專利名稱：大黃酸或大黃酸類化合物的復合物、其制備方法及其在制備治療骨關節炎藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥用復合物，具體涉及一種大黃酸或大黃酸類化合物與不同堿基形成的復合物、這種復合物的制備方法，以及這種復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用。
背景技術：
骨關節炎，風濕性關節炎和類風濕關節炎是發病率較高的關節疾病，以前者為例，發病率約為總人口的10％，對60歲以上的病人，有50％以上的病人受到影響，對婦女在45歲以下，45歲到60歲和65歲以上的發病率分別為2％，30％和68％；而對于男性則分別為3％，24.5％和58％。隨著人口老齡化，發病人口占總人口的比例將越來越多。
目前治療骨關節炎的藥物主要有甾體類和非甾體類抗炎藥物。甾體類抗炎藥的不良反應為人們所熟知。非甾體類抗炎藥中環氧合酶抑制劑(COX)也存在很多不良反應，如口服和注射會引起消化道出血，尤其是老年人更容易產生不良反應，這對于骨關節炎這類老年高發的疾病是很不利的。
現有技術中大黃酸或大黃酸類化合物在制備各種藥物中已有應用，例如中國專利申請200410049948公開的大黃酸鹽。
下述兩個通式分別表示大黃酸和大黃酸的鹽
通式中M表示堿金屬、堿土金屬或有機堿殘基。
大黃酸類化合物的定義為從大黃(Rheum palmatum L.、Rheumtanguticum Maxim.ex Balf.或Rheum officinale Baill.)、虎杖(Polygonumcuspidatum Sieb.et Zucc.)、蕃瀉葉(Folium sennae)、何首烏(Polygonummultiflorum Thunb.)、決明子(Semen cassiae)等含有大黃酸或大黃酸類化合物的植物中提取、精制或經適當的化學修飾制得。其特征成分是含大黃酸(Rhein)或大黃酸類化合物的有效部位；其特征是如通式(I)的化合物，根據中國藥學文摘(檢索詞“大黃酸”)、CNKI數據庫(檢索詞“大黃酸”)、中國專利(檢索詞“大黃酸”)、CA(檢索“登錄號478-43-3”)、美國專利(檢索詞“Rhein”)和歐洲專利(檢索詞“Rhein”)的檢索數據分析，目前大黃酸類化合物的鹽有大黃酸鈉鹽、鉀鹽(US6197818，CN97107137)、二乙酰大黃酸[13739-02-1](CN97192531，CN93101181，CA96193416)及二乙酰大黃酸鉀鹽(EP243968)。
由于大黃酸類化合物不溶于水，且不能完全被胃腸道所吸收，導致生物利用度低，這些都使大黃酸的應用受到了一些限制。將大黃酸類化合物與金屬離子形成鹽，增加了大黃酸類化合物的水溶性，提高了口服途徑的生物利用度；因為大黃酸類化合物的大黃酸鈉鹽、鉀鹽(US6197818，CN97107137)、二乙酰大黃酸[13739-02-1](CN97192531，CN93101181，CA96193416)及二乙酰大黃酸鉀鹽(EP243968)為強堿弱酸鹽，水溶液呈堿性，做成水針pH值較高，人體生理上難以接受；如降低pH值，則制劑穩定性不好。
發明內容
本發明的目的是提供一類新的大黃酸類化合物與不同堿基形成的復合物，不僅使其水溶性增加，而且可以克服大黃酸類化合物的強堿鹽水溶液呈堿性，做成水針pH值較高，人體生理上難以接受；如降低pH值，則制劑穩定性不好的缺點。
本發明的另一目的是提供一種制備上述大黃酸類化合物與不同堿基形成藥物復合物的方法。大黃酸類化合物的復合物水溶性好，可與藥學上可接受的載體形成藥物組合物。
本發明的第三個目的是提供上述復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎藥物中的應用，采用這種復合物制備口服制劑片劑與膠囊，其體外溶出度增加，提示生物利用度提高，更值得一提的是可做成穩定的以水為載體的制劑。
為完成上述三個發明任務，本申請的技術方案分別如下一種大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，該復合物的結構如通式(I) 通式(I)中的左側部分為以下兩者之一(1)大黃酸或大黃酸類化合物單體成分，其中的R2～R3、R6～R7有1～2個取代基為-COOH，R1～R8其余位置為任意的以下取代基-H，-O-glucose，-OH，-OCH3，-CH3，其特征是R1～R8至少有2個為-H；(2)含大黃酸的、從植物中提取的有效部位(簡稱含大黃酸的有效部位)；通式(I)中的M表示含氮有機堿或堿性氨基酸，所述的大黃酸或大黃酸類化合物與含氮有機堿或堿性氨基酸以分子間作用力結合形成復合物。
例如，所述的大黃酸或大黃酸類化合物通過-COOH的羥基和含氮有機堿或堿性氨基酸的活潑氮部位以分子間作用力結合形成復合物。
以上所述的“含大黃酸的有效部位”是指從某種植物中提取、分離、精制而得的具有同一母核的具有生物活性的一組化合物。本發明中該母核為蒽醌。
換言之，其左側部分為含大黃酸的有效部位，或大黃酸類化合物的單體成分；其中的R2～R3、R6～R7有1～2個取代基為-COOH，R1～R8其余位置為任意的以下取代基-H，-O-glucose，-OH，-OCH3，-CH3，其特征是R1～R8至少有2個為-H。
所述的R1～R8上的取代基在所述范圍內選取、換用時，該復合物的這種結構改變對本申請所涉及的藥物學性質不產生實質性影響。
上述方案中的“含氮有機堿或堿性氨基酸與大黃酸或大黃酸類化合物的復合物”與一般意義的“大黃酸或大黃酸類化合物的鹽”完全不同，后者是強堿或弱堿與大黃酸或大黃酸類化合物反應，生成以離子鍵結合的鹽和水；而含氮有機堿或堿性氨基酸與大黃酸或大黃酸類化合物的復含物中，含氮有機堿或堿性氨基酸與大黃酸或大黃酸類化合物的反應中不生成水，是兩個分子之間以分子間作用力結合成復合物，反應中沒有生成水和形成離子鍵的機理。該結構可以由大黃酸與精氨酸反應前后的反應物、生成物的分子量，以及大黃酸精氨酸復合物的元素分析、C譜、H譜等結果得到確認。
例如大黃酸精氨酸復合物的元素分析，數據見表2大黃酸精氨酸元素分析數據見表2表2大黃酸精氨酸元素分析測定結果
從表2看出，合成大黃酸精氨酸中C、H、N、S的元素分析測定值與理論值偏差均小于0.5％，說明合成品符合所要求的分子式C15H8O6C6H14N4O2，并且說明該反應過程中沒有脫水。
圖2為大黃酸精氨酸復合物熱重分析圖譜；從熱重分析可知，大黃酸精氨酸復合物中不含結晶水。
圖3為大黃酸精氨酸復合物核磁共振碳譜；大黃酸精氨酸復合物13C-NMR測定數據及碳原子歸屬見表3表3大黃酸精氨酸復合物13C-NMR測定數據及碳原子歸屬
注括號內數據為大黃酸[Carbon-13NMR，Sadtler Division，199437703C]或精氨酸[核磁共振波譜分析.分析化學手冊(第二版，化學工業出版社，1999年)，第七分冊909～910]的文獻數據。
經復合物的13C-NMR譜測定數據中大黃酸部分的數據與大黃酸文獻報道的數據比較可以看出，2位碳[δ147.37(138.18)]及2位上的羧基碳[δ172.02(165.06)]的化學位移分別向低場移動約9個單位和7個單位，而精氨酸部分由于其結構中含有中等強度的堿性基團胍基，因此，可以推斷為大黃酸的2位羧基與精氨酸的胍基成鹽，見結構式。
以上事實證明了本發明的大黃酸復合物的新結構。
本發明的進一步改進，可以有以下優化方案1、通式(I)中左側部分為含大黃酸有效部位，其中含量在50-99％范圍。
2、通式(I)中左側部分為大黃酸或大黃酸類化合物的單體化合物，其中的R2～R3、R6～R7有1～2個取代基為-COOH，R1～R8其余位置為任意的以下取代基-H，-O-glucose，-OH，-OCH3，-CH3，其特征是R1～R8至少有2個為-H；R1～R8其余位置優選以下取代基
通式(I)中左側部分最優選為大黃酸(Rhein)。
3、通式(I)中M為堿性氨基酸，優選精氨酸、賴氨酸或肉毒堿。
4、通式(I)中M為含氮有機堿，優選葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪。
上述大黃酸或大黃酸類化合的復合物的制備方法，其特征在于含大黃酸的有效部位或者大黃酸或大黃酸類化合物的單體化合物與含氮有機堿或堿性氨基酸以1∶0.5～4.0的摩爾比，在水和/或醇溶劑中反應。
上述制備方法中，所述含氮有機堿優選葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪；堿性氨基酸優選精氨酸、賴氨酸或肉毒堿。
發明人用大黃酸或大黃酸類化合物與堿性氨基酸或含氮有機堿形成藥用復合物，增加了大黃酸或大黃酸類化合物在水中的溶解性，可以做成以水為載體的藥物制劑，提高人體生物利用度；并且其水溶液的pH更適合人體使用，減少其刺激性和毒性。
大黃酸或大黃酸類化合物可以從藥材中提取得到，也可以合成或用其它方法得到。
大黃藥材(Rheum同屬植物的根莖)，粉碎，用水提取，過濾，水提液中加入無機酸和氧化劑反應，用有機溶劑提取，得到混合物(含大黃酸有效部位)，經柱色譜分離得到大黃酸單體化合物。
其中1含大黃酸有效部位與堿性氨基酸或含氮有機堿形成藥用復合物的制備包括以下步驟將所得的含大黃酸有效部位與水和/或醇混合，按1∶0.5～4.0的比例(摩爾比)，加入堿性氨基酸，優選精氨酸、賴氨酸或肉毒堿，反應(邊攪拌混合均勻)，減壓條件下抽去溶劑，制得；或將所得的含大黃酸有效部位與水和/或醇混合，按1∶0.5～4.0的比例(摩爾比)，加入含氮有機堿，優選葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪，反應(邊攪拌混合均勻)，減壓條件下抽去溶劑，制得。
其中2大黃酸單體化合物與堿性氨基酸或含氮有機堿形成藥用復合物的制備包括以下步驟將所得的大黃酸與水和/或醇混合，按1∶0.5～4.0的比例(摩爾比)，加入堿性氨基酸，優選精氨酸、賴氨酸或肉毒堿，反應(邊攪拌混合均勻)，減壓條件下抽去溶劑，制得；或將所得的大黃酸與水和/或醇混合，按1∶0.5～4.0的比例(摩爾比)，加入含氮有機堿，優選葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪，反應(邊攪拌混合均勻)，減壓條件下抽去溶劑，制得。
上述大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，或者大黃酸或大黃酸類化合物復合物的混合物，加入藥用輔料，制備成藥物制劑。
更進一步方案之一是，本發明人用含大黃酸的有效部位或大黃酸類單體化合物與堿性氨基酸或含氮有機堿形成藥用復合物，實驗結果表明形成的復合物，使原來不溶于水的含大黃酸的有效部位或大黃酸類單體化合物變成了可溶于水的復合物，提高了口服制劑體外溶出度(提示口服制劑的體內生物利用度提高)；復合物水溶性增加，可做成以水為載體的注射劑，在制劑學上發現大黃酸或大黃酸類化合物的鈉鹽為強堿弱酸鹽，水溶液呈堿性，水針pH值較高，生理上難以接受，如降低pH值，則制劑穩定性不好，見實施例49。本發明中大黃酸或大黃酸類化合物的復合物制備的藥物制劑穩定性優于鈉鹽，刺激性減小，見實施例50。因此，可制備大黃酸或大黃酸類化合物的復合物在治療糖尿病腎病的藥學應用。大黃酸或大黃酸類化合物的金屬鹽或堿土金屬鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等也具有治療糖尿病腎病的作用。
本發明的藥用組合物的各種劑型可以按照藥學領域的常規生產方法制備。例如使通式(I)為活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
大黃酸或大黃酸類化合的復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用。
具體應用方式，可以將所述的大黃酸或大黃酸類化合的復合物作為藥物有效成分的原料，然后與藥學上可接受的藥用輔料組合，制成用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物組合物，該組合物含有治療有效劑量的上述任一大黃酸或大黃酸類化合物的復合物和藥學上可接受的載體。
上述任一大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，或者大黃酸或大黃酸類化合物復合物的混合物，加入藥用輔料，制備成藥物制劑。在制備治療治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物應用。所述的藥物組合物是藥劑學上所說的任何一種劑型，包括片劑、膠囊劑、軟膠囊、凝膠劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、靜脈乳劑、脂質體注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑。
本發明的藥用組合物優選通式(I)復合物與其任一大黃酸類化合物任意比例的混合物，其中大黃酸類化合物含量為1％～95％。
本發明的藥用組合物優選含有摩爾比為0.1％～99.5％的通式(I)的復合物，其中大黃酸類化合物含量為1.0％～95％。
本發明的藥用組合物除含有治療有效量的上述通式(I)復合物及其大黃酸類化合物為活性成分，還應含有一種或多種藥學上可接受的載體。
上文所述藥學上可接受的載體是指藥學領域常規的藥物載體，例如稀釋劑、賦形劑和水等，填充劑如淀粉、蔗糖，乳糖、微晶纖維素等；粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；潤濕劑如甘油；崩解劑如羧甲基淀粉鈉，羥丙纖維素，交聯羧甲基纖維素，瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進劑如季銨化合物；表面活性劑如十六烷醇，十二烷基硫酸鈉；吸附載體如高齡土和皂粘土；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、微粉硅膠和聚乙二醇等。另外還可以在組合物中加入其它輔劑如香味劑、甜味劑等。
本發明的藥用組合物可通過口服、直腸或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規的固體制劑如片劑、膠囊、粉劑、顆粒劑等，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其它液體制劑如糖漿、口服液、酏劑等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、粉針、水或油性懸浮劑等。優選的形式是片劑、包衣片劑、膠囊、顆粒劑、口服液和注射劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，其劑型是藥劑學上所說的任何一種劑型，包括片劑、膠囊劑、軟膠囊、噴霧劑、凝膠劑、凝膠吸入機、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、靜脈乳劑、脂質體注射劑、靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，它是大黃酸類化合物及大黃酸類化合物與不同堿基或離子形成的藥用復合物與填充劑、崩解劑組配的片劑或膠囊劑；或者是大黃酸類化合物及大黃酸類化合物與不同堿基或離子形成的藥用復合物與填充劑、羥丙甲纖維素K4M組配的緩釋片劑或膠囊劑；或者是大黃酸類化合物分散于油相中得到大黃酸類化合物軟膠囊。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，其特征在于，所述的填充劑是蔗糖，乳糖、微晶纖維素、糊精、淀粉或磷酸鈣；所述的崩解劑是羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮或交聯羧甲基纖維素鈉；本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，所述制劑中還含有粘合劑、潤濕劑或潤滑劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特征在于，它是大黃酸類化合物與增溶劑或溶劑形成的注射劑；或者是大黃酸類化合物形成的凍干注射用粉針劑；或者是大黃酸類化合物分散于油相中得到的注射用乳劑，或者是混懸型注射液，所述的混懸型注射液是將大黃酸類化合物微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、尼泊金酯和羧甲基纖維素鈉的水溶液，經研磨制得。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄欖油；在所述的油相中還可加增溶劑或潛溶劑或抗氧劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。以上所述的藥物組合物制劑，其特點是，所述的增溶劑是聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯吡咯烷酮、泊洛沙姆、吐溫、聚乙二醇、普流羅尼F-68；所述的助溶劑是精氨酸、賴氨酸、葡甲胺或氨基葡萄糖、二乙胺、乙二胺、尿素、肉毒堿、川芎嗪、煙酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸櫞酸及其鈉鹽。
本發明藥用組合物制劑的各種劑型的制備方法之一是，用大黃酸類化合物或大黃酸類化合物復合物為活性成分與以上所述的一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
本發明的藥用組合物優選含有重量比為0.1％～99.5％的大黃酸類化合物、或大黃酸類化合物復合的活性成分，最優選含有重量比為0.5％～95％的大黃酸類化合物或大黃酸類化合物復合的活性成分。
本發明的通式(I)藥用組合物的施用量可根據用藥途徑、患者年齡、體重、體表面積、所治療的疾病的類型和嚴重程度等變化，其日劑量可以是1～300mg/m2成人體表面積，優選10～200mg/m2成人體表面積。可以一次或多次施用。
下面的實施例可以使本專業技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。
本發明的藥用組合物的各種制劑可按照藥學領域的常規生產方法制備。例如使通式(I)復合物或大黃酸類化合物與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
本發明的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，克服了大黃酸或大黃酸類化合物溶解度小，不易藥用，以及大黃酸類化合物的強堿鹽pH值較高，做成水針不穩定，人體難以接受的不足。大黃酸或大黃酸類化合物的復合物不僅使其水溶性增加，而且可以制備成各種醫藥劑型，尤其是以水為載體的制劑，使用方便；本發明還提供了上述大黃酸類化合物與堿性氨基酸或不同堿基形成藥物復合物的方法。本發明提供上述復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎藥物中的應用，本發明的復合物為弱酸弱堿的復合物，水溶液呈近中性，其注射劑或口服液體溶液也呈近中性，藥學上更容易接受、人體順應性更好，制劑穩定性優于鈉鹽與鉀鹽，水針劑刺激性減小，從而可應用于制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。目前上市產品及文獻報道多為大黃藥材及其復方制劑或大黃的提取物，尚未見含大黃酸或大黃酸類化合物的有效部位與堿性氨基酸或含氮有機堿的復合物文獻報道，更沒有藥品上市，因此本發明首次公開了大黃酸或大黃酸類化合物的復合物及其制備方法、組合物、制備方面的用途。
圖1為大黃酸精氨酸元素分析測定報告；圖2為大黃酸精氨酸復合物熱重分析圖譜；圖3、圖4為大黃酸精氨酸復合物核磁共振碳譜。
具體實施例方式
實施例1、大黃酸的提取精制取大黃粉500g，加入5倍量60％乙醇加熱回流2次，每次1小時，合并提取液，濃縮至約1000ml，加入100ml濃鹽酸，50℃水解1小時，放冷，過濾得沉淀，加入1000ml 5％NaHCO3溶液，加熱溶解，過濾，濾液中加入乙醇使乙醇濃度達到50～90％，過濾，濾液用濃鹽酸調pH3以下，過濾得黃色沉淀，水洗至中性，用冰醋酸重結晶得大黃酸，含量98％以上。
實施例2、大黃酸的制備大黃酚6g，加入150ml醋酐和吡啶的混合液中(1∶1)，室溫過夜，反應物倒入冷水中結晶，過濾，烘干，置300ml醋酸酐和冰醋酸混合液(1∶1)，45℃滴加三氧化鉻溶液，65℃攪拌8小時，反應物倒入水中，結晶，過濾，加入1000ml 25％Na2CO3溶液，氯仿萃取3次后，將Na2CO3溶液加熱煮沸，冷卻，加入鹽酸酸化，待排盡大量氣體后，再加熱煮沸1小時，放冷，結晶，抽濾水洗，冰醋酸重結晶，得2g大黃酸，含量98％以上。
實施例3、含大黃酸50％有效部位的制備大黃粗粉100g，加入5倍量60％乙醇加熱回流水解1小時，抽濾，合并濾液并減壓濃縮至原液體積的30％，得稀糖漿狀物，趁熱加入濃HCL(1體積濃鹽酸/10倍量藥材)攪拌10min以上，離心，得沉淀，加入與濃縮液等體積的5％NaHCO3，，加熱溶解，離心，取上清液，加入乙醇使乙醇含量為60～90％，攪拌，離心，取上清液，加入濃鹽酸至pH2以下，離心，干燥即得棕色粉末。
實施例4、含大黃酸50％有效部位精氨酸復合物的制備取含大黃酸50％有效部位40g置適宜容器中，加水，加入L-精氨酸22g加熱，放冷，加乙醇使醇含量達到60～90％，攪勻至溶解，過濾，濾液濃縮，濃縮液中加入乙醇，使醇含量達到40～80％，靜置，過濾，干燥得到固體28g。實施例5、含大黃酸50％有效部位賴氨酸復合物的制備取含大黃酸50％有效部位40g置適宜容器中，加水，加入L-精氨酸20g加熱，放冷，加乙醇使醇含量達到50～90％，攪勻至溶解，過濾，濾液濃縮，濃縮液中加入乙醇，使醇含量達到40～80％，靜置，過濾，干燥得到固體25g。
實施例6、大黃酸精氨酸復合物的制備取大黃酸2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取L-精氨酸2.5g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到固體3.1g。
實施例7、大黃酸賴氨酸復合物的制備取大黃酸2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取賴氨酸2.3g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到固體2.9g。
實施例8、大黃酸葡甲胺復合物的制備取大黃酸2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取葡甲胺3g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到固體3.1g。
實施例9、大黃酸肉毒堿復合物的制備取大黃酸2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取肉毒堿2.5g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到固體3g。
實施例10、大黃酸川芎嗪復合物的制備取大黃酸2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取川芎嗪2.3g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到固體2.6g。
實施例11、大黃酸氨基葡萄糖復合物的制備取氨基葡萄糖6.3g，溶于250ml蒸餾水，攪拌下加入大黃酸2.5g，加熱回流2h。稍冷卻，加入700ml無水乙醇，離心分離，棄去沉淀。上清液減壓蒸去部分溶劑，至剩余體積約100ml。加入無水乙醇70ml，冷卻，析出黃色固體。過濾，濾餅以含水乙醇重結晶，40度真空干燥，得大黃酸氨基葡萄糖。
實施例12、含大黃酸50％有效部位氨基葡萄糖復合物的制備取氨基葡萄糖6.3g，溶于250ml蒸餾水，攪拌下加入含大黃酸50％有效部位5g，加熱回流2h。稍冷卻，加入700ml無水乙醇，離心分離，棄去沉淀。上清液減壓蒸去部分溶劑，至剩余體積約100ml。加入無水乙醇70ml，冷卻，析出黃色固體。過濾，30～60度真空干燥，得含大黃酸有效部位的氨基酸葡萄糖復合物。
實施例13、含大黃酸50％有效部位肉毒堿復合物的制備取含大黃酸50％有效部位40g置適宜容器中，加水，加入肉毒堿22g加熱，放冷，加乙醇使醇含量達到50～90％，攪勻至溶解，過濾，濾液濃縮，濃縮液中加入乙醇，使醇含量達到40～80％，靜置，過濾，干燥得到固體27g。
實施例14、含大黃酸50％有效部位葡甲胺復合物的制備取含大黃酸50％有效部位40g置適宜容器中，加水，加入葡甲胺27g加熱，放冷，加乙醇使醇含量達到50～90％，攪勻至溶解，過濾，濾液濃縮，濃縮液中加入乙醇，使醇含量達到40～80％，靜置，過濾，干燥得到固體30g。
實施例15、含大黃酸50％有效部位川芎嗪復合物的制備取含大黃酸50％有效部位40g置適宜容器中，加水，加入川芎嗪25g加熱，放冷，加乙醇使醇含量達到50～90％，攪勻至溶解，過濾，濾液濃縮，濃縮液中加入乙醇，使醇含量達到40～80％，靜置，過濾，干燥得到固體30g。
實施例16、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌的制備大黃素6g，加入200ml醋酐和吡啶的混合液中(1∶1)，室溫過夜，反應物倒入冷水中結晶，過濾，烘干，置300ml醋酸酐和冰醋酸混合液(1∶1)，45℃滴加三氧化鉻溶液，65℃攪拌8小時，反應物倒入水中，結晶，過濾，加入1000ml 25％Na2CO3溶液，氯仿萃取3次后，將Na2CO3溶液加熱煮沸，冷卻，加入鹽酸酸化，待排盡大量氣體后，再加熱煮沸1小時，放冷，結晶，抽濾水洗，冰醋酸重結晶，得1.9g 4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌，含量98％以上。
實施例17、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌的制備6-甲基異茜草素6g，反應過程同實施例16，得產品1、3-二羥基-6-羧基蒽醌2g。
實施例18、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌精氨酸復合物的制備取4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取L-精氨酸2.5g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌精氨酸復合物固體。
實施例19、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌賴氨酸復合物的制備取4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌2g置適宜容器中，加乙醇溶解，取L-賴氨酸2.2g溶于水加入大黃酸的溶液中，加熱，攪拌使溶解，減壓條件下抽去溶劑，得到4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌賴氨酸復合物固體。
實施例20、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌氨基葡萄糖復合物的制備與實施例11基本相同，但是其中的大黃酸替換為4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌。
實施例21、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌葡甲胺復合物的制備與實施例8基本相同，但是其中的大黃酸替換為4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌。
實施例22、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌肉毒堿復合物的制備與實施例9基本相同，但是其中的大黃酸替換為4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌。
實施例23、4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌川芎嗪復合物的制備與實施例10基本相同，但是其中的大黃酸替換為4、5、7-三羥基-2-羧基蒽醌。
實施例4～15、18～23所制備的各復合物均分別作為治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例24、大黃酸或含大黃酸有效部位膠囊劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位(以大黃酸計)20g微晶纖維素 60g乳糖100g羧甲基淀粉鈉14g2％HPMCE5溶液 適量6％吐溫80 適量硬脂酸鎂2g大黃酸或含大黃酸有效部位、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉分別過100目篩混合均勻，以含吐溫80的HPMG溶液為粘合劑制軟材，過20目篩制顆粒，濕顆粒于50-60℃烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂混勻，灌裝于膠囊中。
實施例25、大黃酸或含大黃酸有效部位的復合物膠囊劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位的復合物(按大黃酸計算投料，下同)20g微晶纖維素 30g乳糖30g羧甲基淀粉鈉5g2％HPMCE5溶液 適量6％吐溫80 適量硬脂酸鎂1g大黃酸或含大黃酸的復合物、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉分別過100目篩混合均勻，以含吐溫80的HPMC溶液為粘合劑制軟材，過20目篩制顆粒，濕顆粒于50-60℃烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂混勻，灌裝于膠囊中。
實施例26、大黃酸或含大黃酸有效部位片劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位20g微晶纖維素 30g乳糖40g羧甲基淀粉鈉7g2％HPMCE5溶液 適量含5％吐溫80 適量硬脂酸鎂1g大黃酸或含大黃酸有效部位、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉分別過100目篩混合均勻，以含吐溫80的HPMC溶液為粘合劑制軟材，過20目篩制顆粒，濕顆粒于50-60℃烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂混勻，壓片。
實施例27、大黃酸或含大黃酸有效部位復合物片劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位復合物(按大黃酸計算投料，下同)20g微晶纖維素 30g乳糖40g羧甲基淀粉鈉5g2％HPMCE5溶液 適量6％吐溫80 適量硬脂酸鎂1g大黃酸或含大黃酸有效部位復合物、微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉分別過100目篩混合均勻，以含吐溫80的HPMC溶液為粘合劑制軟材，過20目篩制顆粒，濕顆粒于50-60℃烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂混勻，壓片。
實施例28、大黃酸或含大黃酸有效部位復合物腸溶片的制備大黃酸或含大黃酸有效部位復合物干燥，加入淀粉，混勻，以0.5％樟腦油稀醇溶液制成顆粒，干燥，壓成1000片，取丙烯酸2，加蓖麻油混合，加95％乙醇至600ml，用噴霧滾轉包衣法包衣。
實施例29、大黃酸或含大黃酸有效部位復合物腸溶膠囊的制備取大黃酸或含大黃酸有效部位復合物，鄰苯二甲酸醋酸纖維素209，溶于丙酮和乙醇(1∶1)混合液500ml溶液中，攪拌，緩緩滴入正己烷，至沉淀為止，硬化，干燥，再將腸溶微囊裝入普通空心硬膠囊中，制成腸溶膠囊。
實施例30、大黃酸或含大黃酸有效部位緩釋膠囊劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位50g聚維酮 50g微晶纖維素 15g羥丙甲纖維素K4M 50g3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉 2g將大黃酸或含大黃酸有效部位和聚維酮溶于少量乙醇中，減壓加熱以揮去乙醇，所得固體過100目篩；將上述固體與微晶纖維素、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混合均，加入3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻。按處方量灌裝于膠囊中。
實施例31、大黃酸或含大黃酸有效部位復合物緩釋膠囊劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位復合物(按大黃酸計算投料，下同)80g微晶纖維素 15g羥丙甲纖維素K4M 100g3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉 2g將大黃酸或含大黃酸有效部位復合物、微晶纖維素、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混合均，加入3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻。按處方量灌裝于膠囊中。
實施例32、大黃酸或含大黃酸有效部位緩釋片劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位50g
聚維酮 50g乳糖 15g羥丙甲纖維素K4M100g3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉 1g將大黃酸或含大黃酸有效部位和聚維酮溶于少量乙醇中，減壓加熱以揮去乙醇，所得固體過100目篩；將上述固體與乳糖、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混合均，加入3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻，壓片即得。
實施例33、大黃酸或含大黃酸有效部位復合物緩釋片劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位復合物(按大黃酸計算投料，下同)80g乳糖15g羥丙甲纖維素K4M 100g3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉 2g將大黃酸或含大黃酸有效部位復合物、乳糖、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混合均，加入3％羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻，壓片即得。
上述實例還可選用其它輔料，崩解劑如羥丙基淀粉、羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉等；填充劑如乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纖維素、糊精、淀粉、磷酸鈣、磷酸氫鈣、硫酸鈣、碳酸鈣、環糊精、微粉纖維素等；潤濕劑和粘合劑如預膠化淀粉、聚維酮、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、微分硅膠、氫化植物油，聚乙二醇4000和6000；潤濕劑如十二烷基硫酸鈉、吐溫80；骨架材料如羥丙甲纖維素、乙基纖維素等。
實施例34、大黃酸或含大黃酸有效部位軟膠囊內容物 每粒含膠殼大黃酸或含大黃酸有效部位50mg 明膠46.00％大豆油 0.5ml 甘油17.82％水 36.18％取大黃酸或含大黃酸有效部位溶于大豆油中，將此溶液制成軟膠囊。每粒含大黃酸或總大黃酸50mg。
本實施例的軟膠囊還可選用如下輔料溶劑如聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄欖油等；增溶劑或潛溶劑如吐溫80、聚氧乙烯蓖麻油、苯甲酸芐酯、乳酸乙酯、油酯乙酯、磷脂等；抗氧劑如沒食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、維生素E等。膠殼中明膠、甘油與水的比例可適當調節，如明膠/甘油/水三者的比例在1∶0.3～0.4∶0.7～1.4為宜，膠殼中還可添加其他成分，如防腐劑對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯等；增塑劑如山梨醇等；穩定劑如阿拉伯膠等；遮光劑如二氧化鈦、硫酸鋇、沉降碳酸鈣等。
實施例35、大黃酸或含大黃酸有效部位注射用乳劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位 20g大豆油50g大豆磷脂 12g甘油 25g注射用水加至 10000ml在氮氣流下，將豆磷脂加入大豆油攪拌使其溶解，加入甘油和大黃酸或含大黃酸有效部位攪拌溶解，攪拌條件下慢慢加入注射用水，經二步高壓乳勻機乳化；仍在氮氣流下，用4號垂熔玻璃漏斗減壓過濾，并在氮氣流下裝瓶軋蓋，先經預熱再于121℃滅菌15分鐘，滅菌完畢后，沖熱水逐漸冷卻即得。
本例中還可選用以下輔料注射用油如油酸乙酯、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄欖油、肉豆蔻酸異丙酯等；抗氧劑如沒食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、維生素E等；表面活性劑如吐溫類、聚氧乙烯蓖麻油、磷脂類、普流羅尼等。
實施例36、大黃酸復合物或含大黃酸有效部位復合物注射劑的制備大黃酸復合物或含大黃酸有效部位的復合物(以大黃酸計)10g注射用水加至5L取大黃酸復合物或含大黃酸有效部位的復合物，加入注射用水中，充分溶解，加入0.1％活性炭，加熱煮沸15分鐘，過濾除炭，調pH值至5.0～7.0，測中間體含量、pH值，合格后，灌封于玻璃安剖中，100℃，30分鐘流通蒸氣滅菌，得大黃酸復合物或含大黃酸有效部位的復合物注射劑。
實施例37、大黃酸或含大黃酸有效部位注射劑大黃酸或含大黃酸有效部位10.0g精氨酸或賴氨酸 6.2g氯化鈉 適量注射用水加至10000mL取大黃酸或含大黃酸有效部位與精氨酸或賴氨酸(或取復合物)置適宜容器中，加注射用水9000ml，攪拌均勻，超聲至溶解，加入氯化鈉攪拌使溶解，補加注射用水至10000ml，經0.22μm微孔濾膜過濾，分裝封口，于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘即得。
實施例38、注射用大黃酸或含大黃酸有效部位粉針劑的制備大黃酸或含大黃酸有效部位10.0g精氨酸或賴氨酸 6.2g甘露醇 16.0g注射用水至 10000ml取大黃酸或含大黃酸有效部位與精氨酸或賴氨酸置適宜容器中，加注射用水9000ml，攪拌均勻，超聲至溶解，加入甘露醇攪拌使溶解；按0.1％加入針用活性炭，攪拌30分鐘，經鈦砂芯脫碳抽濾到潔凈的容器中，補加注射用水至10000ml，將溶液攪拌5分鐘使均勻，再經0.22μm微孔濾膜過濾，濾液灌裝在西林瓶中，每瓶2ml或5ml，然后部分地塞上丁基橡膠賽，送至凍干箱內的板層上，插入溫度探頭，關閉箱門。按凍干曲線冷凍干燥，最后干燥溫度為35℃以上并保持2小時。密塞，放氣，出箱，軋蓋。
實施例39、注射用大黃酸復合物粉針劑的制備大黃酸復合物15.0g甘露醇 16.0g注射用水至 10000ml取大黃酸復合物(可以是大黃酸的精氨酸、賴氨酸、氨基葡萄糖、葡甲胺等復合物)置適宜容器中，加注射用水9000ml，攪拌均勻，超聲至溶解，加入甘露醇攪拌使溶解；按0.1％加入針用活性炭，攪拌30分鐘，經鈦砂芯脫碳抽濾到潔凈的容器中，補加注射用水至10000ml，將溶液攪拌5分鐘使均勻，再經0.22μm微孔濾膜過濾，濾液灌裝在西林瓶中，然后部分地塞上丁基橡膠賽，送至凍干箱內的板層上，插入溫度探頭，關閉箱門。按凍干曲線冷凍干燥，最后干燥溫度為35℃以上并保持2小時。密塞，放氣，出箱，軋蓋。
實施例40、大黃酸或含大黃酸有效部位混懸型注射劑大黃酸或含大黃酸有效部位10g羧甲基纖維素鈉 5g聚山梨脂80 0.1g磷酸二氫鉀 8.3g磷酸氫二鉀 0.8g注射用水 加至 10.0L將大黃酸或含大黃酸有效部位進行氣流粉碎，得粒徑10μm以下的微粉。將磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀溶于注射用水中，加入羧甲基纖維素鈉，60℃條件下使全部溶解，過濾。將微粉化后的大黃酸或總大黃酸置于容器中，加聚山梨脂80研成細糊狀，將上述溶液逐漸加入，攪拌均勻后，經膠體磨研磨5至10次。按常規測定方法測定含量合格后，分裝在安瓿中，于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘即得。
本實施例的注射劑還可選用如下輔料增溶劑如吐溫類、普流羅尼F-68、聚氧乙烯蓖麻油等；助溶劑如氨基酸類化合物如組氨酸、賴氨酸、肉毒堿、鳥氨酸酰胺類化合物如尿素、乙酰胺、硫脲、苯甲酰胺等，含羥基或羧基的化合物如蔗糖、枸櫞酸及其鈉鹽、乳酸、水楊酸鈉等；助懸劑如羧甲基纖維素鈉、聚維酮、羥丙甲基纖維素等；pH調節劑如枸櫞酸及枸櫞酸鹽、磷酸鹽等；溶劑如注射用水、注射用乙醇、丙二醇等。
實施例41、大黃酸精氨酸復合物口服液的制備取大黃酸精氨酸復合物溶于純化水中，攪拌使充分溶解，加入85％的單糖漿，調節pH值3.5～7.0，再加0.3％的苯甲酸鈉作防腐劑，加熱煮沸30分鐘，用0.8μm的微孔濾膜過濾，灌封于20ml的棕色口服玻璃瓶中，100℃，30分鐘滅菌，得大黃酸精氨酸復合物口服液。
實施例42大黃酸精氨酸復合物注射液的制備取大黃酸精氨酸復合物，加入注射用水中，充分溶解，加入0.1％活性炭，加熱煮沸15分鐘，過濾除炭，調pH值至5.0～7.0，測中間體含量、pH值，合格后，灌封于玻璃安剖中，100℃，30分鐘流通蒸氣滅菌，得大黃酸精氨酸注射劑。
實施例43、大黃酸大黃酸精氨酸復合物(98.0-99.9％0.1-2.0％)乳注射液的制備將大黃酸倒入攪拌罐內加熱至80℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質機循環罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質機，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的大黃酸、大黃酸精氨酸復合物與豆磷脂的混合物，加入完畢后關閉加油孔，調節高壓均質機壓力，使低壓10Mpa，高壓32Mpa，連續循環5遍，加入少量精氨酸或賴氨酸，連續循環1遍取樣檢驗，灌封滅菌即得。
實施例44、大黃酸賴氨酸復合物片劑的制備大黃酸賴氨酸復合物6g微晶纖維素40g乳糖 50g羥甲基淀粉鈉 6g10％淀粉漿適量硬脂酸鎂 1g取大黃酸賴氨酸復合物過160目篩，微晶纖維素，乳糖，羥甲基淀粉鈉分別過100篩，將復合物與上述敷料復合均勻，以10％淀粉漿微粘合劑制軟財，過20目篩制顆粒，濕顆粒于60度烘箱鼓風干燥；干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂混勻，壓片，包衣或包腸衣。
實施例45、大黃酸賴氨酸復合物膠囊的制備大黃酸賴氨酸復合物5.8g微晶纖維素40g
乳糖50g羧甲基淀粉鈉6g10％淀粉漿 適量硬脂酸鎂1g微粉硅膠1g取實施例大黃酸賴氨酸復合物過160目篩，微晶纖維素，乳糖，羧甲基淀粉鈉分別過100目篩，將復合物與上述敷料混合均勻，以10％淀粉漿為粘合劑制軟材，過20目篩制顆粒，濕顆粒于50度烘箱鼓風干燥，干顆粒過20目篩整粒，與硬脂酸鎂和微粉硅膠混勻，灌裝于膠囊中。
實施例46、大黃酸賴氨酸復合物口服液的制備取大黃酸賴氨酸復合物溶于純化水中，攪拌使充分溶解，加入85％的單糖漿，調節pH值5.5～8.5，再加0.3％的苯甲酸鈉作防腐劑，加熱煮沸30分鐘，用0.8μm的微孔濾膜過濾，灌封于20ml的棕色口服玻璃瓶中，100℃，30分鐘滅菌，得大黃酸賴氨酸復合物口服液。
實施例47、大黃酸賴氨酸復合物注射液的制備取大黃酸賴氨酸復合物適量，加入注射用水中，充分溶解，加入0.1％活性炭，加熱煮沸15分鐘，過濾除炭，調pH值至5.5～8.5，測中間體含量、pH值，合格后，灌封于玻璃安剖中，100℃，30分鐘流通蒸氣滅菌，得大黃酸賴氨酸注射劑。
實施例48、大黃酸氨基葡萄糖復合物骨關節腔注射液的制備取大黃酸氨基葡萄糖復合物，加入注射用水中，充分溶解，加入0.1％活性炭，加熱煮沸15分鐘，過濾除炭，調pH值至5.0～7.0，測中間體含量、pH值，合格后，灌封于玻璃安剖中，100℃，30分鐘流通蒸氣滅菌，得大黃酸氨基葡萄糖骨關節腔注射液。
實施例49、不同大黃酸或含大黃酸有效部位的金屬鹽或復合物水針劑比較取不同大黃酸或含大黃酸有效部位的金屬鹽或復合物適量，置10ml容量瓶中，加水，振搖使溶解，定容，即得水為載體的制劑，其中大黃酸或含大黃酸有效部位鈉鹽或鉀鹽制劑用稀鹽酸回調pH，結果見表4。
表4
實施例50大黃酸鈉鹽、大黃酸精氨酸復合物水針劑安全性比較家兔耳緣靜脈無菌操作分別緩慢靜脈注入大黃酸鈉鹽、大黃酸精氨酸復合物及0.9％氯化鈉注射液，間日一次，連續3次，結果表明，與對照組相比大黃酸精氨酸復合物對家兔耳緣靜脈無刺激性，組織切片檢查兔耳緣靜脈血管結構正常，無內皮損傷，無血栓形成及其它藥理性變化，大黃酸鈉鹽對家兔耳緣靜脈有刺激性，組織切片檢查兔耳緣靜脈血管略有擴張，部分內皮細胞壞死、脫落，周圍組織見炎癥反應。
實施例51大黃酸氨基葡萄糖復合物對關節炎的治療作用1.對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響選用雄性昆明種小鼠，體重為18-22g，共50只，隨機分為5組，分別為模型對照組、阿司匹林組、大黃酸鈉組、大黃酸氨基葡萄糖大劑量組和小劑量組，每組10只，每天灌胃給藥，0.2ml/10g體重，模型對照組給予等體積的生理鹽水，每天1次，連續給藥3天，于末次給藥60分鐘后，按文獻方法[徐淑云 藥理實驗方法學(第三版)911]進行試驗，并計算耳廓腫脹度，進行統計分析。
試驗結果見表5。
表5大黃酸氨基葡萄糖對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(X±SD，n＝10)
**P＜0.01與模型對照組相比結果顯示大黃酸氨基葡萄糖對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用，與模型對照組比較，差異有極顯著性意義(P＜0.01)。
2.對大鼠對急性胸膜炎滲出與白細胞游走的影響選用體重為200±20g的雄性大鼠，共40只，分為5組，分別為模型對照組、消炎痛組、大黃酸鈉組、大黃酸氨基葡萄糖大劑量組和小劑量組，每組8只，腹腔給藥1h后，按文獻方法[徐淑云藥理實驗方法學(第三版)916]用角叉菜膠致大鼠急性胸膜炎，4h后處死，測胸腔內滲出液體積及白細胞總數。結果見表6。
表6大黃酸氨基葡萄糖對大鼠對急性胸膜炎滲出與白細胞游走的影響(X±SD，n＝8)
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對照組相比。
結果顯示大黃酸氨基葡萄糖大、小劑量組能明顯對抗角叉菜膠致大鼠急性胸膜炎滲出與白細胞的游走。
3.對小鼠免疫功能的影響選用昆明種小鼠，雌雄各半，體重為18-22g，共50只，隨機分為5組，分別為模型對照組、環磷酰胺組、大黃酸鈉組、大黃酸氨基葡萄糖大劑量組和小劑量組，每組10只，每天灌胃給藥，0.2ml/10g體重，每天1次，連續給藥3天，于每次給藥后30分鐘，按文獻方法[徐淑云藥理實驗方法學(第一版)934]進行試驗，并計算吞噬指數K及校正吞噬指數α，按t檢驗法進行統計學處理，結果見表7。
表7大黃酸氨基葡萄糖對小鼠免疫功能的影響(X±SD，n＝10)
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對照組比較結果表明大黃酸氨基葡萄糖能降低小鼠廓清指數及吞噬指數，提示具有調節免疫功能的作用。
4、大黃酸氨基葡萄糖對大鼠肉芽腫形成的影響大鼠隨機分為5組(模型對照組，消炎痛組，大黃酸氨基葡萄糖大、小劑量組和大黃酸鈉組)每組10只，按文獻方法[徐淑云藥理實驗方法學(第三版)918]進行造模，手術當日開始給藥。消炎痛肌肉注射10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g；生理鹽水組及給藥組，每次給藥體積0.4ml/100g，灌胃給藥。二周后處死，按文獻方法進行試驗，并計算肉芽凈重，進行組間t檢驗。試驗結果如下(表8)表8大黃酸氨基葡萄糖對大鼠紙片肉牙腫形成的影響(X±SD，n＝10)
**p＜0.01，與生理鹽水組相比。
試驗結果表明ig大黃酸氨基葡萄糖大劑量組、小劑量組與模型組比較，對抑制大鼠紙片肉牙腫形成有明顯作用，p＜0.01。
5、對醋酸誘發小鼠扭體反應的影響選用昆明種小鼠，雌雄各半，體重為18-22g，共50只，隨機分為5組，分別為模型對照組、阿司匹林組、大黃酸鈉組、大黃酸氨基葡萄糖大劑量組和小劑量組，每組10只，每天灌胃給藥，0.2ml/10g體重，每天1次，連續給藥12天，末次給藥后30min，按文獻方法[徐淑云藥理實驗方法學(第三版)882]進行試驗，并計算扭體反應抑制率，結果見表9。
表9大黃酸氨基葡萄糖對小鼠扭體反應的影響(X±SD，n＝10)
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對照組比較試驗結果表明ig大黃酸氨基葡萄糖大劑量組、小劑量組與模型組比較，能抑制醋酸致小鼠扭體反應的發生，與模型組相比，差異具有顯著性意義，提示大黃酸氨基葡萄糖具有鎮痛作用。
以上5項試驗結果顯示本發明中制備的大黃酸氨基葡萄糖具有抗炎、調節免疫、鎮痛作用，可以用于關節炎的治療。
實施例53、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌精氨酸復合物的制備與實施例6基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例54、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌賴氨酸復合物的制備與實施例7基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例55、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌葡甲胺復合物的制備與實施例8基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例56、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌肉毒堿復合物的制備與實施例9基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例57、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌川芎嗪復合物的制備與實施例10基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例58、1、3-二羥基-6-羧基蒽醌氨基葡萄糖復合物的制備與實施例6基本相同，但是其中的大黃酸替換為1、3-二羥基-6-羧基蒽醌。并用于治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物。
實施例59～64、含大黃酸80％有效部位復合物的制備含大黃酸80％有效部位的制備與實施例3基本相同；后續步驟分別與實施例4、5、12、13、14、15基本相同，但其中含大黃酸有效部位復合物為80％。
權利要求
1.一種大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，該復合物的結構如通式(I) 通式(I)中的左側部分為以下兩者之一(1)大黃酸或大黃酸類化合物單體成分，其中的R2～R3、R6～R7有1～2個取代基為-COOH，R1～R8其余位置為任意的以下取代基-H，-O-glucose，-OH，-OCH3，-CH3，其特征是R1～R8至少有2個為-H；(2)含大黃酸的、從植物中提取的有效部位；通式(I)中的M表示含氮有機堿或堿性氨基酸，所述的大黃酸或大黃酸類化合物與含氮有機堿或堿性氨基酸以分子間作用力結合形成復合物。
2.按照權利要求1所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，所述的通式(I)中左側部分的大黃酸在有效部位的含量在50～99％范圍。
3.按照權利要求1所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，所述的通式(I)中左側部分其特征在于，其中所述的R1～R8選自以下表中的取代基
4.按照權利要求1所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，所述的通式(I)中左側部分為大黃酸。
5.按照權利要求2所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，所述的含大黃酸有效部位是來自大黃Rheum palmatum L.、Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或Rheum officinale Baill.及同屬植物、虎杖Polygonum cuspidatumSieb.et Zucc.及同屬植物、蕃瀉葉Folium sennae及同屬植物、何首烏Polygonum multiflorum Thunb.及同屬植物、決明子Semen cassiae及同屬植物中提取而得。
6.按照權利要求1或2或3或4或5所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，所述的通式(I)中M部分的堿性氨基酸為，精氨酸、賴氨酸或肉毒堿。
7.按照權利要求1或2或3或4或5所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，其特征在于，所述的通式(I)中M部分的含氮有機堿為，葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪。
8.一種權利要求1所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物的制備方法，其步驟是含大黃酸的有效部位或者大黃酸或大黃酸類化合物的單體化合物與含氮有機堿以1∶0.5～4.0的摩爾比，在水和/或醇溶劑中反應；或，含大黃酸的有效部位或者大黃酸或大黃酸類化合物的單體化合物與堿性氨基酸以1∶0.5～4.0的摩爾比，在水和/或醇溶劑中反應。
9.按照權利要求8所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物的制備方法，其特征在于，具體步驟是大黃酸單體化合物與含氮有機堿或堿性氨基酸形成藥用復合物的制備包括以下步驟將大黃酸與水和/或醇混合，按1∶0.5～4.0的摩爾比，加入含氮有機堿，優選為葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪；或加入堿性氨基酸，優選為精氨酸、賴氨酸或肉毒堿，反應，邊攪拌混合均勻，減壓條件下抽去溶劑，制得。
10.按照權利要求8或9所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物的制備方法，其特征在于，大黃酸單體化合物與賴氨酸形成藥用復合物的制備包括以下步驟將大黃酸與水和/或醇混合，按1∶0.8～2.0的摩爾比，加入賴氨酸，反應，邊攪拌混合均勻，減壓條件下抽去溶劑，制得。
11.一種權利要求1～7之一所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用。
12.按照權利要求11所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用，其特征在于，其劑型是片劑、膠囊劑、軟膠囊、噴霧劑、凝膠劑、凝膠吸入劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、靜脈乳劑、脂質體注射劑、靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑。
13.按照權利要求11或12所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物在制備治療骨關節炎、風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用，其特征在于，所述的通式(I)中左側部分為大黃酸。
14.按照權利要求11或12所述的大黃酸或大黃酸類化合物的復合物在制備預防和治療糖尿病腎病的藥物中的應用，其特征在于，所述的堿性氨基酸為精氨酸、賴氨酸或肉毒堿；所述的含氮有機堿為葡甲胺、氨基葡萄糖或川芎嗪。
全文摘要
大黃酸或大黃酸類化合物的復合物，通式(I)中的左側部分為以下兩者之一(1)大黃酸或大黃酸類化合物單體成分，其中的R2～R3、R6～R7有1～2個取代基為－COOH，R1～R8其余位置為任意的以下取代基－H，－O－glucose，－OH，－OCH
文檔編號A61K9/00GK1899275SQ20061010650
公開日2007年1月24日 申請日期2006年7月11日 優先權日2005年7月11日
發明者叢曉東 申請人:江蘇聯創醫藥技術有限公司