復方利福平微片膠囊的制備方法

專利名稱：復方利福平微片膠囊的制備方法
技術領域：
本申請實際上是一種已經獲得專利授權的續申請，發明人已經獲得授權的發明專利名稱是“一種復方利福平制劑的釋藥系統”，其專利申請號是03101211.6，其授權專利證書號是208518，本申請是根據研究的進一步深入，在專利03101211.6的基礎上新發明的一種復方利福平制劑的制備方法。
背景技術：
世界衛生組織(WHO)為防止耐藥性結核病的發生，于2001年第一號(79卷第1期)公告向全球推薦了固定劑量復合(FDC)制劑的12種標準化處方組合。WHO在推薦FDC制劑標準處方的同時，非常強調在制造FDC制劑的時候，一定要保障FDC制劑的產品質量和FDC制劑中利福平生物利用度不受損失。對于FDC制劑的產品質量和保障利福平的生物利用度不遭受損傷的研究各國藥學工作者截止到目前為止，一直也沒有停頓。迄今為止，關于這方面的研究結果可以歸納為以下幾點1、利福平的降解是環境PH和溫度的函數，因此，在體內胃酸的環境下利福平產生降解，當有異煙肼并存的情況下，利福平的降解將加速。根據該研究結果，提示在FDC制造時應該盡量使利福平在吸收前避開酸性環境，以及在酸性環境中與異煙肼相遇，例如，將利福平在小腸上部釋放的概念。
2、在FDC制劑固體環境下，利福平與異煙肼接觸，不僅利福平產生降解，異煙肼也產生降解，吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇、濕度、溫度對這種降解起到催化作用。因此，提示在FDC制劑的固體環境中應該避免利福平與異煙肼密切接觸，并對FDC制劑防濕、避溫。
3、由于含利福平的抗結核FDC制劑在制造中存在上述很難克服的降解問題，在FDC制劑制造和貯運的過程中，很容易造成FDC制劑產品質量的下降。因此，對FDC制劑的產品質量應該進行嚴格的控制，其重點除了各組分的溶出度、釋放度控制以及含量檢測之外，尤為重要的是應對各藥物組分的降解產物進行檢測控制。然而，截止到目前為止還沒有簡便的和有效的分析技術可以對抗結核FDC制劑中利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇的降解產物進行有效的檢測，尤其是3藥和4藥的FDC制劑。
目前不少的藥物制劑專利致力于解決的問題是防止FDC制劑中利福平的生物利用度不遭受損失，例如專利WO02/087547 A1，WO2004/041284等。這些專利都公開了一些行之有效的解決問題的方法，然而，也同時存在一定的缺陷。本申請是根據研究的進一步深入，在專利03101211.6的基礎上新發明的一種復方利福平制劑的制備方法。本發明的改進針對專利03101211.6來說也許是微小的，但是，在現實產品的工業化生產中具有顯著意義的。然而，由于在一些地方進行了改進，也同樣會產生無法避免的缺陷。科學的進步總是伴隨著優點和缺陷并存的狀態，不能因為有缺陷并存而忽略進步的優點，也同時激勵著研究者去不斷地發揚優點克服缺陷。

發明內容
發明專利“一種復方利福平制劑的釋藥系統”實際上是發明提供了一種復方利福平制劑，這種制劑可以解釋為是一種復方利福平制劑的釋藥系統，因為這種制劑涉及了由四種一線抗結核藥物利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇制備成四種藥物微丸，以及他們的制備方法，并由這四種分別按照世界衛生組織公布的標準處方的藥物用量，有組合規律的將利福平微丸與另外三種微丸填充到一個膠囊殼中，形成一種特殊的復方利福平制劑的釋藥系統，這種系統后來被中國國家藥典委員會命名為利福平復方制劑的“雙釋放”制劑，其特點是有些藥物微丸是在胃中釋放，有些藥物微丸是在小腸上部釋放。由這種雙釋放釋藥系統，可以有效地保護復方利福平制劑中利福平和異煙肼的穩定性，提高產品的質量和保障利福平的生物利用度不遭受損失。
在03101211.6發明專利中，發明人對外公布的是以微丸技術為基礎的釋藥系統的組成方法以及4種藥物微丸的制備方法。這種制備方法的特點就是分別將各種藥物制作成微丸，然后再將微丸裝填入膠囊中。這種做法有效的解決了利福平和異煙肼在制劑中的接觸，避免了由于藥物間接觸產生的降解問題。
然而，隨著制藥機械的快速發展，給藥學研究者提供了更好的制造方法。本發明的核心技術就是首先將利福平制成微片(即微小的片劑，簡稱微片)，或者將這4種藥物全部制成單方微片、或者部分制成單方微片部分組合制成復方微片，并嚴格按照WHO提出的抗結核固定劑量復合制劑的標準藥物配伍處方，進行藥物配伍，將符合比例的上述藥物的微片與上述藥物的原粉、或顆粒、或微丸使用多工位膠囊填充機依次填充入膠囊中，最終形成具有將微片作為膠囊填充物這樣特點的微片膠囊劑型。這種復方利福平制劑的最主要特征是在膠囊填充物中，至少有一種藥物組分是以微片的形式填充入膠囊，且利福平組分不與其它藥物組分形成復方膠囊填充物，例如，將利福平原料與其它3種藥物原料直接混合后進行膠囊填充，或者將利福平與其它3種藥物制成復方的微片、或顆粒、或微丸后進行膠囊填充。
在制備工藝中，可以對膠囊中的填充物，包括微片、顆粒、微丸、甚至原粉等進行胃溶材料或者腸溶材料(主要指在小腸上部釋放的腸溶材料)的分別包衣。這樣做的目的是一方面起到對各藥物成分實施隔離，避免在制劑中由于藥物直接接觸而產生的藥物降解，另一方面，也可以如專利03101211.6那樣在體內的釋藥過程中形成雙釋放釋藥體系，避免藥物在體內的降解，從而保障藥物的生物利用度不遭受損失。
采用上述方法可以有以下組合填充方式(1)將利福平組分制備成微片，并對利福平組分所形成的微片實施腸溶包衣。其它異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇這三種成分分別制備成微片進行胃溶材料包衣。然后按照標準處方使用多工位膠囊填充機進行膠囊填充也可以形成2藥、或3藥、或4藥的復方利福平制劑。
這種方式還可以進行多種延伸組合，例如，將利福平制備成腸溶微片，而其它成分制備成顆粒、微丸、甚至原粉，然后與利福平微片進行膠囊填充；再例如，將利福平成分制備成腸溶顆粒、或者腸溶微丸，而將其它成分制備成微片，或者其中一種、或者兩種成分制備成微片，而其它成分制備成顆粒、微丸、甚至直接使用原粉，然后再實施膠囊填充。總之，還會列舉出一些組合方式，但是，不管如何組合，這種填充方式應該具備兩種特征其1是利福平組分是實施腸溶包衣，而其它組分是實施胃溶包衣或者不包衣，然后填充膠囊；其2是在膠囊中至少有一種組分是采用微片填充形式。
(2)將異煙肼成分制備成微片，并對異煙肼成分所形成的微片實施腸溶包衣。其它利福平、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇這三種成分分別制備成微片進行胃溶材料包衣。然后按照標準處方使用多工位膠囊填充機進行膠囊填充也可以形成2藥、或3藥、或4藥的復方利福平制劑。
這種方式還可以進行多種延伸組合，例如，將異煙肼制備成微片，而其它成分制備成顆粒、微丸、甚至原粉，然后與異煙肼微片進行膠囊填充；再例如，將異煙肼成分制備成腸溶顆粒、或者腸溶微丸，而將其它成分制備成微片，或者其中一種、或者兩種成分制備成微片，而其它成分制備成顆粒、微丸、甚至直接使用原粉，然后再實施膠囊填充。總之，還會列舉出一些組合方式，但是，不管如何組合，這種填充方式也應該具備兩種特征其1是異煙肼組分是實施腸溶包衣，而其它組分是實施胃溶包衣或者不包衣，然后填充膠囊；其2是在膠囊中至少有一種組分是采用微片填充形式。
(3)在上述(1)和(2)的制備組合以及分別對利福平和異煙肼組分進行單獨處理的基礎上，可以將吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇進行按比例混合，然后做成這兩種成分的復方微片，使用這種復方微片與利福平和異煙肼組分進行組合膠囊填充。也可以將利福平組分單獨腸溶包衣處理，將異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇進行按WHO標準處方的配伍比例混合，然后做成這三種成分的復方微片。還可以將利福平組分單獨腸溶包衣處理，將異煙肼、吡嗪酰胺進行按WHO標準處方的配伍比例混合，然后做成這二種成分的復方微片。上述這3種制備方式的優點是可以使用3工位膠囊填充機實施4藥組分的膠囊填充或者使用2工位膠囊填充機實施4藥組分和3藥組分的膠囊填充。
上述的制備方式還可擴展為將利福平組分單獨腸溶包衣處理，將異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇進行按WHO標準處方的配伍比例制備成2藥、或3藥復方顆粒、或者復方微丸然后與利福平組分進行膠囊填充等。
將利福平之外的其它3種組分制備成復方微片、顆粒、微丸的原因是這3種藥物都屬于水溶性良好的化學物質，如果沒有利福平的介入，將其混合以后，對各藥物組分的穩定性不會帶來明顯的負面影響，但是，卻可以帶來簡化膠囊填充的優點。這種填充方式應該具備兩種特征其1是利福平組分是單方形式，而其他組分是復方形式；其2是在膠囊中至少有一種組分是采用微片填充形式。
之所以采用微片膠囊填充形式，這種方法的優點與專利03101211.6相比較是在建立各藥物組分的降解產物檢測方法中，需要對藥物組分進行挑揀，微片的挑揀相對于微丸的挑揀，要簡單的多，這樣可以優化產品檢驗的操作過程，這對于產品的工業化生產是非常重要的。基于這樣的優點顯然可見，在上述(1)、(2)、(3)兩種組合填充方式中，以4種藥物組分都分別制備成微片是最佳的組合填充方式。其次是將利福平或異煙肼分別制備成微片，其它組分可采用微丸、顆粒、或者原粉的方式，但是，采用這種方式，其方便于挑揀的優點將會打折扣，然而，如果采用更為先進的檢測方法解決了復方組分中各藥物的降解產物檢測，則在對利福平組分實施分別處理的基礎上，其它組分采用復方處理方式，將對于簡化膠囊填充，降低設備投資，進而對最大限度的降低產品的生產成本是非常有利的。
對于腸溶包衣材料而言，如專利03101211.6中介紹的包衣材料即可，其主要點在于實施腸溶包衣時，由于要求包衣對象的藥物組分是在人體的小腸上部釋放，因此，包衣材料對pH的敏感點在pH5.0～pH5.5之間最好。對于胃溶包衣材料而言，也如專利03101211.6中的描述，當然也可以選用其它的胃溶包衣材料，但只要不破壞被包衣的藥物組分能在胃中開始快速釋放為基本原則。需要指出的是，使用胃溶包衣材料的主要目的是在制劑中對藥物組分進行隔離，因此，常規上還將使用胃溶包衣材料對藥物進行包裹的做法稱之為“包隔離層”。
微片的直徑尺寸非常重要，如果尺寸過大，膠囊裝填出現困難，如果尺寸過小，則浪費膠囊內容空間。因為，按照WHO的標準藥物配伍處方，結核病患者每日的服用藥量比較大，例如，體重在60kg的成年患者，強化期每日需要服用600mg的利福平，300mg的異煙肼，1600mg的吡嗪酰胺和1100mg的鹽酸乙胺丁醇，4藥合起來的總量高達3600mg。如果微片的尺寸掌握不好，就會造成膠囊內容體積的浪費，最終致使需要使用更多的膠囊數量，不僅患者服用不便，還會使產品成本增加。因此，最佳的微片直徑應該在6.0mm～7.8mm、5.5mm～7.0mm、4.5mm～6.0mm、4mm～5.7mm之間，這樣，對應于所使用的膠囊殼是00號、0號、1、2號膠囊。如果直徑再小，對于抗結核復方利福平制劑而言，由于藥量較大，是沒有意義的。當然，微片所需制備的直徑大小與所要裝填的規格有關系，由于本品中含有2～4種主藥成分，而且各主藥的成分含量差異較大，因此應根據需要制備成合適直徑的微片再裝入相應的膠囊中，不可死搬教條的照套上述微片的尺寸，但是，整體看來，所有微片的尺寸應該控制4mm～7.8mm之間，不可過大，尤其是不可過小，最小也不要小于3mm。
微丸的外形也非常重要，一般片劑的外型大都采用向外圓凸形，這樣有利于患者吞咽。對于裝填入膠囊的微片來說，采用向外圓凸形顯然不利于節省膠囊內容空間，因此，需要采用平面圓片外形。為了便于起模，圓片外周具有傾斜棱角是有利的，但傾斜棱角不宜過大。片劑的厚度沒有固定的要求，但是，也不宜過厚。
對于利福平組分的微片而言，微片的硬度非常重要，硬度過大，不利于利福平的釋放，硬度過小，容易碎片。雖然硬度要求隨所采用的輔料不同而不同，但是，對于大多數常用片劑輔料而言，當硬度超過8kg/cm2時，利福平不易從片中釋放，當硬度小于3kg/cm2時，片劑在包衣和膠囊填充的過程中容易碎片。
對于利福平或異煙肼組分而言，將其制備成單組分的腸溶微片以后，應該在膠囊裝填之前對其釋放情況進行檢測，其檢測的方法和釋放限度的要求如下可采用中國藥典(2005年版)二部規定的藥物釋放度檢測方法中的第二法。儀器裝置采用轉籃法、溫度37℃，轉速每分鐘50轉。利福平或者異煙肼在酸中的釋放量2小時內應小于標示量的10％；利福平或異煙肼在緩沖溶液中的釋放量45分鐘內應大于標示量的75％，最佳應大于85％以上。
對于實施腸溶包衣的微片而言，為了更好地實施腸溶材料包衣，可以在微片上首先進行水溶性材料包隔離衣，水溶性包衣材料可以是藥用輔料所允許使用的材料，例如PVP等。進行水溶性隔離衣包裹的原因是在微片進行腸溶包衣的初期，會有少量的藥物粉末脫離微片，在包衣環境中形成飛揚的細粉，這些細粉容易混合在由噴頭噴出的包衣液中，并最終夾雜在腸溶包衣層中，這樣就造成藥物在進行胃溶液釋放度測定時藥物過量的釋放，這在質量控制中是不允許的。當然，如果經過試驗，微片藥物細粉脫離的很少，則隔離層就不再需要了。
采用上述復方利福平制劑的制備方法與專利03101211.6所描述的方法相比較，如果藥物的組分都采用單組分微片進行膠囊填充，不僅可以保留專利03101211.6的優點，還可以克服專利03101211.6的微丸膠囊產品在進行降解產物檢測時對微丸分揀的煩瑣。
如果對除了利福平組分以外的其它組分采用復方形式的微片，然后與利福平組分進行膠囊填充的方式，可以簡化膠囊填充，但是需要配合能夠檢測復方組分的檢測方法。
采用本發明與專利03101211.6比較的一個不足點是利福平微片的釋放略差于利福平微丸的形式。
綜上所述，上述方法與專利03101211.6描述的復方利福平制備方法相比較，優點和缺點兼備。然而，在當前制藥技術競爭激烈的環境下，本發明所描述的復方利福平制劑的制備方法在降低生產設備成本、簡化檢測操作方面所具有的優勢對生產企業將仍然具有很好的誘惑力。
具體實施例方式
上面已詳述本發明，再結合實施例公開微片的體外釋藥特性進一步詳述本發明，顯然，實施例僅供說明絕非限制。
實施例1 異煙肼腸溶微片的制備和體外釋藥特性
1、異煙肼腸溶微片的制備異煙肼素片處方 異煙肼25g，淀粉5g，5％聚維酮(K30)溶液適量，硬脂酸鎂0.12g，共制1000片。
制法 按處方量分別稱取異煙肼與淀粉，過100目篩后混勻，用5％聚維酮(K30)溶液制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為4mm。
腸溶包衣溶液的配制取羥丙甲基鄰苯二甲酸酯5g，加丙酮/乙醇液(3/7)100ml溶解后加入鄰苯二甲酸二乙酯0.5g，溶解均勻即得。
腸溶微片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴腸溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至10％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時。取出，檢查本品的釋放度在0.1mol/L鹽酸溶液中2小時的釋放量應小于10％，在磷酸鹽緩沖液(pH6.8)中0.5小時的釋放量應大于70％。
2、異煙肼腸溶微片的體外釋藥特性(1)實驗目的測定異煙肼腸溶微片在0.1mol/L鹽酸、水、pH6.8磷酸鹽緩沖液、pH5.0磷酸鹽緩沖液中的釋放量。
(2)實驗依據中國藥典2005年版二部附錄“釋放度測定法”項下第二法的方法2。取本品，按照溶出度測定法第一法裝置，分別以0.1mol/L鹽酸、水、pH5.0磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液900ml為溶劑，轉速50轉/分，依法操作，分別于10分鐘、20分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘取溶液10ml，濾過，同時補充同體積的溶劑，取續濾液3ml置于5ml量瓶中用相應的溶劑稀釋至刻度，搖勻，做為樣品溶液；另取對異煙肼照品適量配制成16ug/ml的對照溶液。照分光光度法在200～350nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計算釋放量。
(3)實驗結果如下表數據所示
實施例2 利福平腸溶微片的制備和體外釋藥特性1、利福平腸溶微片的制備利福平素片處方利福平50g，微晶纖維素15g，維生素C 1g，羧甲基淀粉鈉1g，硬脂酸鎂0.25g，共制1000片。
制法 按上述處方取稱各原、輔料，過80目篩后混勻，制粒，整粒，壓片，片直徑為5.5mm。
薄膜包衣溶液的配制取羥丙基甲基纖維素3g，聚乙二醇4000 3g，用70％的乙醇溶液溶解均勻即得。
薄膜包衣的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴薄膜包衣液，邊吹熱風，包至片增重至3％左右，取出置烘箱50℃干燥1小時。
腸溶包衣溶液的配制取羥丙甲基鄰苯二甲酸酯5g，加丙酮/乙醇液(3/7)100ml溶解后加入鄰苯二甲酸二乙酯0.5g，溶解均勻即得。
腸溶微片的制備將制備好的薄膜衣片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴腸溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至10％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時。取出，檢查本品的釋放度在0.1mol/L鹽酸溶液中2小時的釋放量應小于10％，在磷酸鹽緩沖液(pH6.8)中0.5小時的釋放量應大于70％。
2、利福平腸溶微片的體外釋藥特性(1)實驗目的測定腸溶利福平微片在0.1mol/L的鹽酸溶液、水、pH5.0、pH5.6、pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線。
(2)實驗依據中國藥典2005年版二部附錄“釋放度測定法”項下第二法的方法2。取本品，按照溶出度測定法第一法裝置，分別以0.1mol/L鹽酸、水、pH5.0、pH5.6、pH6.8緩沖液900ml為溶劑，轉速50轉/分，依法操作，分別于10分鐘、20分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘取溶液10ml，濾過，同時補充同體積的溶劑，取續濾液4ml置于10ml量瓶中用相應的溶劑稀釋至刻度，搖勻，做為樣品溶液；另取利福平對照品適量配制成25ug/ml的對照溶液。照分光光度法在360～700nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計算溶出量。
(3)實驗結果如下表數據所示
實施例1、柚皮素及其衍生物對小鼠急性腦缺血的影響分組①空白對照組給予與藥物組等體積的生理鹽水；②陽性對照藥組給予藥物燈盞花素片(上海雷允上藥業有限公司，產品批號031111)，劑量200mg/kg；③試驗藥物組給予被檢測藥物，劑量為200mg/kg；方法各組每天灌胃給藥1次，連續給藥7d。末次給藥1h后，將麻醉小鼠仰位固定于手術合上，切開頸部皮膚，分離兩側頸總動脈，用4號手術線分別結扎帶迷走神經的左右頸總動脈，記錄小鼠死亡時間。
表2、對小鼠急性腦缺血的影響(x±S，n＝20)

P＜0.01 vs生理鹽水組從表2看出，柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、橙皮素、異櫻花素、枸桔苷、圣草酚、圣草枸櫞苷及陽性對照藥燈盞花素均可明顯延長小鼠因結扎兩側帶迷走神經的頸總動脈造成急性腦缺血的存活時間，與生理鹽水組比較差異非常顯著(P＜0.01)，提示柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、橙皮素、異櫻花素、枸桔苷、圣草酚、圣草枸櫞苷、燈盞花素對小鼠急性腦缺血有明顯的保護作用。
制法 按處方量分別稱取異煙肼、淀粉與低取代羥丙基纖維素，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為4mm。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶微片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶包衣液，邊吹熱風，包至片增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取出即得。
2、異煙肼胃溶微片的體外釋藥特性(1)實驗目的測定胃溶異煙肼微片在水中的溶出曲線。
(2)實驗依據中國藥典2005年版二部附錄“溶出度測定法”項下第一法的方法。取本品，以水900ml為溶劑，轉速50轉/分，依法操作；分別于10分鐘、20分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘取溶液10ml，濾過，同時補充同體積的溶劑，取續濾液3ml置于5ml量瓶中用相應的溶劑稀釋至刻度，搖勻，做為樣品溶液；另取異煙肼對照品適量配制成16ug/ml的對照溶液。照分光光度法在200～350nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計算溶出量。
(3)實驗結果如下表數據所示

實施例5 吡嗪酰胺胃溶微片的制備和體外釋藥特性1、吡嗪酰胺胃溶微片的制備吡嗪酰胺素片處方 吡嗪酰胺66.7g，淀粉5g，羥丙基纖維素1g，淀粉漿適量，硬脂酸鎂0.3g，共制1000片。
制法 按處方量分別稱取吡嗪酰胺、淀粉與羥丙基纖維素，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為5.5mm。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100m1溶解均勻即得。
胃溶微片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取出即得。
2、吡嗪酰胺胃溶微片的體外釋藥特性(1)實驗目的測定胃溶吡嗪酰胺微片水中的溶出曲線。
(2)實驗依據中國藥典2005年版二部附錄“溶出度測定法”項下第一法的方法。取本品，以水900ml為溶劑，轉速50轉/分，依法操作；經10、20、30、45、60分鐘時，取溶液5ml，同時補充同體積的溶劑，濾過，取續濾液1.5ml置10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，做為供試品溶液；另取吡嗪酰胺對照品，用水稀釋成每1ml中約含10ug的溶液，做為對照品溶液。照分光光度法在200～350nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計算溶出量。

實施例6 鹽酸乙胺丁醇胃溶微片的制備和體外釋藥特性 本發明組合物對小鼠腫瘤的抑制作用用小鼠肉瘤37(S37)、肉瘤180(S180)、淋巴肉瘤1號(Lio1)。抗癌實驗和療效評價方法按常規進行。
接種瘤細胞后24h，腹腔注射(ip)生理鹽水(空白組)、槐果堿(對照組)和本發明組合物(相當于槐果堿量200mg/kg)，每天一次，注射8天，結果對實體瘤，S180，S37，Liol的抑癌率是32-55.5％(p＜0.01)(表3)。
表3抗癌藥物組合物對實體瘤的影響.

**p＜0.05***p＜0.01上述試驗證明本發明藥物組合物在高劑量下既可顯著地降低槐果堿的神經毒性，同時又能顯著地提高抗癌療效。
處方槐果堿25g 地西泮0.25g制法分別稱取規定量槐果堿、地西泮，加注射用水適量溶解，加水至1000ml，滴加適量稀鹽酸調PH5.0-7.0，過濾、灌裝、滅菌。
處方槐果堿25g 地西泮0.125g
制法 按處方量分別稱取異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇、淀粉與糊精，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為6mm。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取出即得。
實施例8 吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇復方微片的制備處方 吡嗪酰胺44.4g，鹽酸乙胺丁醇30.6g，淀粉6g，低取代羥丙基纖維素1g，5％淀粉漿適量，硬脂酸鎂0.3g，共制1000片。。
制法 按處方量分別稱取吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇、淀粉與低取代羥丙基纖維素，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為6mm。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取即得。
實施例9 異煙肼、鹽酸乙胺丁醇復方微片的制備處方 異煙肼12.5g，鹽酸乙胺丁醇45.8g，5％聚維酮(K30)溶液適量，硬脂酸鎂0.25g，共制1000片。。
制法 按處方量分別稱取異煙肼、鹽酸乙胺丁醇、淀粉與低取代羥丙基纖維素，過100目篩后混勻，用5％聚維酮(K30)溶液制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，片直徑為5mm。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶片的制備將制備好的素片置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至片增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取出即得。
實施例10 復方利福平微片膠囊1(利福平微片為腸溶，其余為胃溶微片)的膠囊填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的利福平腸溶微片、異煙肼胃溶微片、吡嗪酰胺胃溶微片、鹽酸乙胺丁醇胃溶微片適量，于4工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例11 復方利福平膠囊2(異煙肼微片為腸溶，其余為胃溶微片)的膠囊填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的異煙肼腸溶微片、利福平胃溶微片、吡嗪酰胺胃溶微片、鹽酸乙胺丁醇胃溶微片適量，于4工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例12 復方利福平膠囊3(利福平為腸溶微片，異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇為復方胃溶微片)的膠囊填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的利福平腸溶微片、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇復方胃溶微片適量，于2工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例13 復方利福平膠囊4(異煙肼為腸溶微片、利福平為胃溶微片，吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇為復方胃溶微片)的膠囊填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的異煙肼腸溶微片、利福平胃溶微片、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇復方胃溶微片適量，于3工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例14 復方利福平膠囊5(利福平為腸溶微片，異煙肼、吡嗪酰胺為復方胃溶微片)的膠囊填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的利福平腸溶微片、異煙肼、吡嗪酰胺復方胃溶微片適量，于2工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例15 復方利福平膠囊6(利福平為腸溶微片，異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇為胃溶顆粒)的膠囊制備(1)異煙肼胃溶顆粒的制備異煙肼顆粒的處方組成異煙肼75g，淀粉10g，低取代羥丙基纖維素3g，5％淀粉漿適量。
制粒按上述處方取稱各原、輔料，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，備用。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶顆粒的制備將制備好的顆粒置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶包衣液，邊吹熱風，包至顆粒增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取出即得。
(2)吡嗪酰胺胃溶顆粒的制備吡嗪酰胺顆粒的處方組成吡嗪酰胺400g，淀粉40g，羥丙基纖維素10g，淀粉漿適量。
制粒按上述處方取稱各原、輔料，過100目篩后混勻，用淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，備用。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶顆粒的制備將制備好的顆粒置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至顆粒增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取即得。
(3)鹽酸乙胺丁醇胃溶顆粒的制備鹽酸乙胺丁醇顆粒的處方組成鹽酸乙胺丁醇275g，淀粉40g，糊精10g，5％淀粉漿適量。
制粒按上述處方取稱各原、輔料，過100目篩后混勻，用5％淀粉漿制粒，置烘箱中60℃干燥，過篩，整粒，備用。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶顆粒的制備將制備好的顆粒置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至顆粒增重至4％左右，取出置烘箱60℃干燥1小時取即得。
(4)顆粒的混合按照WHO標準處方的藥物組合量(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)，取上述異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇胃溶顆粒置3維混合機中混合均勻，并對均勻程度進行檢測。
(5)膠囊的填充 按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的利福平腸溶微片、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇胃溶顆粒混合顆粒適量，于2工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
實施例16 復方利福平膠囊7(利福平為胃溶顆粒，異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇為復方胃溶微片)的膠囊制備(1)利福平胃溶顆粒的制備利福平顆粒的處方組成利福平150g，微晶纖維素30g，維生素C 3g，低取代羥丙基纖維素10g。
制粒按上述處方取稱各原、輔料，過80目篩后混勻，制粒，整粒，備用。
胃溶包衣溶液的配制取胃溶型薄膜包衣預混劑9g，加50％乙醇液100ml溶解均勻即得。
胃溶顆粒的制備將制備好的顆粒置包衣鍋內，滾動包衣鍋，邊噴胃溶衣液，邊吹熱風，包至顆粒增重至4％左右，取出置烘箱50℃干燥1小時取即得。
(2)膠囊的填充按照WHO所提出的標準處方(在專利03101211.6中有描述，為節省篇幅此處不再贅述)取上述實施例描述的利福平胃溶顆粒、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇復方胃溶微片適量，于2工位膠囊填充機上，調整膠囊填充機的膠囊填充量進行膠囊填充。
權利要求
1.一種復方利福平微片膠囊的制造方法，其特征在于將利福平、異煙肼，進一步還包括吡嗪酰胺，進一步還包括吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇為原料藥進行復方配伍制成藥物的膠囊制劑時，至少有其中的一種藥物是首先制備成藥物微片后，再裝入膠囊中，其微片的直徑范圍在3mm～7.8mm之間，最佳直徑范圍在4mm～7.9mm之間，其組分利福平是微片的形式，其它藥物也是微片的形式，其組分利福平是微片的形式，其它藥物可以是微丸的形式，其組分利福平是微片的形式，其它藥物可以是粉末的形式，其組分利福平是單方微片的形式，異煙肼和吡嗪酰胺，進一步還包括吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇是復方微片、微丸、顆粒的形式，其組分異煙肼是單方微片的形式，利福平可以是微丸、顆粒、粉末的形式，進一步包括吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇是復方微片、微丸、顆粒的形式。
2.根據權利要求1，其特征在于利福平微片是腸溶包衣的，異煙肼組分，進一步包括吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇組分是胃溶包衣。
3.根據權利要求1，其特征在于異煙肼微片是腸溶包衣的，利福平微片，進一步包括吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇組分是胃溶包衣。
4.根據權利要求1，微片的外形是向外圓凸形，圓片外周具有傾斜棱角。
5.根據權利要求1，利福平微片的硬度在3～8kg/cm2之間，最佳為3kg/cm2。
6.根據權利要求1，利福平腸溶微片在酸中的釋放量2小時內應小于標示量的10％，在緩沖溶液中的釋放量45分鐘內應大于標示量的75％，最佳應大于85％以上。
7.根據權利要求1，異煙肼腸溶微片在酸中的釋放量2小時內應小于標示量的10％，在緩沖溶液中的釋放量45分鐘內應大于標示量的75％，最佳應大于85％以上。
全文摘要
一種復方利福平微片膠囊制劑的制造方法，這種方法的特點是將利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇進行復方配伍時，至少將其中的一種藥物先制成微片的形式后再裝入膠囊。在制造中可以對微片進行包衣，其目的是在復方制劑的固體環境中避免利福平與其他藥物過多的接觸，使復方利福平制劑的穩定性得到進一步的提高。
文檔編號A61K9/30GK1864681SQ20061009208
公開日2006年11月22日 申請日期2006年6月9日 優先權日2006年6月9日
發明者李思思, 楊勇, 和琳琳, 高藝歌 申請人:高華