專利名稱：：用17-aag或17-ag或其前藥與蛋白酶體抑制劑聯合治療多發性骨髓瘤的方法
技術領域：
：本發明涉及用17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格爾德霉素或17-氨基格爾德霉素或者17-AAG或17-AG的前藥與蛋白酶體抑制劑聯合治療多發性骨髓瘤的方法。發明背景多發性骨髓瘤("MM"，也稱為骨髓瘤或漿細胞骨髓瘤)是不可治愈但可治療的槳細胞癌。漿細胞是免疫系統的重要部分，它產生幫助抵御感染和疾病的免疫球蛋白(抗體)。MM的特征是骨髓("BM")中異常漿細胞數量過多和過量生產完整的單克隆免疫球蛋白(IgG、IgA、IgD或IgE;"M-蛋白")或Bence-Jones蛋白(游離的單克隆輕鏈)。高鈣血癥、貧血、腎損傷、對細菌感染的易感性增加和正常免疫球蛋白的生產受阻是MM的共同臨床表現。MM的特征常常還有彌散性骨質疏松，通常發生在骨盆、脊柱、肋骨和顱骨。MM的治療包括化療、干細胞移植、高劑量化療與干細胞移植聯用以及補救治療。化療包括用Thalomicf(沙利度胺)、硼替佐米、Aredia，帕米膦酸鹽)、類固醇和Zometa，唑來膦酸)治療。然而，許多化療藥對活躍分裂的非癌細胞，如BM、腸胃內襯和毛囊的細胞有毒性。因此，化療可導致血細胞計數減少、惡心、嘔吐、腹瀉和毛發脫落。MM患者的初期或初步治療一般是常規化療或標準劑量化療。患者也可接受化療，以準備高劑量化療和干細胞移植。在移植前，可用誘導治療(在干細胞移植之前的常規化療)降低腫瘤負荷。某些化療藥比其它藥物更適合誘導治療，因為它們對BM細胞的毒性較小，并導致BM產生干細胞的產率較高。適用于誘導治療的化療藥的例子包括地塞米松、沙利度胺/地塞米松、VAD(長春新堿、阿霉素8(多柔比星)和地塞米松聯用)和DVd(聚乙二醇化的脂質體多柔比星(Doxif、Caelyx)、長春新堿和減少用藥的地塞米松聯用)。MM的標準治療是美法侖與氯潑尼松(皮質類固醇藥物)聯用，實現50%的反應率。不幸的是，美法侖是烷化劑，不大適合誘導治療。皮質類固醇(尤其是地塞米松)有時單獨用作MM治療，尤其是在年齡較大的患者和不能耐受化療的患者中。地塞米松也單獨或與其它藥物聯合用于誘導治療。VAD是最常用的誘導治療，但近年來證明，DVd在誘導治療中同樣有效。近年來，硼替佐米已被批準用于治療MM，但它的毒性很大。然而，現有治療都無法提供顯著的治愈潛能。17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格爾德霉素("17-AAG"，有時也稱為17-烯丙基氨基格爾德霉素)是天然產生化合物格爾德霉素的半合成類似物(Sasaki等，1981)。可通過培養生產生物體，如吸濕鏈霉菌去勢變禾中CS^e;tow;^M/^graycop/cMvar.NRRL3602獲得格爾德霉素。另一種生物活性格爾德霉素衍生物是17-氨基格爾德霉素("17-AG")，它是17-AAG在人體中代謝產生的物質。17-AG也可由格爾德霉素制備(Sasaki等1979)。雖然在上世紀90年代，己經深入研究了作為抗癌藥的格爾德霉素和其類似物(如Sasaki等，1981;Schnur，1995;Schnur等，1999)，但它們都沒有被批準用于抗癌應用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>格爾德霉素相信17-AAG和格爾德霉素通過結合熱休克蛋白-90("Hsp90")并抑制其活性起作用(Schulte和Neckers，1998)。Hsp90用作許多細胞蛋白("客戶蛋白")的正常加工的侶伴蛋白，存在于所有哺乳動物細胞中。應激(缺氧、熱等)能誘導其表達增加數倍。還存在其它應激誘導蛋白(輔侶蛋白)如熱休克蛋白-70("Hsp70")，它們也在細胞應答和應激恢復中起作用。在癌細胞中，Hsp90抑制導致破壞Hsp90和其客戶蛋白如erbB2、類固醇受體、raf-l、cdk4和Akt的相互作用。例如，接觸17-AAG導致SKBr3乳腺癌細胞中erbB2耗盡以及Raf-l和突變p53的去穩定(Schulte和Neckers，1998)，乳腺癌細胞中類固醇受體耗盡(Bagatell等，2001)，MEXF276L黑色素瘤細胞中Hsp90耗盡以及Raf-l和erbB2下調(Burger等，2004)，結腸腺癌細胞中Raf-l、c-Akt和Erkl/2耗盡(Hostein等，2001)，白血病細胞中胞內Bcr-Abl和c-Raf蛋白下調以及Akt激酶活性降低(Nimmanapalli等，2001)，具有野生型Rb的肺癌細胞中cdk4、cdk6和細胞周期蛋白E降解(Jiang和Shapiro,2002)，以及NSCLC細胞中erbBl(EGFR)和erbB2(pl85)耗盡(Nguyen等，2000)。因為17-AAG對參與腫瘤發生和癌細胞轉移的Hsp90和其它蛋白有活性，所以許多臨床研究者在人類臨床試驗中評價了它作為抗癌藥的有效性。在這些不同試驗中，國家癌癥研究院(NationalCancerInstitute)的癌癥治療評價計劃(CTEP)推薦用以下2期劑量/方案進行進一步研究在3周中以220mg/m、每平方米患者或對象的體表面積的mg數)每周給藥兩次，給予兩周；450mg/n^每周給藥一次連續給藥，或其間有停藥期或中斷期；在4周中以300mg/n^每周給藥一次，給予3周。用17-AAG進行不同臨床試驗的結果(幾乎僅有實體瘤患者)通常顯示出，臨床活性有限，小結如下(a)在成年實體瘤患者中進行l期試驗，其中每3周的5天中，患者每天接受17-AAG。起始劑量是10mg/m2，遞增至56mg/m2，最大耐受劑量("MTD")和推薦2期劑量確定為40mg/m2。修改該方案，以排除事先患有嚴重肝病的患者，然后以相同方案用高達110mg/r^的劑量治療患者。沒有觀察到客觀腫瘤反應。由于劑量限制性可逆肝臟毒性，進一步修改該方案，以便以每隔一周、每周兩次的方案進行給藥，起始劑量為每日40mg/m2。以每日劑量40和56mg/m^合藥5天后，峰值血漿濃度分別為1,860±660和3,170±1，310nM。以56mg/m"3療的患者中，17-AAG和17-AG的平均AUC值分別為6，708和5,558nM*h，平均t力分別為3.8和8.6小時。17-AAG和17-AG的清除率分別為19.9和30.8L/h/m2，Vz值分別為93和203L/m2(Grem等，2005)。(b)在第二個l期試驗中，晚期實體瘤患者每天接受17-AAG，共計5天，起始劑量為5mg/m2。在80mg/m、t，觀察到劑量限制性毒性(肝炎、腹痛、惡心、呼吸困難)，然而在劑量達到157mg/mV天后不再繼續增加劑量。進一步修改劑量方案，以便實現每周給藥兩次。在80mg/n^的劑量水平下，t^為1.5小時，血衆C^x為2,700nM。相似地，就17-AG而言，k為1.75小時，C^x為607nM。血漿濃度超過了體外和體內異種移植瘤模型中實現細胞殺傷所需的濃度(10-500nM)(Munster等，2001)。(c)進行17-AAG的l期試驗，其中每4周的三周中，每周治療晚期實體瘤患者，起始劑量為10mg/m2，推薦的2期劑量為295mg/m2。劑量遞增達到395mg/n^的劑量，此時觀察到胰腺炎繼發性惡心和嘔吐以及3級疲勞。修改該給藥方案，以便實現在每四周的三周中每周給藥兩次；每3周的2周中每周給藥兩次。對此試驗中獲得的數據進行群體藥動學(PK)分析。17-AAG在中央室的Vd(分布容積)為24.2L，在外周室的Vd為89.6L。17-AAG和17-AG的清除率值分別為26.7L/h和21.3L/h。代謝清除說明，46.4。/。的17-AAG代謝為17-AG。迄今為止，在此試驗中沒有觀察到客觀腫瘤反應。(Chen等，2005)。(d)在4周周期的3周中，每周給藥，從而在實體瘤和淋巴瘤患者中進行另一個l期試驗。起始劑量為15mg/m2。劑量遞增到112mg/m^寸沒有顯著毒性，激素增加劑量，目標是達到"生物學"活性劑量范圍。在308mg/n^時達到每周給予17-AAG的MTD。迄今為止，在此試驗中沒有觀察到客觀腫瘤反應，經測定，治療期間Hsp90客戶蛋白的水平未改變。沒有觀察到侶伴蛋白或客戶蛋白水平和17-AAG或17-AGPK之間的相關性。17-AAGPK和其臨床毒性之間沒有相關性(Goetz等，2005)。(e)用每周給藥一次的方案進行另一個l期試驗，包括ll名轉移性黑色素瘤患者。起始劑量為10mg/m2，在450mg/mV周時觀察到劑量限制性毒性(AST升高3/4級)。在較高劑量(16-450mg/mV周)下，單次輸注所用的17-AAG制劑含有10-40mL二甲亞砜(DMSO)，它可能對試驗中觀察到的胃腸道毒性起到一定作用。用320-450mg/n^治療的患者中，兩名患者顯示出放射性驗證的長期穩定性疾病。沒有記錄到完全或部分反應。在最高劑量水平(450mg/m、下，血漿17-AAG濃度超過10^M并在超過24小時中維持在120nM以上。最高劑量水平450mg/n^下，平均分布容積為142.6L，平均清除率為32.2L/h，平均峰值血漿水平為8,998嗎/L。劑量和所研究劑量水平的曲線下面積(AUC)之間呈線性相關。還測定了藥效學(PD)參數，在用320-450mg/mV周治療的9名患者的8名中觀察到誘導輔侶蛋白Hsp70。也在腫瘤活檢樣品中觀察到客戶蛋白耗盡9名患者的8名中CDK4耗盡，24小時時6名患者的4名中Raf-l耗盡。這些數據表明，l-5天即抑制了腫瘤中的Hsp90。(Banerji等，2005)。用彌散性GFP陽性MM病損的SCID/N0D小鼠模型研究了17-AAG的體內抗-MM活性(Mitsiades等，2006)。存活分析顯示，該治療顯著延長了總體存活時間中值，但根據非臨床數據常常無法預見臨床活性。如上所述，這尤其是17-AAG在實體瘤中的情況，其中在l期臨床試驗中仍未證實臨床前數據的前景。因此，盡管非常努力地將17-AAG開發成抗癌藥，但沒有管理機構批準將其用于治療任何癌癥。仍然需要定量和給予17-AAG和17-AAG前藥(和其代謝物17-AG)的方法，以便實現其潛在的治療益處。本發明提供了用17-AAG有效治療MM的這種方法。近年來，臨床前和臨床研究證明，硼替佐米(Velcade⑧，BZ，PS-341)可克服MM細胞對常規或高劑量細胞毒性化療的耐受性(Hideshima等，2001;Mitsiades等，2001;Mitsiades等，2003)，并改善MM病患結果。最近，硼替佐米已被批準用于治療復發性和難治性MM(Richardson等，2003a)。臨床前研究也表明，用硼替佐米處理MM細胞引發Hsp90顯著上調，這是MM細胞的主要應激反應。雖然硼替佐米能夠改善病患結果，但它的毒性很高。本發明提供了能有效治療多發性骨髓瘤的17-AAG或17-AG或者它們的前藥與硼替佐米的聯合治療。本說明書的最后一部分提供了本文引用的參考文獻列表。將本文引用的所有文獻納入本文作參考，就好像將各發表物或文獻特別和單獨地納入本文作參考的那樣。發明概述本發明提供了在需要治療的對象中治療多發性骨髓瘤(MM)的方法，所述方法包括給予所述對象治療有效劑量的17-AAG或17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥和治療有效劑量的蛋白酶體抑制劑的步驟和任選地重復所述給藥步驟，直到不再獲得進一步的治療益處。在一個實施方式中，所述方法包括用至少兩周的時間將多個劑量的17-AAG或其前藥給予患有MM的對象，其中各劑量的范圍約為100mg/m、340mg/n^的17-AAG或等效量的17-AAG或17-AG前藥。在一個實施方式中，所述劑量約為340mg/n^的17-AAG或等效量的17-AAG或17-AG前藥。在一個實施方式中，此劑量每周給予兩次，至少給予兩周。在一個實施方式中，在3周的至少兩周中，此劑量每周給予兩次，這種每三周的給藥速率稱為一個周期，對所述MM患者施予多個這種治療周期。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致每劑量中17-AAG的AUC總約為2，300-19，000ng/mL化的劑量。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG(或前藥)的C皿、不超過9,600ng/mL(或摩爾等效量的前藥)。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C,大于1,300ng/ml。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C隨大于1,800ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C麗大于1,300ng/mL但不超過9,600ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的Cm^大于1,800但不超過9,600ng/mL。在一個實施方式中，17-AG或17-AG的前藥(其前藥包括17-AAG)的治療有效劑量是導致每劑量中17-AG的AUC,s約為800ng/mL*h-17，000ng/mL嚇的劑量。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AG的C,不超過l,400ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AG的C皿大于140ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AG的C目x大于230ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AG的C,大于140但不超過l,400ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AG的Cn^大于230但不超過1,400ng/mL。在一個實施方式中，17-AAG、17-AAG的前藥、17-AG或17-AG的前藥的治療有效劑量是導致每劑量中17-AAG和17-AG的總AUC總約為3,500-35,000ng/mL*h的劑量。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的Cma不超過9,600ng/mL和/或17-AG的Cmax不超過1,400ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C咖x大于1,300ng/mL和/或17-AG的C隨大于140ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的Cm^大于l，800ng/mL和/或17-AG的Cm^大于230ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C隨大于1,300但不超過9,600ng/mL和/或17-AG的C,大于140但不超過l，400ng/mL。在一個實施方式中，以一定速率和頻率給予此劑量，以使17-AAG的C隨大于1,800但不超過9,600ng/mL和/或17-AG的C隨大于230但不超過1,400ng/mL。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的終末t,力為1.6-5.6小時的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的終末t/2在上述范圍內和每劑量中17-AAG的AUC總約為2,300-19,000ng/ml^h的劑量。在一個實施方式中，n-AG或17-AG的前藥的治療有效劑量是導致17-AG的終末t,/,為3.7-9.1小時的劑量。在一個實施方式中，17-AG或17-AG的前藥的治療有效劑量是導致17-AG的終末t,力在上述范圍內和每劑量中17-AG的AUC總約為800-17,000ng/ml^H的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的分布容積Vz為56-250L的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的分布容積Vz在上述范圍內和每劑量中17-AAG的AUC總約為2，300-19,000ng/ml^h的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致清除率為13-85L/h的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的清除率在上述范圍內和每劑量中17-AAG的AUC總約為2,300-19，000ng/ml^h的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致Vss為96-250L的劑量。在一個實施方式中，17-AAG或17-AAG的前藥的治療有效劑量是導致17-AAG的Vss在上述范圍內和每劑量中17-AAG的AUC,&約為2,300-19,000ng/mL*h的劑量。在一個實施方式中，在單獨的藥物制劑中分別給予17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥和蛋白酶體抑制劑。在另一實施方式中，17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥和蛋白酶體抑制劑在同一藥物制劑中。各藥物制劑還任選地含有藥學上可接受的運載體或稀釋劑。在一個實施方式中，蛋白酶體抑制劑是硼替佐米。在一個實施方式中，以輸注90或120分鐘的方式給予各劑量的17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥，以靜脈內快速推注3-5秒的方式給予各劑量的硼替佐米。在一個實施方式中，在給予各劑量的17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥之前給予各劑量的硼替佐米。在一個實施方式中，所述方法包括用至少2周時間給予MM患者多個劑量的硼替佐米，其中各劑量至少為1mg/m2或約為1mg/m2-1.3mg/m、朋替佐米。在一個實施方式中，所述方法包括用至少2周時間給予MM患者多個劑量的硼替佐米和17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥，其中各劑量的硼替佐米至少為1mg/m2或約為1-1.3mg/m2硼替佐米，各劑量的17-AAG至少為100mg/m217-AAG(或等效量的17-AG或17-AAG或17-AG的前藥)或約為100-340mg/m217-AAG(或等效量的17-AG或17-AAG或17-AG的前藥)。在優選實施方式中，所述方法包括用至少2周時間給予MM患者多個劑量的硼替佐米和17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥，其中各劑量的硼替佐米至少為1mg/n^或約為1-1.3mg/n^硼替佐米，各劑量的17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥至少為150mg/m217-AAG(或等效量的17-AG或17-AAG或17-AG的前藥)或約為150-340mg/m217-AAG(或等效量的17-AG或17-AAG或17-AG的前藥)。附圖簡要說明圖1顯示了劑量水平1(0.7mg/n^硼替佐米和100mg/m^7-AAG)下相對于時間的17-AAG和17-AG的血漿濃度，組合了第1天和第11天的平均值和標準差(SD)。圖2顯示了劑量水平2(1.0mg/n^硼替佐米和100mg/m^7-AAG)下相對于時間的17-AAG和17-AG的血漿濃度，組合了第1天和第11天的平均值和SD。圖3顯示了劑量水平3(1.0mg/m2硼替佐米和150mg/m勺7-AAG)下相對于時間的17-AAG和17-AG的血漿濃度，組合了第1天和第11天的平均值和SD。圖4顯示了劑量水平4(1.3mg/m^朋替佐米和150mg/mh7-AAG)下相對于時間的17-AAG和17-AG的血漿濃度，組合了第1天和第11天的平均值和SD。圖5顯示了個體患者的17-AAG和17-AG的AUC總。圖6顯示了個體患者的總接觸值(AUC,s(17-AAG)和AUC總(17-AG)之和)。圖7顯示了患者的血清M-峰、總IgA和尿M-蛋白的降低百分數(患者201)。圖8顯示了患者的血清M-峰和總IgG的降低百分數(患者204)。圖9顯示了患者的血清M-峰降低百分數(患者307)。圖10顯示了患者的血清M-峰和尿M-蛋白的降低百分數(患者308)。圖11顯示了給予0.7mg/m2硼替佐米和100mg/m217-AAG;1.0mg/m2硼替佐米和100mg/m217-AAG;1.0mg/m2硼替佐米和150mg/m217-AAG以及1.3mg/m2硼替佐米和150mg/mh7-AAG后20S蛋白酶體活性降低的百分數(治療周期l，第11天)。圖12A和12B顯示了輸注17-AAG四次之后在CD138+骨髓瘤細胞中誘導凋亡并使AKT水平降低。發明詳述定義為了幫助理解和實施本發明，以下提供本文所用某些術語的定義。在描述本發明的過程中，17-AAG濃度定義為包括17-AAG前藥的摩爾等效濃度。在描述本發明的過程中，17-AG濃度定義為包括17-AG前藥的摩爾等效濃度。"副作用"的定義與國家癌癥研究院(NationalCancerInstitute)(2003)相同。"劑量限制性毒性"(DLT使義為以下任何臨床毒性，參照國家癌癥研究院(2003)。血液毒性包括(1)4級嗜中性白血球減少癥(連續5天以上絕對嗜中性粒細胞計數(ANC)<0.5x109/L)，或發熱性嗜中性白血球減少癥(ANC〈1.0x109/L，發熱》38.5。C)，(2)4級血小板減少(血小板<25.0x1(^/L或出血時需要輸入血小板)，和/或4級貧血(血紅蛋白<6.5g/dl)。非血液學毒性包括(1)任何》3級的非血液學毒性(除了3級注射部位反應、脫發、食欲缺乏、疲勞)，(2)盡管采用了最大限度的醫學介入和/或預防，仍有之3級的惡心、腹瀉和/或嘔吐，和/或(3)由于從藥物相關毒性恢復的時間延長，治療延遲4周以上。"完全反應(CR)"定義為對血清和尿的陰性免疫固定("IF')持續至少6周。含有〈5。/。漿細胞的骨髓吸出物("BMA")可用于驗證CR。進行環鉆活檢，結果表明槳細胞<5%。在非分泌型骨髓瘤，6周間隔后重復骨髓活檢，以驗證CR。溶骨性病變的大小和數量不應該增加(發生壓縮性骨折不排除反應)，軟組織漿細胞瘤消失。'KPS行為狀態，，的定義如表1所示，該表也提供了與ECOG標準的比較。表l-KPS行為狀態<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>最小反應"定義為下述一種或多種情況血清M-蛋白減少25-49。/。，維持至少六周；尿輕鏈排泄減少50-89%，但仍超過200mg/24小時，維持至少6周；對于僅患非分泌型骨髓瘤的患者，BMA或骨環鉆活檢樣品(如果進行活檢)中漿細胞減少25-49y。，維持至少6周；軟組織漿細胞瘤減小25-49%(經射線照相法或臨床檢測)；，溶骨性病變的大小或數量沒有增加(發生壓縮性骨折不排除反應)。(Blad6等，1998)。"無改變"定義為不滿足最小反應或進行性疾病的標準。(Blad6等，1998)"部分反應(PR)"定義為滿足了一部分、而非全部CR標準的患者，包括常規電泳為陰性但未進行IF的患者發生的反應。參見例如Blad6等(1998)。"平臺期"定義為穩定的副蛋白水平持續至少3個月。平臺要求在評價反應時觀察結果在值的25%以內，升高到25%以上是疾病進展的標準之一。(Blad6等，1998.)不屬于CR的患者的"疾病進展"定義為部份緩解或平臺期的患者的疾病活性明確增加，而術語復發應用于先前屬于CR的患者再次發生明顯疾病。參見例如Blad6等(1998)。"難治性癌癥"指對一種或多種在先治療不反應的癌癥。"復發，，指通過一種或多種在先治療獲得一段時間改善后返回癌癥的病癥和癥狀。"由CR復發"定義為以下一種或多種情況IF或常規電泳上再次出現血清或尿副蛋白，通過至少一種其它實驗進行確認并排除了寡克隆重建；BMA或環鉆骨活檢樣品中漿細胞多于5%;發生新的溶骨性病變或軟組織漿細胞瘤或殘留骨病變的大小明顯增加(發生壓縮性骨折不排除連續反應，可能不表示進展)；和發生不可歸因于任何其它原因的高鈣血癥(校正的血清鈣大于11.5mg/dL)。除非另有說明，"治療有效劑量"指給藥后實現所需治療結果所需的藥物量。實施方式本發明提供了一種采用17-AAG或17-AG和具有其抗癌效果的它們的前藥通過17-AAG或17-AG的體內形成治療MM的重要新方法。本發明的產生部分借助于新方法的發現，所述方法用于定量和給予17-AAG以實現和維持治療有效血液水平的17-AAG或其主要代謝物17-AG(或17-AAG與17-AG加在一起的血液水平，因為這些部分在細胞試驗中等效)，表示為AUC,a、Cmax、終末T,/。清除率和/或分布容積和/或Vss，而不達到可能引起無法控制的毒性的血液水平。在一個實施方式中，本發明方法包括用三周時間給予多個劑量的17-AAG或17-AAG的前藥和多個劑量的蛋白酶體抑制劑。總之，所述三周期間的劑量給藥稱為一個周期。可用多個治療周期治療患者。可用不同周期(包括與本文特別描述的實施方式相比時間較長或較短或包括較多或較少劑量的周期)實施本發明，只要達到本文所述的治療有效劑量。在一個實施方式中，每個周期給予四個劑量，各劑量之間間隔3-4天。在另一實施方式中，每個周期給予四個劑量，在三周周期的前兩周每周給予兩個劑量。在一個實施方式中，在至少3周的時間中通過將多個劑量的17-AAG、或者17-AAG或17-AG的前藥、以及蛋白酶體抑制劑聯合給予(包括在至少一周內分別給予)MM患者實現所述治療有效劑量，其中所述多個劑量導致每劑量中17-AAG的AUC總至少為2，300ng/mPh但不超過19,000ng/mPh。在一個實施方式中，每個周期給予四個劑量，各劑量至少為100或150mg/m2，各劑量之間間隔3-4天。在另一實施方式中，每個周期給予四個劑量，在三周周期中的頭兩周，每周給予兩個劑量。可給予在體內能轉化為17-AAG或17-AG的除17-AAG或17-AG以外的化合物(前藥)。一種類型的前藥是苯醌環被還原成氫醌環、但在對象中又代謝成苯醌環的化合物。17-AAG前藥的特定例子是17-烯丙基氨基-18,21-二氫-17-去甲氧基格爾德霉素。(Adams等，2005)。因此，在一個實施方式中，本發明方法包括在需要治療的患者中治療MM的方法，其中所述方法包括用至少3周的時間將多個劑量的17-AAG或17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥給予MM患者，其中所述多個劑量導致每劑量中17-AG的AUC總至少為5,000但不超過18，000ng/ml^h。在一個實施方式中，每個周期給予四個劑量，各劑量至少為150mg/m2，各劑量之間間隔3-4天。在另一實施方式中，每個周期給予四個劑量，在三周周期中的頭兩周，每周給予兩個劑量。因此，本發明的范圍內包括采用17-AAG的前藥，術語"給予"包括用藥學等效量的給予需要治療對象后能體內轉化為17-AAG或17-AG的化合物治療MM。Wermuth，2003中描述了選擇和制備合適的前藥衍生物的常規方法。蛋白酶體抑制劑是與17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥聯用能有效治療MM患者或通過基本類似于硼替佐米的機制行使其治療作用的抑制蛋白酶體降解蛋白質的任何化合物。在一個實施方式中，蛋白酶體抑制劑是抗腫瘤藥，并且是哺乳動物細胞中26S蛋白酶體的胰凝乳蛋白酶-樣活性的可逆抑制劑。蛋白酶體抑制劑可以是天然或合成的。合適的天然蛋白酶體抑制劑包括但不限于乳胞素、環氧酮和TMC-95環肽。環氧酮的例子包括但不限于環氧霉素(epoxomicin)和艾硼霉素(eponemycin)。合適的合成蛋白酶體抑制劑包括但不限于肽醛和肽乙烯基砜。肽醛的例子包括但不限于Z-Leu-Leu-Leu-al(MG132)、Z-Ile-Glu(Obut)-Ala-Leu-al(PSI)和Ac-Leu-Leu-Nle-al(ALLN)。參見例如，Kisselev和Goldberg(2001)和Richardson等(2003b)。蛋白酶體抑制劑的例子包括但不限于PS-519(Shah等(2002))、NPI-0052(Cusack等(2005))、ZL3VS(Kadlcikova等(2004))、AdaAhx3L3VS(Kadlcikova等(2004))、艾法肽菌素(efrapeptin)(Abrahams等(1996))。在一個實施方式中，肽醛的醛基被硼酸取代，形成肽硼酸。在一個實施方式中，肽硼酸是二肽硼酸，優選硼替佐米。硼替佐米是抗腫瘤改性的二肽硼酸，它是哺乳動物細胞中26S蛋白酶體的胰凝乳蛋白酶-樣活性的可逆抑制劑。Adams等(1998、2000、2001、2003和2004)和Gupta(2004)中介紹了硼替佐米的制備和使用以及合適的藥物劑型和給藥方式。硼替佐米以商品名Velcade⑧出售(MillenniumPharmaceuticals,Inc.,Cambridge,MA)，批準用于治療接受過至少一次治療并且在在先治療后顯示疾病進展的MM患者。含有硼替佐米的藥物制劑可含有約0.9%鹽水和1.0mg/mL甘露醇。硼替佐米的一個劑量可以是至少約0.7-1.3mg/m2。可通過注射給予硼替佐米，通過直接注射或靜脈內輸注在3-5秒內將整個劑量注射到對象體內。出于本發明目的，需要治療的對象一般是患有MM的人患者，但本發明方法也可用于獸醫目的，只要適當調節單位劑量以獲得與本文所述AUCs或其它PK和PD參數等效的用于感興趣的具體哺乳動物(包括貓、牛、犬、馬等)的劑量。藥物科學領域技術人員通過本發明公開的劑量和人體治療的PK參數能了解并不難確定感興趣物種的適用轉換系數。然而，所述方法一般用于使人對象受益，所述對象一般顯示出一些MM的組織學證據，包括以下一種或多種情況血清或尿中的M-峰、BM漿細胞增多>30%、貧血、腎衰竭、高鈣血癥和/或溶骨性病變。在一個實施方式中，根據Durie-Salmon系統診斷為III期MM的患者顯示出以下一種或多種癥狀血紅蛋白值〈8.5g/dL，血清鈣值"2mg/dL，晚期溶骨性病變(3級)，高M-組分生產率(IgG值〉7g/dL;IgA值〉5g/dl;BenceJones蛋白M2g/24小時)。或者，根據InternationalStagingSystem(ISS)系統診斷為III期MM的對象p-2微球蛋白血清水平>5.5g/dL。在一個實施方式中，根據Durie-Salmon系統診斷為II期MM的對象沒有III期MM但顯示出以下一些癥狀而非全部癥狀血紅蛋白值>10g/dL、血清鈣值^12mg/dL、骨x射線顯示正常骨結構(O級)或僅有骨漿細胞瘤、低M組分生產率(IgG值<5g/dL;IgA值〈5g/dL)。或者，根據ISS系統將該對象診斷為II期MM而非III期MM，其沒有<3.5g/dL的p-2微球蛋白血清水平和^3.5g/dL的清蛋白血清水平。在另一實施方式中，所述患者具有一種或多種以下MM病癥或癥狀血清M蛋白的水平升高(如>3g/dL)，和/或來自對象的BM樣品中10。/。以上的細胞是槳細胞。在另一實施方式中，在治療前患者的Karnofsky行為狀態(KPS)至少為70。/。。在另一方面，患者的KPS至少為60Q/。、50%、40%、30%、20%或10%。在一個方面，所述患者的ECOG至少為0、1、2或3。17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥的治療有效劑量和蛋白酶體抑制劑的治療有效劑量是是在一個治療每次聯合給予對象能帶來治療結果的17-AAG、17-AG或者17-AAG或17-AG的前藥以及蛋白酶體的量。治療結果可以是癌癥的進展或擴散的速率減慢或停止一段時間。在一些患者中，治療結果可以是完全或部分消除了MM。在一些患者中，可用一個治療周期實現治療結果。在其它患者中，僅在多個治療周期后才能實現治療結果。然而，本領域技術人員應理解，任何抗癌治療都無法保證每位MM患者獲得治療結果。如上所述，在一個實施方式中，各治療周期是三周。在其它實施方式中，可采用其它治療周期時間，如2或4周(或一個月)，只要實現本文所述的等效AUCfi或其它PK和PD參數。每個治療周期中，各周期中采用的單位劑量給予至少一次，至多8次。一般地，每個治療周期中所述劑量給予2-4次。在一個實施方式中，在各個三周的治療周期的2周中，每周給予該劑量兩次2次。例如，如果在給予第一個劑量時開始周期，那么在一個實施方式中，在治療周期的頭兩周而非第三周中給予該單位劑量一次或兩次。在一個實施方式中，在各治療周期的第l、4、8和11天給予該劑量，第l天是給予第一個劑量的那天。17-AAG的各單位劑量是不大于最大耐受劑量("MTD")的劑量，MTD可定義為接受該治療方法的六名對象中一名或更少的對象顯示出無法進行支持性護理的血液學或非血液學毒性的最大劑量。17-AAG的給藥量優選等于或小于MTD。17-AAG的給藥量優選為不導致不可接受和/或無法控制的血液學或非血液學毒性的劑量。單位劑量17-AAG或17-AG或其前藥的治療有效量是經過一個或多個本發明給藥周期后，在至少一段時間，如3周、6周、2個月、6個月、一年或幾年中，產生完全反應(CR)、部分反應(PR)、最小反應(MR)、穩定性疾病(StD)狀況、血清單克隆蛋白(血清M蛋白)減少或對象BM中漿細胞減少的量(Blad6等，1998)。在一個實施方式中，給予17-AAG導致MM患者的血清和/或尿M蛋白減少、BM漿細胞減少、貧血減輕、腎衰竭減輕、高鈣血癥減輕和/或溶骨性病變減輕/緩解。在一個實施方式中，一些患者不會從CR復發或疾病進展出現顯著延遲。在一個單位劑量中給予的17-AAG量可以是每劑量100-340mg/m2。每三周的兩周中，每周給予17-AAG兩次時，17-AAG的給藥量為每劑量100-340mg/m2。優選地，17-AAG的給藥量為每劑量150-340mg/m2。17-AAG的給藥量也可以是每劑量220-340mg/m2。本領域技術人員應了解，17-AAG或17-AG前藥或者17-AG本身的單位劑量可通過本文提供的17-AAG劑量以及提供的17-AAG和17-AG的PK參數以及前藥或17-AG的分子量和相對生物利用度計算。也可按照每個治療周期17-AAG的給藥量來描述本發明方法。每個周期的劑量一般大于400mg/m2，更通常大于600mg/n^。每個周期的劑量一般為至少880mg/m2。在各種實施方式中，17-AAG的給藥量至少為600-1,360mg/m"治療周期；880-1,360mg/m2/治療周期和1,100-1,360mg/m2/治療周期。當蛋白酶體抑制劑是硼替佐米時，單個劑量中的給藥量可以是每劑量0.7-1.3mg/m2。一個單位劑量中的給藥量可以是每劑量0.7、1.0或1.7mg/m2。每三周的兩周中，每周給予硼替佐米兩次時，給藥量可以是每劑量0.7-1.3mg/m2。也可根據硼替佐米給藥量/治療周期描述本發明方法。每個周期的量一般大于2.8，更通常大于4.0mg/n^。每個周期的量一般為至少5.2mg/m2。或者，硼替佐米給藥量至少為2.8-5.2mg/m々治療周期或4.0-5.2mg/m々治療周期。如上所述，給予單位劑量的頻率為每周一次或每周兩次。在本發明方法的一個實施方式中，每3或4周的2周中，每周靜脈內給予該藥物制劑兩次。在一個實施方式中，給予該患者治療前藥物，以預防或緩解治療相關毒性。以下實施例中描述了說明性治療前用藥。在本發明方法的一個實施方式中，在各周期的第l、4、8和11天給予17-AAG或17-AG或其前藥，該周期時間是3周。一般通過靜脈內輸注給予17-AAG，輸注時間至少為30、60、90或120分鐘。就體表面積("BSA，，)大于2.4n^的患者而言，可按照本文所述方法用最大BSA2.4mH十算劑量。在本發明方法的人類臨床試驗中，將不達到劑量限制性毒性("DLT")的以下給藥方案用于任何治療患者在三周的兩周中(第l、4、8和11天，周期時間為21天)，每次給予275mg/m217-AAG，每周給藥兩次。如上所述，給予17-AAG后，在對象中出現本身具有抗癌活性的主要代謝物17-AG。因此，17-AAG和17-AG各自并一起產生本發明方法的治療益處。17-AAG的治療有效劑量和給藥方案是在本文所述對象中實現17-AAG和/或17-AG的曲線下面積(AUC總)的劑量和方案。以下實施例中介紹了各種治療有效劑量和給藥方案。也可根據終末半衰期fe)、清除率(CL)和/或消除期或穩態的分布容積(Vz和/或Vss灘述本發明提供的17-AAG禾n/或17-AG的治療有效劑量和給藥方案。治療開始后3、6、12、18或24周，即可在對應對象中觀察到本發明治療方法的治療益處。在一個實施方式中，所述治療的治療益處是患者的血清蛋白和/或BUN或血清鈣減少。在各種實施方式中，減少了至少25%;至少50%-80%;至少90%;和100%。可通過(例如)血清蛋白電泳或免疫固定技術測定血清M蛋白的減少。在治療一段時間后測定患者的血清蛋白、BUN或鈣的水平降低百分數，然后與臨治療前測定的患者的血清M蛋白、BUN或鈣的水平作比較。血清蛋白是在血清中水平升高時表明該對象患有MM的蛋白質。這種血清蛋白包括但不限于血清M蛋白(也稱為血清M副蛋白)、卩2-微球蛋白、輕鏈和總蛋白。可通過本發明獲得的其它治療益處包括以下一種或多種益處BM漿細胞減少、貧血減輕、腎衰竭減輕、高鈣血癥減輕和/或溶骨性病變減輕/緩解。另一治療益處是患者KPS改善了10y。或更多、20%或更多、30%或更多、40%或更多或者50%或更多。另一治療益處是患者EC0G改善了1或更多、2或更多或者3或更多。理想地，實施本發明不產生無法控制的血液學或非血液學毒性。要避免的血液學毒性包括4級嗜中性白血球減少癥、4級血小板減少和/或4級貧血。非血液學毒性包括任何S級的非血液學毒性(除了注射部位反應、脫發、食欲缺乏和/或疲勞)、惡心、腹瀉和/或嘔吐23級(盡管采用最大限度的醫學介入和/或預防)和/或由于從藥物相關毒性恢復的時間延長而使治療延遲4周以上。本領域技術人員認識到，癌癥患者中可能出現各種毒性；本發明方法提供了減少或消除這些毒性的發生的益處。藥物制劑含有可引起過敏反應的其它化合物(如克列莫佛"時，可給予其它藥物以預防或減輕過敏反應，如(a)氯雷他定或苯海拉明，(b條莫替丁和(c)甲潑尼龍或地塞米松。本發明也在各種實施方式中提供了，通過與蛋白酶體抑制劑和第三種抗癌化合物聯合給予17-AAG或17-AG或其前藥治療MM的方法，所述另一種抗癌化合物可以是(例如)Thalomid⑧、Aredia⑧和Zometa⑧或Revlimicf(來那度胺)。可以單位劑量和本領域目前采用的給藥方案給予另一種抗癌藥物或藥劑。可用本發明治療至少一種現有的抗癌治療方案失敗，即患有難治性或復發的難治性MM的MM患者。這些現有的抗癌治療包括但不限于單一治療(單一藥物治療)或以下治療和抗癌藥的聯合治療化療、干細胞移植、Thalomid、Velcad^和Revlimid。化療包括美法侖和氯潑尼松聯合治療(MP)、VAD或者烷化劑單用或與其它藥物聯用。如環磷酰胺+依托泊甙或依托泊甙、地塞米松、多柔比星的聯合治療。可能有益于實施本發明的診斷和實驗室的方法和測試是本領域普通技術人員熟知的。參見例如，Pagana和Pagana，《Mosby診斷和實驗室測試手冊》(Mosby'sManualofDiagnosticandLaboratoryTests),第2版，Mosby-YearBook,2002;Jacobs禾卩DeMott《實驗室測試手冊》(LaboratoryTestHandbook),第5版，Jacobs等(編)，Lexi-Comp，Inc.,2001(各自納入本文作參考)。可用FreeliteTM(TheBindingSiteInc.,英國伯明翰)測定血清中游離的K和游離的A輕鏈濃度。用于本發明方法的活性藥物成分("API"，17-AAG、17-AG、前藥、蛋白酶體抑制劑、其它抗癌化合物等)可配制成適合口服或靜脈內給藥的固體或液體形式。參見Gennaro編，《雷明頓藥物科學和實踐》(7em〖"gto",7TzeSc/ewce朋t/尸rac"ceo/P/^m^c力，第20版(LippincottWilliams&Wilkins2003)，納入本文作參考。API可與(例如)用于溶液、乳液、懸液或適合經腸給藥或胃腸道外給藥的任何其它形式的藥學上可接受的無毒運載體或賦形劑混合。藥學上可接受的運載體包括適合用于制備液化形式的制劑的水和其它運載體。此外，可采用輔助性穩定劑、增稠劑和著色劑。用于本發明方法的API可配制成微膠囊、納米顆粒或納米懸液。這些制劑的總體方案參見(例如)《醫學和藥學中的微膠囊和納米顆粒》(MicrocapsulesandNanoparticlesinMedicineandPharmacy),MaxDonbrow編，CRCPress(1992)和Bosch等(1996)、DeCastro(1996)和Bagchi等(1997)。通過提高表面積與體積的比率，這些制劑尤其適用于遞送17-AAG或另一種相對不溶的API。可用維生素E或其PEG化衍生物將17-AAG配制成乳液。用這些賦形劑配制制劑的一般方法參見Quay等(1998)和Lambert等(2000)。可將17-AAG溶解于含有乙醇(優選少于P/。w/v)的水溶液中。加入維生素E或PEG化維生素E。然后去除乙醇，以形成可配成用于靜脈內或口服給藥途徑的預制乳劑。可用于本發明方法的藥物制劑的另一種制備方法包括將17-AAG或其它API包入脂質體中。形成作為藥物遞送載體的脂質體的方法是本領域熟知的。適合本發明的合適方法包括Boni等(1997)、Straubinder等(1995)和Rahman等(1995)(紫杉醇)以及Sonntag等(2001)(大環內酯)所述的方法，已作必要改動。在可用于這些制劑的各種脂質中，值得注意的是磷脂酰膽堿和聚乙二醇-衍生的二硬脂酰磷脂酰-乙醇胺。可與載體物質混合產生一種或單位劑型的17-AAG或其它API取決于所治療的對象和具體的給藥方式。例如，用于靜脈內的制劑的17-AAG含量約為1mg/mL-25mg/mL，優選約為5mg/mL，更優選約為10mg/mL。一般在臨用前用注射用水(WFI)、生理鹽水或5%右旋糖溶液將靜脈內制劑稀釋約2-30倍。在許多情況下，稀釋約5-10倍。在本發明方法的一個實施方式中，將17-AAG配制成含有溶解于載體的17-AAG的藥物溶液制劑，所述載體含有(i)第一組分即乙醇；(ii)第二組分即聚乙氧基化蓖麻油；和(iii)選自丙二醇、PEG300、PEG400、甘油或其組合的第三組分，如Zhong等(2005)所述。可以采用的另一種17-AAG的制劑是基于二甲亞砜("DMSO")和卵磷脂的制劑，如Tabibi等(2004)所述。然而，由于DMSO的某些特性(氣味、患者副反應)，與本文所述不含DMSO的制劑相比不大優選這種制劑。可用于本發明方法的其它l7-AAG制劑參見Ulm等(2003)、Ulm等(2004)、Mansfield等(2006)、Desai等(2006)和Isaacs等(2006)。在另一實施方式中，在用無菌WFI給藥前，可以1:7地稀釋藥物制劑USP(—份未稀釋的藥品加入6份無菌WFI)。在無菌控制條件下進行稀釋。以17-AAG為例，最終稀釋的藥品濃度至少為1.00mg/mL，如約1.43、約2.00或約10.00mg/mL。根據BSA和指定劑量，17-AAG或其它API的劑量需要將不同體積的藥品加入混合包中。可計算過充盈，以說明給藥裝置的損失。優選地，含有稀釋藥品的藥物制劑的pH為中性，該溶液為高滲溶液，約為600mOsm。該藥物制劑可于-2(TC避光保存。在混合之前使藥品升溫至室溫，然后通過溫和顛倒混合。稀釋后，該藥品應該在室溫下穩定約10小時以上(稀釋度1:7)。下述實施例描述了上面以小結方式詳細描述的本發明。實施例1—用17-AAG和硼替佐米聯合治療多發性骨髓瘤患者在開放標記、劑量遞增的臨床試驗中檢測本發明方法。設計試驗以確定在持續3周的給藥周期的第1、4、8和11天通過60分鐘IV輸注與硼替佐米共同給藥的17-AAG的MTD。此試驗的劑量遞增組分從硼替佐米推薦劑量的約50%開始給藥，用前述制劑將17-AAG起始劑量設定為稍低于單一藥物劑量的50。/。(100mg/m2)。然后逐漸增加各藥物的劑量，直到可以確定此聯合用藥的MTD。每兩個治療周期(大約每6周)后評價疾病反應。根據按照標準化骨髓瘤反應評價系統作出的客觀腫瘤評價在穩定或有反應的患者中測定抗腫瘤效力。在開始治療前28天內進行所有基線成像腫瘤評價，然后每6周(約每兩個周期)再評價一次。檢測具有對應腫瘤的所有患者(CR或PR)，以確認第一次記錄反應后6周的反應。按照Blad6等(1998)的指南制訂所用的反應標準。僅在第一個治療周期中獲得藥代動力學(PK)和藥效學(PD)樣品。在藥物相關性嚴重副作用(SAEs)和/或4級毒性的情況下，額外收集PK樣品。此研究中征集的MM患者是先前至少經歷兩種抗癌治療方案失敗的患者。征集標準為(1)患者年齡至少為18歲；(2)KPS行為狀態〉70。/。；(3)有MM的組織學證據但不一定能檢測到疾病，但一定在治療開始前28天內評價疾病；(4)根據先前進行的任何化療、手術或放療的所有副作用，轉變為NCICTCAE(3.0版)級另^2;禾口(5)17-AAG給藥10天內產生以下實驗室結果血紅蛋白28g/dL，絕對嗜中性粒細胞計數21.5x109/L，血小板計數275x109/L，血清膽紅素^2x正常值上限(ULN)，AST^2.5xULN，血清肌酸酐^2xULN。按照表1所述的KPS行為狀態標準對患者進行分級。如果患者有以下情況如先前存在神經病、懷孕、哺乳、最近接受過化療等，則將該患者排除在本研究之外。患者也得滿足某些血液學條件，才能符合征集的條件。17-AAG在血漿中與蛋白質高度結合(在采用人血的體外實驗中結合率約為95%);然而，藥物結合的血漿蛋白和結合親和力未知。征集到試驗中后，對接受已知與蛋白質高度結合的藥物的患者進行密切臨床監測。體外研究表明，細胞色素P450酶參與了17-AAG代謝。沒有用17-AAG和作為細胞色素P450-3A4的底物、抑制劑或誘導物的藥物進行正式的藥物相互作用研究。雖然將任何藥物與17-AAG同步使用沒有禁忌征，但將17-AAG與蛋白質高度結合的藥物(如華法林)和作為細胞色素P450-3A4的底物、抑制劑或誘導物的藥物聯用時應該小心。不將激素避孕藥施用于征集到該試驗中有懷孕可能的婦女。在整個研究期間(從第一次給藥前3周直至治療評價結束)不允許有其它試驗藥。PK評價包括以下測試僅在第一次和第四次給予17-AAG后(第1天和第11天)收集用于測定母體化合物及其初級代謝物的濃度的血樣。收集的PK樣品總數約為115mL全血(7-8大湯匙)。如果患者顯示出可能與藥物有關的SAE，額外收集PK樣品。用留置導管從輸注部位的對側手臂抽血，以避免多次扎針。就17-AAG樣品而言，將5mL血液抽入含有肝素作為抗凝劑的真空管中。將該血液試管顛倒數次，立即將該試管置于冰水中，等待血漿分離。如果用導管采血，在每次樣品采集之前完全抽出導管中的液體并丟棄。在采集和離心過程中，將血漿樣品保持在冰水上。將血漿樣品分入兩個凍存管中，然后冷凍于-70。C。通過經驗證的LC/MS法測定17-AAG和其初級代謝物17-AG的血漿濃度。(Egorin等，1998)。PD評價包括以下測試(l)臨床相關性將感興趣特定毒性的情況(如嚴重性、持續時間和可逆性)與PK參數(如清除率、接觸值、清除半衰期、最大血漿濃度和目標血漿濃度以上的時間)作比較。這些毒性包括肝臟毒性和胃腸道毒性。(2)多發性骨髓瘤細胞(i)MM細胞表面表達IL-6R、胰島素樣生長因子受體-l(IGF-lR);(ii)MM細胞中磷酸化-Akt、Akt、Hsp90和Hsp70的總表達；和(iii)基因表達概況分析以鑒定有關藥物敏感性和耐受性的其它可能生物標記物。純化在基線(第一次給予研究藥物前至多3周)、第四次輸注17-AAG和硼替佐米(第11天)后3-4小時和治療結束后(或在發生進行性疾病時)獲得的骨髓(BM)吸出物中的MM細胞。用磁珠技術根據CD138表達從BM吸出物中純化MM細胞，并經流式細胞術分析確認>95%是CD138+MM細胞。流式細胞術分析用熒光素異硫氰酸酯(FITC)-偶聯的抗-人IGF-1R單克隆抗體(R&DSystems,Minneapolis,MN)評價了IGF-1R表面表達。免疫印跡分析評價了磷酸化-Akt、AKT、Hsp90和Hsp70的總水平。(3)外周血單核細胞獲得PBMC(治療前以及第1天和第11天靜脈內推注硼替佐米后4小時)，并通過Western印跡檢測Hsp70、Hsp90和其它蛋白的改變。在PBMC分離中，將血液采集到不含防腐劑的肝素(袋)中，通過Ficoll-P叫ue密度梯度離心分離PBMC。(4)按照Lightcap等(2000)的方法評價蛋白酶體功能的抑制百分數(通過測定20S蛋白酶體活性評價)。輸注前，第1天和第11天IV推注硼替佐米1、4和24小時后獲得全血裂解物。(5)血漿將全血(每個時間點8cc)收集到含有EDTA的試管中。進行治療結束評價的方法如下。計劃的治療時間為24周(8個周期)。在沒有進行性級別或不可接受的治療相關毒性的情況下治療患者。對接受至少一個記錄的研究藥物和因為任何原因(除了死亡)停止治療的患者進行治療結束評價。在最后一次接受17-AAG后長達28天進行該評價，其包括體檢，測量體重和生命指征，記錄KPS行為狀態、血液學概況、血凝和化學/電解質測定，尿液分析，評價患者目前的醫學狀況和發生的臨床副作用(如果有)。只有在停藥前4周以上進行先前評價時，才進行腫瘤評價(骨髓瘤實驗室檢驗，評價髓外疾病、BM吸出物和其它射線照相分級，如果適合)。在每3周的兩周中(第1、4、8和11天)，每周通過快速注射(3-5秒)以遞增劑量(以mg/m2計)靜脈內給予硼替佐米(購得)兩次。按照藥品說明書(納入本文作參考)給予硼替佐米。硼替佐米的起始劑量為0.7mg/m2;根據觀察到的毒性增加劑量。該劑量不超過它在此群體中進行單一藥物治療中的推薦劑量(1.3mg/m2)。每3周的2周中(第1、4、8和11天)，每周在先前用藥后靜脈內給予劑量遞增的17-AAG(以mg/mH十)兩次，輸注時間為60分鐘。對于體表面積(BSA)大于2.4m2的患者，用最大BSA2.4ii^計算劑量。17-AAG的制備和給藥如下。在藥瓶中將17-AAG溶解于30%丙二醇、20%克列莫佛8￡1^和50%乙醇，至濃度為10mg/mL。藥品裝在帶有20mm瓶口的20mL1型透明玻璃瓶中(含有200mg/小瓶)。用灰色20mm涂有特氟龍的血清塞和白色20mm旋出式白色噴漆旋蓋密封該藥瓶。用無菌WFI給藥前1:7稀釋USP(l份未稀釋的藥品加入6份無菌WFI)。在無菌控制條件下進行稀釋。最終稀釋的藥品濃度約為1.43mg/mL。用玻璃真空容器或相容性非PVC、非DEHP(二(2-乙基己基)鄰苯二甲酸酯)IV混合包制備17-AAG。兩種系統需要不含PVC和DEHP的給藥裝置和嵌入式0.22pm濾器或采用含有這種濾器的增設裝置。由于17-AAG的光敏性，建議避光保存。對于玻璃收集單位，相容性設備的例子包括Baxter1A8502(或等效裝置)，該設備采用裝有0.22pm空氣濾清器的增設裝置(Baxter1C8363或等效裝置)的Baxter2C1106或等效IV給藥裝置。對于非PVC、非DEHP混合袋，相容性混合袋可以是空的或預先裝有250ccWFI。相容性混合袋的例子包括Excel(250ccWFI;由聚烯烴制成)。根據個體患者的體表面積和指定劑量，17-AAG的劑量需要將不同量的藥品加入混合包中。可計算過充盈，以說明給藥設備的損失。如上所述，每3周的2周中，每周靜脈內給予17-AAG兩次。將遞送的總劑量四舍五入至毫克。按如下方法進行在先用藥治療。在每次輸注17-AAG之前，所有患者都經過在先用藥。根據17-AAG治療后可能觀察到的克列莫佛②誘導性超敏反應以及該超敏反應的類型和嚴重性的病史，對每個患者采用合適的在先用藥方案。標準的在先用藥方案是在輸注17-AAG之前30分鐘先施用氯雷他定lOmgp.o.、法莫替丁20mgp.0.和甲潑尼龍40-80mgIV或地塞米松10-20mgIV。根據研究者的判斷選擇抗組胺劑和皮質類固醇、給藥途徑、17-AAG輸注之前的劑量，但類似于其它含有克列莫佛@的產品(如泰素@，紫杉醇)的預防作用。如果患者同步接受氯潑尼松則降低皮質類固醇的劑量。高劑量在先用藥方案是在輸注17-AAG之前至少30分鐘先施用苯海拉明50mgIV、法莫替丁20mgIV和甲潑尼龍80mgIV或地塞米松20mgIV(或者分成10mg口服劑量在輸注前6小時和12小時給藥)。研究藥物的劑量和方案的選擇如下。患者在3周周期中的第1、4、8和11天接受治療。通過靜脈內快速(3-5秒)推注進行由硼替佐米組成的治療，然后通過60分鐘靜脈內推注(IV)給予17-AAG。如果劑量較高時給藥體積需要，則將17-AAG的輸注延長到90或120分鐘。在初次給藥中，將17-AAG和硼替佐米給予所有患者，除了恰好在進入研究前硼替佐米治療失敗的患者。最初的患者組接受劑量為0.7mg/m2的硼替佐米，然后靜脈內輸注劑量為100mg/r^的17-AAG(第1組)。隨后按照每個下述遞增方案征集一組患者劑量為1.0mg/n^的硼替佐米和劑量為100mg/m2的17-AAG(第2組)，劑量為1.0mg/m2的硼替佐米和劑量為150mg/m2的17-AAG(第3組)，劑量為1.3mg/m2的硼替佐米和劑量為150mg/m2的17-AAG(第4組)，劑量為1.3mg/m2的硼替佐米和劑量為220mg/m2的17-AAG(第5組)，劑量為1.3mg/m2的硼替佐米和劑量為275mg/m2的17-AAG(第6組)，劑量為1.3mg/m2的硼替佐米和劑量為340mg/m2的17-AAG(第7組)。每組分配三名患者。如果在可進行評價以決定增加劑量的組中沒有觀察到DLT("可評價"定義為在三周中接受了四次治療或由于藥物相關毒性而退出)，則評價下一劑量水平。如果一名或多名患者發生DLT，那么將患者組增加到六名可評價患者。如果患者組的六名可評價患者中兩名或多名進入DLT組，則認為已經超過MTD;所有其它試驗都在前一劑量水平上進行。如果六名患者中不超過1名患者發生DLT，則評價下一劑量水平。一旦確定MTD后，再征集一定數量的患者，以使MTD劑量水平的患者總數達到12名。按照這種方案治療18名患者。在這18名患者中，9名男性、9名女性。他們的年齡中值為63歲(年齡范圍是44-81歲)。他們的亞型是72%為IgG，28%為IgA。KPS中值為90(范圍是70-100)。在先化療次數為4次(范圍是2-16次)。在先化療包括硼替佐米、沙利度胺、VAD/VdD、美法侖和來那度胺等。先前移植的患者數量為12(67%)。有髓外疾病的患者數量為4(22%)。基線(3-2微球蛋白的中值為3.7(范圍是1.4-9.7)。診斷為MM以來的時間的中值為61個月(范圍是14-238個月)。三名患者(第1組；患者101-103)首先接受0.7mg/m2硼替佐米(3-5秒靜脈內快速推注)，然后接受100mg/r^劑量的17-AAG(—小時靜脈內輸注)，每3周的2周中每周給藥2次(第一個治療周期的第1天和第11天)。患者平均進行3.3個治療周期。在這三名患者中沒有觀察到DLT。這三名患者治療后，在接受了5個治療周期的一名患者中觀察到穩定性疾病(以此劑量水平治療的所有患者的33%)，在兩名患者中觀察到進行性疾病(以此劑量水平治療的所有患者的67%)。三名患者(第2組；患者201、203和204)首先接受1.0mg/m、朋替佐米(3-5秒靜脈內快速推注)，然后接受100mg/m2劑量的17-AAG(—小時靜脈內輸注)，每3周的2周中每周給藥2次(第一個治療周期的第1天和第11天)。患者平均進行11.3個治療周期。在這三名患者中沒有觀察到DLT。這三名患者治療后，治療導致所有三名患者出現MR(以此劑量水平治療的所有患者的100%)。三名患者中一名是沒有用過硼替佐米的患者。兩名患者進行了至少9個治療周期。一名患者以此劑量水平進行9個治療周期，然后增加到劑量水平3進行第IO個治療周期，之后觀察到MR。此患者至少進行了13個治療周期。八名患者(第3組；患者301-308)首先接受1.0mg/n^硼替佐米(3-5秒靜脈內快速推注)，然后接受150mg/m2劑量的17-AAG(—小時靜脈內輸注)，每3周的2周中每周給藥2次(第一個治療周期的第1天和第11天)，以下是例外情況三名患者的輸注時間為1.6-2小時(患者303、305和306)。患者平均進行4.3個治療周期(治療仍在進行)。通過6.0或更多個治療周期，一名患者被鑒定為4級肝臟毒性、肝臟中出現1.4cm的漿細胞瘤、肝臟和心臟中出現淀粉樣病變以及ALT/AST升高。由于無關原因(心臟淀粉樣病變)造成一名患者死亡。在兩名患者中觀察到nCR。這兩名患者中一名是沒有用過硼替佐米的患者。在一名患者中觀察到MR。在兩名患者中觀察到SD。這兩名患者中，一名是沒有用過硼替佐米的患者。觀察到一名患者發生PD。兩名患者無法評價。四名患者(第4組；患者401-404)首先接受1.3mg/m2硼替佐米(3-5秒靜脈內快速推注)，然后接受150mg/m2劑量的17-AAG(—小時靜脈內輸注)，每3周的2周中每周給藥2次(第一個治療周期的第1天和第U天)。患者平均進行4.5個治療周期(治療仍在進行)。一名患者被鑒定為3級胰腺炎(評價仍未確定)。觀察到三名患者發生MR。這三名患者中，一名是沒有用過硼替佐米的患者。在這些患者中觀察到的其它藥物相關性毒性包括1-2級轉氨酶升高、惡心、疲勞、腹瀉、貧血、肌痛、皮疹和輸液反應、以及血小板減少。按照如下安排采集血液進行血漿藥物濃度的PK分析給藥前，開始輸注后30分鐘，恰好在輸注結束(EOI)之前以及輸注后5、15、30分鐘和1、2、4、8和24小時。對于每位患者(除了患者#301)而言，到第4天母體化合物和代謝物都檢測不到，在各3周周期的第11天重復PK。血漿概況顯示，母體藥物(17-AAG)快速清除，代謝物(17-AG)清除較慢。第1組和第2組的所有六名患者都接受100mg/mh7-AAG。六名患者的一名(患者103)的72小時樣品中檢測到代謝物，濃度為10.2ng/mL。圖1禾卩2顯示了這兩個劑量水平下17-AAG和17-AG的血漿濃度概況。輸注結束后，第1天和第11天給藥的17-AAG和17-AG的血漿概況類似。鑒于第11天未收集輸注結束樣品，曲線可能無法區分。第11天給藥前血漿中也有代謝物濃度。用Kinetica軟件4.3版(Innaphase，ChampssurMarne，法國)憑借非隔室分析法分析相對于時間的血漿濃度的結果，以確定17-AAG和17-AG的藥代動力學概況。患者平均結果和統計學小結見表2(17-AAG)和3(17-AG)。表2(第11部分)一17-AAG的PK參數<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>頁表2(第III部分)一17-AAG的PK參數<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>表3(第I部分)一17-AG的PK參數<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表3(第II部分)一17-AG的PK參數<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表2和3的數據的統計學分析顯示，17-AG的AUC^與母體藥物17-AAG的AUC的平均比例為82.5±90.5%。劑量為100mg/m2時平均總接觸值(17-AAG加17-AG)為7,513±3,891ng/mL*h，劑量為150mg/n^時其值為10,313±6,076ng/mL*h。圖5顯示了代謝物和母體藥物的AUC,s的相對值。圖6顯示了代謝物和母體藥物加在一起的總接觸值。劑量與總接觸值的相關性不是非常強，R2=0.682。17-AAG的終末清除半衰期為2.43±0.9小時，17-AG為6.52±1.74小時。17-AAG的全身總清除率為51.58±16.16L/h或28.83±8.51L/h/m2。17-AAG的分布容積為Vz=174.88±68.2L或98.05±36.41L/m2和Vss=153.44±62.3L或85.25±31.60L/m2。前四個劑量組的結果表明，硼替佐米對17-AAG代謝無影響。藥效學分析評價蛋白酶體功能顯示，輸注結束時檢測的4個劑量水平的蛋白酶體功能下降了37%-50%(圖11)。也在槳細胞(CD138+)中觀察到誘導凋亡和AKT水平降低(圖12)。AKT是骨髓瘤細胞中上調的對骨髓瘤細胞生長和進展至關重要的Ras/Raf/MAPK胞內通路上的信號轉導蛋白。在該細胞凋亡(程序性細胞死亡)前觀察到線粒體電位異常。在沒有用過硼替佐米和硼替佐米-難治性患者中觀察到抗骨髓瘤活性。觀察到患者201、204、307和308的血清和尿中各種蛋白質減少。患者201先前接受過VAD治療、每周美法侖-皮質類固醇治療和VAD與沙利度胺⑧聯合治療。在所有前述治療后都觀察到疾病進展。患者201進行了9個治療周期，產生MR。圖7和表4顯示了血清M-峰、總IgA和尿M-蛋白降低。_表4—患者201血清和尿蛋白讀數階段M-峰(g/dL)總lgA(mg/dL)尿M-蛋白(mg/24h)基線3.946,62097.2周期l后4.577,23060.2周期2后3395,7700周期3后3,064,5500周期4后2.93ND0周期5后2.734,0000周期6后2.673,9200周期7后3.4ND0患者204先前接受過MP和Velcade/Doxil/沙利度胺⑧治療。患者204進行了至少6個治療周期，產生MR。圖8和表5顯示了患者204的血清M-峰和總IgG降低。患者307先前接受過VAD、依托泊甙/環磷酰胺、干擾素、沙利度胺⑧和硼替佐米/Doxil/沙利度胺⑧治療。患者307進行了至少8個治療周期。圖9顯示患者307的血清M-峰降低。治療患者307導致nCR。患者308先前接受過地塞米松和沙利度胺⑧/地塞米松治療。患者308進行了至少8個治療周期。圖10顯示患者308的血清M-峰和尿M-蛋白降低。治療患者308導致nCR。雖然參照具體實施方式詳細描述了本發明，但本領域技術人員應認識到，修改和改進都屬于本發明范圍和構思。目前通過書面描述的方式描述本發明，但本領域技術人員應了解，可以各種實施方式來實施本發明，上述說明的目的僅為說明，而非限制所附權利要求書。參考文獻Abrahams等(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA93(18):9420-9424，"ThestructureofbovineFl-ATPasecomplexedwiththepeptideantibioticefrepeption.，，(與肽抗生素efrepeption復合的牛F1-ATP酶的結構)Adams等(1998)US5,780,454Adams等(2000)US6,083,903Adams等(2001)US6,297,217BlAdams等(2003)US6,617,317BlAdams等(2004)US6,747,150B2Adams等(2005)，WO2005/063714。Bagatell等(2001)C//".Owcer7:2076-2084，"DestabilizationofSteroidReceptorsbyHeatShockProtein90-bindingDrugs:ALigand-independentApproachto表5—患者204血清蛋白質讀數階段M-峰(g/dL)總IgG(mg/mL)ooooo65o274o767221118416465322后后后后^123441W1f一一J二_」、二"，一-「，基期期期欺周周周周HormonalTherapyofBreastCancer.，，(用熱休克蛋白90-結合性藥物使類固醇受體去穩定乳腺癌激素治療的配體非依賴性方法)。Bagchi等(1997)US5,662,883.Banerji等(2005)/.C7/".(9wco/.23(1):4152-4161，"PhaseIPharmacokineticandPharmacodynamicStudyof17-Allylamino,17-DemethoxygeldanamycininPatientswithAdvancedMalignancies."(17-烯丙基氨基,17-去甲氧基格爾德霉素在晚期惡性腫瘤患者中的I期藥代動力學和藥效學研究)。Blad6等(1998)///aemoto/.102(5):1115隱23，"CriteriaforEvaluatingDiseaseResponseandProgressioninPatientswithMultipleMyelomaTreatedbyHigh-doseTherapyandHaem叩oieticStemCellTransplantation."(用高劑量療法和造血干細胞移植治療的多發性骨髓瘤患者的疾病反應和進展的評價標準)。Boni等(1997)US5,683,715。Bosch等(1996)US5,510,118。Burger等(2004)顛'-C露er/>喂15(4):377-387，"17-(Allylamino)-17-demethoxygeldanamycinactivityinhumanmelanomamodels."(17-(烯丙基氨基)-17陽去甲氧基格爾德霉素在人黑色素瘤模型中的活性)。Chen等(2005)C獻erC/zemW/ze廣55:237-243，"Populationpharmacokineticanalysisof17-(allylamino)-17-demethoxygeldanamycin(17AAG)inadultpatientswithadvancedmalignancies."(17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格爾德霉素(17AAG)在晚期惡性腫瘤成年患者中的群體藥動學分析)。Cusack等(2005)ASCO2005GastrointestinalCancerSymp.，摘要編號276，"NPI-0052,anoveloraladministeredmarineproductthatpromoteschemosensitivityinacoloncancerxenograftmodelviaproteasomeinhibition."(NPI-0052，一禾中通過蛋白酶體抑制促進結腸癌異種移植瘤模型的化學敏感性的新型口服給藥的海洋產物)DeCastro(1996)US5,534,270。Desai等(2006)WO2006/034147A2。Egorin等(1998)Omcw7^.58:2385-2396，"Metabolismof17-(allylamino)-17-demethoxygeldanamycin(NSC330507)bymurineandhumanhepaticpreparations."(通過鼠和人肝制備物代謝17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格爾德霉素(NSC330507))。Goetz等(2005)丄C/f".0"co/.23(6):1078-1087，"PhaseItrialof17-allylamino-17-demethoxygeldanamycininpatientswithadvancedcancer."(17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格爾德霉素在晚期癌癥患者中的I期臨床試驗)。Grem等(2005)'C//".6>"co/.23(9):1885-93，"PhaseIandpharmacologicstudyof17-(allylamino)-17-demethoxygeldanamycininadultpatientswithsolidtumors."(17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格爾德霉素在實體瘤成年患者中的I期和藥理研究)。Gupta(2004)US6,713,446B2Hideshima等(2001)CancerRes.61，3071-6，"TheProteasomeInhibitorPS-341InhibitsGrowth,InducesApoptosis,andOvercomesDrugResistanceinHumanMultipleMyelomeCells."(蛋白酶體抑制劑PS-341抑制人多發性骨髓瘤細胞生長、誘導其凋亡并克服其耐藥性)。Hostein等(2001)C""cw/ey.61:4003-4009，"InhibitionofSignalTransductionbytheHsp90Inhibitor17-Allylamino-l7-demethoxygeldanamycinResultsinCytostasisandAp叩tosis."(Hsp90抑制劑17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格爾德霉素抑制信號轉導導致細胞生長抑制和凋亡)。Isaacs等(2006)PCT申請號PCT/US2006/007210。Jiang禾口Shapiro,(2002)尸rac.P3ra^肌Me".為」woc.C做cer摘要1645，"17-AAGinducesRb-dependentGlarrestinlungcancercelllines."(17-AAG在肺癌細胞系中誘導Rb依賴性Gl阻滯)。Kadlcikova等(2004)/尸w/w/.85(6):365-371，"EffectsofproteasomeinhibitorsMG132,ZL3VS,andAdaAhx3L3VSonproteinmetabolisminsepticrats.，，(蛋白酶體抑制劑MG132、ZL3VS和AdaAhx3L3VS對腐敗大鼠的蛋白質代謝的影響)。Kisselev和Goldberg(2001)Oiem.5/o/.8:739-758，"Proteasomeinhibitors:fromresearchtoolstodrugcandidates."(蛋白酶體抑制劑從研究工具到候選藥物)。Lambert等(2000)WO00/71163。Lightcap等(2000)C7/".46(5)，673-683，"ProteasomeInhibitionMeasurements:ClinicalApplication."(蛋白酶體抑制測定臨床應用)。Mansfield等(2006)US2006/0067953Al。Mitsiades等(2001)Blood98:795-804，"TRAIL/Apo21ligandselectivelyinducesapoptosisandovercomesdrugresistanceinmultiplemyeloma:therapeuticapplications."(在多發性骨髓瘤中TRAIL/Apo21配體選擇性誘導凋亡并克服耐藥性治療應用)。Mitsiades等(2003)Omcer63(20):6689-96，"FluorescenceImagingofMultipleMyelomaCellsinaClinicallyRelevantSCID/NODinVivoModel:BiologicandClinicalImplications."(多發性骨髓瘤細胞在臨床相關性SCID/NOD體內模型中的熒光成像生物和臨床應用)。Mitsiades等(2006)Blood107(3)，1092-1100，"Antimyelomaacti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7-AAG前藥給予所述對象的步驟。34.如權利要求33所述的方法，其特征在于，所述劑量的17-AAG或17-AAG前藥使每個劑量中17-AG的AUC總約為2,300-19,000ng/mL*h。。35.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述硼替佐米的各個劑量在約1.0-1.3mg/m2的范圍內。36.如權利要求l所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶體抑制劑是肽醛。37.如權利要求l所述的方法，其特征在于，所述肽醛是肽硼酸。38.如權利要求37所述的方法，其特征在于，所述肽硼酸是二肽硼酸。39.如權利要求38所述的方法，其特征在于，所述二肽硼酸是硼替佐米。40.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述給藥步驟導致在所述對象的外周血單核細胞中誘導HSP70。41.如權利要求40所述的方法，其特征在于，在所述給藥步驟后l天可以觀察到所述HSP70誘導。42.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述給藥步驟導致所述對象的骨髓吸出物細胞中CD138+細胞凋亡增加。43.如權利要求42所述的方法，其特征在于，在所述給藥步驟后4小時可以觀察到所述CD138+細胞凋亡增加。44.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述給藥步驟導致所述對象的骨髓吸出物細胞中總AKT減少。45.如權利要求44所述的方法，其特征在于，所述給藥步驟后4小時可以觀察到所述總AKT減少。全文摘要本發明提供了一種治療對象的多發性骨髓瘤的方法，即將17-烯丙基氨基-17-去甲氧基-格爾德霉素或17-氨基格爾德霉素或者17-AAG或17-AG的前藥與蛋白酶體抑制劑聯合給予所述對象。文檔編號A61K31/395GK101166526SQ200680014005公開日2008年4月23日申請日期2006年4月26日優先權日2005年4月29日發明者A·L·漢納,G·F·克羅普,J·M·謝里爾,R·G·小約翰遜,周憶清申請人:高山生物科學股份有限公司