治療頭痛的天舒分散片及制備方法和質量控制方法

專利名稱：治療頭痛的天舒分散片及制備方法和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種治療頭痛的天舒分散片及制備方法和質量控制方法，屬于中藥的技術領域。
背景技術：
中醫治療偏頭痛有效的藥物主要是川芎和天麻制劑，其中天舒制劑由天麻及川芎兩味中藥組成，具有活血平肝的功效，主要用于血瘀所致血管神經性頭痛，廣泛用于防治各類頭痛，研究表明，使用天舒制劑可以緩解疼痛程度，縮短頭痛發作時間，尤其能夠較理想的控制發作次數，很大程度上減輕患者常年被頭痛困擾的痛苦，且無明顯的不良反應。目前市場上應用較多的為天舒膠囊，但膠囊劑存在患者服藥后局部藥物濃度過高等不足之處，而分散片是近年來發展起來的一種速效制劑，有“固體口服液”之美譽，集片劑與口服液體制劑的優點于一身，并克服了兩者的不足，能解決現有膠囊劑存在的問題。另外，為了全面考察和控制產品的質量，保證藥品的臨床療效，需要制定合理而穩定的質量控制標準。

發明內容
本發明的目的在于提供一種治療頭痛的天舒分散片及制備方法和質量控制方法，本發明在現有技術的基礎上，將天舒膠囊改劑為分散片，克服了現有膠囊劑的不足，更有利于藥物吸收，顯著提高了其生物利用度，更加方便患者用藥；并且研究制定了科學合理的質量控制方法，以有效地控制和提高產品質量。
本發明是這樣構成的它是用川芎784g、天麻196g和交聯聚乙烯吡咯烷酮100g、低取代羥丙基纖維素77g、微粉硅膠18g、微晶纖維素200g、硬脂酸鎂3g、阿司帕坦2g制備而成的。
天舒分散片的制備方法為取川芎和天麻粉碎、混合，用90％乙醇回流提取兩次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇并濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏；藥渣加水煎煮兩次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏，與上述清膏合并，真空干燥，粉碎，過80目篩；與低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素及阿司帕坦混合均勻，用95％乙醇制軟材，20目篩網制粒，于60℃±5℃干燥，干顆粒用20目篩網整粒，整粒后的顆粒中加入硬脂酸鎂，混合均勻，壓片，包裝，即得。
天舒分散片的質量控制方法為所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中天麻和川芎的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中川芎所含阿魏酸的含量測定。
天麻的鑒別方法是以天麻素對照品為對照，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法；川芎的鑒別方法是以川芎對照藥材為對照，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
川芎中阿魏酸的含量測定方法是以阿魏酸對照品為對照，以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H10O4計，不得少于0.25mg。
本發明所述質量控制方法包括性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；鑒別(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查分散均勻性 取本制劑2片，置20℃±1℃的100ml水中，振搖3分鐘，應全部崩解并通過二號篩；溶出度 取本制劑，照中國藥典2005年版二部附錄XC溶出度測定法第三法，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液適量，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液；照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量；限度為含量的70％，應符合規定；其他 應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H10O4計，不得少于0.25mg。
中醫認為肝陽上亢，淤血內阻為血管性頭痛的主要發病機理。治則平肝潛陽熄風，通竅活絡化淤。本制劑由川芎、天麻兩味藥物制成，其中川芎具有較強活血化淤作用，能擴張腦血管，改善腦部血液循環，降低血小板凝集及粘附功能，從而減少血管活性物質(緩激肽、5-羥色胺等)的釋放，緩解血管痙攣，減輕或解除頭痛發作。天麻具有平肝熄風作用，藥理實驗表明天麻具有明顯鎮痛、鎮靜及降壓作用，能提高機體抗缺氧能力及改善微循環。兩者合用具有活血行氣，平肝和絡，祛風止痛的作用，主要用于血瘀所致血管神經性頭痛，癥見頭痛日久，痛有定處，或兼頭暈，夜寐不安，舌質暗或瘀斑。
與現有技術相比，本發明分散片具有下列優點崩解時間短，分散狀態佳；藥物溶出迅速，吸收快，生物利用度高；生產設備與普通片劑相同，適宜于工業化大生產；服用方便且方法多樣，可以直接吞服或在水中分散后與果汁、牛奶等并服，尤其適合老、幼及吞咽困難的患者；生產、攜帶、運輸方便，質量穩定。此外，本發明質量控制方法精密度高，重現性好，測量結果準確，可有效保證該制劑的臨床療效。
本申請人進行了一系列的實驗研究，以保證本發明制劑的制備工藝和質量控制方法科學、合理、可行，從而使該制劑具有良好的療效。
一、制備工藝研究1.提取加水量及加醇量的確定試驗方法取一個處方量藥材，分別加12倍、10倍、8倍、6倍量的水提取及90％乙醇提取，以出膏率為評價指標，選擇最佳加水及加醇量，試驗結果如下

試驗結果表明，采用加10倍量90％乙醇及水提取最為合適，其出膏率明顯高于加8倍量、6倍量提取時的出膏率，與加12倍量的提取出膏率無顯著差別，因此確定提取加水量及加醇量分別為10倍量。
2.制劑工藝處方的篩選表1制劑處方工藝篩選

制法將以上各方除硬脂酸鎂外，其余各味均勻混合，分別加如上表所述潤濕劑制軟材，用20目篩制粒，60℃±5℃烘干，20目篩整粒，混入硬脂酸鎂，壓片，結果表明處方4最為理想，因此確定處方4為天舒分散片最終處方，采用處方4進行中試生產，結果成品收得率較高，說明該工藝可行，適合工業化大生產要求，三批中試產品的試驗數據見表2。
天舒分散片最終確定處方如下天舒浸膏粉(一個處方藥材所提)交聯聚乙烯吡咯烷酮100g低取代羥丙基纖維素77g微粉硅膠 18g微晶纖維素200g硬脂酸鎂 3g阿司帕坦 2g共制成1000片，每片重0.70g。
制備工藝取處方量的干浸膏粉，與處方量的低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素及阿司帕坦混合均勻，用95％乙醇制軟材，20目篩網制粒，于60℃±5℃干燥，干顆粒用20目篩網整粒，整粒后的顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻，壓成1000片，包裝，即得。
表2三批中試產品的試驗結果

結論本制劑三批中試產品試驗結果表明，其工藝合理、穩定，成品收得率較高，所得成品經質量檢驗，結果表明均符合規定。
二、毒理學研究天麻浸膏(每支相當生藥7.14g)雄性小鼠1次ip的LD50為0.36ml/10g，相當生藥0.514g/10g；川芎水溶性粗制劑給于小鼠ip和im的LD50分別為65.86與66.42g/kg。川芎嗪小鼠iv的LD50為239mg/kg，連續4wk，動物體重、血象、肝、腎功能和病理組織學檢查均未見明顯異常。
天舒分散片的不同劑量組對小鼠骨髓細胞染邑體和多染紅細胞微核率無顯著性增加，說明該藥物在本實驗所用的劑量范圍內不具有損傷小鼠骨髓細胞的遺傳物質存在。
三、藥效學研究本發明制劑中只含天麻與川芎二味藥材，主要用于治療血管神經性頭痛，二味合用，主要起活血止痛的作用。
天麻的主要藥效學研究ip200mg/kg的香莢蘭醇與香莢蘭素液可減少小鼠自發活動，并在15-30min時呈現鎮靜峰值，提示其具有鎮靜作用；天麻水劑與蜜環菌發酵液對小鼠自主活動均有明顯的抑制作用；天麻水劑、蜜環菌發酵液可減少小鼠進入睡眠時間；香莢蘭醇液、天麻水劑、蜜環菌發酵液、天麻注射液與去天麻甙部分均可延長小鼠睡眠時間；小鼠ip香莢蘭醇液、香莢蘭素液、天麻水劑、蜜環菌發酵液，觀察其對戊四氮引起的驚厥現象，均可提高半數驚厥量CD50；天麻多糖具有增強機體非特異性免疫和細胞免疫的作用；天麻多糖在組織培養上對水泡性口炎病毒(VSV)有直接抑制作用。
川芎的主要藥效學研究川芎有明顯的鎮靜作用。川芎揮發油少量時對動物大腦的活動具有抑制作用，而對延腦呼吸中樞、血管運動中樞及脊髓反射中樞具有興奮作用。川芎煎劑分別給大、小鼠ig均能抑制其自發活動，使戊巴比妥鈉引起的小鼠睡眠時間延長，并能對抗咖啡因(20mg/kg)的興奮作用，但不能對抗戊四氮所致的大鼠驚厥。川芎水提液及其生物堿能擴張冠狀和血管，增加冠脈血流量，改善心肌缺氧狀況，麻醉犬iv川芎嗪后，冠脈及腦血流量增多，冠脈、腦血管及外周阻力降低；川芎嗪也能明顯增加大鼠的心輸出量，降低外周阻力，并降低肺血管阻力；川芎、川芎總生物堿和川芎嗪能使麻醉犬血管阻力下降，使腦、股動脈及下肢血流量增加；川芎嗪延長在體外ADP誘導的血小板凝聚時間，對已聚集的血小板有解聚作用。
四、質量控制方法研究(一)樣品及對照藥來源樣品本申請人自制，批號為050201、050202、050203。
阿魏酸對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號0773-9910。
天麻素對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號0807-9903。
川芎對照藥材來源于中國藥品生物制品檢定所，批號0918-200004。
(二)性狀本制劑為干浸膏粉加適量輔料，經制粒壓片而成，經多批樣品試制，結果其外觀性狀均為棕黃色至棕褐色片，因此，天舒分散片質量標準性狀項下規定為藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀。
(三)鑒別參考國家食品藥品監督管理局國家藥品標準WS3-134(Z-022)-2001(Z)天舒膠囊鑒別項下內容，用薄層的方法對本制劑主藥天麻、川芎進行鑒別。
1、天麻的薄層鑒別(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取天麻素對照品，加甲醇制成每ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(3∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)點樣量的選擇經實驗選擇供試品溶液與對照品溶液各點樣5μl、10μl，結果發現供試品溶液與對照品溶液點樣5μl時斑點較好，較為清晰。故本標準對照品溶液與供試品溶液選用5μl作為點樣量。
(3)專屬性實驗取缺天麻的陰性樣品0.501g，按上法操作制成陰性供試品溶液，展開后在對照品處無相應斑點，說明陰性樣品對本實驗無干擾。
2、川芎的薄層鑒別(1)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材1g，同法制成對照相藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)點樣量的選擇經實驗選擇供試品溶液與對照品溶液各點樣2μl、5μl、10μl，結果發現供試品溶液與對照品溶液點樣2μl時斑點較好，較為清晰。故本標準對照品溶液與供試品溶液選用2μl作為點樣量。
(3)專屬性實驗取缺川芎的陰性樣品0.5088g，按上法操作制成陰性供試品溶液，展開后在對照品處無相應斑點，說明陰性樣品對本實驗無干擾。
(四)檢查1、溶出度檢查本品為分散片，故制訂溶出度檢查項。
(1)儀器與試藥RCZ-813藥物溶出儀；RZQ-8A溶出儀自動取樣器。
樣品來源浙江大德藥業有限公司提供(批號050201、050202、050203)。
(2)溶出介質的選擇取本制劑(批號050201)，照溶出度測定法(中國藥典2005年版二部附錄XC第三法)，分別以水、0.1mol/L鹽酸溶液、0.5％十二烷基硫酸鈉溶液200mL為溶出介質，轉速為每分鐘100轉，依法操作，分別在2、5、10、15、20、30、45、60分鐘時，取溶液3ml，濾過，取續濾液作為供試品溶液，同時補充相應的溶出介質3ml。照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量。結果見表3。
表3溶出介質選擇

由表3可見，水與0.5％十二烷基硫酸鈉溶液的溶出百分率基本一致，而0.1mol/L鹽酸溶液的溶出百分率略低，故溶出介質選用水。
(3)溶出方法的選擇由于本制劑含阿魏酸較低，故選用第三法。
(4)轉速的選擇取本制劑(批號050201)，照溶出度測定法(中國藥典2005年版二部附錄XC第三法)，以水200mL為溶出介質，轉速分別為每分鐘100轉、75轉、50轉，依法操作，分別在2、5、10、15、20、30、45、60分鐘時，取溶液3ml，取續濾液作為供試品溶液；同時補充水3ml。照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量。結果見表4。
表4轉速的選擇

由表4可見，轉速為每分鐘75轉和100轉的溶出量基本一致，而每分鐘50轉的溶出量較低，故選擇轉速為每分鐘75轉。
(5)溶出度測定方法的驗證1)線性精密量取對照品溶液(15.74μg/ml)0.5、1、3、5、10μl，對照品溶液(0.06295mg/ml)5、10、15、20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積Y(見表5)，以進樣量(μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，作標準曲線，并計算回歸方程得y＝5042.4x-22.804，R2＝0.9999，結果顯示進樣量在0.008～1.259μg范圍內有良好的線性關系。
表5阿魏酸線性關系考察

2)儀器精密度取同一供試品(批號050201)溶液，按含量測定項下的色譜條件，重復進樣6次，測定峰面積，結果RSD為0.66％(n＝6)，見表6。
表6阿魏酸溶出度精密度試驗

3)耐用性(穩定性)取同一供試品(批號050201)溶液，間隔一定時間測定一次，結果RSD＝0.66％(n＝6)，結果見表7。結果顯示供試品溶液在38小時內基本穩定。
表7阿魏酸溶出度 穩定性試驗

4)重復性取本制劑(批號050201)10片，精密稱定，研細，精密稱取0.4g 6份，置100ml量瓶中，加水適量，超聲30分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，照含量測定項下的方法測定，計算每1g制劑中阿魏酸的含量。結果平均為0.468，RSD＝0.64％(n＝6)，見表8。
表8阿魏酸溶出度重復性試驗結果

5)專屬性 取處方量的輔料，模擬溶出度測定方法配制成相應濃度的溶液，照含量測定項下的方法測定，結果在對照品色譜相應位置上無色譜峰。
6)準確度取已知含量樣品(批號050201)6份，精密稱取0.2g，置100ml量瓶中，精密加入阿魏酸對照品適量，加水適量，超聲30分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，照含量測定項下的方法測定，計算含量，結果顯示本制劑阿魏酸含量平均回收率為100.3％，RSD＝1.8％。(見表9)。
表9阿魏酸溶出度含量回收率試驗

(6)溶出度測定方法1)溶出曲線的繪制取本制劑三批(批號050201、050202、050203)，照溶出度測定法(中國藥典2005年版二部附錄XC第三法)，以水200ml為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，分別在2、5、10、15、20、30、45、60分鐘時，取溶液3ml，取續濾液作為供試品溶液；同時補充水3ml。照含量測定項下的方法測定，計算出每片在各時間的溶出量，并繪制溶出曲線圖。結果見表10。
表10天舒分散片累積溶出百分率

2)溶出均一性試驗取本制劑一批(批號050201)，照1)的方法測定，并繪制均一性圖譜，見表11。
表11天舒分散片均一性試驗結果表


(7)三批樣品溶出度測定取本制劑三批(批號050201、050202、050203)，照本發明質量標準中溶出度測定方法測定，三批樣品溶出結果見表12。
表12天舒分散片三批樣品溶出結果

結果表明本制劑20分鐘溶出量均在85％以上，藥典中對溶出度限度的一般要求為70％，故將本制劑的溶出度限度定為70％。
(8)溶出度檢查方法根據上述試驗結果，制定如下天舒分散片溶出度檢查方法取本制劑，照溶出度測定法(中國藥典2005年版二部附錄XC第三法)，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液。照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量。限度為含量的70％，應符合規定。
2、分散均勻性 取本制劑2片，置100ml水中振搖，在20℃±1℃水中，3分鐘應全部崩解并通過2號篩。
表13分散時間考察結果

3、砷鹽 按中國藥典2000年版一部附錄IX F砷鹽檢查法第一法進行檢查，結果符合規定。
表14砷鹽測定結果

4、重金屬 按中國藥典2000年版一部附錄IX E重金屬檢查法第二法進行檢查，結果符合規定。
表15重金屬測定結果

5、片重差異本制劑片重大于0.3g，按中國藥典2000年版一部規定片重差異應在±5％以內，取三批樣品20片檢查，結果見下表16。
表16片重差異檢查結果

本制劑三批樣品測定結果表明，片重差異均在規定范圍之內。
6、微生物限度照微生物限度檢查法(中國藥典2000年版一部附錄XIII)檢查，三批樣品的檢查結果見下表。
表17微生物限度檢查結果

(五)含量測定本制劑由川芎、天麻經加工制成，其中川芎的主要有效成份為阿魏酸，現通過采用高效液相色譜法測定樣品中阿魏酸的含量，可有效控制制劑質量。
1、儀器與試藥HP 1100系列液相色譜儀。
阿魏酸對照品，由中國藥品生物制品檢定所提供(批號為0773-9910)。甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余為分析純。樣品由浙江大德藥業有限公司提供(批號050201、050202、050203)。
2、測定波長的選擇取阿魏酸對照品適量，用DAD檢測器，于200～400nm范圍內進行掃描，結果阿魏酸在323nm波長處有最大吸收，故檢測波長選擇為323nm。
3、色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1％醋酸溶液(40∶60)為流動相；檢測波長為323nm；流速1.0ml/min。在此條件下阿魏酸峰與雜質峰能得到較好分離且缺味無干擾。
4、專屬性對缺川芎空白對照樣品按供試品溶液制備方法同樣制得空白對照液，進樣測定。結果表明，缺川芎空白對照對阿魏酸峰無干擾，證明按本方法測定的阿魏酸成分有專屬性。
5、提取條件的選擇(1)溶劑的選擇 由于阿魏酸易溶于乙醇水溶液，故分別選用了30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、乙醇、甲醇作為提取溶劑，進行比較，結果見表18。
表18提取溶劑的選擇

結果表明，以30％乙醇、乙醇、甲醇為提取溶劑，結果偏低，而用50％乙醇、70％乙醇含量結果基本一致，故選用50％乙醇為提取溶劑。
(2)提取方法的選擇 在確定溶劑的情況下，比較了加熱回流提取和超聲提取方法，結果見表19。
表19提取方法的選擇

結果可見，在超聲20分鐘時含量稍偏低，而其它方法含量基本一致，故選用超聲提取30分鐘。
(3)提取溶劑量的比較 在取樣量相同情況下，比較了不同的提取溶劑量，結果見表20。結果可見，含量基本一致，故提取溶劑量選為50ml。
表20提取溶劑量的選擇

6、線性關系精密量取對照品溶液(15.74μg/ml)0.5、1、3、5、10μl，對照品溶液(0.06295mg/ml)5、10、15、20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積Y(見表21)，以進樣量(μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，并計算回歸方程得y＝5042.4x-22.804，R2＝0.9999，結果顯示進樣量在0.008～1.259μg范圍內有良好的線性關系。
表21阿魏酸線性關系考察

7、儀器精密度取同一供試品(批號050201)溶液，按以上色譜條件，重復進樣6次，測定峰面積，結果RSD為0.66％(n＝6)，見表22。
表22阿魏酸精密度試驗

8、耐用性(穩定性)取同一供試品(批號050201)溶液，間隔一定時間測定一次，結果RSD＝0.66％(n＝6)，結果見表23。結果顯示供試品溶液在38小時內基本穩定。
表23阿魏酸穩定性試驗

9、重復性精密稱取同一批號樣品(批號050201)6份，按本發明質量標準中的方法提取，測定峰面積并計算阿魏酸含量(mg/g)，結果本制劑阿魏酸的平均含量為0.460mg/g，RSD＝0.68％(n＝6)，見表24。
表24阿魏酸重復性試驗

10、準確度精密稱取已知含量樣品(批號050201)9份，精密加入阿魏酸對照品適量，按本發明質量標準中的方法提取，測得峰面積并計算含量，結果顯示本制劑阿魏酸含量平均回收率為99.0％，RSD＝1.3％。(見表25)。
表25阿魏酸含量回收率試驗

11、樣品測定及限度范圍按本發明質量標準中的方法測定三批樣品，結果見表26。根據此三批次數據，故將限度暫訂為每片含川芎以阿魏酸(C10H10O4)計，不得少于0.25mg。
表26阿魏酸含量測定結果

具體實施例方式本發明的實施例1川芎784g、天麻196g和交聯聚乙烯吡咯烷酮100g、低取代羥丙基纖維素77g、微粉硅膠18g、微晶纖維素200g、硬脂酸鎂3g、阿司帕坦2g取川芎和天麻粉碎、混合，用90％乙醇回流提取兩次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇并濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏；藥渣加水煎煮兩次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏，與上述清膏合并，真空干燥，粉碎，過80目篩；與低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素及阿司帕坦混合均勻，用95％乙醇制軟材，20目篩網制粒，于60℃±5℃干燥，干顆粒用20目篩網整粒，整粒后的顆粒中加入硬脂酸鎂，混合均勻，壓成1000片，包裝，即得。本產品飯后口服，一次4片，一日3次。
本發明的實施例2所述質量控制方法包括以下內容性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；鑒別(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查分散均勻性 取本制劑2片，置20℃±1℃的100ml水中，振搖3分鐘，應全部崩解并通過二號篩；溶出度 取本制劑，照中國藥典2005年版二部附錄XC溶出度測定法第三法，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液適量，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液；照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量；限度為含量的70％，應符合規定；其他 應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；
對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H10O4計，不得少于0.25mg。
本發明的實施例3質量控制方法可包括以下內容性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；鑒別取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H10O4計，不得少于0.25mg。
本發明的實施例4質量控制方法可包括以下內容性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；
鑒別取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查溶出度 取本制劑，照中國藥典2005年版二部附錄XC溶出度測定法第三法，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液適量，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液；照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量；限度為含量的70％，應符合規定；其他 應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定。
本發明的實施例5質量控制方法可包括以下內容性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；檢查分散均勻性 取本制劑2片，置20℃±1℃的100ml水中，振搖3分鐘，應全部崩解并通過二號篩；溶出度 取本制劑，照中國藥典2005年版二部附錄XC溶出度測定法第三法，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液適量，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液；照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量；限度為含量的70％，應符合規定；其他 應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H10O4計，不得少于0.25mg。
權利要求
1.一種治療頭痛的天舒分散片，其特征在于它是用川芎784g、天麻196g和交聯聚乙烯吡咯烷酮100g、低取代羥丙基纖維素77g、微粉硅膠18g、微晶纖維素200g、硬脂酸鎂3g、阿司帕坦2g制備而成的。
2.如權利要求1所述治療頭痛的天舒分散片的制備方法，其特征在于取川芎和天麻粉碎、混合，用90％乙醇回流提取兩次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇并濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏；藥渣加水煎煮兩次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成55～60℃相對密度為1.27的清膏，與上述清膏合并，真空干燥，粉碎，過80目篩；與低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素及阿司帕坦混合均勻，用95％乙醇制軟材，20目篩網制粒，于60℃±5℃干燥，干顆粒用20目篩網整粒，整粒后的顆粒中加入硬脂酸鎂，混合均勻，壓片，包裝，即得。
3.如權利要求1或2所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中天麻和川芎的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中川芎所含阿魏酸的含量測定。
4.按照權利要求3所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于天麻的鑒別方法是以天麻素對照品為對照，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法；川芎的鑒別方法是以川芎對照藥材為對照，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑的薄層色譜法。
5.按照權利要求3或4所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
6.按照權利要求3所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于川芎中阿魏酸的含量測定方法是以阿魏酸對照品為對照，以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相的高效液相色譜法。
7.按照權利要求3或6所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H1004計，不得少于0.25mg。
8.按照權利要求3所述治療頭痛的天舒分散片的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀藥物為棕黃色至棕褐色片；有特殊的香氣，味微苦澀；鑒別(1)取本制劑3片，研細，加水15ml使溶解，濾過，濾液用乙醚25ml振搖提取，棄去乙醚液，水層用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取天麻素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2片，研細，加乙醚20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查分散均勻性 取本制劑2片，置20℃±1℃的100ml水中，振搖3分鐘，應全部崩解并通過二號篩；溶出度 取本制劑，照中國藥典2005年版二部附錄XC溶出度測定法第三法，以水200mL為溶劑，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經20分鐘時，取溶液適量，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液；照含量測定項下的方法測定，計算出每片的溶出量；限度為含量的70％，應符合規定；其他 應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶1％醋酸溶液＝40∶60為流動相；檢測波長為323nm；理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取重量差異項下的本制劑，研細，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，稱定重量，于功率300W、頻率50kHz條件下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑每片含川芎以阿魏酸C10H1004計，不得少于0.25mg。
全文摘要
本發明提供了一種治療頭痛的天舒分散片及制備方法和質量控制方法，它是用川芎、天麻和交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、微晶纖維素、硬脂酸鎂、阿司帕坦制備而成的；與現有技術相比，本發明分散片具有下列優點崩解時間短，分散狀態佳；藥物溶出迅速，吸收快，生物利用度高；生產設備與普通片劑相同，適宜于工業化大生產；服用方便且方法多樣，尤其適合老、幼及吞咽困難的患者；生產、攜帶、運輸方便，質量穩定。此外，本發明質量控制方法精密度高，重現性好，測量結果準確，可有效保證該制劑的臨床療效。
文檔編號A61K9/20GK1827147SQ200610200359
公開日2006年9月6日 申請日期2006年4月17日 優先權日2006年4月17日
發明者陳法貴, 王天興, 徐麗君 申請人:浙江大德藥業集團有限公司