一種中藥注射制劑及其制備方法

專利名稱：：一種中藥注射制劑及其制備方法
技術領域：
：本發明是一種具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的注射制劑及其制備方法，屬于中藥的
技術領域：
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背景技術：
：本方的醫療用途---心腦血管疾病，如冠心病、心肌梗塞、血栓閉塞性腦血管病等是發病率高、致殘率高和病死率也高的疾病，與糖尿病、腫瘤等是目前對人類威脅最大的三大類疾病，其中心腦血管疾病位于這三大疾病之首。目前我國每年有260萬人因心腦血管疾病死亡，所以預防和治療心腦血管疾病已成為一個必要而艱巨的課題。目前臨床上用于治療心腦血管疾病的藥物一般為丹參注射液、生脈注射液、參麥注射液、燈盞花素注射液等，然而這些注射劑療效并不太理想，并且都有不良反應的報道，如莊志銓在《中成藥》1999年第8期上所述的“生脈(及參脈)注射液的不良反應”、李蘭青等在《臨床誤診誤治》2001年第6期發表的“燈盞細辛注射液的不良反應”等臨床報道。本申請人認為產生這種情況的原因可能是1、這些制劑的組方及其配比有待改進，燈盞花素注射液、丹參注射液等作用單一，只能對心腦血管疾病的某一病因病變產生作用，所以療效不理想；2、加工提取不純，有可能使一些成分如色素、鞣質、淀粉、蛋白質等以膠態形式殘留在藥液中，從而發生不良反應。而中藥講究多成分協同作用，使其發揮更好的療效。因此，發明一種療效好、不良反應少、對心腦血管疾病多種病因產生協同治療作用的藥物組方及其制劑、工藝是很有必要的。本申請人從中醫藥傳統理論、病理機制等幾方面研究治療心腦血管疾病的藥物，擬定組方麥冬、紅參、燈盞細辛。從中醫藥理論上講，紅參益氣補心；麥冬養陰生津、復脈；燈盞細辛有通經活絡、活血化瘀之功效，三藥配伍，組合出一種能有效治療心腦血管疾病的藥物制劑。從病理機制來說，血管病變是導致目前已知所有的心腦血管事件的主要原因，而從病變性質可分為缺血性和出血性兩大類，前者的發病率遠高于后者。近年來，缺血性心腦損傷的自由基機制研究非常活躍，在許多方面取得了較大的進展。現有技術表明燈盞細辛、紅參、麥冬具有優良的清除活性氧自由基的作用。本發明人經過研究發現，三者配伍使用效果較單味藥物更好，并且經過本發明的提取工藝制備的藥物有效成分去除了雜質、保留了藥物中多種有效成分，從而使制劑的效果更佳。
發明內容本發明的目的在于提供一種具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的注射制劑及其制備方法；本發明利用紅參大補元氣，麥冬養陰生津，燈盞細辛活血舒筋、止痛的功效，組合出一種同時能有效治療心腦血管疾病的制劑。本發明針對現有技術，針對不同藥材，采用分開提取的方式，既可有效提取出活性成分，同時可以在保證活性成分的情況下，有針對性去除雜質，使樣品得到精制，制成注射劑，使藥物發揮更快發揮療效，可用于心腦血管疾病急性發作期的治療，同時本發明的制劑還可以有效提高機體免疫力，預防和抵抗疾病的發生。本發明技術方案是這樣實現的一種具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑按照重量份數計算，它由麥冬10～1000份、紅參10～1000份與燈盞細辛50～5000份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有多種糖類成分。所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，按照重量組分計算，它由麥冬10～500份、紅參10～500份與燈盞細辛50～1000份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有麥冬多糖和單糖等多種糖類成分。準確地說，它由麥冬50～200份、紅參50～200份與燈盞細辛200～500份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有麥冬多糖和單糖等多種糖類成分，糖類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于4％。本發明涉及到的紅參還可以是等量的人參或黨參。本發明所述的制劑為注射劑，包括直接用于注射給藥的注射液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液以及用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物。本發明制劑中含有皂苷類成分、多糖類成分和黃酮類成分，按照重量比計算，其中皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于1％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于1％，多糖類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于3％，制劑中的皂苷類成分、多糖類成分、黃酮類成分和其他所有可測成分之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于25％。本發明所述的中藥注射制劑的制備方法為麥冬、紅參與燈盞細辛三味藥材分別加水或乙醇提取，提取液進行適當濃縮得粗提物或進一步采用醇沉法、水沉法、絮凝沉淀法、酸堿沉淀法、柱層析法、溶劑萃取法中的一種或幾種方法結合使用得精制提取物，加入不同輔料制成各種注射制劑。具體的說本發明所述的中藥注射制劑的制備方法是A、取麥冬藥材，加入5～15倍體積水煎煮1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇醇沉，使含醇量為70～90％，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.2～0.5倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.06～0.14倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用，該工藝提取了麥冬藥材中的多糖類成分；B、燈盞細辛加入6～14倍藥材量40％～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加3～5倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.4～0.8L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用5％～15％乙醇除雜，60％～90％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，調節溶液pH值為3～4，靜置，濾過，沉淀加注射用水，攪拌，調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加6～14倍藥材量70％～90％乙醇回流提取1～4次，每次1～3小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水，攪拌，冷藏，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，加入輔料制成不同的注射制劑。本發明所述的注射劑中的無菌塊狀物是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至藥材重量體積的0.35倍藥材量，攪拌，冷藏，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，混合均勻后調pH值6.0～8.0，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，加注射用水至4.5g生藥/ml，取1/15倍藥材重量輔料，加入4～5倍輔料重量的注射用水，攪拌溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液與上述藥液合并，定容到1.5g生藥/ml，粗濾、精濾，定量(3ml/支)灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，溫度-55～-45℃，預凍時間8～12h，開始抽真空，并升溫至-43～-37℃，保持6～10h，再升溫至-33～-27℃，保持6～10h；升溫至-23～-17℃，保持6～10h，升溫至-13～-7℃，保持4～6h，升溫至-3～3℃，保持4～6h，升溫至12～18℃，保持1～3h，升溫至22～28℃，保持1～3h，升溫至32～38℃，保持1～3h，即得凍干粉針。本發明所述的注射劑中小容量注射液或注射用濃溶液是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述藥液混合均勻，按體積加入0.1％～1.5％的活性炭，煮沸，保持微沸10～60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在1～8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到安瓿瓶中，在蒸汽溫度為100～110℃，實際壓力在100～120kN/m3條件下熱壓滅菌40～60分鐘，即得直接用于注射給藥的小容量注射液或注射用濃溶液。本發明所述的注射劑中葡萄糖靜脈輸液劑是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述藥液混合均勻，再加入規定量的葡萄糖，按體積加入0.1％～1.5％的活性炭，煮沸，保持微沸10～60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在1～8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，加注射用水，分裝，在105～125℃條件下，滅菌20～60分鐘，即得葡萄糖靜脈輸液劑。本發明所述的注射劑中氯化鈉靜脈輸液劑是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并混合均勻，再加入規定量的氯化鈉，按體積加入0.1％～1.5％的活性炭，煮沸，保持微沸10～60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在1～8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，加注射用水，分裝，在105～125℃條件下，滅菌20～60分鐘，即得氯化鈉靜脈輸液劑。本發明所述的注射劑中無菌塊狀物是這樣制備A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并混合均勻，按體積加入0.1％～1.5％的活性炭，煮沸，保持微沸10～60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在1～8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到搪瓷盤中，溫度-55～-45℃，預凍時間8～12h，開始抽真空，并升溫至-43～-37℃，保持6～10h，再升溫至-33～-27℃，保持6～10h；升溫至-23～-17℃，保持6～10h，升溫至-13～-7℃，保持4～6h，升溫至-3～3℃，保持4～6h，升溫至12～18℃，保持1～3h，升溫至22～28℃，保持1～3h，升溫至32～38℃，保持1～3h，在無菌條件下分裝到西林瓶中即得凍干無菌粉末。本發明所述的注射劑中噴霧干燥無菌粉末是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并混合均勻，按體積加入0.1％～1.5％的活性炭，煮沸，保持微沸10～60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在1～8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，在進風溫度為140～160℃，出風溫度為60～80℃，氣流速度為16～20m·s-1的條件下噴霧干燥得粉末，分裝即得噴霧干燥無菌粉末。本發明制劑過程中所采用的輔料包括甘露醇、半乳糖、甘氨酸、葡萄糖、氯化鈉、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐溫、泊洛沙姆中的一種或幾種。與現有技術相比，本發明的突出性進步在于本申請人結合傳統中醫藥理論、心腦血管疾病病理機制、各有效成分作用部位等方面篩選出最優組方，使其具備擴血管、腦保護、抗凝、促進心肌損傷愈合等功效，并分別對各味中藥的有效成分進行提取，制備成復方制劑，藥效學試驗證明該復方制劑對心腦血管疾病比其他制劑和單味藥材提取物有更強的療效。本發明篩選出的三味藥物合理有效的組方配比，能夠多方面的作用于血管病變部位，并對增強機體免疫力有較好作用。同時發現，燈盞細辛、麥冬配伍人參、黨參也有一定的療效。本組方各藥材采用單獨提取和適宜的精制工藝，避免出現混合提取可能造成的成分復雜，除雜不干凈導致的色素、鞣質、蛋白質等殘留在藥液中等問題。例如，本申請人在研究中發現，燈盞細辛采用聚酰胺柱分離純化效果好。本申請人在小容量注射液或注射用濃溶液成型研究中發現，燈盞細辛的有效成分燈盞花素溶解性低，制劑容易出現化學穩定性問題。經反復試驗，我們采用較高濃度的乙醇提取燈盞細辛，并將藥液pH值調節為5.5～7.5，此時藥液相對比較穩定，沒有產生微粒或任何外觀變化，指標成分野黃芩苷含量沒有太大變化，有效的解決了燈盞細辛穩定性的問題。本發明提供的凍干制劑，因為主要成分為皂苷、黃酮、多糖物質，在冷凍干燥過程中出現了噴瓶、凍干不完全等情況。經我們反復試驗，采用合理的凍干工藝，較好的解決了這一難題。本發明人在研究過程中發現大部分輔料均可制成凍干粉針，但是從成品率、成型狀況和樣品的復溶性角度綜合考察，單獨使用甘露醇的效果好于其它幾種輔料，既可滿足注射劑各項要求，同時盡量減少添加過多輔料。實驗研究表明，本申請人所篩選出來的組方副作用小、對心腦血管疾病具有明顯的療效；本發明所選用的制備工藝在去除雜質的同時，提取藥材有效成分；本發明所選用的成型工藝合理可控，得到的制劑產品是提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的良藥。申請人進行了一系列實驗，可以證明本發明提供的藥物安全有效、工藝穩定、質量可控。實驗例1藥物有效性研究藥理研究結論從上述試驗可以看出，組合制劑治療效果明顯好于單味制劑組。實驗例2提取工藝條件的研究2.1燈盞細辛制備工藝研究經過以上的分析和考察，確定了制備工藝的基本工藝路線。本試驗將考察影響燈盞細辛中黃酮類成分提取效果的主要因素，如提取溶劑、提取時間等，以確定較佳工藝條件。2.1.1乙醇濃度的考察根據提取工藝的試驗設計，對不同濃度的乙醇進行優選。試驗中設計分別以20％，40％，60％，80％的乙醇作為提取溶劑，以提取物中野黃芩苷的轉移率為考察指標，同時結合野黃芩苷的含量，對不同的提取溶劑進行考察。試驗方法稱取燈盞細辛4份，每份200g，分別加入14倍體積的不同溶劑，回流提取3次，每次1小時。分別將提取液濾過，濾液減壓回收乙醇(60℃)，濃縮，真空干燥(60℃，-0.09Mpa)。測定野黃芩苷的含量。乙醇濃度的考察表注藥材中野黃芩苷含量0.385％結果表明，用60％的乙醇提取時，野黃芩苷含量和轉移率均高于其它濃度的乙醇。故選擇60％的乙醇作為提取溶劑。2.1.2提取條件的優選在確定了燈盞細辛的提取溶劑后，還需對提取條件進一步進行優選。用加熱回流法進行提取時，影響提取效果的主要因素有提取時間、溶劑用量和提取次數等。為了減少試驗次數同時又能真實反映試驗結果，采用正交試驗法安排實驗。以提取時間、提取次數和溶劑用量為考察因素，每個因素設計三個水平，以野黃芩苷的轉移率為考察指標，選用L9(34)正交表，對燈盞細辛提取條件進行優選。提取試驗因素水平設計表因素提取時間(小時)提取次數(次)乙醇用量(倍)水平ABC10.51102121231.5314試驗方法稱取燈盞細辛300g，共9份，依L9(34)正交表各條件進行回流，收集提取液，60℃減壓回收乙醇，真空干燥(60℃，-0.09Mpa)，準確稱重，測定野黃芩苷含量。提取條件正交試驗表因素ABCD轉移率(％)水平1111174.472122281.143133389.274212380.845223186.866231291.087313279.638321385.679332192.29I244.88234.94251.22253.62II258.78253.67254.27251.85III257.59272.64255.76255.78T＝761.2581.6378.3183.7484.54CT＝T2/9＝86.2684.5684.7683.9564389.0685.8690.8885.2585.26R4.6312.571.511.31I259966.2155196.8063111.4964323.10II266967.0964348.4764653.2363428.42III266352.6174332.5765413.1865423.41K2193285.91193877.84193177.90193174.94S39.57236.883.572.58注藥材中野黃芩苷含量0.385％方差分析表由上述數據可知，A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1。B因素(提取次數)對提取物中野黃芩苷的轉移率影響最大，A因素(提取時間)次之，C因素(乙醇用量)無影響。直觀分析表明，在A3B3C2的條件下，野黃芩苷的轉移率最高，屬較佳條件。方差分析結果表明提取次數(B因素)對野黃芩苷的提取率有較大影響應取B3；提取時間(A因素)對野黃芩苷的提取率有一定的影響，但不顯著，結合正交表選擇A2；乙醇用量(C因素)對野黃芩苷的提取率無顯著性影響，故選C1。因此確定最佳的提取條件組合為A2B3C1。2.1.3驗證試驗為了驗證優選的提取條件的可行性和穩定性，我們對篩選后的結果A2B3C1與正交實驗中的較佳條件A3B3C2分別進行了三次驗證實驗。驗證試驗結果注藥材中野黃芩苷含量0.385％從上面的結果可以看出，同正交試驗中較佳條件相比，在縮短提取時間和減少溶劑用量的情況下，野黃芩苷的提取率沒有太大損失，所以經過篩選的提取條件是穩定可行的。2.1.4燈盞細辛分離純化工藝條件研究乙醇提取物中含有大量雜質，需進一步分離精制。經我們反復試驗，選用聚酰胺吸附法對燈盞細辛野黃芩苷進行分離純化。另外根據黃酮類成分溶解的性質，我們采用堿溶酸沉的方法對其進行進一步的純化。2.1.4.1提取液的初步除雜燈盞細辛乙醇提取液中含有大量雜質，故在提取液用聚酰胺吸附之前要進行初步除雜，使藥液得到很好吸附，同時可以避免過多的雜質堵塞層析柱，影響分離效果。方法稱取燈盞細辛藥材900g，加入10倍體積60％乙醇，加熱回流提取3次，每次1小時。提取液減壓回收乙醇(60℃，-0.09MPa)，濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，混合均勻后平均分成3份，加入不同量的注射用水溶解，濾過，沉淀和濾液分別干燥，考察加水量對野黃芩苷溶出情況的影響。加水量對野黃芩苷溶出情況考察表結果表明當加入1200ml注射用水時，可沉淀大部分雜質，同時又可保證野黃芩苷沒有太多損失，由此可以確定除雜條件為將提取液濃縮至相對密度在1.05～1.15(60℃)，加入4倍藥材重量的注射用水溶解，濾過，除去大部分水不溶性雜質。2.1.4.2聚酰胺與燈盞細辛的用量比聚酰胺的吸附容量有一定限度，所以樣品上柱量一定不能超過其吸附容量，否則一些成分就會流失。為避免產生這種現象，我們對聚酰胺吸附燈盞細辛野黃芩苷的載量進行了測定。方法稱取聚酰胺100g裝入層析柱，取經過除雜處理的藥液，使藥液緩慢通過層析柱，直到聚酰胺過飽和，用注射用水將聚酰胺沖洗干凈，并測定其中燈盞細辛野黃芩苷重量，按下列公式計算載量載量＝(野黃芩苷上柱量-水洗液中野黃芩苷量)/聚酰胺重量聚酰胺吸附燈盞細辛載量考察表由結果可知聚酰胺吸附燈盞細辛野黃芩苷載量為0.39g野黃芩苷/100g聚酰胺，即相當于100g藥材/100g聚酰胺。為了防止聚酰胺過載，減少樣品的損失，每次上柱量定為載量的70％，即每公斤藥材需要1.4公斤聚酰胺。2.1.4.3上樣流速的篩選聚酰胺柱上樣要有一定的流速，過快可能導致藥液中有效成分吸附不充分，過慢影響工作效率，因此對藥液上樣流速進行篩選。試驗方法取粉碎后的燈盞細辛藥材1500g，加入10倍量60％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液減壓回收乙醇(60℃，-0.09MPa)，濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，混合均勻后加入4倍藥材重量的注射用水溶解，濾過。濾液平均分成三份，分別以不同的速度過聚酰胺柱(內直徑×聚酰胺柱高度60mm×500mm，聚酰胺體積1000ml，重量700g)，收集流出液，用鹽酸-鎂粉反應檢查流出液中是否含有黃酮類成分，結果如下。上樣流速篩選試驗試驗結果表明，當上樣流速達到0.8L/kg藥材.h由于流速過快，藥液沒有充分吸附，造成損失，流速在0.4L/kg藥材.h和0.6L/kg藥材.h時藥液吸附充分，考慮生產實際為節約工時，選擇上樣流速為0.6L/kg藥材.h。2.1.4.4除雜條件的篩選具體方法取粉碎后的燈盞細辛藥材500g，加入10倍量60％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液減壓回收乙醇(60℃，-0.09MPa)，濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，混合均勻后加入4倍藥材重量的注射用水溶解，濾過。濾液以0.6L/kg藥材.h的速度過聚酰胺柱(內直徑×聚酰胺柱高度60mm×500mm，聚酰胺體積1000ml，重量700g)，并用不同溶劑以1L/kg藥材.h的流速沖洗，分單位收集所有的流出液，烘干稱重，用鹽酸-鎂粉反應檢查流出液中是否含有黃酮類成分，結果如下。洗滌聚酰胺柱用水量考察表從上面的結果可見，當用水和15％乙醇洗脫時可以除去雜質，而用20％乙醇洗脫時含有黃酮類成分，因此為了保留活性成分，我們選用水和15％乙醇作為除雜溶劑；同時當洗脫用水量達到3000ml和15％乙醇洗脫3000ml時，流出液中無黃酮類成分，同時流出液中的固形物較少，說明已經洗脫干凈，故把用4倍聚酰胺體積的注射用水和4倍聚酰胺體積的15％乙醇以1L/kg藥材.h的速度洗脫確定為除雜條件。2.1.4.5洗脫條件篩選為了考察從聚酰胺柱上解吸野黃芩苷的最佳條件，選擇洗脫劑濃度、洗脫劑用量、流出速度作為考察因素，每個因素各取三個水平，采用L9(34)正交表進行試驗。取燈盞細辛藥材1800g，加入10倍體積60％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液減壓回收乙醇(60℃，-0.09MPa)，濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，混合均勻后加入4倍藥材重量的注射用水溶解，濾過。濾液平均分成9份(即每份相當于含藥材200g)，過聚酰胺柱(內直徑∶柱高度＝40mm∶400mm，聚酰胺重量280g，體積400ml)。開始用4倍聚酰胺體積的注射用水和4倍聚酰胺體積的15％乙醇以1L/kg藥材.h的速度沖洗，然后按L9(34)正交表進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，真空干燥(60℃，-0.09Mpa)。以野黃芩苷的轉移率為考察指標。因素水平表因素流速(L/kg藥材.h)洗脫劑用量(倍)乙醇濃度(％)水平ABC10.644020.866031880注洗脫劑用量表示樹脂重量倍數洗脫條件正交表表頭ABCD野黃芩苷轉移率(％)試驗號1111139.562122242.643133356.624212341.725223149.766231234.647313254.368321338.019332143.1I138.82135.64112.21132.42T＝∑yi＝400.41II126.12130.41127.46131.64CT=T2/9＝17814.24III135.47134.36160.74136.35S=K2/3.CT46.2745.2137.4044.1442.0443.4742.4943.8845.1644.7953.5845.45R4.231.7416.181.57I219270.9918398.2112591.0817535.06II215906.2517006.7716246.0517329.09III218352.1218052.6125837.3518591.32K253529.3753457.5954674.4853455.47S28.884.95410.594.25洗脫結果方差分析表由直觀分析可知，A3＞A2＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1，乙醇濃度(因素C)是影響野黃芩苷轉移率的主要因素，其次是流速(因素A)和乙醇用量(因素B)。方差分析表明乙醇濃度對野黃芩苷轉移率有顯著性影響，選最好的條件C3；乙醇用量對野黃芩苷轉移率無顯著性影響，考慮到工廠的成本選B1；流速也無顯著性影響，為了縮短工時選用條件A3；所以確定洗脫條件為A3B1C3，即以4倍聚酰胺體積80％乙醇以1L/kg藥材.h的速度洗脫。為了驗證優化后的分離條件，我們將正交表中最佳的洗脫條件A1B3C3與篩選的洗脫條件A3B1C3進行了三次驗證實驗。洗脫條件驗證實驗結果由驗證實驗結果可以看出，在減少乙醇用量和加快洗脫速度的情況下，野黃芩苷的含量及轉移率均無明顯改變，證明優選后的條件是可行的。2.1.4.6調節pH值純化為了進一步純化燈盞細辛提取物，根據其所含主要活性成分野黃芩苷的性質，采用堿溶酸沉的方法，通過調節水溶液pH值來除去部分雜質。試驗方法及結果稱取燈盞細辛1500g，加10倍量的60％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液回收乙醇至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，加入4倍藥材重量的注射用水溶解，過濾。上清液過聚酰胺柱，先用4倍聚酰胺重量的注射用水和4倍聚酰胺體積的15％乙醇洗脫雜質，再用4倍聚酰胺體積的80％乙醇解吸。收集解吸液，減壓回收乙醇到相對密度1.10～1.15(60℃)，濃縮液平均分成3份，加1％硫酸分別調節為不同的pH值，靜置過濾后，沉淀干燥，測定野黃芩苷含量及轉移率。調節pH值純化試驗結果試驗表明，在pH值3～4之間時得到的提取物中野黃芩苷含量最高，能夠取得較好的純化效果，在pH值5.5～7時幾乎無沉淀出現。確定在聚酰胺柱純化后調節溶液pH值為3～4對提取物進一步純化，得到的提取物加水后調節pH值為5.5～7得到溶液備用。2.1.4.7加水量考察經過以上一系列純化步驟后，提取物需配制成溶液以制備成相應制劑，因此對加水量進行了考察。試驗內容稱取燈盞細辛7500g，加10倍量的60％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液回收乙醇至相對密度為1.05～1.15(60℃)的濃縮液，加入4倍藥材重量的注射用水溶解，過濾。上清液過聚酰胺柱，先用4倍聚酰胺體積的注射用水和4倍聚酰胺體積的15％乙醇洗脫雜質，再用4倍聚酰胺體積的80％乙醇解吸。收集解吸液，減壓回收乙醇到相對密度1.10～1.15(60℃)，濃縮液平均分成3份，加1％硫酸分別調節pH值為3～4，靜置過濾后，沉淀干燥，加入不同體積注射用水，攪拌后調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，測定野黃芩苷含量及轉移率。加水量考察試驗結果試驗結果表明，加入不同的水溶解提取物對野黃芩苷的含量和轉移率有一定的影響，加水越多轉移率越高，結合生產實際選擇加水量為100ml/2500g藥材。2.2紅參制備工藝研究2.2.1乙醇濃度的考察根據提取工藝的試驗設計，對不同濃度的乙醇進行優選。試驗中設計分別以20％，40％，60％，80％的乙醇作為提取溶劑，以提取物中總皂苷的轉移率為考察指標，對不同的提取溶劑進行考察。試驗方法稱取紅參4份，每份200g，分別加入14倍體積的不同溶劑，回流提取3次，每次1小時。分別將提取液濾過，濾液減壓回收乙醇(60℃)，濃縮，真空干燥(60℃，-0.09Mpa)。測定紅參總皂苷的含量。乙醇濃度的考察表注藥材中紅參總皂苷含量0.83％結果表明，用80％的乙醇提取時，紅參總皂苷含量和轉移率均高于使用其它濃度的乙醇提取，故選擇80％的乙醇作為提取溶劑。2.2.2提取條件的優化紅參中的主要活性部位是皂苷類成分，該類成分性質比較穩定，耐熱性好，因此采用乙醇回流法提取，而影響回流提取效果的主要因素有溶劑用量、提取時間和提取次數，因此對這些主要影響因素進行考察。以紅參總皂苷的轉移率作為考察指標，采用L9(34)正交試驗優選提取條件。實驗方法及數據稱取紅參300g，共9份，用80％乙醇作溶劑，分別按正交表L9(34)進行試驗。紅參提取試驗因素水平表因素水平A提取次數(次)B提取時間(h)C溶劑用量(倍)12110231.51234214紅參提取正交試驗表因素ABCD轉移率(％)水平1111161.262122276.933133386.664212376.575223184.726231288.447313268.388321382.349332192.57I224.85206.21232.04238.55II249.73243.99246.07233.75III243.29267.67239.76245.57T＝717.8774.9568.7477.3579.52CT＝T2/9＝83.2481.3382.0277.9257259.7081.1089.2279.9281.86R8.2920.494.683.94I250557.5242522.5653842.5656906.1050557.52II262365.0759531.1260550.4454639.0662365.07III259190.0271647.2357484.8660304.6259190.02K2172112.60173700.90171877.90171849.80172112.60S111.17640.6032.9223.56111.17注紅參藥材中總皂苷含量0.83％方差分析表<tablesid="table14"num="014"><tablewidth="750">方差來源離差平方和自由度方差F值A111.17255.594.72B640.602320.3027.19C32.92216.461.40D23.56211.78</table></tables>F0.05(2，2)＝19.00F0.01(2，2)＝99.00由上述結果可知，A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1。B因素(提取時間)對提取物中總皂苷的轉移率影響較大，A因素(提取次數)有一定的影響但不是很明顯，C因素(溶劑用量)無顯著性影響。直觀分析表明，在A3B3C2的條件下，總皂苷的轉移率最高，屬較佳條件；方差分析結果表明提取時間(B因素)對總皂苷的轉移率有較大影響應取B3；提取次數(A因素)對總皂苷的轉移率有一定的影響，結合正交表中的數據選A2；溶劑用量(C因素)對總皂苷的轉移率無顯著性影響，故選C1。因此確定提取條件為A2B3C1，即10倍量80％乙醇，回流提取3次，每次2小時。2.2.3紅參提取工藝的驗證為了考察經過優化篩選后的提取條件組合后的穩定性和合理性，我們對篩選后的條件與正交試驗中的最佳條件進行驗證實驗。實驗方法及數據稱取紅參藥材300g，共6份，按照篩選后的條件和正交試驗中的較佳條件分別提取。紅參提取驗證實驗注紅參藥材中總皂苷含量0.83％分別以A2B3C1和A3B3C2為提取方案，其總皂苷的轉移率僅相差1.25％，但是優化后的提取條件所得樣品總皂苷含量較高，所以，選擇方案A2B3C1是穩定可行的，即紅參提取工藝條件為10倍量80％乙醇，回流提取3次，每次2小時。2.2.4加水量考察紅參乙醇提取物中尚含有部分脂溶性雜質，不但影響藥物的治療效果，同時會對制劑的成型帶來較大的困難，因此需要進一步除雜，以保證制劑的穩定性。由于皂苷類成分在水和乙醇中均有較好的溶解性，因此采用加水溶解的方法，可以將皂苷與脂溶性的雜質分離開，從而達到純化的目的。由于加水溶解時，加水量對皂苷類成分的溶出有較大影響，故以紅參中總皂苷的轉移率為指標對加水量進行考察。試驗方法稱取紅參3份，每份1000g，分別加入10倍體積的80％乙醇，回流提取3次，每次2小時。分別將提取液濾過，濾液減壓濃縮回收乙醇至相對密度為1.15～1.20(60℃)，加入不同體積的注射用水，攪拌，靜置，濾過，濾液減壓濃縮，真空干燥。計算紅參總皂苷的轉移率。加水量考察試驗結果表明，加水至500ml和350ml時紅參中總皂苷轉移率最高，而且加水至500ml與加水至350ml總皂苷的轉移率變化不大，說明加水至350ml時，已將大部分皂苷類成分溶出，因此將加水量確定為每1000g藥材提取的藥液，濃縮后加水至350ml。2.3麥冬制備工藝研究2.3.1麥冬水提取條件考察2.3.1.1吸水率考察藥材第一次煎煮時是干品，本身要吸收水分，為防止藥材吸水對加水量的影響，特作吸水率考察，在第一次煎煮時多加相應的吸水量。考察時取200g麥冬藥材加10倍量水，浸泡至透心，濾過，測得吸水率為230％。2.3.1.2因素水平選擇中藥制劑療效主要取決于提取，而提取效果受到提取溶劑、提取次數及時間等因素的影響。麥冬中主要的活性成分是多糖類和皂苷類，這兩者在水中均具有良好的溶解性，因此兼顧兩者的提取，初步確定提取溶劑為水。一般考察煎煮提取時，選取加水量、煎煮時間、煎煮次數作為因素，重點考察各因素的不同水平對煎煮提取效果的影響。根據生產經驗和實際情況，選擇因素水平。麥冬提取試驗因素水平表因素水平A煎煮次數(次)B加水量(倍)C煎煮時間(h)11612281.533102麥冬提取正交試驗表因素ABCD轉移率(％)水平1111173.132122279.83133387.934212379.55223185.526231289.747313278.298321384.349332190.97I240.86230.92247.21249.62II254.76249.66250.27247.83III253.60268.64251.74251.77T＝749.2280.2976.9782.4083.21CT＝T2/9＝84.9283.2283.4282.6162370.0784.5389.5583.9183.92R4.6312.571.511.31I258013.5453324.0561112.7862310.14II264902.6662330.1262635.0761419.71III264312.9672167.4563373.0363388.13K2187229.16187821.61187120.88187117.99S39.65237.143.562.59注麥冬藥材中總多糖含量8.65％方差分析表<tablesid="table17"num="017"><tablewidth="792">方差來源離差平方和自由度方差F值顯著性PA39.65219.8315.25B237.142118.5791.21*C3.5621.781.37D2.5921.30</table></tables>F0.05(2，2)＝19.00F0.01(2，2)＝99.00由上述結果可知，A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1。B因素(加水量)對提取物中總多糖的轉移率影響較大，A因素(提取次數)有一定的影響但不是很明顯，C因素(提取時間)無顯著性影響。直觀分析表明，在A3B3C2的條件下，總多糖的轉移率最高，屬較佳條件；方差分析結果表明加水量(B因素)對總多糖的轉移率有較大影響應取B3；提取次數(A因素)對總多糖的轉移率有一定的影響，結合正交表中的數據選A2；提取時間(C因素)對總多糖的轉移率無顯著性影響，故選C1。因此確定提取條件為A2B3C1，即10倍量水，提取2次，每次1小時。2.3.1.3驗證試驗稱取麥冬藥材300g，共6份，按照篩選后的條件和正交試驗中的較佳條件分別提取。麥冬提取驗證實驗注麥冬藥材中總多糖含量8.65％。從以上結果可知，分別以A2B3C1和A3B3C2為提取方案，其總多糖的轉移率僅相差1.25％，但是優化后的提取條件所得樣品總多糖含量較高，所以，選擇方案A2B3C1是穩定可行的，即麥冬提取工藝條件為10倍量水煎煮提取2次，每次1小時。2.3.2除雜工藝考察由于麥冬水提物中含有大量的雜質，無法滿足制劑成型的要求，因此需要對其進行純化。由于提取物為水提物，含有的雜質水溶性較強，因此采用乙醇沉淀法可以將雜質沉淀使藥液得到純化；同時由于多糖在醇中溶解性較差，所以加乙醇沉淀的同時多糖損失，故在醇沉后用注射用水將多糖從沉淀中提取出來。而這兩個試驗，溶劑的用量和乙醇濃度對試驗結果有較大影響，因此以麥冬總多糖含量為指標，考察醇沉時的乙醇濃度和加水量。2.3.2.1醇沉濃度考察實驗方法及數據稱取麥冬藥材1500g，加10倍量水煎煮2次，每次1小時，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)，平均分成三份，加入乙醇使其含醇量達到不同值，冷藏(4℃)12小時，過濾，濾液減壓濃縮，干燥，稱重。沉淀烘干，稱重，測定沉淀中麥冬總多糖含量。醇沉濃度的考察從上面的結果可以看出，當醇沉濃度達到80％時，可以使大部分沉淀析出，所以，選擇醇沉濃度為80％。2.3.2.2加水量考察實驗方法及數據稱取麥冬藥材3000g，加10倍量水煎煮2次，每次1小時，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃)，平均分成三份，加入乙醇使其含醇量達到80％，冷藏(4℃)12小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃測定相對密度為1.15～1.20，加入不同體積的注射用水，攪拌，靜置，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，稱重。沉淀烘干，加入不同體積的注射用水，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，稱重，計算沉淀中麥冬總多糖的轉移率。上清濃縮液加水量考察實驗結果表明，醇沉后上清濃縮液加水至350ml已能夠保證提取物能夠充分轉移到溶液中，而且進一步加大用水量并不能明顯提高溶出物質量，所以選擇醇沉上清濃縮液加水至350ml/1000g藥材。沉淀加水量考察實驗結果表明，醇沉后沉淀加水100ml已能夠保證多糖能夠充分轉移到溶液中，而且進一步加大用水量并不能明顯提高溶出多糖量，所以選擇加水量為100ml/1000g藥材。2.4注射用燈盞參麥成型工藝研究2.4.1配液pH值的選擇為適應人體生理需要，同時還要考慮藥液中各類成分的性質，在配液時需要對藥液的pH值進行適當調整。選擇野黃芩苷含量作為評價指標。試驗方法及結果按處方量投料并按上述條件處理后，將燈盞細辛水液、麥冬水液、紅參水液混合均勻，濾過，加水至1000ml，調pH值，當達到下表所示的不同pH值時，煮沸后靜置12小時，觀察在不同pH值條件下外觀性狀的變化。實驗結果見下表配液pH值的考察結果表明，藥液pH值在6.0以下的樣品煮沸后出現沉淀，pH值在8.0以上的樣品顏色明顯加深，pH值為6.0～8.0的藥液相對比較穩定，外觀沒有明顯變化。確定配液時藥液的pH值調在6.0～8.0之間。2.4.2小容量注射液或注射用濃溶液成型研究2.4.2.1活性炭用量考察注射劑在生產的過程中由于溶劑、原料、容器等帶有熱原性物質，使注射劑的安全性降低，因此在制備注射劑的過程中需要清除熱原性物質。目前除熱原的方法主要有高溫法、酸堿法、超濾法和吸附法，活性炭吸附法不但可以吸附熱原性成分，還具有助濾和脫色的作用，在清除熱原的同時可以改善制劑的外觀性狀，因此我們選用活性炭吸附法除熱原，并對其用量進行考察，結果見下表活性炭用量考察表從藥液外觀來看，選擇活性炭用量為1％和1.5％的比較合適；但從轉移率來判斷，0.1％用量和1％用量略好一點，三者均可以滿足注射劑的相關要求，但是綜合考慮以上因素，以使用藥液體積1％的活性炭脫色為最佳。脫色時間考察表從上面的試驗可以看出，隨著時間的延長藥液的顏色變淡，但是有效成分的轉移率也相應減少，綜合考慮上述因素，選用煮沸30分鐘為最佳。2.4.2.2溶液pH考察為適應人體生理需要，同時還要考慮藥液中各類成分的性質，在配液時需要對藥液的pH值進行適當調整。選擇野黃芩苷含量作為評價指標。試驗方法及結果按處方量投料并按上述條件處理后，將濃縮液混合均勻，濾過，加水至1000ml，調pH值，當達到下表所示的不同pH值時，煮沸后靜置12小時，觀察在不同pH值條件下外觀性狀的變化。實驗結果見表配液pH值的考察結果表明，藥液pH值在5.5以下的樣品煮沸后出現沉淀，pH值在7.5以上的樣品顏色明顯加深，pH值為5.5～7.5的藥液相對比較穩定，外觀沒有明顯變化。下面對其野黃芩苷含量進行測定，結果見表pH值調節前后指標成分的變化情況表由表可知，藥液在調整pH值前后，指標成分野黃芩苷含量沒有太大變化。綜合上述藥液的外觀性狀和野黃芩苷的含量變化，確定配液時藥液的pH值調在5.5～7.5之間。實驗例3粉針制劑成型工藝的考察3.1粉針活性炭用量篩選為了除去藥液中的熱原及部分色素類成分，采用目前生產中常用的活性炭吸附法。用活性炭處理，可使制品符合注射劑要求；同時活性炭也會吸附部分有效成分，活性炭用量過多會使樣品中有效成分含量下降。因此為了保證制劑的有效性，同時又除去熱原和色素類成分，必須對活性炭的用量進行篩選。選擇總皂苷損失率及外觀為評價指標。試驗方法及結果稱取處方量藥材，紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至700ml，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓濃縮，回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加水至700ml，攪拌，靜置，濾過，濾液備用；沉淀加注射用水200ml溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與上述濾液合并供配液用；燈盞細辛加10倍量的60％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過。濾液回收乙醇至相對密度為1.05～1.15(50℃)的濃縮液，加入4倍藥材重量的注射用水溶解，過濾。上清液過聚酰胺柱，先用4倍聚酰胺體積的注射用水和4倍聚酰胺體積的15％乙醇洗脫雜質，再用4倍聚酰胺體積的80％乙醇解吸。收集解吸液，減壓回收乙醇到相對密度1.10～1.15(60℃)，濃縮液用1％硫酸調節pH值為3～4，靜置，濾過，沉淀加注射用水，攪拌，調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液備用。將以上三種溶液混合均勻，平均分成4份，按體積加入不同重量的針用活性炭，煮沸后保持微沸30分鐘，濾過，濾液干燥，測定總皂苷含量。活性炭用量考察表從上面的試驗數據及樣品的外觀性狀來看，0.05％的活性炭用量太少沒有起到脫色的作用；0.2％的活性炭脫色樣品外觀性狀較好，但是總皂苷損失較多，說明活性炭用量偏高；綜合考慮樣品外觀和總皂苷損失率，確定活性炭用量為藥液體積的0.1％。3.2凍干粉針支架劑種類的篩選支架劑種類影響凍干粉針的成型，故首先對此進行了篩選。取藥液，分別與支架劑甘露醇、葡萄糖和乳糖溶液進行混合，0.22μm濾膜過濾后冷凍干燥，每支西林瓶裝溶液3ml。凍干機EdwardsSNL-3200冷凍干燥機(美國熱電Thermo)。凍干條件-45℃，預凍8h后，開始抽真空，并升溫至-40℃，保持10h；升溫至-30℃，保持10h；升溫至-20℃，保持10h；升溫至-10℃，保持5h；升溫至0℃，保持5h；升溫至15℃，保持3h；升溫至25℃，保持3h，結果如表支架劑種類篩選由表可知，在所篩選的輔料中，在其他條件相同的情況下，大部分輔料均可制成凍干粉針，但是從成品率、成型狀況和樣品的復溶性角度綜合考察，單獨使用甘露醇的效果好于其它幾種輔料，即可滿足注射劑各項要求，同時盡量減少添加過多輔料。3.3凍干粉針支架劑用量篩選將不同濃度的甘露醇溶液(40mg/ml、100mg/ml和160mg/ml)與藥液以不同比例進行混合，過濾，每支西林瓶裝量為3ml，冷凍干燥。凍干條件-45℃，預凍8h后，開始抽真空，并升溫至-40℃，保持10h；升溫至-30℃，保持10h；升溫至-20℃，保持10h；升溫至-10℃，保持5h；升溫至0℃，保持5h；升溫至15℃，保持3h；升溫至25℃，保持3h。結果如表甘露醇用量篩選由表可知，當支架劑用量與藥液的比例為2.5∶1時，樣品性狀以甘露醇濃度為100mg/ml和160mg/ml的樣品比較好，40mg/ml的樣品有部分塌陷，但是大部分還是成型的，但綜合考慮輔料的用量和臨床服用量，最佳選擇甘露醇濃度為100mg/ml，甘露醇溶液與藥液的體積比為2.5∶1。3.4凍干粉針冷凍干燥條件篩選冷凍干燥是一個比較漫長的干燥過程，需要消耗大量能源。一個理想的凍干條件不但可以節約大量能源，同時還可以縮短工時，因此我們對現有凍干條件進行優化篩選。具體條件篩選見表冷凍干燥條件篩選時間(h)條件I條件II條件III冷阱溫度(℃)-45(預凍)10-8-40(預凍)-8--40(抽真空)8-8-35(抽真空)-10--30(抽真空)8-10保持-25(抽真空)-8--70C-20(抽真空)8-10-15(抽真空)-6--10(抽真空)5-50(抽真空)44410(抽真空)24320(抽真空)243實驗結果顯示條件I、II和III制得的成品外觀性狀和水分含量均符合標準。但是相對而言，條件II成品率稍低，條件III耗能較大，考慮到生產的實際情況，最終選定總體用時較短的條件I，即冷凍干燥條件為預凍溫度-45℃，預凍時間10h；-40℃抽真空，保持8h；再升溫至-30℃，保持8h；升溫至-20℃，保持8h；升溫至-10℃，保持5h；升溫至0℃，保持4h；升溫至10℃，保持2h；升溫至20℃，保持2h，即得成品。實驗例4噴霧干燥條件篩選噴霧干燥技術可以使樣品在霧化的情況下迅速干燥，保護有效成分，同時可以使樣品的含水量降低，有利于制劑的穩定性。但是噴霧干燥的效果受進出口的溫度和氣流速度影響較大，因此我們以有效成分的損失率為評價指標對這三個因素進行考察。噴霧干燥條件考察表從上述試驗結果可以看出，三種條件均可以得到較好的物料，但是相比之下以進口溫度為150℃，出口溫度為70℃，氣流速度為18m·s-1的條件為最佳。具體的實施方式(份代表重量份，如公斤、克等)實施例1麥冬120份紅參120份燈盞細辛350份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3.5，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，混合均勻后調pH值6.0～8.0，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，加注射用水至4.5g生藥/ml，取1/15倍藥材重量輔料，加入4～5倍輔料重量的注射用水，攪拌溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液與上述藥液合并，定容到1.5g生藥/ml，粗濾、精濾，定量(3ml/支)灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，溫度-50℃，預凍時間10h，開始抽真空，并升溫至-40℃，保持8h，再升溫至-30℃，保持8h；升溫至-20℃，保持8h，升溫至-10℃，保持5h，升溫至0℃，保持4h，升溫至15℃，保持2h，升溫至25℃，保持2h，升溫至35℃，保持2h，即得凍干粉針制劑。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的21％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的10％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的20％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為51％。實施例2麥冬120份紅參120份燈盞細辛350份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3.5，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為6，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述藥液混合均勻，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值6，煮沸，在4℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到安瓿瓶中，在蒸汽溫度為110℃，實際壓力在120kN/m3條件下熱壓滅菌60分鐘，即得直接用于注射給藥的小容量注射液或注射用濃溶液。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的21％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的9％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的24％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為54％。實施例3麥冬120份紅參120份燈盞細辛350份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為6，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述藥液混合均勻，再加入規定量的葡萄糖，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值6，煮沸，在4℃冷藏12小時，粗濾、精濾，加注射用水，分裝，在110℃條件下，滅菌30分鐘，即得葡萄糖靜脈輸液劑。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的25％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的9％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的18％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為52％。實施例4麥冬120份紅參120份燈盞細辛350份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并混合均勻，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值7，煮沸，在4℃冷藏12小時，粗濾、精濾，在進風溫度為150℃，出風溫度為70℃，氣流速度為18m·s-1的條件下噴霧干燥得粉末，分裝即得噴霧干燥無菌粉末。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的24％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的8％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的20％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為52％。本發明的實施例5麥冬1000份人參1000份燈盞細辛5000份A、取麥冬藥材，加入15倍體積水煎煮4次，每次2.5小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇醇沉，使含醇量為90％，濾過合并濾液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加注射用水至0.5倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.14倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用，該工藝提取了麥冬藥材中的多糖類成分；B、燈盞細辛加入14倍藥材量80％乙醇回流提取4次，每次2小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加5倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.8L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，90％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、人參加14倍藥材量90％乙醇回流提取4次，每次3小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.5倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和人參濾液合并，混合均勻后調pH值6.0～8.0，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，加注射用水至4.5g生藥/ml，取1/15倍藥材重量輔料，加入5倍輔料重量的注射用水，攪拌溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液與上述藥液合并，定容到1.5g生藥/ml，粗濾、精濾，定量(3ml/支)灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，溫度-55℃，預凍時間12h，開始抽真空，并升溫至-37℃，保持10h，再升溫至-27℃，保持10h；升溫至-17℃，保持10h，升溫至-7℃，保持6h，升溫至3℃，保持6h，升溫至18℃，保持3h，升溫至28℃，保持3h，升溫至38℃，保持3h，即得凍干粉針制劑。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的46％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的11％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的33％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為90％。本發明的實施例6麥冬10份紅參10份燈盞細辛50份A、取麥冬藥材，加入5倍體積水煎煮1次，每次0.5小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇醇沉，使含醇量為70％，濾過合并濾液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.2倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.06倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用，該工藝提取了麥冬藥材中的多糖類成分；B、燈盞細辛加入6倍藥材量40％乙醇回流提取1次，每次0.5小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加3倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.4L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用5％乙醇除雜，60％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加6倍藥材量70％乙醇回流提取1次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.2倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并，加入適量注射用水，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在8℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到安瓿瓶中，在蒸汽溫度為100℃，實際壓力在100kN/m3條件下熱壓滅菌40分鐘，即得直接用于注射給藥的小容量注射液或注射用濃溶液。經檢測麥冬多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的22％；皂苷類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的1％；黃酮類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的2％；三者之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為25％。本發明的實施例7麥冬50份紅參50份燈盞細辛200份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用C、紅參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，混合均勻后調pH值6.0～8.0，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，加注射用水至4.5g生藥/ml，取1/15倍藥材重量輔料，加入4～5倍輔料重量的注射用水，攪拌溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液與上述藥液合并，定容到1.5g生藥/ml，粗濾、精濾，定量(3ml/支)灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，溫度-55℃，預凍時間8h，開始抽真空，并升溫至-43℃，保持6，再升溫至-33℃，保持6h；升溫至-23℃，保持6h，升溫至-13℃，保持4h，升溫至-3℃，保持4h，升溫至12℃，保持1h，升溫至22℃，保持1h，升溫至32℃，保持1h，即得凍干粉針制劑。經檢測其中皂苷類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的1％；黃酮類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的16％，多糖類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的13％，制劑中的皂苷類成分、多糖類成分和黃酮類成分和其他所有可測成分的含量之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為30％。本發明的實施例8麥冬200份黨參200份燈盞細辛500份A、取麥冬藥材，加入8倍體積水煎煮2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇醇沉，使含醇量為80％，濾過合并濾液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.3倍藥材量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.08倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用，該工藝提取了麥冬藥材中的多糖類成分；B、燈盞細辛加入10倍藥材量70％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用10％乙醇除雜，70％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、黨參加11倍藥材量70％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.3倍藥材量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并，加入適量注射用水混勻，再加入規定量的氯化鈉，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調節pH值為7，煮沸，在4℃冷藏12小時，粗濾、精濾，加注射用水，分裝，在115℃條件下，滅菌30分鐘，即得氯化鈉靜脈輸液劑。本發明的實施例9麥冬500份紅參500份燈盞細辛1000份A、麥冬加入11倍體積水煎煮2次，每次0.8小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為75％，濾液減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，將兩次沉淀合并后加入0.3倍水溶解，濾過，濾液與前面的濃縮液合并，減壓濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得麥冬提取物；B、取燈盞細辛藥材，加入8倍體積60％乙醇回流提取4次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞細辛提取物；C、取紅參藥材，加入6倍體積70％乙醇回流提取2次，每次2小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加注射用水至藥材體積的0.3倍，攪拌、冷藏(4℃)、濾過，濾液供配液用；將上述提取物合并，加入適量注射用水溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸60min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調節pH值為6.5，煮沸，在5℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到搪瓷盤中，溫度-45℃，預凍時間10h；-40℃抽真空，保持8h；再升溫至-30℃，保持8h；升溫至-20℃，保持8h；升溫至-10℃，保持5h；升溫至0℃，保持5h；升溫至10℃，保持2h；升溫至20℃，保持2h，在無菌條件下分裝到西林瓶中即得凍干無菌粉末。經檢測多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的48％，除含有麥冬多糖外尚含有紅參多糖。本發明的實施例10麥冬300份人參200份燈盞細辛1500份A、取麥冬藥材，加入8倍體積水煎煮3次，每次1.5小時，合并提取液，合并提取液，濾過，濾液以0.4L/Kg藥材.min的速度過ZTC-1型大孔吸附樹脂柱，先用6倍樹脂體積的水以0.7L/Kg藥材.min的速度沖洗，再用4倍樹脂體積的15％乙醇以1.2L/Kg藥材.min的速度洗脫雜質，最后用4倍樹脂體積的70％乙醇以0.8L/Kg藥材.min的速度洗脫，收集解吸液，回收乙醇，減壓濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得麥冬提取物；B、取燈盞細辛藥材，加入8倍體積70％乙醇回流提取3次，每次1小時，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入4倍藥材體積的水加熱溶解，過濾，濾液以0.5L/Kg藥材.min的速度過AB-8型大孔吸附樹脂，依次用8倍樹脂體積水和6倍樹脂體積10％乙醇沖洗雜質，然后用5倍樹脂體積的40％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞細辛提取物；C、取人參藥材，加入6倍體積70％乙醇回流提取3次，每次1小時，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入3倍藥材體積的水溶解，過濾，濾液以0.5L/Kg藥材.min的速度過ZTC-1型大孔吸附樹脂，依次用10倍樹脂體積水和5倍樹脂體積25％乙醇沖洗雜質，然后用4倍樹脂體積的60％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得人參提取物；將上述提取物合并，加入適量注射用水溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值5.5～7.5，煮沸，在4℃冷藏12小時，粗濾、精濾，分裝到搪瓷盤中，溫度-45℃，預凍時間10h；-40℃抽真空，保持8h；再升溫至-30℃，保持8h；升溫至-20℃，保持8h；升溫至-10℃，保持5h；升溫至0℃，保持5h；升溫至10℃，保持2h；升溫至20℃，保持2h，在無菌條件下分裝到西林瓶中即得凍干無菌粉末。經檢測糖類成分含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的4％，多糖含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的3％，皂苷類成分含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的47％。本發明的實施例11麥冬300份人參200份燈盞細辛1500份A、麥冬加10倍藥材量水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏(4℃)12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏(4℃)，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水100ml，攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、人參加10倍藥材量80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍量，攪拌，冷藏(4℃)，濾過，濾液供配液用；將上述濾液合并混合均勻，再加入規定量的氯化鈉，按體積加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸50min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規定量，調PH值為5.5，煮沸，在6℃冷藏12小時，粗濾、精濾，加注射用水、分裝，在110℃條件下，滅菌50分鐘，即得氯化鈉靜脈輸液劑。其中皂苷類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的15％；黃酮類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的1％，多糖類成分的含量為制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的18％，制劑中的皂苷類成分、多糖類成分和黃酮類成分和其他所有可測成分的含量之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量為34％。權利要求1.一種具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于按照重量組分計算，它由麥冬10～1000份、紅參10～1000份與燈盞細辛50～5000份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有多種糖類成分。2.按照權利要求1所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于按照重量組分計算，它由麥冬10～500份、紅參10～500份與燈盞細辛50～1000份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有麥冬多糖和單糖等多種糖類成分。3.按照權利要求1或2所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于按照重量組分計算，它由麥冬50～200份、紅參50～200份與燈盞細辛200～500份經提取精制并加適當輔料制作而成，或是由相應重量份藥材經提取精制后得到的提取物加適當輔料制作而成的注射劑，制劑中含有麥冬多糖和單糖等多種糖類成分，糖類成分的含量占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于4％。4.按照權利要求1～3任意一項所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于所述的注射劑包括直接用于注射給藥的注射液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液以及用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物。5.按照權利要求4所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于制劑中含有皂苷類成分、多糖類成分和黃酮類成分，其中皂苷類成分的含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的1％；黃酮類成分的含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的1％，多糖類成分的含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量的3％。6.按照權利要求5所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于制劑中的皂苷類成分、多糖類成分和黃酮類成分和其他所有可測成分的含量之和占制劑中扣除輔料量和水分量后的總固體量不低于25％。7.如權利要求4所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于麥冬、紅參與燈盞細辛三味藥材分別加水或乙醇提取，提取液進行適當濃縮得粗提物或進一步采用醇沉法、水沉法、酸堿法、絮凝沉淀法、柱層析法、溶劑萃取法中的一種或幾種方法結合使用得精制提取物，取藥材粗提物或精制提取物加入不同輔料制成不同注射制劑。8.如權利要求7所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于A、取麥冬藥材，加入5～15倍體積水煎煮1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇醇沉，使含醇量為70～90％，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.2～0.5倍量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加注射用水溶解，攪勻，冷藏，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用，該工藝提取了麥冬藥材中的多糖類成分；B、燈盞細辛加入6～14倍藥材量的40％～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2小時，提取液減壓回收乙醇濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加3～5倍藥材量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.4～0.8L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用5％～15％乙醇除雜，60％～90％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，調節溶液pH值為3～4，靜置，濾過，沉淀加注射用水，攪拌，調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加6～14倍藥材量的70％～90％乙醇回流提取1～4次，每次1～3小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水攪拌，冷藏，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，加入輔料制成不同的注射制劑。9.按照權利要求8所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于無菌塊狀物是這樣制備的A、麥冬加10倍藥材量的水煎煮提取2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入乙醇使含醇量為80％，冷藏12小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至0.35倍量，濾過，濾液保留，醇沉后的沉淀加0.1倍藥材重量體積的注射用水溶解，攪勻，冷藏，濾過，濾液與前面保留的濾液合并供配液用；B、燈盞細辛加入10倍藥材量的60％乙醇回流提取3次，每次1小時，提取液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，，加4倍藥材重量的注射用水溶解，靜置，濾過，濾液以0.6L/kg藥材.h的速度上聚酰胺柱，水洗除雜后用15％乙醇除雜，80％乙醇洗脫，收集解吸液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，用1％硫酸調節溶液pH值為3～4，靜置24小時，濾過，沉淀加注射用水攪拌，用氫氧化鈉調節溶液pH值為5.5～7，靜置，濾過，濾液供配液用；C、紅參加10倍藥材量的80％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60℃時測定相對密度為1.15～1.20，加注射用水至藥材重量體積的0.35倍量，攪拌，4℃冷藏，濾過，濾液供配液用；將上述麥冬、燈盞細辛和紅參濾液合并，混合均勻后調pH值6.0～8.0，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，加注射用水至4.5g生藥/ml，取1/15倍藥材重量輔料，加入4～5倍輔料重量的注射用水，攪拌溶解，按體積加入0.1％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液與上述藥液合并，定容到1.5g生藥/ml，粗濾、精濾，定量(3ml/支)灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，溫度-55～-45℃，預凍時間8～12h，開始抽真空，并升溫至-43～-37℃，保持6～10h，再升溫至-33～-27℃，保持6～10h；升溫至-23～-17℃，保持6～10h，升溫至-13～-7℃，保持4～6h，升溫至-3～3℃，保持4～6h，升溫至12～18℃，保持1～3h，升溫至22～28℃，保持1～3h，升溫至32～38℃，保持1～3h，即得凍干粉針制劑。10.按照權利要求7～9中任意一項所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于制劑中所采用的輔料包括甘露醇、半乳糖、甘氨酸、葡萄糖、氯化鈉、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐溫、泊洛沙姆中的一種或幾種。11.按照權利要求1～10任意一項所述的具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑，其特征在于紅參還可以是等量的人參或黨參。全文摘要本發明涉及一種具有提高機體免疫力、治療心腦血管疾病的中藥注射制劑及其制備方法，它由麥冬、人參或紅參或黨參和燈盞細辛組方，有針對性提取了麥冬藥材中的多糖類成分。與現有技術相比，本發明配伍簡單，合理可行，療效好，無毒副作用，并且提供了不同劑型的制備方法，應用面廣，擴大了使用范圍，實驗發現本發明制劑能起到提高機體免疫力、增加冠狀動脈及腦血管血流，改善心肌和腦組織等血供的作用，對于治療心腦血管疾病如冠心病、心絞痛、心律失常、腦血栓、老年性癡呆等有較好的療效。文檔編號A61P9/06GK1935235SQ20061011168公開日2007年3月28日申請日期2006年8月22日優先權日2005年8月22日發明者于文風申請人:北京奇源益德藥物研究所