專利名稱：Abo血型反定型試劑盒的制作方法
技術領域：
本發明屬于新生物制品領域，是用于ABO血型鑒定的反定型試劑盒。
背景技術：
血型是人類血液的主要特征之一，表達了血液各種成份抗原的遺傳性狀，其中ABO血型系統因其存在的規律性，廣泛性、特殊性成為輸血和器官移植中最重要的血型系統。Hoktoen早在1907年就首先提出了血型檢定對輸血治療的重要性，Ottenberg等在1908年進一步提出了供受體血液交叉配合試驗的概念，更強調血型檢定對臨床輸血的深遠意義。ABO血型不相容輸血，幾乎毫無例外要發生溶血性輸血反應癥狀；彌漫性血管內凝血、腎衰以至死亡。因此，ABO血型的準確定型至關重要。
ABO血型系統的分型原則是紅細胞上有A抗原，血清中有抗B抗體為A型；紅細胞上有B抗原，血清中有抗A抗體為B型；紅細胞上有A、B兩種抗原，血清中不含抗A、抗B抗體為AB型；紅細胞上沒有A和B抗原，血清中含抗A和抗B抗體的為O型。
由于ABO血型是由紅細胞表面抗原和血清中的抗體兩者共同決定的，兩者都檢測，即正反定型，才能正確判定ABO血型。用抗-A和抗-B試劑檢測紅細胞抗原，稱之正定型；用A型和B型紅細胞檢測血清中的抗體，稱之反定型。僅進行ABO正定型的試驗結果不可靠，需要采用ABO反定型試驗來驗證。
在ABO血型檢定中，往往會出現一些非人為操作引起的定型錯誤，其影響因素主要來自待檢標本及正定型試劑兩個方面。受標本和試劑兩方面因素的影響，即使應用高質量的正定型試劑也不可能完全避免ABO血型定型錯誤，只有進一步改進定型技術才能解這一難題，正確的血型檢定方法和合格的血型試劑是同等重要的。英國藥典中特別強調“檢測ABO血型要檢測紅細胞抗原和血清或血漿中抗體兩方面”。2000年衛生部頒發的《臨床輸血技術規范》(衛醫發 184號)第四章第十五條明確規定“輸血科(血庫)要逐項核對輸血申請單、受血者和供血者血樣，復查受血者和供血者ABO血型(正反定型)，并常規檢查患者的Rh(O)血型，正確無誤時可進行交叉配血。”目前在國內的醫院和采血站使用的反定型試劑都是自己配制，保存期很短，一般在三天左右，這種現狀給臨床使用單位帶來了諸多不便，導致一些臨床使用單位只做正定型，不做反定型，導致血型鑒定的差錯，甚至出現嚴重的輸血事故。
發明內容
本發明的目的是提供一種方便、有效期長、靈敏度高、準確性好的ABO型反定型試劑盒，能夠在臨床上準確地診斷ABO血型。
為了達到上述目的，保證ABO反定型試驗結果準確可靠，本發明由A型、B型和O型紅細胞和紅細胞保養液組成，A型、B型和O型紅細胞的濃度為4％，紅細胞保養液是使用蒸餾水按照以下配方配制而成檸檬酸三鈉·2H2O 19-22毫摩爾濃度磷酸二氫鉀 1.45-1.48毫摩爾濃度磷酸氫二鈉 1.10-1.20毫摩爾濃度氯化鈉 65-67毫摩爾濃度葡萄糖 47-49毫摩爾濃度蔗糖15-18毫摩爾濃度腺嘌呤 1.4毫摩爾濃度肌苷4.2-4.4毫摩爾濃度分子量≤40000的葡聚糖 0.018-0.020％(w/v)硫酸新霉素 0.01％(w/v)氯霉素 0.03-0.04％(w/v)防腐劑Proclin 300 5ml/L用0.01摩爾濃度氫氧化鈉調整溶液PH為6.8-7.1，除菌過濾。
本發明的紅細胞是經過準確鑒定了ABO血型的紅細胞加入了上述保養液中調配而成，紅細胞的濃度為4％，在2-8℃的條件下有效期不低于3個月。
本發明的配置方法包括按比例配制紅細胞保養液和加入紅細胞調配，在制備過程中，需要對紅細胞進行篩選和處理，首先要選擇非血緣正常人的全血，各項檢查全部合格，即HBsAg陰性、HCV Ab陰性、HIVAb陰性、梅毒陰性，轉氨酶在正常范圍內，紅細胞無溶血現象，再用抗-A和抗-B抗體準確鑒定出血型，經過過濾和洗滌，去除其中已發生了凝集的紅細胞和蛋白成分，特別是經過白細胞過濾器過濾，去除其中的白細胞，最后用保養液調節紅細胞的濃度，制成標準濃度的反定型試劑。
本發明的優點是使用方便、有效期長、靈敏度高、準確性好的ABO血型反定型試劑盒，能夠在臨床上準確地診斷ABO血型。
以下通過具體實施例詳細說明本發明的實施和所具有的有益效果，不能對本發明的實施范圍構成任何限定。
實施例1、保存液的配制，使用蒸餾水按照以下配方配制而成檸檬酸三鈉·2H2O 22毫摩爾濃度磷酸二氫鉀1.48毫摩爾濃度磷酸氫二鈉1.10毫摩爾濃度氯化鈉67毫摩爾濃度葡萄糖50毫摩爾濃度蔗糖 18毫摩爾濃度腺嘌呤1.4毫摩爾濃度肌苷 4.4毫摩爾濃度分子量≤40000的葡聚糖 0.30％(w/v)硫酸新霉素0.01％(w/v)氯霉素0.04％(w/v)防腐劑5ml/L用0.01摩爾濃度氫氧化鈉調整溶液PH為6.8-7.1，除菌過濾。
2、紅細胞的選擇使用三天內采集的非血緣正常人的全血，檢測各項指標，要求HBsAg陰性、HCV Ab陰性、HIVAb陰性、梅毒陰性，轉氨酶在正常范圍內，紅細胞無溶血現象。用抗-A和抗-B抗體準確鑒定待用紅細胞的血型，經過過濾和洗滌，去除其中已發生了凝集的紅細胞和蛋白成分，用白細胞過濾器過濾除去白細胞。
3、反定型試劑盒的調配將上述紅細胞加入保養液，利用分光光度計準確調節細胞濃度達到4％。
權利要求
1.一種ABO血型反定型試劑盒，由A型、B型和O型紅細胞和紅細胞保養液組成，其特征在于A型、B型和O型紅細胞的濃度為4％，所述的紅細胞保養液是使用蒸餾水按照以下配方配制而成檸檬酸三鈉·2H2O 19-22毫摩爾濃度磷酸二氫鉀 1.45-1.48毫摩爾濃度磷酸氫二鈉 1.10-1.20毫摩爾濃度氯化鈉 65-67毫摩爾濃度葡萄糖 47-49毫摩爾濃度蔗糖 15-18毫摩爾濃度腺嘌呤 1.4毫摩爾濃度肌苷 4.2-4.4毫摩爾濃度分子量≤40000的葡聚糖 0.018-0.020％(w/v)硫酸新霉素 0.01％(w/v)氯霉素 0.03-0.04％(w/v)防腐劑Proclin 300 5ml/L用0.01摩爾濃度氫氧化鈉調整溶液PH為6.8-7.1，除菌過濾。
2.根據權利要求1所述的ABO血型反定型試劑盒的紅細胞保養液，其特征在于該試劑盒的有效期不低于3個月。
3.根據權利要求1所述的ABO血型反定型試劑盒的紅細胞保養液，其特征在于A型、B型和O型紅細胞事先經過了過濾和洗滌，去除其中已發生了凝集的紅細胞和蛋白成分。
4.根據權利要求4所述的ABO血型反定型試劑盒的紅細胞保養液，其特征在于特別是經過白細胞過濾器過濾，去除其中的白細胞。
5.根據權利要求1所述的ABO血型反定型試劑盒，其特征在于ABO血型反定型試劑可儲存于密封瓶中，密封瓶的材質可以是塑料、玻璃等透明材料。
全文摘要
本發明提供了一種ABO血型反定型試劑盒，由A型、B型和O型紅細胞和紅細胞保養液組成，其特征在于A型、B型和O型紅細胞的濃度為4％，所述的紅細胞保養液是使用蒸餾水按照特定配方配制而成，A型、B型和O型紅細胞的濃度為4％，A型、B型和O型紅細胞事先經過了過濾和洗滌，去除其中已發生了凝集的紅細胞和蛋白成分，可儲存于密封瓶中，密封瓶的材質可以是塑料、玻璃等透明材料，本發明的有效期不低于3個月，本發明的優點是使用方便、有效期長、靈敏度高、準確性好的ABO血型反定型試劑盒，能夠在臨床上準確地診斷ABO血型。
文檔編號A61J1/06GK1831535SQ20061007592
公開日2006年9月13日 申請日期2006年4月24日 優先權日2006年4月24日
發明者劉淑紅, 范明, 周明非, 李婭 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所, 周明非