Rhcc在藥物遞送、真實過濾、化學催化及納米顆粒生產中的用途的制作方法

專利名稱：Rhcc在藥物遞送、真實過濾、化學催化及納米顆粒生產中的用途的制作方法
RHCC在藥物遞送、真實過濾、化學催化及納米顆粒生產中的用途 發明領域本發明涉及蛋白質及其在藥物遞送、過濾、作為催化劑和在納米 顆粒(nanopartide)生產中的用途的領域。更具體而言，本發明涉及 包含疏水性空腔的特定蛋白質的用途，所述蛋白質適合于用于例如藥 物遞送、通過從流體和/或非流體物質過濾來去除毒性物質、在化學反 應中作為催化劑、以及用于生產納米顆粒。發明背景稱為RHCC (右手巻曲螺旋)的多肽鏈是由海葡萄嗜熱菌 (5YGp/^/of/zermws )產生的四臂(tetrabrachion )蛋白質的片段，所述海葡萄嗜熱菌是生活在海底所謂的"黑煙柱(black smoker)" 環境中的細菌。該細菌是硫依賴性的、最佳生長溫度為92°C,且以肽 的發酵為生。；該細菌具有包含所謂的堆積(stack)的準壁膜間隙 (quasi-periplasmic space ),戶斤述:^禾口、由四《連螺J走^R巻曲螺j走連同2 個蛋白質酶一起構建"。該細菌、四臂和RHCC的顯著特性是極端的 耐熱性及其對變性劑的強抵抗力。RHCC的結構已通過x射線晶體學確定。它是四聚的組合，其片 段是右手螺旋，且是右手超結構。4條RHCC鏈各自包含52個殘基 且包含四臂的蛋白酶結合區域(氨基酸殘基1238 - 1287 ) 。 RHCC平 均長72 A，且直徑為25 A。盡管桿狀蛋白質外部是相當親水的，但 內部具有強疏水性特征和大約9500人2的大隱蔽表面。最有特征的是 穿過整個四聚體的通道，所述通道伴隨4個大空腔。空腔具有145 - 300 人3的體積，并且也具有強疏水性特征。"'i"' iv， v然而，在晶體結構中， 這些空腔充滿了水分子。金屬和金屬離子以及金屬配合物在已知其作用方式很久以前就已 應用于醫學用途。這個的例子是用于治療胃腸病癥的鉍。作用方式正 在進行研究，并且與細胞膜、蛋白質、DNA和酶的金屬藥物 (metallodmg)相互作用被表明尤其重要。作用方式的理解使得可能 設計基于金屬的藥物。其中金屬藥物已取得進展的領域的例子是基于銀的抗感染劑、用于磁共振成像的基于釓和鐵的造影劑、用于x射線 成像的放射性核素、和用于癌癥治療的鉑，例如順鉑。Vii然而，如作為治療劑有效一樣，當不受控制地攝食時金屬也可以 是劇毒的。重金屬例如鉛、汞、砷以及許多它們的化合物對人是有毒 的，然而對這些及其他的暴露已由社會的工業化而增加。毒性作用可 以是金屬化合物與身體的天然成分，例如氧、硫和氮，之間形成配合 物的結果。由金屬修飾的生物分子可能失去其正確地發揮功能的能 力，并且如果金屬以足夠的量攝食，那么這個的病征可能是病理性的。藥物遞送大多數藥物(例如順鉑)具有嚴重的副作用，這意味著它們不僅 對例如細菌、病毒和癌細胞有活性，而且它們還攻擊身體細胞和器官。 為了使這些副作用降到最低，需要具有在通過身體時掩蔽藥物直至它 已到達靶細胞或器官的容器。許多藥物在血流中不能溶解至所需程度，所以在血液中只能應用小濃度。為了克服這個問題，已開發了藥物遞送系統(DDS)，它提 供了在疏水核周圍的親水殼，這適合于疏水性藥物(例如，脂質體)。含金屬藥物和不含金屬藥物的特性可以通過將藥物與藥物遞送系 統(DDS)組合應用而得到改善。DDS可以改變給定藥物的藥物代謝 動力學和生物分布(例如耙向的遞送)。DDS可以用作藥物經過長時 間段控制釋放的藥物庫(reservoir) 。 Vli脂質和聚合物通常用作DDS, 并且圍繞這些遞送系統已進行了廣泛研究。近來在市場上已出現了用 于藥物的受控遞送和/或用于成像用途的造影劑的樹狀聚體和樹枝狀聚 合物。vi"近來，已出現許多基于DDS的蛋白質，包括蛋白質-聚合物 系統以及巻曲螺旋蛋白質。x' xi如下文所列，本領域現在已知的DDS仍具有重大缺點。 一般的 DDS應當容易溶解于血流中，從而使得足夠量的載體-藥物復合物可 以應用于患者。不幸的是，如果聚合物的確包含疏水性側鏈或樹狀聚 體具有疏水性外殼，那么用于DDS的聚合物和樹狀聚體可以具有溶 解性問題。當藥物將在身體中某個位置處從DDS釋放時，特異性靶向是需 要的。靶向可以通過纟合DDS加上標記來完成，所述標記對耙組織或耙組織上的組分特異。最常見的遞送系統難以標記；脂質體難以標記是因為它們由數以百計的單個脂質分子(脂質)組成，所述脂質分子是聚集的。對于基于脂質體的DDS,給脂質分子加上標記可能改變獲 得脂質體所需的濃度和操作。同樣，脂質標記操作可能必須在有機溶劑中進行，所述有機溶劑可能與所需標記不相容，所述標記可能是例 如基于肽的結構(在有機溶劑中具有低溶解性和穩定性)。對于聚合 物和樹狀聚體存在同樣的基本問題。DDS不應不能接受地減少藥物的功能性。對于例如癌癥治療，只 有水解形式的順鉑的充分確定的形狀能夠與癌細胞的RNA結合且阻 止其增殖。試圖通過用小受體靶向分子標記例如順鉑來將它遞送給癌 細胞，但在維持順鉑的幾何和化學形狀并從而維持它的功能性的要求下這非常具有挑戰性xi"。DDS應該可能以可重復的形式大量生產。脂質體的生產難以擴大 規模(upscale);大量生產的脂質體的特性往往匹配小量生產的脂質 體的特性。基于聚合酶的DDS依賴于聚合物的窄分子量分布。這需要相當 難的生產技術和/或分離步驟。樹狀聚體往往難以生產是因為它的生產通常是多步化學合成。有用的DDS應當是穩定的且可能貯存。脂質體只是亞穩定的且 在室溫下降解，從而對DDS的生產后處理施加了限制。金屬過濾金屬中毒的治療集中在從體內排出金屬。常用的治療是乙二胺四 乙酸(EDTA)-與帶正電的金屬離子配合的金屬螯合劑。EDTA還 確實與負責細胞膜完整性的陽離子如同例如鈣和鎂配合，并且副作用和免疫反應也不能被忽視。 納米顆粒生產在過去20年中毫微大小的材料(例如金屬毫微簇)已引起大量 興趣。興趣由無數特性和應用的前景激起，所述特性和應用與原子 和小分子的受控排序對毫微大小的物體的作用有關。應用達到從基 于量子點的新電子裝置、傳感器和催化劑到具有無比的機械強度的新類材料(例如碳納米管(nanotube))。金屬納米顆粒的獨有特征 是它們表現得像分子而不是散裝金屬；例如與散裝金屬的連續帶結構 相反，此類小顆粒由于獨特的能級而具有獨特的吸收語帶。這種作用 可以用于測定金屬納米顆粒的尺寸。為了生產納米顆粒，大量操作已被公開。對于納米顆粒生產的具 體挑戰是達到窄尺寸分布X11。構建納米顆粒時的主要問題是它們聚集 成較大單位。已使用硫醇來解決這個問題，因為它們與例如金顆粒表 面結合，從而防止顆粒-顆粒相互作用。發明概述本發明涉及來源于四臂蛋白質的肽-在本文中稱為RHCC和/或 其片段的各種用途。所述RHCC肽是具有其中可以積聚例如金屬配合 物的空腔的四鏈巻曲螺旋。本發明提供了關于單一和/或結晶形式的所述RHCC肽和/或其片 段的新用途。所述RHCC肽和/或肽的晶體配合物可以在單個肽和/或 晶體圓周上進行標記，從而允許特異性耙向例如活體內的環境和/或位 點，或需要所述作用的任何地方。在一個方面，此類靶還可以是微生 物，例如細菌和/或病毒。本領域技術人員將理解每當提及RHCC肽 和/或其片段，就意指至少一種RHCC肽和/或至少2種RHCC肽的晶 體配合物和/或肽片段。本發明還涉及所述RHCC肽和/或其片段用作藥物遞送系統的用 途，所述藥物遞送系統用于將包含至少 一種元素例如金屬元素的藥物 遞送至身體內的特定位點，所述至少一種元素用于使所述藥物與所述 藥物遞送系統結合。所述藥物遞送系統和所選藥物可以包含在藥物組 合物中作為藥物使用。此外，本發明還包含的是所述RHCC肽和/或其片段用于從流體 和/或非流體物質、例如從體液和/或組織過濾物質的用途，所述物質 包含至少一種元素例如金屬元素，所述至少一種元素用于使所述物質 與所述RHCC肽和/或其片段結合。在另一實施方案中，RHCC肽和/ 或其片段遇到的物質可以積聚在其空腔內，且因此裝載的肽將通過尺 寸排阻過濾器和/或腎和/或其他功能從流體和/或非流體物質中清除。 更具體而言，所述物質一般將是重金屬，以及包含重金屬的物質。本發明還包含的是包含金屬納米顆粒(例如Pt、 Pd、 Ir、 Rh、 Ru) 的RHCC肽和/或其片段作為化學反應催化劑的用途，所述化學反應 例如還原、氧化、C-C和C-雜原子(例如但不限于，O、 N、 S、 P) 形成反應和重排。這時在空腔內的金屬組合充當化學反應催化劑，所 述化學反應例如氫化和氧化還原反應、C-C和C-X偶合和重排，優選 以水作為溶劑。另外，本發明還涉及所述RHCC肽和/或其片段在納米顆粒構建 中的用途。RHCC肽和/或其片段的空腔可以充當其中金屬鹽到金屬納 米顆粒的反應的反應室。附圖簡述

圖1:溶于tris-緩沖液(A)、甲醇和tris-緩沖液的混合物(體積 50/50 ) ( B )、曱醇(C )中的HgI42-、以及連同RHCC —起溶于tris-緩沖液(E)的Hgl -的吸收光譜。tris-緩沖液(D)的光譜已從所有 光譜中減去，并且RHCC的光譜已從光譜E中減去。圖2:溶于tris-緩沖液(A)、含RHCC的未過濾的混合物(B) 中以及用尺寸排阻過濾器("Centurion 10")過濾后(C)的Hgl42-的吸收光鐠。圖3:順鉬和RHCC在分開溶液中的吸收光諳(小圖)，以及過 濾過量順鉑且用不含金屬配合物的溶劑替換溶劑后RHCC和順鉑的混 合溶液的吸收光諳。發明詳述令人驚訝的是，本發明人已發現物質和/或藥物與RHCC肽和/或 其片段的可能結合及從后者釋放使后者成為下列用途中的有用工具 例如藥物遞送、從活體過濾毒性物質、用于生產納米顆粒、作為化學 反應中的催化劑、或用作反應容器。因此，本發明的主要目的是提供使用RHCC肽和/或其片段的用 于藥物遞送、過濾物質的系統和/或用于生產納米顆粒的系統，所述 RHCC肽和/或其片段使得可能在特定目的位點與物質和/或藥物結合 和釋放。RHCC肽和/或其片段還涉及在納米顆粒生產以及化學反應中 的催化劑中的用途。因此，本發明涉及RHCC肽和/或其片段的各種用途。本發明人顯示RHCC肽能夠與目的物質和/或藥物結合，所述物質和/或藥物包 含使得能夠與所述RHCC肽結合的元素，所述物質和/或藥物與肽的 內部結合，隨后通過靶環境中改變的條件而被釋放。所述RHCC肽和 /或其片段因此可以用作藥物遞送系統、過濾系統、催化劑和/或用于 生產納米顆粒。此外，所述RHCC肽和/或其片段還可以包含在另外 包含所選藥物和/或物質的藥物組合物中，用于將所述藥物和/或物質 遞送多合例3口革巴組織。在本發明的一種背景中，例如通過使用將保護鄰近RHCC序列的 插入的限制位點將編碼標記的相應cDNA片段克隆到petl5b-RHCC構 建體內，RHCC肽和/或其片段可以與合適的標記(例如識別癌細胞上 的細胞表面抗原的單鏈抗體)融合。不希望限制本發明，融合肽的表 達和/或純化可以依照如實一險部分中所述的單獨RHCC的表達和純化 來完成。本領域技術人員應當理解所述RHCC肽當然也可以在RHCC 肽生產和純化后與標記融合。a v 3:'US* B M I ￡i H S表l: RHCC—條鏈的氨基酸序列(SEQ.ID.NO:l) RHCC肽在本上下文中包含肽，所述肽包含稱為肽鏈的4條鏈， 一起形成右手平行RHCC四聚體。所述肽鏈之一的序列在表1中給出 (SEQ.ID.NO: 1 )。四聚體RHCC肽包含各為52個氨基酸殘基的4條 肽鏈，總共為208個氨基酸。由小寫字母指示的11殘基重復位置依 照Lupasx"i和Stetefeld"提出的模型分配。疏水核的位置是a和h。 11 殘基重復的連續性被He 11和Thr 16之間的4殘基插入(打滑)打斷。 開始的2個N末端殘基Gly 1和Ser 2不是四臂編碼序列的部分。天 然RHCC從11開始。GS來源于載體且不屬于四臂蛋白質。因為我們 已用從GS開始的重組表達蛋白質進行了所有實驗，所以我們提到這&寂s寂T& 狡究l 辦,德 一 一1 3 4 s個序列。在融合分子中，這些氨基酸充當接頭。氨基酸的編號在序列左側指示。氨基酸殘基Ile 3對應于四臂序列上的第1238位。因此， 術語"RHCC狀"在本上下文中指包含4條肽鏈的四聚復合物和/或其 片段，所述肽鏈可以互相獨立地具有任何合適的長度，例如來源于SEQ ID NO:l的約1-52個氨基酸。在本發明的一個優選實施方案中，肽 鏈為約52個氨基酸。"RHCC肽，，還可以指已通過任何合適的方式 修飾的RHCC肽和/或其片段，所述修飾例如如本發明所公開的點突 變。還應當理解"RHCC肽"也可以指幾種RHCC肽和/或其片段的晶 體復合物。此類晶體復合物包含至少2種RHCC肽和/或其片段，優 選尺寸為10 rn^及更大。此類RHCC晶體復合物也可以具有用于目 標用途的任何合適尺寸。蛋白質是由氨基酸殘基構成的生物大分子，所述氨基酸殘基由肽 鍵連接在一起。蛋白質和/或肽在本上下文中可以通過相互作用例如疏 水和/或親水相互作用和/或鹽橋保持在一起。蛋白質作為氨基酸殘基 的線性聚合物也稱為多肽。 一般地，蛋白質具有50 - 800個氨基酸殘 基，且因此具有約6,000 -幾十萬道爾頓或更大的分子量。小蛋白質 稱為肽或寡肽。然而，在本上下文中，應當理解術語"蛋白質"可以 與術語"肽"和"多肽"互換使用。本發明涉及的蛋白質、多肽、肽，例如RHCC肽和/或其片段可 以是基本上分離和/或純化的形式。應當理解蛋白質、多肽和/或肽可 以與載體或稀釋劑混合，所述載體或稀釋劑將不干擾蛋白質、多肽和/ 或肽的預期用途，并且它們將仍視為基本上分離的。此類基本上純化 的形式一般將包含在制劑和/或組合物中的蛋白質、多肽和/或肽，其 中制劑中超過大約90%,例如95%、 96%、 97%、 98%、 99%或100%的蛋白質、多肽和/或肽是依照本發明的蛋白質、多肽和/或肽。此外，與依照本發明的RHCC肽和/或其片段的氨基酸序列至少70 %相同的任何氨基酸序列，例如至少72 % 、 75 % 、 77 % 、 80 % 、 82 % 、 85%、 87%、 90%、 91%、 92%、 93%、 94%、 95%、 96%、 97%、 98%或99%相同，也視為在本發明的范圍內。依照本發明的"片段"包含RHCC肽的任何長度的任何合適的氨 基酸片段。因此，本發明的上下文中RHCC肽的片段包含四聚RHCC 肽的一條肽鏈的至少一個部分，最高達RHCC肽的4條鏈的至少一個部分。依照本發明的RHCC肽的片段包含約1 - 207個氨基酸，例如 但不限于約l-50、 50- 100、 100 - 150、 150- 200或200 - 207個氨 基酸。RHCC肽的片段還可以更長，如果任何所述RHCC肽鏈已由另 外的氨基酸殘基延長的話，所述另外的氨基酸殘基不是RHCC肽鏈 (SEQ ID NO:l)的天然氨基酸序列的部分。向天然序列加入的另外 氨基酸殘基的量沒有限制，然而設想結合結構域可以包含約100-150個殘基。RHCC肽和/或其片段可以以許多不同方式生產，包括但不限于， 較大分子的斷裂、化學合成、重組技術和/或通過這些方法的組合。本 領域技術人員應當理解用于生產RHCC肽和/或其片段的任何方法都 可以在本發明的背景中使用。本發明還包含的是已通過任何合適方式修飾的RHCC肽和/或其 片段的用途。具有與參考氨基酸序列至少例如90%相同的氨基酸序列 的蛋白質、多肽、肽和/或其片段，意指例如肽的氨基酸序列等同于參 考序列，除了氨基酸序列可能包括最高達10個點突變(但不限于10 個點突變)/參考氨基酸序列的100個氨基酸之外。換言之，為了獲得 具有與參考氨基酸序列例如至少90%相同的氨基酸序列的肽，參考序 列中最高達10%的氨基酸可以被缺失或由另一種氨基酸或許多氨基酸 置換。參考序列的這些突變可以發生于參考氨基酸序列的氨基或羧基 末端位置處、或那些末端位置之間的任何地方，單獨散布在參考序列 的氨基酸中、或以一個或多個鄰接群散布在參考序列內。RHCC肽和/ 或其片段4條單獨鏈中的一條或多條的序列中的一個或多個點突變， 被設計為改善RHCC肽的功能性，例如但不限于，結合和釋放物質例 如含金屬物質，和/或藥物。因此，本發明的一種背景涉及RHCC蛋 白質和/或其片段的用途，所述RHCC蛋白質和/或其片段已在RHCC 肽和/或其片段中的任何合適位置上進行點突變，以獲得改善的功能 性。任何合適量的點突變都可以用于獲得具有所需功能性的RHCC肽 和/或其片段。在本發明的一個方面，點突變在RHCC肽和/或其片段 的至少一條肽鏈中進行，以改變所述RHCC肽的至少一個空腔的特 性。RHCC肽和/或其片段的修飾進一步包括給一種或多種RHCC肽和 /或其片段和/或RHCC肽鏈加上標記，即添加氨基酸、碳水化合物和/或化學物質，這在活生物內產生RHCC肽和/或其片段時通過使RHCC和任何其他肽或蛋白質的編碼序列在表達載體內連接來達到，或在合成期間或之后通過化學方法與RHCC肽的一條或多條肽鏈結合來達 到。此類標記可以與單個RHCC肽和/或其片段和/或至少2種RHCC 肽的RHCC肽和/或其片段的復合物結合。此外，本發明當然還包含RHCC和/或其片段的任何其他變體、 書亍生物和/或類似物的用途，所述變體、書f生物和/或類似物仍能與所 需物質和/或藥物結合，和/或在功能上仍等價于天然RHCC肽和/或其 片段。此類變體可以是RHCC肽和/或其片段，其已通過給所述RHCC 肽和/或其片段添加任何合適量的氨基酸來延長，例如但不限于，1-5 和5-10個氨基酸。依照本發明的RHCC肽和/或其片段的修飾還包 括截短。應當理解如本發明公開的任何修飾可以在一條或多條RHCC 肽鏈和/或其片段的核酸和/或氨基酸序列中進行。在本發明中，局部算法程序最適合于測定同一性。局部算法程序(例如Smith-Waterman)比較一個序列中的子序列與第二個序列中的 子序列，并找到子序列組合和那些子序列的比對，所述比對產生最高 的總相似性得分。內部缺口 (如果允許的話)是被罰分的。局部算法 適用于比較2種多結構域蛋白質，所述蛋白質具有共同的單個結構域 或4義4又共同的結合位點。測定同一性和相似性的方法編碼在可7>開獲得的程序中。測定2 個序列之間的同 一 性和相似性的優選計算機程序方法包括但不限于， GCG程序包(Devereux, J等人(1994 ) ) BLASTP、 BLASTN和FASTA(Altschul, S.F.等人(1990) ) 。 BLASTX程序是從NCBI及其他來 源可公開獲得的(BLAST Manual, Altschul， S.F.等人，Altschul， S.F. 等人(1990))。每種序列分析程序具有缺省評分矩陣和缺省缺口罰 分。 一般而言，分子生物學家將預期使用由所用軟件程序確立的缺省 設置。在本發明的一種背景中，RHCC肽和/或其片段可以進一步作為單 一肽和/或作為2種或更多種RHCC肽和/或其片段的晶體復合物應用， 由此可以設計所述晶體的合適大小。此外，單一或晶體結構的RHCC 肽可以用標記修飾，目的是在目的位點處積聚RHCC肽。 一般地，這 個位點可以是胂瘤，并且標記可以是特異性結合正被討論的腫瘤類型的分子。標記對其特異性的位點是組織或組織的成分，稱為靶、靶組 織或耙向的組織。在本發明的一個方面，此類靶還可以包含微生物， 例如細菌和/或病毒。RHCC作為藥物遞送系統(DDS)在優選實施方案中，本發明涉及RHCC肽和/或其片段作為用于 施用藥物的藥物遞送系統的用途，所述藥物包含用于使所述藥物與所 述藥物遞送系統結合的至少一種元素。在一個方面，所述元素是金屬 元素。本發明的具體目的是提供包含RHCC蛋白質和/或其片段的新 DDS,所述DDS減少藥物例如含金屬藥物的無意毒性。術語"藥物遞送系統"在本上下文中指用于遞送任何種類的藥物 例如本文公開的藥物的系統，所述系統包含RHCC肽和/或其片段， 所述RHCC肽和/或其片段能夠使所述目的藥物結合到所述RHCC肽 的空腔內，以在身體內攜帶所述藥物，并隨后在到達靶環境時通過擴 散從所述空腔內釋放所述藥物，或在靶環境中的條件變化后或由所述 變化引起所述藥物從所述空腔內釋放。在本發明的上下文中，術語"元素"指將結合到RHCC肽和/或 其片段的空腔內的物質和/或藥物部分的任何物質，以及基于其促進與 所述RHCC肽和/或其片段結合的能力選擇的任何物質。此類元素可 以是但不限于，金屬元素、疏水性元素、親水性元素等。在本文中，術語"結合"用于描述藥物和/或物質的行為，所述藥 物和/或物質進入RHCC肽和/或其片段的空腔內隨后與其結合，其中 與RHCC肽的所述結合可以通過正被討論的物質和/或藥物與RHCC 肽和/或其片段之間的任何相互作用來進行，所述相互作用例如但不限 于，疏水相互作用、親水相互作用、靜電相互作用、共價結合、范德 華結合、離子結合及其組合。在本發明的上下文中，術語"藥物，，指為了醫學目的向身體添加 的物質，和/或物質組合。此類醫學目的可以是但不限于，診斷、治療 和/或成像。依照本發明的"藥物"和/或"物質"涉及適合于預期目 的的任何化學物質、肽/蛋白質、合成物質等。在本文中，"藥物，，和"物質"可互換使用。在本發明的一個實施方案中，含金屬藥物是優選的。此類藥物和/或藥物組合以合適的方 式施用于患者，其劑量將取決于患者的性別、年齡、健康狀況、疾病 等對每個患者進行設計。無意毒性在本文中指藥物的所有不需要的作用，包括但不限于稱為副作用的作用。包含RHCC肽和/或其片段的DDS可以保護身體不 受藥物影響，因為藥物保持在肽的空腔內。不希望限制本發明，RHCC 肽和/或其片段還可以保護藥物不被身體的成分降解。在本上下文中，術語"金屬元素"指包含任何種類和/或量的金屬 成分的元素，例如金屬和/或半金屬原子，以及包含此類的任何可應用 物質，無論是帶電的還是不帶電的、疏水的、親水的或任何其他形式。在本發明的另一優選實施方案中，元素不僅選自金屬元素，而且 選自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt，和/或其組合。然而 應當理解所述元素并不限于這些。此外，設想所述元素可以是物質和/ 或藥物的部分。在再一實施方案中，所述藥物選自由下列組成的含Pt藥物組順 鉑(PtH6N2Cl2)、卡鉑(PtC6H12N204 )、奈達鉑(PtN2C2H8N203 )、 奧沙利柏(PtN2C8H1404 ) 、 ZD0473 ( PtC6H10N2Cl2 ) 、 JM216 (PtC10H22N2O4Cl2)、洛巴鉑(PtC9H18N203 )、反式畫[PtCl2 (吡啶)2] 和反式-[Pt (OH) 2C12 (NH3) (NH2-C6H5)],和/或其組合。然而本 發明并不限于這些藥物，并且其他藥物也可以在本上下文中使用，例 如由本發明公開的藥物來源或起源的藥物。用于在本發明的上下文中使用的所述含Pt藥物和/或任何其他藥 物設想被裝載到RHCC肽和/或其片段的空腔內。不希望限制本發明 的范圍，裝載可以通過例如將RHCC肽和/或RHCC肽晶體浸入含藥 物的溶液中，例如通過將1 mM順式-PtCl2 (NH2) 2溶液與0.2 mM 肽溶液混合來完成。在本發明的一種背景中，混合溶液在室溫下攪拌 1小時。然而，設想混合條件以及此類混合期間的溫度可以以任何合適的方式改變。取決于藥物特性，RHCC肽和/或其片段的穩定性允許 在更高或更低的溫度下裝載。藥物裝載的例子在圖l和2中給出。此外，在一個實施方案中，本發明涉及RHCC肽和/或其片段作 為用于施用藥物的藥物遞送系統的用途，所述藥物包含用于使所述藥 物與所述藥物遞送系統結合的至少一種元素，如本發明所公開的，其 中所述RHCC肽和/或其片段進一步包含用于特異性靶向的標記。在本文中，術語"標記"指允許選擇性耙向特定環境的分子標記。 依照本發明，標記特異性地與靶相互作用。與其他DDS即脂質體、 聚合物和樹狀聚體比較，標記的肽可以通過在細菌中基因表達來產 生。此外，每條肽鏈的標記(例如用針對癌細胞的細胞表面抗原的抗 體)可以提供標記的寡聚化(四聚體形成)，從而增加結合活性和生 物活性(參考ProcNatlAcadSci USA 2004 April 13; 101 ( 15 ) :5547畫 52)。可以與RHCC肽和/或其片段結合的標記的例子是氨基酸、碳 水化合物和/或另一種化學物質，其加到一種或多種RHCC肽和/或其 片段和/或RHCC肽鏈，這在活生物內產生RHCC肽時通過給編碼載 體加上密碼子序列來達到，或在合成期間或之后通過化學方法與RHCC 肽的一條或多條RHCC肽鏈結合來達到。此類標記可以與單個RHCC 肽和/或其片段和/或與至少2種RHCC肽的RHCC肽和/或其片段復合 物結合。當RHCC肽和/或其片段到達靶時，在一個具體實施方案中藥物 可以從肽釋放。在本上下文中，術語"藥物釋放"指使藥物與在RHCC 肽和/或其片段中它所結合的空腔和/或空隙解離。此類解離可以是由 于擴散和/或環境中的變化，例如但不限于，pH中的變化，RHCC肽 的酶促降解，RHCC肽的水解降解，鹽橋斷裂從而打開肽且允許泄漏， 或當與耙等相互作用時通過標記觸發RHCC肽內化到細胞內。具體 地，藥物從肽中的泄漏將在其中與周圍比較pH更低的細胞輸入系統 附近發生，更低的pH斷裂鹽橋。在本發明的一個方面，RHCC肽可 以通過標記進入細胞內。在另一方面，本發明還涉及RHCC肽和/或其片段作為用于施用 藥物的藥物遞送系統的用途，所述藥物包含用于使所述藥物與所述藥 物遞送系統結合的至少一種元素，其中從所述RHCC肽和/或其片段 的藥物釋放是由于靶環境中的pH變化，RHCC肽和/或其片段的酶促降解，RHCC肽和/或其片段的水解降解，和/或RHCC肽和/或其片段的鹽橋打開，從而允許通過熱力學平衡和/或動力學屏障中的變化而泄漏。"耙環境中的pH變化"指由于例如RHCC肽和/或其片段轉運到 其中pH比原始環境更高或更低的另一種環境的pH中的變化，從而 導致例如所述RHCC肽和/或其片段電荷中的變化，引起RHCC肽的 空腔內存在的物質和/或藥物釋放。在本發明的優選實施方案中，pH 在耙環境例如癌細胞中更低，其中所述物質優選被釋放以用于特定作 用。在本發明的上下文中"靶環境"和/或"靶，，可以是活體內的任何 組織、細胞類型和/或流體。此外，在一種背景中，靶還可以是微生物， 例如細菌或病毒，以及此類卩毀生物或病毒上存在的任何表面分子。應 當理解關于RHCC肽和/或其片段的"靶環境"和/或"靶"可以是此 類RHCC肽例如通過使用標記指向的任何位點。在本發明的一種背景中，物質和/或藥物還可以經由特異性結合使 RCHH肽和/或其片段固定化在所需靶上得到促進，這可以增加物質和 /或藥物在這個位點釋放的可能性。當RHCC肽和/或其片段直接在靶 位點施用，其后經由特異性結合靶而固定到所述靶時，尤其適用此類 釋放方式。在這種情況下物質和/或藥物的釋放主要取決于結合平衡。不希望限制本發明的范圍，設想藥物將最終在所需作用部位從 RHCC肽和/或其片段中釋放，所述所需作用部位例如器官、受感染細 胞和/或肺瘤細胞，本文中稱為靶和/或"靶環境"。如前文指出的，RHCC 肽和/或其片段提供了許多可替代的釋放機制。釋放可以通過例如生物 (例如蛋白質的酶促降解)和化學過程來觸發。此外，優選的是釋放的時間選擇是可控制的，即優選地在到達靶 (所涉及的器官、細胞或肺瘤)前非常低或無釋放，隨后在靶以所需 速率釋放。因此RHCC肽和/或其片段內部和外部(溶劑、晶體內空 隙)之間的藥物轉運的動力學屏障具有重要性。RHCC肽的空腔的入口由鹽橋和/或氫4建建立。不希望限制本發 明，推測多個鹽橋是RHCC肽的極端穩定性的原因，且因而是藥物將 停留在肽內直至釋放被觸發，且鹽橋被打開的原因。在另 一 優選實施方案中，本發明涉及用于施用藥物的藥物遞送系統，其中所述藥物遞送系統包含RHCC肽和/或其片段以及包含選自 下列的至少一種元素的藥物Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt, 和/或其組合。然而應當理解所述元素并不限于這些。此外，設想所述 元素可以是物質和/或藥物的部分。在另一方面，本發明涉及藥物遞送系統，其中所述藥物選自由下 列組成的含Pt藥物組順鉑(PtH6N2Cl2)、卡鉑(PtC6H12N204 )、 奈達鉑(PtN2C2H8N203 )、奧沙利柏(PtN2C8H1404 ) 、 ZD0473 (PtC6H10N2Cl2) 、 JM216 ( PtC10H22N2O4Cl2)、洛巴鉑(PtC9H18N203 )、 反式-[PtCl2 (吡啶)2]和反式-[Pt ( OH ) 2C12 ( NH3) ( NH2-C6H5 )], 和/或其組合。然而本發明并不限于這些藥物，并且其他藥物也可以在 本上下文中使用，例如由本發明公開的藥物來源或起源的藥物。在本 發明的 一個方面，此類藥物遞送系統還可以包含如本文所/>開的標記 用于特異性靶向。RHCC肽在苛刻條件和大溫度間隔中也具有的穩定性使得它優于 考慮用于藥物遞送目的幾乎任何其他肽(例如，其他巻曲螺旋)。比 較起來，脂質體的完整性在血流中難以控制，且因此來自基于脂質體 的DDS的藥物釋放是不可預測的。RHCC肽由于其親水殼在水中是高度可溶的。RHCC肽的空腔具 有疏水襯里，且不那么可溶于水的藥物，特別是含金屬藥物確實在空 腔內積聚。本發明提供了改善難溶性藥物的溶解性的DDS，從而使得 能夠使用比其他方式更大的濃度。此外，肽只攜帶藥物，從而暗示RHCC 肽和藥物之間沒有發生化學反應，且藥物無變化地進行遞送。用于藥物遞送的RHCC肽和/或其片段的制備一般從使RHCC肽 和/或其片段與藥物溶液混合開始。攪拌可能是必需的。RHCC肽是穩 定的，且溫度及其他參數可以依照所選藥物的特性進行設定。所選藥物例如順鉑可以積聚在RHCC肽和/或其片段的空腔內， 從而產生裝載的肽。在某些實施方案中，所述RHCC肽進行標記以在靶位點完成積聚。標記與RHCC肽的結合通過本領域技術人員已知的任何方法完成。例如，RHCC肽可以與標記融合，所述標記是設計為識別耙細胞或組織上的抗原的抗體。融合可以通過設計基因來促進， 所述基因整合肽和標記序列，從而導致生產使肽和標記特性組合的融合蛋白。在本發明的一個實施方案中，裝載有物質和/或藥物、含或不含一種或多種標記的RHCC肽和/或其片段被i.v.(靜脈內)給予患者。如 果所述藥物是標記的，那么RHCC肽和/或其片段通過標記的作用在 把組織積聚。單獨或包含(enscoped)在藥物組合物中、裝載到RHCC肽和/或 其片段內的藥物的施用可以經由任何常規的施用途徑來進行，所述施 用途徑例如但不限于，經口、腸胃外、靜脈內、口腔、耳、直腸、陰 道、腹膜內、局部(皮膚)或經鼻途徑，或通過施用于體腔。在一種 背景中，RHCC肽和/或其片段可以在體內各處轉運直至擊中標記對其 特異的靶。在另一優選實施方案中，本發明涉及包含依照本發明的藥物遞送 系統的藥物組合物。"藥物組合物"指適合于醫學用途，且包含依照本發明的藥物遞 送系統、所選藥物和/或物質、和任選地賦形劑的組合物。然而，耳又決 于RHCC肽和/或其片段的用途，藥物組合物可以是藥物和/或治療和/ 或化妝品組合物。在下文中，術語"藥物組合物"還意欲包含化妝品 組合物以及屬于藥物和化妝品之間所謂的灰色地區的組合物，即藥妝 品(cosmeceuticals )。包含RHCC肽和/或其片段的藥物組合物包含依照本發明的藥物 遞送系統。在本上下文中，術語"藥物遞送系統"可以包含在藥物組 合物(藥物制劑或劑型)中，所述藥物組合物在施用后將活性物質和/ 或藥物呈遞給人或動物身體。藥物或化妝品可接受的賦形劑是對組合物將給其施用的個體基本 上無害的物質。此類賦形劑通常滿足國家衛生當局給出的要求。官方 藥典例如英國藥典(British Pharmacopoeia )、美國藥典(United States of America Pharmacopoeia )和歐洲藥典(European Pharmacopoeia ) i殳 定了關于藥物可接受的賦形劑的標準。在用于依照本發明使用的組合物中藥物可接受的賦形劑的選擇及 其最佳濃度一般無法預測且必須基于最終組合物的實驗性評估來確定。藥物和/或治療制劑領域中的技術人員可以在例如"Remington's Pharmaceutical Sciences",第18版，Mack Publishing Company, Easton， 1990中找到指導。盡管本文中給出了此類賦形劑的例子，但是本發明 并不限于這些。藥物組合物可以適合與外科手術結合施用，例如通過輸注進入血 液、淋巴、腹水或脊髓液內，或通過吸入作為全身施用。對于全身應 用，依照本發明的組合物可以包含依照本發明常規無毒的藥物可接受 的載體和賦形劑，包括小球體和脂質體。用于依照本發明使用的藥物組合物可以是但不限于，例如流體、 半固體或固體組合物的形式，例如但不限于，溶解的輸液液體，例如 無菌鹽水，林格液，葡萄糖溶液，磷酸緩沖鹽水，血液，血漿，水， 粉末，微膠嚢，生物可吸收的貼劑，獸用頓服藥，片，繃帶，石膏， 移植片，丸劑，噴霧劑，皂，栓劑，陰道栓劑(vagitories)，牙膏， 洗劑，漱口劑，洗發劑，小球體，納米顆粒，噴霧劑，氣溶膠，吸入 裝置，溶液，分散體，濕潤劑，懸浮液，乳劑，糊劑，軟膏，親水性 軟膏，乳膏，凝膠，水凝膠，敷料，裝置，模板，智能凝膠(smart gels )，移植物，溶液，乳劑，懸浮液，粉末，薄膜，泡沫，墊，海綿(例如 膠原海綿)，經皮遞送系統，顆粒，粒劑，膠嚢，瓊脂糖或殼聚糖珠， 片劑，微膠嚢，冷凍干燥粉末、顆粒、粒劑或小丸，及其混合物。用于依照本發明使用的合適的分散劑或濕潤劑可以是天然存在的 磷脂，例如卵磷脂，或大豆卵磷脂；環氧乙烷與下列的縮合產物例 如脂肪酸、長鏈脂族醇、或可由脂肪酸以及己糖醇或己糖醇肝衍生的 偏酯，例如聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯、聚氧乙 烯山梨糖醇酐單油酸酯等。然而本發明并不限于這些。合適的懸浮劑是例如天然存在的樹膠，例如阿拉伯樹膠、黃原膠 或西黃蓍膠；纖維素，例如羧曱基纖維素鈉、微晶纖維素(例如，Avicd RC591,曱基纖維素)；褐藻酸鹽和殼聚糖(kitosans)，例如但不限 于，褐藻酸鈉，等。然而本發明并不限于這些。藥物可接受的賦形劑是否適合于在藥物組合物中使用 一般取決于 選擇對病癥類型使用哪類劑型和/或哪類劑型對身體有損害。藥物可接受的賦形劑可以包括溶劑、緩沖劑、防腐劑、濕潤劑、 螯合劑、抗氧化劑、穩定劑、乳化劑、懸浮劑、膠凝劑、軟膏基質、 滲透增強劑、香料、粉末和皮膚保護劑。然而應當強調本發明并不限 于這些。才直凈勿油或〉每產油(marine oil)(侈il3口食用油，濁口杏4二油、荒麻油、可 可脂、椰子油、玉米油、棉籽油、亞麻子油、橄欖油、棕櫚油、花生 油、翼粟籽油、菜籽油、芝麻油、大豆油、向日葵油和茶子油)，礦 物油，脂肪油，液體石蠟，聚乙二醇，丙二醇，丙三醇，液體聚烷基 硅氧烷，或其他親水或醚溶劑，例如pH約5.5-6.0的弱酸，及其混 合物。緩沖劑的例子是檸檬酸、乙酸、酒石酸、乳酸、氫磷酸(hydrogen phosphoric acid)、碳酸氫鹽、磷酸鹽、二乙胺等。防腐劑的合適例子是對羥基苯曱酸酯類，例如對羥基苯曱酸曱 酯、對羥基苯曱酸乙酯、對羥基苯曱酸丙酯、對羥基苯曱酸丁酯、對 羥基苯曱酸異丁酯、對羥基苯曱酸異丙酯，山梨酸鉀，山梨酸，苯甲 酸，苯曱酸曱酯，苯氧基乙醇，溴硝丙二醇，bronidox, MDM乙內酰 脲，氨基甲酸硤丙炔丁酯，EDTA，氯芐烷銨(benzalconium chloride), 和千醇，或防腐劑的混合物。濕潤劑的例子是丙三醇、丙二醇、山梨糖醇、乳酸、尿素及其混 合物。螯合劑的例子是EDTA鈉和檸檬酸。抗氧化劑的例子是丁基化羥基苯曱醚(BHA)、抗壞血酸及其衍 生物、生育酚及其衍生物、半胱氨酸及其混合物。乳化劑的例子是天然存在的樹膠，例如阿拉伯樹膠或西黃蓍膠； 天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂、失水山梨糖醇單油酸酯衍生物； 羊毛脂；羊毛脂醇；山梨糖醇酐酯；單酸甘油酯；脂肪族醇；脂肪酸 酯(例如脂肪酸的三酸甘油酯)；及其混合物。懸浮劑的例子是例如纖維素和纖維素衍生物，例如羧甲基纖維 素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基曱基纖維素、微晶纖維素， 角叉菜聚糖，金合歡膠，阿拉伯樹膠，西黃蓍膠，及其混合物。凝膠基質、增粘劑或能夠從創傷吸收溢泌物的組分的例子是液體石蠟，聚乙烯，脂肪油，膠態二氧化硅或鋁，鋅皂，丙三醇，丙二醇，西黃蓍膠，羧基乙烯基聚合物，硅酸鋁鎂，Carbopol ,親水聚 合物例如淀粉或纖維素衍生物，例如羧曱基纖維素、羥乙基纖維素及 其它纖維素衍生物，水溶脹型水膠體，角叉菜聚糖，透明質酸鹽(例 如任選包含氯化鈉的透明質酸鹽凝膠)，膠原，明膠，果膠，殼聚糖 和褐藻酸鹽，包括藻酸丙二醇酯。軟膏基質的例子是例如蜂蠟、石蠟、鯨蠟醇、鯨蠟醇十六酸酯、 植物油、脂肪酸的失水山梨糖醇酯(Span)、聚乙二醇，以及脂肪酸 失水山梨糖醇酯和環氧乙烷之間的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇 酐單油酸酯(Tween)。疏水或水乳化軟膏基質的例子是石蠟、植物油、動物脂肪、合成 甘油酯、蠟、羊毛脂和液體聚烷基硅氧烷。親水軟膏基質的例子是固體聚乙二醇(聚乙二醇)。軟膏基質的其他例子是三乙醇胺皂、硫酸化脂肪族醇和聚山梨醇酯。粉末組分的例子是褐藻酸鹽、膠原、乳糖、應用于創傷時能夠 形成凝膠的粉末(吸收液體/創傷溢泌物)。通常，預期用于對大的開 放性創傷應用的粉末必須是無菌的，且存在的顆粒必須是微粉化的。其他賦形劑的例子是聚合物，例如羧甲纖維素(carmelose)、羧 曱纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羧乙基纖維素、羧丙基纖維素、曱 基纖維素、果膠、黃原膠、刺槐豆膠、金合歡膠、明膠、卡波姆，乳 化劑如維生素E、硬脂酸甘油酯、十六烷基(cetanyl)葡糖苷、膠原、 角叉菜聚糖、透明質酸鹽以及褐藻酸鹽和殼聚糖。稀釋劑和崩解劑的例子是但不限于，乳糖、蔗糖、emdex、磷酸 鈣、碳酸鈣、硫酸鈣、甘露糖醇、淀粉和微晶纖維素。粘合劑的例子是但不限于，蔗糖、山梨糖醇、阿拉伯樹膠、褐藻 酸鈉、明膠、淀粉、纖維素、羧曱基纖維素(coboxymethylcellulose) 鈉、甲基纖維素、羧丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇 (polyetyleneglycol)。應當理解在其中藥物可接受的賦形劑可以以不同劑型或組合物使 用的情況下，具體的藥物可接受的賦形劑的應用不限于賦形劑的具體 劑型或具體功能。敷料和/或繃帶也是用于RHCC肽和/或其片段的重要遞送系統。當敷料用作劑型時，RHCC肽和/或其片段在敷料制備之前或期間與其 他材料/成分混合，或者肽和/或其片段可以以某種方式包被在敷料上， 例如通過將敷料浸在肽和/或其片段的溶液或分散體中，或通過將級分 和/或肽片段的溶液或分散體噴霧在敷料上。可替代地，肽和/或其片 段可以以粉末的形式應用于敷料。敷料可以是吸收性創傷敷料的形式 以用于應用于溢泌性創傷。敷料還可以是水凝膠敷料的形式(例如交 聯聚合物，例如Intrasites,它包含羧曱基纖維素、丙二醇或多糖、二 糖和蛋白質)，或閉塞敷料的形式，例如褐藻酸鹽、殼聚糖、親水聚 氨基曱酸酯薄膜、膠原片、板、粉末、泡沫、或海綿、泡沫(例如聚 氨基曱酸酯或硅氨烷)、水膠體(例如羧曱基纖維素，CMC)、膠原 和基于透明質酸的敷料，包括其組合。在用于依照本發明使用的藥物組合物中，RHCC肽和/或其片段一 般以約0.001 % -約99.9%w/w的濃度存在。在優選方面，本發明涉及依照本發明的藥物組合物，以用于作為 藥物使用。本發明還涉及此類藥物組合物在制備用于治療癌癥的藥物 的用途。在本上下文中，術語"癌癥"指狀況，例如但不限于，乳腺癌、 前列腺癌、肺癌、白血病、腦腫瘤、骨肉瘤、皮膚腫瘤、肝癌、腎癌、 睪丸癌、以及任何種類的實體瘤。在再一方面，本發明涉及用于施用包含至少一種元素的藥物的方 法，所述至少一種元素用于使所述藥物與所述藥物遞送系統結合，其 中所述方法包括給有此需要的患者施用依照本發明的藥物遞送系統、 和/或依照本發明的藥物組合物。在一個方面，所述元素是金屬元素。RHCC和/或其片段作為過濾系統在本發明的另一實施方案中，RHCC肽和/或其片段用于從血液或 其他流體或組織過濾毒性化合物，特別是包含重金屬的配合物。RHCC 肽可以以單一狀態、或尺寸等于或大于10 nms的晶體復合物形式使 用。為了從身體的特定部分過濾金屬，對身體的這個部分特異的標記 可以依照如本發明公開的規程使用。RHCC肽和/或其片段可以溶于氯 化鈉或營養液體或任何其他合適液體中靜脈內注射。RHCC肽和/或其 片段的濃度可以是1 nM-100 mM，且取決于待解毒的患者的狀況一次或重復給予。
在尤其優選的實施方案中，本發明涉及RHCC肽和/或其片段用 于從流體和/或非流體物質過濾包含至少 一種元素的物質的用途，所述
至少一種元素用于使所述物質與所述RHCC肽和/或其片段結合。
在一個實施方案中，所述元素是金屬元素。依照本發明，所述流 體和/或非流體物質是體液，例如血液、尿和/或任何其他身體組織。
術語"過濾"在本文中指其中物質和/或組分從介質、流體和/或 非流體物質中去除和/或排出的程序。在本發明的一種背景中，"過濾" 可以包括使流體或非流體物質中存在的物質結合到RHCC肽和/或其 片段的空腔內，且隨后通過如本文公開的任何方法從所述流體或非流 體物質中去除與所述物質結合的所述RHCC肽和/或其片段。術語"過 濾"在本上下文中可以與吸收和/或清除互換使用。依照本發明被去除 的物質是例如對人有毒的重金屬。過濾可以依照本發明通過使用例如 親和層析、尺寸排阻過濾器等來進行。在本發明的一種背景中，通過 透析進行過濾。在此類背景中，將RHCC摻入透析過濾器內以直接使 重金屬與過濾器結合。
術語"流體和/或非流體物質"指處于流體狀態的任何物質，例如 體液，例如血液、血漿、尿等，或非流體物質，例如身體組織。
此外，本發明涉及RHCC肽和/或其片段用于從流體和/或非流體 物質過濾包含至少一種元素的物質的用途，所述至少一種元素用于使 所述物質與所迷RHCC肽和/或其片段結合，其中所述元素選自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt，和/或其組合。然而應當理解 所述元素并不限于這些。此外，設想所述元素可以是物質的部分。
在另 一優選方面，本發明涉及依照本發明用于從流體和/或非流體 物質過濾包含至少一種元素的物質的過濾系統，所述至少一種元素用 于使所述物質與所述RHCC肽和/或其片段結合，所述過濾系統包含 RHCC肽和/或其片段以及固體基質。術語"過濾系統"在本文中指包含與例如固體基質、尺寸排除過 濾器等組合的RHCC肽和/或其片段的系統。所述過濾系統通過使所
述物質與RHCC肽和/或其片段結合用于有效去除，從流體和/或非流
體物質例如體液中去除不需要的物質。
在同樣優選的方面，本發明涉及依照本發明用于從流體和/或非流 體物質過濾包含至少一種元素的物質的過濾系統，所述至少一種元素
用于使所述物質與所述RHCC肽和/或其片段結合，所述過濾系統包 含RH C C肽和/或其片段以及尺寸排阻過濾器。
在另 一 同樣優選的方面，本發明涉及依照本發明用于從流體和/或 非流體物質過濾包含至少 一種元素的物質的過濾系統，所述至少 一種 元素用于使所述物質與所述RHCC肽和/或其片段結合，所述過濾系 統包含RHCC肽和/或其片段，其中所述RHCC肽和/或其片段用未切 割的多組氨酸標記進行標記。在本發明的一種背景中，所述未切割的 多組氨酸標記允許例如使用親和層析固定化RHCC肽和/或其片段。
在再一方面，本發明涉及用于從流體和/或非流體物質過濾包含至 少一種元素的物質的方法，所述至少一種元素用于使所述物質與RHCC 肽和/或其片段結合，所述方法包括混合所述RHCC肽和/或其片段 與所述流體和/或固體物質用于過濾所述物質，和從所述流體和/或固 體物質分離所述RHCC肽和/或其片段。
本發明進一步涉及用于從流體和/或非流體物質過濾包含至少一種 元素的物質的方法，所述至少一種元素用于使所述物質與RHCC肽和 /或其片段結合，其中所述RHCC肽和/或其片段與固體基質結合。
此外，本發明涉及用于從流體和/或非流體物質過濾包含至少 一種 元素的物質的方法，所述至少一種元素用于使所述物質與RHCC肽和 /或其片段結合，其中所述分離步驟包括使用尺寸排阻過濾器。
在另一方面，用于從流體和/或非流體物質過濾包含至少一種元素 的物質的所述方法包括用未切割的多組氨酸標記進行標記的RHCC肽 和/或其片段，所述至少一種元素用于使所述物質與RHCC肽和/或其 片段結合。此類方法還可以包括使用親和層析。
在再一優選方面，本發明涉及用于從流體和/或非流體物質過濾包 含至少一種元素的物質的方法，所述至少一種元素用于使所述物質與 RHCC肽和/或其片段結合，其中所述分離步驟包括身體的腎過濾。本發明的目的是提供適合于從人體、血流、其他體液和/或其他組 織過濾毒性含金屬元素，特別是含重金屬元素的RHCC肽和/或其片
段的用途。為了用作過濾器，所述RHCC肽和/或其片段可以以任何 合適的形式例如經口進行施用。不希望限制本發明的范圍，設想的一 種可能作用方式是消化系統中的酸性環境可以打開蛋白質，但當所述 蛋白質進入中性pH時將重新組成。蛋白質將在體內循環，并且當遇 到有毒金屬元素時，這些蛋白質將積聚在RHCC肽的空腔內。RHCC 肽隨后可以通過腎功能從血流中清除。
在本發明的一個實施方案中，所述RHCC肽和/或其片段用作過 濾系統以從流體和/或非流體物質去除毒性物質。在這個實施方案中， RHCC肽以其天然和單一狀態，或尺寸等于或大于10 nmS的晶體形式 使用。
在本發明的具體實施方案中，其中RHCC肽和/或其片段用于使 人從重金屬解毒，標記可以用于使RHCC肽定位于靶，即特定目的組 織。RHCC肽和/或其片段可以經口施用，或溶于氯化鈉或營養液體或 另一種合適液體中靜脈內注射。RHCC肽和/或其片段的濃度以及劑量 方案可以根據待解毒的患者的狀態來確定。金屬配合物，特別是重金 屬配合物，可以積聚在RHCC肽的內部空腔內。在本發明的一個方面， 其中體內的RHCC肽遇到金屬配合物，特別是重金屬配合物，可以發 生交換反應，從而使重金屬對RHCC肽和/或其片段內部平衡。設想 RHCC肽和/或其片段可以在體內循環數分鐘或數小時或數日，且最后 通過腎功能排泄。
在本發明的再一實施方案中，通過使用RHCC肽和/或其片段從 重金屬過濾水、血液或其他液體。在這個實施方案中，RHCC肽和/或 其片段可以作為單一肽或作為晶體復合物結構與基質結合。基質可以 是但不限于，鋁、纖維素、紙、金屬氧化物和聚合物。
在本發明的再一實施方案中，RHCC肽和/或其片段也可以在溶液 中，從而在已允許RHCC肽與溶解的重金屬的相互作用發生足夠時間 后，需要通過其他方法從溶液中分離裝載金屬的RHCC肽。設想此類 分離可以通過例如尺寸排阻過濾器來完成，因為它們是商購可得的， 或親和層析，其中使用具有未切割的多組氨酸標記的RHCC肽和/或 其片段。R H C C和/或其片段用于生產納米顆粒
在本發明的再一實施方案中，金屬配合物或金屬離子(例如-)可以用作合成金屬納米顆粒的前體。依照反應1， m金屬離 子(Mn+)或另一種前體被還原以提供含m原子的金屬(M)納米顆 粒，所述另一種前體可以是金屬鹽和/或金屬配合物和/或金屬配鹽
m[Mn+] + nmM e-=>Mm ( 1 )
m[AuCl4]- + 3 me' =〉 4 mCr + Aum ( 2 )
其中[AuCl4]-變換成Au的例子在反應2中給出。對于具有窄尺寸 分布的小顆粒生產最關鍵的是發展的顆粒對抗聚集的穩定化。在本發 明的一個方面，穩定化通過在RHCC肽和/或其片段內生產具有不同 形狀和尺寸的納米顆粒來獲得。根據等式3和4，此類合成可以以2 個步驟進行-將金屬離子摻入RHCC肽的空腔內(3)，隨后使離子 還原以獲得元素金屬(4)。其中[AuCl4]—變換成Au的例子在反應5 和6中給出。
肽+ m[Mn+]=> [肽 m[Mn+]] ( 3 )] + n m M e.=> [肽 Mm] (4) 肽+ m[AuCl4].=> [肽 m [AuCl4]—] ( 5 )-] + 3 me.=〉[肽 Aum] + 4 mCl. (6) 當RHCC肽晶體浸入金屬離子溶液內時，構建肽-金屬復合物的 反應(3)已顯示容易發生。NMR和UV-Vis吸收實驗已證實對于等 價金屬離子([PtCl4]-和[Hgl4]2—) ， RHCC肽也將金屬離子摻入溶液 內。為了依照反應(4)添加電子，可以使用電化學或光電化學還原 (使用例如[Ru (bpy) 3]2+)，盡管化學還原劑(例如NaBHj的簡單 添加也是可能的。
因此，本發明涉及RHCC肽和/或其片段用于由包含至少一種元 素的前體生產納米顆粒的用途，其中所述至少一種元素用于使所述前 體與所述RHCC肽和/或其片段結合。在一個方面，此類元素是金屬 元素。
"納米顆粒"指至少2個原子的復合物，優選具有約1-100 nm 的尺寸。
在本上下文中，"前體，，指如本文公開的，依照本發明用于形成 納米顆粒的任何物質。在一個實施方案中，此類前體包含用于與RHCC肽和/或其片段結合的元素，例如金屬元素，以用于有效生產納米顆粒。 依照本發明的納米顆粒的前體可以是金屬鹽或復合金屬鹽和/或復合金屬。本發明還涉及RHCC肽和/或其片段用于由包含至少一種元素的 前體生產納米顆粒的用途，其中所述至少一種元素用于使所述前體與 所述RHCC肽和/或其片段結合，其中所述元素選自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt，和/或其組合。然而，應當理解所述元 素并不限于這些。本發明中特別感興趣的一組金屬納米顆粒由Ag、 Au、 Pd、 Pt、 Rh、 Ru、 Fe和/或其組合組成。此外，本發明涉及RHCC肽和/或其片段用于由包含至少一種元 素的前體生產納米顆粒的用途，其中所述至少一種元素用于使所述前 體與所述RHCC肽和/或其片段結合，其中所述前體選自HAuCl4、 K2PtCl4、 K2PdCl4、 CuCl2、 FeCl2和AgN03,和/或其組合。然而本發 明并不限于這些，其他前體也可以在本發明的背景中使用，例如由如 本文7>開的前體來源或起源的前體。在另一實施方案中，本發明涉及用于由包含至少一種元素的前體 生產納米顆粒的方法，所述至少一種元素用于使所述前體與RHCC肽 和/或其片段結合，所述方法包括下列步驟制備包含RHCC肽和/或其片段以及包含至少一種元素的前體的溶液，所述至少一種元素用于 使所述前體與RHCC肽和/或其片段結合；混合所述溶液；和向溶液 中加入還原劑。在一個實施方案中，所述元素是金屬元素。在另一實 施方案方法中，所述溶液是水性的。本發明進一步涉及用于由包含至少一種元素的前體生產納米顆粒 的方法，所述至少一種元素用于使所述前體與RHCC肽和/或其片段 結合，其中所述前體選自HAuCl4、 K2PtCl4、 K2PdCl4、 CuCl2、 FeCl2 和AgN03，和/或其組合。然而本發明并不限于這些，其他前體也可以在本發明的背景中使用，例如由如本文公開的前體來源或起源的前體。本發明還涉及用于由包含至少一種元素的前體生產納米顆粒的方法，所述至少一種元素用于使所述前體與RHCC肽和/或其片段結合， 其中所述還原成分選自[Ru (bpy) 3]2+和NaBH4，和/或其組合。然而本發明并不限于這些，其他還原成分也可以在本發明的背景中使用， 例如由如本文公開的還原成分來源或起源的還原成分。本發明的另 一個目的是提供用于構建納米顆粒例如金納米顆粒的 反應器室。反應器室意指RHCC肽和/或其片段的任何空腔。顆粒通 過化學反應在RHCC肽和/或其片段的空腔內構建。RHCC肽提供了 納米顆粒不受聚集影響的保護，以及關于所生產顆粒的尺寸分布的物 理限制。在本發明的這個實施方案中，納米顆粒通過使用RHCC肽和/或 其片段來構建。不希望是限制性的，可能的方案是所述RHCC肽和/ 或其片段以溶液或晶體形式與溶液中的金屬離子例如[AuCl4]-混合。金 屬離子進入RHCC肽和/或其片段的空腔。當加入電子時，將發生金 屬離子至金屬的還原，并且納米級別尺寸的顆粒在單獨空腔內形成。 電子可以以化學方法(通過還原劑)、以電化學電池的形式電化學、 和/或通過光敏化(由激發態的光敏劑轉移電子)來加入。RHCC作為催化劑在再一方面，本發明還涉及包含金屬納米顆粒(例如Pt、 Pd、 Ir、 Rh、 Ru)或金屬離子的RHCC肽和/或其片段作為化學反應中的催化 劑的用途，所述化學反應例如還原、氧化、C-C和C-雜原子(例如但 不限于，O、 N、 S或P)形成反應和重排。用于在本發明中使用、特 別感興趣的一組已知和未知的金屬納米顆粒或金屬離子包括Ag、 Au、 Pd、 Pt、 Rh、 Ru、 Fe、 Cu、 Ir、 Ni和/或其組合。應當指出其他金屬 和組合也可以在本發明的背景中使用。在空腔內的金屬組合充當化學 反應的同質或異質催化劑，所述化學反應例如氫化和氧化還原反應、 氧化、C-C和C-雜原子偶合和重排，特別是用水作為溶劑。與本領域 技術發展水平比較，對于經由包含金屬納米顆粒或金屬離子的RHCC 肽和/或其片段的化學催化，使用水作為溶劑應當視為重要進展，因為它允許避免或至少減少有機溶劑。目前使用的大量有機溶劑無疑是環境問題。實驗部分重組RHCC多肽鏈片段在大腸桿菌(^c/zw/c/^ co//)菌林JM109 (DE3) (Novagen)或某些其他合適的細菌菌抹中表達。編碼全長 四臂分子的殘基Ue3至Ile52以及N末端多組氨酸標記的cDNA片段 通過PCR技術使用petl5b-RHCC作為模板產生。使用合適的限制位 點將PCR產物連接到petl5b表達載體(Novagen),或任何其他合適 的表達載體內。用RHCC表達載體轉化后，細菌在液體培養液中于37 。C培養直至達到在600nm處0.6的光密度。RHCC多肽鏈片段的表達 隨后通過加入0.4 mM的異丙基P -D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)來誘 導。在誘導后培養繼續至少2小時。由細菌細胞制備RHCC肽通過下 列方法來進行從培養基中收獲細菌，并在變性條件下進行細胞裂解。 RHCC肽的自發復性通過重建生理條件來促進。通過親和層析在Ni2+-瓊脂糖(Novagen)上純化6xHis-標記的融合肽在如制造商的說明書 中所述的變性條件下進行。RHCC多肽鏈片段與6xHis-標記的分離通 過蛋白酶處理來進行。重組多肽鏈片段包含2個另外的N末端Gly和 Ser殘基，所述2個另外的殘基來源于表達質粒且不是四臂編碼序列 的部分。結晶實驗于4。C使用蒸汽擴散技術來進行。座滴(sitting droplet) 通過將4 nl肽溶液(12.8 mg ml")與2 M硫酸銨和200 mM Tris-HCl (pH7.9)混合來制備。該晶體屬于空間群P3卩1，尺寸為a=110.02 A、 b^l0.02A和c二70.96 A。藥物在空腔內的定位可以通過對分子例如藥物的局部顯微環境敏 感的技術來檢測。例如可見光的吸收(UV-Vis光譜學-溶劑化顯色作 用)可以用于探測例如HgV的局部環境(圖1 ) 。 HgV的吸收峰的位置在水(圖1-曲線A)、曱醇(圖1,曲線C)、水/曱醇(50/50)(圖1 -曲線B),以及含肽的混合物(圖1 -曲線E)中進行測量。 在含肽的混合物中HgV峰的位置與在曱醇中的HgV峰一致，這表明 HgV當與肽混合時位于疏水環境中(比較圖1 -曲線C與曲線E)。 可以得出結論為肽對于溶解的種類(HgV)提供了類似甲醇的疏水環 境。因此HgV當以上述方式與肽混合時位于疏水空腔內。金屬配合物與RHCC之間的強相互作用的另外指示可以通過過濾 實驗來確定首先，將RHCC與過量的金屬配合物(例如Hgl/.或順 鉑)混合。使混合溶液攪拌至少1小時后，包含RHCC的溶劑、金屬 復合物和緩沖液或任何其他支持鹽、溶劑連同任何過量的金屬復合物 和鹽一起經由尺寸排阻過濾器用不包含任何金屬復合物的溶劑替換。 此類實驗的結果在圖2中繪出。光譜顯示即使在使過量的金屬配合物 與RHCC分離后，仍可觀察到Hgl -的典型峰。這強烈暗示HgI427RHCC 相互作用很強烈，足以防止Hgl -從溶液中被過濾。與x射線結構組 合，可以推斷溶液中的Hgl/'在空腔內的定位。如圖3中所示，相同 實驗已用順鉑進行RHCC的濾過的溶液清楚地顯示了順鉑的存在， 這表明2種組分之間的強相互作用。依照晶體結構，可以推斷順柏摻 入RHCC空腔內。評估帶電或不帶電的種類摻入蛋白質內的其他方法是質譜法(MALDI-TOF),紅外光鐠法(IR)，如果藥物具有IR活性基的話， 和電子自旋共振(ESR),如果藥物具有含不成對電子的金屬離子的 話。RHCC和人白細胞介素-6的融合分子 產生在序列中具有下列部分的融合蛋白i) 用于純化的組氨酸標記 HHHHHHLVPRGS ( SEQ ID NO:2 )ii) 人白細胞介素-6序列MPVPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAE 亂NLPKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMST KVL)QFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHL1LRSFKEFLQSSLRA LRQM (SEQ ID NQ:3》ii) GS接頭iii) RHCC序列IINETADDIVYRLTVIIDDRYESLKNUTLRADRLEMIINDNVSTILASI (SEQ ID NO:4)RHCC-IL-6單體的計算分子量是28.3 kDa。在SDS-PAGE中，該 分子顯示出32kDa的表觀分子量。關于四聚體的相應值是約130kDa。 RHCC-IL-6融合分子可溶于水性介質，且顯示出對IL-6-依賴性BAF/3 細胞系的完全生物學活性。這表明融合分子能夠結合活細胞上的細胞 表面受體并以天然配體的形式激活它們。參考文獻1 StetterKO: Ufe atttie upper temperature border. 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權利要求
1. RHCC肽和/或其片段作為用于施用藥物的藥物遞送系統的用途，所述藥物包含用于使所述藥物與所述藥物遞送系統結合的至少一種元素。
2. 根據權利要求l的用途，其中所述元素是金屬元素。
3. 根據權利要求1或2的用途，其中所述元素選自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt，和/或其組合。
4. 根據權利要求1-3中任何一項的用途，其中所述藥物選自由 下列組成的含Pt藥物組順鉑(PtH6N2Cl2)、卡鉑(PtC6H12N204 )、 奈達鉑(PtN2C2H8N203 )、奧沙利鉑(PtN2C8H1404 ) 、 ZD0473(PtC6H10N2Cl2) 、 JM216 ( PtC10H22N2O4Cl2)、洛巴鉑(PtC9H18N203 )、 反式-[PtCl2 (吡啶)2]和反式-[Pt ( OH ) 2C12 ( NH3) ( NH2-C6H5)]， 和/或其組合。
5. 根據權利要求1 - 4中任何一項的用途，其中所述RHCC肽和 /或其片段進一步包含用于特異性靶向的標記。
6. 根據權利要求1-5中任何一項的用途，其中來自所述RHCC 肽和/或其片段的藥物釋放是由于靶環境中的pH變化，RHCC肽和/或 其片段的酶促降解，RHCC肽和/或其片段的水解降解，和/或RHCC 肽和/或其片段的鹽橋打開，從而允許通過熱力學平衡和/或動力學屏 障中的變化而泄漏。
7. —種用于施用藥物的藥物遞送系統，其中所述藥物遞送系統 包含RHCC肽和/或其片段以及包含選自下列的至少一種元素的藥物 Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt,和/或其組合。
8. 根據權利要求7的藥物遞送系統，其中所述元素是金屬元素。
9. 根據權利要求7或8的藥物遞送系統，其中所述藥物選自由 下列組成的含Pt藥物組順鉑(PtH6N2Cl2)、卡鉑(PtC6H12N204 )、 奈達鉑(PtN2C2H8N203 )、奧沙利柏(PtN2C8H1404 ) 、 ZD0473(PtC6H10N2Cl2) 、 JM216 ( PtC10H22N2O4Cl2)、洛巴鉑(PtC9H18N203 )、 反式畫[PtCl2 (吡啶)2]和反式-[Pt ( OH ) 2C12 ( NH3) ( NH2-C6H5)], 和/或其組合。
10. 根據權利要求7-9中任何一項的藥物遞送系統，其中所述 RHCC肽和/或其片段進一步包含用于特異性耙向的標記。
11. 一種藥物組合物，其包含根據權利要求7-10中任何一項的 藥物遞送系統。
12. 根據權利要求11的藥物組合物，其用于作為藥物使用。
13. 根據權利要求11的藥物組合物用于制備用于治療癌癥的藥 物的用途。
14. 一種用于施用包含至少一種元素的藥物的方法，所述至少一 種元素用于使所述藥物與所述藥物遞送系統結合，其中所述方法包括 給有此需要的患者施用根據權利要求7-10中任何一項的藥物遞送系 統、和/或根據權利要求11的藥物組合物。
15. 根據權利要求14的方法，其中所述元素是金屬元素。
16. RHCC肽和/或其片段用于從流體和/或非流體物質過濾包含 至少一種元素的物質的用途，所述至少一種元素用于使所述物質與所 述RHCC肽和/或其片段結合。
17. 根據權利要求16的用途，其中所述元素是金屬元素。
18. 根據權利要求16或17的用途，其中所述流體和/或非流體物 質是體液，例如血液和尿和/或身體組織。
19. 根據權利要求16-18中任何一項的用途，其中所述元素選 自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、 Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt，和/或其組合。
20. —種用于根據權利要求16-19中任何一項的用途的過濾系 統，其包含RHCC肽和/或其片段以及固體基質。
21. —種用于根據權利要求16-19中任何一項的用途的過濾系 統，其包含RHCC肽和/或其片段以及尺寸排阻過濾器。
22. —種用于根據權利要求16-19中任何一項的用途的過濾系 統，其包含RHCC肽和/或其片段，其中所述RHCC肽和/或其片段用 未切割的多組氨酸標記進行標記。
23. —種用于從流體和/或非流體物質過濾包含至少一種元素的物 質的方法，所述至少一種元素用于使所述物質與RHCC肽和/或其片 段結合，所述方法包括-混合所述RHCC肽和/或其片段與所述流體和/或固體物質以用 于過濾所述物質，和-從所述流體和/或固體物質分離所述RHCC肽和/或其片段。
24. 根據權利要求23的方法，其中所述RHCC肽和/或其片段與 固體基質結合。
25. 根據權利要求23的方法，其中所述分離步驟包括使用尺寸 排阻過濾器。
26. 根據權利要求23的方法，其中所述RHCC肽和/或其片段用 未切割的多組氨酸標記進行標記。
27. 根據權利要求26的方法，其中所述分離步驟包括使用親和層析。
28. 根據權利要求23的方法，其中所述分離步驟包括身體的腎 過濾。
29. RHCC肽和/或其片段用于由包含至少一種元素的前體生產納 米顆粒的用途，其中所述至少一種元素用于使所述前體與所述RHCC 肽和/或其片段結合。
30. 根據權利要求29的用途，其中所述元素是金屬元素。
31. 根據權利要求29或30的用途，其中所述元素選自Al、 Sc、 Ti、 V、 Cr、 Fe、 Co、 Ni、 Cu、 Zn、 Ga、 Ge、 As、 Se、 Sr、 Y、 Zr、 Nb、 Mo、 Tc、 Ru、 Rh、 Pd、 Ag、 Cd、 In、 Sn、 Sb、 Te、 Cs、 Ba、 La、 Ce、 Pr、 Nd、 Pm、 Sm、 Eu、 Gd、 Tb、 Dy、 Ho、 Er、 Tm、 Yb、 Lu、Hf、 Ta、 W、 Re、 Os、 Ir、 Pt、 Au、 Hg、 Tl、 Pb、 Bi、 Po、 At、 Fr、 Ra、 Ac、 Th、 Pa、 U、 Np、 Pu、 Am、 Cm、 Bk、 Cf、 Es、 Fm、 Md、 No、 Lr、 Rf、 Db、 Sg、 Bh、 Hs和Mt,和/或其組合。
32. 根據權利要求29-31中任何一項的用途，其中所述前體選 自HAuCl4、 K2PtCl4、 K2PdCl4、 CuCl2、 FeCl2和AgN03，和/或其組 合。
33. —種用于由包含至少一種元素的前體生產納米顆粒的方法， 其中所述至少一種元素用于使所述前體與RHCC肽和/或其片段結合， 所述方法包括下列步驟-制備包含所述RHCC肽和/或其片段以及包含至少一種元素的 前體的溶液，所述至少一種元素用于使所述前體與所述RHCC肽和/ 或其片段結合；-混合所述溶液；和-向所述溶液中力口入還原劑。
34. 根據權利要求33的方法，其中所述元素是金屬元素。
35. 根據權利要求33或34的方法，其中所述溶液是水性的。
36. 根據權利要求33 - 35中任何一項的方法，其中所述前體選 自HAuCl4、 K2PtCl4、 K2PdCl4、 CuCl2、 FeCl》AgN03,和/或其組合。
37. 根據權利要求33 - 36中任何一項的方法，其中所述還原成 分選自[Ru (bpy) 3]21。NaBH4，和/或其組合。
38. 包含金屬納米顆粒例如Pt、 Pd、 Ir、 Rh和/或Ru的RHCC肽 和/或其片段作為化學反應中的催化劑的用途。
全文摘要
本發明涉及RHCC肽和/或其片段的不同用途。所述RHCC肽和/或其片段使得能夠將藥物和/或物質攝取和結合到所述肽和/或片段的空腔內，用于將此類物質和/或藥物遞送和釋放到目的靶位點，或用于從流體或非流體物質，例如從身體組織或體液中去除物質。在一種背景中，RHCC肽和/或其片段還可以用于生產納米顆粒，或作為化學反應中的催化劑。在優選方面，所述RHCC肽和/或其片段構成用于將藥物遞送至活體內的目的位點的藥物遞送系統。
文檔編號A61K47/48GK101222940SQ200680021873
公開日2008年7月16日 申請日期2006年4月18日 優先權日2005年4月18日
發明者E·菲格邁耶, J·米勒 申請人:奧普托文特有限公司