治療急性支氣管炎的急支泡騰片及制備方法和質量控制方法

專利名稱：治療急性支氣管炎的急支泡騰片及制備方法和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種治療急性支氣管炎的急支泡騰片及制備方法和質量控制方法，屬于中藥技術領域。
背景技術：
急性支氣管炎屬于中醫“肺咳-暴咳”之范疇。其病位在肺，其發病以風邪為先導，或夾寒、或夾熱，或夾燥。風邪犯肺，肺失宣疏，津液失于輸布而成痰，風痰阻肺，肺氣上逆而致咳嗽。治宜疏風祛邪，理肺止咳，佐以化痰。呼吸道感染則為細菌或病毒感染，常伴有咳嗽、咳痰、哮喘，治療應以抗感染為主，輔以止咳化痰藥物。急支類制劑由魚腥草、四季青、麻黃、前胡、枳殼等中藥組成，具有消炎、止咳、化痰等作用，臨床用于急性支氣管炎、感冒后咳嗽及慢性支氣管炎急性發作有明顯的療效，優于其它化痰止咳類藥物，副作用少，但目前尚未有泡騰片供應；因此，將現有急支顆粒改劑為泡騰片，能顯著提高其生物利用度，更好的提高患者依從性，方便患者用藥。另外，為全面考察和控制本發明制劑的質量，保證其臨床療效，需要制定合理而穩定的質量控制方法。

發明內容
本發明的目的在于提供一種治療急性支氣管炎的急支泡騰片及制備方法和質量控制方法，本發明在現有技術的基礎上，提供了一種溶解快、生物利用度高、穩定性好，且服用方便的新型制劑-泡騰片，并研究制訂了更為科學合理的制備工藝和質量控制方法，以有效地控制和提高產品質量，從而確保其臨床療效。
本發明是這樣構成的它是用魚腥草900g、金蕎麥900g、四季青900g、麻黃180g、紫菀450g、前胡270g、枳殼270g、甘草90g和微晶纖維素170g、低取代羥丙基纖維素100g、微粉硅膠100g、交聯聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氫鈉350g、枸櫞酸255g、富馬酸145g、阿司帕坦10g制備而成的。
本發明所述泡騰片的制備方法為取魚腥草、枳殼加4倍量水提取揮發油4小時，蒸餾后的水溶液濾過，濾液與揮發油分別另器收集，金蕎麥、四季青、麻黃、紫菀、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至60℃相對密度為1.30的稠膏，80℃減壓干燥，粉碎，過80目篩；與微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氫鈉、枸櫞酸、富馬酸混合均勻，加入揮發油密閉，壓片，包裝即得。
泡騰片的質量控制方法為所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中麻黃和枳殼的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中總黃酮的含量測定。
麻黃的鑒別方法是以鹽酸麻黃堿對照品為對照，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑的薄層色譜法；枳殼的鑒別方法是以柚皮苷對照品為對照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
總黃酮的含量測定方法是以蘆丁對照品為對照的紫外分光光度法。
具體的含量測定方法為對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；
測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30O16計，不得少于10mg。
本發明所述質量控制方法包括性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；鑒別(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定對照品溶液的制備精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30O16計，不得少于10mg。
急性支氣管炎基本病機是風邪犯肺，肺失宣疏，津液失于輸布而成痰，風痰阻肺，肺氣上逆而致咳嗽。治宜疏風祛邪，理肺止咳，佐以化痰。呼吸道感染則為細菌或病毒感染，常伴有咳嗽、咳痰、哮喘，治療應以抗感染為主，輔以止咳化痰藥物。本方中魚腥草與四季青清熱解毒，對各種細菌有抑制作用和一定抗病毒作用。金蕎麥清熱解毒，清肺化痰，利咽，用于肺熱咳嗽，咽喉腫痛等。麻黃發汗解表、宣肺平喘，用于外感風寒表實證、咳嗽氣喘等。紫菀化痰止咳，用于咳嗽氣逆，痰吐不爽，肺虛久咳，痰中帶血。前胡散風清熱，降氣化痰；用于風熱咳嗽痰多，痰熱喘滿，咯痰黃稠。枳殼能下氣化痰，有較強的抗過敏活性。甘草具補脾、潤肺、解毒、調和諸藥的功能，主治咳嗽、支氣管炎等。諸藥合用，共奏化痰止咳之功效，具有抗炎、鎮咳、祛痰等作用，對治療急慢性支氣管炎及所引起的咳嗽、多痰等癥狀療效顯著。
與現有技術相比，本發明泡騰片具有溶解快，生物利用度高，穩定性好的優點，而且攜帶和服用方便，尤其適用于兒童、老年人和不易吞服固體制劑的人群使用；其毒性低，使用安全，具有抗炎、鎮咳、祛痰等作用，對治療急慢性支氣管炎及所引起的咳嗽、多痰等癥狀療效顯著，還能提高患者依從性，方便患者用藥。此外，本發明質量控制方法精密度高，重現性好，可操作性強，回收率高，能有效保證該制劑的臨床療效。
申請人進行了一系列試驗來選擇本發明藥物制劑的制備工藝和質量控制方法，以保證其科學、合理、可行，并具有良好的治療效果。
一、制備工藝研究1.揮發油提取時間的確定試驗方法取一個處方量魚腥草及枳殼，提取揮發油，提取時間分別為3小時、4小時、5小時，比較其出油率，確定最佳揮發油提取時間，試驗結果如下


試驗結果表明，揮發油提取時間為4小時，其生藥材中的揮發油已基本提取完全，因此確定揮發油提取時間為4小時。
2.提取加水量的確定試驗方法取一個處方量的藥材，分別加12倍、10倍、8倍、6倍量的水提取，以出膏量(干膏)作評價指標，確定最佳提取加水量，試驗結果如下

試驗果表明，采用加10倍量水提取時較為適宜，其出膏量明顯高于加8倍量及6倍量時的出膏量，與加12倍量水提取時出膏量無明顯差別，因此提取加水量確定為10倍量。
3.制劑處方工藝篩選

結果處方一在壓片過程中稍有粘沖現象；處方二所得片子片面光滑，但崩解不合格，有時會產生粘沖現象，口味較差；
處方三所得片子片面光滑，但崩解不合格，口味較差；處方四所得片子片面光滑，崩解合格，口味適宜。
最終確定急支泡騰片處方及制備工藝如下干浸膏粉(一個處方藥材所提)微晶纖維素 170g交聯聚乙烯吡咯烷酮 250g低取代羥丙基纖維素 100g微粉硅膠100g碳酸氫鈉350g枸櫞酸 255g富馬酸 145g阿司帕坦10g共制成1000片，每片重1.60g。
制備工藝取處方量的干浸膏粉，與低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、碳酸氫鈉、富馬酸、枸櫞酸及阿司帕坦混合均勻，加入揮發油，密閉，壓片，包裝，即得。
4.三批中試產品的試驗結果


結論本制劑三批中試產品試制結果表明，其工藝合理、穩定，成品收得率較高，所得成品經質量檢驗，結果表明均符合規定。
二、本產品的毒理試驗小鼠20只，以本產品2片沖水溶解之后0.88g生藥/ml灌胃，耐受最大濃度為0.4ml/10g，ig給藥，每隔4h給藥1次，1天內共4次。給藥后連續觀察7天，未見小鼠死亡，未見小鼠外觀、活動、飲食、體重等出現異常反應。
此時小鼠灌胃的1日最大耐受量為140.8g/kg.此劑量相當于人臨床1日口服量的320倍，表明該藥毒性較小。
本產品由麻黃、前胡、紫菀等八味中藥組成，方中無毒性藥材，經查閱相關文獻未見該藥的毒副作用與明顯不良反應的報道。
三、本產品的藥效學研究藥效學試驗的結果如下1、抗炎作用本產品對巴豆油所致的小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用，說明該藥對炎癥早期的血管通透性增加、滲出和水腫有顯著的抑制作用。
2、鎮咳作用本產品對小鼠氨水引咳有明顯的鎮咳作用。
3、祛痰作用祛痰實驗(酚紅法)也顯示本產品具有較顯著的祛痰作用，其鎮咳祛痰作用均顯示一定的量效關系。
四、質量控制方法研究(一)樣品及對照品來源樣品本申請人自制，批號為050501、050502、050503。
對照品來源蘆丁對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號0080-9705。
鹽酸麻黃堿對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號171242-200404。
柚皮苷對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號110722-200309。
(二)性狀本制劑為中藥浸膏粉加適量輔料，混合壓片而成，經多批樣品試制，確定本制劑性狀為藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦。
(三)鑒別國家藥品監督管理局新藥轉正標準第二十一冊收載的急支顆粒質量標準鑒別項制訂了麻黃、枳殼兩味藥材的定性鑒別。本發明用薄層的方法對本制劑主藥麻黃、枳殼進行鑒別。
1、麻黃的薄層鑒別(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加鹽酸乙醇溶液(3→10)5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)點樣量的選擇經實驗選擇供試品溶液與對照品溶液各點樣5μl與供試品溶液點樣10μl、對照品溶液點樣5μl，結果發現供試品溶液點樣10μl、對照品溶液點樣5μl時斑點較好，較為清晰。故本標準將供試品溶液點樣10μl、對照品溶液點樣5μl作為點樣量。
(3)專屬性實驗取缺麻黃的陰性樣品約1.1g，同供試品法操作制成陰性供試品溶液，展開后在對照品處無相應斑點，說明陰性樣品對本實驗無干擾。
2、枳殼的薄層鑒別(1)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32∶17∶5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)點樣量的選擇經實驗選擇供試品溶液與對照品溶液各點樣2μl、5μl和對照品溶液點樣5μl、供試品溶液點樣10μl，結果發現供試品溶液與對照品溶液各點樣5μl時斑點較好，較為清晰。故本標準對照品溶液與供試品溶液選用5μl作為點樣量。
(3)專屬性實驗取缺枳殼的陰性樣品約1.0g，同上法操作制成陰性供試品溶液，展開后在對照品處無相應斑點，說明陰性樣品對本實驗無干擾。
(四)檢查1、崩解時限(1)選擇依據本品為泡騰片劑，根據中國藥典2000年版一部附錄X IIA項下關于泡騰片劑的相關描述進行崩解時限檢測。
(2)檢測方法取本制劑1片，置盛有200ml25℃水的250ml燒杯中，有許多氣泡放出，當氣泡停止逸出時，片劑完全分散在水中，無聚集的顆粒剩余。取本制劑6片，同法測定，各片均應在5分鐘內崩解完畢。
(3)檢測結果表1崩解時限檢查結果

2、砷鹽 按中國藥典2000年版一部附錄IX F砷鹽檢查法第一法進行檢查，結果符合規定。
表2砷鹽測定結果

3、重金屬 按中國藥典2000年版一部附錄IX E重金屬檢查法第二法進行檢查，結果符合規定。
表3重金屬測定結果

4、片重差異本制劑片重大于0.3g，按2000年版中國藥典一部規定片重差異應在±5％以內。取本制劑三批樣品20片檢查，結果見下表4。
表4片重差異檢查結果 本制劑三批樣品測定結果表明，片重差異均在規定范圍之內。
5、微生物限度照微生物限度檢查法(中國藥典2000年版一部附錄XIII)檢查，三批樣品的檢查結果見下表。
表5微生物限度檢查結果

(五)含量測定對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含無水蘆丁0.1mg)。
標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、醋酸-醋酸鉀緩沖液(pH5.5)3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄V)，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度。從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得。
本品每片含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計，不得少于10mg。
1、方法(1)儀器與試藥紫外分光光度計756MC(上每第三分析儀器廠)。
蘆丁對照品來源于中國藥品生物制品檢定所，批號0080-9705。
水為重蒸餾水。
供試品(急支泡騰片)批號050501、050502、050503。
(2)檢測波長的選擇量取蘆丁對照品溶液在紫外分光光度計上測定紫外光譜圖，在400～200nm波長范圍內掃描，結果在272nm波長處有最大吸收峰，故選擇272nm作為檢測波長。
(3)對照品溶液的制備
精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含無水蘆丁0.1mg)。
2、提取條件的選擇(1)提取溶劑的比較取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度。從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得。另一份以乙醇作為提取溶劑，同法配制。
表6提取溶劑的比較結果

結果顯示，以甲醇提取比乙醇作為溶劑提取效率更高。因此選用甲醇作為提取溶劑。
(2)提取方法選擇照供試品溶液配制方法，一份超聲1小時另一份回流提取1小時，結果見下表。
表7提取方法的比較結果

結果顯示超聲提取的含量較高，因此選用超聲作為提取方法。
(3)提取次數選擇照供試品溶液配制方法，一份超聲30分鐘一次，殘渣未超聲；另一份超聲30分鐘，殘渣再超聲30分鐘。結果見下表。
表8提取次數的比較結果

結果顯示超聲30分二次可以提取完全。
3、標準曲線的繪制精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、醋酸-醋酸鉀緩沖液(pH5.5)3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄V)，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。回歸方程為Y＝0.0107+0.0407X，r＝0.9998測定結果見下表。
表9線性考察

結果表明蘆丁對照品在4.002μg/ml～20.01μg/ml范圍內吸收度與濃度具有良好的線性關系。
4、精密度試驗取本制劑(批號050501)按上法配制供試品溶液，重復測定5次，結果RSD為0.15％(n＝5)，結果見下表。
表10精密度試驗結果

5、重現性試驗按供試品配制方法配制5份供試品，分別測定每份樣品含量，結果平均含量為10.98mg/g，RSD為0.88％(n＝5)，結果見下表。
表11重現性試驗結果

6、回收率試驗精密稱取一已知含量的供試品(批號050501)，分別添加蘆丁對照品(濃度為8.088mg/ml)1ml，按上述的方法制成供試品溶液，依法進行測定，計算回收率，測定結果見下表。
表12回收率試驗結果

7、穩定性試驗取供試品溶液一份，每隔一定時間測定，測得吸收度如下表，結果表明，供試品溶液在室溫下放置24小時內穩定。測定結果見下表。
表13穩定性試驗結果

8、樣品的測定及含量限度的確定按供試品溶液的配制方法，對十批樣品進行含量測定，以確定其含量限度，十批樣品的含量測定結果見下表。
表14含量測定結果

最后確定其含量限度為10mg/片，應符合規定。
具體實施例方式本發明的實施例1魚腥草900g、金蕎麥900g、四季青900g、麻黃180g、紫菀450g、前胡270g、枳殼270g、甘草90g和微晶纖維素170g、低取代羥丙基纖維素100g、微粉硅膠100g、交聯聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氫鈉350g、枸櫞酸255g、富馬酸145g、阿司帕坦10g取魚腥草、枳殼加4倍量水提取揮發油4小時，蒸餾后的水溶液濾過，濾液與揮發油分別另器收集，金蕎麥、四季青、麻黃、紫菀、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至60℃相對密度為1.30的稠膏，80℃減壓干燥，粉碎，過80目篩；與微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氫鈉、枸櫞酸、富馬酸混合均勻，加入揮發油密閉，壓制成1000片，包裝即得。本產品溶于適量水后口服，一次4片，一日3～4次；小兒酌減。
本發明的實施例2所述質量控制方法包括以下內容性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；鑒別(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定對照品溶液的制備精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30O16計，不得少于10mg。
本發明的實施例3質量控制方法可以包括以下內容性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；鑒別取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；含量測定對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30O16計，不得少于10mg。
本發明的實施例4質量控制方法可以包括以下內容性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；鑒別取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定。
本發明的實施例5質量控制方法可以包括以下內容性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30O16計，不得少于10mg。
權利要求
1.一種治療急性支氣管炎的急支泡騰片，其特征在于它是用魚腥草900g、金蕎麥900g、四季青900g、麻黃180g、紫菀450g、前胡270g、枳殼270g、甘草90g和微晶纖維素170g、低取代羥丙基纖維素100g、微粉硅膠100g、交聯聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氫鈉350g、枸櫞酸255g、富馬酸145g和阿司帕坦10g制備而成的。
2.如權利要求1所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的制備方法，其特征在于取魚腥草、枳殼加4倍量水提取揮發油4小時，蒸餾后的水溶液濾過，濾液與揮發油分別另器收集，金蕎麥、四季青、麻黃、紫苑、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至60℃相對密度為1.30的稠膏，80℃減壓干燥，粉碎，過80目篩；與微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氫鈉、枸櫞酸、富馬酸混合均勻，加入揮發油密閉，壓片，包裝即得。
3.如權利要求1或2所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中麻黃和枳殼的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中總黃酮的含量測定。
4.按照權利要求3所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于麻黃的鑒別方法是以鹽酸麻黃堿對照品為對照，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑的薄層色譜法；枳殼的鑒別方法是以柚皮苷對照品為對照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑的薄層色譜法。
5.按照權利要求3或4所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
6.按照權利要求3所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于總黃酮的含量測定方法是以蘆丁對照品為對照的紫外分光光度法。
7.按照權利要求3或6所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30016計，不得少于10mg。
8.按照權利要求3所述治療急性支氣管炎的急支泡騰片的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀藥物為淡棕色至棕色片；氣香，味甜、微苦；鑒別(1)取本制劑2片，研細，加水30ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調節pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加3→10鹽酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑3片，研細，加水20ml，微熱使發泡完全后冷至室溫，過濾，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關的各項規定；含量測定對照品溶液的制備 精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸鉀緩沖液3ml，加水稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄V分光光度法，在272nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；測定法 取本制劑，研成細粉，取細粉約1.5g，精密稱定，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，合并濾液，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1mol/L三氯化鋁溶液3ml”起，依法測定吸收度；從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得；本制劑每片含總黃酮以蘆丁C27H30016計，不得少于10mg。
全文摘要
本發明提供了一種治療急性支氣管炎的急支泡騰片及制備方法和質量控制方法，它是用魚腥草、金蕎麥、四季青、麻黃、紫菀、前胡、枳殼、甘草和適量輔料制備而成的；與現有技術相比，本發明泡騰片具有溶解快，生物利用度高，穩定性好的優點，而且攜帶和服用方便；其毒性低，使用安全，療效顯著，還能提高患者依從性，方便患者用藥。此外，本發明質量控制方法精密度高，重現性好，可操作性強，回收率高，能有效保證該制劑的臨床療效。
文檔編號A61K9/46GK1827134SQ200610200358
公開日2006年9月6日 申請日期2006年4月17日 優先權日2006年4月17日
發明者陳法貴, 王天興, 徐麗君 申請人:浙江大德藥業集團有限公司