專利名稱：：抗原偶聯(lián)物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)、公共衛(wèi)生、免疫學(xué)、分子生物學(xué)和病毒學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明提供包含與至少一種本發(fā)明的抗原連接的病毒樣顆粒(VLP)的組合物，其中所述本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CCR5、本發(fā)明的胃泌素、本發(fā)明的CXCR4、本發(fā)明的CETP或本發(fā)明的C5a。本發(fā)明還提供一種制備所述組合物的方法。本發(fā)明的組合物可以用于制備疫苗，該疫苗特別用于治療其中本發(fā)明的抗原介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的疾病，特別是用于治療AIDS、胃腸癌、冠心病或炎性疾病。而且，本發(fā)明的組合物誘導(dǎo)有效的免疫應(yīng)答，特別是抗體應(yīng)答。而且，本發(fā)明的組合物特別可用于在特定環(huán)境內(nèi)有效誘導(dǎo)自身特異性免疫應(yīng)答。相關(guān)4支術(shù)
背景技術(shù)：
：HIVR5林利用細(xì)胞表面分子CD4和CCR5附著并進(jìn)入巨噬細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞。CCR5是一種7-跨膜受體，具有N末端序列和三個暴露于胞外間隙的環(huán)，它們后來分別被稱為PNt、ECL-1、ECL-2和ECL-3。天然CCR5配體RANTES、MIP-lot、MIP-1(3及其類似物能夠阻斷病毒-共同受體的相互作用，并進(jìn)一步引起CCR5的內(nèi)化(Lederman等人，2004，Science306,p485)。CCR5特異性自身抗體已經(jīng)在12.5%的重復(fù)暴露于HIV但是仍未感染的女性中發(fā)現(xiàn)(Lopalco等人，2000,J.Immunology164,3426)。這些抗體表現(xiàn)為結(jié)合CCR5的第一胞外環(huán)(ECL-1)，并且能夠抑制外周血單核細(xì)胞(PBMC)的R5-向性HIV感染。在女性中的同種異體免疫產(chǎn)生能夠在體外抑制R5-HIV感染的CCR5特異性抗體(Wang等人，2002,Clin.Exp.Immunol.129，493)。單克隆抗-CCR5抗體能夠在體外預(yù)防HIV感染(Olson等人，1999,J.Virol.73,4145;Wu和LaRosa等人，1997,J.Exp.Med.186，1373)。與對應(yīng)于小胞外環(huán)ECL-2A(Argl68-Thrl77)的環(huán)肽結(jié)合的抗體抑制HIV-1R5的感染(Misumi等人，2001，J.Virol.75,11614)。用線性CCR5肽(來自N-末端，ECL-l或ECL-2序列)免疫猴子產(chǎn)生的抗體在外體具有病毒抑制作用(Lehner等人，2001,J.Immunology166,7446)。CCR5的N-末端結(jié)構(gòu)域展示在乳頭瘤病毒樣顆粒上，并免疫猴子(Chackerian等人，2004,J.Virol.78,4037)。趨化因子受體CXCR4，也被稱為LESTR或融合素，屬于七跨膜域G-蛋白偶聯(lián)受體家族(Federsppiel等人(1993)，Genomics16:707)。CXCR4在大多數(shù)白細(xì)胞群體的細(xì)胞表面上表達(dá)，該白細(xì)胞群體包括所有B細(xì)胞和單核細(xì)胞、大多數(shù)T淋巴細(xì)胞亞類、內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞(Murdoch,(2000)Immunol.Rev.177:175)。CXCR4的唯一已知的配體是SDF-1(Pelchen-Mattews，等人(1999)Immunol.Rev.168:33)。CXCR4后來被確定為HIV的共同受體(Feng等人(1996)Science272:872)。因此，進(jìn)入細(xì)胞需要CXCR4的HIV抹被歸類為X4抹，并且這種進(jìn)入可以被已經(jīng)顯示阻止HIV-1進(jìn)入的SDF-1所阻斷(Oberlin等人(1996),A^w"3SZ.S33,Bleul,等人(1996)A^wre3W,S29)。已經(jīng)鑒定了幾種CXCR4肽拮抗劑，它們顯示抑制X4HIV-1抹的進(jìn)入和感染(Murakami等人(1997)JMet//c^.'"卵;Arakaki等人(1999).JKz>o/73,/779;Doranz等人(2001)J/ASi/wmA"raWn^"77.^/75;Domnz,等人(1997)/~M^/7抓.7395;Schols，D.(2004),CWr7bpM^/C&m(M3)。另外，小化學(xué)化合物AMD3100，它是HIV-1和HIV-2復(fù)制的強(qiáng)選擇性抑制劑，顯示為CXCR4特異性的(DeClercq(2003)NatRevDrugDiscov2:581)。而且，針對CXCR4的不同胞外域的抗-CXCR4單克隆抗體顯示抑制HIV-1感染(Endres等人(1996)Ce〃87:7^5;Brelot等人(1997),/77,47";Misumi等人(2003)，/歷o/C&mXiao等人(2000)，Exp^fo/胃泌素(G17)是一組經(jīng)典的腸肽激素，它們在結(jié)腸和胰臟中含量非常低(Koh，RegulatoryPeptides.93，37-44(2000))。胃泌素是從它的前體前胃泌素(G34)加工而來的。胃泌素和前胃泌素都以C末端甘氨酸延伸的形式和C末端苯丙氨酸酰胺化的形式存在(Steel.IDrugs.5,689-695(2002))。眾所周知胃泌素具有刺激胃酸分泌的能力(PharmacolTher.98，109-127(2003))。相關(guān)的激素膽嚢收縮素(CCK),其具有作為胃泌素的C-末端四肽酰胺，在十二指腸中合成，并負(fù)責(zé)胰酶分泌。酰胺化的G17與CCK-2受體結(jié)合，CCK既結(jié)合CCK-1受體又結(jié)合CCK-2受體(Steel.IDrugs.5，689-695(2002))。甘氨酸延長的胃泌素的受體仍然不清楚。最近的數(shù)據(jù)提示胃泌素可能促進(jìn)胃腸道癌癥的發(fā)展(Watson.AlimentPharmacolTher.14，1231-1247(2000))。補(bǔ)體系統(tǒng)的激活誘導(dǎo)大量的強(qiáng)有力的生物學(xué)效應(yīng)，其中許多由過敏毒素C5a介導(dǎo)。補(bǔ)體第5成分(C5)由C5轉(zhuǎn)化酶切割為兩個片段，C5a和C5b。C5a是一種74個氨基酸的四螺旋束糖蛋白(Fernandez和Hugli,J.Biol.Chem.253,6955-6964，1978)，負(fù)責(zé)產(chǎn)生針對細(xì)胞系統(tǒng)、特別是嗜中性粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的大量多樣化的效應(yīng)，以誘導(dǎo)局部炎癥來對抗感染性^鼓生物(WardP,Nat.Rev.Immunol.4:133，2004)。但是，通過相同的方式，膿毒癥中C5a的過量產(chǎn)生導(dǎo)致嗜中性粒細(xì)胞的嚴(yán)重的功能缺陷(Czermak等人,Nat.Med.5:788,1999;Huber-Lang等人，J.Immunol.166:1193,2001)。C5a活化增強(qiáng)也與許多原發(fā)和/或慢性炎性疾病有關(guān)，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(JoseP.AnnRheum.Dis.49:747,1990)、牛皮癬(TakematsuH,Arch.Dermatol.129:74,1993)、成人型呼吸窘迫綜合征(LangloisP,HeartLung18:71，1989)、再灌注損傷(Homeister,J.A腿.Rev.Pharmacol.Toxicol.34:17,1994)、狼疳腎炎和大皰性類天皰癡。與C5結(jié)合并且阻斷其切割、由此減少C5a和C5b產(chǎn)生的抗體，已經(jīng)提出用于治療諸如腎小球腎炎(W09529697)、哞喘(WO04022096)、膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(Wang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，92:8955，1995)和血清轉(zhuǎn)移關(guān)節(jié)炎(Ji等人，Immunity,16:157,2002)等疾病。特異性結(jié)合C5a的抗體已經(jīng)提出用于治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)(WO8605692)和有害的血管內(nèi)補(bǔ)體激活(EP245993)。對C5aR胞外環(huán)具有反應(yīng)性、由此可能降低或抑制C5a與C5aR結(jié)合的單克隆抗體已經(jīng)提出用于治療免疫病理疾病(W02003062278)。膽固醇-酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)是一種血漿糖蛋白，其介導(dǎo)膽固醇酯(CE)和甘油三酯(TG)在高密度脂蛋白(HDL)顆粒和富含apoB的顆粒如極低密度脂蛋白(VLDL)顆?；虻兔芏戎鞍?LDL)顆粒之間的交換。CETP也轉(zhuǎn)移磷酯(PL)。人CETPcDNA編碼一種476個氨基酸的蛋白質(zhì)。HDL被認(rèn)為抗動脈粥樣硬化，因?yàn)樵贖DL-膽固醇水平和冠心病(CHD)之間已經(jīng)觀察到負(fù)相關(guān)(BarterP丄和RyeK,A.(1996)Atherosclerosis121:1-12)。WO96/39168公開了一種通過刺激抑制CETP活性的免疫應(yīng)答增加HDL-c的方法。針對CETP抗原的免疫也已經(jīng)在US2003/0026808中描述。CETP多肽與"MAP"融合，并且在完全弗氏佐劑(CFA)中乳化，用于免疫兔子。CETP肽與乙型肝炎核心抗原(HBcAg)的融合也已經(jīng)在US2003/0026808中公開，但是該構(gòu)建體的免疫原性尚未報道。
發(fā)明內(nèi)容現(xiàn)在，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的分別包含至少一種CCR5胞夕卜域或至少一種CCR5胞外域片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，特別是抗體應(yīng)答，導(dǎo)致抗CCR5的高抗體效價。而且，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的分別包含至少一種CCR5胞外域或至少一種CCR5胞夕卜域片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，特別是抗體應(yīng)答，具有針對HIV感染的保護(hù)和/或治療效果。這表明本發(fā)明的組合物和疫苗分別產(chǎn)生的免疫應(yīng)答，特別是抗體，能夠在體內(nèi)特異性地識別CCR5，并且作為HIV共同受體干擾其功能。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是CCR5胞外域或CCR5胞外域片段或其任意組合，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少兩個第一附著位點(diǎn)的RNA噬菌體的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的至少一種CCR5胞夕卜域PNt，其中所述CCR5胞外域PNt包含、基本由、或者由以下物質(zhì)組成(i)Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片段，和(ii)包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27(SEQIDNO:56)的Ntb結(jié)構(gòu)域或包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27的Ntb結(jié)構(gòu)域片段，其中所述Nta結(jié)構(gòu)域或所述Nta結(jié)構(gòu)域片段的C末端與所述Ntb結(jié)構(gòu)域或所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段的N末端融合，優(yōu)選直接融合，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個或第二個位點(diǎn)包含或者是巰基，優(yōu)選半胱氨酸殘基的巰基，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的N末端的上游；并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第二個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的C末端的下游，優(yōu)選地位于所述CCR5胞外域PNt的C末端的下游；并且其中所述RNA噬菌體的所述VLP和所述CCR5胞外域PNt通過至少一個非肽共價4建連接。另一方面，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療HIV感染的方法，其其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CCR5。現(xiàn)在，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的分別包含至少一種CXCR4胞外域或至少一種CXCR4胞外域片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是強(qiáng)抗體應(yīng)答，導(dǎo)致抗CXCR4的高抗體效價。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是CXCR4胞外域或CXCR4胞外域片段或其任意組合，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段?，F(xiàn)在，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的分別包含至少一種CETP蛋白或至少一種CETP片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是強(qiáng)抗體應(yīng)答，導(dǎo)致抗CETP的高抗體效價。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是CETP蛋白或CETP片段或其任意組合，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段?，F(xiàn)在，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的分別包含至少一種C5a蛋白或至少一種C5a片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是強(qiáng)抗體應(yīng)答，導(dǎo)致抗C5a的高抗體效價。而且，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的分別包含至少一種C5a蛋白或至少一種C5a片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是強(qiáng)抗體應(yīng)答，對其中C5a起重要作用的原發(fā)和/或慢性炎性疾病如關(guān)節(jié)炎具有保護(hù)和/或治療效果。這表明本發(fā)明的組合物和疫苗分別產(chǎn)生的免疫應(yīng)答，特別是抗體，能夠在體內(nèi)特異性地識別C5a,并且干擾其功能。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是C5a蛋白或C5a片段或其任意組合，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段。本發(fā)明相對于使用抗C5a單克隆抗體治療疾病的現(xiàn)有技術(shù)是有利的。單克隆抗體治療的缺點(diǎn)包括需要反復(fù)注射大量抗體(Kaplan,CurrOpinInvest.Drugs.2002;3:1017-23)。高劑量的抗體可以導(dǎo)致副作用，例如輸液病。在異型應(yīng)答的患者中也可能產(chǎn)生抗-抗體，即使使用人抗體或人源化抗體也是如此，導(dǎo)致療效降低或者潛在地也導(dǎo)致副作用。而且，與人源化單克隆抗體的高生產(chǎn)成本和需要經(jīng)常前往醫(yī)院有關(guān)的費(fèi)用使許多需要治療的患者無法采用這種抗體治療。在一方面，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療原發(fā)和/或慢性炎性疾病的方法，其中該方法包括給動物或人分別施用本發(fā)明的組合物或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的C5a。其中C5a介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘和大皰性類天皰瘡。在一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是本發(fā)明的緩激肽，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段。在一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是本發(fā)明的脫-Arg緩激肽，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段?，F(xiàn)在，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的分別包含至少一種胃泌素G17、至少一種胃泌素G17片段、胃泌素G34或至少一種胃泌素G34片段的組合物和疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是強(qiáng)抗體應(yīng)答，導(dǎo)致抗胃泌素或前胃泌素的高抗體效價。因此，在第一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是胃泌素G17、胃泌素G17片段、胃泌素G34或胃泌素G34片段，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接，優(yōu)選地形成有序且重復(fù)的抗原陣列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，適合在本發(fā)明中使用的病毒樣顆粒包括病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的重組蛋白、優(yōu)選重組外殼蛋白、其突變體或片段。在另一方面，本發(fā)明提供一種疫苗組合物，其中所述疫苗組合物包含至少一種本發(fā)明的抗原。而且，本發(fā)明提供一種給人或動物、優(yōu)選給哺乳動物施用該疫苗組合物的方法。本發(fā)明的疫苗組合物在不存在至少一種佐劑的情況下能夠誘導(dǎo)強(qiáng)免疫應(yīng)答，特別是抗體應(yīng)答。因此，在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，該疫苗組合物不含佐劑。避免使用佐劑可以減少不希望的炎性T細(xì)胞應(yīng)答的可能的發(fā)生。在另一方面，本發(fā)明提供包含本發(fā)明的組合物和可接受的藥物載體的藥物組合物。再另一方面，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明的組合物的方法，包括(a)提供具有至少一個第一附著位點(diǎn)的VLP;(b)提供具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種本發(fā)明的抗原；和(c)將所述VLP與所述至少一種本發(fā)明的抗原相組合，產(chǎn)生所述組合物，其中所述至少一種抗原和所述VLP通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接。圖1A顯示用nG17amide或CCK8包被板并與連續(xù)稀釋的小鼠血清(免疫后14天)孵育的ELISA結(jié)果。圖1B顯示抑制ELISA的結(jié)果，其中在加到包被后的板上之前，血清與連續(xù)稀釋的nG17amide或CCK8預(yù)孵育。圖2示出了在Q13-mC5acys或QJ3VLP免疫的小鼠最后一次注射膠原/CFA之后(圖2A)或最后一次注射抗-膠原單克隆抗體混合物之后(圖2B)，所有肢的平均臨床得分總和。x-軸表示膠原注射后的天數(shù)，y-軸表示所有腿的臨床得分的平均和。圖3示出了蛋白尿讀數(shù)大于300|Lig/ml的用Q13-mC5acys或QfiVLP免疫的小鼠的百分?jǐn)?shù)。發(fā)明詳述除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員的通常理解具有相同的含義。抗原本文所用的術(shù)語"抗原"指如果被MHC分子呈遞，則能夠被抗體或T細(xì)胞受體(TCR)結(jié)合的分子。本文所用的術(shù)語"抗原"也包括T細(xì)胞表位?？乖€能夠被免疫系統(tǒng)識別，以及/或者能夠誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答和/或細(xì)胞免疫應(yīng)答，導(dǎo)致B和/或T淋巴細(xì)胞的活化。然而，至少在某些情況下，這可能需要抗原含有Th細(xì)胞表位或者連接于Th細(xì)胞表位上，并且包含于佐劑中。一個抗原可能包含一個或多個表位(B和T表位)。上面提到的特異性反應(yīng)表示抗原優(yōu)選地一^:以高選擇性方式與其相應(yīng)的抗體或TCR反應(yīng)，而不與可能由其它抗原誘導(dǎo)的其它許多抗體或TCR反應(yīng)。本文所用的抗原也可以是幾種不同抗原的混合物?？乖晕稽c(diǎn)術(shù)語"抗原性位點(diǎn)"和術(shù)語"抗原性表位"在本文中可以互換使用，是指多肽的連續(xù)或不連續(xù)的部分，它可以被抗體或在MHC分子環(huán)境內(nèi)被T細(xì)胞受體免疫特異性地結(jié)合。免疫特異性結(jié)合不包括非特異性結(jié)合，但是不一定排除交叉反應(yīng)性?？乖晕稽c(diǎn)在對于該抗原性位點(diǎn)而言獨(dú)特的空間構(gòu)象中一般包含5-10個氨基酸。本發(fā)明的抗原本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的抗原"是指選自下組的抗原a)本發(fā)明的CCR5;b)本發(fā)明的CXCR4;c)本發(fā)明的CETP;d)本發(fā)明的C5a;e)本發(fā)明的胃泌素；f)本發(fā)明的緩激肽；和g)本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽。本發(fā)明的CCR5:本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的CCR5"是指如本文定義的至少一種CCR5胞夕卜域、至少一種CCR5胞外域片段或其任意組合。CCR5胞外域本文使用的術(shù)語"CCR5胞外域"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由SEQIDNO:24的人CCR5的4個胞外域任一或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物(ortholog)組成的多肽。而且，本文使用的術(shù)語"CCR5胞外域"也應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由任何天然或遺傳工程變體組成的多肽，該變體與以上定義的CCR5胞外域具有70%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上、最優(yōu)選97%以上的氨基酸序列同一性。本文使用的術(shù)語"CCR5胞外域"也應(yīng)當(dāng)包括以上定義的CCR5胞外域的翻譯后修飾，包括但不限于糖基化、乙?；?、磷酸化。優(yōu)選地，本文定義的CCR5胞外域由長度為最多200個、更優(yōu)選最多100個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CCR5胞外域能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CCR5的抗體的產(chǎn)生。CCR5胞外域片段本文使用的術(shù)語"CCR5胞外域片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CCR5胞外域的至少4、5個、優(yōu)選地至少6、7、8、9、10、11、12、17、18、19、20、25或30個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文使用的術(shù)語"CCR5胞外域片段"應(yīng)當(dāng)任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CCR5胞外域的至少6個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文定義的CCR5胞外域由長度為最多50個、更優(yōu)選最多30個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CCR5胞外域片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CCR5的抗體的產(chǎn)生。CCR5胞外域和/或CCR5胞外域片段的組合術(shù)語"CCR5胞外域和/或CCR5胞外域片段的組合"應(yīng)當(dāng)包括任何包含或由以上定義的CCR5胞外域和/或CCR5胞外域片段的任意組合組成的實(shí)體。優(yōu)選地，CCR5胞外域和/或CCR5胞外域片段通過融合到一條多肽中而組合。因此，術(shù)語"CCR5胞外域和/或CCR5胞外域片段的組合"還包括作為間隔區(qū)的額外的氨基酸，其中所述間隔區(qū)通常不長于10個、優(yōu)選不長于6個氨基酸，并且其中所述間隔區(qū)位于兩個CCR5胞外域和/或CCR5月包夕卜i或片l殳之間。本發(fā)明的CXCR4:本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的CXCR4"是指本文定義的至少一種CXCR4胞外域、至少一種CXCR4胞外域片段或其任意組合。CXCR4胞外域本文使用的術(shù)語"CXCR4胞外域"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由SEQIDNO:28的人CXCR4的4個胞外域任一或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。而且，本文使用的術(shù)語"CXCR4胞外域"也應(yīng)當(dāng)包括組成的多肽，該變體與以上定義的CXCR4胞外域具有70%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上、最優(yōu)選97%以上的氨基酸序列同一性。本文使用的術(shù)語"CXCR4胞外域"也應(yīng)當(dāng)包括如上定義的CXCR4胞外域的翻譯后修飾，包括但不限于糖基化、乙酰化、磷酸化。優(yōu)選地，本文定義的CXCR4胞外域由長度為最多200個、更優(yōu)選最多100個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CXCR4胞外域能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CXCR4的抗體的產(chǎn)生。CXCR4胞外域片段本文使用的術(shù)語"CXCR4胞外域片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CXCR4胞外域的至少4、5個、優(yōu)選地至少6、7、8、9、10、11、12、17、18、19、20、25或30個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。本文使用的術(shù)語"CXCR4胞外域片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CXCR4胞外域的至少6個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文使用的CXCR4胞外域片段由長度為最多50個、更優(yōu)選最多30個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CXCR4胞外域片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CXCR4的抗體的產(chǎn)生。CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段的組合術(shù)語"CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段的組合"應(yīng)當(dāng)包括任何包含或由以上定義的CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段的任意組合組成的實(shí)體。優(yōu)選地，CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段通過融合到一條多肽中組合。因此，術(shù)語"CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段的組合"還包括作為間隔區(qū)的額外的氨基酸，其中所述間隔區(qū)通常不長于10個、優(yōu)選不長于6個氨基酸，并且其中所述間隔區(qū)位于兩個CXCR4胞外域和/或CXCR4胞外域片段之間。本發(fā)明的C5a:本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的C5a"是指本文定義的至少一種C5a胞外域或至少一種C5a胞外域片段或其任意組合。C5a蛋白本文使用的術(shù)語"C5a蛋白"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由SEQIDNO:45的人C5a或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。而且，本文使用的術(shù)語"C5a蛋白"也應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由任何天然或遺傳工程變體或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，所述變體與SEQIDNO:45的人C5a具有70%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上、最優(yōu)選97%以上的氨基酸序列同一性。本文使用的術(shù)語"C5a蛋白"也應(yīng)當(dāng)包括如上定義的C5a蛋白的翻譯后修飾，包括但不限于糖基化、乙?；?、磷酸化。優(yōu)選地，本文定義的C5a蛋白由長度為最多200個、更優(yōu)選最多100個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，C5a蛋白能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合C5a的抗體的產(chǎn)生。C5a片段本文使用的術(shù)語"C5a片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的C5a蛋白的至少4、5個、優(yōu)選地至少6、7、8、9、10、11、12、17、18、19、20、25或30個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文使用的術(shù)語"C5a片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的C5a蛋白的至少6個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文使用的C5a片段由長度為最多50個、更優(yōu)選最多30個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，C5a片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合C5a的抗體的產(chǎn)生。本發(fā)明的CETP:本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的CETP"是指本文定義的至少一種CETP蛋白或至少一種CETP片段或其任意組合。CETP蛋白本文使用的術(shù)語"CETP蛋白"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由SEQIDNO:31的人CETP或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。而且，本文使用的術(shù)語"CETP蛋白"也應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由任何天然或遺傳工程變體或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，所述變體與SEQIDNO:31的人CETP具有70%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上、最優(yōu)選97%以上的氨基酸序列同一性。本文使用的術(shù)語"CETP蛋白"也應(yīng)當(dāng)包括如上定義的CETP蛋白的翻譯后修飾，包括但不限于糖基化、乙?；?、磷酸化。優(yōu)選地，本文定義的CETP蛋白由長度為最多500個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CETP蛋白能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CETP的抗體的產(chǎn)生。CETP片段本文使用的術(shù)語"CETP片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CETP蛋白的至少4、5個、優(yōu)選地至少6、7、8、9、10、11、12、17、18、19、20、25或30個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及任何與其具有65%以上、優(yōu)選80%以上、更優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文使用的術(shù)語"CETP片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或可替代地或優(yōu)選地由本文定義的CETP蛋白的至少6個連續(xù)氨基酸組成的多肽，以及與其具有80%以上、優(yōu)選90%以上、更優(yōu)選95%以上的氨基酸序列同一性的多肽。優(yōu)選地，本文定義的CETP片段由長度為最多50個、更優(yōu)選最多30個的氨基酸組成。典型且優(yōu)選地，CETP片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性結(jié)合CETP的抗體的產(chǎn)生。本發(fā)明的胃泌素本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的胃泌素"是指如本文定義的至少一種胃泌素G17、至少一種胃泌素G17片段、至少一種前胃泌素G34或至少一種前胃泌素G34片段，或其任意組合。胃泌素G17:術(shù)語"胃泌素G17"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:34、SEQIDNO:36的人胃泌素1-17、C末端苯丙氨酸被酰胺化的SEQIDNO:34的胃泌素1-17或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。術(shù)語"胃泌素G17"還應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:34、SEQIDNO:36的人胃泌素1-17、C末端苯丙氨酸被酰胺化的SEQIDNO:34的胃泌素1-17或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，其中最多三個、優(yōu)選最多兩個、更優(yōu)選一個氨基酸被缺失、添加或置換。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。胃泌素G17的長度優(yōu)選地不長于50個，更優(yōu)選不長于30個氨基酸。典型且優(yōu)選地，胃泌素G17能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合胃泌素的抗體。胃泌素G17片段本文使用的術(shù)語"胃泌素G17片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由或由胃泌素G17的至少4、5個、優(yōu)選地至少6、7、8、9或10個連續(xù)氨基酸組成的多肽。術(shù)語"胃泌素G17片段"應(yīng)當(dāng)還包括任何包含、基本由或由如上定義的胃泌素G17的片段組成的多肽，其中至少一個氨基酸、優(yōu)選地最多三個、更優(yōu)選地最多兩個、更優(yōu)選一個氨基酸被缺失、添加或置換。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。胃泌素G17片段的長度優(yōu)選地不長于30個，更優(yōu)選不長于20個氨基酸。典型且優(yōu)選地，胃泌素G17片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合胃泌素的抗體。前胃泌素G34:術(shù)語"前胃泌素G34"包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:35、SEQIDNO:37的人胃泌素1-34、C末端苯丙氨酸被酰胺化的胃泌素l-34或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。術(shù)語"前胃泌素G34"還應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:35、SEQIDNO:37的人胃泌素1-34、C末端苯丙氨酸被酰胺化的胃泌素1-34或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，其中最多5個、優(yōu)選最多4個、更優(yōu)選最多3個、優(yōu)選最多2個、更優(yōu)選一個氨基酸被缺失、添加或置換。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。前胃泌素G34的長度優(yōu)選地不長于60個，更優(yōu)選不長于40個氨基酸。典型且優(yōu)選地，前胃泌素G34能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合前胃泌素的抗體。前胃泌素G34片段本文使用的術(shù)語"前胃泌素G34片段"應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由或由前胃泌素G34的至少6、7、8、9、10、11、12、13或14個氨基酸組成的多肽。術(shù)語"前胃泌素G34片段，，應(yīng)當(dāng)還包括任何包含、基本由或由如上定義的前胃泌素G34的片段組成的多肽，其中至少一個氨基酸、優(yōu)選地最多三個、更優(yōu)選最多兩個、更優(yōu)選一個氨基酸被缺失、添加或置換為另一個氨基酸。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。前胃泌素G34片段的長度優(yōu)選地不長于40個，更優(yōu)選不長于20個氨基酸。典型且優(yōu)選地，前胃泌素G34片段能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合前胃泌素的抗體。本發(fā)明的緩激肽本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的緩激肽"包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:22的人緩激肽或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的緩激肽"還應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:22的人緩激肽或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，其中最多2個、優(yōu)選1個氨基酸被缺失、添加或置換為另一個氨基酸。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。本發(fā)明的緩激肽的長度優(yōu)選地不長于30個，更優(yōu)選不長于20個氨基酸。典型且優(yōu)選地，本發(fā)明的緩激肽能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合緩激肽的抗體。本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽"包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:23的人脫-Arg-緩激肽或來自任何其他動物、優(yōu)選哺乳動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽。本文使用的術(shù)語"本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽"還應(yīng)當(dāng)包括任何包含、基本由、或由SEQIDNO:23的人脫-Arg-緩激肽或來自任何其他動物的相應(yīng)直向同源物組成的多肽，其中最多2個、優(yōu)選1個氨基酸被缺失、添加或置換為另一個氨基酸。優(yōu)選地，所述置換是保守氨基酸置換。本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽的長度優(yōu)選地不長于30個，更優(yōu)選不長于20個氨基酸。典型且優(yōu)選地，本發(fā)明的緩激肽能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性結(jié)合脫-Arg-緩激肽的抗體。聯(lián)接的(associated):本文所用的術(shù)語"聯(lián)接的"(或其名詞聯(lián)接)是指所有可能的方式，優(yōu)選化學(xué)相互作用，通過這種方式，兩個分子連接在一起?；瘜W(xué)相互作用包括共價和非共價的相互作用。非共價相互作用的典型例子是離子相互作用、疏水相互作用或氫鍵，而共價相互作用例如基于共價鍵如酯、醚、磷酯、酰胺、肽、碳-磷鍵、碳-硫鍵如硫醚或酰亞胺4定。第一附著位點(diǎn)本文所用的短語"第一附著位點(diǎn)"是指VLP中天然存在的或者人工添加到VLP中的一種元件，第二附著位點(diǎn)可與之連接。第一附著位點(diǎn)可以是蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、肽、糖、多核苷酸、天然或合成的聚合物、次級代謝物或化合物(生物素、熒光素、視黃醇、洋地黃毒苷、金屬離子、苯曱基磺酰氟)、或化學(xué)反應(yīng)基如氨基、羧基、巰基、羥基、胍基、組氨酰基或其組合。作為第一附著位點(diǎn)的化學(xué)反應(yīng)基的一個優(yōu)選的實(shí)施方案是氨基酸如賴氨酸的氨基。第一附著位點(diǎn)一^:位于VLP的表面上，優(yōu)選位于VLP的外表面上。多個第一附著位點(diǎn)一般以重復(fù)構(gòu)型存在于病毒樣顆粒的表面上，優(yōu)選外表面上。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，第一附著位點(diǎn)與VLP通過至少一個共價鍵、優(yōu)選通過至少一個肽鍵聯(lián)接。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，第一附著位點(diǎn)自然存在于VLP中?？商娲?，在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，第一附著位點(diǎn)被人工添加到VLP上。第二附著位點(diǎn)本文使用的短語"第二附著位點(diǎn)"是指天然存在于或者人工添加到本發(fā)明的抗原上的一種元件，第一附著位點(diǎn)可以與之連接。本發(fā)明的抗原的第二附著位點(diǎn)可以是蛋白質(zhì)、多肽、肽、氨基酸、糖、多核苷酸、天然或合成的聚合物、次級代謝物或化合物(生物素、熒光素、視黃醇、洋地黃毒苷、金屬離子、苯甲基磺酰氟)、或化學(xué)反應(yīng)基例如氨基、羧基、巰基、羥基、胍基、組氨酰基、或其組合。作為第二附著位點(diǎn)的化學(xué)反應(yīng)基的一個優(yōu)選的實(shí)施方案是巰基，優(yōu)選氨基酸半胱氨酸的巰基。本文使用的術(shù)語"具有至少一個第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的抗原"是指包含本發(fā)明的抗原和至少一個第二附著位點(diǎn)的構(gòu)建體。在一個實(shí)施方案中，第二附著位點(diǎn)自然存在于本發(fā)明的抗原內(nèi)。在另外一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，第二附著位點(diǎn)被人工添加到本發(fā)明的抗原上。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，第二附著位點(diǎn)與本發(fā)明的抗原通過至少一個共價睫、優(yōu)選通過至少一個肽4建聯(lián)接。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，具有至少一個第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的抗原還含有連接體，優(yōu)選地所述連接體包含至少一個第二附著位點(diǎn)，優(yōu)選地，所述連接體與本發(fā)明的抗原通過肽4建融合。外殼蛋白本申請中的術(shù)語"外殼蛋白"和可交換使用的術(shù)語"衣殼蛋白，，是指能夠摻入病毒衣殼或VLP內(nèi)的病毒蛋白質(zhì)。典型且優(yōu)選地，術(shù)語"外殼蛋白"是指由病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的基因組或由病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的變體的基因組編碼的外殼蛋白。更優(yōu)選地，例如，術(shù)語"AP205的外殼蛋白"是指SEQIDNO:14或其中從SEQIDNO:14上切下第一個甲硫氨酸的氨基酸序列。更優(yōu)選地，例如，術(shù)語"Q卩的外殼蛋白，，是指SEQIDNO:l("Q卩CP")和SEQIDNO:2(Al),其在N末端含有或不含甲硫氨酸。噬菌體Q(3的衣殼主要由Q(3CP組成，含有少量A1蛋白。連接的本文所用的術(shù)語"連接的"(或其名詞連接)是指所有可能的方式，優(yōu)選化學(xué)相互作用，通過這種方式，至少一個第一附著位點(diǎn)和至少一個第二附著位點(diǎn)連接在一起?；瘜W(xué)相互作用包括共價和非共價的相互作用。非共價相互作用的典型例子是離子相互作用、疏水相互作用或氫鍵，而共價相互作用例如基于共價鍵如酯、醚、磷酯、酰胺、肽、碳-磷鍵、碳-硫鍵如硫醚或酰亞胺鍵。在某些優(yōu)選實(shí)施方案中，第一附著位點(diǎn)和第二附著位點(diǎn)通過至少一個共價鍵連接，優(yōu)選通過至少一個非肽鍵連接，更優(yōu)選只通過非肽鍵連接。然而，本文所用的術(shù)語"連接，，應(yīng)當(dāng)不僅包括至少一個第一附著位點(diǎn)和至少一個第二附著位點(diǎn)的直接連接，而且可替代地并且優(yōu)選地，包括至少一個第一附著位點(diǎn)和至少一個第二附著位點(diǎn)通過中間分子的間接連接，典型且優(yōu)選地通過使用至少一個、優(yōu)選一個異雙功能交聯(lián)劑連接。連接體本文所用的"連接體"將第二附著位點(diǎn)與本發(fā)明的抗原聯(lián)接，或者已經(jīng)包含第二附著位點(diǎn)、基本由、或者由第二附著位點(diǎn)組成。優(yōu)選地，本文所用的"連接體"已經(jīng)包含第二附著位點(diǎn)，典型且優(yōu)選地一但不是必需地一為一個氨基酸殘基，優(yōu)選半胱氨酸殘基。本文所用的"連接體"也被稱為"氨基酸連接體"，特別是當(dāng)本發(fā)明的連接體含有至少一個氨基酸殘基時。因此，術(shù)語"連接體"和"氨基酸連接體"在本文中可以交換使用。然而，這并不意味著這種連接體僅由氨基酸殘基組成，即使由氨基酸殘基組成的連接體是本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方案。連接體的氨基酸殘基優(yōu)選地由本領(lǐng)域已知的天然氨基酸或非天然氨基酸、其全L型或全D型或混合物組成。本發(fā)明的連接體的進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案是包含巰基或半胱氨酸殘基的分子，這些分子因此也包括在本發(fā)明中。可用于本發(fā)明的其他連接體有包含Cl-C6烷基-、環(huán)烷基如環(huán)戊基或環(huán)己基、環(huán)烯基、芳基或雜芳基部分的分子。而且，優(yōu)選地包含C1-C6烷基-、環(huán)烷基-(C5，C6)、芳基-或雜芳基-部分和另外的氨基酸的連接體也可以用作本發(fā)明的連接體，并且包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。連接體與本發(fā)明的抗原優(yōu)選地通過至少一個共價鍵、更優(yōu)選地通過至少一個肽鍵聯(lián)接。在本發(fā)明的抗原內(nèi)不天然存在第二附著位點(diǎn)的情況中，連接體與至少一個第二附著位點(diǎn)例如半胱氨酸優(yōu)選地通過至少一個共價鍵、更優(yōu)選地通過至少一個肽鍵聯(lián)沖妄。有序且重復(fù)的抗原陣列本文所用的術(shù)語"有序且重復(fù)的抗原陣列"通常是指抗原的重復(fù)模式，或者其特征在于抗原相對于病毒樣顆粒的空間排列具有典型且優(yōu)選地高度的均一性。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，這種重復(fù)模式可以是幾何模式。本發(fā)明的某些實(shí)施方案，例如RNA噬菌體的VLP,是合適的有序且重復(fù)的抗原陣列的典型且優(yōu)選的實(shí)例，其優(yōu)選地具有嚴(yán)格重復(fù)的類晶體抗原排列，優(yōu)選間隔1-30納米，優(yōu)選2-15納米，更優(yōu)選2-10納米，更優(yōu)選2-8納米，進(jìn)一步更優(yōu)選1.6-7納米。包裝的本文所用的術(shù)語"包裝的"是指聚陰離子大分子相對于VLP的狀態(tài)。本文所用的術(shù)語"包裝"包括結(jié)合，該結(jié)合可以是共價的，例如化學(xué)偶聯(lián)，也可以是非共價的，例如離子相互作用、疏水相互作用、氫鍵等。該術(shù)語也包括聚陰離子大分子的包封或部分包封。因此，聚陰離子大分子可以被VLP包封，而不需存在實(shí)際上的結(jié)合，特別是共價結(jié)合。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一個聚陰離子大分子被包裝在VLP內(nèi)，最優(yōu)選地以非共價的方式包裝。多肽如此處所用的術(shù)語"多肽"是指由單體(氨基酸)通過酰胺鍵(也稱為肽鍵)線性連接組成的分子。它是指氨基酸分子鏈，而不是指特定長度的產(chǎn)物。因此，多肽的定義內(nèi)包括肽、二肽、三肽、寡肽和蛋白質(zhì)。該術(shù)語也包括多肽的翻譯后修飾，例如糖基化、乙?；?、磷酸化等。重組VLP:本文使用的術(shù)語"重組VLP"是指通過包括至少一個重組DNA技術(shù)步驟的方法獲得的VLP。本文使用的術(shù)語"重組產(chǎn)生的VLP"是指通過包括至少一個重組DNA技術(shù)步驟的方法獲得的VLP。因此，術(shù)語"重組VLP，，和"重組產(chǎn)生的VLP，，在本文中可以互換使用，具有相同的含義。病毒顆粒本文使用的術(shù)語"病毒顆粒"是指病毒的形態(tài)學(xué)形式。在某些病毒類型中，它包含由蛋白質(zhì)衣殼圍繞的基因組；另外一些具有額外的結(jié)構(gòu)(例如被膜、尾等)。本文使用的病毒樣顆粒(VLP)是指非復(fù)制性或非傳染性的、優(yōu)選非復(fù)制性且非傳染性的病毒顆粒，或者是指非復(fù)制性或非傳染性的、優(yōu)選非復(fù)制性且非傳染性的類似于病毒顆粒、優(yōu)選病毒衣殼的結(jié)構(gòu)。本文使用的術(shù)語"非復(fù)制性"是指不能復(fù)制VLP所含的基因組。本文使用的術(shù)語"非傳染性"是指不能進(jìn)入宿主細(xì)胞。優(yōu)選地，本發(fā)明的病毒樣顆粒是非復(fù)制性和/或非傳染性的，因?yàn)樗狈θ炕虿糠值牟《净蚪M或基因組功能。在一個實(shí)施方案中，病毒樣顆粒是其中病毒基因組已經(jīng)被物理或化學(xué)滅活的病毒顆粒。典型且更優(yōu)選地，病毒樣顆粒缺少病毒基因組的全部或部分復(fù)制性和傳染性部分。本發(fā)明的病毒樣顆?？赡芎信c其基因組不同的核酸。本發(fā)明的病毒樣顆粒的一個典型且優(yōu)選的實(shí)施方案是病毒衣殼，如相應(yīng)病毒、噬菌體、優(yōu)選RNA噬菌體的病毒衣殼。術(shù)語"病毒衣殼，，或"衣殼，，是指由病毒蛋白質(zhì)亞單位組成的大分子裝配體。典型地，有60、120、180、240、300、360個和360個以上的病毒蛋白亞單位。典型且優(yōu)選地，這些亞單位的相互作用導(dǎo)致形成具有固有的重復(fù)組織的病毒衣殼或病毒衣殼樣結(jié)構(gòu)，其中所述結(jié)構(gòu)一般是球形或管狀。病毒顆粒和病毒樣顆粒的一個共同特征是其高度有序且重復(fù)的亞單位排列。RNA噬菌體的病毒樣顆粒本文使用的術(shù)語"RNA噬菌體的病毒樣顆粒"是指包含RNA噬菌體的外殼蛋白、其突變體或片段或者優(yōu)選地基本由其組成或者由其組成的病毒樣顆粒。另外，RNA噬菌體的病毒樣顆粒類似于RNA噬菌體的結(jié)構(gòu)，并且是非復(fù)制性或非傳染性的，并且至少缺少編碼RNA噬菌體的復(fù)制機(jī)制的基因，一般也缺少編碼負(fù)責(zé)病毒附著或進(jìn)入宿主的蛋白質(zhì)的基因。然而，該定義應(yīng)當(dāng)也包括上述基因仍然存在但是無活性的RNA噬菌體的病毒樣顆粒，這樣也可產(chǎn)生非復(fù)制性和/或非傳染性的RNA噬菌體的病毒樣顆粒。在本申請的公開內(nèi)容中，術(shù)語"亞單位"和"單體"在上下文中可互換并且等同地使用。一種或一個術(shù)語"一種"或"一個"在本申請中使用時，除非另外說明，是指"至少一種(個)"或"一種(個)或一種(個)以上"。在本申請中，如果抗體與抗原結(jié)合的結(jié)合親和力(Ka)為106M—}或更高，優(yōu)選l(fM"或更高，更優(yōu)選1()Sm"或更高，最優(yōu)選10"m"或更高，則該抗體被定義為特異性結(jié)合。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地測定抗體的親和力(例如通過Scatchard分析)。多肽的氨基酸序列同一性可以使用諸如Bestfit程序等已知計算機(jī)程序常規(guī)確定。當(dāng)使用Bestfit或其它任何序列比對程序、優(yōu)選使用Bestfit來確定一種特定序列與參照氨基酸序列是否例如95%相同時，將參數(shù)設(shè)置為使得在參照氨基酸序列的全長上計算同一性百分比，并且允許最多占參照序列中氨基酸殘基總數(shù)的5%的同源性缺口。上述測定多肽之間百分同一性的方法適用于本發(fā)明公開的所有蛋白質(zhì)、多肽或其片段。保守氨基酸置換，如本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的，包括等構(gòu)置換(isostericsubstitution)，該置換中氨基酸的電荷、極性、芳族、月旨族或疏水性性質(zhì)得到保持。典型的保守氨基酸置換是下組之一內(nèi)的氨基酸之間的置換Gly,Ala;Val，Ile，Leu;Asp,Glu;Asn,Gin;Ser,Thr，Cys;Lys，Arg;Phe和Tyr。物和方法。本發(fā)明的組合物包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是本發(fā)明的抗原，并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗原與VLP連接，從而形成有序且重復(fù)的抗原-VLP陣列。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，至少20個，優(yōu)選至少30個，更優(yōu)選至少60個，更優(yōu)選至少120個，進(jìn)一步更優(yōu)選至少180個本發(fā)明的抗原與VLP連接?？梢赃x擇本領(lǐng)域公知的任何具有有序且重復(fù)的結(jié)構(gòu)的病毒作為本發(fā)明的VLP。其外殼或衣殼蛋白能夠用于制備VLP的示例性的DNA或RNA病毒已經(jīng)在WO2004/009124的第25頁第10-21行，第26頁第ll-28行，和第28頁第4行到第31頁第4行公開。這些公開的內(nèi)容在此引入作為參考。病毒或病毒樣顆?？梢詮牟《靖腥镜募?xì)胞培養(yǎng)物中產(chǎn)生和純化。獲得的用于疫苗目的的病毒或病毒樣顆粒需要沒有毒力。除了遺傳工程以外，還可以利用物理或化學(xué)方法滅活病毒基因組功能，如紫外線照射、曱醛處理。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，VLP是重組VLP。幾乎所有/>知的病毒都已經(jīng)被測序，并且可以容易地被公眾獲得。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地確定編碼外殼蛋白的基因。通過在宿主中重組表達(dá)外殼蛋白制備VLP是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常識。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，病毒樣顆粒包含或者由選自下組的病毒的重組蛋白、其突變體或片段組成a)RNA噬菌體；b)噬菌體；c)乙型肝炎病毒，優(yōu)選其衣殼蛋白(Ulrich等人，VimsRes.50:141-182(1998))或其表面蛋白(WO92/11291);d)麻疹病毒(Warnes等人，Gene160:173-178(1995));e)辛德畢斯病毒；f)輪狀病毒(US5,071,651和US5,374,426);g)口蹄疫病毒(Twomey等人，Vaccine13:1603-1610，(1995));h)諾沃克病毒(Jiang,X.等人，Science250:1580-1583(1990);Matsui，S.M.等人，J.Clin.Invest.87:1456-1461(1991));i)曱病毒；j)逆轉(zhuǎn)錄病毒，優(yōu)選其GAG蛋白(WO96/30523);k)逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子Ty，優(yōu)選蛋白pi;l)人乳頭瘤病毒(WO98/15631);m)多瘤病毒；n)煙草花葉病毒；和o)禽獸棚病毒。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，VLP包含或者由重組蛋白、其突變體或片段的一種以上的氨基酸序列、優(yōu)選兩種氨基酸序列組成。包含或者由一種以上的氨基酸序列組成的VLP在本申請中被稱為嵌合VLP。如此處使用的術(shù)語"重組蛋白的片段"或術(shù)語"外殼蛋白的片段"被定義為一種多肽，其長度分別為野生型重組蛋白或外殼蛋白長度的至少70%，優(yōu)選至少80%，更優(yōu)選至少90%，更優(yōu)選至少95%，并且優(yōu)選地保留形成VLP的能力。優(yōu)選地，該片段通過至少一個內(nèi)部缺失、至少一個截短或至少一個其組合而獲得。術(shù)語"重組蛋白的片段"或術(shù)語"外殼蛋白的片段"還包括與以上定義的"重組蛋白的片段"或"外殼蛋白的片段"分別具有至少80%,優(yōu)選90%，更優(yōu)選95%的氨基酸序列同一性并且優(yōu)選能夠裝配為病毒樣顆粒的多肽。在本發(fā)明中可以交換使用的術(shù)語"突變重組蛋白"或術(shù)語"重組蛋白突變體，，，或者在本發(fā)明中可以交換使用的術(shù)語"突變外殼蛋白"或術(shù)語"外殼蛋白突變體"，分別是指具有野生型重組蛋白或外殼蛋白衍生的氨基酸序列的多肽，其中該衍生的氨基酸序列與野生型序列至少80%、優(yōu)選至少85%、90%、95%、97%或99%相同，并且優(yōu)選地保留裝配為VLP的能力。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的病毒樣顆粒是乙型肝炎病毒的病毒樣顆粒。乙型肝炎病毒樣顆粒的制備已經(jīng)在WO00/32227、WO01/85208和WO02/056905中公開，所有三篇文獻(xiàn)在這里都引用以作參考。適合在本發(fā)明的實(shí)施中使用的HBcAg的其他變體在WO01/056905的第34-39頁已經(jīng)公開。在本發(fā)明的一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，將賴氨酸殘基導(dǎo)入HBcAg多肽中，來介導(dǎo)本發(fā)明的抗原與HBcAg的VLP的連接。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，利用包含、或由SEQIDNO:20的氨基酸1-144、或1-149、1-185組成的HBcAg制備本發(fā)明的VLP和組合物，其中該氨基酸被修飾使得第79和80位的氨基酸被替代為具有Gly-Gly-Lys-Gly-Gly氨基酸序列的肽。這個修飾將SEQIDNO:20改變?yōu)镾EQIDNO:21。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，SEQIDNO:21的第48和110位的半胱氨酸殘基，或其相應(yīng)片^:，優(yōu)選1-144或l-149，被突變?yōu)榻z氨酸。本發(fā)明進(jìn)一步包括包含具有上述相應(yīng)氨基酸改變的乙型肝炎核心蛋白突變體的組合物。本發(fā)明進(jìn)一步包括分別包含HBcAg多肽的組合物和疫苗，該HBcAg多肽包含、或由與SEQIDNO:21至少80%、85%、90%、95%、97%或99%相同的氨基酸序歹'j組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，病毒樣顆粒是豇豆褪綠斑駁病毒、豇豆花葉病毒或苜蓿花葉病毒的病毒樣顆粒。產(chǎn)生這些病毒的VLP的方法在US2005/0260758和WO05067478中描述。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的病毒樣顆粒是RNA噬菌體的病毒樣顆粒。優(yōu)選地，該RNA噬菌體選自a)噬菌體Q卩；b)噬菌體R17;c)噬菌體fr;d)噬菌體GA;e)噬菌體SP;f)噬菌體MS2;g)噬菌體Mll;h)噬菌體MX1;i)噬菌體NL95;k)噬菌體f2;1)噬菌體PP7;和m)噬菌體AP205。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述組合物包含RNA噬菌體的外殼蛋白、其突變體或片段，其中該外殼蛋白具有選自以下序列的氨基酸序列(a)SEQIDNO:l;涉及Q(3CP;(b)SEQIDNO:l和SEQIDNO:2的混合物(涉及Q卩Al蛋白)；(c)SEQIDNO:3;(d)SEQIDNO:4;(e)SEQIDNO:5;(f)SEQIDNO:6;(g)SEQIDNO:6和SEQIDNO:7的混合物；(h)SEQIDNO:8;(i)SEQIDNO:9;(j)SEQIDNO:10;(k)SEQIDNO:l1;(1)SEQIDNO:12;(m)SEQIDNO:13;和(n)SEQIDNO:14。通常，上述外殼蛋白能夠裝配為VLP,需要或不需要存在N-末端曱硫氨酸。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，VLP是嵌合VLP，包含或者由RNA噬菌體的外殼蛋白、其突變體或片段的一種以上的氨基酸序列，優(yōu)選兩種氨基酸序列組成。在一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，VLP包含或者由RNA噬菌體的兩種不同的外殼蛋白組成，所述兩種外殼蛋白具有SEQIDNO:1和SEQIDNO:2，或SEQIDNO:6和SEQIDNO:7的氨基酸序列。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的病毒樣顆粒包含或者基本由或者由RNA噬菌體QP、fr、AP205或GA的重組外殼蛋白、其突變體或片段組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的VLP是RNA噬菌體Q卩的VLP。根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的RNA噬菌體的病毒樣顆粒、特別是QP和fr的病毒樣顆粒，已經(jīng)在WO02/056905中/>開，其/〉開內(nèi)容在此引用作為參考。特別地，WO02/056905的實(shí)施例18給出了由QP制備VLP顆粒的詳細(xì)描述。在另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的VLP是RNA噬菌體AP205的VLP。在本發(fā)明的實(shí)踐中也可以使用AP205VLP的能夠裝配的突變形式，包括氨基酸5位的脯氨酸被置換為蘇氨酸、氨基酸14位的天冬酰胺被置換為天冬氨酸的AP205外殼蛋白，這產(chǎn)生本發(fā)明的其他優(yōu)選的實(shí)施方案。WO2004/007538，特別是在實(shí)施例1和實(shí)施例2中，描述了如何獲得包含AP205外殼蛋白的VLP，以及特別是其表達(dá)和純化。WO2004/007538在此引入作為參考。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的VLP包含或者由病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的突變外殼蛋白組成，其中通過置換和/或通過刪除而除去至少一個賴氨酸殘基，從而修飾了該突變外殼蛋白。在另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的VLP包含或者由病毒、優(yōu)選RNA噬菌體的突變外殼蛋白組成，其中通過置換和/或通過插入而添加至少一個賴氨酸殘基，從而修飾了該突變外殼蛋白。在一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，突變外殼蛋白是RNA噬菌體Q(3的突變外殼蛋白，其中已經(jīng)通過置換或通過刪除除去了至少一個或至少兩個賴氨酸殘基。在一個可替代的非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，突變外殼蛋白是RNA噬菌體Q(3的突變外殼蛋白，其中已經(jīng)通過置換或通過插入添加了至少一個或至少兩個賴氨酸殘基。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，RNA噬菌體Q卩的突變外殼蛋白具有選自SEQIDNO:15-19中任一個的氨基酸序列。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物和疫苗的抗原密度為從0.5,優(yōu)選從l.O,優(yōu)選從1.2,優(yōu)選從1.6,優(yōu)選從1.9，優(yōu)選從2.2至4.0。如本文使用的術(shù)語"抗原密度"是指VLP、優(yōu)選RNA噬菌體的VLP的每個亞單位上、優(yōu)選每個外殼蛋白上連接的本發(fā)明的抗原的平均數(shù)。因此，該值計算為在本發(fā)明的組合物或疫苗中VLP、優(yōu)選RNA噬菌體的VLP的所有亞單位或單體上的平均數(shù)。其它一些RNA噬菌體外殼蛋白在細(xì)菌宿主中表達(dá)后也顯示自裝配(Kastelein，RA.等人，Gene23:245-254(1983)，Kozlovskaya,TM.等人，Dokl.Akad.NaukSSSR287:452-455(1986)，Adhin，MR.等人，Virology170:238-242(1989)，Priano,C.等人，J.Mol.Biol.249:283-297(1995))。特別是已經(jīng)公開了GA(Ni,CZ,等人,ProteinSci.5:2485-2493(1996),Tars，K等人，J.Mol.Biol.271:759-773(1997))和fr(PushkoP.等人，Prot.Eng.6:883-891(1993),Liljas，L等人.JMol.Biol.244:279-290,(1994))的生物學(xué)和生化性質(zhì)。幾種RNA噬菌體的晶體結(jié)構(gòu)已經(jīng)確定(Golmohammadi,R.等人，Structure4:543-554(1996))。利用這些信息，能夠確定表面暴露的殘基，從而能夠修飾RNA噬菌體的外殼蛋白，以便能夠通過插入或置換插入一個或多個反應(yīng)性氨基酸殘基。來源于RNA噬菌體的VLP的另一個優(yōu)點(diǎn)是它們在細(xì)菌中的高表達(dá)產(chǎn)量，這允許以可承受的成本產(chǎn)生大量的物質(zhì)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗原是CCR5胞夕卜域、CCR5胞外域片段或其任意組合。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是CCR5胞夕卜域片段。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域片段包含、基本由或由CCR5胞外域ECL2片段、優(yōu)選ECL2A組成。本領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解，ECL2A優(yōu)選地從ECL2的N末端的第一個氨基酸開始，并且優(yōu)選地終止于恰在人ECL2序列中半胱氨酸之前的蘇氨酸。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域片段包含、基本由、或由SEQIDNO:25組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域片段包含、基本由、或由環(huán)化的ECL2A組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CCR5胞外域片段包含、基本由、或由環(huán)化的SEQIDNO:25組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CCR5胞外域片段包含、基本由、或由環(huán)化的SEQIDNO:26或SEQIDNO:52組成，其中該肽通過兩端的C和G殘基環(huán)化。本文使用的環(huán)化的SEQIDNO:25是指包含、基本由、或由SEQIDN0.25組成的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基通過至少一個化學(xué)鍵，優(yōu)選地通過至少一個共價鍵彼此相互作用。優(yōu)選地，所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基均通過共價鍵彼此相互作用。優(yōu)選地，所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基通過一個肽鍵彼此相互作用，產(chǎn)生環(huán)肽。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是CCR5胞外域PNt。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或由SEQIDNO:27組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或由具有另外的連接體的SEQIDNO:27組成，該連接體優(yōu)選地是半胱氨酸，與SEQIDNO:27的C或N末端融合，優(yōu)選地與SEQIDNO:27的C末端融合。在另一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CCR5胞夕卜域PNt包含、基本由、或由具有另外的連接體的SEQIDNO:27組成，該連接體優(yōu)選地是半胱氨酸，與SEQIDNO:27的C或N末端融合，優(yōu)選地與SEQIDNO:27的C末端融合，其中SEQIDNO:27內(nèi)天然存在的半胱氨酸-陂置換為另一個氨基酸，優(yōu)選絲氨酸。這確保了均一且確定的抗原呈遞。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種組合物，其包含(a)具有至少兩個第一附著位點(diǎn)的RNA噬菌體的病毒樣顆粒(VLP);和(b)具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的至少一種CCR5胞外域PNt;其中所述CCR5胞外域PNt包含、基本由、或者由以下物質(zhì)組成(i)Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片段，和(ii)包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27(SEQIDNO:56)的Ntb結(jié)構(gòu)域或包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27的Ntb結(jié)構(gòu)域片段，其中所述Nta結(jié)構(gòu)域或所述Nta結(jié)構(gòu)域片段的C末端與所述Ntb結(jié)構(gòu)域或所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段的N末端融合，優(yōu)選直接融合，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個或第二個位點(diǎn)包含或者是巰基，優(yōu)選半胱氨酸殘基的巰基，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的N末端的上游；并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第二個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的C末端的下游，優(yōu)選位于所述CCR5胞外域PNt的C末端的下游；并且其中所述RNA噬菌體的所述VLP和所述CCR5胞外域PNt通過至少一個非肽共價4定連接。Nta結(jié)構(gòu)域本文使用的術(shù)語"Nta結(jié)構(gòu)域"是指具有SEQIDNO:57的氨基酸序列或來自任何其他動物、優(yōu)選靈長類動物(包括類人猿和原猴)、更優(yōu)選來自類人猿的CCR5直向同源物的相應(yīng)序列的天然Nta結(jié)構(gòu)域。此外，本文使用的術(shù)語"Nta結(jié)構(gòu)域"還指修飾的Nta結(jié)構(gòu)域，其中本文定義的天然Nta結(jié)構(gòu)域的3個、優(yōu)選2個、更優(yōu)選1個氨基酸已經(jīng)通過缺失、插入和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是由包含所述修飾的Nta結(jié)構(gòu)域的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。Nta結(jié)構(gòu)域片段本文使用的術(shù)語"Nta結(jié)構(gòu)域片段"是指任何包含、基本由、或由本文定義的Nta結(jié)構(gòu)域的至少8個、優(yōu)選地至少9、10、11、12、13、14、15或16個連續(xù)氨基酸序列組成的多肽，條件是由包含所述修飾的Nta結(jié)構(gòu)域片段的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。Ntb結(jié)構(gòu)域本文使用的術(shù)語"Ntb結(jié)構(gòu)域"是指具有SEQIDNO:58的氨基酸序列或來自任何其他動物、優(yōu)選靈長類動物(包括類人猿和原猴)、更優(yōu)選來自類人猿的CCR5直向同源物的相應(yīng)序列的天然Ntb結(jié)構(gòu)域。此外，本文使用的術(shù)語"Ntb結(jié)構(gòu)域"還指修飾的Ntb結(jié)構(gòu)域，其中本文定義的天然Ntb結(jié)構(gòu)域的2個、優(yōu)選1個氨基酸已經(jīng)通過缺失、插入和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是由包含所述修飾的Ntb結(jié)構(gòu)域的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。Ntb結(jié)構(gòu)域片段本文使用的術(shù)語"Ntb結(jié)構(gòu)域片段"是指任何包含、基本由、或由本文定義的Ntb結(jié)構(gòu)域的至少6個、優(yōu)選地至少7、8、9、10個連續(xù)氨基酸序列組成的多肽，條件是由包含所述修飾優(yōu)選地，所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段包含、基本由、或由氨基酸序列CQKINVK(SEQIDNO:59)、更優(yōu)選地CQKINVKQ(SEQIDNO:60)組成。此外，所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段包含、基本由、或由氨基酸序列CQKINVK、更優(yōu)選地CQKINVKQ組成，其中CQKINVK或CQKINVKQ的一個氨基酸已經(jīng)通過缺失、插入和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是由包含所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的CCR5胞外域PNt除了所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的所述第一個和第二個位點(diǎn)所包含的或是所述第一個和第二個位點(diǎn)的兩個巰基、優(yōu)選地所述半胱氨酸殘基的兩個巰基以外，不包含另外的半胱氨酸的巰基，優(yōu)選地不包含另外的巰基。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)不位于Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片段的N末端的上游。這確保了Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片段的N末端能夠被宿主免疫系統(tǒng)自由接近，因?yàn)镃CR5的天然構(gòu)型具有自由移動的N末端。優(yōu)選地，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片賴二的C末端的下游。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)是在所述CCR5胞外域PNt內(nèi)天然存在的半胱氨酸殘基。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)對應(yīng)于SEQIDNO:27的半胱氨酸殘基的巰基。在一個替代實(shí)施方案中，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于所述天然存在的半胱氨酸上游1、2或3個氨基酸位置處、或下游1或2個氨基酸位置處，其中優(yōu)選地，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的所述第一個位點(diǎn)通過插入或?qū)⒃撐恢锰幪烊淮嬖诘陌被釟埢脫Q為半胱氨酸而產(chǎn)生；并且其中優(yōu)選地，PNt結(jié)構(gòu)域內(nèi)所述天然存在的半胱氨酸已經(jīng)缺失或置換，優(yōu)選地被絲氨酸或丙氨酸置換。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:27的氨基酸序列組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:27衍生的氨基酸序列組成，其中SEQIDNO:27的3個、優(yōu)選2個、優(yōu)選1個氨基酸通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是由包含所述SEQIDNO:27衍生的氨基酸序列的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含連接體，其中所述連接體與所述CCR5胞外域PNt的C末端融合，并且其中所述連接體包含或者是所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第二個位點(diǎn)。連接體可以是不同長度的，使得Ntb結(jié)構(gòu)域或Ntb結(jié)構(gòu)域片段的柔性可以調(diào)節(jié)，以便更有效地與不同的VLP偶聯(lián)，或者更好地模擬天然Ntb結(jié)構(gòu)域的天然構(gòu)型。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，連接體選自(a)GGC;(b)GGC-CONH2;(c)GC;(d)GC-CONH2;(e)C;和(f)C-CONH2。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接體是半胱氨酸或酰胺化的半胱氨酸。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:44的氨基酸序列組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個和第二個位點(diǎn)與至少兩個第一附著位點(diǎn)通過至少兩個非肽共價鍵連接。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，只有所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個和第二個位點(diǎn)與至少兩個第一附著位點(diǎn)通過至少兩個非肽共價鍵連接，典型且優(yōu)選地形成Ntb結(jié)構(gòu)域或Ntb結(jié)構(gòu)域片段的"橋樣"結(jié)構(gòu)。不受提出的理論的束縛，據(jù)認(rèn)為這種橋樣結(jié)構(gòu)模擬了天然Ntb結(jié)構(gòu)域的天然構(gòu)型，天然Ntb結(jié)構(gòu)域的N末端與ECL3環(huán)中的另一個半胱氨酸配合成二硫鍵，其C末端錨定到細(xì)胞膜上。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少兩個第一附著位點(diǎn)包含相同的反應(yīng)性官能團(tuán)。優(yōu)選地，所述至少兩個第一附著位點(diǎn)的每一個包含氨基。更優(yōu)選地，所述至少兩個第一附著位點(diǎn)的每一個包含賴氨酸殘基的氨基。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物還包含至少兩個異雙功能分子，其中所述至少兩個異雙功能分子連接所述至少兩個第一附著位點(diǎn)和所述至少兩個第二附著位點(diǎn)，其中優(yōu)選地，所述至少兩個異雙功能分子的每一個是SMPH。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，RNA-噬菌體的病毒樣顆粒是QP、AP205、fr或GA。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，RNA-噬菌體的病毒樣顆粒是QP。至少4個賴氨酸殘基暴露于Qp外殼蛋白的VLP的表面上。這種賴氨酸密度確保了在至少兩個第二附著位點(diǎn)的另一個通過至少一個非肽共價鍵連接一個第一附著位點(diǎn)之后，至少兩個第二附著位點(diǎn)之一快速發(fā)現(xiàn)并且連接第一附著位點(diǎn)。類似地，其他RNA-噬菌體的VLP也適合本發(fā)明。在一方面，本發(fā)明提供一種制備組合物的方法，包括(a)提供具有至少兩個第一附著位點(diǎn)的RNA噬菌體的病毒樣顆粒，其中所述RNA噬菌體的病毒樣顆粒(VLP)包含或者由所述RNA噬菌體的外殼蛋白、其突變體或片段組成；其中優(yōu)選地所述至少兩個第一附著位點(diǎn)的每一個包含或者是氨基，優(yōu)選賴氨酸的氨基；(b)提供具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的至少一種CCR5胞外域PNt;其中所述CCR5胞外域PNt包含、基本由、或者由以下物質(zhì)組成(i)Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片段，和(ii)包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27(SEQIDNO:56)的Ntb結(jié)構(gòu)域或包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27的Ntb結(jié)構(gòu)域片段，其中所述Nta結(jié)構(gòu)域或所述Nta結(jié)構(gòu)域片段的C末端與所述Ntb結(jié)構(gòu)域或所述Ntb結(jié)構(gòu)域片段的N末端融合，優(yōu)選直接融合，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個或第二個位點(diǎn)包含或者是巰基，優(yōu)選半胱氨酸的琉基，并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的N末端的上游；并且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第二個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的C末端的下游，優(yōu)選地位于所述CCR5胞外域PNt的C末端的下游；(c)將所述RNA噬菌體的VLP和所述CCR5胞外域PNt通過至少一個非肽共價鍵連接。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt與RNA噬菌體的VLP的外殼蛋白的分子比為8:1至0.5:1,優(yōu)選為4:1至1:1,更優(yōu)選地為4:1至2:1，更優(yōu)選地為2:1。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，步驟(a)進(jìn)一步包括向所述RNA噬菌體的病毒樣顆粒(VLP)中添加異雙功能連接體，其中優(yōu)選地所述異雙功能連接體是SMPH。優(yōu)選地，SMPH與RNA噬菌體的VLP的外殼蛋白的分子比為40:1至2:1,優(yōu)選地為20:1至4:1,更優(yōu)選地為10:1。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述RNA噬菌體的VLP和所述CCR5胞外域PNt位點(diǎn)的連接在離子強(qiáng)度不大于150mM、優(yōu)選地不大于100mM、優(yōu)選地不大于75、更優(yōu)選地不大于50mM的溶液中進(jìn)行。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，RNA-噬菌體的病毒樣顆粒是QP、AP205、fr或GA,優(yōu)選地是QP。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:27的氨基酸序列組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:27衍生的氨基酸序列組成，其中SEQIDNO:27的3個、優(yōu)選地2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:27衍生的氨基酸序列的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CCR5。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的CCR5胞外域PNt包含、基本由、或優(yōu)選地由SEQIDNO:44的氨基酸序列組成。一方面，本發(fā)明提供一種根據(jù)本發(fā)明的方法可以獲得或者優(yōu)選地已經(jīng)獲得的組合物。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗原是CXCR4胞外域、CXCR4胞外域片段或其任意組合。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4胞外域是CXCR4的N末端胞外域。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4N-末端胞外域通過其C末端與病毒樣顆粒偶聯(lián)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4N-末端胞外域包含、基本由或由SEQIDNO:30或SEQIDNO:30衍生的氨基酸序列組成，其中SEQIDNO:30的3個、優(yōu)選地2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:30衍生的氨基酸序列的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CXCR4。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，包含、基本由或由SEQIDNO:30組成的CXCR4N-末端胞外域通過其C-末端與病毒樣顆粒偶耳關(guān)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4胞外域片^殳是CXCR4胞外域ECL2片段。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CXCR4胞外域ECL2片段包含、基本由、或由SEQIDNO:29或SEQIDNO:29衍生的氨基酸序列組成，其中SEQIDNO:29的2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:29衍生的氨基酸序列的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合人CXCR4。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4胞外域ECL2片段包含、基本由或由線性即非環(huán)化的SEQIDNO:29或SEQIDNO:29衍生的氨基酸序列組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述線性SEQIDNO:29通過其N末端或C末端、優(yōu)選地通過其C末端與病毒樣顆粒偶4關(guān)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，CXCR4胞外域片段包含或由環(huán)化的CXCR4胞外域ECL2片段組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CXCR4胞外域片段包含、基本由、或由環(huán)化SEQIDNO:29或SEQIDNO:29衍生的環(huán)化氨基酸序列組成。本文4吏用的環(huán)化SEQIDNO:29是指包含或由SEQIDN0.29組成的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基通過至少一個化學(xué)鍵、優(yōu)選地通過至少一個共價鍵彼此相互作用。優(yōu)選地，所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基均通過共價鍵彼此相互作用。優(yōu)選地，所述氨基酸序列的第一個氨基酸殘基和最后一個氨基酸殘基通過一個肽鍵彼此相互作用，形成環(huán)肽。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CXCR4胞外域ECL2片段包含或由環(huán)化SEQIDNO:49或SEQIDNO:53組成，其中該肽通過兩端的C和G殘基環(huán)化。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是本發(fā)明的胃泌素。在一個實(shí)施方案中，至少一種抗原是胃泌素G17。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，胃泌素G17包含、基本由、或由SEQIDNO:34組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，胃泌素G17包含、基本由、或由SEQIDNO:36組成。在一個替代的進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，胃泌素G17包含、基本由、或優(yōu)選地由最后一個氨基酸F被酰胺化的SEQIDNO:34組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是本發(fā)明的前胃泌素G34。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，前胃泌素G34包含、基本由、或由SEQIDNO:35組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，前胃泌素G34包含或由SEQIDNO:37組成。在一個—#代的進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，前胃泌素G34包含、基本由、或優(yōu)選地由最后一個氨基酸F被酰胺化的SEQIDNO:35組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原包含、基本由、或由胃泌素G171-9片段(SEQIDNO:33)組成，優(yōu)選地具有與其C末端融合的連接序列，更優(yōu)選地具有與C末端融合的連接序列SSPPPPC(SEQIDNO:39)。一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，與連接體融合的本發(fā)明的胃泌素包含、基本由、或由SEQIDNO:38組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，具有至少一個第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的胃泌素包含、基本由、或由選自SEQIDNO:38;SEQIDNO:39;SEQIDNO:40;SEQIDNO:41;SEQIDNO:42和SEQIDNO:43的氨基酸序列組成。.應(yīng)當(dāng)指出，作為胃泌素序列一部分的序列EGPWLEEEE的第一位置處的E可以是E、pyroE或Q。當(dāng)另外的氨基酸與EGPWLEEEE的N末端融合時，序列EGPWLEEEE的第一位置處的E可以是E或優(yōu)選地Q。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的至少一種抗原是CETP片段。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，CETP片段包含、基本由、或由具有SEQIDNO:32的氨基酸序列的多肽或SEQIDNO:32衍生的多肽組成，在該衍生的多肽中SEQIDNO:32的2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:32衍生的多肽的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合CETP,優(yōu)選人CETP。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是C5a蛋白。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，C5a蛋白包含、基本由、或由具有SEQIDNO:45的氨基酸序列的多肽或SEQIDNO:45衍生的多肽組成，在該衍生的多肽中SEQIDNO:45的5個、4個、優(yōu)選3個、優(yōu)選2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:45衍生的多肽的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合C5a,優(yōu)選人C5a。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種抗原是C5a片段。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，C5a片段包含、基本由、或由具有SEQIDNO:46的氨基酸序列的多肽或SEQIDNO:46衍生的多肽組成，在該衍生的多肽中SEQIDNO:46的2個、優(yōu)選地1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換、優(yōu)選地通過保守置換而修飾，條件是包含所述SEQIDNO:46衍生的多肽的本發(fā)明組合物產(chǎn)生的抗體特異性結(jié)合C5a,優(yōu)選人C5a。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的緩激肽。緩激肽(BK，KRPPGFSPFR,SEQIDNO:50)是一種重要的血管擴(kuò)張肽，在血壓、血流和血管通透性的局部調(diào)節(jié)中起重要作用(^Mwgo/z'w//.&等人.，//;^eWe"^o",7P95入緩激通過B2-受體發(fā)揮其作用。脫-Arg9-BK(KRPPGFSPF，SEQIDNO:51)具有與纟爰激肽重疊的和不同的功能。證據(jù)表明脫-Arg9-BK在組織損傷后快速產(chǎn)生，并且調(diào)節(jié)在炎癥過程中觀察到的大多數(shù)事件，包括血管擴(kuò)張、血管通透性提高、血漿外滲、細(xì)胞遷移、疼痛和痛覺過敏卩Ca/"to,S.爭乂.，2WW。脫-Arg9-BK通過Bl受體發(fā)揮其作用。已經(jīng)報道BK和脫-Arg9-BK在幾種炎性疾病中起作用(^Crww"爭入.，BrJP/mrmaco/,Ow^m5.爭乂.'/mmw"(^/^n^co/ogy7997」。實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明BK和脫-Arg9-BK都在哮喘發(fā)展過程中起作用卩C7zr/W朋""S.C.等人.，爿m.iev./99二.Bfl廠"M爭入.，77zora;c,7992;Fw〃er兄『.等人，爿m.iev.i^w/r版，，7」。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的緩激肽還包含與本發(fā)明的緩激肽的N末端融合的連接體，優(yōu)選地該連接序列是半胱氨酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的緩激肽還包含與本發(fā)明的緩激肽的C末端融合的連接體，優(yōu)選地該連接序列是半胱氨酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的緩激肽包含或者由SEQIDNO:50組成。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物還包含與本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽的N末端融合的連接體，優(yōu)選地該連接序列是半胱氨酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物還包含與本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽的C末端融合的連4妻體，優(yōu)選地該連4妄序列是半胱氨酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽包含或者由SEQIDNO:51組成。在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一種抗原包含或者由本發(fā)明的抗原的至少一個抗原性位點(diǎn)組成。眾所周知，具有免疫原性通常不需要全長蛋白質(zhì)，一個蛋白質(zhì)通常含有一個以上的抗原性表位，即抗原性位點(diǎn)。一個片段或短肽可能足以含有至少一個可^^皮抗體或MHC分子環(huán)境內(nèi)的T細(xì)胞受體免疫特異性結(jié)合的抗原性位點(diǎn)?？乖晕稽c(diǎn)可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的大量技術(shù)來確定。確定蛋白質(zhì)的抗原性位點(diǎn)的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。WO2005/108425在第到段已經(jīng)詳細(xì)說明了這樣一些方法，其具體公開內(nèi)容在此引入作為參考。應(yīng)當(dāng)指出，這些方法通常適用于其他多肽抗原，因此不限于WO2005/108425中公開的IL-23p19。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，具有至少一個第一附著位點(diǎn)的VLP與具有至少一個第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的抗原通過至少一個肽鍵連接。編碼本發(fā)明的抗原的基因、優(yōu)選編碼不長于75個氨基酸、優(yōu)選不長于50個氨基酸、更優(yōu)選不到30個氨基酸的本發(fā)明的抗原的基因，符合讀框地連接到編碼VLP外殼蛋白的基因的內(nèi)部或優(yōu)選N末端或C末端。也可以通過將本發(fā)明的抗原的序列插入部分外殼蛋白序列已經(jīng)缺失的外殼蛋白突變體(其進(jìn)一步稱為截短突變體)中實(shí)現(xiàn)融合。截短突變體可以具有外殼蛋白的部分序列的N末端或C末端或者內(nèi)部缺失。例如，對于特異性VLPHBcAg,氨基酸79-80被替換為外源表位。該融合蛋白優(yōu)選保留了在表達(dá)后裝配為VLP的能力，這可以通過電鏡檢查?？杉尤雮?cè)翼氨基酸殘基來增加外殼蛋白和外源表位之間的距離。甘氨酸和絲氨酸殘基是用于側(cè)翼序列的特別有利的氨基酸。這種側(cè)翼序列提供額外的柔性，可減少外源序列融合進(jìn)入VLP亞單位序列時可能的去穩(wěn)定效應(yīng)，并且可減少外源表位的存在對裝配的干擾。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，修飾的VLP是嵌合VLP,其中優(yōu)選地，所述嵌合VLP包含或由至少一個融合蛋白和至少一個病毒外殼蛋白組成。在另外一些實(shí)施方案中，至少一種本發(fā)明的抗原，優(yōu)選由少于50個氨基酸組成的本發(fā)明的抗原，能夠與大量其它病毒外殼蛋白融合，例如，與Qf3的Al蛋白的截短形式的C末端融合(Kozlovska,T.M.,等人，Intervirology39:9-15(1996))，或者插入CP延伸的位點(diǎn)72和73之間。例如，Kozlovska等人(Intervirology，39:9-15(1996))描述了其中的表位融合到在第19位截短的Q卩CP延伸區(qū)的C-末端的QPAl蛋白融合體。作為另一個例子，本發(fā)明的抗原可以插入frCP的第2和3位氨基酸之間(PushkoP.等人，Prot,Eng.6:883-891(1993))。而且，本發(fā)明的抗原能夠與RNA噬菌體MS-2外殼蛋白的N末端突出(3-發(fā)夾融合(W092/13081)。此外，本發(fā)明的抗原也可以與乳頭瘤病毒的衣殼蛋白融合，優(yōu)選地與1型牛乳頭瘤病毒(BPV-1)的主要衣殼蛋白Ll融合(Chackerian,B.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA96:2373-2378(1999),WO00/23955)。將BPV-1Ll的氨基酸130-136置換為本發(fā)明的抗原也是本發(fā)明的實(shí)施方案。將本發(fā)明的抗原與病毒的外殼蛋白、其突變體或片段融合的實(shí)施方案已經(jīng)在WO2004/009124的第62頁第20行至第68頁第17行公開，在此引入作為參考。在另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，至少一種本發(fā)明的抗原，優(yōu)選由不長于70個氨基酸、優(yōu)選不長于50個氨基酸組成的本發(fā)明的抗原，與RNA噬菌體AP205的外殼蛋白、其突變體或片段的N末端或C末端融合。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述融合蛋白還包括間隔區(qū)，其中所述間隔區(qū)與AP205的外殼蛋白、其突變體或片段和本發(fā)明的抗原融合。優(yōu)選地，所述間隔區(qū)由不到30個、優(yōu)選不到20個、更優(yōu)選不到10個、再更優(yōu)選不到5個氨基酸組成。在本發(fā)明一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，組合物含有或者基本由具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒組成，該病毒樣顆粒與具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種本發(fā)明的抗原通過至少一個共價鍵連接，優(yōu)選地該共價鍵是非肽鍵。優(yōu)選地，第一附著位點(diǎn)不包含或者不是半胱氨酸殘基的巰基。進(jìn)一步優(yōu)選地，第一附著位點(diǎn)不包含或者不是巰基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，第一附著位點(diǎn)包含或優(yōu)選地是氨基，優(yōu)選賴氨酸殘基的氨基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，第二附著位點(diǎn)包含，或者優(yōu)選地是巰基，優(yōu)選半胱氨酸的巰基。在本發(fā)明的一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一個第一附著位點(diǎn)包含或優(yōu)選地是氨基，優(yōu)選賴氨酸殘基的氨基，并且至少一個第二附著位點(diǎn)包含，或者優(yōu)選地是巰基，優(yōu)選半胱氨酸殘基的巰基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，通過化學(xué)交聯(lián)，一^L且優(yōu)選地通過使用異雙功能交聯(lián)劑，將本發(fā)明的抗原與VLP連接。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述異雙功能交聯(lián)劑含有能夠與VLP的優(yōu)選的第一附著位點(diǎn)(優(yōu)選氨基，更優(yōu)選賴氨酸殘基的氨基)反應(yīng)的官能團(tuán)，和能夠與本發(fā)明的抗原固有的或人工添加的優(yōu)選的第二附著位點(diǎn)(即巰基，優(yōu)選半胱氨酸殘基的巰基)反應(yīng)的另一個官能團(tuán)，任選地該另一個官能團(tuán)也可通過還原用于反應(yīng)。有幾種異雙功能交聯(lián)劑在本領(lǐng)域公知。包括優(yōu)選的交聯(lián)劑SMPH(Pierce)、Sulfo-MBS、Sulfo-EMCS、Sulfo-GMBS、Sulfo-SIAB、Sulfo-SMPB、Sulfo-SMCC、SVSB、SIA和其它例如可從PierceChemicalCompany獲得的、具有一個氨基反應(yīng)性官能團(tuán)和一個巰基反應(yīng)性官能團(tuán)的交聯(lián)劑。上述交聯(lián)劑均導(dǎo)致在與氨基反應(yīng)后形成酰胺鍵和與巰基反應(yīng)后形成硫醚《定。適用于實(shí)施本發(fā)明的另一類交聯(lián)劑的特征在于偶聯(lián)時在本發(fā)明的抗原與VLP之間《1入二硫鍵。屬于這一類的優(yōu)選交聯(lián)劑包括，例如SPDP和Sulfo-LC-SPDP(Pierce)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物還包含連接體。根據(jù)本發(fā)明的公開內(nèi)容，通過連接優(yōu)選包含適合作為第二附著位點(diǎn)的至少一個氨基酸的連接體，實(shí)現(xiàn)向本發(fā)明的抗原上構(gòu)建第二附著位點(diǎn)。因此，在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，連接體通過至少一個共價鍵、優(yōu)選通過至少一個、通常一個肽鍵與本發(fā)明的抗原連接。優(yōu)選地，連接體包含或者由第二附著位點(diǎn)組成。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接體包含巰基，優(yōu)選半胱氨酸殘基的巰基。在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，氨基酸連接體是半胱氨酸殘基。連接體的選擇在WO2005/108425Al，第32-33頁公開，在此引入作為參考。根據(jù)上述優(yōu)選方法利用異雙功能交聯(lián)劑連接本發(fā)明的抗原與VLP,使得本發(fā)明的抗原以定向方式與VLP偶聯(lián)。連接本發(fā)明的抗原和VLP的其它方法包括使用碳二亞胺EDC和NHS交聯(lián)本發(fā)明的抗原和VLP的方法。本發(fā)明的抗原也可以首先通過例如與SATA、SATP或亞氨硫醇(iminothiolane)反應(yīng)而硫醇化。必要時，在脫保護(hù)之后，本發(fā)明的抗原可以和VLP如下所述偶聯(lián)。在分離過量的硫醇化試劑之后，本發(fā)明的抗原與預(yù)先用含有半胱氨酸反應(yīng)性部分的異雙功能交聯(lián)劑活化的VLP反應(yīng)，該活化的VLP展示至少一個或幾個對半胱氨酸殘基具有反應(yīng)性的官能團(tuán)，如上所述的硫醇化的本發(fā)明的抗原能夠與該官能團(tuán)反應(yīng)。任選地，在反應(yīng)混合物中含有少量的還原劑。另外一些方法使用同型雙功能交聯(lián)劑，如戊二醛、DSG、BM[PEO]4、BS3(Pierce)或含有對VLP的胺基或羧基有反應(yīng)性的官能團(tuán)的其它已知同型雙功能交聯(lián)劑，將本發(fā)明的抗原與VLP連接。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，組合物包含或者基本由通過化學(xué)相互作用與本發(fā)明的抗原連接的病毒樣顆粒組成，其中這些相互作用的至少一種不是共價鍵。這些相互作用包括但不限于抗原-抗體相互作用、受體-配體相互作用。VLP與本發(fā)明的抗原的連接可以通過將VLP生物素化并且將本發(fā)明的抗原表達(dá)為鏈霉親和素-融合蛋白而實(shí)現(xiàn)。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的VLP由宿主重組產(chǎn)生，并且其中所述VLP基本不含宿主RNA,優(yōu)選宿主核酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物還包含至少一種與VLP結(jié)合、優(yōu)選包裝或包封于VLP內(nèi)部的聚陰離子大分子。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，聚陰離子大分子是聚谷氨酸和/或聚天冬氨酸?；静缓拗鱎NA、優(yōu)選宿主核酸本文所用的術(shù)語"基本不含宿主RNA,優(yōu)選宿主核酸"是指VLP所含的宿主RNA、優(yōu)選宿主核酸的量，該量典型且優(yōu)選地為每mgVLP不到30pg,優(yōu)選不到20昭，更優(yōu)選不到IO昭，甚至更優(yōu)選不到8嗎，甚至更優(yōu)選不到6叱，甚至更優(yōu)選不到4嗎，最優(yōu)選不到2pg。在上述內(nèi)容中使用的宿主是指在其中重組產(chǎn)生VLP的宿主。測定RNA、優(yōu)選核酸的量的常規(guī)方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。根據(jù)本發(fā)明測定RNA、優(yōu)選核酸的量的典型且優(yōu)選的方法在同一申請人于2005年10月5日提交的WO2006/037787A2的實(shí)施例17中描述。對于含有QP以外的VLP的本發(fā)明的組合物，測定RNA、優(yōu)選核酸的量典型且優(yōu)選地使用相同、相似或類似的條件。最終需要的條件的改變是本領(lǐng)域技術(shù)人員的常識。確定的量的數(shù)值應(yīng)當(dāng)?shù)湫颓覂?yōu)選地被理解為包括指定數(shù)值士10%、優(yōu)選±5%偏差的數(shù)值。聚陰離子大分子本文所用的術(shù)語"聚陰離子大分子"是指包含重復(fù)負(fù)電荷基團(tuán)的高相對分子量的分子，其結(jié)構(gòu)基本包括實(shí)際上或概念上來源于低相對分子量的分子的多個重復(fù)單位。聚陰離子大分子的分子量應(yīng)當(dāng)為至少2000道爾頓，更優(yōu)選至少3000道爾頓，甚至更優(yōu)選至少5000道爾頓。本文所用的術(shù)語"聚陰離子大分子"典型且優(yōu)選地指不能活化toll-樣受體的分子。因此術(shù)語"聚陰離子大分子"典型且優(yōu)選地不包括Toll-樣受體配體，甚至更優(yōu)選地不包括免疫刺激物，如Toll-樣受體配體、免疫刺激性核酸和脂多糖(LPS)。更優(yōu)選地，本文所用的術(shù)語"聚陰離子大分子"是指不能誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生的分子。甚至更優(yōu)選地，術(shù)語"聚陰離子大分子"不包括免疫刺激物。本文所用的術(shù)語"免疫刺激物"是指能夠誘導(dǎo)和/或增強(qiáng)特別針對本發(fā)明中包括的抗原的免疫應(yīng)答的分子。宿主RNA、優(yōu)選宿主核酸本文^f吏用的術(shù)語"宿主RNA、優(yōu)選宿主核酸"或術(shù)語"具有二級結(jié)構(gòu)的宿主RNA、優(yōu)選宿主核酸"是指最初由宿主合成的RNA或優(yōu)選核酸。然而，RNA、優(yōu)選核酸在典型且優(yōu)選地通過本發(fā)明的方法減少或去除RNA、優(yōu)選核酸的量的過程中可能經(jīng)受化學(xué)和/或物理學(xué)改變，例如，RNA、優(yōu)選核酸的大小可能4皮縮短，或者其二級結(jié)構(gòu)可能改變。但是，甚至這種得到的RNA或核酸仍然被認(rèn)為是宿主RNA，或宿主核酸。2005年10月5日同一申請人提交的WO2006/037787A2公開了確定VLP包含的RNA的量以及減少VLP包含的RNA的量的方法，因此整個申請，特別是實(shí)施例4、5、17，引入本文作為參考。減少或消除宿主RNA、優(yōu)選宿主核酸的量，最小化或者減少了不希望的T細(xì)胞應(yīng)答，如炎性T細(xì)胞應(yīng)答和細(xì)胞毒性T細(xì)胞應(yīng)答，和其他不希望的副作用，如發(fā)熱，而同時保持特異性針對抗原的強(qiáng)抗體應(yīng)答。在一個方面，本發(fā)明提供一種含有、基本由或由本發(fā)明的組合物組成的疫苗組合物。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，該疫苗組合物中與VLP連接的本發(fā)明的抗原可能來源于動物，優(yōu)選哺乳動物或人。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗原來源于人、牛、狗、貓、小鼠、大鼠、豬或馬。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，該疫苗組合物進(jìn)一步包含至少一種佐劑。所述至少一種佐劑的施用可以在施用本發(fā)明的組合物之前、同時或之后進(jìn)行。本文使用的術(shù)語"佐劑"是指免疫應(yīng)答的非特異性刺激物，或允許在宿主中產(chǎn)生儲庫(depot)的物質(zhì)，當(dāng)分別與本發(fā)明的疫苗和藥物組合物結(jié)合時能夠產(chǎn)生更強(qiáng)的免疫應(yīng)答。在另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，所述疫苗組合物不含佐劑。本發(fā)明的一個有利的特征是組合物的高免疫原性，甚至在不含佐劑時依然如此。而且，不含佐劑使得不希望的炎性T細(xì)胞應(yīng)答的發(fā)生減至最少，炎性T細(xì)胞應(yīng)答是針對自身抗原接種中的一個安全性問題。因此，優(yōu)選地給患者施用本發(fā)明的疫苗而不需在施用該疫苗之前、同時或之后給同一患者施用至少一種佐劑。VLP通常被描述為佐劑。然而，術(shù)語"佐劑"在本申請中使用時是指不是用于本發(fā)明組合物的VLP、而是除所述VLP以外的佐劑。本發(fā)明進(jìn)一步公開了一種免疫方法，包括給動物或人施用本發(fā)明的疫苗。所述動物優(yōu)選的是哺乳動物，如貓、綿羊、豬、馬、牛、狗、大鼠、小鼠，特別是人。疫苗可以用本領(lǐng)域所知的各種方法給動物或人施用，但是通常通過注射、輸注、吸入、口服或其他適當(dāng)?shù)奈锢矸椒▉硎┯??；蛘?，偶?lián)物可以肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、經(jīng)粘膜、經(jīng)皮、鼻內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下施用。用于施用的偶聯(lián)物的成分包括無菌水溶液(例如生理鹽水)或非水溶液和懸液。非水溶劑的例子有丙二醇、聚乙二醇、#_物油如#1欖油、和注射用有;f幾酯如油酸乙酯。可以利用載體或封閉敷料提高皮膚通透性并促進(jìn)抗原吸收。如果接受個體能夠耐受本發(fā)明的疫苗的施用，則認(rèn)為該疫苗是"藥學(xué)可接受的"。進(jìn)而，本發(fā)明的疫苗將以"治療有效量"(即產(chǎn)生希望的生理學(xué)效果的量)施用。免疫應(yīng)答的性質(zhì)或類型不是本申請公開內(nèi)容的限制因素。并非意在通過以下機(jī)制的解釋來限制本發(fā)明，本發(fā)明的疫苗可以誘導(dǎo)可與CCR5、CXCR4、胃泌素、前胃泌素、CETP、C5a、緩激肽或脫-Arg-緩激肽結(jié)合的抗體，從而降低了它的濃度和/或干擾它的生理學(xué)或病理學(xué)功能。在一個方面，本發(fā)明提供一種包含、基本由、或由本發(fā)明所述組合物和可接受的藥物載體組成的藥物組合物。當(dāng)給個體施用本發(fā)明的疫苗時，它可以是含有鹽、緩沖液、佐劑或其他改善偶聯(lián)物效果所需的物質(zhì)的形式。適合在制備藥物組合物中使用的材料的例子在許多資料中提供，包括REMINGTON'SPHARMACEUTICALSCIENCES(Osol,A,ed，MackPublishingCo，(1990))。本發(fā)明教導(dǎo)了一種制備本發(fā)明的組合物的方法，該方法包括以下步驟(a)提供具有至少一個第一附著位點(diǎn)的VLP;(b)提供具有至少一個第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的抗原；和(c)將所述VLP和所述本發(fā)明的抗原組合，產(chǎn)生組合物，其中所述本發(fā)明的抗原和所述VLP通過所述第一附著位點(diǎn)和第二附著位點(diǎn)連接。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種本發(fā)明的抗原是通過表達(dá)，優(yōu)選地通過在細(xì)菌系統(tǒng)中，優(yōu)選地在大腸桿菌中表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。為了有利于純化過程，通常添加標(biāo)簽，如His標(biāo)簽、Myc標(biāo)簽。在另一方法中，特別可以化學(xué)合成具有不長于50個氨基酸的至少一種本發(fā)明的抗原。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供具有至少一個第一附著位點(diǎn)的VLP的步驟包括以下另外的步驟(a)將所述病毒樣顆粒解裝配為所述RNA噬菌體的所述外殼蛋白、其突變體或片段；(b)純化所述外殼蛋白、其突變體或片段；(c)將所述純化的所述RNA噬菌體的外殼蛋白、其突變體或片段重裝配為病毒樣顆粒，其中所述病毒樣顆?；静缓拗鱎NA,優(yōu)選宿主核酸。在一個進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述純化的外殼蛋白的重裝配在至少一種聚陰離子大分子的存在下實(shí)現(xiàn)。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療HIV感的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CCR5。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療HIV感的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CXCR4。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療動脈粥樣或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CETP。動脈粥樣;更化是一種動3永疾病，包括f旦不限于冠心病、冠狀動"永疾病、頸動脈疾病和腦血管病。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療原發(fā)和/明的組合物或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的C5a。其中C5a介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘和大皰性類天皰瘡。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療原發(fā)和/明的組合物或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的緩激肽。其中緩激肽介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于關(guān)節(jié)炎和哮喘。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療原發(fā)和/或慢性炎性疾病的方法，其中所述方法包括給動物或人分別施用本發(fā)明的組合物或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽。其中脫-Arg-緩激肽介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于關(guān)節(jié)炎和哮喘。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療癌癥、特明的組合物或本發(fā)明的疫苗組合物，其中本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的胃泌素。胃腸道癌癥包括但不限于胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌和胰腺癌。在另一方面，本發(fā)明提供用作藥物的本發(fā)明的組合物，其中本發(fā)明的抗原分別是本發(fā)明的CCR5、本發(fā)明的CXCR4、本發(fā)明的胃泌素、本發(fā)明的CETP、本發(fā)明的C5a、本發(fā)明的緩激肽、或本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療人類HIV感染的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的CCR5。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療人類HIV感染的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的CXCR4。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的CETP。動脈粥樣硬化是一種動脈病，包括但不限于冠心病、冠狀動脈疾病、頸動脈疾病和腦血管病。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療原發(fā)和/或慢性炎性疾病的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的C5a。其中C5a介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘和大1-1Ji"T;Wl王夭7^'巴仇、。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療原發(fā)和/或慢性炎性疾病的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的緩激肽。其中緩激肽介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于關(guān)節(jié)炎和哮喘。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療原發(fā)和/或慢性炎性疾病的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的脫-Arg-緩激肽。其中脫-Arg-緩激肽介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的原發(fā)和/或慢性炎性疾病包括但不限于關(guān)節(jié)炎和。孝喘。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供所述組合物在制備預(yù)防和/或治療癌癥、特別是胃腸道癌癥的藥物中的用途，其中所述組合物包含至少一種本發(fā)明的胃泌素。胃腸道癌癥包括但不限于胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌和胰腺癌。實(shí)施例實(shí)施例1CCR5PNt肽或ECL2A與QJ5VLP的偶聯(lián)2g/1Q(3VLP(143pMQ卩外殼蛋白)用1.43mMSMPH(Pierce)在25°C下衍生化30分鐘，然后相對于20mMHepespH8,150mMNaCl透析。0.286mM的C末端半胱氨酸被酰胺化的肽PNt-CC(SEQIDNO:44,來自3mM在DMSO中的貯存液)和1g/l衍生化的Q(3顆粒在25°C下孵育2小時。作為第二種方法，2g/1Q(3VLP用1.43mMSMPH在25°C下衍生化30分鐘，然后相對于20mM磷酸鹽pH7.4透析。0.143mM的C末端半胱氨酸被酰胺化的肽PNt-CC(SEQIDNO:44,來自50mM在DMSO中的貯存液)和1g/l衍生化的QP顆粒在25°C下孵育2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物相對于20mM磷酸鹽pH7.4透析。2g/1Q(3用1.43mMSMPH(Pierce)在25°C下衍生化30分鐘，然后相對于20mMHepespH7.4,150mMNaCl透析。0.286mM的C末端半胱氨酸被酰胺化的肽PNt-SC(SEQIDNO:54,來自5mM在DMSO中的貯存液)和1g/l書于生化的Q(3顆粒在25°C下孵育2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物相對于20mMHepespH7.4,150mMNaCl透析。2g/1Q(3用1.43mMSMPH(Pierce)在25。C下衍生化30分鐘，然后相對于20mMHepespH7.4，150mMNaCl透析。0.143mM的C末端半胱氨酸被酰胺化的肽PNt-CN(SEQIDNO:55,來自5mM在DMSO中的貯存液)和1g/l衍生化的Qf3顆粒在25°C下孵育2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物相對于20mMHepespH7.4,150mMNaCl透析。2g/1Q(3用1.43mMSMPH在25°C下衍生化30分鐘，然后相對于20mM磷酸鹽pH7.5透析。將1g/1衍生化的Q(3顆粒溶解在20%乙腈中，加入0.286mM環(huán)ECL2A(SEQIDNO:26,來自5mM在DMSO中的貯存液)，并在20mM磷酸鹽pH7.5，150mMNaCl中在25。C下孵育2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物相對于20mM磷酸鹽pH7.5透析。實(shí)施例2免疫C57BL/6小鼠在第0天用50嗎Q(3-PNtCC、Q卩-PNtCN、Q(3-PNtSC或Q(3-ECL2A(從實(shí)施例1獲得)免疫(皮下，在0.2ml20mM磷酸鹽pH7.5中)，并且與僅用50pgQi3免疫的Balb/C小鼠進(jìn)行比較。在于第14天用相同疫苗加強(qiáng)免疫后，在第14天和第21天通過ELISA檢測抗-QB和抗-CCR5肽抗體滴度(表1)。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>此外，新西蘭白兔在第0天用100(igQ(3-PNtCC(從實(shí)施例1第二種方法獲得)和相等份數(shù)(v/v)的弗氏完全佐劑免疫(真皮內(nèi)，在兔背上10個點(diǎn)處)。隨后三次加強(qiáng)免疫(100pgQ|3-PNtCC,在第14、28、56天)用相等份數(shù)(v/v)的不完全弗氏佐劑進(jìn)行。在第37天和第56天通過ELISA檢測抗-QB和抗-CCR5肽抗體滴度，發(fā)現(xiàn)總是高于12000。實(shí)施例3多克隆小鼠或兔IgG的純化來自分別用Q卩-PNtCC、Q卩-PNtCN、Q卩-PNtSC或Q(3-ECL2A免疫的5只小鼠(或兩只兔)的合并的血清(從實(shí)施例4獲得)以14000rpm離心5分鐘。將上清液加到3.3ml預(yù)洗的蛋白Gsepharose柱(Amersham)上。然后用PBS洗柱，用100mM甘氨酸pH2.8洗脫。將1ml級分收集到預(yù)先裝有112pi1MTrispH8的試管中。合并在280nm處具有光吸收的峰級分。實(shí)施例4多克隆兔IgG的親和純化按照生產(chǎn)商的說明(GEHealthcareEurope)將1mgQ卩或QP_PNtCC固定在N-羥基琥珀酰亞胺活化的Sepharose柱上。以0.5ml/min的流速將5mg兔IgG(來自實(shí)施例3)在PBS中加于Q卩親和柱上。收集流過級分進(jìn)一步進(jìn)行PNtCC特異性純化。使用100mM甘氨酸pH2.6從Q卩柱上洗脫Q卩特異性IgG，并用120mMTrispH8中和。流過級分中的PNtCC特異性IgG在Qp-PNtCC柱上進(jìn)一步純化。洗脫并中和的IgG用離心過濾裝置(AmiconUltra-4，10000MWCO)用PBS洗4次。實(shí)施例5使用小鼠多克隆IgG對細(xì)胞CCR5的FACS染色CEM.NKR-CCR5是CEM.NKR細(xì)胞系的表達(dá)CCR5的變體，CEM.NKR細(xì)胞系是天然表達(dá)CD4的細(xì)胞系(Trkola等人.，J.Virol.,1999,8966)。CEM.NKR-CCR5細(xì)胞在RPMI1640培養(yǎng)基(含10%FCS、谷氨酰胺和抗生素)中生長。將細(xì)胞沉淀，并重懸浮在含有1。/o胎牛血清(FCS)的磷酸鹽緩沖液(PBS)中，以得到2.3xl()6細(xì)胞/ml。加入人IgG(MiltenyiBiotec)的[l:250]稀釋液作為封閉劑,并孵育20分鐘。細(xì)胞在1%FCS/PBS中洗滌一次，平板接種0.1ml(2.3x105細(xì)胞/孔)，并與實(shí)施例3純化的CCR5多克隆抗體(60mg/l;從蛋白G柱上洗脫；用1%FCS/PBS稀釋)孵育。在4。C下30分鐘后，細(xì)胞用1%FCS/PBS洗滌一次，在4°C下用15mg/1在1%FCS/PBS中的FITC-山羊-抗-小鼠-IgG(Jackson)染色20分鐘。在1%FCS/PBS中洗滌兩次后，通過流式細(xì)胞術(shù)分析5000-10000個染色的細(xì)胞。用"cellquest"流式細(xì)胞分析軟件確定每次染色的幾何平均值。表2顯示了PNtCC或ECL2A特異性抗體特異性結(jié)合在CEM.NKR細(xì)胞表面上表達(dá)的CCR5分子，而PNtSC和PNtCN特異性抗體以及QP特異性抗體不結(jié)合在細(xì)胞表面上表達(dá)的CCR5分子。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>實(shí)施例6HIV-中和試驗(yàn)簡要地說，用RosetteSep混合物(StemCellTechnologiesInc)將從3個健康供血者獲得的血沉棕黃層排除CD8+T細(xì)胞，并通過Ficoll-Hypaque離心(Amersham-PharmaciaBiotech)分離。用i咅養(yǎng)基(RPMI1640,10%FCS,100U/ml1L-2,谷氨酰胺和抗生素)將細(xì)胞調(diào)節(jié)為4xl06/ml，分為三份，并用5嗎/ml植物凝集素(PHA)、0.5嗎/mlPHA或lmg/l抗-CD3MAbOKT3刺激。72小時后，將來自所有三個刺激的細(xì)胞混合，并作為刺激的CD4+T細(xì)胞的來源用于感染和病毒中和實(shí)-瞼。HIV中和試驗(yàn)基本如前所述進(jìn)行(Trkola等人.，J.Virol.,1999,8966)。R5病毒(CCR5共同受體特異株)、JR-FL和SF162在以前已經(jīng)描述(O'Brien等人.，Nature1990,348,69;和Shioda等人.，Nature1991，349,167)。簡言之，細(xì)胞與系列稀釋的純化的多克隆兔IgG(25ng/ml-25ng/ml;從實(shí)施例5或?qū)嵤├?獲得)或陽性對照HIV抑制劑Rantes在96-孔培養(yǎng)板中37。C孵育1小時?！鯥IIIIIIIIIIIIIKSH4,000TCID5。/ml(100TCID5。50%組織培養(yǎng)感染劑量；Trkola等人，J.Virol.，1999，8966)。加入病毒接種物(100TCID50:50%組織培養(yǎng)感染劑量)，將培養(yǎng)板培養(yǎng)7天?？偢腥倔w積為200pL。然后，如以前所述(Moore等人，1990.Science250，1139)，利用免疫測定法測定上清液基質(zhì)中HIV-1p24抗原的產(chǎn)生。表3顯示純化的抗體在低抗體濃度(例如0.56ng/ml)時有效地中和HIV可達(dá)70。/。。表3:<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>使用CEM5.25細(xì)胞的HIV中和試驗(yàn)使用(Montefiori,D.C.(2004))所述的JR-FL包膜假型螢光素酶報道病毒在CEM5.25.EGFP.luc.M7細(xì)胞(NathanielLandau)上評價純化的小鼠血清免疫球蛋白樣品對病毒分離抹JR-FL的中和活性。在螢光素酶報道基因試驗(yàn)中針對HIV、SIV和SHIV評價中和抗體(CurrentProtocolsinImmunology,JohnWiley&Sons,12.11.1-12.11.15禾口Wei,X.,等人，Nature422:307-12)。CEM5.25.EGFP.luc.M7細(xì)胞與連續(xù)稀釋的小鼠抗體(從實(shí)施例3獲得)在37。C下孵育1小時。然后加入病毒接種物(150TCID5Q)和polybrene(終濃度為10pg/ml)?？偢腥倔w積為200|il。通過回歸分析確定72小時后螢光素酶才艮道基因產(chǎn)量降低50%的Ig濃度(NTso)。表4顯示PNtCC特異性總IgG在低濃度時抑制HIV感染，而PNtCN特異性IgG在測定的任何濃度下都不抑制HIV感染。表4:抑制HIV的抗體濃度_50%抑制_PNt-CN>25|ig/mlPNt-CC1.45pg/ml陽性對照(CCRS單克隆抗體)O.njug/ml實(shí)施例7Q(3-PNtCC的凝膠內(nèi)消化和LC/MS分析將Q(3-PNtCC、Q卩-PNtSC和書t生化Q(3的樣品(從實(shí)施例1獲得)加樣到還原SDS-PAGE凝膠上。將對應(yīng)于每種肽的Q(3單體和每種肽的Q(3二聚體(或者在衍生化的Q卩的情況下，QP單體和Q(3二聚體)的凝膠帶切成小片，用100(il100mMNH4HC03,50%乙腈洗兩次，并且用50乙腈洗一次。棄去所有三種上清液。然后，加入10ial蛋白酶Glu-C(0.01ng/|il,在10mMTris,pH8.2中)和10iil緩沖液(10mMTris，pH8.2),在37°C下孵育過夜。貯存上清液，并將凝膠片用100pl0.1%三氟乙酸，50%乙腈抽提兩次。混合并干燥所有三種上清液。將樣品溶解在15|il0.1%甲酸中。將6)Lil注入HPLC柱上，通過LC/MS確定肽的質(zhì)量。實(shí)施例8CXCR4片段(aal-39)和(aal76-185)的化學(xué)合成以及與Q(3VLP的偶聯(lián)按照標(biāo)準(zhǔn)方法(PeterHenklein,Charit6)化學(xué)合成具有與CXCR4片段1-39的N末端或C末端融合的CGG或GGC連接序列的CXCR4片段1-39(SEQIDNO:30)，具有在CXCR4片段176-185(SEQIDNO:29)的N末端或C末端融合的CGG或GGC連接體的CXCR4片段176-185(SEQIDNO:29),其通過連接在N末端添加的C和在C末端添加的G而環(huán)^f匕。3ml(1.0mg/ml)Q卩VLP在20mMHepes,pH7.2中的溶液與85|ulSMPH(50mM,在DMSO中，Pierce)在25°C下反應(yīng)30分鐘。然后用透析的衍生化的QPVLP偶聯(lián)肽CXCR4-CGG-l-39、CXCR4-1-39-GGC、CXCR4-CGG-176-185、CXCR4-176-185-GGC或CXCR4-C-176-185-G。簡要地說，濃度為1mg/ml的1ml衍生化的Q卩VLP與70jil5mM肽溶液在25。C下在20mMHepes,pH7.2中反應(yīng)2小時。估計偶聯(lián)效率為每個Q(3單體0.24-0.5個CXCR4片段。實(shí)施例9用CXCR4片段免疫小鼠成年雌性C57BL/6小鼠(每組3只)接種QP-CXCR4-片段(在實(shí)施例8中獲得)，使用Q卩VLP作為對照。來自每個樣品的100嗎透析后的疫苗用PBS稀釋至體積為200jul，在第0天和第14天皮下注射(lOO(il,在兩腹側(cè))。施用疫苗時不使用或使用佐劑(Allhydrogel,1mg/注射)。小鼠在第14、21、28天眼眶后采血，并通過ELISA測定肽特異性抗體應(yīng)答，方法如下以10pg/ml的濃度在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中包被與RNase偶聯(lián)的CXCR4-肽，4。C過夜。簡要地說，CXCR4與RNase如下偶聯(lián)5mg/mlRNase在0.2mMSPDP(SIGMA)中室溫衍生化1小時。然后用PD10柱(Amersham)純化衍生化的RNase溶液。向書f生化的RNase溶液中加入10mMEDTA和lmM肽，反應(yīng)液孵育l小時。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table>顯示了每組三只小鼠血清中的平均肽特異性ELISA滴度。實(shí)施例10通過人T-細(xì)胞系Jurkat和CEM.NKR-CCR5的表面染色檢測CXCR4-特異性抗體Jurkat細(xì)胞或CEM.NKR-CCR5細(xì)胞在添加了10%FCS、谷氨酰胺和抗生素的RPMI1640培養(yǎng)基中生長。收獲細(xì)胞，洗滌，并重懸浮在含有r/。胎牛血清(FCS)的磷酸鹽緩沖液(PBS)中。為了阻止Fc-受體介導(dǎo)的結(jié)合，細(xì)胞首先與大鼠-抗-小鼠-CD16/CD32(BDPharmingen)在PBS/1%FCS中4°C孵育30分鐘。洗滌后，細(xì)胞(lxl()S)與連續(xù)稀釋的小鼠血清(從實(shí)施例10獲得)在4。C下孵育30分鐘。細(xì)胞用PBS/1%FCS洗滌，與FITC-抗-小鼠-IgG(BDPharmingen)在4°C下孵育30分鐘，然后用FACSCalibur分析細(xì)胞，并使用CellQuest軟件(BDBiosciences)定量抗體的特異性結(jié)合。結(jié)果總結(jié)在下表中。表6:<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>*使用1:200稀釋的第一次免疫后第21天的血清進(jìn)行細(xì)胞的染色。實(shí)施例11R4HIV-l抹中和試驗(yàn)簡要地說，首先用RosetteSep混合物(StemCellTechnologiesInc.，BIOCOBAAG)將從3個健康供血者獲得的血沉棕黃層排除CD8+T纟田月包，并通過Ficoll-Hypaque離心(Amersham-PharmaciaBiotech)j]史集外周血單核細(xì)胞。然后用培養(yǎng)基(RPMI1640,10%FCS,100U/mlIL-2,谷氨酰胺和抗生素)將純化的細(xì)胞調(diào)節(jié)為4xl06/ml，分為三份樣品，并用5lig/ml植物凝集素(PHA)、0.5嗎/mlPHA或lmg/1抗-CD3MAbOKT3刺激。72小時后，將細(xì)胞混合，并作為刺激的CD4+T細(xì)胞用于感染和病毒中和實(shí)驗(yàn)。為了檢測中和潛力，細(xì)胞首先與連續(xù)稀釋的純化的多克隆小鼠IgG(如上所述)或?qū)φ湛贵w12G5(25pg/ml-25ng/ml;Pharmingen)在96-孔培養(yǎng)板中37。C孵育1小時。X4林NL4-3和2044如前所述(Trkola等人(1998),J.Virol.72:396;Trkoly等人(1998),J.Virol72-1876)。然后加入病毒接種物(100TCID5。；50%組織培養(yǎng)感染劑量;Trkola等人.，J.Virol"1999,8966)，細(xì)胞再培養(yǎng)4-14天?？偢腥倔w積為200^1。在感染后的第6天，如前所述(Moore等人.，1990.Science250,1139)通過免疫測定法測定上清液的HIV-1p24抗原產(chǎn)量。實(shí)施例12CETP片段與Q(3VLP的偶聯(lián)具有人CETP的氨基酸461-476(SEQIDNO:32)羧基端序列并且在其N末端融合有用于偶聯(lián)VLP的三肽CGG的CETP肽CETPl通過固相化學(xué)法在EMCmicrocollectionsGmbH化學(xué)合成。肽在其C-末端酰胺化。750pi(4.0mg/ml)Q|3VLP在20mMHepes,150mMNaClpH7.4中的溶液與10倍過量的SMPH(21.4pi100mM在DMSO中的貯存液,Pierce)在25°C下反應(yīng)30分鐘。1.5ml濃度為2mg/ml的衍生化的Q卩VLP與21jil50mMCETP肽溶液在20mMHepes，150mMNaCl，pH7.4中15。C反應(yīng)2小時。實(shí)施例13用Q卩-CETP1免疫小鼠和ELISA給雌性Balb/c小鼠(『3)接種與QpVLP偶聯(lián)的CETPl。50|ig透析后的疫苗用PBS稀釋至體積為在第0、14、50、73天皮下注射(lOO)il,在兩腹側(cè))。施用疫苗時不使用佐劑。測定在第0、70、80天眼眶后采血的小鼠血清中的抗體滴度。CETPl與AP205VLP偶聯(lián)(20mMHepes,150mMNaClpH7.4)，用于包被ELISA板。簡要地說，1ml1mg/mlAP205VLP用7.1pi50mMSMPH(Pierce)貯存液(在DMSO中)室溫衍生化30分鐘。衍生化的AP205溶液(lml)與7.1|il50mMCETPl貯存液(在DMSO中)反應(yīng)，并且在15°C下孵育2小時。CETPl也與BSA偶聯(lián)以包被ELISA板。ELISA板用濃度為5pg/ml的與AP205VLP或BSA偶聯(lián)的CETP肽在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中4°C包一皮過夜。表7.在第0、14、50、73天用Q(3-CETP1免疫的小鼠的平均抗-CETP1特異性IgG抗體滴度(表示為在ELISA測定中產(chǎn)生半數(shù)最大結(jié)合的血清稀釋度的倒數(shù))表7<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>實(shí)施例14與AP205VLP的C末端融合的CETP1的克隆、表達(dá)和純化克隆通過退火編碼CETP1肽序列并且分別含有《/7"2/和M/7/J/03/限制位點(diǎn)的兩條互補(bǔ)寡核苷酸產(chǎn)生編碼CETP1肽(SEQIDNO:32)的DNA片段。獲得的片段用K;^2/和iWpW/03/消化，并且克隆到載體pAP405-61(如WO2006/032674實(shí)施例l所述)中的相同的限制位點(diǎn)內(nèi)，位于大腸桿菌色氨酸操縱子啟動子的控制下。所得到的質(zhì)粒編碼的蛋白質(zhì)AP205-11-CETP1為AP205外殼蛋白一GTAGGGSG—FGFPEHLLVDFLQSLS。AP205-11-CETP1基本如WO04/007538所述表達(dá)并純化。實(shí)施例15在膽固醇飼養(yǎng)的兔動脈粥樣硬化模型中檢測CETP疫苗新西蘭白兔(每組11=12)在第0天皮下接種200pgVLP-CETP疫苗或VLP，并且在第3、6、9、12、15、19、23、27周加強(qiáng)免疫。在第16周將兔置于高膽固醇飲食(0.25%)下，保持該飲食16周。以固定間隔從禁食兔中采集血漿樣品，測定抗體滴度、脂蛋白、膽固醇和CETP活性。在第32周殺死動物，取出主動脈進(jìn)行動脈粥樣硬化損害分析。在主動脈"enface"制備后，將主動脈用油紅O染色，并計算每只動物中被病變覆蓋的主動脈的百分比。實(shí)施例16緩激肽和脫-Arg9-緩激肽與QPVLP的偶聯(lián)和小鼠的免疫按照標(biāo)準(zhǔn)程序化學(xué)合成兩條序列的N末端均融合有Cys的緩激肽(BK)(SEQIDNO:22)和脫-Arg9-緩激肽(SEQIDNO:23)或在C末端融合有Cys的緩激肽(BK)。這些肽與QPVLP偶聯(lián)。成年雌性C57BL/6小鼠(每組10只)在第0、14、28天皮下接種50iLig與Q(3偶聯(lián)的Q卩-BK或Q(3-脫-Arg9-BK(100(il，在兩腹側(cè))。施用疫苗時不使用佐劑。小鼠在第0、14、21、30天眼眶后采血，并首先，BK或脫-Arg9-BK與RNase(SIGMA)偶聯(lián)。用濃度為1(Vg/ml的與RNase偶聯(lián)的緩激肽在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中包被ELISA板,4。C過夜。表8.在第0、14天分別用Q卩BK或Q(3-脫-Arg9-BK免疫的小鼠的平均抗-BK和抗-脫-Arg9-BK特異性IgG抗體滴度(表示為稀釋倍數(shù))<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>實(shí)施例17針對Q(3-BK、QP-脫-Arg9-BK接種對于治療膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的效力每組IO只雄性DBA/1小鼠用50嗎Q(3-BK、Q(3-脫-Arg9-BK或單獨(dú)的Q(3真皮內(nèi)免疫三次(第0、14、28天)。然后給小鼠真皮內(nèi)62注射兩次(第34、55天)與完全弗氏佐劑混合的200pgII型牛膠原。在第二次膠原/CFA注射后，定期檢查小鼠，按照觀察到的變紅和腫脹的程度將范圍為0-3的臨床得分分配給每肢。第二次膠原/CFA注射三周后，在三個實(shí)驗(yàn)組中確定每肢的平均臨床得分。實(shí)施例18針對Qp-BK和Q(3-脫-Arg9-BK接種對于治療變應(yīng)性氣管炎癥(AAI)的效力利用變應(yīng)性氣管炎癥的實(shí)驗(yàn)哮喘模型評價針對緩激肽(BK)和脫-Arg9-緩激肽(脫-Arg9-BK)接種對具有以下特征的Th2-介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的效果嗜酸性粒細(xì)胞向肺內(nèi)流入，細(xì)胞因子(IL-4，IL-5,IL-13)產(chǎn)生，IgE抗體和粘膜產(chǎn)生，支氣管高反應(yīng)性(BHR)。Balb/c小鼠(每組5只)如實(shí)施例16所述用Q(3-BK或QP-脫-Arg9-BK免疫，或者注射單獨(dú)的Qf3。第一次免疫35天后，在存在或不存在佐劑(Alhydrogel)的情況下給小鼠腹膜內(nèi)注射5(Vg卵白蛋白(OVA)。10天后(即第45天)，每日用PBS中的50|LigOVA鼻內(nèi)攻擊所有小鼠，連續(xù)4天。最后一次攻擊24小時后，用全身體積描記器檢測BHR。然后在特定時間點(diǎn)處死小鼠，分析肺部炎癥和Th2介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。用PBS/1%BSA進(jìn)行肺灌洗。支氣管-肺泡灌洗液(BAL)中所含的細(xì)胞用Coulter計數(shù)器(InstrumentenGesellschaftAG)計數(shù)，并且如前所述利用Maigriinwald-Giemsa染色進(jìn)行區(qū)分(TrifilieffA,等人.ClinExpAllergy.2001Jun;31(6):934-42)。實(shí)施例19胃泌素或胃泌素片段與Q(3VLP的偶聯(lián)下列胃泌素肽按照標(biāo)準(zhǔn)程序合成。G17(1-9)C2:pEGPWLEEEESSPPPPC(SEQIDNO:39)clG17:pEGPWLEEEEEAYGWMDFGGC(SEQIDNO:40)nGl7amide:CGGQGPWLEEEEEAYGWMDFCONH2(SEQIDNO:41)nG17-G:CGGQGPWLEEEEEAYGWMDFG(SEQIDNO:40)nG34amide:(SEQIDNO:38)nG34-G:NO:43)(SEQID隨后利用透析的、衍生化的QPVLP偶聯(lián)clG17。簡要地說，1ml衍生化的QPVLP(濃度為2mg/ml)與167^110mM肽DMSO溶液和100pl乙腈在15。C下反應(yīng)2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物被命名為QP-clG17。通過密度分析考馬斯藍(lán)染色的SDS-PAGE,估計偶聯(lián)效率[即molQ卩-胃泌素/molQ卩單體(總)]為每個Q(3單體2.4個clG17片段。隨后利用透析的、衍生化的Q卩VLP偶聯(lián)nG17amide、nG17-G、nG34amide或nG34-G。簡要地說，84(il衍生化的Q|3VLP(濃度為2mg/ml)與12pl10mM肽溶液和4jilH20在15°C下反應(yīng)2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物分別被命名為QP-nG17amide、Qf3-nG17-G、Q卩-nG34amide和Q(3-nG34-G。實(shí)施例20G17(1-9)C2(SEQIDNO:39)與白喉類毒素(DT)和Q卩的偶聯(lián)用于偶聯(lián)G17(1-9)C2和DT的方案類似于美國專利5,866,128的實(shí)施例1。簡要地說，通過將1mgDT溶解于100pl0.2M磷酸鈉緩沖液，pH6.6中活化DT(ListBiologicalLaboratories)。分別地，將2mgSMPH溶解在80jilDMSO中。將12piSMPH加入100|ulDT中。室溫孵育2小時后，混合物相對于2L0.1M檸檬酸鈉緩沖液，pH6.0透析兩次各2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物被命名為DT-G17(1-9)C2。隨后利用透析的、衍生化的Q(3VLP偶聯(lián)G17(1-9)C2。簡要地說，84pl衍生化的Q{3VLP與6|il10mM肽DMSO溶液和6|alH20在18。C下反應(yīng)2小時。偶聯(lián)產(chǎn)物被命名為Q(3-G17(1-9)C2。實(shí)施例21用Q(3-clG17、Q卩-nG17amide、Q(3-nG17畫G、Q(3-nG34amide、QP-nG34-G、Q卩-G17(1-9)C2和DT-G17(1-9)C2免疫小鼠給成年雌性C57BL/6小鼠接種Q(3-clG17(每組5只小鼠)、Q卩-nG17amide、Q(3-nG17-G、Q卩-nG34amide和Q卩-nG34-G(每組3只小鼠)。50pgQP-clG17或25|ugQ卩-nG17amide、Q(3-nG17-G、Q(3-nG34amide和QP-nG34-G(在實(shí)施例24中獲得)用PBS稀釋至體積為200并在第0、14天皮下注射(100pl，在兩腹側(cè))。施用疫苗時不使用佐劑。作為對照，一組小鼠注射50pgQP。用Q(3-C1G17免疫的小鼠在第0、14、21、28、42、69和101天眼眶后采血，用Q|3-nG17amide、Q卩-nG17-G、Q卩-nG34amide和Q卩-nG34-G免疫的小鼠在第0、14、21、28、42、56和77天眼眶后采血。成年雌性C57BL/6小鼠用Q(3-G17(1-9)C2(每只小鼠使用lmg明礬或不使用明礬)和DT-G17(1-9)C2(每只小鼠使用lmg明諷)免疫(每組5只小鼠)。50pgQP-G17(1-9)C2和DT-G17(1-9)C2用PBS稀釋至體積為200并在第0、14天皮下注射(100p1,在兩腹側(cè))。小鼠在第0、14天眼眶后采血。通過用在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中濃度為10|ug/ml的RNase-偶聯(lián)的clG17或nG17amide、nG17-G、nG34smide、nG34-G在4°C下包被過夜,利用ELISA檢測針對這些胃泌素片段的特異性抗體的滴度。表9.在第0、14天分別用Q卩-clG17、Q(3-nG17amide、Q卩-nG17-G、Q卩-nG34amide和Q卩-nG34-G免疫的小鼠中的平均抗畫clG17-、nG17amide、nG17-G、nG34amide或nG34-G-特異性IgG抗體滴度(表示為稀釋倍數(shù))。清楚地表明胃泌素-VLP偶聯(lián)物能夠誘導(dǎo)針對胃泌素片段的高抗體滴度。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage66</column></row><table>表IO顯示平均G17(l-9)C2-特異性抗體滴度。ELISA滴度表示為在ELISA測定中導(dǎo)致半數(shù)最大OD的血清稀釋度。在使用或不使用明礬的情況下用Q(3-G17(1-9)C2免疫的小鼠或用DT-G17(1-9)C2免疫的小鼠中，到第14天分別達(dá)到大約1:4242、1:5838和1:788的平均滴度。半數(shù)最大OD滴度低于100，這被認(rèn)為低于該測定的截止值。這清楚地證明了Q(3-G17(1-9)C2比DT-G17(1-9)C2能夠誘導(dǎo)更早和更高的抗體應(yīng)答。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage66</column></row><table>實(shí)施例22檢查針對clG17產(chǎn)生的血清與CCK8的交叉反應(yīng)性ELISA板用在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中濃度為0.2mg/ml的clG17或CCK8(SIGMA)4。C包^皮過夜。來自clG17包被板的ELISA滴度為1250,未觀察到明顯的與CCK的反應(yīng)性(圖1A)。也在抑制ELISA中檢查了交叉反應(yīng)性。ELISA板用在包被緩沖液(O.lMNaHC03,pH9.6)中濃度為0.2mg/ml的clG17或CCK8(SIGMA)4°C包被過夜。在加熱器上在600rpm振蕩下，將針對Q卩-clG17(從實(shí)施例21獲得)產(chǎn)生的小鼠血清(免疫后14天)與連續(xù)稀釋的nG17amide或CCK8在37。C下孵育2小時。然后將這些血清加入到ELISA板中，室溫孵育2小時。nG17amide預(yù)孵育抑制了血清對包被的nG17amide的識別，未觀察到CCK的抑制活性。這兩個實(shí)驗(yàn)顯示抗QI3-clG17抗體不與CCK8交叉反應(yīng)(圖1B)。實(shí)施例23C5a和C5a片段與Q卩的偶聯(lián)含有N末端CGSGG連接體的鼠C5a氨基酸序列(SEQIDNO:47,下文稱為mC5acys)由DictageneSA化學(xué)合成?；瘜W(xué)合成鼠C5a序列的C末端19個氨基酸(EMCMicrocollections),其在N末端具有額外的CGG連接體(SEQIDNO:48,下文稱為mC5acys59-77)。143)aMQ|3VLP在20mMHEPES，150mMNaCl,pH7.2中的溶液與2倍摩爾過量(286iuM)的(SMPH,Pierce)在25°C振蕩下反應(yīng)30分鐘。透析后，向36iliMSMPH-衍生化的QPVLP溶液中加入等摩爾量的mC5acys。反應(yīng)體積為100pl，反應(yīng)液在15。C振蕩下孵育2小時。200|uMQ{3VLP在20mMHEPES,150mMNaCl，pH7.2中的溶液與5倍摩爾過量(1mM)的SMPH(Pierce)在25。C振蕩下反應(yīng)30分鐘。透析后，向107SMPH-衍生化的Q卩VLP溶液中加入5倍摩爾過量的mC5acys59-77。反應(yīng)液在15。C振蕩下孵育2小時。實(shí)施例24用QP-mC5acys疫苗免疫小鼠和mC5acys-特異性抗體的檢測小鼠在第0、14天并且在需要時用50pg實(shí)施例23制備的Q(3-mC5acys疫苗皮下免疫。小鼠在第14、21天并且在隨后的時間點(diǎn)眼眶后或經(jīng)由尾靜脈采血。從這些采血中收集血清，通過C5a-特異性ELISA進(jìn)行分析。小鼠接受50jugQ(3-VLP或只接受PBS作為陰性對照。通過在0.1M碳酸鹽緩沖液(pH9.6)中用1嗎/mlmC5acys包被過夜，通過ELISA檢測抗-mC5acysIgG抗體滴度。表11顯示該試驗(yàn)的代表性結(jié)果，其中使用來自24天前用Q卩-mC5acys、單獨(dú)的Q卩VLP免疫的或未處理的小鼠的血清。接受Q卩-mC5acys疫苗的小鼠一致性地顯示針對平板包被的mC5acys的IgG抗體應(yīng)答。表11<table>tableseeoriginaldocumentpage68</column></row><table>鼠基本如上所述用50fxgQP-mC5acys"—"皮下免疫。實(shí)施例25QP-mC5acys疫苗免疫中和了系統(tǒng)性mC5acys的體內(nèi)效應(yīng)在靜脈注射少量mC5acys后通過測定血液粒細(xì)胞數(shù)的表觀降低，在嗜中性白血球減少試驗(yàn)中檢測mC5acys的體內(nèi)生物活性。將雌性C57BL/6小鼠(6-8周齡)麻醉并通過側(cè)尾靜脈注射100jil溶液。小鼠接受PBS、PBS中的mC5acys或PBS中的Q(3衣殼。3分鐘后，小鼠通過眼眶后途徑采血，將100iul全血轉(zhuǎn)移到含有抗凝劑肝素(Roche)的2mlPBS中。在室溫下于450xg離心IO分鐘將細(xì)胞沉淀。吸出上清液后，細(xì)胞沉淀物重懸浮于2mlTris氯化銨(TAC)溶液(17mMTris，126mMNH4Cl，pH7.2)中，在室溫下5分鐘，以裂解紅細(xì)胞。其余的細(xì)胞通過離心沉淀，重復(fù)TAC處理。其余的細(xì)胞再次通過離心沉淀，并重懸浮于50pl流式細(xì)月包洗滌纟爰沖液(DulbeccoPBS，含有2%(v/v)胎牛血清和0.1%NaN3)中。細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀(FACSCalibur,BectonDickenson),通過前向和側(cè)向散射畫門(gate)檢測粒細(xì)胞的級分。表6給出了mCa5cys誘導(dǎo)嗜中性白細(xì)胞減少的一個代表性實(shí)驗(yàn)。在這種情況中，與PBS處理的小鼠和接受1pgQ卩衣殼蛋白的小鼠相比，1nmolmC5acys誘導(dǎo)統(tǒng)計學(xué)上顯著性的嗜中性白細(xì)胞減少，顯示合成的mC5acy具有生物活性。C57BL/6小鼠用在Dulbecco，sPBS中稀釋的50嗎Q!3-mC5acys在脅腹皮下免疫。對照小鼠接受單獨(dú)的QB或者不予處理。免疫在實(shí)驗(yàn)的第0、14天進(jìn)行。第一次免疫后第22天，經(jīng)側(cè)尾靜脈靜脈內(nèi)注射50pmolmC5acys，以誘導(dǎo)系統(tǒng)性中性白細(xì)胞減少。在用單獨(dú)的Q/3VLP免疫的小鼠中或未處理的小鼠中，在注射50pmolmC5acys后3分鐘血液中的粒細(xì)胞百分比下降。在接種Qfi-mC5acys的小鼠中，這種血液粒細(xì)胞百分比的下降得到阻止。因此，通過用Qfi-mC5acys免疫在小鼠中產(chǎn)生的抗-mC5a抗體能夠中和通過靜脈注射mC5acys誘導(dǎo)的系統(tǒng)性中性白細(xì)胞減少應(yīng)答(表12)。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage69</column></row><table>用Q|3-mC5acysVLP免疫減輕了膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠模型中的疾病雄性6周齡的DBA/lJCrl小鼠(CharlesRiver,Deutschland)在脅腹皮下免疫50Q13-mC5acys(n=8)或50Q13VLP(n=8),其均在Dulbecco，sPBS中稀釋。在第一次免疫后第15、24天皮下給予30叫Q13-mC5a或30Q13VLP進(jìn)行另外兩次加強(qiáng)免疫。在開始時使用玻璃注射器將100II型牛膠原(MDBiosciences)與完全弗氏佐劑(CFA)以1:1比例乳化，用其進(jìn)行免疫，之后在第35、57天通過尾真皮內(nèi)免疫小鼠。CFA由含有5mg/ml熱滅活的結(jié)核分枝桿菌(Afycc^ac/enwm^/Z^rcw/cwi)才朱H37RA(DifcoLaboratodes)的不冗全弗氏佐劑(DifcoLaboratories)制備。然后通過每天檢測前肢和后肢關(guān)節(jié)厚度并且每天估計關(guān)節(jié)臨床得分來監(jiān)測小鼠中膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的誘導(dǎo)和嚴(yán)重程度。關(guān)節(jié)厚度使用張力恒定的卡鉗(constant-tensioncaliper)來測量。臨床得分基本按照下列標(biāo)準(zhǔn)給出得分0-沒有腫脹，關(guān)節(jié)正常；得分1-指/爪輕度變紅和/或腫脹；得分2-變紅和/或肺脹，累及整個爪/關(guān)節(jié)；得分3-爪/關(guān)節(jié)嚴(yán)重腫脹，變形，關(guān)節(jié)強(qiáng)直。持續(xù)實(shí)驗(yàn)觀察直到最后一次膠原/VFA注射后第15天(第一次免疫后第72天)。表13顯示最后一次膠原/VFA注射后所有肢的關(guān)節(jié)厚度的平均增加。Q13-mC5acys接種組的關(guān)節(jié)厚度的平均增加在大多數(shù)天里低于Q13對照組，在最后一次膠原/VFA注射后第5、7、10天，該差異的p值<0.1(通過2-尾studentt-檢驗(yàn))。表13<table>tableseeoriginaldocumentpage71</column></row><table>圖2a顯示最后一次膠原/VFA注射后所有肢的平均臨床得分總和。Q13-mC5acys接種組的平均臨床得分總和一致性地低于QI3VLP對照，在最后一次膠原/VFA注射后的第6、8、12、14天，其差異的p值<0.1(通過2-尾studentt-檢驗(yàn))，在第7、9、10天差異的其p值<0.05(通過2-尾studentt-檢驗(yàn))。該結(jié)果表明與Q13載體接種的小鼠相比，Q13-mC5acys接種降低了小鼠中膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度。實(shí)施例27用Qp-mC5acysVLP免疫減輕了抗膠原單克隆抗體混合物誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠模型中的疾病雌性6-8周齡的balb/c小鼠(CharlesRiver)在脅腹皮下免疫50jugQ13-mC5acys(n=5)或50|ugQ13VLP(n=5)，其均在Dulbecco，sPBS中稀釋。在第一次免疫后第21和35天皮下給予50pgQfi-mC5a或50pgQBVLP進(jìn)行另外兩次加強(qiáng)免疫。小鼠在第一次免疫后第41天用200pl抗膠原單克隆抗體混合物(MDBiosciences)靜脈內(nèi)免疫，隨后在1天后腹膜內(nèi)注射100plLPS溶液(MDBiosciences)。然后基本如實(shí)施例26所述監(jiān)測小鼠中抗膠原單克隆抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的誘導(dǎo)和嚴(yán)重程度。繼續(xù)實(shí)驗(yàn)觀察直到抗膠原單克隆抗體混合物注射后第14天(第一次免疫后第55天)。圖2b示出了單克隆抗體混合物注射后所有肢的平均臨床得分總和。在QB-mC5acys接種組中平均臨床得分總和一致性地低于QfiVLP對照，在最后一次膠原/CFA注射后的第3、4、7、8、9、10、11、13天，其差異的p值〈0.1(通過2-尾studentt-檢驗(yàn))，在第12、M天其p值<0.05(通過2-尾studentt-檢驗(yàn))。該結(jié)果表明與QB載體接種的動物相比，Q13-mC5acys接種降低了小鼠中抗膠原單克隆抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度。實(shí)施例28Q卩-mC5acysVLP免疫和新西蘭黑/新西蘭白Fl雜交系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型NZB/NZWFl小鼠與人類系統(tǒng)性紅斑狼瘡非常類似地自發(fā)發(fā)展為自身免疫病(Andrews等人.J.Exp.Med.,148:1198,1978)。雌性16周齡的NZB/NZWFl小鼠(CharlesRiver)在脅腹皮下免疫50jugQJ3-mC5acys(n=20)或50QGVLP(n=20),其均在Dulbecco，sPBS中稀釋。在第一次免疫后第14和28天皮下給予50pgQfi-mC5a或50pgQBVLP進(jìn)行另外兩次加強(qiáng)免疫。在第58天給予在明鞏中的50jugQ13-mC5a或50pgQBVLP進(jìn)行另外一次加強(qiáng)免疫。從第16周(第0天)到第29周齡(第91天)每周使用浸漬片(Roche)通過比色分析測量尿中排泄的蛋白質(zhì)的量(蛋白尿)。進(jìn)一步每周測量蛋白尿，直到52周齡，需要時通過進(jìn)一步加強(qiáng)免疫保持高抗體滴度。圖3顯示蛋白尿讀數(shù)達(dá)到300mg/dL的小鼠的百分比。這些數(shù)據(jù)顯示Q卩處理組中30%的小鼠到29周齡時蛋白尿讀數(shù)大于300jug/ml。與之相比，在Q(3C5acys處理組中只有一只小鼠在該年齡時的讀數(shù)高于300pg/ml。通過ELISA測定，這只特定小鼠具有低C5acys抗體滴度。該結(jié)果表明，與QB載體接種的動物相比，用mC5acys接種降低了新西蘭黑/新西蘭白Fl系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型中蛋白尿的發(fā)生率或延遲了其發(fā)病。權(quán)利要求1.一種組合物，其包含(a)具有至少一個第一附著位點(diǎn)的病毒樣顆粒(VLP)；和(b)具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種抗原，其中所述至少一種抗原是本發(fā)明的抗原，該抗原選自a)本發(fā)明的CCR5；b)本發(fā)明的C5a；c)本發(fā)明的CXCR4；d)本發(fā)明的胃泌素；和e)本發(fā)明的CETP；并且其中(a)和(b)通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接。2.權(quán)利要求l的組合物，其包含(a)具有至少兩個第一附著位點(diǎn)的RNA-噬菌體的病毒樣顆粒；和(b)具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的至少一種CCR5胞外域PNt;其中所述CCR5胞外域PNt包含(i)Nta結(jié)構(gòu)域或Nta結(jié)構(gòu)域片l殳，和(ii)包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27(SEQIDNO:56)的Ntb結(jié)構(gòu)域，或包含SEQIDNO:27的氨基酸23-27的Ntb結(jié)構(gòu)域片段，且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個或第二個位點(diǎn)包含巰基，且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)位于所述SEQIDNO:27的氨基酸23-27的N末端的上游；且其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第二個位點(diǎn)位于所述CCR5胞外域PNt的C末端的下游；且其中所述RNA噬菌體的所述VLP和所述CCR5胞外域PNt通過至少一個非肽共價鍵連接。3.權(quán)利要求2的組合物，其中所述具有至少兩個第二附著位點(diǎn)的CCR5胞外域PNt除了所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的所述第一個和所述第二個位點(diǎn)包含的所述兩個巰基以外不包含另外的巰基。4.權(quán)利要求2或3的組合物，其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的第一個位點(diǎn)對應(yīng)于SEQIDNO:27的半胱氨酸殘基的巰基。5.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)的組合物，其中所述CCR5胞外域PNt包含SEQIDNO:27的氨基酸序列。6.權(quán)利要求2-5中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含連接體，其中所述連接體與所述CCR5胞外域PNt的C末端融合，并且其中所述連接體包含所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的所述第二個位點(diǎn)，其中優(yōu)選地所述連接體是半胱氨酸或酰胺化的半胱氨酸。7.權(quán)利要求2-6中任一項(xiàng)的組合物，其中所述至少兩個第二附著位點(diǎn)的所述第一個和所述第二個位點(diǎn)與所述至少兩個第一附著位點(diǎn)通過至少兩個非肽共價鍵連接。8.權(quán)利要求2-7中任一項(xiàng)的組合物，其中所述RNA噬菌體是QP或AP205。9.權(quán)利要求2-8中任一項(xiàng)的組合物，其中所述至少兩個第一附著位點(diǎn)的每一個包含氨基。10.權(quán)利要求1的組合物，其中所述本發(fā)明的CCR5是CCR5胞外域，優(yōu)選地所述CCR5胞外域是CCR5胞外域PNt，進(jìn)一步優(yōu)選地所述PNt結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO:27的氨基酸序列。11.權(quán)利要求1的組合物，其中所述本發(fā)明的CCR5是CCR5胞外域片段，優(yōu)選地所述CCR5胞外域片段是CCR5胞外域ECL2A片段，進(jìn)一步優(yōu)選地所述PNt胞外域ECL2片段包含選自以下的氨基酸序列(a)SEQIDNO:25;和O)SEQIDNO:26。12.權(quán)利要求1的組合物，其中所述本發(fā)明的胃泌素包含、基本由、或由選自以下的氨基酸序列組成a)SEQIDNO:33t0SEQIDNO:34;c)SEQIDNO:35;d)SEQIDNO:36;e)SEQIDNO:37。13.權(quán)利要求l的組合物，其中所述本發(fā)明的C5a是C5a蛋白，優(yōu)選地所述C5a蛋白包含、基本由、或由選自以下的氨基酸序列組成(a)SEQIDNO:45;和(b)SEQIDNO:45衍生的多肽，其中SEQIDNO:45的3個、優(yōu)選2個、優(yōu)選1個氨基酸已經(jīng)通過插入、缺失和/或置換而修飾。14.權(quán)利要求1或權(quán)利要求10-13任一項(xiàng)的組合物，其中所述VLP是RNA噬菌體的VLP。15.權(quán)利要求14的組合物，其中所述RNA噬菌體是Q(3、fr、GA或AP205。16.權(quán)利要求1或權(quán)利要求10-15任一項(xiàng)的組合物，其中所述具有第一附著位點(diǎn)的VLP與所述具有第二附著位點(diǎn)的本發(fā)明的抗原通過至少一個共價鍵連接，其中優(yōu)選地所述共價鍵是肽鍵，其中所述VLP是RNA噬菌體AP205的VLP。17.權(quán)利要求1或權(quán)利要求10-15任一項(xiàng)的組合物，其中所述第一附著位點(diǎn)與所述第二附著位點(diǎn)通過至少一個共價鍵連接，其中優(yōu)選地所述共價鍵是非肽鍵。18.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組合物，其中所述第一附著位點(diǎn)優(yōu)選地包含賴氨酸的氨基。19.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組合物，其中所述第二附著位點(diǎn)包含巰基，優(yōu)選地包含半胱氨酸的巰基。20.—種包含權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的組合物的疫苗，其中優(yōu)選地所述疫苗不含佐劑。21.—種藥物組合物，其包含(a)權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的組合物或權(quán)利要求20的疫苗；和(b)可接受的藥物載體。22.—種制備權(quán)利要求1或權(quán)利要求10-19中任一項(xiàng)的組合物或權(quán)利要求20的疫苗的方法，包括(a)提供具有至少一個第一附著位點(diǎn)的VLP;(b)提供具有至少一個第二附著位點(diǎn)的至少一種本發(fā)明的抗原；和(c)連接所述VLP和所述至少一種本發(fā)明的抗原，產(chǎn)生所述組合物，其中所述至少一種本發(fā)明的抗原和所述VLP通過所述至少一個第一附著位點(diǎn)和所述至少一個第二附著位點(diǎn)連接。23.權(quán)利要求2-11的組合物在制備治療AIDS的藥物中的用途。24.權(quán)利要求12的組合物在制備治療胃腸癌的藥物中的用途。25.權(quán)利要求13的組合物在制備治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)、公共衛(wèi)生、免疫學(xué)、分子生物學(xué)和病毒學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明提供包含與至少一種本發(fā)明的抗原連接的病毒樣顆粒(VLP)的組合物，其中所述本發(fā)明的抗原是本發(fā)明的CCR5、本發(fā)明的胃泌素、本發(fā)明的CXCR4、本發(fā)明的CETP或本發(fā)明的C5a。本發(fā)明還提供一種制備所述組合物的方法。本發(fā)明的組合物可以用于制備疫苗，該疫苗特別用于治療其中本發(fā)明的抗原介導(dǎo)或貢獻(xiàn)于其病癥的疾病，特別是用于治療AIDS、胃腸癌、冠心病或炎性疾病。而且，本發(fā)明的組合物誘導(dǎo)有效的免疫應(yīng)答，特別是抗體應(yīng)答。而且，本發(fā)明的組合物特別可用于在特定環(huán)境內(nèi)有效誘導(dǎo)自身特異性免疫應(yīng)答。文檔編號A61K39/12GK101193654SQ200680020851公開日2008年6月4日申請日期2006年6月14日優(yōu)先權(quán)日2005年6月14日發(fā)明者A·休伯,A·杰格萊納,A·蒂索特,H·欣頓,M·巴克曼,N·施米茨,P·索登,S·馬丁,宇鄒申請人:賽托斯生物技術(shù)公司