新的環肽化合物的制作方法

專利名稱：新的環肽化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的環肽化合物或其鹽，其對丙型肝炎病毒(下文稱為HCV)復制子的RNA復制具有抑制作用。特別地，本發明涉及新的環肽化合物或其鹽、其制備方法、包含所述新的環肽化合物或其鹽的藥物組合物、以及預防性和/或治療性治療人類或動物丙型肝炎的方法。

背景技術：
全世界HCV攜帶者估計數量約為170百萬(約3％)，日本約1.5百萬。即便使用干擾素(下文稱為IFN)和利巴韋林(Virazole)聯合治療(可用的首選治療方法)，對全部類型的HCV的有效性為40％。此外，對于IFN-抗性病毒(基因型1b)(尤其大量地發現于日本)，其有效性僅為15至20％。另一方面，聯合治療常具有副作用。因此很難通過使用當前可用的治療方法完全地除去病毒。在慢性肝炎不能完全治愈的情況下，這種肝炎將發展成肝硬化(30％)或肝細胞癌(25％)。在歐洲和美國，丙型肝炎已成為肝移植的主要適應癥。然而，HCV的復發經常發生，即便是在移植的肝中。由于這些原因，社會上對于改善有效性和安全性、具有更高抗病毒作用和抑制丙型肝炎能力的新藥的需求是非常強烈的。
HCV是一種具有正鏈RNA作為基因的病毒，并且根據基因堿基序列分析被分類為黃病毒科(Flaviviridae)。根據第四版Fields Virology，D.Knipe et al ed.，Philadelphia，Lippincott Williams&Wilkins 2001，1127-1161，盡管在1970年代已預見到HCV的存在，HCV的發現是非常困難的。將HCV稱為非-A非-B肝炎病毒已有多年。在1989年，根據Choo Q-L et al.，Science 244，359-362(1989)，從受感染的試驗動物的血清中克隆到此病毒的部分基因，其cDNA序列已被鑒別和確認，從而該病毒被稱為″HCV″。
發明公開 環孢菌素A被用作器官移植的免疫抑制劑。M.Thali et al.，Nature372，363-365(1994)報道，環孢菌素A通過抑制環孢菌素A和病毒顆粒之間的相互作用形成人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)而具有抗-HIV活性。R.M.Wenger et al.在WO00/01715中報道，他們的新型的環孢菌素藥物具有抗-HIV活性。此外，K.Inoue et al.，6th International Symposium onhepatitis C and Related Virus，3-6June (2000)Bethesda，MD，USA報道環孢菌素A具有抗-HCV活性，然而，支持此觀點的報道目前的其它群組。HIJIKATA et al.在WO2005/021028中報道了他們的修飾的環孢菌素藥物具有抗-HCV活性。
M.Berenguer et al.，J.Hepatol 32，673-684(2000)報道臨床應用作為免疫抑制劑的環孢菌素A會造成HCV在移植患者中繁殖。
因此，由于以上原因，活性、血中遷移、選擇性和副作用改善的(例如與環孢菌素A相比)抗-丙型肝炎藥是需要的。
此外，為了轉變環孢菌素化合物的骨架，需要一些苛刻的條件例如高溫或高壓。另一方面，在本發明中通過重排反應將起始化合物(FR901459化合物)轉化成我們的化合物的需要溫和的酸性條件，原因是起始化合物的2-位的羥基。
本發明的目標環狀肽化合物是一種新的化合物，并且可以由以下通式(I)表示
其中 X是

或
其中 R1是氫或低級烷基； R2是氫、芳基或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代 羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、任選取代的氨甲酰氧基、和任選取代的氨基； 以及

是含N的雜環基團； Y是

或
其中 R3是環(低級)烷基、芳基、任選取代的雜環基團或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代 羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、任選取代的氨基和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)； 以及 R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基； 以及

表示單鍵或雙鍵； 或其鹽， 條件是， 當R2是氫時，R3是環(低級)烷基、芳基、任選取代的雜環基團、低級烷氧基甲基、芳基(低級)烷基、叔丁基、仲丁基、環(低級)烷基(低級)烷基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代羥基，低級烷氧基，芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、任選取代的氨基和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自定義如上文)。
目標化合物(I)的優選實施方案如下 1)通式(I)的化合物， 其中 X是
其中 R1是氫或低級烷基； 以及 R2是芳基或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代 羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、二(低級)烷基氨甲酰氧基、和氨基，其任選被選自以下的一個或兩個適合的取代基取代 低級烷基、芐氧基羰基和叔丁氧基羰基； 以及 Y是

或
其中 R3是環(低級)烷基、芳基、或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代 羥基、低級烷氧基、和芳基(低級)烷氧基； R4是氫； 以及 R5是低級烷基； 或其鹽。
2)1)的化合物 其中 R1是低級烷基； R2是低級烷基； Y是
其中 R3是芳基或低級烷基，其任選被羥基或低級烷氧基取代； R4是氫； 以及 R5是低級烷基； 以及

部分是雙鍵； 或其鹽。
3)2)的化合物 其中 R3是低級烷基，其任選被羥基或低級烷氧基取代； 或其鹽。
4)通式(I)的化合物， 其中 X是
其中 R1是低級烷基； 以及 R2是氫； 以及 Y是

或
其中 R3是環(低級)烷基、芳基、任選被低級烷氧基羰基取代的雜環基團、(低級)烷氧基(低級)烷基、芳基(低級)烷基、叔丁基、仲丁基、環(低級)烷基(低級)烷基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代 羥基、低級烷氧基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)、和氨基，其任選被選自以下的一個或兩個適合的取代基取代 低級烷基和芐氧基羰基； 以及 R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基； 或其鹽。
5)4)的化合物 其中 Y是
其中 R3是環(低級)烷基、芳基、任選被低級烷氧基羰基取代的雜環基團、叔丁基、仲丁基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代 羥基、低級烷氧基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)； R4是氫 以及 R5是低級烷基； 以及

部分是雙鍵； 或其鹽。
6)通式(I)的化合物， 其中 X是
以及 Y是
其中 R3是低級烷基； 以及 R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基； 或其鹽。
7)6)的化合物， 其中 X是

或
R4是氫； R5是低級烷基； 以及

部分是雙鍵； 或其鹽。
本發明化合物(I)或其鹽可以通過下述反應流程的方法制備。


方法2

方法3

方法4
本發明的起始化合物或其鹽可以通過例如下述反應流程的方法制備。
方法A

方法B

其中 X和Y定義如上， L是離去基團， P是氨基保護基團， R’是甲氧基或
R”是H或

以及 “n次”中的n是2或3。
制備目標化合物和起始化合物的方法描述如下。
方法1 目標化合物(Ia)或其鹽可以從化合物(IIa)或其鹽通過以下方法制備。
a)導入保護的氨基酸 此反應是將化合物(IIa)與化合物(V)酰胺化。
通常，化合物(V)是羧酸(L是OH)或其反應性衍生物(包括酰鹵(例如，碳酰氯、碳酰溴等)、酸酐、活化酯(例如，乙烯基酯、炔丙基酯、2，4-二硝基苯基酯、五氟苯基酯、甲磺酰基苯基酯、二甲基亞胺基甲基酯、對硝基苯基硫酯、與N-羥基化合物的活化酯(例如N-羥基琥珀酰亞胺酯、N-羥基苯并三唑等)等)等)。
當化合物(V)是游離羧酸化合物時，該反應優選在縮合劑(包括碳二亞胺(例如，N，N-二異丙基碳二亞胺、N，N’-二環己基碳二亞胺、1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺等)、二苯基膦疊氮、二苯基膦酰氯等)的存在下進行。
并且在本反應中的這一反應通常是在添加的例如N-羥基苯并三唑(HOBt)、1-羥基-7-氮雜苯并三唑(HOAt)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯等存在下進行的。
該反應也可在有機或無機堿例如堿金屬碳酸氫鹽、三(低級)烷基胺、吡啶、N-(低級)烷基嗎啉、N，N-二(低級)烷基芐胺等存在下進行。
該反應通常在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、丙酮、醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
反應溫度是不受限制的，并且反應通常是在冷卻至加熱中進行的。
b)脫保護 這一反應是化合物(IIIa)或其鹽的氨基保護基團的消除反應。并且這一反應還是化合物(IIIa)或其鹽的的甲基酯部分到羧酸的反應。
根據反應底物和反應條件這兩個反應是同時進行(例如，后述制備例68或161所述的)或者在兩個不同的反應中進行(例如，后述制備例7和171或153和169所述的)。
c)環化 此環化是通過化合物(IVa)的酰胺化進行的，這樣這一反應可以以如上述方法1-a)中相同的方法進行，并且因此所用試劑和反應條件(例如，溶劑、反應溫度等)可以適用于方法1-a)的那些。
方法2 目標化合物(Ib)或其鹽可以從化合物(IIb)通過序列反應制備，該序列反應包含如上文所述的導入保護的氨基酸、脫保護和環化。并且各反應可以以如上述方法1中相同的方法進行，并且因此所用試劑和反應條件(例如，溶劑、反應溫度等)可以適用于方法1的那些。
方法3 目標化合物(Ic)或其鹽可以從化合物(IIc)通過序列反應制備，該序列反應包含如上文所述的導入保護的氨基酸脫保護反應各兩次，以及環化。并且各反應可以以如上述方法1中相同的方法進行，并且因此所用試劑和反應條件(例如，溶劑、反應溫度等)可以適用于方法1的那些。
方法4 目標化合物(Id)或其鹽可以通過將化合物(Ic)經過催化氫化制備。
用于催化氫化的適合的催化劑是常規的，例如鉑催化劑(例如，鉑片、多孔鉑、鉑黑、膠態鉑、鉑氧化物、鉑絲等)、鈀催化劑(例如，多孔鈀、鈀黑、鈀氧化物、碳載鈀、碳載鈀氫氧化物、膠態鈀、硫酸鋇載鈀、碳酸鋇載鈀等)等。
氫化通常是在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
反應溫度不是關鍵性的，并且反應通常在冷卻至溫熱下進行。
方法A 化合物(IX)或其鹽可以從化合物(VII)或其鹽通過以下方法制備。
a)重排 此反應是化合物(VII)的重排。
該反應通常是在酸(例如三氟乙酸，硫酸，甲磺酸等)的存在下進行的。
該反應通常在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、丙酮、醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
反應溫度是不受限制的，并且反應通常是在冷卻至加熱中進行的。
本發明的此反應，由于并且因底物的原因，可以是溫和的條件例如溫和的酸(對甲苯磺酸)和溫和的溫度(環境溫度到溫熱)下進行，得到經歷重排反應的選擇性化合物。
b)氨基保護 此反應是保護氨基部分，其在重排反應后進行。
該反應通常在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、乙醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
反應溫度是不受限制的，并且反應通常是在冷卻至加熱中進行的。
這些序列反應(a)重排和b)氨基保護)可以通過后述制備例156中所公開的方法或者其類似的方法進行。
c)水解 化合物(IX)或其鹽可以從化合物(VIII)或其鹽通過水解制備。
該水解優選在堿(包括無機堿和有機堿例如堿金屬(例如，鈉、鉀等)、堿土金屬(例如，鎂、鈣等)、堿金屬或堿土金屬的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽、三烷基胺(例如，三甲胺等)、肼、甲基吡啶、1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯、1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯等)或者酸(包括有機酸(例如，甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸等)、無機酸(例如，氫溴酸、硫酸、鹽酸等)和路易斯酸(例如，三溴化硼、氯化鋁、三氯化鈦等))存在下進行。
該反應通常在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、乙醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
液態堿或酸也可用作溶劑。
反應溫度是不受限制的，并且反應通常是在冷卻至加熱中進行的。
此反應可以通過后述制備例167中所公開的方法或者其類似的方法進行。
方法B 化合物(II)或其鹽可以從化合物(IX)或其鹽通過以下方法制備。
a)與(X)反應 此反應是化合物(IX)與化合物(X)的酰胺化，這樣這一反應可以以如上述方法1-a)中相同的方法進行，并且因此所用試劑和反應條件(例如，溶劑、反應溫度等)可以適用于方法1-a)的那些。
此反應可以通過后述制備例90中所公開的方法或者其類似的方法進行。
b)脫保護 這一反應可以以如上述方法1-b)中相同的方法進行，并且因此所用試劑和反應條件(例如，溶劑、反應溫度等)可以適用于方法1-b)的那些。
此反應可以通過后述制備例152中所公開的方法或者其類似的方法進行。
c)Edman降解法(n次) 該反應通常在常規溶劑中進行，該溶劑例如水、乙腈、丙酮、醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇等)、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、或對該反應無不良影響的任何其它有機溶劑，或其混合物。
反應溫度是不受限制的，并且反應通常是在冷卻至加熱中進行的。
并且重復進行此反應，直至獲得目標化合物。
此反應可以通過后述制備例138中中序列2和3等所公開的方法或者其類似的方法(例如，圍繞這種類型的Edman降解法描述的M.K.Eberle et al.，J.Org.Chem.59，7249-7258(1994))進行。
化合物(VII)或其鹽(FR901459化合物)可以根據例如日本公開專利申請號(Laid-open Application Hei)5-271267中所述的方法通過真菌(紙葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)No.19392保藏號FERM BP-3364；保藏于通商產業省工業技術院微生物工業技術研究所)發酵制備。
更特別的，目標化合物可以通過本申請實施例中所述的方法或類似方法制備。
通過上述方法1至4以及A和B獲得的化合物可以通過常規方法被分離和純化，所述的常規方法例如粉碎、重結晶、柱色譜法、高效液相色譜法、再沉淀和除礦物質柱色譜法。
目標化合物(I)的適合的鹽是常規的可藥用的并且是無毒的鹽，并且可以是與堿或酸加成的鹽，例如無機堿的鹽(例如，堿金屬鹽如鈉鹽、鉀鹽等，堿土金屬鹽如鈣鹽、鎂鹽等，銨鹽)、有機堿的鹽(例如，有機胺鹽如三乙胺鹽、二異丙基乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環己基胺鹽、N′N′-二芐基乙烯二胺鹽等)、無機酸加成鹽(例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等)、有機羧酸或磺酸的加成鹽(例如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、葡萄糖酸鹽、富馬酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽等)、堿性或酸性氨基酸(例如精氨酸、門冬氨酸、谷氨酸等)的鹽等。
在本說明書上面和下面的說明中，包括在本發明范圍內的各種定義的適合實例和說明詳細說明如下。
術語“低級”意欲具有1至6個，優選具有1至4個，除非另有說明。
“低級烷基”和“低級烷基”部分的適合的實例可包括直線或分支的具有1至6個碳原子的例子，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基、新戊基、己基、異己基等。
“低級烷氧基”和“低級烷氧基”部分的適合的實例可包括直線或分支的具有1至6個碳原子的例子，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基、己氧基、異己氧基等。
“環(低級)烷基”的適合的實例可包括具有有3至6個碳原子的環狀烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基和環己基等。
“芳基”和“芳基”部分的適合的實例可包括苯基，其可被低級烷基取代(例如，苯基、2，4，6-三甲苯基、甲苯基等)；萘基、蒽基、四氫萘基、茚基、四氫茚基等。
“任選取代的氨基”的適合的實例可包括任選被一個或兩個適合的取代基例如低級烷基、氨基保護基團(例如，芐氧基羰基、叔丁氧基羰基(Boc)等)等取代的氨基。
“任選取代的氨甲酰氧基”的適合的實例可包括任選被一個或兩個適合的取代基例如低級烷基、氨基保護基團(例如，芐氧基羰基、叔丁氧基羰基(Boc)等)等取代的氨甲酰氧基。
“雜環基團”的適合的實例可包括 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1至4個氮原子，例如，吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、二氫吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基(例如，4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)、氮雜卓基等； 飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1至4個氮原子，例如，氮丙定基、氮雜環丁烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、2，5-亞甲基哌嗪基、六氫氮雜卓基等； 不飽和的縮合雜環基團含有1至4個氮原子，例如，吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、四氫吲哚基、二氫吲唑基等； 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個氧原子和1至3個氮原子，例如，噁唑基、異噁唑基、噁二唑基(例如，1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基等)等； 飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個氧原子和1至3個氮原子，例如，嗎啉基、悉尼酮基等； 不飽和的縮合雜環基團含有1或2個氧原子和1至3個氮原子，例如，苯并噁唑基、苯并噁二唑基等； 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個硫原子和1至3個氮原子，例如，噻唑基、異噻唑基、噻二唑基(例如，1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基等)、二氫噻嗪基等； 飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個硫原子和1至3個氮原子，例如噻唑烷基等； 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個硫原子，例如，噻吩基、二氫二thiinyl、二氫二亞硫酰基等； 不飽和的縮合雜環基團含有1或2個硫原子和1至3個氮原子，例如，苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并噻二唑基等； 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有氧原子，例如，呋喃基等； 飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有1或2個氧原子，例如，環氧乙烷基、1，3-二氧戊環基、四氫呋喃基、四氫吡喃基等； 不飽和的3至8-元(更優選5或6-元)雜單環基團含有氧原子和1或2個硫原子，例如，二氫噁thiinyl等； 不飽和的縮合雜環基團含有1或2個硫原子，例如苯并噻吩基、苯并二thiinyl等；以及 不飽和的縮合雜環基團含有氧原子和1或2個硫原子，例如，苯并噁thiinyl等； 飽和的縮合雜單環基團含有1至3個氮原子，例如四氫吡咯并吡咯烷基等； 等。
適合的“含N雜環基團”可以是指上文提及的那些，其中所述的雜環基團含有至少一個氮原子，例如吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、噻唑基、噁唑基等。
適合的“任選取代的雜環基團”可包括上文提及的雜環基團，其任選被適合的取代基例如低級烷基、低級烷氧基、芳基、氨基、低給烷氧基羰基等取代。
術語“鹵素”表示氟、氯、溴和碘。
V.Lohmann et al.，Science 285，110-113(1999)報道他們制備了人肝瘤細胞系(Huh-7)，其中導入了亞基因組HCV RNA分子，并且發現亞基因組HCV RNA以高比率被復制在所述細胞中。據認為在這些細胞系中的亞基因組HCV RNA的復制機理極其相似于受HCV感染的肝細胞中的全長HCV RNA基因組的復制。因此，根據本發明評價化合物(I)抑制RNA復制活性的方法是基于使用Huh-7細胞的細胞分析方法，在該Huh-7細胞中導入了亞基因組HCV RNA。
為了顯示本發明化合物(I)或其鹽的有用性，本申請中代表隊性化合物的藥理試驗實施例顯示如下。
試驗實施例 1.HCV復制子報道子分析 試驗化合物抑制HCV復制子復制的抑制活性是通過螢光素酶活性定量來評價的，所述螢光素酶是一種由Yokota et al.，EMBO4602-608(2003)報道的在復制子系統中編碼的報道子基因產物。該分析法是根據Steady-

螢光素酶分析系統(Promega)的技術手冊進行的。復制子分析是用由Lohmann et al.，Science 285110(1999)報道的修飾的方法進行的。細節說明如下。
1)藥物添加入細胞 將在D-MEM介質(含有5％胎牛血清)中的6x103HCV復制子細胞接種在96-孔微量滴定板(Corning Inc.)的各孔中。在37℃下和5％CO2中將細胞培養16小時之后，加入試驗化合物。
2)螢光素酶分析過程 培養2天以上之后，除去培養介質，再將25μl的Glo Lysis緩沖溶液加入到各孔中，再培養5分鐘。使發生溶胞，將25μl的Steady-

分析試劑加入到各孔中。培養5分鐘之后，用發光測量計Mithras LB940(BERTHOLD TECHNOLOGIES GmbH&Co.KG)根據廠商說明書測定發光。
3)試驗結果 在以每一濃度的化合物處理的復制子細胞中的螢光素酶活性被用來計算每一化合物的EC50值，其給出了對于對照組(無藥物組，僅含DMSO)以50％酶活性水平表示的化合物濃度。
根據上述試驗例的結果，可以了解，本發明的化合物(I)或其鹽具有抗-丙型肝炎病毒活性。
本發明的抗-HCV藥，其含有作為活性成分的化合物(I)或其鹽，可在藥物制品的形式中使用，例如在固體、半固體或液體的形式中，在具有有機或無機載體或賦形劑的混合物中使用，適用于口服；舌下；口頰；鼻；呼吸器官；胃腸外(皮內、器官內、皮下、真皮內、肌內、關節內、中央靜脈、肝靜脈、外周靜脈、淋巴、心血管、動脈、眼(其包括眼周圍流向或眼周圍靜脈滴注))；靜脈滴注入眼球、眼球結構或眼球層；耳，其包括耳道、乳頭狀腔、外或內耳道、鼓膜、鼓室、內耳(其包括螺旋耳蝸神經節、迷路(labyrinth)等)；腸內；直腸；陰道；輸尿管；和膀胱給藥。對于子宮內和圍產期適應性疾病，胃腸外給藥是優選的，因為給藥是在母體血管中進行的，或者在空位(vacancies)中進行的，例如母體器官包括子宮、子宮頸和陰道；胎兒胚胎，胎兒，新生兒和結締組織；以及羊膜，臍帶，臍動脈和靜脈；胎盤等。這些通道的使用是因每一患者的病況而變化的。
化合物(I)或其鹽可以作為治療藥物獨立地給藥，或者可以期望地以處方藥物的一部分使用。根據本發明的″抗-HCV藥″可以在藥物制品的形式中使用，例如在固體、半固體或液體的形式中，在具有至少一種或多種適合的有機或無機載體或賦形劑或者其它藥理學治療劑的混合物中使用。活性成分可以與例如常用的藥理學可接受的并且無毒的載體組合于以下形式中固體形式例如顆粒、片、丸、糖錠、膠囊或栓劑；乳膏；軟膏；氣霧劑；吹入用粉末；液體形式例如流向用的溶液、乳液或混懸液；口服食入劑；滴眼劑；以及適合使用的任何其它形式。并且，如果需要，在上述制品中可以包括輔助物質例如，穩定劑、增稠劑、潤濕劑、硬化劑和著色劑；芳香劑或緩沖劑；或者常用的任何其它添加劑。
化合物(I)或其藥學可接受的鹽是以一種在疾病的進展和病況下足以產生需要的抗-丙型肝炎作用的量被包括在所述的藥物組合物中。
IFN和/或利巴韋林與化合物(I)或其鹽的聯合應用可有效地抑制丙型肝炎。
對于組合物用于人，優選通過靜脈、肌內、肺、口服給藥、滴眼給藥或吹入給藥。雖然化合物(I)的治療有效量的劑量因每一治療的個體患者的年齡和狀況而變化以及取決于它們，治療或預防丙型肝炎通常給予的量是，在靜脈給藥的情況下為每kg人體重0.001-400mg的化合物(I)的日劑量，在肌內給藥的情況下為每kg人體重0.1-20mg的化合物(I)的日劑量，在口服給藥的情況下為每kg人體重0.5-50mg的化合物(I)的日劑量。然而，這些劑量可以被要求超過其獲得治療結果的限度。
包含在本發明組合物中用于單一的單位劑量的脂肽化合物(I)或其藥學可接受的鹽的量是0.1至400mg，更優選1至200mg，再更優選5至100mg，特別是5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95和100mg。
本發明可包括制造品，其包括包裝材料和包含在所述包裝材料中的上文標識的化合物(I)，其中所述的化合物(I)治療上有效地預防或治療丙型肝炎，并且其中所述包裝材料包括標簽和書面材料，所述書面材料說明所述化合物(I)可以或者應當用于預防或治療丙型肝炎。
本發明可包括商品包裝，其包括含有上文標識的化合物(I)的藥物組合物和與其相關的書面材料，其中所述書面材料說明所述化合物(I)可以或者應當用于預防或治療丙型肝炎。
應當指出，化合物(I)或其鹽可包括一種或多種立體異構體，例如由于不對稱碳原子和雙鍵的光學異構體和幾何異構體，以及所有的這些異構體及其混合物均包括在本發明的范圍內。
化合物(I)或其鹽可包括溶劑化的化合物(例如水合物、乙醇合物等)。
化合物(I)或其鹽可包括結晶型和非結晶型。
化合物(I)或其鹽可包括前藥形式。
本文引用的專利說明書和出版物通過引用并入到本說明書中。
以下給出制備例和實施例用以說明本發明。然而，本發明并不限于這些制備例和實施例。
如下文提及的，給出了在以下實施例1至83中所用的起始化合物和獲得的目標化合物。
在本說明書上文和下文描述的制備例、實施例和公式中所用的縮寫、符號和術語具有以下含義。
AcOEt 乙酯 Bop-Cl2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯 CHCl3 氯仿 CH2Cl2二氯甲烷 Et2O 乙醚 HCl 鹽酸 HOAt 1-羥基-7-氮雜苯并三唑 LiOH 氫氧化鋰 MeCN 乙腈 MeOH 甲醇 MgSO4 硫酸鎂 NaHCO3碳酸氫鈉 NaOH 氫氧化鈉 Na2SO4硫酸鈉 TFA 三氟乙酸 WSCD 1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺 nBu 正丁基 iBu 異丁基 tBu 叔丁基 Cy.Hex.環己基 Et 乙基 Me 甲基 Ph 苯基 iPr異丙基 Bn 芐基 Boc叔丁氧基羰基 Fmoc 9H-芴-9-基甲氧基羰基 實施例 實施例編號 制備例 制備例編號 MS 質譜數據 制備例1 在冰浴冷卻下，向下文制備例158的目標化合物(粗品78g，理論量76.9g)在MeCN(555ml)中的溶液中加1N HCl(555ml)。將該混合物溫熱至30℃，再在30℃下攪拌3h。將所得混合物用Na2CO3溶液中和(29.48g，在H2O 300ml中)，再在真空下濃縮。用飽和NaHCO3水溶液將殘余溶液的pH值調節至8，再將該溶液用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，6，9，18，21-戊異丁基-24-異丙基-8，12，15，17，23，26-六甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28-九氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氮雜三十一烷-31-酸甲酯(粗品70g，理論量65.5g)為淡棕色粉末。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例2 在環境溫度下，向制備例1的目標化合物(粗品70g，理論量65.5g)在AcOEt(660ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(10ml)，再用二異丙基乙胺將該混合物的pH值調節至7.5。在環境溫度下將反應混合物攪拌1.5h。向所得溶液中加N，N-二甲基丙二胺(9.1g)，并攪拌5分鐘。將反應混合物傾至0.5N HCl(1l)，再用AcOEt萃取。將有機相用0.5N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再用硅膠柱色譜法純化，用己烷∶AcOEt(2∶1-1∶1-1∶2)洗脫，得到(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-1-苯胺基-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，6，9，18，21-戊異丁基-24-異丙基-2，8，12，15，17，23，26-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28-九氧代-1-硫代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氮雜三十一烷-31-酸甲酯(44.3g)為淡黃色粉末。
制備例3 向制備例2的目標化合物(44.3g)在MeCN(337ml)中的溶液中加入1N HCl(337ml)，再在30℃下將該混合物攪拌2h。將所得混合物用Na2CO3溶液(58.8g，在H2O 300ml中)中和，再在真空下濃縮。用飽和NaHCO3水溶液將殘余溶液的pH值調節為8，再將該溶液用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物用硅膠柱色譜法純化，用CHCl3∶MeOH(100∶0-97∶3)洗脫，得到(2S，5S，8S，11S，14S，17R，20S，23S，26S)-26-氨基-2-[(1R)-1-羥乙基]-5-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-11，14，23-三異丁基-8-異丙基-6，9，15，17，20，24，28-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25-八氧代-3，6，9，12，15，18，21，24-八氮雜二十九烷-1-酸甲酯(29.1g)為淡黃色狀。
1H-NMR(氯仿-d，δppm)10.27(0.5H，d，J＝9.0Hz)，7.38(0.5H，d，J＝8.5Hz)，7.00(0.5H，d，J＝8.5Hz)，6.93(0.5H，d，J＝8.5Hz)，6.89(1H，d，J＝8.5Hz)，6.84(0.5H，d，J＝8.0Hz)，6.80(0.5H，d，J＝8.0Hz)，5.14-5.51(5H，m)，4.86-5.04(1H，m)，4.66-4.81(2H，m)，4.55(2H，m)，4.31(1H，m)，4.00(1H，m)，3.77(1H，m)，3.76(1.5H，s)，3.75(1.5H，s)，3.25(1.5H，s)，3.14(1.5H，s)，3.06(1.5H，s)，3.02(1.5H，s)，3.01(1.5H，s)，3.00(3H，s)，2.71(1.5H，s)，2.35(2H，m)，2.03-1.24(61H，m) 制備例4 在冰浴冷卻下，向以下制備例59的目標化合物(3.2g)在CH2Cl2(38.5ml)中的溶液中加入TFA(9.6ml)，再在冰浴冷卻下將該混合物攪拌2h。向該混合物中加入TFA(7ml)，再在冰浴冷卻下將該混合物另外攪拌1h。在冰浴冷卻下將所得混合物用Na2CO3水溶液中和(6.6g，在100mlH2O中)，再在真空下濃縮。向該殘余溶液中加入飽和NaHCO3水溶液以調節pH＝8，再將該混合物用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用NaSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-3-仲丁基-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，18，21-四異丁基-24-異丙基-8，12，15，17，23，26-六甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28-九氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-十氮雜三十一烷-31-酸甲酯(3.0g)為無色固體。
制備例5-19的化合物是以類似于制備例4的方法獲得的。
制備例20 在冰浴冷卻下，向以下制備例208的目標化合物(1.20g)在二噁烷(10ml)中的溶液中加入1N LiOH(3.1ml)。在相同溫度下攪拌3h之后，將溶液用5％枸櫞酸酸化至pH 5，在真空中濃縮以除去二噁烷，再用AcOEt(50ml)萃取。將有機層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-(1-叔丁氧基乙基)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-3，5，11，15，18，20，26，29-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(790mg)，為固體。
制備例21-24的化合物是以類似于制備例20的方法獲得的。
制備例25 在冰浴冷卻下，向制備例4的目標化合物(81mg)的溶液中加入(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](甲基)氨基}丙酸(33.5mg)、Bop-Cl(26.2mg)和二異丙基乙胺(36μl)。在環境溫度下將該混合物攪拌13h，再用AcOEt萃取。將有機相用10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法(CHCl3∶MeOH＝90∶10)純化，得到(5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S，35S)-8-仲丁基-1-(9H-芴-9-基)-35-[(1R)-1-羥乙基]-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-2-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氮雜三十六烷-36-酸甲酯(74mg)為無色固體。
制備例26-40的化合物是以類似于制備例25的方法獲得的。
制備例41 在環境溫度下，向制備例25的目標化合物(73mg)在二噁烷(1.9ml)中的溶液中加入1N NaOH(0.49ml)，再將該混合物攪拌2h。向該反應混合物中加入10％枸櫞酸水溶液以調節pH＝4，再將該溶液用AcOEt萃取。有機相用鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-仲丁基-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-3，5，11，15，18，20，26，29-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(56mg)為無色粉末。
制備例42-56的化合物是以類似于制備例41的方法獲得的。
制備例57 在室溫下，向以下制備例93的目標化合物(1.60g)在N，N-二甲基甲酰胺(16ml)中的溶液中加入哌啶(1.1ml)。在相同溫度下攪拌2h之后，在真空下濃縮反應混合物。將殘余物溶解于AcOEt(60ml)，再將該溶液用5％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將粗產物通過硅膠柱(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)純化，得到(2S，5S，8S，11S，14S，17R，20S，23S，26S，29S)-2-[(1R)-1-羥乙基]-5-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-8-異丙基-6，9，15，17，20，24，30，32，32-九甲基-29-(甲氨基)-4，7，10，13，16，19，22，25，28-九氧代-31-氧雜-3，6，9，12，15，18，21，24，27-九氮雜三十三烷-1-酸甲酯(1.34g)為粉末。
制備例58的化合物是以類似于制備例57的方法獲得的。
制備例59 在冰浴冷卻下，向制備例3的目標化合物(3.0g)在CH2Cl2(60ml)中的溶液中加入(2S，3S)-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-3-甲基戊酸(839mg)、HOAt(466mg)和WSCD(531mg)，再在冰浴冷卻下將該混合物攪拌1.5h。在真空下濃縮所得混合物，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-仲丁基-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-2，2，5，11，15，18，20，26，29-九甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十氮雜三十四烷-34-酸甲酯(3.22g)為淡黃色粉末。所得產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例60-67的化合物是以類似于制備例59的方法獲得的。
制備例68 在冰浴冷卻下，將(6R，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-仲丁基-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-2，2，11，15，18，20，26，29，35-九甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸甲酯(80mg)溶解于20％TFA/CH2Cl2(2ml)。在相同溫度下攪拌4h之后，向該溶液中加入飽和NaHCO3水溶液至pH 8。該混合物用CHCl3(20ml)萃取，有機層用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物溶解于MeOH(4ml)。在冰浴冷卻下向該溶液中加入1N LiOH(0.60ml)。在相同溫度下攪拌1h之后，將溶液用5％枸櫞酸水溶液酸化至pH5，在真空中濃縮以除去MeOH，再用CHCl3(20ml)萃取。將有機層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物與Et2O研磨，得到(5S，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32R)-32-氨基-5-[(1R)-1-羥乙基]-8-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-14，17，26，29-四異丁基-11-異丙基-3，9，12，18，20，23，27，33-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30-十一氮雜三十五烷-1-酸(45mg)，為固體。
制備例69-74的化合物是以類似于制備例68的方法獲得的。
制備例75 在環境溫度下，向以下制備例193的目標化合物(53mg)在二噁烷(0.64ml)中的溶液中加入1N NaOH(0.16ml)，再將該混合物攪拌2h。向該反應混合物中加入10％枸櫞酸水溶液以調節pH＝4，再將該溶液用AcOEt萃取。有機相用鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，6，9，12，21，24-六異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(18mg)為無色粉末。
制備例76-89的化合物是以類似于制備例75的方法獲得的。
制備例90 在冰浴冷卻下，向以下制備例167的目標化合物(5.40g)、{[(2S，3R)-2-氨基-3-羥基丁酰基](甲基)氨基}乙酸甲酯鹽酸鹽(1.46g)和HOAt(0.550g)在CH2Cl2(80ml)中的溶液中加入WSCD(0.627g)在CH2Cl2(4ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌3h之后，在真空下濃縮反應混合物。將殘余物溶解于AcOEt (200ml)，再將該溶液用0.5N HCl、1M NaHCO3和鹽水洗滌，用無水MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到(6S，12S，15S，18S，21S，24R，27S，30S，33S，36S，39S)-6，39-二[(1R)-1-羥乙基]-36-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，18，27，30-戊異丁基-33-異丙基-2，2，8，11，17，21，24，26，32，35，41-十一甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37，40-十三氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35，38，41-十三氮雜四十三烷-43-酸甲酯(6.00g)為粉末。
制備例91 在冰浴冷卻下，向制備例3的目標化合物(120mg)、(2S)-2-[{(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]丙酰基}(乙基)氨基]-3-甲基戊酸(59mg)和HOAt(19mg)在CH2Cl2(6ml)中的溶液中加入WSCD(21mg)在CH2Cl2(1ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌1h以及室溫下攪拌5h之后，在真空下濃縮反應溶液。將殘余物溶解于AcOEt(20ml)，再將該溶液用0.5N HCl、1M NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到(6R，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S，36S)-9-仲丁基-8-乙基-36-[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，24，27-四異丁基-30-異丙基-2，2，5，6，14，18，21，23，29，32-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸甲酯(155mg)為無定形粉末。
制備例92的化合物是以類似于制備例91的方法獲得的。
制備例93 在冰浴冷卻下，向制備例3的目標化合物(1.20g)、(2S，3R)-3-叔丁氧基-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](甲基)氨基}丁酸(516mg)和HOAt(171mg)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中加入WSCD(195mg)在CH2Cl2(1ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌1h以及室溫下攪拌4h之后，在真空下濃縮反應溶液。將殘余物溶解于AcOEt(50ml)，再將該溶液用0.5N HCl、1M NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到(5S，8S，11S，14S，17R，20S，23S，26S，29S，32S)-5-(1-叔丁氧基乙基)-1-(9H-芴-9-基)-32-[(1R)-1-羥乙基]-29-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-8，11，20，23-四異丁基-26-異丙基-4，10，14，17，19，25，28-七甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30-十氧代-2-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氮雜三十三烷-33-酸甲酯(1.6g)為無定形粉末。
制備例94的化合物是以類似于制備例93的方法獲得的。
制備例95 在冰浴冷卻下，向以下制備例166的目標化合物(1.20g)、(2S，3R)-3-叔丁氧基-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](甲基)氨基}丁酸(527mg)和HOAt(174mg)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中加入WSCD(199mg)在CH2Cl2(1ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌1h以及室溫下攪拌4h之后，在真空下濃縮反應溶液。將殘余物溶解于AcOEt(50ml)，再將該溶液用0.5N HCl、1M NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(5S，8S，11S，14S，17R，20S，23S，26S，29S，32S)-5-(1-叔丁氧基乙基)-1-(9H-芴-9-基)-32-[(1R)-1-羥乙基]-29-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-8，11，20，23-四異丁基-26-異丙基-4，10，14，17，19，25，28，34-八甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-2-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氮雜三十六烷-36-酸甲酯(1.58g)為無定形粉末。
制備例96-109和111-116的化合物是以類似于制備例95的方法獲得的。
制備例110 向以下實施例25的目標化合物(190mg)在吡啶(1.2ml)中的溶液中加入乙酸酐(280μl)。該混合物攪拌過夜之后，將該混合物用AcOEt稀釋，用1N鹽酸水溶液和NaHCO3洗滌，用MgSO4干燥，濃縮。將殘余物用硅膠(己烷/AcOEt＝1/4，然后CH2Cl2/MeOH＝9/1)進行色譜層析，得到(1R)-1-{(2S，5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S)-8-(1-叔丁氧基乙基)-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2-基}乙基乙酸酯(193mg)。
制備例117 在冰浴冷卻下，向以下制備例154的目標化合物(粗品84g，理論量82.5g)在MeCN (1l)中的溶液中加入1N HCl(1.11l)。將該混合物溫熱至30℃，再在30℃下攪拌4h。將所得混合物用Na2CO3溶液中和(58.8g，在H2O 300ml中)，再在真空下濃縮。用飽和NaHCO3水溶液將殘余溶液的pH值調節為8，再將該溶液用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，12，21，24-戊異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(粗品78g，理論量69.4g)為淡棕色粉末。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例118 在冰浴冷卻下，向制備例4的目標化合物(100mg)的溶液中加入(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]丁酸(27.6mg)、Bop-Cl(43.2mg)和二異丙基乙胺(59μl)。在環境溫度下將該混合物攪拌13h，再用AcOEt萃取。將有機相用10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法純化(CHCl3∶MeOH＝90∶10)，得到(6R，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S，36S)-9-仲丁基-6-乙基-36-(1-羥乙基)-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，24，27-四異丁基-30-異丙基-2，2，5，8，14，18，21，23，29，32-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸甲酯(64.8mg)為無色固體。
制備例119-127的化合物是以類似于制備例118的方法獲得的。
制備例128 在冰浴冷卻下，向制備例118的目標化合物(64.8mg)在CH2Cl2(1.2ml)中的溶液中加入TFA(0.36ml)，再在冰浴冷卻下將該混合物攪拌2h。向所得溶液中加入飽和NaHCO3水溶液以調節pH＝8。該混合物用AcOEt萃取，再將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。在真空中除去溶劑，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-仲丁基-3-乙基-33-(1-羥乙基)-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(58.6mg)。所得產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例129-137的化合物是以類似于制備例128的方法獲得的。
制備例138 在室溫下，向以下制備例168的目標化合物(3.70g)在AcOEt(40ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(757mg)在AcOEt(10ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌30分鐘之后，將N，N-二甲氨基丙胺(752mg)加至該溶液中。將該溶液攪拌15分鐘，用0.2N HCl、NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到粉末。在冰浴冷卻下將所得混合溶解于MeCN(100ml)，再加入1N HCl (60ml)。在室溫下攪拌6h之后，用1NNa2CO3(50ml)中和該溶液，在真空中濃縮以除去MeCN，再用AcOEt(200ml)萃取。有機層用NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，6，9，18，21-戊異丁基-24-異丙基-8，12，15，17，23，26，32-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(3.19g)為粉末。
制備例139 在環境溫度下，向制備例128的目標化合物(58.6mg)在MeOH(1.2ml)中的溶液中加入1N NaOH(0.23ml)，再將該混合物攪拌2h。向該反應混合物中加入10％枸櫞酸水溶液以調節pH＝4，再將該溶液用AcOEt萃取。有機相用鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-6-仲丁基-3-乙基-33-(1-羥乙基)-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(58.6mg)為無色粉末。
制備例140-148的化合物是以類似于制備例139的方法獲得的。
制備例149 在冰浴冷卻下，將(6R，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S，36S)-9-(1-叔丁氧基乙基)-6-乙基-36-[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，24，27-四異丁基-30-異丙基-2，2，5，8，14，18，21，23，29，32-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸甲酯(110mg)溶解于20％TFA/CH2Cl2(3ml)。在相同溫度下攪拌4h之后，向該溶液中加入飽和NaHCO3水溶液至pH 8。該混合物用CHCl3(20ml)萃取，有機層用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物溶解于MeOH(4ml)。在冰浴冷卻下向該溶液中加入1N LiOH(0.77ml)。在相同溫度下攪拌1h之后，將溶液用5％枸櫞酸水溶液酸化至pH 5，在真空中濃縮以除去MeOH，再用AcOEt(20ml)萃取。將有機層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-3-乙基-33-[(1R)-1-羥乙基]-6-(1-羥乙基)-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24-四異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(70mg)，為固體。
制備例150和151的化合物是以類似于制備例149的方法獲得的。
制備例152 在冰浴冷卻下，將制備例90的目標化合物(6.00g)溶解于20％TFA/CH2Cl2(80ml)，再在相同溫度下將該混合物攪拌4h。向該溶液中加入飽和NaHCO3水溶液至pH 8，該混合物用CHCl3(200ml)萃取。有機層用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到(5S，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S，38S，39R)-38-氨基-39-羥基-5-[(1R)-1-羥乙基]-8-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-14，17，26，29，32-戊異丁基-11-異丙基-3，9，12，18，20，23，27，33，36-九甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37-十二氧代-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33，36-十二氮雜四十烷-1-酸甲酯(5.70g)為無定形粉末。
制備例153的化合物是以類似于制備例152的方法獲得的。
制備例154 向以下制備例155的目標化合物(粗品75.0g，理論量71.8g)在混合溶劑(AcOEt 750ml和吡啶67.5ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(19.8ml)，再將該混合物攪拌13h。向該混合物中加入吡啶(67.5ml)和二異丙基乙胺，再將該混合物的pH值調節至8。將該混合物攪拌3h。向所得溶液中加入N，N-二甲基丙二胺(19.8g)，并攪拌5分鐘。將反應混合物傾至0.5N HCl(1l)，再用AcOEt萃取。將有機相用0.5N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(3S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S，36S)-1-苯胺基-3，36-二[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，15，24，27-戊異丁基-30-異丙基-5，8，14，18，21，23，29，32-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-1-硫代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十二氮雜三十七烷-37-酸甲酯(粗品84g，理論量82.5g)為棕色形式。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例155 在冰浴冷卻下，向以下制備例157的目標化合物(粗品80.2g，理論量77.1g)在CH2Cl2中的溶液中加入TFA(205ml)。在冰浴冷卻下將該混合物攪拌2h。在冰浴冷卻下用Na2CO3溶液(147g/500ml H2O)和飽和NaHCO3水溶液調節溶液的pH值。將有機相用CHCl3萃取。將有機相用飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(2S，5S，8S，11S，14S，17R，20S，23S，26S，29S，35S，36R)-35-氨基-36-羥基-2-[(1R)-1-羥乙基]-5-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-11，14，23，26，29-戊異丁基-8-異丙基-6，9，15，17，20，24，30，33-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氮雜三十七烷-1-酸甲酯(75g，粗品)為棕色粉末。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例156 向(3S，6S，9S，12R，15S，18S，21S，24S，30S，33S)-30-[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，18，21，24-戊異丁基-3-異丙基-1，4，10，12，15，19，25，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(100g)在四氫呋喃(1l)中的溶液中加入4-甲基苯磺酸(70.6g)，再在50℃下將該混合物攪拌14h。在冰浴冷卻下向該混合物中加入1N NaOH并中和，再加入Boc2O(17.9g)。在冰浴冷卻下用1N NaOH將該混合物的pH值調節至8。在環境溫度下將該混合物攪拌2.5h。在真空下濃縮所得混合物，再用AcOEt萃取。將有機相用飽和Na2CO3水溶液、0.1N HCl和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到{(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，33S，34R)-3-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-9，12，21，24，27-戊異丁基-6-異丙基-4，7，13，15，18，22，28，31，34-九甲基-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氧代-1-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氮雜環三十四烷-33-基}氨基甲酸叔丁酯(167.2g)為棕色形式。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例157 在環境溫度下，向以下制備例167的目標化合物(71.0g)在CH2Cl2(1l)中的溶液中加入(2S，3R)-2-氨基-3-羥基丁酸甲酯鹽酸鹽(10.8g)和HOAt(10.8g)。在冰浴冷卻下向該混合物中加入WSCD(9.9g)。在環境溫度下將該混合物攪拌1.5h。在真空下濃縮所得混合物，再用AcOEt萃取。將有機相用0.5N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(6S，12S，15S，18S，21S，24R，27S，30S，33S，36S，39S)-6，39-二[(1R)-1-羥乙基]-36-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，18，27，30-戊異丁基-33-異丙基-2，2，8，11，17，21，24，26，32，35-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37-十二氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35，38-十二氮雜四十烷-40-酸甲酯(80.2g，粗品)為棕色形式。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例158 在環境溫度下，向制備例117的目標化合物(粗品78g，理論量69.4g)在AcOEt(690ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(11.3g)，再將該混合物攪拌1h。向溶液中加入二異丙基乙胺(5ml)，再將該混合物另外攪拌1.5h。向所得溶液中加入N，N-二甲基丙二胺(9.1g)，并攪拌5分鐘。將反應混合物傾至0.5N HCl(1l)，再用AcOEt萃取。將有機相用0.5N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-1-苯胺基-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，12，21，24-戊異丁基-27-異丙基-2，5，11，15，18，20，26，29-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-1-硫代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(粗品78g，理論量76.9g)為棕色形式。所得粗產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例159 在冰浴冷卻下，向制備例1的目標化合物(87mg)的溶液中加入(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](甲基)氨基}丙酸(36mg)、Bop-Cl(28.2mg)和二異丙基乙胺(39μl)。在環境溫度下將該混合物攪拌13h，再用AcOEt萃取。將有機相用10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法純化(CHCl3∶MeOH＝90∶10)，得到(5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S，35S)-1-(9H-芴-9-基)-35-[(1R)-1-羥乙基]-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-8，11，14，23，26-戊異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-2-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氮雜三十六烷-36-酸甲酯(110mg)為無色固體。
制備例160的化合物是以類似于制備例159的方法獲得的。
制備例161 在冰浴冷卻下，向制備例95的目標化合物(1.55g)在二噁烷(30ml)中的溶液中加入1N LiOH(10ml)。在相同溫度下攪拌3h之后，將溶液用5％枸櫞酸酸化至pH 5，在真空中濃縮以除去二噁烷，再用AcOEt(50ml)萃取。將有機層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物與Et2O研磨，得到(5S，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S)-5-[(1R)-1-羥乙基]-8-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-14，17，26，29-四異丁基-11-異丙基-3，9，12，18，20，23，27，33，35，35-十甲基-32-(甲氨基)-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-34-氧雜-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30-十氮雜三十六烷-1-酸，為固體。
制備例162-165的化合物是以類似于制備例161的方法獲得的。
制備例166 在室溫下，向制備例138的目標化合物(3.15g)在AcOEt(40ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(511mg)在AcOEt(10ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌30分鐘之后，將N，N-二甲氨基丙胺(527mg)加至該溶液中。將該溶液攪拌15分鐘，用0.2N HCl、NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到粉末。在冰浴冷卻下將所得粉末溶解于MeCN(100ml)，再加入1N HCl(50ml)。在室溫下攪拌6h之后，用1N Na2CO3(25ml)中和該溶液，在真空中濃縮以除去MeCN，再用AcOEt(150ml)萃取。有機層用NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(5S，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S)-29-氨基-5-[(1R)-1-羥乙基]-8-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-14，17，26-三異丁基-11-異丙基-3，9，12，18，20，23，27，31-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28-九氧代-3，6，9，12，15，18，21，24，27-九氮雜六三十二烷-1-酸甲酯(2.72g)為粉末。
制備例167 在冰浴冷卻下，向制備例156的目標化合物(粗品167g，理論量108g)在MeOH (1l)中的溶液中加入1N NaOH(819ml)。將該混合物在環境溫度下攪拌8h。向該混合物中加入1N NaOH(82ml)，再將該混合物攪拌2h。將所得混合物用1N HCl中和，并在真空下濃縮。殘余溶液用1N HCl酸化(pH＝3)，再用AcOEt萃取。將有機相用0.1N HCl和鹽水洗滌，再用MgSO4干燥。在真空下除去溶劑。將所得油與AcOEt∶己烷＝450ml∶1500ml研磨，得到(6S，12S，15S，18S，21S，24R，27S，30S，33S，36S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-36-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-12，15，18，27，30-戊異丁基-33-異丙基-2，2，8，11，17，21，24，26，32，35-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸(80.4g)。
制備例168 在室溫下，向制備例152的目標化合物(5.70g)在AcOEt(100ml)中的溶液中加入異氰硫基苯(1.08g)在AcOEt(10ml)中的溶液。在相同溫度下攪拌2h之后，將N，N-二甲氨基丙胺(820mg)加至該溶液中，將該溶液攪拌15分鐘，用0.2N HCl、NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到粉末。在冰浴冷卻下將所得粉末溶解于MeCN(100ml)，再加入1N HCl(100ml)。在室溫下攪拌6h之后，用1N Na2CO3(50ml)中和該溶液，在真空中濃縮以除去MeCN，再用AcOEt(200ml)萃取。有機層用NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，12，21，24-戊異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29，35-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十二氮雜三十七烷-37-酸甲酯(3.77g)為粉末。
制備例169 在冰浴冷卻下，向(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-3-仲丁基-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，18，21-四異丁基-24-異丙基-8，12，15，17，23，26，32-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(230mg)在MeOH(4ml)中的溶液中加入1N LiOH(184ml)。在相同溫度下攪拌1h之后，將溶液用5％枸櫞酸酸化至pH 5，在真空中濃縮以除去MeOH，再用AcOEt(20ml)萃取。將有機層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物與Et2O研磨，得到(3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S，24S，27S，30S)-3-仲丁基-30-[(1R)-1-羥乙基]-27-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，18，21-四異丁基-24-異丙基-8，12，15，17，23，26，32-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(188mg)，為固體。
制備例170-177的化合物是以類似于制備例169的方法獲得的。
制備例178 在冰浴冷卻下，向制備例1的目標化合物(66mg)在CH2Cl2(2.5ml)中的溶液中加入(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-4-甲基戊酸(16.5mg)、HOAt(9.1mg)和WSCD(10.4mg)，再在冰浴冷卻下將該混合物攪拌1.5h。在真空下濃縮所得混合物，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(6R，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S，36S)-36-[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，12，15，24，27-六異丁基-30-異丙基-2，2，5，8，14，18，21，23，29，32-十甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氧代-3-氧雜-5，8，11，14，17，20，23，26，29，32，35-十一氮雜三十七烷-37-酸甲酯(57mg)為淡黃色粉末。所得產物未進一步純化即用于下一反應。
制備例179-192的化合物是以類似于制備例178的方法獲得的。
制備例193 在冰浴冷卻下，向制備例178的目標化合物(57mg)在CH2Cl2(1.2ml)中的溶液中加入TFA(0.3ml)，再在冰浴冷卻下將該混合物攪拌2h。在冰浴冷卻下將所得混合物用NaHCO3水溶液中和(430mg，在20ml H2O中)，再在真空下濃縮。向該殘余溶液中加入飽和NaHCO3水溶液以調節pH＝8，再將該混合物用AcOEt萃取。將有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用NaSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，6，9，12，21，24-六異丁基-27-異丙基-5，11，15，18，20，26，29-七甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸甲酯(53mg)為無色固體。
制備例194-207的化合物是以類似于制備例193的方法獲得的。
制備例208 在冰浴冷卻下，向制備例57的目標化合物(1.00g)、(2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](甲基)氨基}丙酸(399mg)和Bop-Cl(416mg)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中加入N-乙基-N-異丙基-2-丙胺(422mg)。在室溫下攪拌過夜之后，在真空下濃縮反應溶液。將殘余物溶解于AcOEt(50ml)，再將該溶液用0.5N HCl、1M NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物通過硅膠柱(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)純化，得到(5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S，35S)-8-(1-叔丁氧基乙基)-1-(9H-芴-9-基)-35-[(1R)-1-羥乙基]-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-2-氧雜-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34-十一氮雜三十六烷-36-酸甲酯(1.25g)為無定形粉末。
制備例209-212的化合物是以類似于制備例208的方法獲得的。
制備例213 在環境溫度下，向制備例159的目標化合物(110mg)在二噁烷(2.4ml)中的溶液中加入1N NaOH(0.6ml)，再將該混合物攪拌2h。向該反應混合物中加入10％枸櫞酸水溶液以調節pH＝4，再將該溶液用AcOEt萃取。有機相用鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將殘余物與Et2O研磨，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18R，21S，24S，27S，30S，33S)-33-[(1R)-1-羥乙基]-30-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，12，21，24-戊異丁基-27-異丙基-3，5，11，15，18，20，26，29-八甲基-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十氧代-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一氮雜三十四烷-34-酸(79mg)為無色粉末。
制備例214的化合物是以類似于制備例213的方法獲得的。
制備例215 在冰浴冷卻下，將制備例110的目標化合物(193mg)溶解于10％TFA/CH2Cl2(6ml)。在相同溫度下攪拌2h之后，向該反應溶液中加入1MNaHCO3水溶液至pH＝8。用CHCl3(50ml)萃取反應混合物，有機層用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(1R)-1-{(2S，5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S)-8-(1-羥乙基)-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2-基}乙基乙酸酯(183mg)為無定形粉末。
制備例216 向制備例215的目標化合物(187mg)在CH2Cl2(1.2ml)中的溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(54mg)和N-甲基嗎啉(29μl)。將該混合物攪拌過夜之后，以1小時的間隔加入三批另外的4-硝基苯基氯甲酸酯(54mg)和N-甲基嗎啉(29μl)。消耗掉起始化合物之后，將該混合物用AcOEt稀釋，用1N鹽酸水溶液和NaHCO3洗滌，用MgSO4干燥，濃縮。殘余物用硅膠(己烷/AcOEt＝1/4，然后CH2Cl2/MeOH＝9/1)進行色譜層析，得到(1R)-1-[(2S，5R，8S，11S，14S，17S，20R，23S，26S，29S，32S)-32-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-11，14，23，26-四異丁基-29-異丙基-4，5，7，13，17，20，22，28，31-九甲基-8-(1-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}乙基)-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2-基]乙基乙酸酯(87mg)。
制備例217 向制備例216的目標化合物(27mg)在四氫呋喃(1ml)中的溶液中加入嗎啉(4.9μl)，再在室溫下下將該混合物攪拌過夜。殘余物用硅膠(CH2Cl2/MeOH＝97/3至90/10)進行色譜層析，得到1-{(2S，5S，8S，11S，14R，17S，20S，23S，26S，29S，32R)-29-[(1R)-1-乙酰氧基乙基]-26-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-5，8，17，20-四異丁基-23-異丙基-1，7，11，14，16，22，25，31，32-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2-基}乙基嗎啉-4-羧酸酯(22mg)。
制備例218-220的化合物是以類似于制備例217的方法獲得的，實施例1的化合物是以類似于制備例4的方法獲得的。
實施例2 在冰浴冷卻下，向制備例139的目標化合物(42.7mg)在CH2Cl2(43ml)中的溶液中加入HOAt(5.5mg)和WSCD(6.3mg)，再在5℃下將該混合物攪拌13h。在真空下將反應混合物濃縮，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用H2O、10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法(CHCl3∶MeOH＝95∶5)純化，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-33-仲丁基-3-乙基-6-(1-羥乙基)-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(29mg)為無色粉末。
實施例3-11的化合物是以類似于實施例2的方法獲得的。
實施例12 在冰浴冷卻下，將以下實施例25的目標化合物(1.00g)溶解于10％TFA/CH2Cl2(10ml)。在相同溫度下攪拌2h之后，向該反應混合溶液中加入1M NaHCO3水溶液至pH 8。將反應混合物用CHCl3(50ml)萃取，有機層用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮。將所得殘余物通過硅膠柱純化(洗脫液2％MeOH，在CHCl3中)，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-33-(1-羥乙基)-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(625mg)為無定形粉末。
實施例13的化合物是以類似于實施例12的方法獲得的。
實施例14 在冰浴冷卻下，向制備例41的目標化合物(42.7mg)在CH2Cl2(48ml)中的溶液中加入HOAt(7.3mg)和WSCD(8.3mg)，再在5℃下將該混合物攪拌13h。在真空下將反應混合物濃縮，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用H2O、10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法純化(CHCl3∶MeOH＝95∶5)，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-33-仲丁基-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(29mg)為無色粉末。
實施例15-24的化合物是以類似于實施例14的方法獲得的。
實施例25 在冰浴冷卻下，向制備例20的目標化合物(785mg)和HOAt(99mg)在CH2Cl2(785ml)中的溶液中經3h加入WSCD(113mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液。在5℃下攪拌過夜，將溶液在真空中濃縮。將殘余物溶解于AcOEt(40ml)-H2O(40ml)，用0.2N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌溶液，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到粉末。將粗制粉末通過硅膠柱色譜法(洗脫液∶己烷∶丙酮，2∶1)純化，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-33-(1-叔丁氧基乙基)-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(365mg)為無定形粉末。
實施例26-35的化合物是以類似于實施例25的方法獲得的。
實施例36 在冰浴冷卻下，向制備例75的目標化合物(48mg)在CH2Cl2(37ml)中的溶液中加入HOAt(6.0mg)和WSCD(6.9mg)，再在5℃下將該混合物攪拌13h。在真空下將反應混合物濃縮，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用H2O、10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法純化(CHCl3∶MeOH＝95∶5)，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-3，15，18，27，30，33-六異丁基-12-異丙基-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(34mg)為無色粉末。
實施例37-51的化合物是以類似于實施例36的方法獲得的。
實施例52 在冰浴冷卻下，向制備例161的目標化合物(920mg)和HOAt(489mg)在CH2Cl2(1000ml)中的溶液中加入WSCD(558mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液，再攪拌該混合物。在5℃下攪拌過夜之后，在真空下濃縮該溶液。將殘余物溶解于AcOEt(100ml)-H2O(100ml)，將該溶液用0.2N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再在真空下濃縮，得到粉末。將粗制粉末通過硅膠柱色譜法(洗脫液4％MeOH，在CHCl3中)純化，得到(3S，6S，9S，12R，15S，18S，21S，24S，30S，33S)-24-(1-叔丁氧基乙基)-30-[(1R)-1-羥乙基]-33-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-6，9，18，21-四異丁基-3-異丙基-1，4，10，12，15，19，25，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(448mg)為無定形粉末。
實施例53-73的化合物是以類似于實施例52的方法獲得的。
實施例74 在冰浴冷卻下，向制備例213的目標化合物(79mg)在CH2Cl2(63ml)中的溶液中加入HOAt(10.3mg)和WSCD(11.7mg)，再在5℃下將該混合物攪拌13h。在真空下將反應混合物濃縮，殘余物用AcOEt萃取。將有機相用H2O、10％枸櫞酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，再用Na2SO4干燥。在真空下除去溶劑，再將該殘余物通過制備型薄層色譜法(CHCl3∶MeOH＝95∶5)純化，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30，33-戊異丁基-12-異丙基-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(43mg)為無色粉末。
實施例75 將(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-3-[(芐氧基)甲基]-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R)-1-羥基-2-甲基己基]-15，18，27，30，33-戊異丁基-12-異丙基-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(22mg)溶解于MeOH(1ml)，再在室溫和大氣壓下經5％Pd/碳氫化。2小時之后，濾出催化劑，再在真空下減壓濃縮濾液。殘余物通過硅膠柱制備型薄層色譜法(己烷-丙酮1∶1)純化，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-3-(羥甲基)-9-[(1R，2R)-1-羥基-2-甲基己基]-15，18，27，30，33-戊異丁基-12-異丙基-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(18mg)。
實施例76 將(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-3-[(芐氧基)甲基]-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基-4-己烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-33-(1-甲氧基乙基)-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(20mg)溶解于MeOH(2ml)，再在室溫和大氣壓下經Pd/碳氫化。40分鐘之后，濾出催化劑，再在真空下減壓濃縮濾液。殘余物通過硅膠制備型薄層色譜法(CHCl3∶MeOH＝95∶5)純化，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-3-(羥甲基)-9-[(1R，2R)-1-羥基-2-甲基己基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-33-(1-甲氧基乙基)-1，4，10，13，19，21，24，28-八甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(12mg)為無色粉末。
實施例77 向制備例217的目標化合物(11.5mg)在四氫呋喃(1ml)中的溶液中加入在MeOH(1ml)中的甲醇鈉(sodium methanolate，25μmol)，再在室溫下將該混合物攪拌過夜。將該混合物經ODS純化，得到1-{(2S，5S，8S，11S，14R，17S，20S，23S，26S，29S，32R)-29-[(1R)-1-羥乙基]-26-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-5，8，17，20-四異丁基-23-異丙基-1，7，11，14，16，22，25，31，32-九甲基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33-十一氧代-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2-基}乙基嗎啉-4-羧酸酯(9mg)。
實施例78-80的化合物是以類似于實施例77的方法獲得的。
實施例81 在室溫下，將(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R，4E)-1-羥基-2-甲基己-4-烯-1-基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-33-(1-甲氧基乙基)-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(60mg)在MeOH(6.0ml)中的溶液用20％Pd/C(50％濕品；30mg)氫化2小時。過濾該混合物，再將濾液濃縮。蒸發殘余物，得到(3R，6S，9S，12S，15S，18S，21R，24S，27S，30S，33S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-9-[(1R，2R)-1-羥基-2-甲基己基]-15，18，27，30-四異丁基-12-異丙基-33-(1-甲氧基乙基)-1，3，4，10，13，19，21，24，28-九甲基-1，4，7，10，13，16，19，22，25，28，31-十一氮雜環三十三烷-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，32-十一酮(56mg)。
實施例82和83的化合物是以類似于實施例81的方法獲得的。
實施例和制備例的化合物的結構和質譜數據(ESI-MS[(M+H)+]，除非另有說明)顯示于表1～42，實施例化合物的1H-NMR數據的峰δppm(氯仿-d、TMS內標)顯示于表43。
表1～11下式表示的實施例化合物
表1
表2
表3

表4
表5
表6

表7

表8

表9

表10

表11
表12下式表示的實施例化合物
表13～22下式類型1表示的制備例化合物
表13(類型1-1)

表14(類型1-2)

表15(類型1-3)

表16(類型1-4)

表17(類型1-5)

表18(類型1-6)

表20(類型1-8)

表21(類型1-9)

表22(類型1-10)
表19(類型1-7)

表23～31下式類型2表示的制備例化合物
表23(類型2-1)

表24(類型2-2)

表25(類型2-3)

表26(類型2-4)
表27(類型2-5)


表28(類型2-6)

表29(類型2-7)

表30(類型2-8)

表31(類型2-9)
表32～36下式類型3表示的制備例化合物
表32(類型3-1)

表33(類型3-2)

表34(類型3-3)

表35(類型3-4)

表36(類型3-5)

表37～40下式類型4表示的制備例化合物
表37(類型4-1)
表38(類型4-2)

表39(類型4-3)

表40(類型4-4)
表41下式表示的其它類型的制備例化合物

表42下式表示的另一其它類型的制備例化合物

表43 本發明化合物結構顯示于以下表44。這些化合物可以容易地通過上面的制備方法、實施例或制備例中所述的方法、或者本領域技術人員公知的方法，或者其變換方式制備。


權利要求
1.下通式(I)的環肽化合物或其鹽
其中
X是
或
其中
R1是氫或低級烷基；
R2是氫、芳基或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代
羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、任選取代的氨甲酰氧基、和任選取代的氨基；
以及
是含N的雜環基團；
Y是
或
其中
R3是環(低級)烷基、芳基、任選取代的雜環基團或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代
羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、任選取代的氨基和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)；
以及
R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基；
以及
表示單鍵或雙鍵；
條件是
當R2是氫時，R3是環(低級)烷基、芳基、任選取代的雜環基團、低級烷氧基甲基、芳基(低級)烷基、叔丁基、仲丁基、環(低級)烷基(低級)烷基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代羥基，低級烷氧基，芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、任選取代的氨基和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自定義如上文)。
2.權利要求1的化合物或其鹽，
其中
X是
其中
R1是氫或低級烷基；
以及
R2是芳基或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代
羥基、環(低級)烷基、低級烷氧基、芳基、芳基(低級)烷氧基、二(低級)烷基氨甲酰氧基、和氨基，其任選被選自以下的一個或兩個適合的取代基取代
低級烷基、芐氧基羰基、和叔丁氧基羰基；
以及
Y是
或
其中
R3是環(低級)烷基、芳基、或低級烷基，其任選被選自以下的適合的取代基取代
羥基、低級烷氧基、和芳基(低級)烷氧基；
R4是氫；
以及
R5是低級烷基。
3.權利要求2的化合物或其鹽，
其中
R1是低級烷基；
R2是低級烷基；
Y是
其中
R3是芳基或低級烷基，其任選被羥基或低級烷氧基取代；
R4是氫；
以及
R5是低級烷基；
以及
部分是雙鍵。
4.利要求3的化合物或其鹽，
其中
R3是低級烷基，其任選被羥基或低級烷氧基取代。
5.利要求1的化合物或其鹽，
其中
X是
其中
R1是低級烷基；
以及
R2是氫；
以及
Y是
或
其中
R3是環(低級)烷基、芳基、任選被低級烷氧基羰基取代的雜環基團、(低級)烷氧基(低級)烷基、芳基(低級)烷基、叔丁基、仲丁基、環(低級)烷基(低級)烷基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代
羥基、低級烷氧基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)、和氨基，其任選被選自以下的一個或兩個適合的取代基取代
低級烷基和芐氧基羰基；
以及
R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基。
6.利要求5的化合物或其鹽，
其中
Y是
其中
R3是環(低級)烷基、芳基、任選被低級烷氧基羰基取代的雜環基團、叔丁基、仲丁基、或乙基，其被選自以下的適合的取代基取代
羥基、低級烷氧基、芳基(低級)烷氧基、低級烷氧基(低級)烷氧基、和-OC(O)NR6R7(其中R6和R7各自獨立地是氫或低級烷基，或者R6和R7與它們所連接的氮原子一起表示任選被低級烷基取代的含N雜環基團)；
R4是氫
以及
R5是低級烷基；
以及
部分是雙鍵。
7.利要求1的化合物或其鹽，
其中
X是
以及
Y是
其中
R3是低級烷基；
以及
R4和R5各自獨立地是氫或低級烷基。
8.利要求7的化合物或其鹽，
其中
X是
或
R4是氫；
R5是低級烷基；
以及
部分是雙鍵。
9.備權利要求1的化合物或其鹽的方法，其包括
i)使下式(IIa)化合物或其鹽
與下式(V)化合物或其鹽反應
其中Y如權利要求1定義，
P是氨基保護基團，以及
L是離去基團；
再連續地進行所述氨基保護基團的脫保護反應；再進一步連續地環化反應，得到下式(Ia)化合物或其鹽
其中Y如權利要求1定義；
ii)使下式(IIb)化合物或其鹽
與下式(VI)化合物或其鹽反應
其中X如權利要求1定義，以及
L和P各自定義如上文；
再連續地進行所述氨基保護基團的脫保護反應；再進一步連續地環化反應，得到下式(Ib)化合物或其鹽
其中X如權利要求1定義；
iii)使下式(IIc)化合物或其鹽
與以上化合物(V)或其鹽反應；再連續地進行所述氨基保護基團的脫保護反應；再進一步連續地進行一系列的與以上化合物(VI)或其鹽的反應、脫保護反應和環化反應，得到下式(Ic)化合物或其鹽
其中X和Y各自如權利要求1定義；
iv)使以上化合物(Ic)或其鹽進行氫化反應，得到下式化合物(Id)或其鹽
其中X和Y各自如權利要求1定義。
10.制備下式化合物(II)或其鹽的方法
其中
R’是甲氧基或
以及
R”是氫或
使下式化合物(VII)或其鹽
進行重排反應，再連續地進行氨基保護反應，然后再進行水解反應，下一步連續地與下式化合物(X)或其鹽反應
其中R’如上文定義；再進一步連續進進行所述氨基保護基團的脫保護反應，最后進行Edman降解法2或3次，得到式化合物(II)或其鹽。
11.一種藥物組合物，其包括作為活性成分的權利要求1的化合物或其藥學可接受的鹽和藥學可接受的載體或賦形劑。
12.權利要求1的化合物或其藥學可接受的鹽在制備藥物中的用途。
13.用作藥物的權利要求1的化合物或其藥學可接受的鹽。
14.預防性和/或治療性治療丙型肝炎的方法，其包括向人或動物給予權利要求1的化合物或其藥學可接受的鹽。
15.一種商品包裝，其包括權利要求11的藥物組合物和與其相關的書面材料，其中所述書面材料說明所述藥物組合物可以或者應當用于預防或治療丙型肝炎。
16.一種制造品，其包括包裝材料和包含在所述包裝材料中的權利要求1定義的化合物(I)或其藥學可接受的鹽，其中所述的化合物(I)治療上有效地預防或治療丙型肝炎，并且其中所述包裝材料包括標簽和書面材料，所述書面材料說明所述化合物(I)可以或者應當用于預防或治療丙型肝炎。
全文摘要
本發明涉及新的環肽化合物或其鹽，其具有基于對丙型肝炎病毒復制子的RNA復制具有抑制活性的抗-丙型肝炎病毒活性；涉及其制備方法，所述方法包括在溫和的酸性條件下的重排反應以及隨后的氨基酸變換反應等；涉及包括它們的藥物組合物；以及涉及預防性和/或治療性治療人類或動物丙型肝炎的方法。
文檔編號A61P31/00GK101305019SQ200680039029
公開日2008年11月12日 申請日期2006年10月26日 優先權日2005年10月26日
發明者閨正博, 吉村誠司, 上條一紀, 牧野拓也, 安田實, 山中敏夫, 辻井榮作, 山岸幸子 申請人:安斯泰來制藥有限公司