腦功能改善用組合物的制作方法

專利名稱：腦功能改善用組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于改善腦功能的組合物，還涉及這些組合物作為食品以及藥物的用途。
背景技術：
日本本國正迎來急劇的高齡化社會，因此，可以預想到腦血管障礙或癡呆癥的增加。為了預防或治療這些腦疾病，正在進行腦循環/代謝改善藥或抗癡呆藥等具有腦功能改善性的藥物的研究和開發。
近年來，正在多個方面對提高學習能力、記憶力等腦功能的物質進行探索、研究。并且，從預防的觀點出發，還需要可通過日常的飲食生活等攝取的可改善腦功能的物質。
專利文獻1中記載了有效成分為北海道針蘑科(エゾハリタケ科)的蘑菇的子實體或其處理物的腦功能改善劑；專利文獻2中記載了具有改善腦功能、增強學習能力以及增強記憶力的作用的功能性食品，其中含有乳酸菌發酵乳或乳酸菌與酵母的共生發酵乳作為有效成分；專利文獻3中記載了有效成分為茶氨酸(theanine)的腦功能改善劑。
藍莓(blueberry)的果實中含有作為花色素(anthocyanidin)衍生物的花色素苷(anthocyanin)。對于該花色素苷，已知其有視覺功能改善作用、體內的活性氧去除作用、血管強化作用、抗炎癥作用、抗潰瘍作用等藥理效果，在歐美被許可為藥品。
專利文獻4中記載了有效成分為從藍莓的果實提取的花色素衍生物的抗癌劑。
但是，對于藍莓果實的腦功能改善作用，至今還不知曉。
專利文獻1日本特開2002-80390號公報專利文獻2日本特開平9-23848號公報專利文獻3日本特開平8-73350號公報專利文獻4日本特開2003-277271號公報發明內容本發明提供對腦功能的改善或提高有效的組合物。
本發明者為了解決上述課題進行了深入研究，結果發現藍莓衍生物(ブル一ベリ一由來物)具有改善或提高腦功能的功效，從而完成了本發明。
即，本發明涉及腦功能改善用組合物，該腦功能改善用組合物的特征在于，其含有藍莓衍生物。
本發明的組合物具有改善或提高腦功能的效果。
另外，本發明的組合物即使長期服用也無需擔心副作用等，安全性高。
具體實施例方式
本發明中使用的藍莓果實衍生物(ブル一ベリ一果実由來物)，只要是以屬于杜鵑花科越桔屬(vaccinium)的植物(下面還稱為“藍莓”)的果實為原料得到的物質即可，沒有特別限定，例如可以舉出果實本身；果實的細片、粉末(例如將果實干燥后粉末化得到的物質等)、以及它們的懸濁液；果實的提取液、濃縮提取液以及萃取粉末等提取物；以及對該提取物進行精制得到的精制物等。在得到優異的腦功能改善效果的方面，優選藍莓果實提取物，特別優選精制物。
本發明中，這些藍莓果實提取物可以僅使用1種，也可以2種以上并用。
本發明中，作為藍莓的果實，使用了果實本身，但也可以僅使用果肉或果皮。
并且，本發明中，作為藍莓的果實，可以使用純的(生の)果實、果肉或果皮，也可以使用經干燥的果實、果肉或果皮。
作為上述藍莓，只要是屬于杜鵑花科越桔屬的植物即可，沒有特別限定，可以舉出兔眼藍莓(V.shei)、澳洲越橘(V.australe)、北方高叢藍莓(V.corymbosum)、歐洲越桔(V.myrtillus)、或矮叢藍莓(V.angustifolium)，在能夠發揮優異的腦功能改善效果的方面，優選歐洲越桔(又稱為山桑子(bilberry))。
本發明中，作為藍莓果實衍生物，還可以舉出藍莓的果實中含有的成分。作為這種成分，可以舉出花色素衍生物例如花色素、花色素苷、黃烷-3-醇以及黃酮醇糖苷等。
在發揮優異的腦功能改善效果的方面，優選花色素衍生物，特別優選花色素苷。
藍莓的果實中含有的花色素苷具有例如下述通式所示的花色素結構。
通式中，Glyc表示阿拉伯糖、葡萄糖以及半乳糖中的任意一種。并且，通式中R1、R2和R3具有表1所述的組合。
表1 歐洲越桔的果實中所含有的花色素苷共計15種，其是在如表1所示的R1～R3的取代基不同的5種花色素上鍵合有3種糖(阿拉伯糖、葡萄糖以及半乳糖)而成的。另外，下面將這15種花色素苷統稱為“花色素苷”。
可利用公知的方法從藍莓中提取花色素苷。例如，將對藍莓果實進行榨汁得到的藍莓汁吸附到Sep-Pac Plus C18Cartridge柱(Waters公司制)上，利用無菌水(滅菌水)進行清洗，然后用1％的HCl-甲醇溶液洗脫，由此提取純度為90％的花色素苷。
另外，在得到含有大量的花色素苷的藍莓果實提取物的方面，優選利用SEPHADEXLH-20柱(Amersham Pharmacia Biotech AB公司制Cat17-0090-01)進行提取。
將如此得到的提取液進行HPLC(高效液相色譜法)，將色譜圖與作為標準品的花色素苷的色譜圖進行比較，結果確認到在提取液中含有上述15種花色素苷。
另外，用于得到花色素苷的原料不限于對藍莓的果實進行榨汁得到的藍莓汁，也可以使用市售的藍莓粉末或濃縮液。
本發明的組合物可以是藍莓果實衍生物例如藍莓的果實、其提取物、其精制物、或花色素苷本身，也可以含有其它成分，例如改善或提高腦功能的物質等。
作為改善或提高腦功能的物質，優選例如銀杏葉提取物、蜂王漿、靈芝、高麗人參、小球藻(chlorella)、糙米黑醋(玄米黑酢)、蜂膠、芝麻素(sesamin)、姜黃、大豆卵磷脂、DHA、磷脂酰絲氨酸(Phosphatydyl serine)。
本發明的組合物，可以是藍莓果實衍生物例如藍莓的果實、其提取物、其精制物、或花色素苷本身，在不損害本發明的效果的前提下，可以含有賦形劑、甜味劑、酸味劑、增稠劑、香料、色素、乳化劑以及其它通常用于藥品、食品等中的添加劑或材料。
本發明的組合物用于預防和/或治療腦功能障礙。作為這類腦功能障礙，可以舉出例如腦血管性癡呆、阿耳茨海默(Alzheimer)型癡呆以及兩者的混合型等的癡呆癥；健忘癥或記憶障礙(物忘れ)等記憶力下降；理解力下降學習能力下降梅尼埃爾氏病(Meniere′s disease)以及膜下出血、腦出血、腦血栓、腦梗塞以及腦浮腫等腦血管障礙的后遺癥，作為這種后遺癥有例如意識障礙、運動障礙和語言障礙(出血或梗塞引起的腦的相對側的手腳麻痹)、構音障礙(有時伴隨面部神經麻痹)、失語癥、感情障礙、思考障礙、感覺障礙、記憶障礙以及姿勢異常等。尤其，本發明的組合物在預防和/或治療腦功能性障礙方面有用阿耳茨海默型癡呆；梅尼埃爾氏病；以及膜下出血、腦出血、腦血栓、以及腦梗塞的后遺癥。
并且，本發明的組合物不僅可用于預防、治療腦功能障礙，還可用于進一步提高健康人的學習能力、記憶力或反射反應能力等腦功能。
本發明的組合物，可以作為食品或動物用飼料，例如作為健康食品、功能性食品、健康增補食品、特定保健用食品、美容食品、或營養增補食品(補品，supplement)使用。這些食品和動物用飼料也可以是例如茶和果汁等飲料水；以及冰淇淋、果凍、糖、巧克力以及口香糖等形式。并且，也可以是液劑、粉劑、粒劑、膠囊劑或片劑的形式。此處，動物用飼料的動物包括寵物、畜產動物或動物園等中飼養的動物，包括需要預防或治療水腫(むくみ)的全部動物。
本發明的組合物可以用作藥品或準藥品。這些藥品或準藥品，能夠以例如散劑、片劑、包衣片、糖衣片、硬明膠膠囊劑或軟明膠膠囊劑、液劑、乳濁劑、或懸濁劑的形式經口施用，也可以例如以栓劑的形式經直腸施用，或例如以注射劑或輸液的形式施用；例如以軟膏、霜劑、凝膠劑或液劑的形式進行局部或經皮的非經口施用。優選經口施用。
以片劑的形式使用本發明的組合物時，可以使用在藥學上或食品學上許可的各種載體，可以舉出乳糖、葡萄糖等賦形劑；水、乙醇等結合劑；瓊脂末、干燥淀粉等崩解劑；甘油硬脂酸酯、可可油等崩解抑制劑；高嶺土、膨潤土等吸附劑；十二烷基硫酸鈉等吸收促進劑；甘油、淀粉等保濕劑；硼酸末、聚乙二醇等潤滑劑等。
本發明的組合物的攝取量沒有特別限定，可以根據劑型以及使用者或患者等攝取者或攝取動物的年齡、體重以及癥狀進行適當選擇。
例如，作為有效成分量，按花色素苷量計，攝取者或攝取動物的每1kg體重每日經口攝取0.3mg～5mg、優選0.35mg～3kg、更優選0.35mg～1.5mg，能夠得到優異的腦功能改善效果，所以較理想。
攝取時間間隔(期間)可根據攝取者或攝取動物的年齡、癥狀，任意決定。
實施例下面，舉出制造例、制劑例、試驗例等，更詳細具體地說明本發明，但本發明不限于此。尤其，此處沒有給出將本發明的藍莓的果實分成果肉和果皮的實施例，但也可以從果肉分離果皮后分別使用。
使用的藍莓為インデイナ公司出售的商品名為ミルトセレクト的山桑子提取物。該山桑子提取物含有表A所示的花色素苷。另外，結合糖僅為半乳糖和阿拉伯糖。所使用的山桑子含有較多的翠雀素類(36.7％)、花青素類(28.7％)、牽牛素類(14.7％)和翠雀素類的花色素苷。
表A使用的藍莓(野莓wild berry，ウイルドベリ一)的花色素苷的種類和量

1.藍莓果實提取物的制造例1將藍莓(歐洲越桔)的果實榨汁，將得到的藍莓汁吸附到Sep-Pac PlusC18Cartridge柱(Waters公司制)上，利用無菌水進行清洗后，用1％的HCl-甲醇溶液洗脫，從而提取藍莓中的花色素苷。利用蒸發裝置在溫度37℃下對這樣得到的提取液進行濃縮后，將pH調整為7.0，溶解于DMSO(二甲亞砜)中，接著進行干燥，得到藍莓果實提取物。另外，在想得到含有大量的花色素苷的藍莓果實提取物時，還可以使用SEPHADEXLH-20柱(Amersham Pharmacia Biotech AB公司制Cat17-0090-01)。
2.試驗食物的制造根據以下處方，按照慣用的方法，在軟膠囊(OVAL No.6)中填充混合成分，制造了作為試驗食物的制劑例1和空白食物。
表2 試驗食物的組分(1個膠囊中)

膠囊的外皮含有明膠末、甘油、二氧化鈦以及焦糖色素。
3.受試者在試驗實施前進行了生活習慣問卷調查的50歲～70歲的男女中，選擇下述排除標準以外的人作為受試者。
排除標準1)已經常用藍莓的人2)常用以藍莓為主成分的藥品或健康增補食品的人3)正在攝取影響腦功能或血液流動的藥品(華法令等)或健康增補食品的人4)具有糖尿病或在腦功能、血液流動、消化器、胰腺、肝臟或腎臟等方面具有嚴重的疾病的人5)開始本試驗時，正在參加其它臨床試驗的人6)具有食物過敏(包括藍莓)的人7)根據生活習慣問卷調查的結果，判斷為不適合作為受試者的人(例如，因試驗食物組分中的成分引起過過敏的人、具有極端酗酒傾向的人等)8)具有色覺異常或色覺障礙的人9)其它由試驗負責醫生判斷為不合適的人4.試驗日程表試驗以雙盲檢測平行組間比較來進行。
首先，使上述的受試者在試驗期間的初日(試驗第一天)來到醫院，進行問診、身體測量以及腦功能檢查1和2。
接著，將這些受試者分為試驗組和空白組2組，隨機分為23名和24名，開始試驗食物的攝取。
按照每日1次、2個膠囊、連續12周，使試驗組的受試者攝取制劑例1，使空白組的受試者攝取空白食物。另外，在攝取中讓受試者記日記。
從開始攝取起4周后(試驗第28天)、8周后(試驗第56天)、以及12周后(試驗第84天)，分別進行了問診、身體測量以及腦功能檢查2。
5.檢查項目在本試驗中，進行了問診、身體測量以及腦功能檢查。各檢查方法如下。并且，在各檢查中得到的值以平均值±標準誤差表示。
1)問診詢問有無主觀和客觀癥狀。
2)身體測量測量身高、體重、體脂肪、血壓、脈動數以及視力。
3)腦功能檢查作為腦功能檢查，進行了如下的腦功能檢查1和2。檢查在空腹狀態下進行。并且，對于吸煙者，在檢查結束之前禁止吸煙。
腦功能檢查1利用改良長谷川式簡易智力評價等級(HDS-R)進行檢查。
腦功能檢查2利用單詞的想起試驗和叫色心理測驗(stroop test)進行檢查。各試驗按照如下進行。
(i)單詞的想起試驗指示受試者“請盡可能多地說出您所知道的動物的名字”，記錄從舉出的第一個動物的名字到60秒以內列舉的動物的名字。記錄除去了重復的名字的所列舉的動物的名字的數量，作為想起數量。
怎么也想不起第一個動物的名字時，對受試者進行引導，“例如，狗是動物的名字，除此之外還有哪些呢”。若該引導之后也不能想起，經過了30秒時，中止試驗，將想起數量記為0。
動物不限于哺乳類，爬蟲類、鳥類、魚類等名字也加到想起數量中。
同樣地，使受試者分別列舉蔬菜以及以“あ”開頭的單詞，記錄它們的想起數量。
并且，合計這些動物、蔬菜以及以“あ”開頭的單詞的各自的想起數量，將它作為總想起數量。
(ii)叫色心理測驗進行如下4種試驗，記錄讀取所需的時間，4種試驗分別為讀出隨機寫有“紅”“藍”“黑”3種顏色的70個字的文字的試驗(步驟1)；讀出70個“紅”“藍”“黑”3種顏色的試驗(步驟2)；以及將寫有“紅”“藍”“黑”的70個字隨機分配為“紅”“藍”“黑”的3種顏色，讀取其文字的試驗(步驟3)以及讀取其顏色的試驗(步驟4)，記錄讀取所需要的秒數。
4)日記使受試者記載試驗食物的攝取狀況、主觀和客觀癥狀以及其它藥品的服藥狀況。
6.試驗結果1)受試者的背景空白組和試驗組中，分別有24名和23名的受試者(共計47名)參加了試驗，沒有掉隊、中止的人。將參加了試驗的受試者的背景示于表3。在年齡、性別以及基于HDS-R的分數方面在組間未見不均衡(P＞0.05)。另外，統計分析利用方差分析(ANOVA)進行。
表3 受試者的背景

值平均值±標準誤差2)有效性根據試驗第1天、第28天、第56天、第84天的受試者腦功能檢查2的測定值，評價制劑例1對腦功能的有效性。
在同一組內比較試驗第1天、試驗第28天、試驗第56天、第84天時，根據組內的對應的某一t檢驗，檢驗統計分析。顯著性水平為雙側5％。
3)腦功能檢查(i)單詞的想起試驗試驗組中，動物、蔬菜、以及以“あ”開頭的單詞的想起數量以及總想起數量與攝取前相比有所增大(表4)，但在空白組中，未見增加。
(ii)叫色心理測驗試驗組中，步驟1～4的各步驟中的讀取所需的秒數減少(表5)，但在空白組中，未見減少。
如上所述，空白組中沒有看到明顯的效果，但可判斷出制劑例1的腦功能改善效果。
表4 試驗食物對腦功能的作用(單詞的想起試驗)

單位個值平均值±標準誤差()內表示從試驗第1天的值的增加率(％)。
*與試驗第1天的值的比較。t檢驗P＜0.05**與試驗第1天的值的比較。t檢驗P＜0.01表5 試驗食品對腦功能的作用(叫色心理測驗)

單位秒值平均值±標準誤差分別示出下述數值步驟1讀取文字所需的秒數；步驟2讀取顏色所需的秒數；步驟3讀取帶有顏色的文字所需的秒數；步驟4讀取帶有顏色的文字的顏色所需的秒數。
()內表示從試驗第1天的值的減少率(％)。
*與試驗第1天的值的比較。t檢驗P＜0.05**與試驗第1天的值的比較。t檢驗P＜0.015)安全性體重、血壓以及脈動未見異常。在日記中也沒有特別顯示異常的發現。并且，本試驗期間，未見與試驗食物相關的有害現象。
由以上，證實了制劑例1具有安全性。
產業上的可利用性本發明的組合物能夠適用于腦功能的改善。
該組合物能夠在上述的目的中用作藥品或健康食品、健康增補食品、特定保健用食品、或營養增補食品等食品。
權利要求
1.一種腦功能改善用組合物，其中，所述腦功能改善用組合物含有藍莓果實衍生物。
2.如權利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍莓果實衍生物是藍莓的果實。
3.如權利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍莓果實衍生物是花色素苷。
4.如權利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍莓果實衍生物是野莓果實衍生物。
5.如權利要求3所述的腦功能改善用組合物，其特征在于，所述花色素苷含有翠雀素、花青素、牽牛素作為主要成分。
6.一種具有腦功能改善功能的食品，其中，所述食品是將權利要求1～5所述的腦功能改善用組合物添加在食品中而形成的。
7.一種具有腦功能改善功能的補品，其中，所述補品含有權利要求1～5所述的腦功能改善用組合物作為主成分。
8.一種具有腦功能改善功能的藥品，其中，所述藥品含有權利要求1～5所述的腦功能改善用組合物作為主成分。
全文摘要
本發明提供腦功能改善用組合物。本發明所述的腦功能改善用組合物的特征在于，其含有藍莓衍生物。
文檔編號A61P25/00GK1957970SQ20061014279
公開日2007年5月9日 申請日期2006年10月31日 優先權日2005年10月31日
發明者佐佐木憲一 申請人:自然路有限公司