專利名稱：一種抗uv－b輻射損傷的防護劑的制作方法
技術領域：
本發明屬于化學領域，涉及一種從植物中提取的天然產物的組合物，具體為一種能高效抵御UV-B輻射損傷的防護劑。
背景技術：
太陽紫外輻射是指波長范圍在150～380nm的電磁波，其中波長小于280nm的紫外輻射稱為短波紫外或者UV-C，波長在280-320nm的紫外輻射稱為中波紫外或者UV-B，波長超過320nm的紫外輻射稱為長波紫外或者UV-A。太陽輻射中存在UV-A、UV-B和UV-C三種波段的紫外線。UV-C輻射對生物有極強殺傷作用，但它只能在真空中傳播，當它穿過大氣層時，被平流層中的臭氧強烈吸收而很少達到地表；UV-A和UV-B可穿過大氣層到達地表，到達地表的UV-B最易引起動、植物和人類損傷。一些對UV-B敏感的植物已經瀕臨滅絕，人類皮膚癌和白內障的增加也與環境UV-B輻射增強有關。
目前應用于防曬和特殊工種的抗紫外輻射的日用化工材料，大多是有機合成制劑，采用植物天然提取物組配的較少。雖然有機合成的抗紫外輻射制劑具有效果好、生產成本低等優點，但有機合成制劑往往有副作用，因此消費者在購買此類產品時顧慮重重。
發明內容
本發明的防護劑為一種從茶葉提取和純化的組合物，該組合物的有效成分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)和表兒茶素沒食子酸酯(ECG)，為一種天然產物制劑。本發明的防護劑不僅對UV-B有強烈的吸收和屏蔽作用，而且可有效防止因UV-B照射的細胞膜過氧化破壞，并阻斷UV-B引起的細胞癌變信號轉導，從而使生物免受UV-B輻射損傷。
本發明抗UV-B輻射損傷的防護劑其有效成份在組合物中所占質量百分數為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)40～65％、表沒食子兒茶素(ECG)15～25％，余量為輔料。輔料的主要成分為糊精。
所述防護劑可以進一步稀釋成50～1000毫克/每升的水溶液，或以任何常規無毒及皮膚學上可以接受且在本發明防護劑中穩定的基質或載體將防護劑稀釋成50～1000毫克/公斤的凝膠劑。
作為優選的稀釋方案，應用于植物保護的水溶液稀釋濃度為250毫克/升；應用于動物體、人體保護的凝膠劑稀釋濃度為200毫克/公斤；應用于滴眼劑水溶液稀釋濃度為50毫克/升。
任何常規無毒及皮膚學上可以接受且在本發明防護劑中穩定的基質或載體包括水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、纖維素衍生物、海藻酸鹽、果膠、明膠、黃原膠、殼多糖、乙烯聚合物、丙烯酸樹脂等，上述物質都可以作為本發明防護劑的稀釋劑。
本發明組配的防護劑抗UV-B效果的工作原理主要包括①可有效地吸收UV-B能量而降低UV-B對動植物機體的損傷程度；②有效調節植物自身抗UV-B物質合成代謝途徑；③有效阻斷UV-B引起的動物細胞癌變信號轉導；④以滴劑滴眼，可以減少UV-B對眼睛的傷害，預防由UV-B作用引起的白內障發生。
具體實施例方式
選擇幾種劑型的配方如下表
推薦幾種稀釋劑如下蒸餾水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、甘油、丙二醇、羧甲基纖維素、卡波姆940、海藻酸鹽、果膠、黃原膠、丙烯酸樹脂、聚乙烯醇和聚羧乙烯等。
實施例1用磷酸鹽緩沖溶液將防護劑1以50mg/L的濃度稀釋，與JB6單層皮膚細胞共培養1h后，進行強度為110μW/cm2UV-B處理，輻射時間為30min，以沒有本制劑共培養而直接UV-B輻射處理的JB6細胞為對照。處理結束后進行生理指標和基因表達檢測。結果顯示，UV-B處理后JB6細胞脂質過氧化水平增加30％以上，環氧化酶2基因表達水平顯著增強；蛋白激酶B和磷酸肌醇-3-激酶磷酸化水平和酶活力也顯著增加。而環氧化酶2基因表達是細胞癌變的主要指標之一；同時蛋白激酶B和磷酸肌醇-3-激酶也是細胞癌變過程中重要的信號轉導蛋白，其磷酸化水平的提高和活力增加是癌變過程被激活的重要指標。可見UV-B處理不僅可能造成細胞膜損傷，而且還可能引起生物體細胞癌變。以本發明的組配處理后再進行UV-B輻射，細胞脂質過氧化水平和環氧酶2的基因表達強度與未進行UV-B輻射處理的正常細胞一致，同時細胞中蛋白激酶B和磷酸肌醇-3-激酶磷酸化和酶活力均表現出低水平。說明本發明的組配可有效抑制UV-B引起的細胞損傷和癌變。
以裸鼠為材料，研究了本發明組配防護劑2凝膠劑(濃度為50-1000mg/kg)的抗UV-B作用。結果顯示，在UV-B輻射前或輻射后，以200mg/kg的本發明組配凝膠劑進行涂抹可有效抑制和消除由UV-B輻射引起的皮膚紅斑和皮削脫落。
實施例2將防護劑3以250mg/L水溶液稀釋后噴施擬南芥幼苗后，進行強度為190μW/cm2的UV-B輻射處理1h。結果顯示，只噴施蒸餾水而未噴施本申請組配的擬南芥，出現明顯的萎焉癥狀，同時黃酮類代謝途徑相關酶(如二氫黃酮脫氫酶、查耳酮合成酶等)基因表達強度顯著增加，而黃酮類代謝途徑相關基因表達的增強是擬南芥抗UV-B脅迫的自身防衛性反應；噴施本申請組配后再進行UV-B輻射的擬南芥植株直立性好，未表現出明顯的損傷癥狀，黃酮類代謝途徑相關基因表達強度與正常生長植株(4000μmol/cm2/s白光照射)無顯著差異。說明噴施本申請組配可有效減少植物紫外輻射損傷。
實施例3將防護劑4用生理鹽水稀釋為含50mg/L，對離體培養的大鼠晶狀體預處理1h后，然后進行25μW/cm2的UV-B輻射處理15min，以未添加本制劑的生理鹽水預培養后進行UV-B輻射的為陽性對照，以未進行UV-B輻射處理的為陰性對照。結果顯示，與陰性對照相比，以生理鹽水預培養后進行UV-B輻射的大鼠離體晶狀體細胞凋亡率增加18％，晶蛋白交鏈程度超過50％，DNA完整性也顯著降低，而晶狀體細胞凋亡率和晶蛋白交鏈度增加以及DNA完整性的降低是白內障形成的重要指標。而經50mg/L本制劑預培養的大鼠晶狀體在UV-B輻射后，細胞凋亡率、DNA損傷和晶蛋白交鏈程度均與未進行UV-B輻射處理的陰性對照接近。說明本申請組配可有效預防UV-B對動物眼睛的輻射損傷，有效抵御UV-B誘發的白內障的形成。
權利要求
1.一種抗UV-B輻射損傷的防護劑，其特征在于它是一種從茶葉提取和純化的組合物，該組合物的有效成分按質量百分數計為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)40～65％、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)15～25％，余量為輔料。
2.按權利要求1抗UV-B輻射損傷的防護劑，其特征在于所述防護劑可以進一步稀釋成50～1000毫克/每升的水溶液，或以任何常規無毒及皮膚學上可以接受且在本發明防護劑中穩定的基質或載體將防護劑稀釋成50～1000毫克/公斤的凝膠劑。
3.按權利要求1和2抗UV-B輻射損傷的防護劑，其特征在于應用于植物保護的水溶液稀釋濃度為250毫克/升；應用于動物體、人體保護的凝膠劑稀釋濃度為200毫克/公斤；應用于滴眼劑水溶液稀釋濃度為50毫克/升。
4.按權利要求2所述抗UV-B輻射損傷的防護劑，其特征在于所述任何常規無毒及皮膚學上可以接受且在本發明防護劑中穩定的基質或載體包括水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、纖維素衍生物、海藻酸鹽、果膠、明膠、黃原膠、殼多糖、乙烯聚合物、丙烯酸樹脂。
全文摘要
一種抗UV－B輻射損傷的防護劑，它是從茶葉提取和純化的組合物，該組合物的有效成分按質量百分數計為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)40～65％、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)15～25％，余量為輔料。該防護劑可以進一步稀釋成50～1000毫克/每升的水溶液，或以任何常規無毒及皮膚學上可以接受且在本發明防護劑中穩定的基質或載體將防護劑稀釋成50～1000毫克/公斤的凝膠劑。作為優選，應用于植物保護的水溶液稀釋濃度為250毫克/升；應用于動物體、人體保護的凝膠劑稀釋濃度為200毫克/公斤；應用于滴眼劑水溶液稀釋濃度為50毫克/升。
文檔編號A61K8/96GK1876064SQ20061005041
公開日2006年12月13日 申請日期2006年4月19日 優先權日2006年4月19日
發明者陸建良, 梁月榮, 金晶, 鄭新強 申請人:浙江大學