同載尼莫司汀及其增效劑的抗癌緩釋劑的制作方法

專利名稱：同載尼莫司汀及其增效劑的抗癌緩釋劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同載尼莫司汀及其增效劑的抗癌緩釋劑，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑。
背景技術(shù)：
關(guān)于癌癥的研究雖已取得了較大進(jìn)展，但其死亡率仍居各種常見死因的前列。在我國每年約有160萬人患癌癥，近130萬人死于癌癥，占總死亡人數(shù)的五分之一。癌癥發(fā)病率逐年上升且呈年輕化趨勢，有資料顯示，在不到20年的時間里，我國癌癥發(fā)病率上升了69％，死亡率增長了29.4％。據(jù)世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計，到2020年全球癌癥發(fā)病率將增加百分之五十，發(fā)病人數(shù)增到一千五百萬。因此，探討一種有效的治療癌癥的方法或藥物已經(jīng)成為目前研究的熱點。
尼莫司汀(ACNU)作為新的治療腦腫瘤的首選藥物之一，而用ACNU局部緩釋治療腦腫瘤的經(jīng)驗更表明，局部藥物緩釋保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度，降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用，給膠質(zhì)瘤化療帶來了希望。之所以用ACNU，特別是局部緩釋ACNU治療腦腫瘤，其理論根據(jù)在于(1)由于受血腦屏障的限制，許多化療藥物在常規(guī)靜脈化療時不能進(jìn)入腦內(nèi)或藥物濃度難以達(dá)到或保持長時間有效濃度，相比之下，ACNU受血腦屏障的限制較?。?2)90％的病人于手術(shù)后1年內(nèi)在局部(2cm內(nèi))復(fù)發(fā)；(3)ACNU作為最常用的治療腦腫瘤的藥物，對腦腫瘤具有相對高的選擇性。
然而ACNU對其它腫瘤的作用尚不清楚。

發(fā)明內(nèi)容基于以上對現(xiàn)有技術(shù)的考查，本發(fā)明對腦腫瘤和某些顱外腫瘤進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)尼莫司汀對骨腫瘤、胸腺癌、淋巴瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌及直腸癌等實體腫瘤具有較為明顯的作用效果。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)ACNU局部緩釋對甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實體腫瘤也具有很好的治療作用。
許多實體腫瘤對尼莫司汀的敏感性雖然不差，但在治療過程中容易產(chǎn)生耐藥性。其主要原因是難于腫瘤局部獲得并維持有效藥物濃度。單純提高全身給藥量又受到全身毒性反應(yīng)的限制。為有效提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度，人們研究了含抗癌藥物的緩釋系統(tǒng)，包括緩釋微球(囊)(見(中國專利號ZL00809160.9；申請?zhí)?1109723.6)、Ciftci K等“用含氟尿嘧啶的聚乳酸微球治療實體腫瘤及藥物釋放的研究”《藥物開發(fā)技術(shù)》(Pharm Dev Technol.)2(2)151-60，1997)、緩釋植入劑(見中國專利號ZL96115937.5；ZL97107076.8)等。然而，固體緩釋植入劑(中國專利號ZL96115937.5；ZL97107076.8)和現(xiàn)有的如用于治療腦腫瘤(ZL00809160.9)緩釋微球或美國專利(US5,651,986)均存在不容易操作、療效差、并發(fā)癥多等問題。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明中提到的藥物與尼莫司汀合用可使其抗癌作用相互加強(以下將能使尼莫司汀抗癌作用相互增加的藥物稱之為尼莫司汀增效劑)。除此之外，將尼莫司汀或尼莫司汀與其增效劑的組合包裝于特定的緩釋輔料中并配以特殊溶媒制成抗癌藥物緩釋注射劑不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術(shù)操作的并發(fā)癥、降低病人的費用。尼莫司汀增效劑除能抑制腫瘤生長外，還能增加腫瘤細(xì)胞對抗癌藥物的敏感性。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，并非所有輔料都能有效釋放ACNU。藥用輔料有數(shù)百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將本發(fā)明中所選的尼莫司汀在人體或動物體內(nèi)于一定的時間內(nèi)緩慢釋放的藥用輔料必須經(jīng)過大量創(chuàng)造性的實驗才能獲得，特定的緩釋輔料與可被緩釋藥物的組合的選擇需要經(jīng)過大量的創(chuàng)造性勞動才能確定。相關(guān)數(shù)據(jù)，特別是動物體內(nèi)釋放特性的數(shù)據(jù)需要經(jīng)過體內(nèi)外大量創(chuàng)造性的實驗才能獲得，并非經(jīng)過有限的實驗就能確定，具有非顯而易見性。
局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，發(fā)明了含尼莫司汀及其增效劑的抗實體瘤緩釋劑。該治療實體腫瘤的緩釋劑，包括抗癌有效成分和藥用緩釋輔料。
其中抗癌有效成分為尼莫司汀(ACNU，Nimustine)與尼莫司汀增效劑的組合，尼莫司汀增效劑包括選自羥基喜樹堿的拓?fù)涿敢种苿?H-過氧環(huán)磷酰胺(4H-HCY)和或多西他賽(Docetaxel，紫杉特爾)。
藥用緩釋輔料包括下列之一或其組合外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠和蛋白膠之一或其組合。
在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、雙脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。對羧苯氧基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
聚乳酸的分子量峰值可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以5,000-50,000為優(yōu)選，以10,000-30,000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為1000到30000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到30000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為20000到30000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。所用聚乳酸以左旋聚乳酸(L-PLA)為優(yōu)選。左旋聚乳酸(L-PLA)粘度范圍IV(dl/g)為0.2～0.8，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度范圍為55～65℃，熔點175～185℃。
除上述緩釋輔料外，還可選用其他物質(zhì)見美國專利(專利號4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等；也可添加其它藥用輔料，如但不限于，充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
緩釋劑的一種形式是緩釋注射劑，緩釋注射劑的組成為(A)緩釋微粒，由如下的成分組成，重量百分比抗癌有效成分0.5-60％緩釋輔料40-99.5％助懸劑 0.0-30％(B)溶媒，分為普通溶媒和特殊溶媒。
其中，普通溶媒包括蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液；特殊溶媒為含助懸劑的普通溶媒，助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、吐溫20、吐溫40和吐溫80之一或其組合。當(dāng)緩釋微粒(A)中的助懸劑為“0”時，溶媒(B)為特殊溶媒。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)55-90％的PLA；(2)50-90％的PLGA；(3)50-85％的聚苯丙生；(4)55-90％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)55-90％的EVAc；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
抗癌有效成分在緩釋劑中的重量百分比為1-50％，5-30％為優(yōu)選，10-25％為最優(yōu)選。尼莫司汀與尼莫司汀增效劑的重量比為1-9∶1-5。
緩釋注射劑的抗癌有效成分優(yōu)選下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚乳酸；
(D)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚苯丙生；(G)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生；(H)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚苯丙生；(I)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生。
緩釋注射劑的抗癌有效成分進(jìn)一步優(yōu)選為下列之一，均為重量百分比(A)5-30％的尼莫司汀和5-20％的羥基喜樹堿；(B)5-25％的尼莫司汀和5-35％的4H-過氧環(huán)磷酰胺；(C)5-25％的尼莫司汀和5-25％的多西他賽。
緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆粒或球形小丸，然后與注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗癌成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的緩釋輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。為方便注射，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
溶媒的制備則取決于溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液，但必須嚴(yán)格按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質(zhì)及其需要量及注射劑的制備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐溫80(0.1％)溶于生理鹽水中得相應(yīng)溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時)。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關(guān)鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強。這種意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時)。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應(yīng)的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃-30℃時)。此黏度適用于18-22號注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結(jié)合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核-外殼結(jié)構(gòu)，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進(jìn)入體內(nèi)達(dá)到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動性較好的凝膠，可經(jīng)瘤周或瘤內(nèi)注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
本發(fā)明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑?？拱┲踩雱┑挠行С煞挚删鶆虻匕b于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選?？蔀?.1-5mm(粗)×1-10mm(長)的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。
緩釋植入劑的抗癌有效成分優(yōu)選如下，均為重量百分比
本發(fā)明治療實體腫瘤的緩釋劑優(yōu)選下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的尼莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的尼莫司汀和65-85％的聚苯丙生；(G)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生；(H)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚苯丙生；(I)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5-35％的尼莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生。
緩釋植入劑的抗癌有效成分進(jìn)一步優(yōu)選為下列之一，均為重量百分比(A)5-30％的尼莫司汀和5-20％的羥基喜樹堿；(B)5-25％的尼莫司汀和5-35％的4H-過氧環(huán)磷酰胺；(C)5-25％的尼莫司汀和5-25％的多西他賽。
本發(fā)明藥物組合物用于治療實體腫瘤，實體腫瘤包括腦腫瘤、膠質(zhì)瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。如肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。因此，本發(fā)明的應(yīng)用是用于制造治療上述腫瘤的上述各種藥物制劑，其中以針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及緩釋植入劑為優(yōu)選，以緩釋注射劑、緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑為最優(yōu)選。
本發(fā)明治療實體腫瘤的藥物組合物中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。由于本發(fā)明抗癌藥物組合物可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學(xué)治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術(shù)療法合用，從而使其抗癌效果進(jìn)一步加強。當(dāng)與上述非手術(shù)療法合用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可與非手術(shù)療法同時應(yīng)用，也可在非手術(shù)療法實施前幾天內(nèi)應(yīng)用，其目的在于盡可能增強腫瘤的敏感性，從而為根治各種人體及動物原發(fā)和轉(zhuǎn)移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應(yīng)用價值及顯著的經(jīng)濟(jì)和社會效益。
當(dāng)局部應(yīng)用時，該組合物可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤周圍或瘤體內(nèi)，也可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內(nèi)。
本發(fā)明治療實體腫瘤的藥物組合物中主要成份以生物可容性物質(zhì)為支持物，故不引起異物反應(yīng)。支持物體內(nèi)放置后可降解吸收，故不再手術(shù)取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應(yīng)。對實體腫瘤具有明顯的治療作用。
本發(fā)明治療實體腫瘤的藥物組合物中可通過許多方案予以實施，其目的只是為了進(jìn)一步說明，并非對本發(fā)明的實施加以任何限制。
通過如下試驗和實施例對本發(fā)明的技術(shù)方法作進(jìn)一步的描述試驗一、尼莫司汀對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用。
為驗證尼莫司汀對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用，本試驗將尼莫司汀(10ug/ml)加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中(表1)，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)并計算其對腫瘤細(xì)胞生長的抑制率(％)。
腫瘤細(xì)胞生長的抑制率(％)＝((對照組細(xì)胞數(shù)-試驗組細(xì)胞數(shù))/對照組細(xì)胞數(shù))×100％表1
試驗一的結(jié)果表明，尼莫司汀對所試腫瘤的生長均有明顯抑制作用(P＜0.05)。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為實體腫瘤的治療提供了新的選擇。
本發(fā)明治療實體腫瘤的藥物組合物可制成任意劑型或形狀，但以植入的緩慢釋放劑為優(yōu)選。
試驗二、不同方式應(yīng)用尼莫司汀后的局部藥物濃度比較以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至1厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg尼莫司汀。測定不同時間腫瘤內(nèi)藥物含量(％)，結(jié)果表明，尼莫司汀經(jīng)不同方式應(yīng)用后的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑(分子量為15000-25000的PLA為輔料)的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的重要特征。以下的相關(guān)抑瘤試驗進(jìn)一步證實了這一點。
試驗三、不同方式應(yīng)用尼莫司汀后的體內(nèi)抑瘤作用比較以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至0.8厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg尼莫司汀。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果。結(jié)果表明，尼莫司汀經(jīng)不同方式應(yīng)用后的抑瘤作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑(分子量為30000-50000的PLGA(75∶25)為輔料)的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗四、尼莫司汀(緩釋注射劑)的體內(nèi)抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個胰腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下7組(見表2)。第一組為對照，第2到7組為治療組，緩釋注射劑(含1-32％ACNU，分子量為20000-40000的PLA為輔料)經(jīng)瘤內(nèi)注射。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表2)。
表2
以上結(jié)果表明，尼莫司汀緩釋注射劑對實體腫瘤具有明顯的抑制作用，其作用和用藥劑量有關(guān)。
試驗五、尼莫司汀和尼莫司汀增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細(xì)胞包括胰腺癌、食道癌、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將尼莫司汀和尼莫司汀增效劑按1∶1濃度比加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤細(xì)胞生長抑制效果見表3所示。
表3
以上結(jié)果表明，所用尼莫司汀增效劑(4H-HCY(4H-過氧環(huán)磷酰胺)、羥基喜樹堿、多西他賽)及尼莫司汀在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。同樣的效果還見于其他類型腫瘤，如腦膠質(zhì)瘤、骨肉瘤、食道癌、卵巢癌、胰腺癌、腸癌等。
試驗六、尼莫司汀及尼莫司汀增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個肝腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表4)。第一組為對照，第2到10組為治療組，緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置(含5-30％ACNU，分子量為30000-50000的PLGA(50∶50)為輔料)。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表4)。
表4
以上結(jié)果表明，所用尼莫司汀對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，其抑制作用和劑量有關(guān)，當(dāng)與尼莫司汀增效劑(多西他賽)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗七、尼莫司汀和尼莫司汀增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組(尼莫司汀或尼莫司汀增效劑)和聯(lián)合治療組(尼莫司汀和尼莫司汀增效劑)。緩釋注射劑經(jīng)瘤內(nèi)注射。治療后第20天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表5)。
表5
以上結(jié)果表明，所用尼莫司汀及尼莫司汀增效劑(羥基喜樹堿)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用，且呈明顯的量效關(guān)系。
試驗八、尼莫司汀和尼莫司汀增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋注射劑(輔料為分子量為20000-40000的PLA)經(jīng)瘤內(nèi)注射。治療后第20天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表6)。
表6
以上結(jié)果表明，所用尼莫司汀及尼莫司汀增效劑(4H-過氧環(huán)磷酰胺)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用，且呈明顯的量效關(guān)系。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗九、尼莫司汀及尼莫司汀增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個直腸腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表7)。第一組為對照，第2到10組為治療組，緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置(含5-30％ACNU，分子量為20000-40000的PLGA(50∶50)為輔料)。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表7)。
表7
以上結(jié)果表明，所用尼莫司汀增效劑(羥基喜樹堿)對腫瘤細(xì)胞生長均有抑制作用，其抑制作用和劑量有關(guān)，當(dāng)與尼莫司汀聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗十、不同分子量聚乳酸制成的尼莫司汀緩釋植入劑的體內(nèi)釋放比較以大白鼠為試驗對象，分組(3只/組)并于皮下給予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承載的等量尼莫司汀緩釋植入劑。然后分別于1、3、7、14、21、28和35天測藥物于植入劑內(nèi)的剩余量，進(jìn)而得出其體內(nèi)釋放速度(％)。結(jié)果表明，分子量為20000的釋放為1天(10％)、3(26％)、7(54％)、14(80％)、21(90)、28(92)和35(94％)。比較不同分子量聚乳酸制成的尼莫司汀緩釋植入劑的體內(nèi)釋放發(fā)現(xiàn)，隨分子量增加而變慢，以第7天為例，與全身給藥組相比，腫瘤抑制率隨聚乳酸分子量增加而提高，依次為66％(MW5000)、64％(MW15000)、58％(MW25000)、54％(MW40000)和46(MW60000)。
同樣的結(jié)果還見于用聚乳酸為輔料制成的藥物緩釋劑，含有尼莫司汀及其增效劑的組合。
特別注意的是，本發(fā)明的緩釋劑，特別是緩釋注射劑操作簡單方便、重復(fù)性好。不僅療效好，毒副作用小。
不同的藥物包裝與不同的生物降解高分子的是要特性不同。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，最適宜于本發(fā)明藥物緩釋的緩釋輔料為外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白膠之一或其組合。上述緩釋輔料制成的緩釋制劑無明顯的藥物突釋現(xiàn)象；最適宜的助懸劑為甲基纖維素、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40、土溫80之一或其組合。
總之，所用尼莫司汀和各種尼莫司汀增效劑單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。因此，本發(fā)明所述的有效成分為尼莫司汀與任意一種尼莫司汀增效劑。含有以上有效成分的藥物可制成緩釋微球，進(jìn)而制成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優(yōu)選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過以下實施方式得以進(jìn)一步說明。上述實施例及以下實施例只是對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，并非對其內(nèi)容和使用作任何限制。
具體實施方式
實施例一將90mg的藥用輔料分子量為20000-40000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入10mg尼莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含含重量百10％尼莫司汀的的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為360cp-480cp(25℃-30℃時)。皮下釋藥時間為25-30天。
實施例二將75mg的藥用輔料分子量為30000-50000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入25mg尼莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百25％尼莫司汀的治療實體腫瘤的抗癌體內(nèi)植入劑。皮下釋藥時間為35-40天。
實施例三將95mg的藥用輔料分子量為25000-40000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入5mg尼莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百5％尼莫司汀的治療實體腫瘤的抗癌體內(nèi)植入劑。皮下釋藥時間為30-40天。
實施例四如實施例一到三所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5％的尼莫司汀和95％的聚乳酸；(B)10％的尼莫司汀和90％的聚乳酸；(C)20％的尼莫司汀和80％的聚乳酸；(D)35％的尼莫司汀和65％的聚乳酸；實施例五將稱重70mg的藥用輔料分子量為15000-35000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA，70∶25)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入10mg尼莫司汀和20mg多西他賽，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含含重量百10％尼莫司汀和20％多西他賽的的微粉，然后懸浮于含1.0％羧甲基纖維素鈉和5％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為420cp-480cp(25℃-30℃時)。大鼠皮下釋藥時間為40-45天。
實施例六將稱重80mg的藥用輔料分子量為25000-50000的PLGA(50∶50)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入15mg尼莫司汀和5mg多西他賽，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比15％尼莫司汀和5％多西他賽的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。大鼠皮下釋藥時間為45-50天。
實施例七將稱重70mg的藥用輔料分子量為20000-40000的PLGA(75∶25)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入15mg尼莫司汀和15mg多西他賽，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比15％尼莫司汀和15％多西他賽的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。大鼠皮下釋藥時間為50-55天。
實施例八如實施例五到七所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5％的尼莫司汀和25％的多西他賽；(B)10％的尼莫司汀和30％的多西他賽；(C)15％的尼莫司汀和20％的多西他賽；(D)20％的尼莫司汀和10％的多西他賽；(E)25％的尼莫司汀和5％的多西他賽。
實施例九將稱重95mg的藥用輔料分子量為35000-55000的乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入5mg尼莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比5％尼莫司汀的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。大鼠皮下釋藥時間為35-45天。
實施例十如實施例九所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比將稱重70mg的藥用輔料分子量為35000-55000的乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加有機溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入10mg尼莫司汀和20mg羥基喜樹堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％尼莫司汀和20％羥基喜樹堿的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。大鼠皮下釋藥時間為35-45天。
實施例十一將80mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷∶葵二酸重量比為50∶50)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和10mg羥基喜樹堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含含重量百10％尼莫司汀和10％羥基喜樹堿的微粉，然后懸浮于含2.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為400cp-520cp(25℃-30℃時)，在體外生理鹽水中的釋藥時間為20-30天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-35天。
實施例十二如實施例十一所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5％的尼莫司汀和35％的羥基喜樹堿；(B)10％的尼莫司汀和25％的羥基喜樹堿；(C)15％的尼莫司汀和15％的羥基喜樹堿；(D)20％的尼莫司汀和10％的羥基喜樹堿；
(E)25％的尼莫司汀和5％的羥基喜樹堿。
實施例十三將稱重80mg的藥用輔料分子量為20000-40000的PLGA(50∶50)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和10mg 4H-過氧環(huán)磷酰胺，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％尼莫司汀和10％4H-過氧環(huán)磷酰胺的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為20-30天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天。
實施例十四將稱重70mg的藥用輔料分子量為40000-60000的PLGA(75∶25)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入15mg尼莫司汀和15mg多西他賽，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比15％尼莫司汀和15％多西他賽的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-30天。
實施例十五將稱重70mg的藥用輔料分子量為20000-40000的PLA放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和20mg羥基喜樹堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％尼莫司汀和20％羥基喜樹堿的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-35天。
實施例十六如實施例十三到十五所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5％的尼莫司汀和35％的多西他賽；(B)10％的尼莫司汀和25％的多西他賽；(C)15％的尼莫司汀和15％的多西他賽；(D)20％的尼莫司汀和10％的多西他賽；(E)25％的尼莫司汀和5％的多西他賽。
實施例十七將稱重80mg的藥用輔料分子量為20000-40000的PLGA(50∶50)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和10mg 4H-過氧環(huán)磷酰胺，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％尼莫司汀和10％4H-過氧環(huán)磷酰胺的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-40天。
實施例十八將稱重80mg的藥用輔料分子量為40000-60000的PLGA(75∶25)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入15mg尼莫司汀和5mg4H-過氧環(huán)磷酰胺，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含重量百分比15％尼莫司汀和5％4H-過氧環(huán)磷酰胺的的微粉，然后懸浮于含5％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為480cp-540cp(25℃-30℃時)，在體外生理鹽水中的釋藥時間為25-30天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天。
實施例十九將稱重80mg的藥用輔料分子量為20000-40000的PLA放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入5mg尼莫司汀和15mg4H-過氧環(huán)磷酰胺，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比5％尼莫司汀和15％4H-過氧環(huán)磷酰胺的治療實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-20天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天。
實施例二十如實施例十七到十九所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5％的尼莫司汀和35％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺；(B)10％的尼莫司汀和25％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺；(C)15％的尼莫司汀和15％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺；(D)20％的尼莫司汀和10％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺；(E)25％的尼莫司汀和5％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺。
實施例二十一如實施例一到實施例十九所述的治療實體腫瘤的藥物組合物，所不同的是所用藥用輔料選自下列之一或其組合a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；b)分子量為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；
d)聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的重量百分比為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋白。
所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20。
另外，腫瘤內(nèi)植入尼莫司汀緩釋植入劑對膠質(zhì)瘤、骨腫瘤、淋巴瘤、胃癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、直腸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實體腫瘤也具有很好的治療作用，其作用明顯超過尼莫司汀腹腔注射組和尼莫司汀局部注射組。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為實體腫瘤的治療藥物提供了又一新的選擇。
權(quán)利要求
1.一種尼莫司汀及其增效劑的抗癌緩釋劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分0.5-60％緩釋輔料40-99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。其中，抗癌有效成分為尼莫司汀與選自羥基喜樹堿、4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺或多西他賽的尼莫司汀增效劑的組合；緩釋輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)聚苯丙生；d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、碘甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)。
2.如權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑的輔料選自下列之一，均為重量百分比(A)70-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)70-95％的聚乳酸；(C)65-95％的聚乳酸；(D)75-95％的聚苯丙生；(E)65-95％的乙烯乙酸乙烯酯共聚物。
3.如權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑抗癌有效成分還選自下列之一，均為重量百分比(1)5-25％的尼莫司汀和5-35％的4H-過氧環(huán)磷酰胺；(2)5-25％的尼莫司汀和5-35％的羥基喜樹堿；(3)5-25％的尼莫司汀和5-35％的多西他賽。
4.如權(quán)利要求1和2所述之治療實體瘤的緩釋注射劑，其特征在于聚乳酸的分子量峰值為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-60000。
5.如權(quán)利要求1和2所述之治療實體腫瘤的緩釋注射劑，其特征在于聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物的分子量峰值為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000；聚乙醇酸與羥基乙酸的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。
6.如權(quán)利要求1和2所述之治療實體腫瘤的緩釋注射劑，其特征在于其聚苯丙生中對羧苯基丙烷與葵二酸的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。
7.如權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于其抗癌有效成分制成緩釋植入劑。
8.如權(quán)利要求7所述之緩釋植入劑，其特征在于抗癌有效成分還選自下列之一，均為重量百分比(1)5-25％的尼莫司汀和5-35％的4H-過氧4H-過氧環(huán)磷酰胺；(2)5-25％的尼莫司汀和5-35％的羥基喜樹堿；(3)5-25％的尼莫司汀和5-35％的多西他賽。輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)聚苯丙生；d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
9.如權(quán)利要求7所述之緩釋植入劑，其特征在于抗癌有效成分和輔料選自下列之一，均為重量百分比(A)70-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)70-95％的聚乳酸；(C)65-95％的聚乳酸；(D)75-95％的聚苯丙生；(E)65-95％的乙烯乙酸乙烯酯共聚物。
10.如權(quán)利要求1所述之緩釋劑，用于制備治療包括腦腫瘤、膠質(zhì)瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的實體腫瘤的藥物。
全文摘要
一種同載尼莫司汀及其增效劑的抗癌緩釋劑由緩釋輔料和抗癌有效成分組成，抗癌有效成分包括尼莫司汀與其增效劑(多西他賽、羥基喜樹堿或4H－過氧環(huán)磷酰胺)。緩釋注射劑的的黏度為10cp－650cp(20℃－30℃時)。其抗癌有效成分還可制成緩釋植入劑。緩釋輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將抗癌有效成分效緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應(yīng)的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該抗藥物組合物不僅能夠降低抗癌有效的全身毒性反應(yīng)，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法的治療效果。實體腫瘤包括膠質(zhì)瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、肺癌、腸癌、乳腺癌等。
文檔編號A61K31/505GK1919172SQ20061020089
公開日2007年2月28日 申請日期2006年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月22日
發(fā)明者孔慶忠, 劉玉燕, 鄒會鳳, 張紅軍, 俞建江, 張婕 申請人:濟(jì)南康泉醫(yī)藥科技有限公司