專利名稱：一種甾體皂甙元化合物作殺菌劑的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，特別涉及作為殺菌劑在荔枝霜疫霉病防治中的用途。
背景技術：
荔枝霜疫霉病是由低等真菌(Peronophythora litchii Chen)引起的病害，可造成荔枝嫩梢干枯、落花、落果和爛果等癥狀，是嚴重影響荔枝產量和品質的主要病害。目前，在生產上防治荔枝霜疫霉病仍然是以化學合成藥劑——雷多米爾(Ridomil)為主，藥劑種類比較單一，長期使用必然會導致病原菌產生抗性，尚未見有植物源殺菌劑應用于此病防治的報道。
甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮(1β，2β，3β，4β，5β，7α-hexahydroxyspirost--25(27)-en-6-one)是以百合科植物開口箭(Tupistra chinensis Bak.)的根莖為原料，采用生物活性追蹤法，通過甲醇或乙醇提取、有機溶劑分部和系列柱層析等方法分離得到的。該化合物屬于多羥基取代的螺甾烷型甾體衍生物，白色粉末，熔點為244～247℃，其結構式如式I。
發明內容
本發明的目的在于提供一種甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的新用途，即作為殺菌劑在荔枝霜疫霉病防治中的用途。
所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮作為殺菌劑使用時，濃度≥100mg/L，采用噴霧、浸泡或涂布的方法使用。
所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮可作為有效成分單獨用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮可作為有效成分或添加物與其它一種或一種以上化合物以任意比例混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮可與甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮可與防治荔枝霜疫霉病的化學合成殺菌劑復配，用于荔枝霜疫霉病的防治，所述防治荔枝霜疫霉病的化學合成殺菌劑可選雷多米爾。
還可將含有所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的植物提取物、分部提取物或分離部位作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
用孢子萌發法對荔枝霜疫霉菌進行離體生物活性跟蹤測試證明所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發的有效抑制中濃度(EC50)為100.28μg/ml。
用接種法對所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮進行荔枝霜疫霉菌的活體抗菌試驗證明濃度為500μg/mL的所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮藥液處理對荔枝(品種為‘淮枝’)霜疫霉病具有明顯的防治效果。
圖1為甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發的抑制作用。
具體實施例方式 下面結合實施例對本發明做進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。
實施例1 甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發抑制作用的離體活性測定 先將甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮配成濃度為1000μg/mL的貯液，再取在25℃和98％RH條件下培養，菌齡為5天的荔枝霜疫霉菌菌種，用無菌水沖洗，制成不同濃度孢子囊懸浮液，用不同濃度的孢子囊懸浮液分別與所述甾體皂甙元化合物貯液配成濃度50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL和250μg/mL的系列含藥菌液，含藥菌液的菌數為每視野下20個孢子囊，將含藥菌液搖勻，置于25℃和98％RH條件下培養6小時，同時設空白對照，然后取培養后的含藥菌液在10×40倍顯微鏡下統計萌發率或抑制率，結果如圖1。
由圖1可見，本發明的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發的抑制效果隨濃度升高而增強，由統計分析得出，所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發的有效抑制中濃度EC50為100.28μg/mL。
實施例2 甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌的活體抑菌測定 將經挑選的荔枝(品種為‘淮枝’)先用表面消毒劑洗果，接著用自來水沖凈藥液、晾干，然后取濃度為500μg/mL的所述甾體皂甙元化合物藥液(配制方法同實施例1)，均勻涂布于荔枝果尖處、晾干，再取霜疫霉菌孢子囊懸浮液(2×105個/mL)，均勻涂布于施藥處，單果包裝并于25℃和98％RH條件下培養3天后，統計病、健果，計算感染率，試驗結果如表1所示 表11β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌的活體抑菌結果* *后隨字母相同者，表示在5％水平上差異不顯著(DMRT法)。
由表1可見，荔枝果實使用本發明的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮處理后，接種霜疫霉菌，其感病率僅為16.7％，與對照例的感病率87.8％相比，具有顯著差異，因此，1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮對荔枝霜疫霉菌具有明顯的活體抗菌作用，亦即對荔枝霜疫霉病具有明顯的防效。
權利要求
1、一種甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
2、根據權利要求1所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮作為殺菌劑使用時，濃度≥100mg/L，采用噴霧、浸泡或涂布的方法使用。
3、根據權利要求1所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮作為有效成分單獨用于荔枝霜疫霉病的防治。
4、根據權利要求1所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮作為有效成分或添加物與其它一種或一種以上化合物以任意比例混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
5、根據權利要求1所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮與甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
6、根據權利要求1所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮與雷多米爾復配后用于荔枝霜疫霉病的防治。
7、根據權利要求1-6任一項所述的甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的用途，其特征在于使用含有所述甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮的植物提取物、分部提取物或分離部位作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
全文摘要
本發明公開了一種甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α－六羥基螺甾－25(27)－烯－6－酮作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病防治的用途，該甾體皂甙元化合物可單獨、或與其他化合物混合、或與雷多米爾復配用于荔枝霜疫霉病的防治。
文檔編號A61P1/00GK1934943SQ200610084989
公開日2007年3月28日 申請日期2004年2月27日 優先權日2004年2月27日
發明者吳光旭, 陳維信, 魏孝義, 劉愛媛, 吳振先, 李雪萍 申請人:華南農業大學, 長江大學, 中國科學院華南植物園