專利名稱：：浮游病毒感染對策方法
技術領域：
：本發明涉及浮游病毒的感染對策方法。
背景技術：
：例如，在工作場所等處，存在受到某些種類的呼吸道病毒感染的從業人員時，有在該工作場所內工作的其它從業人員被相同的呼吸道病毒感染的可能性。此時，存在著呼吸道病毒疾病發病，身體狀況失調，而使職場的業務效率大幅下降的情況。所謂呼吸道病毒是在動物中引起肺炎等呼吸器官疾病的病毒的總稱。其中，包括流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、禽流感病毒、SARS病毒、冠狀病毒等。而且，一旦被這些呼吸道病毒感染，呼吸道病毒疾病發病，則極為嚴重時有導致死亡的情況。這種呼吸道病毒還存在于由其感染者的呼吸器官排出的飛沫中。由于這種飛沫可以浮游于空氣中，因此通過未感染者吸入被含有呼吸道病毒的飛沫污染的空氣，而擴散感染，蔓延呼吸道病毒。而且，麻滲病毒和風滲病毒中，未感染者吸入由該病毒的感染者的呼吸器官排出的飛沫污染的空氣，通過呼吸道二次感染，因此雖一般并不稱為"呼吸道病毒"，但屬于相同范疇。為了防止呼吸道病毒的蔓延，除去浮游于室內(空氣中)的呼吸道病毒或使之失活是一種有效的方法。作為可以使浮游于室內的呼吸道病毒失火的方法，可以列舉，例如稱之為熏蒸的方法(參照非專利文獻l)。非專利文獻l:"殺菌.消毒手冊"醫齒藥出版，1991年，殺菌-消毒手冊編集委員會
發明內容所謂熏蒸，是一種使將藥劑氣化形成的氣體充滿于密閉的室內，殺死存在于該室內的蟲、螨、霉菌等的方法。可以在熏蒸中使用的藥劑，可以列舉，例如甲醛、溴化甲基、磷化鋁、氰酸氣體等。不過，可在熏蒸中使用的藥劑對生物體毒性很大，熏蒸時，需要從業人員中斷其業務，退出室內，業務效率降低。本發明鑒于上述實際情況而完成，提供了一種浮游病毒感染對策方法，該方法在存在動物且病毒浮游的空間中，在動物安全生存于其空間中的原本狀態下，可以防止對動物的病毒感染等。用于實現上述目的的本發明的浮游病毒感染對策方法的第一特征構成在于在浮游病毒可以存在的空間中供給二氧化氯氣體，使前述空間中二氧化氯氣體的濃度為動物可以生存而前述浮游病毒失活的濃度。二氧化氯氣體具有強氧化力和殺菌力，以及強殺病毒效果。因此，通過使二氧化氯氣體與浮游病毒接觸，可以使浮游病毒失活。本說明書中所謂"失活"是指，例如浮游病毒死亡，在宿主中無法增殖的狀態，或浮游病毒雖生存但在宿主中幾乎無法增殖的狀態。因此，如本構成那樣，在某種空間中供給二氧化氯氣體，如果將該空間中二氧化氯氣體的濃度維持在浮游病毒失活的濃度，則即使浮游病毒由外部帶入該空間，該浮游病毒也可立即失活。因此，可以防止對存在于該空間中的動物的病毒感染。而且，由于前述空間中的二氧化氯氣體的濃度是動物可以生存而浮游病毒失活的濃度，因此在該空間中動物可以進行正常的生活。因此，例如，在工作場所等處，從業人員就可以照原樣工作，該工作場所中的空氣可維持在浮游病毒失活的狀態。于是，通過防止病毒的二次感染，可以試圖維持從業人員的健康，并且不需要中斷在通過熏蒸等進行空氣凈化時的業務，因此沒有業務效率降低的顧慮。而且，所謂"動物"是指，例如人、家畜等哺乳類、鳥類、爬行動物等在前述空間中生存、具有被浮游病毒感染的可能性的動物。本發明的第二特征構成在于在浮游病毒可以存在的空間中供給二氧化氯氣體，使前述空間中二氧化氯氣體的濃度為動物可以生存而可以防止前述浮游病毒向前述動物感染的濃度。根據該構成，例如浮游病毒成為喪失感染能力而無法在宿主間感染的狀態。所謂"喪失感染能力"是指例如，使浮游病毒用于感染宿主所必需的表面蛋白質變性，而無法感染該宿主的狀態。因此，可以防止宿主間的感染，動物由于感染浮游病毒而致病毒性疾病發病的可能性變得非常低。本發明的第3個特征構成在于在浮游病毒可以存在的空間中供給二氧化氯氣體，使前述空間中二氧化氯氣體的濃度為動物可以生存而可以抑制前述浮游病毒感染的動物的發病的濃度。根據該構成，動物即使被浮游病毒感染，也可以減少病毒性疾病發病的可能性。本發明的第4個特征構成在于在浮游病毒可以存在的空間中供給二氧化氯氣體，使前述空間中二氧化氯氣體的濃度為動物可以生存而可以治療由于前述浮游病毒感染而發病的動物的濃度。根據該構成，即使動物被浮游病毒感染，病毒性疾病發病，也可以減輕癥狀。而且，可以縮短其發病期。本發明的第5特征構成在于前述空間中的二氧化氯氣體的濃度為0扁lppm-0.1ppm。根據該構成，空間中的二氧化氯氣體的濃度不到0.0001pm時難以使浮游病毒失活，而且，二氧化氯氣體的作業環境基準值為O.lppm，因此濃度比O.lppm大時，對動物有害。因此，空間中的二氧化氯氣體的濃度為0.0001ppm-0.1ppm的極低濃度時，使浮游病毒失活，而且，動物可以在該空間中更安全地生存。本發明的第6個特征構成在于，前述浮游病毒為呼吸道病毒。才艮據本構成，可以有效實施對呼吸道病毒的感染預防，或對于可感染后發病的各種呼吸器官疾病(例如，肺炎等)的預防或治療。本發明的第7特征構成在于，前述呼吸道病毒為流感病毒。才艮據本構成，可以有效實施對流感病毒的感染預防，或對于可感染后發病的各種癥狀(例如，發熱、鼻弟、咽喉疼痛等)的預防或治療。圖1測定與二氧化氯反應的G6PD的酶活性的圖具體實施方式[實施方式本發明可以使用例如適當的二氧化氯氣體產生裝置來實施。作為本發明中可以使用的二氧化氯氣體產生裝置，可以列舉大型的擱置型的裝置、小型的設置式的裝置、小型攜帶式裝置，或在凝膠中填充發生用藥劑或混合干燥藥劑，半自動地長期產生低濃度的二氧化氯氣體的器具。但是，并不限于這些例子，例如，還可以隨時使用就像在口腔中^U^低濃度的二氧化氯氣體來使用那樣的裝置。該二氧化氯氣體發生裝置配備反應槽，可以^f^存藥液的藥液罐、液體泵、空氣泵、稀釋器等而構成。藥液罐存在兩種，各藥液罐中分別容納亞氯酸鹽水溶液和酸。作為可以4吏用的亞氯酸鹽，可以列舉亞氯酸堿金屬鹽(亞氯酸鈉、亞氯酸鉀、亞氯酸鋰等)，或亞氯酸堿土類金屬鹽(亞氯酸釣、亞氯酸鎂、亞氯酸鋇等)，但不限于這些物質。而且，作為可以使用的酸，可以列舉鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸，但不限于這些物質。液體泵附隨藥液罐而配備，根據時間可以精確控制送液。通過液體泵，由兩個藥液罐分別定期向反應槽輸送規定量的亞氯酸鹽水溶液和酸，混合進行反應，從而產生二氧化氯氣體。將產生的二氧化氯氣體通過稀釋器與由空氣泵輸送的一定流速的空氣混和，稀釋至規定濃度(優選0.8ppm)。在浮游病毒可以存在的所希望的空間中供給稀釋的二氧化氯氣體，將在該空間中的二氧化氯氣體的濃度維持在動物可以生存而浮游病毒失活的濃度。該濃度可以是可防止浮游病毒對動物的感染的濃度，或可以控制感染了浮游病毒的動物的發病的濃度，或可以治療由于浮游病毒感染而發病的動物的濃度。具體地，根據后述的小鼠的流感感染實驗的結果，該濃度維持在0.05ppm-0.1ppm。而且，二氧化氯氣體的濃度可以例如按如下方式設定。后述的小鼠的流感感染實驗中，施予10LDs。以上的高濃度的病毒，使其感染小鼠。一般而言，在如劇場那樣的大型設施內發生流感等呼吸道病毒感染病時，極低濃度的病毒就成為問題。例如，即使是0.02LDs。這樣的濃度也可引起感染。此時的空氣中的病毒濃度是上述濃度的約500分之一(IOLD知/0.02LD5。)。因此，為了預防流感病毒的感染所必需的二氧化氯氣體濃度為0.0001ppm(0.05/500)。換言之，根據本發明，用前述二氧化氯氣體發生裝置，將空間中的二氧化氯氣體濃度維持在極低濃度(0.0001-0.1卯m)。此時，二氧化氯氣體的濃度為對動物通常安全的濃度，而且，對于浮游病毒，可以維持通常使其活性失活或喪失感染能力的濃度。(空間)所謂可以適用于本發明的空間，可以列舉例如劇場、機場的大廳、事務所、教室等人出入的空間，或鼠籠、塑料大棚等飼養動物或栽培植物的空間，或人的口腔內等空間。但是，不限于這些空間，只要是隨時可以形成封閉狀態或開滋:狀態的空間，就可以適用于任意空間。(浮游病毒)所謂本發明中的浮游病毒是指可以浮游于上述空間中的病毒，可以例舉，例如流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、禽流感病毒、SARS病毒、冠狀病毒、RS病毒等呼吸道病毒等，但不限于此。例如，盡管一般不稱為"呼吸道病毒"，但由于可考慮用本發明進行預防和治療，因而通過飛沫經由呼吸道二次感染的麻滲病毒和風滲病毒也是本發明的對象。(動物)本發明中作為對象的生物是指，例如，人、家畜等哺乳類、鳥類、爬行動物等，在前述空間中生存，具有被浮游病毒感染的可能性的動物。實施例以下，對于本發明，通過實施例進行具體說明，但本發明不限于這些實施例。(二氧化氯氣體生成)在各藥液罐中分別預先填充0.250/o的亞氯酸鈉(NaC102)和0.9%的鹽酸。將它們通過附隨于各個罐的液體泵定期送到反應槽中。通it^混合亞氯酸鈉和鹽酸使之反應后生成的二氧化氯中^V空氣，作為氣體M出。此時放出的二氧化氯氣體的濃度為約50ppm。放出的二氧化氯氣體通過稀釋器與一定流速的空氣混合，稀釋至低濃度。本實驗中，稀釋后放出的二氧化氯氣體的濃度為0.8ppm。如下所述，在小鼠的籠中進一步稀釋，濃度達到0.08卯m或其之下。通常用二氧化氯測定器(4330-SP,美國InterScan公司制)測定二氧化氯氣體的濃度。(流感病毒的制備)使用如下的流感病毒以作為犬腎細胞的MDCK細胞(ATCCCCL34)作為宿主，預先在含有2%胎牛血清的培養基中使A型流感病毒株A/PR8(H1N1)增殖而得的流感病毒。以這種方式增殖的病毒暫時懸浮于磷酸緩沖液(PBS)，煙霧化，然后使用。此時，懸浮的病毒的濃度，作為煙霧f^鼠籠時，分別調制成50%的小鼠死亡的濃度(LDs。)的10、100、1000倍的濃度。(動物實驗)使用8周齡的雄CD-1小鼠進行動物實驗。將15只小鼠作為一組，將這樣一組小鼠^V大小為25.5cmx36.8cmx8.0cm的鼠籠中。在其中以每分鐘12.5升的流速輸送A型流感病毒的煙霧。此時，按0.6-1.8升/分鐘左右的$錄同時輸送0.8ppm濃度的二氧化氯氣體。鼠籠內的二氧化氯氣體由于煙霧的存在而被稀釋。本實驗中，鼠籠中的實測的二氧化氯氣體濃度可以設定為Oppm，0.03ppm，0.05卯m，0.08ppm,獲得這四種濃度中的數據。病毒的煙霧對小鼠暴露的時間為15分鐘。作為原則，在導入含有病毒的煙霧的同時導入二氧化氯氣體，M—部分實驗中，比煙霧導入時更晚些導入二氧化氯氣體。這是為了確認，如下所述，二氧化氯氣體對于已經ii^部的病毒是否防止發病。作為對照實驗，使用不含病毒的磷酸鹽緩沖液，在鼠籠中導入該磷酸鹽緩沖液的煙霧。病毒暴露后的小鼠，一次一只裝入到各個鼠籠中，分別隔離飼養兩周。這期間，為了確認病毒感染的有無及其程度(病毒數)，在病毒暴露第3-4天時從15只中的5只中摘出其肺組織。將摘出的肺搗碎后，分離病毒，測定其量。肺內的病毒的定量通過以下方式進行懸浮肺的粉碎物，制作出其稀釋系列，使其感染培養細胞，求出TCIDso值(50。/。組織培養感染量)。另一方面，對于剩下的10只小鼠，觀察其生死直至第14天。這期間，死亡的情況下，在死亡的那一時刻，不死亡的情況下，在第14天，摘出肺組織，用曱搭固定，按照常規方法進行其病理組織檢查。(同時施予二氧化氯氣體0.08卯m)表示了對小鼠暴露15分鐘1000LDsG量的病毒的煙霧，以0.08卯m(鼠籠內的最終濃度)的濃度同時對其施予二氧化氯氣體時的小鼠的生死(表1)。[表1病毒暴露后的死亡小鼠數(與各組10只相關的數據)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>根據表l，清楚了在施予0.08卯m的二氧化氯氣體的小鼠組中，小鼠的死亡明顯推遲。這種差異可以進行統計學的顯著差異抬，驗，其顯著水平(危險率)為0.0001以下(P〈0.0001)。即，可以確認差異為"統計學上存在顯著差異"。然后，對于相同實驗，從病毒暴露后第3天的各組15只小鼠中取出各組5只小鼠，摘出其肺組織，搗碎，測定其中的病毒量(表2)。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>[表6100LDS。病毒暴露后第3天的肺組織中的總病毒量(TCIDso值)_<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由此清楚了，流感病毒以10LD5。和100LDs。的濃度存在時，通it^fe予0.08ppm的二氧化氯氣體顯示出了與流感的發病相關的充分的抑制效果。(同時施予二氧化氯氣體0.05卯m)然后，對于施予10LDs。濃度的病毒的情況，研究了再同時施予低濃度(0.05卯m)的二氧化氯時的效果。其結果是，二氧化氯氣體施予組中，沒有發現流感發病(表7)，肺內的病毒量(表8)減少。由此清楚了，流感病毒以10LDs。濃度存在時，由于同時施予0.05ppm的二氧化氯氣體抑制了流感的發病。同時施予O.03ppm二氧化氯時，10LD5。病毒暴露后的死亡小鼠數(與各組10只相關的數據)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由此清楚了，流感病毒以lOLDso濃度存在時，同時施予0.03ppm的二氧化氯氣體時，對于小鼠中的流感的抑制沒有效果。因此確認了，作為同時施予二氧化氯氣體時的流感發病抑制效果，病毒濃度為lOLDso量時，二氧化氯氣體的濃度至少在0.05卯m以上才有效。根據以上實驗，空間中維持的二氧化氯氣體濃度可以按例如以下方式設定。一般的像劇場這樣的大型設施內的如流感等呼吸道病毒感染病發生時，極低濃度的病毒就成為問題。例如，像0.02LDso這樣的濃度也會引發感染。此時空氣中的病毒濃度為上述實驗的約500分之一(10LDs。/0.02LD5。)。因此，為了預防流感病毒的感染所必需的二氧化氯濃度為0.0001ppm(0.05/500)。因此，i殳定成這種極低濃度的二氧化氯濃度時，可以預期使流感病毒失活，抑制感染的效果。(延遲施予0.08ppm二氧化氯氣體)然后，對lOLDso濃度的病毒施予組，將施予0.08ppm二氧化氯氣體的時機設為病毒暴露開始時M遲5分鐘、IO分鐘、15分鐘，分別研究了二氧化氯氣體的效果。而且此時，各種情況下二氧化氯氣體的暴露時間為15分鐘。本實驗的目的在于，對于一旦到達肺并附著于其上進行增殖的病毒，確iU4遲施予的二氧化氯氣體是否能有效防止流感發病。也就是說，觀察是否存在對于流感的"治療"效果。結果示于表11和表12。[表lll延遲施予O.08ppm二氧化氯氣體時，l0LDs。病毒暴露后的死亡小鼠數(與各組10只相關的數據)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>總病毒量的定量結果是，盡管病毒暴露后經過15分鐘后施予二氧化氯氣體，病毒量也比預測量少。由此認為，通iti4遲施予二氧化氯氣體可以減輕流感的癥狀。該結果表明，即使流感病毒已附著于呼吸系統的組織中進行增殖時，也可以通it^遲的二氧化氯氣體施予，來抑制流感癥狀。即，提示出二氧化氯氣體可發揮對患流感動物的治療效果的可能性。(低濃度的二氧化氯產生的蛋白質變性實驗)本實施方式中，基于小鼠的流感病毒感染實驗說明了，例如，通過如0.05-0.1卯m這種極低濃度的二氧化氯氣體，病毒可以失活，或喪失感染能力。這種二氧化氯的抗病毒效果，可以通過以下實驗說明。該實驗中，使低濃度的二氧化氯對作為酵母的酶的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(以下稱為G6PD)反應，研究G6PD的酶活性如何變化。用PBS緩沖液(20mM磷酸鈉緩沖液，pH7，130mMNaCl)使二氧化氯以O.l,1，10,100，1000nM(換算成ppm濃度時，為0.007,0.07,0.7，7，70卯m)的終濃度溶解(以下，稱為二氧化氯溶液)。使G6PD以80pg/mL的終濃度溶解于各個二氧化氯溶液中。然后，于25C反應2分鐘。G6PD的酶活性通過以下方式測定以NADP和葡萄糖-6-磷酸作為底物，用分光光度計觀察NADPH的吸收。具體的反應條件按照制造者(Sigma公司)的指示。酶活性的測定結果示于圖1。橫軸的濃度按卯m換算表示。縱軸的"比活性"表示每lmg蛋白質的酶活性(unit/mg)。該結果是，二氧化氯濃度為0.07卯m時，與二氧化氯濃度為Oppm時相比，酶活性降低到6成左右(45/71)。因此，即使是0.07卯m左右的濃度極低的二氧化氯，也發現了抑制酶活性。由此提示，即使在本發明這樣的極低濃度的二氧化氯的濃度范圍，也起抑制酶活性的抗病毒效果。(二氧化氯對流感病毒的有效性的確認實驗)為了確認二氧化氯對流感的有效性，以下，對研究二氧化氯導致的存在于流感病毒表面蛋白質的變性效果的實驗進行說明。流感病毒顆粒的表面存在兩種蛋白質血凝素(hemagglutinin，以下稱為HA)，和神經氨酸酶(neuraminidase，以下稱為NA)。HA是病毒感染的最初步驟，即病毒為了結合于宿主細胞表面所必需的蛋白質，其具有使病毒感染選艮的作用。另一方面，NA具有切斷宿主細胞中增殖的后代病毒和宿主細胞表面的結合，使病毒從宿主細胞表面游離的作用。因此，后代病毒容易擴散，可以使病毒感染擴大。因此，相反如果HA的功能缺損，則病毒就無法感染，或者，如果NA的功能缺損，則可以將通過感染而死亡的宿主細胞抑制到最小限度。因此認為，這兩種蛋白質中的至少一個如果喪失功能，病毒的感染能力就降低。因此，使二氧化氯與流感病毒反應，研究這兩種蛋白質的功能如何變化。如下進行實驗，為了明確研究二氧化氯對這兩種蛋白質的變性效果，設定成二氧化氯的濃度范圍為2.7-21.4卯m。用PBS緩沖'液使二氧化氯以40，80，160，240，320juM(換算成ppm濃度時，為2.7，5.4，10.7,16.1，21.4ppm)的終濃度溶解。使流感病毒以77pg/mL的終濃度溶解于各個二氧化氯溶液中。然后，于水上反應2分鐘。反應后，通過公知的血液凝集>^應試樣，測定HA的效價。測定結果示于表13中。[表13<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>而且，二氧化氯濃度在5.4ppm時，研究效價IC^應時間的變化。測定結果示于表14。[表14<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>由此提示，使二氧化氯與流感病毒反應時，HA立即變性，其功能失活。NA的效價的測定結果示于表15。[表15反應的二氧化氯濃度02.75.410.716.121.4NA效價S9,S54837.3S2432.732218.7712l(U鄉7.娜標準差0細121.593821.0953550.2656360.118774由此提示，使二氧化氯與流感病毒反應時，NA立即變性，其功能失活。根據以上內容，發現二氧化氯使流感病毒的感染能力降低。[其它實施方式在上述實施方式中，以病毒存在的場所作為"空間"，可以列舉例如劇場等人出入的場所。但是，并不限于這些場所，人出入的場所可以為泳池、浴場等液體環境中。而且，作為對象的生物，可以列舉動物，但不限于此，具有被浮游病毒感染的可能性的植物也可作為對象。產業上利用的可能性本發明可以應用于浮游病毒的感染對策方法。權利要求1.一種浮游病毒感染對策方法，其特征在于，在浮游病毒能夠存在的空間中供給二氧化氯氣體，使在所述空間中的二氧化氯氣體的濃度為動物能夠生存而所述浮游病毒失活的濃度。2.—種浮游病毒感染對策方法，其特征在于，在浮游病毒能夠存在的空間中供給二氧化氯氣體，使在所述空間中的二氧化氯氣體的濃度為動物能夠生存而能夠防止所述浮游病毒對所述動物感染的濃度。3.—種浮游病毒感染對策方法，其特征在于，在浮游病毒能夠存在的空間中供給二氧化氯氣體，使在所述空間中的二氧化氯氣體的濃度為動物能夠生存而能夠抑制感染了所述浮游病毒的動物發病的濃度。4.一種浮游病毒感染對策方法，其特征在于，在浮游病毒能夠存在的空間中供給二氧化氯氣體，使在所述空間中的二氧化氯氣體的濃度為動物能夠生存而能夠治療感染了所述浮游病毒而發病的動物的濃度。5.根據權利要求1~4中任一項所記載的浮游病毒感染對策方法，其特征在于，所述濃度為0.0001ppm~0.1ppm。6.根據權利要求1~5中任一項所記載的浮游病毒感染對策方法，其特征在于，所述浮游病毒為呼吸道病毒。7.根據權利要求6所記載的浮游病毒感染對策方法，其特征在于，,斤述呼吸道病毒為5危感病毒。全文摘要一種浮游病毒感染對策方法，其通過在浮游病毒可以存在的空間中供給二氧化氯氣體，使前述空間中二氧化氯氣體的濃度為動物可以生存而前述浮游病毒失活的濃度。文檔編號A61L9/015GK101316617SQ200680044049公開日2008年12月3日申請日期2006年11月27日優先權日2005年11月28日發明者緒方規男申請人:大幸藥品株式會社