專利名稱：：氯吡格雷與聚陰離子的鹽及其在制備藥物制劑中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及活性成分氯吡格雷的鹽、其制備方法及其在藥物制劑中的應用。
背景技術：
：氯吡格雷((+)-(S)-ot-(2-氯苯基)-6，7-二氬漆吩并[3，2-c〗吡咬-5(4)-乙酸甲酯)(圖1)在EP-A-0099802和US4529596中作為活性成分被公開。氯吡格雷作為血小板凝集抑制劑，優(yōu)選用于預防血栓栓塞性疾病，例如中風或心肌梗塞等。在EP-A-0281459中提出了使用氯吡格雷的無機鹽形式，尤其是結晶硫酸氫鹽。該文還公開了氯吡格雷的其它鹽，但它們在某些情況下為無定形且/或有吸濕性，因此難以純化且難以制成藥物制劑。根據(jù)EP1480985B1，主要以藥物制劑使用的氯吡格雷硫酸氫鹽，因含酸性質子而具有強酸性，這導致其和賦形劑的相容性減弱。該專利與W02004/072085A2和EP1415993Al都提出了使用一價有機烷基和芳基磺酸鹽的形式，其基本上以晶體化合物形式存在，且易被純化。此類鹽能在諸如二嚙烷、甲苯等有機溶劑中制備。當鹽中含有常被吸附的溶劑殘留作為溶劑化物時，有利于純化的結晶性非常明顯。結晶氯吡格雷硫酸氫鹽和結晶有機烷基或芳基磺酸鹽的缺點在于溶解度有限和溶解動力學緩慢。US6284277和W02004/026879因而公開了制備無定形形式的氯吡格雷硫酸氫鹽的方法，這種無定形形式的氯吡格雷硫酸氫鹽比在諸如甘露醇或丙氨酸之類的小分子或聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、羥丙基纖維素等中性聚合物(WO2004/026879)的存在下對結晶氯吡格雷硫酸氫鹽進行冷凍千燥而得的結晶形式具有更好的溶解度。然而，這種方法使硫酸氫鹽的強酸性得以保留，這可能會給賦形劑帶來不良影響。例如在酸性條件下聚乙二醇會加速分解。
發(fā)明內容在我們的研究中驚奇地發(fā)現(xiàn)，與EP-A-0281459,W02004/072085A2，EP1415993A1，EP1480985B1中所公開的相反，氯吡格雷也能和聚陰離子形成穩(wěn)定的、基本上為無定形的鹽，該鹽適合制備活性成分的口服藥物制劑。該聚陰離子例如可舉出角叉菜膠、聚苯乙烯磺酸鹽(PSS)、或聚乙烯磷酸鹽。因此本發(fā)明的一實施方式涉及氯吡格雷與聚陰離子的鹽。另一實施方式涉及這些鹽在藥物制劑中的應用。又一實施方式涉及穩(wěn)定的混合鹽，該混合鹽可從上述氯吡格雷聚陰離子鹽和一價氯吡格雷鹽例如鹽酸鹽中沉淀而得。這些化合物中的聚陰離子鹽的含量至少為10°/4，優(yōu)選至少為20%，進一步優(yōu)選至少為30%,最優(yōu)選至少為40%。另外，本發(fā)明進一步的實施方式還涉及氯吡格雷聚陰離子鹽的制備方法，優(yōu)選包括從酸性水溶液中沉淀析出的步驟。優(yōu)選氯吡格雷的聚陰離子鹽穩(wěn)定且不吸濕。而且這種鹽含有高含量的氯吡格雷和低含量的附加氫離子。而且這種鹽能以工業(yè)化標準制備。并且，這種鹽尤其容易在胃腸道中迅速溶解。特別優(yōu)選在醫(yī)藥應用方面具有穩(wěn)定性且無吸濕性的氯吡格雷的聚陰離子鹽。作為氯吡格雷，可使用其兩個異構體的消旋混合物，也可以使用單個異構體，優(yōu)選(S)-(+)異構體因為其具有高活性。聚陰離子是高分子化合物，其分子量優(yōu)選在500g/mo1以上，每分子具有至少4個負電荷單元，優(yōu)選具有7個以上、特別優(yōu)選具有10個以上。負電荷優(yōu)選來自于pka值<3.5的酸性基團，例如已知有有機硫酸根、磺酸根或磷酸根基團及一些羧酸根基團。已知具有上述特性的聚陰離子一方面是一些自然形成的化合物及它們的改性體，例如角叉菜膠，硫酸軟骨素、肝素、右旋糖酐硫酸鹽，磺基乙基纖維素、DM。另外，也適合采用合成的聚陰離子，例如聚苯乙烯磺酸鹽、聚茴香腦磺酸鹽、聚乙烯硫酸鹽、聚乙烯磺酸鹽、多磷酸鹽和聚乙烯膦酸鹽。和迄今為止口服使用的氯吡格雷相比，與肝素、聚茴香腦磺酸根或與DM的鹽形式可允許制成胃腸道外施用形式的組合產品(某些情況下可作為儲存產品)。和迄今為止記載的結晶鹽相比，所制備的聚鹽，它們部分為無定形，優(yōu)選基本上或主要為無定形，或全部為無定形，這樣使得它們比純結晶鹽具有更好的溶解動力學。并且，如實施例所述，聚陰離子鹽能容易被純化并制備成高純度產品。聚陰離子鹽也能和一價陰離子鹽例如鹽酸鹽一起被制備成混合鹽。因此，1.獲得穩(wěn)定的無機鹽，例如鹽酸鹽；2.在全部組分中獲得高含量的活性成分；3.溶解度只略微降低，但無定形形式基本被保留。與氯吡格雷硫酸氫鹽(HS(V)相比，制備出的聚陰離子鹽僅含有很少的游離H+離子，因此酸性明顯降低，可避免對賦形劑或人體的毒副反應。研究中還驚人的發(fā)現(xiàn)，在低;pH值范圍內，當易溶性氯吡格雷鹽的溶液被添加到聚離子水漆液中時，期望的氯吡格雷聚陰離子鹽能夠容易地被沉淀出來。產生的沉淀可通過離心或過濾而容易地脫除。被用作起始原料的易溶性氯吡格雷鹽優(yōu)選具有無機陰離子，例如氯吡格雷硫酸氫根、氫溴酸根，或特別是易溶的鹽酸根?？蛇M行另外的或任選的冷凍千燥的步驟，以及任選的隨后例如通過洗滌除去取代陰離子的步驟。在和聚陰離子反應之前，這些起始原料也可以從游離氯吡格雷基質中直接制備，尤其可通過以下三種方法制備a.將樹脂狀氯吡格雷基質溶解在曱醇中，與HC1溶液反應，然后蒸發(fā)除去甲醇。b.通過分散氯吡格雷夜滴，將樹脂狀氯吡格雷基質溶解于HC1中。c.把氯吡格雷基質提取到例如氯仿，乙醚、乙酸乙酯等水不溶性有機溶劑中，然后與適合的聚陰離子鹽酸溶液一起振動。已經發(fā)現(xiàn)，和制備一價陰離子的方法相比，氯吡格雷和陰離子之間并不是等摩爾的，使用顯著過量的氯吡格雷是有利的。這樣一方面強力提高了析出的鹽的收率，另一方面產生了聚合物的更大的負載量，從而得到更好的氯吡格雷/聚陰離子的比率。氯吡格雷聚陰離子鹽的制備在以下的實施例和附圖中進行說明和顯示。圖1:活性成分氯吡格雷的結構和制備氯吡格雷聚陰離子鹽的反應流程圖圖2:不同濃度的氯吡格雷鹽酸鹽在pH1.2下在水中的吸收光譜(實線(2):0.015M,虛線(1):0.0015M)圖3:在25^的0.05M的HC1中氯吡格雷從鹽中的釋放曲線(實線)和完全溶解時的最大值(虛線)3a)氯吡格雷從氯牝格雷-PSS,中的釋放3b)氯吡格雷從氯吡格雷-角叉菜膠中的釋放3c)氯吡格雷從氯吡格雷-角叉菜膠/HCl混合鹽中的釋放圖4:制備的氯吡格雷聚陰離子化合物的粉末衍射圖具體實施例方式樣品的分析鑒定通過UV/Vis光鐠儀(Varian，Cary50)對制備的化合物做定性和定量分析，提供水中的氯吡格雷H+在250-285nm范圍內的特征光譜(與甲醇中的基質的光譜不同)(圖2)，UV/Vis光譜的特征峰位于入，=271n邁s=680L/molxcmXmax=278nms=603L/molxcm入訓=301nms=105lVmolxcm入幅=342nms=46L/molxcm在制備的化合物中，氯吡格雷和聚陰離子的比例可通過CHN分析做進一步的確定。氯吡格雷聚陰離子鹽的溶解動力學和溶解度可以在0.05M的HC1中通過UV/Vis光i普進行測定。結晶/無定形的比率的X射線檢查用ST0ESTADIP透射衍射儀在粉末樣品上進行，采用CuKocl射線(1.5406A)。實施例1由氯吡格雷HBr制備氯吡格雷-PSS將804mg(2mmo1)的氯吡格雷HBr溶解于20mL的0.2MHCl中，在振蕩的同時加入10mL0.1摩爾的聚苯乙烯磺酸酸(PSS)鈉溶液(摩爾濃度以單體為基準)。邊攪拌邊冷卻溶液至5X:，然后通過離心分離將沉淀脫除。沉淀用lmL0.05M的HCl洗滌，洗滌3次后真空干燥。收率理論值505mg，實測值230mg-46%活性成分負栽量活性成分負栽量可在2mL0.05MHCl(0.885g/L)中溶解1.77mg的產品來進行分析，同時記錄UV/Vis光譜。在271nm時的消光度是E=1.628，這里，PSS的消光系數(shù)e27產330L/molxcm，氯吡格雷的消光系數(shù)￡271=680L/molxcm,從而得至'Je271=1010L/molxc邁。該結果非常接近產品中的58.5%m/m的氯吡格雷負栽量(M產505g/mo1的1:1的產品)，比理論上的63%略低。第二次分析得到的負載量為57.9%。這意味著92。/的PSS基團負載有氯吡格雷。元素分析起始原料和制備化合物的元素分析值列于表l，運用理論上的PSS組成來計算化合物，且假設PSS和氯吡格雷在產品組成中為1:1的負載比。表l:起始原料和制備化合物的元素分布百分比分子量氯吡格雷氫溴酸鹽402g/mol，PSS(單體單元)206g/mol，氯吡格雷-PSS505.45g/mol<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>元素分析證實了期望產品氯吡格雷-PSS的組成。同樣，分光光謙結果確認負栽量較低，因為碳含量和硫舍量比期望的100%氯吡格雷負栽量時的略寸氐。溶解度化合物的溶解度可以通過將每個化合物沉浸在20mg500wL的0.05MHC1中，在25t:下振蕩、孵育48小時來測定。沉淀被充分離心，上清液在0.05MHCl中稀釋，并記錄下光i普。通過消光度測定化合物的溶解度L(單位g/L)。L氣處格雷-Fs產0.0195mol/L=9,9g/L溶出度在25"下0.05M(pHl.3)HCl溶液中測定溶解動力學。為此，稱取在缽中研成粉狀的一定量的氯吡格雷鹽放入4mL的石英管中，然后把它們放在具有磁力攪拌器的UV/Vis光譜儀中。在t。=0秒，加入2mL的0.05MHCl，在271nm處消光度逐漸增加。攪拌20小時，并在50"短暫加熱，測定在U完全溶解時的消光度。圖3a示出了溶解動力學和完全溶解時的值(虛線)。25'C下經過20分鐘的氯吡格雷-PSS化合物的釋放度為83%。實施例2由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-角叉菜膠(方法(a),見上文)在室溫下將6.42g(20mmol)氯吡格雷溶解于lOOmL甲醇中。向其中加入200mL0.2M(40mmol)HC1。在旋轉蒸發(fā)器中將澄清溶液濃縮至約120mL,隨后用水補充到150mL。由此獲得pHO.67的0.133M的澄清的氯吡格雷鹽酸鹽溶液。在室溫下，邊快速攪拌邊將90mL(12mmol)的該溶液添加到60mL的0.1M(6mmo1)IV型入-角叉菜膠溶液(Sigma-Aldrich)中。在攪拌的同時將溶液冷卻至5X:,沉淀被濾出。將沉淀通過懸浮在24mL的0.05MHC1中進行洗滌，洗滌3次后過濾，然后將沉淀真空千燥。收率理論值3324mg，實測值2042mg=61.4%活性成分負栽量活性成分負栽量可用與實施例1同樣的方法測定2次，結果分別為57.26%和57.19%,即，為理論負栽量57.9%的98%。元素分析起始原料和制備化合物的元素分析值列于表2。所測得的角叉菜膠的值與分子式明顯不同。測得的角叉菜膠組成用于計算氯吡格雷-角叉菜膠鹽的理論值。產品的組成假設角叉菜膠和氯吡格雷的配比為1:1。表2起始原料和制備化合物的元素分布百分比分子量氯吡格雷基質3ng/mo1，角叉菜膠(單體單元)256g/mol，氯吡格雷-角叉菜膠554g/mol條物氯條雷絲團-德幼絲團-p她型)角戲膠氯p緣雷-氯'嫌雷-元素理她%理她%理她%測量值%%實須他c47.7128.2422.8622.2844.4680942.12H4.223.142.703.7994.7878744.796N3.480.000.000.1452.5601562.66907.9547.0648.25———s7.9512.5515.2411.7411.1495011.75CI8.810.000.000.36.2917238.23Br19.880.000.00—0—Na09.0210.95—0-總量100.00嵐00100.0038,2664.3769.69元素分析的結果和預期的組成有所不同，這可解釋為自然形成的角叉菜膠的組成是變化的。溶解度溶解度可用與實施例1同樣的方法在25匸下0.05MHC1中測定。L氣'比格雷-角又菜膠=0.0634mol/L=35.lg/L溶出度溶出度可用與實施例1同樣的方法測定。圖3b示出了溶解動力學和完全溶解時的值(虛線)。251C下經過20分鐘的氯吡格雷-角叉菜膠化合物的釋放度為99%。產品迅速溶解，幾分鐘內幾乎100%完全溶解。實施例3由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-角叉菜膠/HCl混合鹽(方法(b)，見上文)通過劇烈攪拌和超聲將3.21g(lOmmol)氯吡格雷基質溶解于50mL2M(lOO咖ol)HC1中。與使用低濃度的HC1相比，上述情形可在1分鐘內完成溶解。溶液的pH值用4mL10M的NaOH(90mmol)調整至0，在劇烈攪拌下加入到100mL的0.05M的X-角叉菜膠水溶液(5mmo1)中。再加入10M的NaOH，使pH值提高到pHl，在攪拌的同時將溶液冷卻至5"C。沉淀被離心出來，將沉淀用12mL的0.05MHC1洗滌，洗滌3次后真空干燥。收率理論值2770mg，實測值1620mg=58.5%活性成分負載量活性成分負載量可用與實施例1同樣的方法測定2次，結果分別為72.26%和74.1%，也就是純氯吡格雷-角叉菜膠鹽理論負載量57.9%的126%。此差異是因為它和氯吡格雷鹽酸鹽形成了混合鹽，下文中元素分析證實了這點。純氯吡格雷鹽酸鹽不可能從它的水溶液中單獨被分離出來，文獻中描述其吸濕性很強。從負載量(100%角叉菜膠鹽-57.9%負載量，100%鹽酸鹽=89.9%負載量)計算角叉菜膠陰離子和氯酸根陰離子的比例，角叉菜膠氯酸根的比例為1.13。元素分析制備化合物的元素分析為其是混合鹽提供了證據(jù)。利用元素分析得到的角叉菜膠組成用于計算氯吡格雷-角叉菜膠鹽的理論值。產品組成假設角叉菜膠和氯吡格雷的配比為1:1(表3)。表3制備化合物的元素分布百分比化合物氯吡格雷-角叉菜膠氯吡格雷-角叉菜膠:%%<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由于氯化物混合鹽的形成，元素分析的結果和預期的組成明顯不同。特別是從高氯含量、'高碳和氯的含量比率證實了混合鹽的形成，后者與由負栽量計算出的角叉菜膠陰離子和氯酸根陰離子的比率非常一致。溶解度溶解度可用與實施例1同樣的方法測定。在251C下0.05MHC1中為L氣吡格雷/HC1—0.026mol/L=14.4g/L。這明顯低于純的單獨的鹽的溶解度，這解釋為在低pH值下優(yōu)先形成該混合鹽。溶出度溶解動力學可用與實施例1同樣的方法測定。圖3c示出了溶解動力學和完全溶解時的值(虛線)。氯吡格雷-角叉菜膠/HCl混合鹽比純的角叉菜膠鹽的溶解減少。25"C下經過20分鐘的釋放度僅為89.5%。實施例4從氯吡格雷硫酸氬鹽制備氯吡格雷-右旋糖酐硫酸鹽(方法C)將0.418g(lmmol)氯吡格雷硫酸氫鹽溶解在30mL的水中，在分液漏斗中用50%乙酸乙酯和50°/。乙醚的混合液層覆蓋。加入3.5mL10M的NaOH后進行長時間振蕩。在起初渾濁的水相基本變清澈之后分層。有機相用20mL的水洗滌l次。隨后加入5mL0.1M的右旋糖酐硫酸鹽溶液和5mL0.3MHC1進行長時間振蕩。白色沉淀從水相中分離。脫除有機相后，沉淀物被離心出來，將沉淀用0.05MHC1洗滌3次，然后真空干燥。分子量Mw-617g/mol收率理論值308.5mg，實測值212mg=68.7%活性成分負載量活性成分負栽量可用與實施例1同樣的方法測定2次，結果分別為59.2%和60.7%。這比;^艮據(jù)生產商(sigma)給出的疏酸鹽含量預測的數(shù)值還高。本化合物及以下化合物只測定溶解度和氯吡格雷含量百分比。溶解度溶解度可用與實施例1同樣的方法測定。在251C下0.05MHC1中L氣郝雷-右旋糖肝械酸鹽-O.019mol/L=11.7g/L。這明顯比純的單獨的鹽的溶解度低，這解釋為在低pH值下優(yōu)先形成該混合鹽。實施例5由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-肝素(方法a)該鹽(Mw-584g/mol)可用與實施例2同樣的方法進行小批量制備。收率為22%，活性成分負載量測定為53,4%，和理論值(54.9%)基本相符。在0.05MHC1中的溶解度L氣*格雷—肝*=0,084mol/L=49.lg/L。實施例6由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-硫酸軟骨素(方法a)該鹽(Mw-530g/mol)可用與實施例2同樣的方法進行小批量制備。然而此種情況下沒有沉淀析出。因此將溶液進行冷凍干燥，并通過洗滌3次將NaCl從所得固體中除去。收率為15%，活性成分負栽量測定為51.7%(理論值為60.6%)。低活性成分負栽量可能是由于極高的溶解度，溶解度為L氣贈-硫酸軟骨素-0.45mol/L=238g/L。實施例7由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-聚乙烯磷酸鹽(方法a)該鹽(Mw=443g/mol)可用與實施例6同樣的方法制備。得到凝膠狀產物，但經冷凍干燥后仍為粉末。收率為35%，活性成分負載量為73.2%(每份氯吡格雷相對每份砩酸根基團的理論負載量為72.5%)，溶解度為L氣吡格雷-聚乙烯褲酸鹽—0.22mol/L=97g/L，在高度稀釋下仍然有不溶顆粒存在。實施例8由氯吡格雷基質制備氯吡格雷-聚乙烯磺酸鹽(方法a)該鹽(Mw=428g/mol)可用與實施例6同樣的方法制備。收率為19%，活性成分負栽量為48%(理論值為75%),低活性成分負栽量可能是由于該鹽的高溶解度L氣處格雷-聚乙蜂橫酸鹽-0.4mol/L=171g/L，這可能是由于聚陰離子的低疏水性?；衔锏慕Y晶性分析對實施例1-3的樣品，即氯吡格雷-PSS、氯吡格雷-角叉菜膠和氯吡格雷-角叉菜膠/HCl用X射線粉末衍射儀進行測定，同時用氯吡格雷硫酸氫鹽作為對照。圖4示出了相應的圖鐠。其中，氯吡格雷硫酸氫鹽(綠色，曲線(3))顯示出基本為結晶結構，而所有制備產品測定出的結構基本上是無定形。在完全無定形形式的氯吡格雷-PSS(圖中為紅色，曲線(2))和具有十分弱的結構的氯吡格雷-角叉菜膠(曲線(4))，和具有一定程度顯著結構的氯吡格雷-角叉菜膠/HCl(曲線(1))之間雖然有略微差距，但它們仍基本上為無定形。權利要求1.活性成分氯吡格雷與聚陰離子的鹽，其中，該鹽基本上或主要為無定形形式，且聚陰離子具有至少4個負電荷，優(yōu)選具有7個以上負電荷，最優(yōu)選具有10個以上負電荷。2.權利要求l的活性成分氯吡格雷與有機聚陰離子的鹽，其中，有機聚陰離子具有疏酸根、磺酸根或礴酸根基團作為栽流子。3.權利要求1或2的鹽，其中，所述聚陰離子包括角叉菜膠、硫酸軟骨素、藻酸硫酸鹽、右旋糖酐硫酸鹽，磺基乙基纖維素和肝素的所有類型。4.權利要求1-3任T項的鹽，其中，所述聚陰離子是優(yōu)選具有硫酸根、磺酸根、磷酸根或膦酸根的合成聚合物，例如包括聚苯乙烯磺酸鹽，聚茴香腦磺酸鹽、聚乙烯硫酸鹽、聚乙烯磷酸鹽。5.權利要求l-3任一項的鹽，它是與聚陰離子肝素或DNA的鹽，可用作組合產品。6.混合鹽，由權利要求1-5的鹽和一價氯吡格雷鹽組成，其中，所述聚陰離子鹽含量至少為10%,優(yōu)選為30%以上。7.權利要求1-6的鹽的制備方法，其中，所述鹽從主要是易溶性氯吡格雷鹽的水溶液與聚f月離予的水溶液中沉淀。8.權利要求l-6任一項的鹽在制備藥物制劑中的用途。9.藥物制劑，包含權利要求l-6任一項的鹽。全文摘要本發(fā)明涉及活性成分氯吡格雷與聚陰離子的鹽。該鹽主要是無定形形式，該聚陰離子具有至少4個負電荷，優(yōu)選具有7個以上負電荷，特別優(yōu)選具有10個以上負電荷。氯吡格雷+HCl→氯吡格雷H<sup>+</sup>+Cl<sup>-</sup>n氯吡格雷H<sup>+</sup>+聚陰離子<sup>n-</sup>→氯吡格雷n聚陰離子↓文檔編號A61K31/4365GK101360749SQ200680046892公開日2009年2月4日申請日期2006年12月15日優(yōu)先權日2005年12月15日發(fā)明者B·鮑德,L·達赫納,M·剛扎爾茲菲爾雷羅申請人:凱普休路森納米科學股份公司