專利名稱：一種血管粘接吻合密封膠及試劑盒的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種血管粘接吻合密封膠及試劑盒，屬于醫學生物技術領域。
背景技術：
血管吻合方法有很多，傳統的吻合方法是間斷縫合吻合法，即“金標準”血管吻合法。但針線對血管壁造成穿透性損傷，尤其是對內膜的損傷會導致一定的吻合失敗率，且操作繁瑣，耗時過長。因此不少學者尋求更理想的血管吻合方法。如支撐吻合法、套入吻合法、熱凝吻合法、粘接吻合法及機械吻合法等。
血管粘接吻合法是應用醫用膠(氰基丙稀酸酯吻合膠)，并結合支架等技術吻合血管的方法。使用的醫用膠，對血管組織仍有毒性損傷等副作用，膠體漏入管腔，則會在吻合口有強烈致血栓作用，從而導致吻合失敗。
中空內支架端端直接粘接吻合法，是以往研究的一種粘結吻合方法，具有微創、簡潔、快速和吻合完畢后即能通血等特點。具體方法為將中空速溶支架置入待吻合血管兩端，將兩端攏緊對合，然后在吻合口周圍涂布醫用吻合膠，膠體固化后即完成操作。
該方法也存在不足之處1.血管兩斷端吻合時，將兩端對合再緊密，仍可能留有縫隙，涂布醫用膠時，難免會漏入管腔，形成血栓，造成吻合失敗；2.對于中大血管，或張力較大的吻合口，強度可能不夠；3.粘膠固縮時會產生裂紋，從而易形成吻合口漏。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種能有效阻止膠體漏入管腔的血管粘接吻合密封膠。
本發明要解決的另一個技術問題是提供一種便于使用的血管粘接吻合密封膠試劑盒。
為實現上述目的，本發明采用以下技術方案一種血管粘接吻合密封膠，由濃度為10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸鈉溶液組成。
作為較佳實施方式，CaCl2溶液的濃度為20wt％，海藻酸鈉溶液的濃度為3wt％。
本發明的原理低濃度的海藻酸鈉溶液具有一定的流動性和粘性，遇CaCl2溶液后立即在接觸面形成海藻酸鈣膜，并不會被體液溶解和沖走，滯留原位，從而阻隔醫用膠滲入管腔，避免其對血管和管斷端及內膜的損傷和形成血栓，起到密封和保護的作用。
本發明使用方法簡單，先將海藻酸鈉溶液滴入血管吻合口，隨后在其上滴加CaCl2溶液而成膜，即可密封吻合口。
我們對海藻酸鈉溶液和CaCl2溶液的濃度進行了優選試驗，分別選取1wt％、2wt％、3wt％、5wt％和10wt％的海藻酸鈉溶液及40wt％、20wt％和10wt％CaCl2溶液，首先按不同濃度將海藻酸鈉溶解形成淡黃色半透明的粘稠液體，然后與不同濃度的CaCl2溶液反應成膜，測定其滴加操作的方便程度、粘度、流動性(浸潤時間)、成膜速度和成膜厚度等指標，確定最終密封膠的濃度配比。
研究發現(1)的對于不同濃度的海藻酸鈉溶液，成膜速度與溶液濃度無明顯關系，成膜厚度隨溶液濃度增加而增加，鏡下觀察表明，濃度越高成膜致密性越好。但是，海藻酸鈉溶液濃度由1wt％到10％，流動性逐漸變差，流動時間逐漸增長，在手術操作中，要求密封膠在1～2秒內完成血管吻合口周圍的浸潤，因此流速不能太慢，選擇1wt％-5wt％較好，綜合考慮其他因素，3wt％為最佳濃度。此外，5wt％濃度下凝膠成形好，便于操作。(2)對于不同濃度的CaCl2溶液，成膜厚度隨其濃度增加而輕度增厚。成膜速度與溶液濃度無明顯關系。
海藻酸鈉溶液與CaCl2溶液反應生成海藻酸鈣，據報道，該物質與機體有較好的生物相容性，對機體基本無毒、無害。我們選用40wt％和20wt％的CaCl2溶液與5wt％的海藻酸鈉溶液反應制成40wt％和20wt％的海藻酸鈣凝膠，埋植入2組各8只SD大鼠體內，分3點埋植于背部兩側和腹部皮下，術后飼養，觀察大鼠的活動和飲食、飲水情況，以及埋植局部的皮膚等反應情況，并且檢測機體對海藻酸鈣的反應，判斷試驗動物在植入后可能存在的毒性反應和其他不良反應。
結果表明(1)埋植物在3周后逐漸消失。(2)40wt％組SD大鼠皮下埋入點局部皮膚，2天后有3只出現紅腫，一周后有2只出現破潰，排除移植物和滲液后結痂愈合；其余大鼠和20wt％組SD大鼠，在移植部位未見明顯不良反應，切口愈合良好。全部試驗動物活動無異常、無死亡，飲食正常。(3)體內組織學檢測發現在第2周至第4周時，可見外周有包膜和血管形成，到第8周時，包膜變薄血管減少；至16周時，包膜基本消失，埋入的海藻酸鈣僅剩一薄層，絕大部分已經吸收(約80％)。相同時程內，濃度低的組剩余量少。隨著時間推移，兩組剩余量均減少。根據以上結果，40wt％的海藻酸鈣局部有較強的刺激反應，以致皮膚炎性紅腫和壞死，但是動物活動無異常，無死亡，飲食正常。說明CaCl2溶液濃度過高，僅對局部不利，甚至是破壞性的，但對全身無明顯影響。因此選擇20wt％左右的CaCl2溶液是比較合適的。
本發明還提供了一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，包含10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸鈉溶液。該試劑盒也可是包含CaCl2、海藻酸鈉和溶劑。其中溶劑可以是蒸餾水、雙蒸水、注射用水等，用以溶解CaCl2和海藻酸鈉，配制10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸鈉溶液。
該試劑盒中還配制有血管內支架。血管內支架作為常規技術，可以是目前市售的任何可用于血管吻合手術的中空內支架。
為了取得更優異的技術效果，本發明在中空內支架表面涂布有CaCl2成分。這種支架表面涂布方法簡單易行，向10-25wt％的CaCl2溶液加入明膠，使明膠濃度為wt2.5％，取中空內支架蘸涂該2.5wt％的明膠CaCl2溶液后烘干，包裝，用60Co消毒備用。
本發明還提供一種特制的血管內支架，其為徑向中空、兩端呈梭形的柱狀結構，外表面涂布有CaCl2成分。該支架以聚乙二醇為原料制成，制作方法參照梁向黨，張伯勛，范昱瑋等.新型血管吻合用支架對血管內膜的影響。醫療衛生裝備.2003；24(7)5-6和13孫賡，張伯勛，梁向黨等.吻合用血管內支架溶解方式的研究。醫療衛生裝備.2004；25(6)14-15。
表面涂布有CaCl2成分的血管內支架，置入管腔內部后，可以利用吻合操作中血管內殘余的水份使支架表面的CaCl2成分變成溶液游離，當接觸到滴入的海藻酸鈉凝膠溶液后，其首先與CaCl2溶液反應而在靠近吻合口管腔內側的管壁成膜，稱之為“內成膜”；此后，在海藻酸鈉凝膠外側滴加CaCl2溶液，便在吻合口管腔外周一側完成成膜，成為“外成膜”。
本發明的有益效果在于本發明的密封膠安全無毒、能迅速成膜、固化，形成不溶于水的膜狀物，便于手術操作，可有效阻隔、降低膠體毒性；涂布有CaCl2成分(涂層)的血管內支架，能起到雙重阻隔醫用膠滲漏到管腔內部的作用。
下面結合附圖和具體實施方式
對本發明作進一步說明，凡依照本發明公開內容所作的本領域任何等同替換，均屬于本發明的保護范圍。
圖1為血管內支架的結構示意圖。
圖2為血管內支架的剖面圖。
具體實施例方式
實施例1.制備密封膠一.材料海藻酸鈉、CaCl2、化學純，購于北京生化試劑公司。
二.制備方法
將海藻酸鈉和CaCl2分別溶于蒸餾水，制成濃度為20wt％的海藻酸鈉溶液和3wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法第一種方法不使用支架的手術中，將海藻酸鈉溶液滴入血管吻合口，隨后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可從血管壁外側密封吻合口。此后可滴加醫用膠，醫用膠不會泄漏到血管管腔內。
第二種方法在普通血管內支架表面蘸涂CaCl2溶液，置于血管斷端的吻合口內，將海藻酸鈉溶液滴入血管吻合口，隨后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可從血管壁內、外雙側密封吻合口。
第三種方法使用實施例4的制備的血管內支架，直接將支架置于血管斷端吻合口內，血管壁上的水份使支架表面的CaCl2成分游離為溶液，直接將海藻酸鈉溶液滴入血管吻合口，隨后在其上滴加CaCl2溶液立即成膜，即可從血管壁內、外雙側密封吻合口，如圖2所示。
實施例2.制備密封膠一.材料海藻酸鈉、CaCl2、化學純，購于北京生化試劑公司。
二.制備方法將海藻酸鈉和CaCl2分別溶于蒸餾水，制成濃度為10wt％的海藻酸鈉溶液和1wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法同實施例1。
實施例3.制備密封膠一.材料海藻酸鈉、CaCl2、化學純，購于北京生化試劑公司。
二.制備方法將海藻酸鈉和CaCl2分別溶于蒸餾水，制成濃度為25wt％的海藻酸鈉溶液和5wt％的CaCl2溶液。
三.使用方法同實施例1。
實施例4.制備血管內支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明膠，均購自北京化學試劑公司。
二.制備方法1.準確稱取1.25g明膠溶解于50ml 20wt％的CaCl2溶液中，加熱，制備出2.5wt％的明膠CaCl2溶液備用。
2.將聚乙二醇加熱致65～70℃，溶解形成無色透明的粘稠液體，控制溫度，利用模具分別制成徑向中空的圓柱體，支架的兩端修成錐形，使其整體呈棗核狀外觀。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明膠CaCl2溶液，再次烘干，包裝，60Co消毒備用。
血管內支架1的結構如圖1和圖2所示，具有徑向的孔洞11和表面CaCl2涂層12。
實施例5.制備血管內支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明膠，均購自北京化學試劑公司。
二.制備方法1.準確稱取1.25g明膠溶解于50ml 10wt％的CaCl2溶液中，加熱，制備出2.5wt％的明膠CaCl2溶液備用。
2.將聚乙二醇加熱致65～70℃，溶解形成無色透明的粘稠液體，控制溫度，利用模具分別制成徑向中空的圓柱體，支架的兩端修成錐形，使其整體呈棗核狀外觀。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明膠CaCl2溶液，再次烘干，包裝，60Co消毒備用。
血管內支架1的結構如圖1和圖2所示，具有徑向的孔洞11和表面CaCl2涂層12。
實施例6.制備血管內支架一.材料聚乙二醇，分子量20000；明膠，均購自北京化學試劑公司。
二.制備方法1.準確稱取1.25g明膠溶解于50ml 25wt％的CaCl2溶液中，加熱，制備出2.5wt％的明膠CaCl2溶液備用。
2.將聚乙二醇加熱致65～70℃，溶解形成無色透明的粘稠液體，控制溫度，利用模具分別制成徑向中空的圓柱體，支架的兩端修成錐形，使其整體呈棗核狀外觀。烘干后，在支架表面蘸涂2.5wt％的明膠CaCl2溶液，再次烘干，包裝，60Co消毒備用。
血管內支架1的結構如圖1和圖2所示，具有徑向的孔洞11和表面CaCl2涂層12。
實施例7.制備試劑盒一.制備方法1.按實施例1至3的任何一種方法制備密封膠；2.按實施例4至6的任何一種方法制備血管內支架；3.將密封膠與血管內支架組合于一定規格的包裝物中，即得。
二.使用方法1.術野暴露按照常規手術操作將試驗動物(純種新西蘭白兔，中國人民解放軍總醫院試驗動物中心提供)麻醉后，仰臥位，頸部備皮鋪無菌洞巾。無菌條件下，取頸前正中切口，長約8厘米，逐層切開，于甲狀軟骨下緣無分支段，分離曝露兩側頸總動脈，直徑約為2.0毫米，游離長度3-4厘米。兩端夾好止血夾阻斷血流后，剪斷動脈，血管自然回縮，有約1-1.5厘米的缺損，肝素鹽水沖洗管腔、血管吻合合攏器，輕柔將兩斷端拉攏對合，準備吻合。
2.密封吻合口用紗布條蘸干術野內積液，取出與動脈直徑相當的內置中空支架，先輕柔置入動脈一端，然后再置入動脈另一端；血管完全合攏后，將海藻酸鈉溶液滴于吻合口，溶液很快浸潤吻合口圓周，蘸去管壁上多余的海藻酸鈉溶液；然后再將CaCl2溶液同法滴于吻合口，CaCl2溶液接觸海藻酸鈉溶液即能迅速成膜，此時吻合口欠嚴密的縫隙即被密封膠膜密封，蘸去管壁上多余的CaCl2溶液。
3.粘接吻合口(現有技術中為手術常規操作)方法1.直接粘接取出吻合膠(醫用508系列粘接劑中的EC膠，由廣州白云醫用膠有限公司提供)，于吻合口先滴1-2滴膠液，膠液很快流淌浸潤吻合口四周，固化后再涂布一次膠，很快固化即完成粘接吻合。
方法2.被膜(包膜)粘接取出吻合膠(醫用508系列粘接劑中的EC膠，由廣州白云醫用膠有限公司提供)，于吻合口先滴1-2滴膠液，膠液很快流淌浸潤吻合口四周，固化后，將膜片輕輕放于血管之下，在血管吻合口周圍涂布一圈膠后，迅速翻卷膜片兩端，相對翻卷粘接，包于吻合口外一周，加壓固化。
三.使用效果先后松開兩端止血夾，可見血流逐漸通過吻合口，血流暢通。術后即時暢通率100％，密封完好，無縫隙、無漏血，有效防止醫用膠漏入管腔。透過管壁可見吻合口內的支架逐漸溶解，吻合口段無狹窄發生。
權利要求
1.一種血管粘接吻合密封膠，其特征在于由濃度為10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸鈉溶液組成。
2.根據權利要求1所述的一種血管粘接吻合密封膠，其特征在于由濃度為20wt％的CaCl2溶液和3wt％的海藻酸鈉溶液組成。
3.一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，其特征在于包含10-25wt％的CaCl2溶液和1-5wt％的海藻酸鈉溶液。
4.根據權利要求3所述的一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，其特征在于包含20wt％的CaCl2溶液和3wt％的海藻酸鈉溶液。
5.根據權利要求3或4所述的一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，其特征在于還包含有中空的血管內支架。
6.根據權利要求5所述的一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，其特征在于在中空內支架表面涂布有CaCl2涂層。
7.根據權利要求6所述的一種血管粘接吻合密封膠試劑盒，其特征在于所述中空內支架為徑向中空、兩端呈梭形的柱狀結構。
全文摘要
本發明公開了一種血管粘接吻合密封膠，由濃度為10－25wt％的CaCl
文檔編號A61L31/02GK101077424SQ200610081220
公開日2007年11月28日 申請日期2006年5月25日 優先權日2006年5月25日
發明者范恒華, 張伯勛, 伍驥 申請人:范恒華