征是按以下步驟制備的1)處方量三七粉碎成粗顆粒，加入8-15倍量65-85％乙醇提取，合并提取液過濾；2)提取液回收乙醇后加入水分散，冷藏過夜，過濾，續(xù)濾液備用；3)續(xù)濾液上預處理好的SA-1大孔吸附樹脂，水沖洗后，70-85％濃度乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，烘干得三七提取物。
4.如權利要求3所述的三七提取物的制備方法，其特征是提取步驟為處方量三七粗顆粒加入10倍量75％的乙醇提取三次，每次2小時。
5.如權利要求4所述的三七提取物的制備方法，其特征是SA-1大孔吸附樹脂為強極性含有酰胺鍵的苯乙烯二乙烯苯骨架功能性大孔吸附樹脂。
6.如權利要求3所述的三七提取物的制備方法，其特征是第三步中上大孔吸附樹脂的流速為2小時每個床體積，先用2倍床體積的水沖洗樹脂，再用2倍床體積80％的乙醇洗脫。
7.如權利要求1或2所述的三七提取物在制備治療心腦血管疾病藥物中的用途，可以用于制備三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液。
全文摘要
一種新的三七提取物，含有80－99.9％的三七三醇，不含有鞣制、蛋白等致敏物質。可以用于制備三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制劑。使用新型強極性大孔吸附樹脂SA－1樹脂制備的該提取物克服了以往三七提取物制劑純度較低，顏色深，工藝復雜，尤其是用于注射制劑時因為有致敏物質導致不安全隱患高的問題。實踐證明，新的三七提取物用于制備三七總皂苷片、三七總皂苷沖劑、三七總皂苷注射液、血塞通片、血塞通膠囊、血塞通軟膠囊、血塞通注射液、洛泰粉針劑、血栓通注射液、路路通注射液等三七提取物制劑工藝可控，質量穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，藥理實驗證明藥效優(yōu)于原工藝制備物。
文檔編號A61P9/10GK101081242SQ200710026318
公開日2007年12月5日 申請日期2007年1月16日 優(yōu)先權日2007年1月16日
發(fā)明者陳文展 申請人:陳文展